CN109224059A - 复方制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种复方制剂及其制备方法。所述复合制剂为结肠溶制剂,所述复合制剂包括如下重量份的组分:绿豆多肽:4‑6份;丹参提取物:0.5‑1.5份;黄芪提取物:0.5‑1.5份;红花提取物:0.2‑0.4份;β‑环糊精:2‑4份;硬脂酸镁:0.005‑0.015份。该复方制剂通过绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在该重量份的范围内的协同作用,对提高缺氧耐受力、改善缺氧状况以及防治心脑血管疾病具有很好的疗效。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种复方制剂及其制备方法。
背景技术
绿豆的化学成分中富含蛋白质、各种氨基酸,硫胺素、核黄素、尼克酸、维生素E等各种维生素及钾、钠、钙、镁、铁、锰、硒等各种微量元素。绿豆中除了含有上述人体必需的营养素外,还含有许多生物活性物质。从食物蛋白尤其是产量丰富的植物蛋白的酶解产物中可提取出具有生物活性的蛋白多肽,如酶抑制剂、肠调节吸收肽、抗氧化肽、抗菌肽等。
绿豆中含有丰富的蛋白质,内服可保护胃肠黏膜,绿豆鞣酸和黄酮类化合物可与有机磷的农药、汞、砷、铝等有毒的元素结合形成沉淀,减轻或失去毒性,且不易被肠道吸收。绿豆的化学成分及药理作用的研究,为绿豆的开发和利用奠定了良好的基础,绿豆多肽的开发和研制,为开发新型中药药品、保健食品及特殊医疗用途食品展示了广阔的天地。
绿豆多肽在服用和食用过程中,容易被胃液强酸和蛋白酶降解。特别是低分子量绿豆多肽,更易被酶降解成氨基酸,而失去生物活性,直接服用绿豆多肽时,对适应症的治疗效率不是很理想。
因此,现有技术有待改进。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的上述不足,提供一种复方制剂,旨在解决现有绿豆多肽服用时效果不理想的技术问题。
为实现上述发明目的,本发明采用的技术方案如下:
本发明一方面提供一种复合制剂,所述复合制剂为结肠溶制剂,所述复合制剂包括如下重量份的组分:
绿豆多肽:4-6份;
丹参提取物:0.5-1.5份;
黄芪提取物:0.5-1.5份;
红花提取物:0.2-0.4份;
β-环糊精:2-4份;
硬脂酸镁:0.005-0.015份。
本发明提供的复方制剂为一种结肠溶制剂,该复方制剂通过将绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在结肠定位崩解释放,然后结肠内丰富的淋巴组织将其吸收,这样避免了胃液、消化道内蛋白酶水解多肽的作用,从而充分发挥了绿豆多肽的生物活性作用;该复方制剂中的β-环糊精和硬脂酸镁作为辅料在该重量份范围内,可以更好地辅助制剂的制备以及绿豆多肽和其他中药提取物的释放,同时,通过绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在该重量份的范围内的协同作用,对提高缺氧耐受力、改善缺氧状况以及防治心脑血管疾病具有很好的疗效。
本发明另一方面提供一种上述复合制剂的制备方法,包括如下步骤:
用蛋白酶水溶液酶解绿豆粉,得到含有所述绿豆多肽的绿豆粉酶解液;
将所述绿豆粉酶解液浓缩处理得到第一浓缩液;
分别将丹参、黄芪和红花粉碎后溶于水中加热浸泡提取,得到丹参提取液、黄芪提取液和红花提取液,然后合并浓缩得到第二浓缩液;
将所述第一浓缩液和所述第二浓缩液与所述β-环糊精和硬脂酸镁混合后,制备成结肠溶制剂,得到所述复合制剂。
本发明提供的复方制剂的制备方法工艺简单易行,成本低,该制备方法中先通过酶解工艺提取绿豆多肽,并浸泡提取各种中药提取物,然后将其与β-环糊精和硬脂酸镁混合后,利用剂型工艺制备成结肠溶制剂。最终得到的复方制剂通过绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在该重量份的范围内的协同作用,对提高缺氧耐受力、改善缺氧状况以及防治心脑血管疾病具有很好的疗效。
附图说明
图1为本发明实施例1中提取到的绿豆多肽的凝胶层析峰图。
具体实施方式
为了使本发明要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
一方面,本发明实施例提供了一种复合制剂,所述复合制剂为结肠溶制剂,所述复合制剂包括如下重量份的组分:
绿豆多肽:4-6份;
丹参提取物:0.5-1.5份;
黄芪提取物:0.5-1.5份;
红花提取物:0.2-0.4份;
β-环糊精:2-4份;
硬脂酸镁:0.005-0.015份。
本发明实施例提供的复方制剂为一种结肠溶制剂,该复方制剂通过将绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在结肠定位崩解释放,然后结肠内丰富的淋巴组织将其吸收,这样避免了胃液、消化道内蛋白酶水解多肽的作用,从而充分发挥了绿豆多肽的生物活性作用;该复方制剂中的β-环糊精和硬脂酸镁作为辅料在该重量份范围内,可以更好地辅助制剂的制备以及绿豆多肽和其他中药提取物的释放,同时,通过绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在该重量份的范围内的协同作用,对提高缺氧耐受力、改善缺氧状况以及防治心脑血管疾病具有很好的疗效。
进一步地,本发明实施例提供的复方制剂中,包括:绿豆多肽:5份;丹参提取物:1份;黄芪提取物:1份;红花提取物:0.3份;β-环糊精:3份;硬脂酸镁:0.01份。含有该重量份的复方制剂对提高缺氧耐受力以及防治心脑血管疾病的效果最佳。
进一步地,本发明实施例提供的复方制剂中,所述绿豆多肽的相对分子质量为158-970。该低分子量的绿豆多肽生物活性更高,对提高缺氧耐受力以及防治心脑血管疾病的作用更强。
进一步地,本发明实施例提供的复方制剂中,所示复方制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。结肠部位的pH值呈弱碱性,蛋白水解酶的含量较低,通过对复方制剂制成pH依赖型结肠溶胶囊,更好地定位于结肠部位。
另一方面,本发明实施例还提供了一种上述复合制剂的制备方法,包括如下步骤:
S01:用蛋白酶水溶液酶解绿豆粉,得到含有所述绿豆多肽的绿豆粉酶解液;
S02:将所述绿豆粉酶解液浓缩处理得到第一浓缩液;
S03:分别将丹参、黄芪和红花粉碎后溶于水中加热浸泡提取,得到丹参提取液、黄芪提取液和红花提取液,然后合并浓缩得到第二浓缩液;
S04:将所述第一浓缩液和所述第二浓缩液与所述β-环糊精和硬脂酸镁混合后,制备成结肠溶制剂,得到所述复合制剂。
本发明实施例提供的复方制剂的制备方法工艺简单易行,成本低,该制备方法中先通过酶解工艺提取绿豆多肽,并浸泡提取各种中药提取物,然后将其与β-环糊精和硬脂酸镁混合后,利用剂型工艺制备成结肠溶制剂。最终得到的复方制剂通过绿豆多肽和丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物在该重量份的范围内的协同作用,对提高缺氧耐受力、改善缺氧状况以及防治心脑血管疾病具有很好的疗效。
进一步地,在上述步骤S01中,所述蛋白酶水溶液中的蛋白酶选自胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种,即用上述任一种酶对绿豆粉进行酶解,得到对应的绿豆多肽。而所述蛋白酶水溶液的加入重量为0.1%。
具体地,对于制备绿豆多肽,可以在绿豆粉中加入5倍重量的纯净水,然后加热至45℃,搅拌调节pH值为5.9-6.1,再加0.1%蛋白酶水溶液(即占绿豆粉重量的0.1%),酶解4h。如此,可以得到含有相对分子质量为158-970的绿豆多肽的绿豆粉酶解液。
上述绿豆多肽的提取,采用生物酶水解工艺,绿豆粉经酶解、精制、真空干燥而成的低分子多肽,其中总氮含量约12%,产品回收率可达33%,而绿豆多肽的回收率可达45%。
将所述绿豆粉酶解液浓缩处理得到第一浓缩液的相对密度为1.20-1.22(20℃时)。该相对密度的浓缩液,既能有效保证含有绿豆多肽的浓缩液不粘壁,又能保证其含水量足够低,以利于后续剂型的制备。本发明实施例中,相对密度即为相对水的密度。
进一步地,在上述步骤S03中,各中药提取物的的提取工艺包括:分别将将丹参、黄芪、红花各自加入10倍重量的纯化水,水煎2次,每次1.5h,得到丹参提取液、黄芪提取液和红花提取液;合并提取液,减压浓缩至相对密度1.20-1.22(20℃时)的第二浓缩液。该相对密度的浓缩液,既能有效保证含有中药提取物的浓缩液不粘壁,又能保证其含水量足够低,以利于后续剂型的制备。
本发明先后进行过多次试验,现举一部分试验结果作为参考对发明进行进一步详细描述,下面结合具体实施例进行详细说明。
实施例1
含有绿豆多肽、丹参提取物、黄芪提取物以及红花提取物的复方制剂的制备方法,步骤如下:
1.1原料前处理:
绿豆:除去沙石,杂物,常水洗净,蒸馏水冲洗,60℃以下恒温干燥,粉碎成绿豆粉。
1.2酶解:
绿豆多肽提取:
在绿豆粉中加入5倍重量的纯净水,加热至45℃,搅拌调节pH值至5.9-6.1,搅拌20min;加0.1%蛋白酶水溶液(蛋白酶:胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或木瓜蛋白酶)搅拌,搅拌速度为120r/min,酶解二次,每次4h;然后经SephadexG25(Fine)凝胶层析,如图1所示,得到单一的层析峰,其相对分子质量分布为158-970。
1.3浓缩:
将上述绿豆粉酶解液减压浓缩,浓缩至相对密度1.20-1.22。
1.4中药提取液
分别在丹参、黄芪、红花中分别加入10倍重量的纯化水,水煎2次,每次1.5h,得到丹参提取液、黄芪提取液和红花提取液;合并提取液,减压浓缩至相对密度1.20-1.22。
1.5制粒:
将上述两种浓缩液合并,且与β-环糊精、硬脂酸镁按配方比例(即绿豆多肽:丹参提取物:黄芪提取物:红花提取物:β-环糊精:硬脂酸镁=5:1:1:0.3:3:0.01)置于混合器内混匀,机械制粒,70℃恒温干燥。
1.6填充胶囊:
采用pH依赖型结肠溶胶囊壳,将上述制粒用填充机填装胶囊,每粒胶囊内容物450mg;如此可以控制绿豆多肽分子量及含量,分子量在1KDa以下,多肽含量至少10%以上。最终得到的复方制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。
实施例2
验证实施例1制备的复方制剂对SD大鼠心肌细胞的影响。
采用Harary法,在CO2温箱中对SD乳鼠心肌细胞进行离体培养48h,对心肌细胞分为6组,每组瓶,分为正常对照组、模型组:过氧化氢(H2O2)加入培养液中,100μmol/L:阳性对照组:将异搏定加入培养液中,40μmol/L:pH依赖型结肠溶胶囊实验组,分为低、中、高3个剂量组,分别为50、100、150mg/L加入培养中。通过培养心肌细胞,分离培养液,应用试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化歧化酶(SOD)活性和和丙二醛(MDA)的含量。
其中,乳酸脱氢酶(LDH)是体内能量代谢过程中的一个重要的酶;此酶几乎存在于所有组织中,以肝、肾、心肌、骨骼肌、胰腺和肺中为最多;LDH在心肌细胞中活性降低,有利于保护心脑血管。脂质氧化终产物丙二醛(MDA)在体外影响线粒体呼吸链复合物及线粒体内关键酶活性。MDA是膜脂过氧化最重要的产物之一,它的产生还能加剧膜的损伤细胞膜,可通过MDA了解膜脂过氧化的程度,以间接测定膜系统受损程度。MDA含量是观察心肌细胞膜损伤一个常用指标。超氧化物歧化酶(SOD)是一种源于生命体的活性物质,是机体内天然存在的超氧自由基清除因子,能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质,清除体内过剩氧自由基,预防自由基过剩引起的各种疾病,尤其是糖尿病与心血管方面的疾病。
最终,本实施例pH依赖型结肠溶胶囊对心肌细胞LDH、SOD、MDA的作用结果见表1。
表1
注:与对照组比较△P<0.05,△△P<0.01△△△P<0.001。
表1中的本实验结果证明:该pH依赖型结肠溶胶囊使大鼠心肌细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性降低,丙二醛(MDA)含量减少,有利于保护心脑血管。
实施例3
复方制剂对心肌细胞线粒体琥铂酸脱氢酶(SDH)和细胞色素C氧化酶(CCO)比活力的影响。
针对实施例2中各组,用Lowry法测定了心肌细胞线粒体中蛋白含量;具体过程为:通过消化分离心收集肌细胞,加入线粒体分离介质,超射波震荡,制备线粒体悬液,用琥铂酸脱氢酶(SDH)和还原型细胞色素C氧化酶(CCO)试剂盒测定线粒体中比活力。其中,琥铂酸脱氢酶(SDH)和细胞色素C氧化酶(CCO)是线粒体内膜呼吸的关键酶,其活性直接影响心肌细胞能量代谢过程而影响其功能,改善线粒体中SDH和CCO活性有助于线粒体的呼吸和能力代谢功能。上述两种酶的比活力测定结果见表2。
表2
注:与对照组比较△P<0.05,△△△P<0.001
通过表2的数据显示:模型组SDH和CCO比活力与对照组比较显著下降(P<0.001),实验高剂量组SDH和CCO比活力升高,与对照组物明显差异,说明该pH依赖型结肠溶胶囊使有效地维持心肌细胞中线粒体能量代谢功能,有助于改善心肌细胞的氧化应急状态,保护心肌细胞,提高缺氧耐受力、改善缺氧状况,防治心脑血管疾病。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种复合制剂,所述复合制剂为结肠溶制剂,其特征在于,所述复合制剂包括如下重量份的组分:
绿豆多肽:4-6份;
丹参提取物:0.5-1.5份;
黄芪提取物:0.5-1.5份;
红花提取物:0.2-0.4份;
β-环糊精:2-4份;
硬脂酸镁:0.005-0.015份。
2.如权利要求1所述的复合制剂,其特征在于,所述复合制剂包括:绿豆多肽:5份;丹参提取物:1份;黄芪提取物:1份;红花提取物:0.3份;β-环糊精:3份;硬脂酸镁:0.01份。
3.如权利要求1所述的复合制剂,其特征在于,所述绿豆多肽的相对分子质量为158-970。
4.如权利要求1-3任一项所述的复合制剂,其特征在于,所示复合制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。
5.一种如权利要求1-4任一项所述的复合制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
用蛋白酶水溶液酶解绿豆粉,得到含有所述绿豆多肽的绿豆粉酶解液;
将所述绿豆粉酶解液浓缩处理得到第一浓缩液;
分别将丹参、黄芪和红花粉碎后溶于水中加热浸泡提取,得到丹参提取液、黄芪提取液和红花提取液,然后合并浓缩得到第二浓缩液;
将所述第一浓缩液和所述第二浓缩液与所述β-环糊精和硬脂酸镁混合后,制备成结肠溶制剂,得到所述复合制剂。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶水溶液中的蛋白酶选自胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种。
7.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述蛋白酶水溶液的加入质量为0.1%。
8.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述第一浓缩液的相对密度为1.20-1.22。
9.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述第一浓缩液的相对密度为1.20-1.22。
10.如权利要求5-9任一项所述的制备方法,其特征在于,在pH值为5.9-6.1的条件下,用蛋白酶水溶液酶解绿豆粉。
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