CN103467352B - 一种灵菌红素提取纯化的方法 - Google Patents
一种灵菌红素提取纯化的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103467352B CN103467352B CN201310357554.2A CN201310357554A CN103467352B CN 103467352 B CN103467352 B CN 103467352B CN 201310357554 A CN201310357554 A CN 201310357554A CN 103467352 B CN103467352 B CN 103467352B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- prodigiosin
- ethyl acetate
- extraction
- concentrated solution
- silica gel
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种提取纯化灵菌红素的方法，用于从生产灵菌红素的固态发酵物料中分离并纯化出灵菌红素，其特征在于，具有以下步骤：将固态发酵物料进行真空干燥制得提取原料；以提取溶剂与含水溶剂分别对提取原料进行浸提1-2小时并浓缩两次提取液；合并两次浓缩液，再次浓缩并离心，分别收集上清液和沉淀；上清液以等体积的乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯相，蒸干溶剂得到灵菌红素粗提物；将灵菌红素粗提物与沉淀合并，加入0.5～2倍质量的硅胶，然后两次以硅胶轴向压缩柱梯度洗脱进行纯化，依次得到灵菌红素次纯品和灵菌红素高纯品。
Description
技术领域
本发明涉及药物中间体的提取工艺，尤其是一种从固态发酵物料中提取和纯化灵菌红素的方法。
背景技术
灵菌红素（prodigionsin）是一族天然红色素的总称，通常具有由三个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构，属于生物碱。自然界中产灵菌红素的菌株主要是粘质沙雷氏菌（Serratiamarcecens），此外还有一些放线菌（例如：Streptomycescoelicolor）、以及海洋细菌（例如：Hahellachejuensis、Pseudoalteromonasdenitrificans）。
近年来，许多学者研究发现，灵菌红素家族化合物是一类非常有潜力的抗癌待选药物，对许多癌细胞（如肺癌、结肠癌、肾癌以及乳腺癌）都具有良好的细胞凋亡作用，而对正常细胞的毒性非常低；除了诱导细胞凋亡，灵菌红素能够抑制癌细胞的浸润转移作用。此外，灵菌红素可以抑制磷酸化反应、激活细胞酪氨酸激酶，并且通过与细胞表面受体结合，阻断γ链的信号转换，从而显示出免疫抑制活性。灵菌红素已经成为抗癌等新药研发的热点。
相对于普通硅胶柱层析，利用动态轴向压缩柱系统纯化灵菌红素，效率高，单针上样量大，分离纯化时间短；选择的溶剂可以使用分析级或者工业级试剂，价格低廉，更好的降低成本，有利于工业化生产。目前灵菌红素及其类似物的发酵主要以液态发酵为主，发酵水平较低，总体来说还不能满足工业化需求。由于灵菌红素主要为胞内产物，只有少量的分泌在发酵液中，因此，从发酵液中回收灵菌红素程序较为复杂，溶剂和能耗较高，这也是限制灵菌红素产业化的一个瓶颈。公开号为CN102002469A（发明名称：生产灵菌红素的菌株及其方法）、CN102277323A（发明名称：高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌（Serratiamarcescens）Sm-128菌株及其应用）、CN101392227B（发明名称：一种粘质沙雷氏菌及其生产的灵菌红素）等专利文献公开了一系列粘质沙雷氏菌发酵生产灵菌红素的方法，并没有涉及灵菌红素的提取工艺。专利CN102311981A（发明名称：制备提纯灵菌红素的方法）、CN1884483A（发明名称：生产灵菌红素的海洋细菌菌株及其生产灵菌红素的方法）等专利文献公开了一系列液态发酵法生产、提取纯化灵菌红素的方法，并没有涉及固态发酵物料中灵菌红素的提取纯化工艺。
发明内容
本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种从固态发酵物料中提取纯化灵菌红素的方法。为了实现这一目的，本发明采取了以下技术方案。
一种提取纯化灵菌红素的方法，用于从生产灵菌红素的固态发酵物料中分离并纯化出灵菌红素，其特征在于，具有以下步骤：将固态发酵物料进行真空干燥制得提取原料；以一定重量比将提取溶剂与提取原料在容器中混合，保持温度在40℃-50℃之间，浸提1-2小时，移出并过滤容器中的液体得到第一提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第一浓缩液；以一定重量比将含水溶剂加入容器，保持温度在40℃-50℃之间，浸提1-2小时，移出并过滤容器中的液体得到第二提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第二浓缩液；合并第一浓缩液和第二浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无液体挥发，制备得到灵菌红素浓缩液；将灵菌红素浓缩液离心，分别收集上清液和沉淀；向上清液中加入与上清液等体积的乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩，蒸干溶剂得到灵菌红素粗提物；将灵菌红素粗提物与沉淀合并，加入0.5～2倍质量的硅胶，充分搅拌后干燥，制备得到灵菌红素干浓缩物；将灵菌红素干浓缩物加入硅胶轴向压缩柱，以体积比1:1～1:4的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯梯度洗脱，收集并合并红色洗脱组分，减压浓缩蒸干溶剂得到灵菌红素次纯品；将灵菌红素次纯品与0.5～2倍质量的硅胶混合，继续用硅胶轴向压缩柱纯化，以体积比1:3～1:5的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯进行梯度洗脱，按时间分批收集洗脱组分，利用高效液相色谱检测各批洗脱组分，并将纯度高的洗脱组分合并，减压浓缩除去溶剂得到灵菌红素高纯品。
发明的作用与效果
本发明工艺简单，安全可靠，灵菌红素的提取率达到90%以上；与液态发酵提取技术相比，本方法提取溶剂消耗少，能耗低，提取损失小。采用动态轴向压缩柱系统纯化灵菌红素，产品分离效率高，溶剂消耗少，产品质量容易控制，纯化系统为密闭系统，操作环境污染小。
具体实施方式
下面以实施例对本发明的具体实施方式进行详细说明。在实施本发明的过程中，采用杭州惠合机械设备有限公司生产的多功能提取罐进行提取；硅胶轴向压缩柱梯度洗脱时，每个梯度使用洗脱液40-60L。另外，以如下条件进行高效液相色谱（HPLC）检测：HPLC仪器为Agilent1200Series；色谱柱为SepaxBio-C18（3μm，4.6mm×150mm）；流速为0.6mL/min；检测波长为535nm；流动相A为水/三氟乙酸（TFA）=100/0.1，流动相B为乙腈/三氟乙酸（TFA）=100/0.09；柱温为28℃；进样量为10μL。其中，HPLC洗脱梯度如下：0-15min，流动相B25-90%；15-15.5min，流动相B90-25%；15.5-21min，流动相B25%。
<实施例1>
（1）灵菌红素固态发酵物料经过50℃真空干燥制得的提取原料，装入多功能提取罐中；
（2）灵菌红素浓缩液制备
第一次向多功能提取罐中加入3倍重量比的乙醇回流提取1小时，提取过程中温度保持在40℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无乙醇挥发，回收乙醇；
第二次向多同能提取罐中加入3倍重量比的70%乙醇溶液回流提取1小时，提取过程中温度保持在40℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇；
合并两次提取的浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无乙醇挥发出，制备得到灵菌红素浓缩液。
（3）灵菌红素干浓缩物制备。将灵菌红素浓缩液8000r/min离心10min，收集沉淀；向上清中加入1倍体积的乙酸乙酯，进行分配萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩得到灵菌红素粗提物，与前述沉淀合并，加入1倍的硅胶，充分搅拌后干燥，得到灵菌红素干浓缩物；
（4）利用动态轴向压缩柱系统对灵菌红素进行纯化制备。
分离纯化条件是：采用10μm球形硅胶轴向压缩柱，直径250mm，填料高度1000mm，洗脱液采用正己烷-乙酸乙酯混合液，正己烷-乙酸乙酯的体积比为1:1、1:3、1:4和纯乙酸乙酯梯度洗脱；流速为250mL/min；收集红色组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素次纯品，次纯品纯度≥80%。
将灵菌红素次纯品继续用动态轴向压缩柱系统纯化，梯度洗脱条件：正己烷与乙酸乙酯体积比1:3、1:4、1:5和纯乙酸乙酯梯度洗脱，流速为250mL/min；分布收集红色部分并用HPLC检测洗脱组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
<实施例2>
（1）灵菌红素固态发酵物料经过50℃真空干燥制得的提取原料，装入多功能提取罐中。
（2）灵菌红素浓缩液的制备。
第一次向多功能提取罐中加入4倍重量比的乙醇回流提取1.5小时，提取过程中温度保持在45℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
第二次向多同能提取罐中加入4倍重量比的80%乙醇溶液回流提取1.5小时，提取过程中逐渐加热温度保持在45℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
合并两次提取的浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无乙醇挥发出，制备得到灵菌红素浓缩液。
（3）灵菌红素干浓缩物的制备。
将灵菌红素浓缩液8000r/min离心10min，收集沉淀；向上清中加入1倍体积的乙酸乙酯，进行分配萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩得到灵菌红素粗提物，与前述沉淀合并，加入1.5倍的硅胶，充分搅拌后干燥，得到灵菌红素干浓缩物；
（4）利用动态轴向压缩柱系统对灵菌红素进行纯化制备。
分离纯化条件是：采用10μm球形硅胶轴向压缩柱，直径250mm，填料高度1000mm，洗脱液采用正己烷-乙酸乙酯混合液，正己烷-乙酸乙酯的体积比为1:1、1:3、1:4和纯乙酸乙酯梯度洗脱；流速为300mL/min；收集红色组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素次纯品，次纯品纯度≥80%。
将灵菌红素次纯品继续用动态轴向压缩柱系统纯化，梯度洗脱条件：正己烷与乙酸乙酯体积比1:3、1:4、1:5和纯乙酸乙酯梯度洗脱，流速为300mL/min；分布收集红色部分并用HPLC检测洗脱组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
<实施例3>
（1）灵菌红素固态发酵物料经过50℃真空干燥制得的提取原料，装入多功能提取罐中。
（2）灵菌红素浓缩液的制备。
第一次向多功能提取罐中加入5倍重量比的乙醇回流提取2小时，提取过程中温度保持在50℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
第二次向多同能提取罐中加入5倍重量比的90%乙醇溶液回流提取2小时，提取过程中温度保持在50℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
合并两次提取的浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无乙醇挥发出，制备得到灵菌红素浓缩液。
（3）灵菌红素干浓缩物的制备。
将灵菌红素浓缩液8000r/min离心10min，收集沉淀；向上清中加入1倍体积的乙酸乙酯，进行分配萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩得到灵菌红素粗提物，与前述沉淀合并，加入2倍的硅胶，充分搅拌后干燥，得到灵菌红素干浓缩物。
（4）利用动态轴向压缩柱系统对灵菌红素进行纯化制备。
分离纯化条件是：采用10μm球形硅胶轴向压缩柱，直径250mm，填料高度1000mm，洗脱液采用正己烷-乙酸乙酯混合液，正己烷-乙酸乙酯的体积比为1:1、1:3、1:4和纯乙酸乙酯梯度洗脱；流速为330mL/min；收集红色组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素次纯品，次纯品纯度≥80%。
将灵菌红素次纯品继续用动态轴向压缩柱系统纯化，梯度洗脱条件：正己烷与乙酸乙酯体积比1:3、1:4、1:5和纯乙酸乙酯梯度洗脱，流速为330mL/min；分布收集红色部分并用HPLC检测洗脱组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
<实施例4>
（1）灵菌红素固态发酵物料经过50℃真空干燥制得的提取原料，装入多功能提取罐中。
（2）灵菌红素浓缩液的制备。
第一次向多功能提取罐中加入4倍重量比的甲醇回流提取1.5小时，提取过程中温度保持在45℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
第二次向多同能提取罐中加入4倍重量比的含水80%甲醇溶液回流提取1.5小时，提取过程中温度保持在45℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
合并两次提取的浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无乙醇挥发出，制备得到灵菌红素浓缩液。
（3）灵菌红素干浓缩物的制备。
将灵菌红素浓缩液8000r/min离心10min，收集沉淀；向上清中加入1倍体积的乙酸乙酯，进行分配萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩得到灵菌红素粗提物，与前述沉淀合并，加入1.5倍的硅胶，充分搅拌后干燥，得到灵菌红素干浓缩物。
（4）利用动态轴向压缩柱系统对灵菌红素进行纯化制备。
分离纯化条件是：采用10μm球形硅胶轴向压缩柱，直径250mm，填料高度1000mm，洗脱液采用正己烷-乙酸乙酯混合液，正己烷-乙酸乙酯的体积比为1:1、1:3、1:4和纯乙酸乙酯梯度洗脱；流速为300mL/min；收集红色组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素次纯品，次纯品纯度≥80%。
将灵菌红素次纯品继续用动态轴向压缩柱系统纯化，梯度洗脱条件：正己烷与乙酸乙酯体积比1:3、1:4、1:5和纯乙酸乙酯梯度洗脱，流速为300mL/min；分布收集红色部分并用HPLC检测洗脱组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
<变形例>
分别以异丙醇、丙酮或乙腈中的一种代替实施例4中的甲醇，其他条件不变，分别进行灵菌红素的提取和纯化，得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
<实施例5>
（1）灵菌红素固态发酵物料经过50℃真空干燥制得的提取原料，装入多功能提取罐中。
（2）灵菌红素浓缩液的制备。
第一次向多功能提取罐中加入3倍重量比的乙醇回流提取1小时，提取过程中温度保持在40℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
第二次向多同能提取罐中加入3倍重量比的70%乙醇溶液回流提取1小时，提取过程中温度保持在40℃，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟。移出并过滤提取液，于50℃-70℃减压浓缩无乙醇挥发，回收乙醇。
合并两次提取的浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无乙醇挥发出，制备得到灵菌红素浓缩液。
（3）灵菌红素干浓缩物制备。
将灵菌红素浓缩液8000r/min离心10min，收集沉淀；向上清中加入1倍体积的乙酸乙酯，进行分配萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩得到灵菌红素粗提物，与前述沉淀合并，加入0.5倍的硅胶，充分搅拌后干燥，得到灵菌红素干浓缩物。
（4）利用动态轴向压缩柱系统对灵菌红素进行纯化制备。
分离纯化条件是：采用10μm球形硅胶轴向压缩柱，直径250mm，填料高度1000mm，洗脱液采用正己烷-乙酸乙酯混合液，正己烷-乙酸乙酯的体积比为1:1、1:3、1:4和纯乙酸乙酯梯度洗脱；流速为280mL/min；收集红色组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素次纯品，次纯品纯度≥80%。
将灵菌红素次纯品继续用动态轴向压缩柱系统纯化，梯度洗脱条件：正己烷与乙酸乙酯体积比1:3、1:4、1:5和纯乙酸乙酯梯度洗脱，流速为280mL/min；分布收集红色部分并用HPLC检测洗脱组分，合并后减压浓缩出去溶剂得到灵菌红素高纯品，高纯品纯度≥95%。
具体实施方式的有益效果
本发明的具体实施方式工艺简单、稳定，安全可靠，提取溶剂消耗少，能耗低，提取损失小，灵菌红素的提取率达到90%以上。采用动态轴向压缩柱系统纯化灵菌红素，不仅产品分离效率高，溶剂消耗少，产品质量容易控制，纯化系统为密闭系统，操作环境污染小，而且产品纯度皆不低于95%。
以上，仅为本发明的一种具体实施方式而已，并非用来限定本发明的实施范围，即凡依本发明申请专利范围的内容所作的等效变化与修饰，都应为本发明的技术范畴。
Claims (5)
1.一种提取纯化灵菌红素的方法，用于从生产灵菌红素的固态发酵物料中分离并纯化出灵菌红素，其特征在于，具有以下步骤：
将所述固态发酵物料进行真空干燥制得提取原料；
以一定重量比将提取溶剂与所述提取原料在容器中混合，保持温度在40℃-50℃之间，回流提取1-2小时，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟，移出并过滤所述容器中的液体得到第一提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第一浓缩液；
以一定重量比将含水溶剂加入所述容器，保持温度在40℃-50℃之间，回流提取1-2小时，每隔15分钟将提取液用循环泵由下至上循环15分钟，移出并过滤所述容器中的液体得到第二提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第二浓缩液；
合并所述第一浓缩液和所述第二浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无液体挥发，制备得到灵菌红素浓缩液；
将所述灵菌红素浓缩液离心，分别收集上清液和沉淀；
向所述上清液中加入与所述上清液等体积的乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩，蒸干溶剂得到灵菌红素粗提物；
将所述灵菌红素粗提物与所述沉淀合并，加入0.5～2倍质量的硅胶，充分搅拌后干燥，制备得到灵菌红素干浓缩物；
将所述灵菌红素干浓缩物加入硅胶轴向压缩柱，以体积比1:1～1:4的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯梯度洗脱，收集并合并红色洗脱组分，减压浓缩蒸干溶剂得到灵菌红素次纯品；
将所述灵菌红素次纯品与0.5～2倍质量的硅胶混合，继续用所述硅胶轴向压缩柱纯化，以体积比1:3～1:5的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯进行梯度洗脱，按时间分批收集洗脱组分，利用高效液相色谱检测各批所述洗脱组分，并将纯度高的所述洗脱组分合并，减压浓缩除去溶剂得到灵菌红素高纯品，
其中，所述溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙腈中的一种，
所述含水溶剂为含水10-30％的甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮或乙腈溶液，
所述硅胶轴向压缩柱为10μm球形硅胶压缩柱，所述压缩柱的直径为250μm，填料高度为1000mm。
2.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：
其中，所述容器为杭州惠合机械设备有限公司生产的多功能提取罐。
3.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：
其中，在减压浓缩制备所述第一浓缩液和所述第二浓缩液时，回收挥发出来的溶剂。
4.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：
其中，制备所述灵菌红素干浓缩物时使用的干燥技术为冷冻干燥、50℃真空干燥以及50℃烘干中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：
其中，当梯度洗脱时，洗脱液流速为250-330ml/min，每个梯度的洗脱液的量为40-60L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310357554.2A CN103467352B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种灵菌红素提取纯化的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310357554.2A CN103467352B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种灵菌红素提取纯化的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103467352A CN103467352A (zh) | 2013-12-25 |
| CN103467352B true CN103467352B (zh) | 2016-04-20 |
Family
ID=49792433
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310357554.2A Active CN103467352B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种灵菌红素提取纯化的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103467352B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103755619B (zh) * | 2014-01-09 | 2016-06-08 | 嘉兴学院 | 一种灵菌红素的提取分离方法 |
| CN111778298B (zh) * | 2020-07-27 | 2023-06-27 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种粘质沙雷氏菌itbb b5-1在生产灵菌红素中的应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4266028A (en) * | 1979-02-21 | 1981-05-05 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Process for preparation of prodigiosin |
| CN102002469B (zh) * | 2010-09-28 | 2013-05-01 | 嘉兴学院 | 生产灵菌红素的菌株及其方法 |
| CN102311981B (zh) * | 2011-07-19 | 2013-10-09 | 东南大学 | 制备提纯灵菌红素的方法 |
| CN102888351B (zh) * | 2012-09-03 | 2014-06-11 | 广东药学院 | 一种灵菌红素高产菌株及其生产方法 |
-
2013
- 2013-08-15 CN CN201310357554.2A patent/CN103467352B/zh active Active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 动态轴向压缩工业制备色谱分离丹参脂溶性单体化合物;朱靖博等;《大连工业大学学报》;20100131;第29卷(第1期);第51-54页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103467352A (zh) | 2013-12-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101372492A (zh) | 一种制备高纯度莫西克汀的方法 | |
| CN103467551B (zh) | 一种虫草素和虫草多糖及其制备方法 | |
| CN103570779A (zh) | 模拟移动床分离制备甘草苷的方法 | |
| CN103467352B (zh) | 一种灵菌红素提取纯化的方法 | |
| CN102093374A (zh) | 一种高效提取喜树碱衍生物的方法 | |
| CN103709152B (zh) | 一种葛根素的分离纯化方法 | |
| CN102086226B (zh) | 一种制备环孢菌素a的方法 | |
| CN102898347A (zh) | 一种从小叶锦鸡儿中萃取海帕刺桐碱的方法 | |
| CN103570647A (zh) | 从红豆杉细胞培养液中制备高纯度紫杉醇的方法 | |
| CN100545157C (zh) | 模拟移动床色谱法从芦蒿中分离纯化黄酮的方法 | |
| CN105111061B (zh) | 一种抗肿瘤活性化合物的制备方法 | |
| CN104803836B (zh) | 从水翁花蕾中提取4′,6′-二羟基-3′,5′-二甲基-2′-甲氧基查耳酮的工艺 | |
| CN102617674A (zh) | 一种山莨菪根中东莨菪苷单体的制备方法 | |
| CN102432419B (zh) | 从紫茎泽兰中提取分离β-榄香烯的方法 | |
| CN108675915A (zh) | 一种制备ent-spathulenol的方法 | |
| CN101531646B (zh) | 盐析法提取赤霉素 | |
| CN107141198A (zh) | 一种从海洋球石藻中提取叶绿醇的方法 | |
| CN103305582A (zh) | 一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法 | |
| CN1328269C (zh) | 一种紫杉醇的制备方法 | |
| CN105367615B (zh) | 一种大豆苷的分离纯化方法 | |
| CN111848357A (zh) | 一种超高液相色谱法制备高纯度大麻二酚的方法 | |
| CN103242333A (zh) | 一种查帕苦树素的提纯方法 | |
| CN104496762B (zh) | 从普通油茶叶中分离出两种联苄类化合物的方法 | |
| CN108774120A (zh) | 拉帕醌类化合物及其制备方法 | |
| CN102584704B (zh) | 一种聚合物微球分离制备格尔德霉素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20180530 Address after: 201315 A01 room, block B, 499 Kang Yi Road, Pudong New Area, Shanghai. Patentee after: Shanghai Minhe Biotechnology Co., Ltd. Address before: 200093 No. 516, military road, Shanghai, Yangpu District Patentee before: University of Shanghai for Science and Technology |
|
| TR01 | Transfer of patent right |