CN109310719A - 益生菌的新医学应用 - Google Patents

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W·菲奥雷
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Abstract

本发明涉及基于细菌和/或酵母和/或其他微生物的组合物的应用，其单独或组合使用，用于治疗肠易激综合征(IBS)的症状和/或用于治疗肠易激综合征(IBS)，或也用于治疗影响胃肠器官的类似病理。具体说，细菌选自以下属：乳杆菌属，双歧杆菌属，芽孢杆菌属，丙酸杆菌属，链球菌属，乳球菌属，气球菌属和肠球菌属。

Description

益生菌的新医学应用
技术领域
本发明涉及基于细菌，优选乳杆菌属(Lactobacillus)和/或双歧杆菌属(Bifidobacterium)，和/或酵母和/或其他微生物的组合物的用途，单独或组合使用，用于治疗肠易激综合征(IBS)的症状和/或治疗肠易激综合征(IBS)，或者也用于治疗影响胃肠道器官的类似病症。
背景技术
胃肠道疾病是一种非常普遍的疾病，是各国必须承担的公共卫生成本的主要部分，同时对受影响个体的生活质量产生强烈的负面影响。
具体说，肠易激综合征(IBS)或结肠易激综合征是最常见的胃肠道疾病之一。它影响美国和欧洲大约15-20％的人口，并且与其相关的腹部不适或疼痛与肠道习惯的变化相关。
传统上，IBS被认为是与肠运动异常和内脏痛觉过敏相关的心理领域的疾病。尽管在消化水平上缺乏明显的异常，但最近应用定量形态学和分子技术已经揭示了大部分患有IBS的患者在胃肠粘膜内或组织，细胞和分子水平的腔内的改变。
鉴于前述内容，强烈需要新的和/或替代的治疗方案，其可以减轻与该病理相关的症状和/或治疗病理。
发明内容
申请人已经发现，单独或组合地给予或使用基于细菌和/或酵母和/或其他微生物的组合物是上述需要的解决方案。具体说，属于选自以下的属的细菌是尤其有效的：乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、链球菌属(Streptococcus)、乳球菌属(Lactococcus)、气球菌属(Aerococcus)、肠球菌属(Enterococcus)及其组合，其中乳杆菌属和/或双歧杆菌属显示出特别有效。
事实上，申请人已经令人惊讶地证明，基于属于乳杆菌属和/或双歧杆菌属的细菌，特别是包含菌种副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)的益生菌组合物，优选以口服形式给药或使用，可减轻与IBS相关的症状，特别是通过改善腹痛和与之相关的不适。
此外，使用基于这些细菌的组合物可带来以下效果：
-通常在肠道微生物群水平上增加乳杆菌属细菌群，同时显著减少属于瘤胃球菌属(Ruminococcus)的细菌群，这是一种通常与IBS相关的病原体；
-短链脂肪酸，特别是丁酸和/或乙酸的肠浓度增加；和
-促炎细胞因子，特别是IL-6和/或IL-15减少。
附图简要说明
下面将借助于以下附图并且具有不具有任何限制特征的实施例来详细描述本发明。
具体来说：
-图1显示了干酪乳杆菌(L.casei)的摄入如何改善腹痛和IBS缓解程度。
-图2显示了干酪乳杆菌的摄入如何诱导乳杆菌属的显著增加和瘤胃球菌属的显著减少。
-图3显示了干酪乳杆菌的摄入如何诱导短链脂肪酸(丁酸和乙酸)的显著增加。
-图4显示了干酪乳杆菌的摄入如何诱导促炎细胞因子IL-6和IL-15的显著减少。
本发明优选实施方式详述
本发明的第一方面涉及基于细菌和/或酵母和/或其他微生物的组合物，其单独或组合使用，用于治疗肠易激综合征(IBS)的症状和/或用于治疗肠易激综合征(IBS)，或也用于治疗影响胃肠器官的类似病理。
优选地，组合物-也称为益生菌组合物或益生菌-包含属于乳杆菌属和/或双歧杆菌属的细菌。
上述组合物已证明有益的症状优选表现为腹痛和与IBS相关的不适。
优选地，治疗肠易激综合征(IBS)的症状和/或治疗肠易激综合征(IBS)或治疗影响胃肠器官的类似病理，与通常在肠道微生物群水平上的乳杆菌属的细菌群的增加有关，和/或优选地同时与属于瘤胃球菌属的细菌群(即通常与IBS相关的病原体)的显著减少有关。
因此，治疗IBS及其症状的有效性与通常在肠道微生物群水平上的乳杆菌属的细菌群的增加有关，和/或优选地同时与属于瘤胃球菌属的细菌群的显著减少有关。
根据本发明的另一个优选方面，治疗肠易激综合征(IBS)的症状和/或治疗肠易激综合征(IBS)或治疗影响胃肠器官的类似病理与短链脂肪酸(特别是丁酸和/或乙酸)的肠道浓度增加有关，和/或与促炎细胞因子(特别是IL-6和/或IL-15)的减少有关。
本文中，“益生菌”的定义是由粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)于2001年联合召集的一组专家制定的：“活的微生物，其在足量给予时赋予宿主健康益处”。特别是在意大利，卫生部将益生菌定义为“一旦摄入足够量就能发挥有益于身体的功能的微生物”，基本上与上述两个组织的定义相呼应。
优选地，乳杆菌属的细菌属于以下菌种中的至少一种：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、解淀粉类乳杆菌(Lactobacillus amylolyticus)、嗜淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、食品乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、鸟乳杆菌(Lactobacillus aviaries)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、纤维二糖乳杆菌(Lactobacillus cellobiosus)、棒状乳杆菌(Lactobacillus coryniformis)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminis)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、鸡乳杆菌(Lactobacillus gallinarum)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、马乳样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens)、开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri)、粘膜乳杆菌(Lactobacillus mucosae)、面包乳杆菌(Lactobacillus panis)、丘状乳杆菌(Lactobacillus collinoides)、类植物乳杆菌(Lactobacillus paraplantarum)、戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、蓬蒂乳杆菌(Lactobacillus pontis)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)和旧金山乳杆菌(Lactobacillus sanfranciscensis)。
优选地，双歧杆菌属的细菌属于以下菌种中的至少一种：动物双歧杆菌(B.animalis)、双歧双歧杆菌(B.bifidum)、短双歧杆菌(B.breve)、婴儿双歧杆菌(B.infantis)、长双歧杆菌(B.longum)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)、链状双歧杆菌(B.catenulatum)、角双歧杆菌(B.angulatum)、小行星双歧杆菌(B.asteroids)、布氏双歧杆菌(B.boum)、豚双歧杆菌(B.choerinum)、棒状双岐杆菌(B.coryneforme)、串孔双歧杆菌(B.cuniculi)、齿垢双歧杆菌(B.denticolens)、齿双歧杆菌(B.dentium)、高卢双歧杆菌(B.gallicum)、加氏沙门氏菌(B.gallinarum)、印度双歧杆菌(B.indicum)、奇异双歧杆菌(B.inopinatum)、乳酸双歧杆菌(B.lactis)、大黑盘双歧杆菌(B.magnum)、瘤胃双歧杆菌(B.merycicum)、最小双歧杆菌(B.minimum)、假小链双歧杆菌(B.pseudocatenulatum)、伪长双歧杆菌(B.pseudolongum)、小鸡双歧杆菌(B.pullorum)、反刍月形双歧杆菌(B.ruminantium)、世纪双歧杆菌(B.saeculare)、细弱双歧杆菌(B.subtile)、嗜酸嗜热双歧杆菌(B.thermacidophilum)、嗜热双歧杆菌(B.thermophilum)和图氏双歧杆菌(B.tsurumiense)。
所述酵母优选是酿酒酵母属(Saccharomyces)，更优选酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和/或布拉酵母(Saccharomyces boulardii)。
一般而言，本发明组合物中包含的微生物是EFSA的QPS列表中包括的单一微生物或任何微生物物种的组合。
本发明组合物的微生物优选是活的，由此所述组合物也可被定义为益生剂。
或者，组合物的微生物是死的，或者是裂解物或提取物或级分(fractions)的形式，因此组合物也可被定义为副益生剂。
在另一种可选形式中，组合物还包含由定义为生物后益生剂的微生物产生的代谢生物产物和/或细菌衍生的任何其他产物。
因此，本发明的组合物也可以是已知或假定的益生剂或副益生剂或后益生剂。
组合物中的细菌可以单独使用或以各种组合使用。
优选地，组合物中包含的细菌能够在胃肠道转运中存活，并因此能够活着到达结肠并在其中定植。
优选地，干酪乳杆菌是菌株(Lactobacillus paracasei CNCM I-1572)。副干酪乳杆菌细菌由索发股份公司于1995年5月5日在巴黎的巴斯德研究所的国家微生物保藏中心(CNCM)保藏，保藏号为CNCM I-1572。
组合物中的细菌以每次摄入10亿至1,000亿，优选100至750亿，更优选150至500亿，更优选200至300亿个活细菌细胞的量施用。
优选地，摄入每天至少进行1-2次。
可以通过任何途径给予。优选地，口服组合物，更优选以丸剂，胶囊，片剂，粒状粉末，硬壳胶囊，口服溶解颗粒，小药囊，锭剂或可饮用小瓶的形式。
或者，将本发明的组合物配制成液体，例如糖浆或饮料，或者将其加入食品中，例如加入酸奶，奶酪或果汁中。
或者，将本发明的组合物配制成能够发挥局部作用的形式，例如，灌肠剂。
本发明组合物的口服制剂还包含通常可用于生产益生菌和/或药物产品的赋形剂。
优选地，该组合物包含抗结块剂，优选二氧化硅，硬脂酸镁。
优选地，该组合物包含包衣试剂，优选明胶，着色剂。
在本发明的另一个实施方案中，本发明的组合物包含维生素，微量元素，优选锌或硒，酶和/或益生元物质，优选低聚果糖(FOS)，低聚半乳糖(GOS)，菊粉，瓜尔胶，动物和植物蛋白，抗氧化剂，植物提取物或其组合。
实施例
在本文中，通过多中心随机、双盲安慰剂对照交叉临床研究实验证明，对患有IBS的患者给予要求保护的组合物：
-改善腹痛和IBS缓解程度(图1)；
-诱导乳杆菌属显著增加和瘤胃球菌属显著减少(图2)；
-诱导短链脂肪酸，特别是丁酸和乙酸的显著增加(其浓度的急剧下降是各种病理情况的典型情况)(图3)；和
-显著降低促炎细胞因子IL-6和IL-15(图4)。
该研究按照交叉设计进行，并结合新一代高通量DNA测序技术(见下表I)，这是评估人类肠道菌群变化的最佳方法，因为粪便微生态系统中细菌组成的巨大复杂性和明显的个体差异。
表I
具体说，该研究包括5个阶段：
磨合期(2周)：受试者未接受处理A或处理B(安慰剂)，
处理期1(4周)：受试者接受处理A或处理B。
洗出期(4周)：受试者未接受处理A或处理B。
处理期2(4周)：受试者接受处理B或处理A。
随访(4周)：受试者未接受处理A或处理B。
处理A和B可为本发明组合物，具体示例中为plus或安慰剂。处理开始时，不知晓受试者摄入了什么，仅在处理终末期，即解除盲法时，知晓摄取顺序。
患有IBS的40名受试者随机接受包含干酪乳杆菌的本发明组合物，每天2次，持续4周，或不含细菌的等同产品(安慰剂)。
研究的受试者具有表II中所示的特征。
表II
数据以患者数量(％)或均值±SD表示。*磨合期的均值。
给予的组合物如下：
本发明的组合物：
-干酪乳杆菌(副干酪乳杆菌CNCM I-1572)，至少240亿个活细胞
-防结块剂：SiO2和硬脂酸镁
-包衣：食品级明胶和着色剂E171
安慰剂组合物：
-防结块剂：SiO2和硬脂酸镁
-包衣：食品级明胶和着色剂E171
这两种组合物在外观上难以区分。
研究的总持续时间为18周。
评估治疗有效性的参数如下：
使用从“0”(无)到“10”(非常严重)的每日11点数字刻度，过去24小时内出现腹痛/不适(响应者定义为与磨合期的平均值相比，至少2个4周的处理期间，平均每周腹痛和/或不适评分降低≥30％的患者)
使用平衡的7点序数量表，其中1＝“完全缓解”，4＝“未改变”，7＝“情况坏尽到无法想象”，与研究开始前相比，过去7天的IBS缓解程度(响应者被定义为评分为1＝“完全缓解”或2＝“大幅度地缓解”的患者，至少2个4周的处理期间)
肠道微生物群的组成(通过Ion Torrent PGM分析，对编码细菌核糖体RNA 16S亚基的部分基因进行核苷酸测序)，短链脂肪酸(SCFA)的组成(通过高效液相色谱分析，偶联串联质谱)以及粪便中的IgA和细胞因子(通过特异性ELISA测试分析)
使用Bristol量表评估每日大便频率和稠度
使用VAS量表评估的治疗总体满意度
医院焦虑和抑郁量表(HADS)：焦虑和抑郁各7分，每个点有4分(0-3)李克特量表，每个分量表的最低分数为0，最高分为21分
使用经过验证的简表12项健康调查(SF-12)进行的生活质量评估，范围从0到100
摄入急救药物
干酪乳杆菌的摄入导致以下结果：
关于腹痛和/或不适评分，在干酪乳杆菌组中，响应者的百分比为37.5％(n＝15)，而安慰剂组为30.0％(n＝12)。
同样，关于IBS缓解程度，在干酪乳杆菌组中，响应者的百分比为22.5％(n＝9)，而安慰剂组为15.0％(n＝6)。
从干酪乳杆菌处理的开始到结束，丁酸盐和乙酸盐的粪便浓度增加，而在安慰剂处理期间它们减少。
从干酪乳杆菌处理的开始到结束，粪便中IgA和IL-6的平均水平降低，而在安慰剂处理期间它们增加。
在用干酪乳杆菌处理期间，IL-15的平均值降低，而用安慰剂处理该值增加。
科学文献清楚地表明(正如这些研究发表在卓越的科学期刊，如胃肠病学，JCI和自然杂志上)，高水平的IL-15与乳糜泻，慢性炎症性肠病，依赖于肠道抗原的过敏性疾病有关，也与诸如淋巴瘤等严重疾病有关。
最后，干酪乳杆菌诱导乳杆菌属的显著增加和瘤胃球菌属的显著降低，其中瘤胃球菌属是通常与IBS相关的病原体。在健康受试者中，该属以低量存在，而在具有IBS的受试者中，其通常以大量存在。益生菌治疗减少了这些细菌的细胞数量。该属可被视为IBS的一种生物学生物标志物。
在每个患者的18周研究期结束时获得的结果总结如下：
-干酪乳杆菌可改善腹痛和IBS缓解程度，即使与安慰剂的差异无统计学意义；
-干酪乳杆菌诱导乳杆菌属显著增加和瘤胃球菌属的显著减少；
-干酪乳杆菌诱导短链脂肪酸(丁酸和乙酸)显著增加，这与肠粘膜上的一系列有益活性有关；其浓度急剧下降是各种病理情况的典型特征；和
-干酪乳杆菌诱导促炎细胞因子IL-6和IL-15显著减少。

Claims (10)

1.包含细菌和/或酵母和/或其他微生物的组合物，单独或组合使用，用于治疗与IBS相关的症状，优选腹痛和不适，和/或用于治疗肠易激综合征(IBS)或胃肠器官的类似病症，其中，所述细菌属于乳杆菌属和/或双歧杆菌属。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述乳杆菌属的细菌属于以下菌种中的至少一种：副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、解淀粉类乳杆菌(Lactobacillus amylolyticus)、嗜淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、食品乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、鸟乳杆菌(Lactobacillus aviaries)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、纤维二糖乳杆菌(Lactobacillus cellobiosus)、棒状乳杆菌(Lactobacillus coryniformis)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、香肠乳杆菌(Lactobacillus farciminis)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、鸡乳杆菌(Lactobacillus gallinarum)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、希氏乳杆菌(Lactobacillus hilgardii)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、马乳样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens)、开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri)、粘膜乳杆菌(Lactobacillus mucosae)、面包乳杆菌(Lactobacillus panis)、丘状乳杆菌(Lactobacillus collinoides)、类植物乳杆菌(Lactobacillus paraplantarum)、戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、蓬蒂乳杆菌(Lactobacillus pontis)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)和旧金山乳杆菌(Lactobacillus sanfranciscensis)。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，副干酪乳杆菌是保藏号为CNCMI 1572的干酪乳杆菌菌株。
4.如权利要求1－3中任一项所述的组合物，其中，所述双歧杆菌属的细菌属于以下菌种中的至少一种：动物双歧杆菌(B.animalis)、双歧双歧杆菌(B.bifidum)、短双歧杆菌(B.breve)、婴儿双歧杆菌(B.infantis)、长双歧杆菌(B.longum)、青春双歧杆菌(B.adolescentis)、链状双歧杆菌(B.catenulatum)、角双歧杆菌(B.angulatum)、小行星双歧杆菌(B.asteroids)、布氏双歧杆菌(B.boum)、豚双歧杆菌(B.choerinum)、棒状双岐杆菌(B.coryneforme)、串孔双歧杆菌(B.cuniculi)、齿垢双歧杆菌(B.denticolens)、齿双歧杆菌(B.dentium)、高卢双歧杆菌(B.gallicum)、加氏沙门氏菌(B.gallinarum)、印度双歧杆菌(B.indicum)、奇异双歧杆菌(B.inopinatum)、乳酸双歧杆菌(B.lactis)、大黑盘双歧杆菌(B.magnum)、瘤胃双歧杆菌(B.merycicum)、最小双歧杆菌(B.minimum)、假小链双歧杆菌(B.pseudocatenulatum)、伪长双歧杆菌(B.pseudolongum)、小鸡双歧杆菌(B.pullorum)、反刍月形双歧杆菌(B.ruminantium)、世纪双歧杆菌(B.saeculare)、细弱双歧杆菌(B.subtile)、嗜酸嗜热双歧杆菌(B.thermacidophilum)、嗜热双歧杆菌(B.thermophilum)和图氏双歧杆菌(B.tsurumiense)。
5.如权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中，所述酵母属于酵母(Saccharomyces)属，优选酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和/或布拉氏酵母(Saccharomycesboulardii)。
6.如权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中，所述细菌是活的或是死的，如裂解物或提取物或级分。
7.如权利要求1-6中任一项所述的组合物，还包含由定义为生物后益生剂的微生物产生的代谢生物产物和/或细菌衍生的任何其他产物。
8.如权利要求1-7中任一项所述的组合物，其中，所述细菌以每次摄入10亿至1,000亿，优选100至750亿，更优选150至500亿，更优选200至300亿个活细菌细胞的量施用。
9.如权利要求1-8中任一项所述的组合物，其中，所述组合物配制用于口服使用，优选作为丸剂，胶囊，片剂，粒状粉末，囊盖，可溶性颗粒，袋，丸剂或可饮用的小瓶，或配制成液体，优选作为糖浆或饮料，或添加到食品，优选酸奶，奶酪或果汁中；或者配制成具有局部作用的形式，优选以灌肠剂的形式。
10.如权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中，所述摄入每天至少1-2次。
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