CN101531646B - 盐析法提取赤霉素 - Google Patents
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Abstract
本发明技术是用盐析法从发酵滤液中提取赤霉素，方法要点是：向含有赤霉素的发酵滤液中加入足够量的氯化钠或硫酸钠，赤霉素即从滤液中析出，经固液分离，得含赤霉素的粗提物，粗提物收率大于98％。
Description
技术领域：
本发明描述了农用植物生长调节剂的提取方法，具体的讲是用盐析法从发酵滤液中提取赤霉素。
背景技术
赤霉素是一种公知的植物生长调节剂。生产中使用的赤霉素是利用赤霉菌进行液体发酵产生的。提取工艺是：发酵结束，发酵液经板框过滤得含赤霉素的发酵滤液和菌丝体滤饼；从发酵滤液中进一步将赤霉素提取出来的方法有两种：一是用乙酸乙酯直接萃取赤霉素；二是先将发酵滤液减压浓缩到1/5体积后，在用乙酸乙酯将浓缩液中的赤霉素萃取出来。用第一种方法萃取赤霉素，萃取率高但有机溶剂消耗较大；用第二种方法从发酵滤液中提取赤霉素的不足之处是在加热减压浓缩过程中，PH值略有偏移或温度过高或浓缩时间过长都会造成赤霉素降解，使收率下降。
为了克服以上两种方法之不足，本发明采用盐析法从发酵滤液中提取赤霉素。方法要点是：发酵滤液中加入足够量的氯化钠或硫酸钠使赤霉素从发酵滤液中析出，然后采用过滤或离心的方法将含有赤霉素的粗提取物分离出来。再用少量的乙酸乙酯和其他溶剂进行纯化，即可获得纯度较高的赤霉素。也可以在加入盐的同时加入少量的乙酸乙酯来提高赤霉素在乙酸乙酯中的分配系数，同样可以减少溶剂用量降低生产成本。
发明内容
本发明技术是关于赤霉素提取方法，其特征在于向含有赤霉素的发酵滤液中加入足够量的氯化钠或硫酸钠，从而使赤霉素从滤液中析出，然后用离心或过滤的方法将析出的赤霉素分离出来。一般而言，在发酵滤液中加入25～35％氯化钠(重量/体积比)或加入10～25％硫酸钠(重量/体积比)即可使赤霉素的析出率达80～99％，随着盐的加入量越多赤霉素析出率越高，当盐在发酵滤液中达到饱和时，赤霉素析出率为最大。
还可以在发酵滤液中加入少量的氯化钠或硫酸钠(大约在5～10％)，同时加入乙酸乙酯或4-甲基-2-戊酮等疏水性溶剂，进行萃取，由于盐的加入可提高赤霉素在有机相中的分配系数。同样可以减少溶剂用量，降低提取成本。
具体实施方式
实例1、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入重量/体积比为35％的氯化钠，充分搅拌使氯化钠全部溶解，然后过滤或离心，即得含赤霉素的粗提取物。经HPLC分析，赤霉素的收率达99％。
实例2、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入重量/体积比为22％的硫酸钠，充分搅拌使氯化钠全部溶解，然后过滤或离心，即得含赤霉素的粗提取物。经HPLC分析，赤霉素的收率达99％。
实例3、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入重量/体积比为20％的氯化钠，充分搅拌使氯化钠全部溶解，然后过滤或离心，即得含赤霉素的粗提取物。经HPLC分析，赤霉素的收率达82～88％。
实例4、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入重量/体积比为15％的硫酸钠，充分搅拌使氯化钠全部溶解，然后过滤或离心，即得含赤霉素的粗提取物。经HPLC分析，赤霉素的收率达84～88％。
实例5、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入相当于滤液10％的乙酸乙酯和15％的硫酸钠，充分搅拌萃取，然后静置或离心分相，得含赤霉素的有机相，萃取率达97％以上，不加入盐的对照组，其萃取率为88％。
实例6、
发酵结束，发酵液用高压板框压滤，得含赤霉素的发酵滤液。向滤液中加入相当于滤液6％的乙酸乙酯和24％的硫酸钠，充分搅拌萃取，然后静置或离心分相，得含赤霉素的有机相，萃取率达99％以上，不加入盐的对照组，其萃取率为81％。
Claims (2)
1. 一种赤霉素的提取方法，其特征在于向含有赤霉素的发酵滤液中加入重量/体积比为10～40％氯化钠或硫酸钠，充分混合，待赤霉素析出完成，进行固液分离，即得含赤霉素的粗提物。
2. 一种赤霉素的提取方法，其特征在于向含有赤霉素的发酵滤液中加入重量/体积比为5～30％氯化钠或硫酸钠，同时加入相当于发酵滤液体积的5～100％的乙酸乙酯，充分混合，然后静置或离心分相，即可获得含赤霉素的有机相。
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