CN109294719A - 一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物及其制备方法和使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物及其制备方法和使用方法。本发明组合物中包括马鞭草2～3份、鱼腥草2～3份、满天星3～5份和壳聚糖1～2份，本发明组合物对粘红酵母油脂中的杂质具有吸附作用，通过吸附作用，明显降低微生物油脂中的杂质含量，提高油脂品质；本发明组合物可促进粘红酵母细胞破壁，使微生物油脂从细胞中完全释放，提高成品得率。采用本发明方法，粘红酵母油脂的得率最高达到99.3％，所得微生物油脂中杂质含量可低至0，不皂化物含量低至0.1％，油脂质量佳。
Description
技术领域
本发明涉及微生物油脂提取技术领域，特别涉及一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物及其制备方法和使用方法。
背景技术
粘红酵母(Rhodotorula glutinis(Fres.)Harrison)是一种重要的工业菌株，其生长周期短，油脂含量丰富，一般可以达到细胞干重的40％～70％，单位面积的产油量可高出大豆等油料作物数十倍，是一种应用前景良好的产油微生物。粘红酵母菌体个体大，代谢物多，本身含有丰富的蛋白质以及大量色素，从粘红酵母中提取到高质量、高得率的微生物油脂存在一定的难度。
CN104531342A公开了一种提取微生物油脂的方法，包括以下步骤：(1)将发酵后的产油微生物通过分离系统，得到含水量为65％～90％的湿菌体；(2)向步骤(1)的湿菌体中加入正己烷和乙醇的混合溶剂，恒温提取一段时间，然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；(3)向步骤(2)所得菌粕中加入正己烷和一定浓度的乙醇，恒温提取一段时间，再次固液分离后收集含油混合溶剂b和菌粕；(4)合并上述含油混合溶剂a和b；然后脱溶得到微生物油脂。该方法中采用的正己烷仍然具有一定的低毒性，产品杂质含量较多，且经过多次的固液分离导致油脂的损耗，此外操作较为繁琐，在推广应用方案存在一定的局限性。
发明内容
鉴以此，本发明提供了一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物及其制备方法和使用方法。
本发明的技术方案是：
一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2～3份、鱼腥草2～3份、满天星3～5份和壳聚糖1～2份。
优选的，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2份、鱼腥草2份、满天星5份和壳聚糖1份。
本发明还提供了所述组合物的制备方法，包括以下步骤：
取马鞭草、鱼腥草和满天星，烘干，粉碎，过100～200目筛，得粉末，加入质量百分浓度为80～90％的乙醇水溶液，每克粉末中乙醇水的加入量为15～20mL，45～50℃浸提0.5～1h，过滤，得滤饼，按料液比g/mL为1：(2～3)加入30～50℃温水浸提30～45min，过滤，取滤液，减压浓缩得含水量小于8％的浸膏，加入壳聚糖，混匀，即可。
此外，本发明还进一步提供了采用本发明组合物提高粘红酵母油脂得率和纯度的方法，包括以下步骤：
(1)收集发酵结束的粘红酵母湿菌体，湿菌体的含水量为50～80％；
(2)按照所述湿菌体重量的0.1～2％添加本发明所述的组合物，搅拌均匀，按料液比g/mL为1:(1～3)，加入异丙醇乙醇混合溶液，10～20℃保温2～7h；然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；
(3)向步骤(2)所得菌粕中加入乙醇，20～30℃保温1～2h，再次固液分离后收集含油混合溶剂b；将含油混合溶剂a和b合并；50～60℃脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得微生物油脂。
优选的，所述异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:1。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
A.本发明组合物对粘红酵母油脂中的杂质具有吸附作用，通过本发明组合物的吸附作用，明显降低微生物油脂中的杂质含量，提高优质品质；
B.本发明组合物可促进粘红酵母细胞破壁，使微生物油脂从细胞中完全释放，提高成品得率。
C.本发明微生物油脂提取方法简单易操作，易于工业推广。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种提高粘红酵母油脂得率的组合物，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2份、鱼腥草2份、满天星3份和壳聚糖2份。
所述组合物的制备方法，包括以下步骤：
取马鞭草、鱼腥草和满天星，烘干，粉碎，过200目筛，得粉末，加入质量百分浓度为80％的乙醇水溶液，每克粉末中乙醇水的加入量为20mL，45℃浸提1h，过滤，得滤饼，按料液比g/mL为1：2加入30℃温水浸提45min，过滤，取滤液，减压浓缩得含水量小于8％的浸膏，加入壳聚糖，混匀，即可。
实施例2
一种提高粘红酵母油脂得率的组合物，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草3份、鱼腥草3份、满天星5份和壳聚糖2份。
所述组合物的制备方法，与实施例1相同。
实施例3
一种提高粘红酵母油脂得率的组合物，所述组合物包括以下成分：马鞭草2份、鱼腥草2份、满天星5份和壳聚糖1份。
所述组合物的制备方法，与实施例1相同。
实施例4
一种提高粘红酵母油脂得率的组合物，其成分与实施例3相同。
所述组合物的制备方法，包括以下步骤：
取马鞭草、鱼腥草和满天星，烘干，粉碎，过100目筛，得粉末，加入质量百分浓度为90％的乙醇水溶液，每克粉末中乙醇水的加入量为15mL，50℃浸提0.5h，过滤，得滤饼，按料液比g/mL为1:3加入50℃温水浸提30min，过滤，取滤液，减压浓缩得含水量小于8％的浸膏，加入壳聚糖，混匀，即可。
实施例5
实施例1～4制备的组合物在提取粘红酵母油脂方面的使用方法，包括以下步骤：
(1)收集发酵结束的粘红酵母湿菌体，湿菌体的含水量为50％；
(2)按照所述湿菌体重量的0.1％分别添加实施例1～4制备的组合物，搅拌均匀，按料液比g/mL为1:1，加入异丙醇乙醇混合溶液，10℃保温2h；然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:1；
(3)向步骤(2)所得菌粕中加入乙醇，20℃保温1h，再次固液分离后收集含油混合溶剂b；将含油混合溶剂a和b合并；50℃脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得到微生物油脂。
得到的产品分别编号为组5-1(采用实施例5的使用方法和实施例1的组合物，其他编号同理)、5-2、5-3、5-4。
实施例6
实施例1～4制备的组合物在提取粘红酵母油脂方面的使用方法，包括以下步骤：
(1)收集发酵结束的粘红酵母湿菌体，湿菌体的含水量为80％；
(2)按照所述湿菌体重量的2％分别添加实施例1～4制备的组合物，搅拌均匀，按料液比g/mL为1:3，加入异丙醇乙醇混合溶液，10℃保温7h；然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；所述异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:5；
(3)向步骤(2)所得菌粕中加入乙醇，30℃保温2h，再次固液分离后收集含油混合溶剂b；将含油混合溶剂a和b合并；60℃脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得到微生物油脂。
得到的产品分别编号为组6-1、6-2、6-3、6-4。
对比例1
一种用于提取粘红酵母油脂的组合物，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2份、鱼腥草2份、马齿笕5份和壳聚糖1份。其他操作与实施例6中的组6-3相同。
对比例2
一种提取微生物油脂的方法，包括以下步骤：
称取湿重为2.0g(含水量为80.0％)的粘红酵母的湿菌体，加入8mL的正己烷和分析纯乙醇混合液(体积比为1:2.2)，30℃、220rpm振荡提取3小时后，8000rpm下离心10min，收集含油混合溶剂。向一次提取后的菌粕中加入10mL的75％乙醇和正己烷混合溶剂(体积比为3:1)，30℃、220rpm振荡提取2小时后，8000rpm下离心10min，收集含油混合溶剂。向第二次提取后的菌粕中加入10mL的75％乙醇和正己烷混合溶剂(体积比为3:1)，30℃、220rpm振荡提取1小时后，8000rpm下离心10min，收集含油混合溶剂。合并三次含油混合溶剂后脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得微生物油脂。
分别按照实施例与对比例的方法提取粘红酵母油脂，检测油脂得率、杂质和不皂化物的含量，结果见表1。
表1
| 得率 | 杂质(wt％) | 不皂化物(wt％) | |
| 组5-1 | 88.8％ | 0.02 | 0.7％ |
| 组5-2 | 88.0％ | 0.02 | 0.8％ |
| 组5-3 | 99.3％ | 0 | 0.1％ |
| 组5-4 | 98.0％ | 0 | 0.1％ |
| 组6-1 | 87.0％ | 0.02 | 1.0％ |
| 组6-2 | 87.9％ | 0.02 | 1.0％ |
| 组6-3 | 92.2％ | 0.01 | 0.4％ |
| 组6-4 | 91.7％ | 0.01 | 0.3％ |
| 对比例1 | 74％ | 0.03 | 2.0％ |
| 对比例2 | 84％ | 0.05 | 2.5％ |
从表1可知，采用本发明方法微生物油脂的得率最高达到99.3％，所得微生物油脂中杂质含量可低至0，不皂化物含量低至0.1％，油脂质量佳。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2～3份、鱼腥草2～3份、满天星3～5份和壳聚糖1～2份。
2.根据权利要求1所述的提高粘红酵母油脂得率和纯度的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的成分：马鞭草2份、鱼腥草2份、满天星5份和壳聚糖1份。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，通过以下方法制备而得：
取马鞭草、鱼腥草和满天星，烘干，粉碎，过100～200目筛，得粉末，加入质量百分浓度为80～90％的乙醇水溶液，每克粉末中乙醇水溶液的加入量为15～20mL，45～50℃浸提0.5～1h，过滤，得滤饼，按料液比g/mL为1：(2～3)加入30～50℃温水浸提30～45min，过滤，取滤液，减压浓缩得含水量小于8％的浸膏，加入壳聚糖，混匀，即可。
4.一种粘红酵母油脂的提取方法，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的组合物。
5.根据权利要求4所述的粘红酵母油脂的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)收集发酵结束的粘红酵母湿菌体，粘红酵母湿菌体的含水量为50～80％；
(2)按照所述粘红酵母湿菌体重量的0.1～2％添加权利要求1～3任一项所述的组合物，搅拌均匀，按料液比g/mL为1:(1～3)，加入异丙醇乙醇混合溶液，10～20℃保温2～7h；然后进行固液分离，得到含油混合溶剂a和菌粕；
(3)向步骤(2)所得菌粕中加入乙醇，20～30℃保温1～2h，再次固液分离后收集含油混合溶剂b；将含油混合溶剂a和含油混合溶剂b合并；50～60℃脱溶，然后常规脱色、脱臭处理，得到微生物油脂。
6.根据权利要求5所述的粘红酵母油脂的提取方法，其特征在于，所述异丙醇乙醇混合溶液中异丙醇和乙醇的体积比为1:1。
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