CN109298093A - 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法 - Google Patents

一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109298093A
CN109298093A CN201811297759.5A CN201811297759A CN109298093A CN 109298093 A CN109298093 A CN 109298093A CN 201811297759 A CN201811297759 A CN 201811297759A CN 109298093 A CN109298093 A CN 109298093A
Authority
CN
China
Prior art keywords
methanol
preparation
dwarf lilyturf
total saponins
easypro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811297759.5A
Other languages
English (en)
Inventor
安怀略
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN201811297759.5A priority Critical patent/CN109298093A/zh
Publication of CN109298093A publication Critical patent/CN109298093A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种益心舒中药制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，采用高效液相色谱法进行测定，麦冬总皂苷以鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品为对照，以甲醇为流动相A,0.02％～2％磷酸水溶液为流动相B梯度洗脱的高效液相色谱法进行测定，本测定方法专属性强、精密度高、重复性好、回收率高、稳定性高、测量结果准确，达到了有效控制药物质量的目的，确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。

Description

一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法
技术领域
本发明涉及一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，属于中药检测技术领域。
背景技术
益心舒中药制剂是以人参、黄芪、丹参、麦冬、五味子、川芎、山楂等七味药组成，具有益气复脉，活血化瘀，养阴生津的功效，用于气阴两虚，心悸脉结代，胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛见有上述症状者，目前临床上广泛用于治疗心绞痛、心肌缺血、各型心率失常、房性早搏、胸痛及冠心病心绞痛患等。
益心舒中药制剂中含有人参、麦冬等，其中皂苷类成分是该中药制剂的主要有效成分，目前，现有技术中HPLC测定益心舒胶囊中人参总皂苷的含量已经相对成熟，但是对于HPLC法测定麦冬总皂苷的技术，还没有相关专利及文献报道，为进一步完善益心舒中药制剂的质量检测标准，以确保其药品质量，并且为了减少分开多次测定不同麦冬总皂苷成分含量而产生的误差，如果能一次性测定多种成分的含量，不仅可以节约时间和成本，还可以使得同一系统条件下的测试结果更稳定、可靠，因此本申请人着手研究了同时测定益心舒制剂中麦冬总皂苷成分含量的方法。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其中麦冬总皂苷以鲁斯可皂苷元(C27H4204)计，进行快速、准确、高重现性、高回收率的测定。
为解决现有技术问题，本发明采用如下的技术方案：
一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，麦冬总皂苷以鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品为对照，以甲醇为流动相A、0.02％～2％磷酸水溶液为流动相B梯度洗脱的高效液相色谱法。
上述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，所述高效液相色谱法，按照如下步骤进行测定：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，0.02％～2％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；检测波长为397nm，流速为0.8～1.0mL/min，柱温为25～35℃，理论板数以鲁斯可皂苷元峰计算不低于2000；
(2)对照品溶液的制备：取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含50ug的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：采用下述方法①-④中的任一种：
①精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声或回流处理30～60min，用甲醇补足重量；滤过，取续滤液，即得；
②精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流提取30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，加水搅拌，滤过，加少量水洗涤滤饼及容器3次，合并洗液及滤液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
③精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用碱溶液洗3次，每次20mL，正丁醇液浓缩至干，残渣加水5mL使溶解，通过处理好的大孔吸附树脂柱或中性氧化铝柱，水洗至无色，收集50％～80％的乙醇洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
上述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，所述梯度洗脱的具体条件为：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
上述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，供试品溶液的制备方法③中所述的碱溶液为1％氢氧化钠溶液或氨试液，所述的大孔吸附树脂柱为D101、AB-8或NKA-9树脂。
上述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，所述流动相B为0.2％磷酸水溶液。
本发明所述的益心舒制剂是按以下方法制备而成的：川芎100～150g与山楂150～250g、黄芪150～250g和麦冬150～250g加水煎煮二次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.10～1.15(80℃)，向浓缩液中加入一倍量的85％乙醇，混匀，静置，滤过，滤液浓缩，备用；将五味子100～150g与丹参250～300g加入85％乙醇回流提取二次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩至相对密度为1.25～1.30(80℃)，得醇提浸膏，备用；将前述两种浸膏混合，加入人参细粉200g(或其醇提物)，混匀，干燥，粉碎，加入适量辅料制成任何一种药剂学上所说的剂型，如：片剂、胶囊剂、口服液、口含片、颗粒剂、冲剂、丸剂、膏剂、散剂、丹剂等制剂形式。
前述益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法中，每克益心舒制剂中以鲁斯可皂苷元(C27H4204)的总量计，不得少于1.4mg。
为了能够尽可能的精确测定制剂中麦冬总皂苷的含量，发明人将多种皂苷成分有效分离开来，对流动相种类、流动相比例以及梯度洗脱条件的摸索、确定是非常关键的。
本发明在现有技术的基础之上，继续探索，通过对流动相种类、流动相比例、梯度洗脱条件、对照品及供试品的制备方法等进行摸索、筛选，最终建立了益心舒制剂中麦冬总皂苷的高效液相色谱含量测定方法。以下是申请人所进行的相关试验研究和考察的主要内容。一、仪器与试药(见表1)
表1仪器与试剂表
二、方法与结果
1、色谱条件的选择
1.1柱温选择
为寻找最佳柱温，申请人采用不同柱温进行实验，观察结果，结果见表2。
表2柱温实验表
柱温(℃) 20 25 30 35 40
结果 分离度差 分离度良好 分离度良好 分离度良好 溶剂粘度大
由表2可知，选择25～35℃作为柱温均可。
1.2流速选择
为寻找最佳流速范围，申请人采用不同流速进行实验，记录色谱峰，结果见表3。
表3色谱峰记录表
由表3可知，设置流速为0.8～1.0mL/min，各峰间的分辨率良好，色谱时间短，峰面积适中，效果最好。
1.3流动相选择
为寻找最佳流动相，申请人采用不同流动相进行UV检测，记录色谱峰，结果如下。
(1)乙腈-水梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(2)乙腈-0.02％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(3)乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(4)乙腈-1％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(5)乙腈-2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(6)甲醇-水梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(7)甲醇-0.02％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(8)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(9)甲醇-1％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(10)甲醇-2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75。
(11)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝10∶90；5～40min：A∶B＝10～28∶90～72；40～75min：A∶B＝28～38∶72～62；75～80min：A∶B＝38～10∶62～90；80～110min：A∶B＝10∶90。
(12)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝15∶85；5～40min：A∶B＝15～30∶85～70；40～75min：A∶B＝30～40∶70～60；75～80min：A∶B＝40～15∶60～85；80～110min：A∶B＝15∶85。
(13)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～5min：A∶B＝12∶88；5～40min：A∶B＝12～30∶88～70；40～75min：A∶B＝30～35∶70～65；75～80min：A∶B＝35～12∶65～88；80～110min：A∶B＝12∶88。
(14)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～8min：A∶B＝15∶85；8～40min：A∶B＝15～25∶85～75；40～55min：A∶B＝25～35∶75～65；55～80min：A∶B＝35～15∶65～85；80～110min：A∶B＝15∶85。
(15)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～10min：A∶B＝15∶85；10～45min：A∶B＝15～25∶85～75；45～60min：A∶B＝25～35∶75～65；60～80min：A∶B＝35～15∶65～85；80～110min：A∶B＝15∶85。
(16)甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度：0～10min：A∶B＝20∶80；10～45min：A∶B＝20～35∶80～65；45～60min：A∶B＝35～45∶65～55；60～80min：A∶B＝45～20∶55～80；80～110min：A∶B＝20∶80。
结果显示在流动相B与洗脱条件相同的条件下，流动相A运用乙腈与甲醇均可，且甲醇较乙腈效果稍好，又因甲醇价格比乙腈低廉，因此优选流动相A为甲醇；在流动相A为甲醇且洗脱条件相同的情况下，流动相B采用水或0.02％～2％磷酸水溶液均可，但用一定浓度的磷酸水溶液替代水可得到较好的效果，且流动相用甲醇-0.2％磷酸水溶液效果更好；采用甲醇-0.2％磷酸水溶液的流动相体系，对不同时间段不同比例的流动相进行调整，摸索得到甲醇-磷酸水溶液体系采用上述(8)的梯度洗脱方式所得色谱峰较好，其分离度均符合要求，峰形均较好。
2、对照品溶液的制备
取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含50ug的溶液，即得；
3、供试品溶液的制备
采用下述方法①-③中的任一种：
①精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声或回流处理30～60min，用甲醇补足重量；滤过，取续滤液，即得；
②精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流提取30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，加水搅拌，滤过，加少量水洗涤滤饼及容器3次，合并洗液及滤液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
③精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用碱溶液(如1％氢氧化钠溶液、氨试液)洗3次，每次20mL，正丁醇液浓缩至干，残渣加水5mL使溶解，通过处理好的大孔吸附树脂柱(如D101、AB-8、NKA-9树脂)或中性氧化铝柱，水洗至无色，收集50％～80％的乙醇洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对三种供试品制备方法进行比较，结果如表4所示：
方法 测试结果
方法一 人参皂苷的提取效率高，但纯度稍低
方法二 人参皂苷的提取效率高，但纯度稍低
方法三 人参皂苷的提取效率稍低，但纯度高
由表4可知，通过方法一与方法二制备供试品，步骤简单操作方便，提取效率高，但是纯度稍低，杂质较多；采用方法三制备供试品，步骤繁琐，提取效率较前两者低，但提取的麦冬总皂苷纯度高，杂质残留量低，降低了检测过程中杂质的影响力，更利于保证检测结果的准确性和稳定性。
4、检测波长的选择
本发明人通过大量试验反复对鲁斯可皂苷元对照品溶液进行光谱紫外扫描，发现特别是在397nm处有极大吸收波长，因此本发明中麦冬总皂苷检测波长确定为397nm。
5、稳定性实验
精密吸取同一供试品溶液，室温下分别于0、2、4、8、12、24h各吸取10μL，共进样6次，测得麦冬总皂苷峰面积，计算得RSD分别为0.64％、0.91％、1.36％、0.78％，表明处理后的溶液在室温下24h内稳定，稳定性良好。
6、重复性实验
取同一供试品溶液6份，各进样10μL，测得麦冬总皂苷峰面积，计算得RSD分别为0.83％、0.76％、1.22％、0.74％，表明重复性良好。
7、加样回收率实验
精密称取已知含量的样品100mg，分别加入相当于各被测物含量的80％、100％、120％的对照品储备液，按照供试品溶液的制备项下方法制备低、中、高回收率样品各3份，测定各麦冬总皂苷成分的含量并计算加样回收率(n＝9)，结果麦冬总皂苷的平均回收率为101.3％(RSD＝1.40％)，表明本方法准确度良好。
8、样品含量测定
取5批益心舒制剂或其内容物适量，精密称定，分别按对照品溶液的制备项、供试品溶液的制备项下方法进行制备，按线性关系的考察项下含量测定(供试品溶液、对照品溶液分别进样10μL)，计算出麦冬总皂苷的含量，结果见表6。
表6样品含量测定结果(n＝5)
批号 含量(mg/g)
20171201 1.4826
20171002 1.4882
20180101 1.5106
20180201 1.6211
20180301 1.5232
本发明通过高效液相色谱法对益心舒制剂中麦冬总皂苷成分的含量进行测定，所述方法的专属性强、精密度高、重复性好、回收率高、稳定性高、测量结果准确，达到了有效控制药物质量的目的，确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。
具体实施方式
本发明实施例1：一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，步骤如下：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，0.02％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，洗脱条件为：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75；检测波长为397nm，流速为0.8mL/min，柱温为25℃，理论板数以鲁斯可皂苷元(C27H4204)峰计算不低于3000；
(2)对照品溶液的制备：取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含50ug的溶液即得；
(3)供试品溶液的制备：精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声或回流处理30～60min，用甲醇补足重量；滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本发明实施例2：一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，步骤如下：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，0.2％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，洗脱条件为：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75；检测波长为397nm，流速为0.9mL/min，柱温为30℃，理论板数以鲁斯可皂苷元(C27H4204)峰计算不低于3000；
(2)对照品溶液的制备：取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含50ug的溶液即得；
(3)供试品溶液的制备：精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流提取30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，加水搅拌，滤过，加少量水洗涤滤饼及容器3次，合并洗液及滤液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本发明实施例3：一种益心舒制剂麦冬总皂苷的含量测定方法，步骤如下：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，1％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，洗脱条件为：0～5min：A∶B＝25∶75；5～35min：A∶B＝25～35∶75～65；35～70min：A∶B＝35～50∶65～50；70～80min：A∶B＝50～25∶50～75；80～110min：A∶B＝25∶75；检测波长为203nm，流速为1.0mL/min，柱温为35℃，理论板数以人参皂苷Re峰计算不低于3000；
(2)对照品溶液的制备：取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含鲁斯可皂苷元(C27H4204)50ug的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用碱溶液(氨试液)洗3次，每次20mL，正丁醇液浓缩至干，残渣加水5mL使溶解，通过处理好的大孔吸附树脂柱(D101)，水洗至无色，收集50％～80％的乙醇洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
上述实施例中的所有条件参数的任意组合，均可得到一致的含量测定结果。

Claims (5)

1.一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其特征在于：麦冬总皂苷以鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品为对照，以甲醇为流动相A、0.02％～2％磷酸水溶液为流动相B梯度洗脱的高效液相色谱法。
2.根据权利要求1所述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱法，按照如下步骤进行测定：
(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，0.02％～2％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱；检测波长为397nm，流速为0.8～1.0mL/min，柱温为25～35℃，理论板数以鲁斯可皂苷元峰计算不低于2000；
(2)对照品溶液的制备：取鲁斯可皂苷元(C27H4204)对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1mL含50ug的溶液，即得；
(3)供试品溶液的制备：采用下述方法①-④中的任一种：
①精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声或回流处理30～60min，用甲醇补足重量；滤过，取续滤液，即得；
②精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，加热回流提取30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，加水搅拌，滤过，加少量水洗涤滤饼及容器3次，合并洗液及滤液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
③精密称取益心舒制剂或其内容物5～20g，置100mL具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，超声处理30min～60min，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液25mL，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用碱溶液洗3次，每次20mL，正丁醇液浓缩至干，残渣加水5mL使溶解，通过处理好的大孔吸附树脂柱或中性氧化铝柱，水洗至无色，收集50％～80％的乙醇洗脱液，浓缩至干，残渣加甲醇溶解，并转移至25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(4)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
3.根据权利要求2所述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体条件为：0～5min：A：B＝25：75；5～35min：A：B＝25～35：75～65；35～70min：A：B＝35～50：65～50；70～80min：A：B＝50～25：50～75；80～110min：A：B＝25：75。
4.根据权利要求2所述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其特征在于，供试品溶液的制备方法③中所述的碱溶液为1％氢氧化钠溶液或氨试液，所述的大孔吸附树脂柱为D101、AB-8或NKA-9树脂。
5.根据权利要求1、2或3所述的益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法，其特征在于，所述流动相B为0.2％磷酸水溶液。
CN201811297759.5A 2018-11-01 2018-11-01 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法 Pending CN109298093A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811297759.5A CN109298093A (zh) 2018-11-01 2018-11-01 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811297759.5A CN109298093A (zh) 2018-11-01 2018-11-01 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109298093A true CN109298093A (zh) 2019-02-01

Family

ID=65146268

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811297759.5A Pending CN109298093A (zh) 2018-11-01 2018-11-01 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109298093A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111024841A (zh) * 2019-12-10 2020-04-17 常熟雷允上制药有限公司 中药麦冬的皂苷及其重金属含量测定方法
CN113552266A (zh) * 2021-09-22 2021-10-26 山东省食品药品检验研究院 一种脑灵素制剂中麦冬原料的检测方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111024841A (zh) * 2019-12-10 2020-04-17 常熟雷允上制药有限公司 中药麦冬的皂苷及其重金属含量测定方法
CN113552266A (zh) * 2021-09-22 2021-10-26 山东省食品药品检验研究院 一种脑灵素制剂中麦冬原料的检测方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101850070B (zh) 中药唐草片的检测方法
CN103575819B (zh) 一种强心中药制剂指纹图谱的测定方法
CN101732607B (zh) 一种花芪中药制剂的质量检测方法
CN111175428B (zh) 补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法
CN103285306B (zh) 益气补肾的中药组合物的制备方法及检测方法
CN102614378B (zh) 养阴降糖中药组合物及其制备方法和检测方法
CN104330511B (zh) 一种益心舒制剂中人参皂苷的含量测定方法
CN106290599B (zh) 一种中药组合物的含量测定方法
CN115718145A (zh) 一种中药组合物的指纹图谱的测定方法
CN114609291B (zh) 一种中药复方一贯煎的指纹图谱检测方法
CN109298093A (zh) 一种益心舒制剂中麦冬总皂苷的含量测定方法
CN114689775A (zh) 芍药甘草汤指纹图谱及其构建方法和芍药甘草汤产品的检测方法
CN100543469C (zh) 十全大补膏的检测方法
CN103344737A (zh) 一种治疗鼻窦炎的中药片剂的质量控制方法
CN101804151A (zh) 一种制备益心舒片的方法
CN102218122A (zh) 一种海龙蛤蚧口服液的质量控制检测方法
CN106226435A (zh) 一种益心舒片皂苷类成分的指纹图谱检测方法
CN101874852A (zh) 八珍益母胶囊的质量检测方法
CN103592391A (zh) 贞芪扶正制剂中特女贞苷的含量测定方法
CN102068598B (zh) 治疗妇女血亏月经不调的养荣百草丸的检测方法
CN106033075A (zh) 一种益心复脉颗粒中黄芪甲苷含量测定方法
CN110487941A (zh) 桃红四物汤制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN104237404B (zh) 一种益心舒制剂中阿魏酸的含量测定方法
CN114942291A (zh) 潜阳育阴颗粒的质量检测方法
CN102008541B (zh) 无糖型复方扶芳藤制剂中3种主要活性成分的同时检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20190201