CN108997351A - 含取代对氯苯乙酰基哌嗪类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

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CN108997351A CN201810790461.1A CN201810790461A CN108997351A CN 108997351 A CN108997351 A CN 108997351A CN 201810790461 A CN201810790461 A CN 201810790461A CN 108997351 A CN108997351 A CN 108997351A
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于升平
刘洋
王鲁华
郭凯文
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Abstract

本申请提供一种含取代对氯苯乙酰基哌嗪类化合物及其制备方法与应用，该类化合物具有式(I)所示结构：

Description

含取代对氯苯乙酰基哌嗪类化合物及其制备方法与应用
技术领域
本申请涉及有机化合物合成及医药应用领域，具体涉及一种含取代对氯苯乙酰基哌嗪类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
Akt研究的深入始于两个基因Akt1和Akt2的分离，它们是病毒致癌基因v-akt的人类同源基因，其编码的蛋白质与PKC和PKA高度同源，因此也称为PKB。(参见：Manning,B.D.；Toker,A.AKT/PKB Signaling:Navigating the Network.Cell2017,169,381-405.)Akt是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其与ATP结合的晶体结构早在2005年已经阐明。Akt属于AGC家族成员，含有480个氨基酸，存在三种亚型，即Akt1(PKBα)，Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)。(参见：Osaki,M.；Oshimura,M.；Ito,H.PI3K-Akt pathway:its functions andalterations in human cancer.Apoptosis2004,9,667-676.)三者具有相似的结构：一个N末端的普列克底物蛋白同源(pleckstrin homology，PH)域，一个位于中心的激酶催化域(CAT domain)，和一个C-末端的延长部分(EXT)，EXT含有一个调控的疏水基序(hydrophobic motif,HM)。这三种亚型，在PH域约80％同源，连接PH域和催化域的linker17约46％同源，催化域约90％同源，C-末端延长部分(EXT)约70％同源。(参见：Kumar,C.C.；Madison,V.AKT crystal structure and AKT-specific inhibitors.Oncogene 2005,24,7493-7501.)
PI3K/AKT/mTOR信号通路在细胞存活与生长中起着相当关键的作用，是肿瘤细胞抵御细胞死亡的重要通路之一。(参见：De,L.A.；Maiello,M.R.；D'Alessio,A.；Pergameno,M.；Normanno,N.The RAS/RAF/MEK/ERK and the PI3K/AKT signalling pathways:rolein cancer pathogenesis and implications for therapeutic approaches.ExpertOpin Ther Targets2012,16Suppl 2:S17.)Akt是细胞增殖、存活、凋亡和代谢调控中的关键节点，Akt被激活后，可磷酸化下游100多种底物来发挥其生物学功能，抑制Akt将有利于肿瘤的靶向治疗。(参见：Manning,B.D.；Cantley,L.C.AKT/PKB signaling:navigatingdownstream.Cell2007,129,1261.)目前以Akt为靶点的抗肿瘤药物研究已经成为研究的热点之一。
发明内容
本申请提供了一种含取代对氯苯乙酰基哌嗪类化合物及其制备方法和应用，该类化合物对Akt1激酶和MCL细胞株的生长具有抑制活性。
本申请是通过如下技术方案实现的：
首先，本申请提供了一种式(I)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐：
其中，X选自H、-CH-、-C-Br和卤素；Y选自H、-CH-、C1-C18的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br和卤素；Y选自H、-CH-和C1-C8的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、F、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；其中，所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；其中，所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C3的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自
进一步地，在式(I)中，当X与Y之间为双键，X为-C-Br，Y为-CH-时，R1不为
进一步地，在一个或多个实施方式中，X与Y之间的为双键，X选自-CH-和-C-Br；Y为-CH-；
进一步地，所述化合物具有如下所示的结构：
其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，R2选自
进一步地，R2选自
进一步地，R2为
进一步地，在一个或多个实施方式中，X与Y之间的为无键；X选自H和卤素；Y为C1-C18的直链或支链烷基；
进一步地，R1为
进一步地，所述化合物具有如下所示的结构：
其中，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C8的直链或支链烷基；
进一步地，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C5的直链或支链烷基；
进一步地，X为H、Cl或Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基；
进一步地，X为Cl或Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基
进一步地，X为H；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基；
进一步地，X为Cl；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基；
进一步地，X为Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基。
进一步地，所述化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐选自以下化合物：
叔丁基{2-[4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}氨基甲酸酯(II-1)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二甲氨基)乙酮(II-2)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二乙氨基)乙酮(II-3)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(吡咯-1-基)乙酮(II-4)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(3,5-二甲基哌啶-1-基)乙酮(II-5)；
1-[4-(5-溴-7H-[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-吗啉乙酮(II-6)；
叔丁基4-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基}-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸酯(II-7)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙酮(II-8)；
叔丁基{{1-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}哌啶-4-基}甲基}氨基甲酸酯(II-9)；
2-氨基-1-(4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-(4-氯苯)乙酮盐酸盐(II-10)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(哌嗪基)乙酮盐酸盐(II-11)；
2-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)乙酮盐酸盐(II-12)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-1)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-2)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-3)；
4-[6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-4)；
{4-[5-氯-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-5)；
{4-[5-氯-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-6)；
{4-[5-氯-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-7)；
{4-[6-(叔丁基氨基)-5-氯嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-8)；
{4-[5-溴-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-9)；
{4-[5-溴-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-10)；
{4-[5-溴-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-11)；
{4-[5-溴-6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-12)。
另一方面，本申请还提供了一种制备式(II)所示化合物或其可药用盐的方法，所述方法按如下所示反应路线(反应路线1)进行：
其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，R2选自
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述方法包括：
(1)以起始原料1在DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中与NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)反应得中间体2；
(2)中间体2、1-Boc-哌嗪和DIEA(N,N-二异丙基乙胺)在DMF中反应生成中间体3；
(3)中间体3在甲醇溶液中与氯化氢二氧六环溶液反应，脱掉Boc保护基，得中间体4；
(4)中间体4在EDCI(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、DIEA和DMF存在条件下，与中间体酸M反应后，得式(II)化合物；和/或，进一步地，用得到的式(II)化合物的甲醇溶液与氯化氢的二氧六环溶液反应，得新的式(II)化合物(该化合物不同于该步骤中参与反应的式(II)化合物)
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述方法包括：
(1)以起始原料1在DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中与NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)反应得中间体2；
(2)中间体2、1-Boc-哌嗪和DIEA(N,N-二异丙基乙胺)在DMF中反应生成中间体3；
(3)中间体3在甲醇溶液中与氯化氢二氧六环溶液反应，脱掉Boc保护基，得中间体4；
(4)中间体4在EDCI(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、DIEA和DMF存在条件下，与中间体酸M反应后，得式II-1～II-9化合物；
进一步地，将得到的化合物II-1、II-7、II-9的甲醇溶液分别与氯化氢的二氧六环溶液反应，得式II-10～II-12化合物。
进一步地，在一个或多个实施方式中，上述反应路线1中各步骤的试剂及条件为：
(a)NBS，DMF，r.t.(室温)；(b)1-Boc-哌嗪，DIEA，DMF，110℃；(c)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.；(d)中间体酸M，EDCI，HOBt，DIEA，DMF，r.t.；(l)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.。
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述中间体酸M具有如下所示的结构：
其中，R2选自
进一步地，在一个实施方式中，所述中间体M按如下方式得到：
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述中间体酸M按照如下反应路线制备得到：
其中，R2选自
进一步地，在一个或多个更为具体的实施方式中，所述制备式(II)化合物或其可药用盐的方法包括：
(1)将原料1溶于DMF中，加入NBS，室温搅拌12h，反应毕，将反应液倒入冰水中，过滤，滤饼用水洗涤，干燥，得中间体2；
(2)将中间体2、1-叔丁氧羰基哌嗪和DIEA溶于二氧六环中，80℃微波反应2h，减压蒸除溶剂，加入水，乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶柱层析，得粗品，用乙醇重结晶，得白色固体中间体3；
(3)将中间体3溶于4N氯化氢二氧六环溶液中，室温反应2h，反应毕，析出固体，过滤，得中间体4；
(4)将中间体M和DIEA溶于N,N-二甲基甲酰胺中，冰浴条件下，加入EDCI和HOBt，继续搅拌1h后，加入中间体4，加毕，室温搅拌过夜，反应完毕，将反应液倾入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，得式(II)化合物中的II-1～II-9；
进一步地，将式(II)化合物中的II-1、II-7、II-9溶于甲醇中，加入4N的氯化氢二氧六环溶液，室温搅拌48h,析出固体，过滤，得式(II)化合物中的II-10～II-12。
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述制备式(II)化合物或其可药用盐的方法按照如下所示的反应进行：
进一步地，在一个或多个实施方式中，上述反应路线中各步骤的试剂及条件为：
(a)NBS，DMF，r.t.(室温)；(b)1-Boc-哌嗪，DIEA，DMF，110℃；(c)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.；(m)(Boc)2O，NaOH(aq)，THF，r.t.；(n)甲醇，H2SO4，60℃；(o)NBS，AIBN，CCl4，76.8℃；(p)取代仲胺，DIEA，CH3CN，80℃；(q)乙醇，NaOH(aq，10M)，80℃；(d)EDCI，HOBt，DIEA，DMF，r.t.；(l)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.。
另一方面，本申请还提供了一种制备式(III)所示化合物或其可药用盐的方法，所述方法按如下所示反应路线(反应路线2)进行：
其中，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C8的直链或支链烷基；
进一步地，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C5的直链或支链烷基；
进一步地，X为H、Cl或Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基；
进一步地，所述方法包括：
(i)以起始原料5溶于异丙醇中，与取代胺反应得中间体6a-6d；
(ii)中间体6a-6d与1-Boc-哌嗪在二氧六环和K2CO3存在下反应生成中间体7a-7d；
(iii)中间体7a-7d在冰醋酸存在条件下，与NCS/NBS反应，得中间体7e-7l；
(iv)中间体7e-7l在甲醇溶液中，与氯化氢二氧六环溶液反应，脱掉Boc保护基，得中间体8a-8l；
(v)中间体8a-8l在EDCI、HOBt、DIEA和DMF存在下与中间体酸N反应后，得中间体9a-9l；
(vi)将中间体9a-9l的甲醇溶液，与氯化氢的二氧六环溶液反应，得式(III)化合物的盐酸盐；
进一步地，所述中间体酸N为
进一步地，在一个或多个更为具体的实施方式中，所述制备式(III)化合物或其可药用盐的方法包括：
(i)将起始原料5混悬于异丙醇中，冰浴条件下加入取代胺，加毕，室温反应2h，减压蒸除溶剂，残渣加乙酸乙酯溶解和水，水相用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅胶短柱柱层析，得中间体6a-6d；
(ii)将中间体6a-6d和1-叔丁氧羰基哌嗪溶于二氧六环中，加入无水碳酸钾，150℃微波反应1～2h，反应毕，过滤，滤饼甲醇洗涤，合并滤液，滤液减压蒸除溶剂，得棕色油状物，硅胶柱层析，得中间体7a-7d；
(iii)中间体7a-7d和NCS/NBS溶于冰醋酸中，室温反应2h，反应毕，减压蒸除冰醋酸，用2N氢氧化钠调节溶液pH大于7，用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，得中间体7e-7l；
(iv)将中间体7e-7l溶于甲醇中，加入4N氯化氢二氧六环溶液，室温搅拌，反应24h；反应毕，析出白色固体，过滤，滤饼少量甲醇洗涤，得中间体8a-8l；
(v)将二(2-氯乙基)胺盐酸盐原料15和10％氢氧化钠溶液混悬于二氯甲烷中，冰浴条件下滴加(Boc)2O，加毕，室温反应24h，反应毕，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，无色油状物，得中间体16；
(vi)将4-氯苯乙腈和中间体16溶于重蒸DMF中，冰浴条件下，缓慢加入40％氢化钠，加毕，室温反应30min，60℃反应18h，反应完毕，将反应液倾入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，白色固体，得中间体17；
(vii)将中间体17溶于乙醇中，加入10N氢氧化钠溶液，80℃回流反应48h，反应毕，减压蒸除乙醇，用1N盐酸溶液调pH小于3，过滤，得白色微黄固体，用乙酸乙酯/甲醇重结晶，白色固体，得中间体N；
(viii)将中间体酸N和DIEA溶于DMF中，冰浴条件下，加入EDCI、HOBt，搅拌1h，加入中间体8a-8l，室温搅拌12h，反应完毕，将反应液倾入冰水中，乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，得中间体9a-9l；
(ix)将中间体9a-9l溶于甲醇溶液中，加入4N的氯化氢二氧六环溶液，室温搅拌，反应24h，反应毕，析出固体，过滤，滤饼用甲醇重结晶，得式(III)化合物的盐酸盐。
进一步地，在一个或多个实施方式中，所述制备式(III)化合物或其可药用盐的方法按照如下所示的反应进行：
进一步地，在一个或多个实施方式中，上述反应路线中各步骤的试剂及条件为：
(e)YNH2，异丙醇，r.t.(室温)；(f)1-Boc-哌嗪，K2CO3，二氧六环，150℃；(g)NCS/NBS，AcOH；2N NaOH；(h)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.；(r)(Boc)2O，CH2Cl2，10％NaOH(aq)，r.t；(s)NaH，DMF，60℃；(t)乙醇，10N NaOH(aq)；(k)EDCI，HOBt，DIEA，DMF，r.t.；(j)氯化氢-二氧六环，甲醇，r.t.。
再一方面，本申请提供了一种药物组合物，其包含如上所述的式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐。
又一方面，本申请提供了如上所述的式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或包含所述式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐的药物组合物在制备Akt抑制剂中的应用。
又一方面，本申请提供了如上所述的式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或包含所述式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用；进一步地，所述肿瘤为套细胞淋巴瘤。
再一方面，本申请提供了一种联合用药组合，其包括如上所述的式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或包含所述式(I)或式(II)或式(III)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐的药物组合物与抗肿瘤药物在治疗肿瘤尤其套细胞淋巴瘤的联合应用。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本申请。应理解，这些实施例仅用于说明本申请而不用于限制本申请的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本申请方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例14-哌嗪-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶盐酸盐(中间体4)的制备
(1)5-溴-4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(中间体2)的制备
将4-氯吡咯并嘧啶(20mmol)溶于20ml DMF，加入NBS(21mmol)，室温搅拌12h，反应完毕后，将反应液倒入200ml冰水中，过滤，滤饼用水洗涤，干燥，得到中间体2。灰白色固体，收率为94.6％,Mp:290-292℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):13.00(s,1H),8.64(s,1H),7.97(s,1H).MS(ESI)m/z:232[M+H]+.
(2)4-(4-Boc-1-哌嗪)-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(中间体3)的制备
将中间体2(5mmol)，1-叔丁氧羰基哌嗪(6mmol)和DIEA(7.5mmol)溶于5ml二氧六环中，80℃微波反应2h，减压蒸除溶剂，加入20ml水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，依次用20ml水、饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶柱层析，得粗品，用乙醇重结晶，得中间体3。白色固体，收率为78.5％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):12.21(s,1H),8.37(s,1H),7.52(d,J＝2.6Hz,1H),3.52(s,8H),1.42(s,9H).MS(ESI)m/z:382[M+H]+.
(3)4-哌嗪-5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶盐酸盐(中间体4)的制备
将中间体3(3.5mmol)溶于4ml的4N氯化氢二氧六环溶液中，室温反应2h。反应完毕后，有固体析出，过滤，得到中间体4。白色固体，收率为99.2％。MS(ESI)m/z:282[M+H]+。
实施例2中间体M的制备
(1)2-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)乙酸(中间体M1)的制备
将2-氨基-2-(4-氯苯基)乙酸(5mmol)溶于四氢呋喃溶液中，滴加2N氢氧化钠溶液至pH大于8，匀速滴加(Boc)2O(7.5mmol)的四氢呋喃溶液(四氢呋喃/水＝2:1,v/v)。加毕，室温反应3h。反应完毕后，用1N盐酸溶液调节pH小于2，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，以20mL饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，得中间体M1，透明油状物，收率为71.3％。
(2)2-(4-氯苯基)乙酸甲酯(中间体12)的制备
将原料4-氯苯乙酸(中间体11，40mmol)溶于25ml甲醇，加入5滴浓硫酸，回流反应5h。减压蒸除溶剂，得油状物。加入25ml乙酸乙酯溶解，依次用25ml饱和碳酸氢钠溶液，水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，得中间体12，浅黄色油状物，收率为97.6％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(d,J＝8.4Hz,2H),3.70(d,2H),3.61(s,3H).MS(ESI)m/z:185[M+H]+。
(3)α-溴-4-氯苯乙酸甲酯(中间体13)的制备
将中间体(12，27.95mmol)溶于20ml CCl4中，3h内分三次加入N-溴代丁二酰亚胺(27.95mmol)及偶氮二异丁腈(AIBN,27.95mmol)，回流反应2h，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝100/1，得中间体13，浅黄色油状物，收率为94.3％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.49(d,J＝8.4Hz,2H),6.00(s,1H),3.73(s,3H).MS(ESI)m/z:263[M+H]+.
(4)α-取代-4-氯苯乙酸甲酯(中间体14)的合成通法
将中间体13(2mmol)溶于5ml乙腈，加入取代仲胺(2.2mmol)和DIEA(3mmol)，回流反应4h。反应毕，减压蒸除溶剂，加入20ml水，用20ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，20ml水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝30:1-15:1-8:1-4:1-1:1，得中间体14。
中间体14a：甲基2-(4-氯苯基)-2-(二甲氨基)乙酸，黄色油状物，收率为61.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.39(d,J＝8.8Hz,2H),7.33(d,J＝8.8Hz,2H),3.86(s,1H),3.70(s,3H),2.24(s,6H).MS(ESI)m/z:228[M+H]+.
中间体14b：甲基2-(4-氯苯基)-2-(二乙胺基)乙酸，黄色油状物，收率为70.2％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.31(d,J＝8.8Hz,2H),3.94(s,1H),3.68(s,3H),2.36(q,4H),1.60(t,6H).MS(ESI)m/z:256[M+H]+.
中间体14c：甲基2-(4-氯苯基)-2-(吡咯-1-基)乙酸，无色油状物，收率为90％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.43(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),3.90(s,1H),3.68(s,3H),2.55-2.43(m,4H),1.82-1.81(m,4H).MS(ESI)m/z:254[M+H]+.
中间体14d：甲基2-(4-氯苯基)-2-(3,5-二甲基哌啶-1-基)乙酸，无色油状物，收率为65.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.31-7.26(m,4H),4.45(s,1H),3.69(s,3H),2.73-2.67(m,2H),2.70-1.84(m,6H),1.07(t,J＝6.0Hz,6H).MS(ESI)m/z:296[M+H]+.
中间体14e：甲基2-(4-氯苯基)-2-吗啉乙酸，无色透明油状物，收率为71.4％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.45(d,J＝9.2Hz,2H),7.43(d,J＝9.2Hz,2H),4.16(s,1H),3.61(s,3H),3.57(d,J＝4.4Hz,4H),2.35(d,J＝4.4Hz,4H).MS(ESI)m/z:270[M+H]+.
中间体14f：叔丁基4-(1-(4-氯苯基)-2-甲氧基-2-乙氧基)哌嗪-1-羧酸酯，无色透明油状物，收率为100％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.38(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),3.99(s,1H),3.69(s,3H),3.44(s,4H),2.39(s,4H),1.44(s,9H).MS(ESI)m/z:369[M+H]+.
中间体14g：甲基2-(4-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙酸，棕色油状物，收率为66.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.39(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),3.96(s,1H),3.68(s,3H),2.63-2.40(m,8H),2.31(s,3H).MS(ESI)m/z:283[M+H]+.
中间体14h：甲基2-[4-(叔丁氧羰基氨基)哌啶-1-基]-2-(4-氯苯基)乙酸，白色固体，收率为70.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.37(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),4.43(br,1H),3.96(s,1H),3.68(s,3H),3.49(br,1H),2.86(br,1H),2.67(br,1H),2.24(t,J＝10.8Hz,1H),2.01-1.84(m,3H),1.45-1.43(s,10H).MS(ESI)m/z:383[M+H]+.
(5)α-取代-4-氯苯乙酸(中间体M2-M9)的合成通法
将中间体14(1mmol)混悬于3ml乙醇/水(2/1,V/V)中，加1N氢氧化钠溶液2ml，室温搅拌4h。反应毕，减压蒸除乙醇，用1N盐酸溶液调节pH约为6，析出固体，过滤，滤饼用水洗涤，得中间体M2-M9。
或：用1N盐酸溶液调节pH约为6未析出固体时，蒸除乙醇，用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷，减压蒸除溶剂，得中间体M2-M9。
中间体M2：2-(4-氯苯基)-2-(二甲基氨基)乙酸，白色固体，收率为81.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):7.41(d,J＝7.2Hz,2H),7.16(d,J＝7.2Hz,2H),4.77(s,1H),2.84(s,6H).MS(ESI)m/z:212[M-H]-.
中间体M3：2-(4-氯苯基)-2-(二乙氨基)乙酸，白色固体，收率为20％。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.64–7.54(m,2H),7.48–7.41(m,2H),4.56(s,1H),3.21(td,J＝13.3,6.4Hz,2H),3.05(s,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,6H).MS(ESI)m/z:240[M-H]-.
中间体M4：2-(4-氯苯基)-2-(吡咯-1-基)乙酸，白色固体，收率为86.9％。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm):7.56(d,J＝8.8Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),4.51(s,1H),3.31-3.29(m,4H),2.11-1.99(m,4H).MS(ESI)m/z:238[M-H]-.
中间体M5：2-(4-氯苯基)-2-(3,5-二甲基哌啶-1-基)乙酸，白色固体，收率为58.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.43(d,J＝8.8Hz,2H),7.35(d,J＝8.8Hz,2H),3.81(s,1H),3.09-3.07(m,1H),2.56-2.54(m,1H),1.70-1.63(m,4H),1.51(t,J＝10.8Hz,1H),0.80(d,J＝5.2Hz,3H),0.70(d,J＝8.4Hz,3H),0.54-0.45(m,1H).MS(ESI)m/z:280[M-H]-.
中间体M6：2-(4-氯苯基)-2-吗啉乙酸，白色固体，收率为83.9％。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm):7.55(d,J＝8.4Hz,2H),7.45(d,J＝8.8Hz,2H),4.41(s,1H),3.88-3.81(m,3H),3.30-3.22(m,3H),2.88-2.85(m,2H).MS(ESI)m/z:254[M-H]-.
中间体M7：2-(4-叔丁氧羰基哌嗪基)-2-(4-氯苯基)乙酸，白色固体，收率为43.4％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.45(d,J＝8.8Hz,2H),7.42(d,J＝8.8Hz,2H),4.05(s,1H),3.30-3.24(m,4H),2.37-2.29(m,4H),1.37(s,9H).MS(ESI)m/z:353[M-H]-.
中间体M8：2-(4-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙酸，白色微黄固体，收率为93.9％。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ(ppm):7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝8.4Hz,2H),3.88(s,1H),3.31-3.30(m,3H),3.14(s,3H),2.74(s,3H),2.65(br,2H).MS(ESI)m/z:267[M-H]-.
中间体M9：2-[4-(叔丁氧羰基氨基)哌啶-1-基]-2-(4-氯苯基)乙酸，白色固体，收率为59.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.42(s,4H),6.84(d,J＝7.2Hz,1H),4.04(s,1H),3.26(s,1H),3.05(d,J＝11.2Hz,1H),2.64(d,J＝11.6Hz,1H),2.36(t,J＝10.8Hz,1H),2.23(t,J＝10.8Hz,1H),1.75(d,J＝6.0Hz,1H),1.68(d,J＝12.4Hz,1H),1.50(t,J＝12.0Hz,2H),1.36(s,9H).MS(ESI)m/z:367[M-H]-.
实施例3目标化合物II-1～II-12的制备
(1)目标化合物II-1～II-9的制备
将中间体酸M(0.4mmol)和DIEA(2mmol)溶于2ml DMF中，冰浴条件下，加入EDCI(0.48mmol)和HOBt(0.48mmol)，继续搅拌1h后，加入中间体4(0.4mmol)。加毕，室温搅拌过夜。反应完毕，将反应液倾入20ml冰水中，20ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用20ml水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为乙酸乙酯/甲醇＝100:1～60:1或二氯甲烷/甲醇＝50:1～30:1，得目标产物II-1～II-9。
II-1：叔丁基{2-[4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}氨基甲酸酯，棕色固体，产率43.8％，Mp:128～131℃。1H NMR(400MHz,MeOD)δ(ppm):8.24(s,1H),7.39(s,4H),7.34(s,1H),5.67(s,1H),3.95–3.84(m,1H),3.84–3.72(m,2H),3.72–3.64(m,1H),3.64–3.53(m,2H),3.53–3.42(m,1H),3.31(dt,J＝3.2,1.6Hz,3H),3.21–3.10(m,1H),1.43(s,9H).13C NMR(100MHz,CD3OD)δ(ppm):169.20,159.69,155.87,151.33,150.39,136.03,133.96,129.35,128.79,123.95,105.14,86.58,79.51,54.66,49.76,49.50,45.14,42.12,27.28.
II-2：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二甲氨基)乙酮，浅棕色固体，产率74.4％，Mp:103～105℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):12.06(s,1H),8.37(s,1H),7.40(d,J＝8.5Hz,2H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),7.29(s,1H),4.26(s,1H),3.95-3.91(m,1H),3.88–3.62(m,4H),3.59-3.50(m,2H),3.33–3.19(m,1H),2.32(s,6H),1.26(t,J＝7.1Hz,1H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ(ppm):169.27,159.67,151.95,150.63,134.55,134.21,130.33,129.00,123.49,105.36,87.34,71.55,50.38,49.59,45.29,43.39,42.12.
II-3：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二乙氨基)乙酮，浅棕色固体，产率62.3％，Mp:83～87℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.78(s,1H),8.41(s,1H),7.39(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(d,J＝8.4Hz,2H),4.84(s,1H),3.94–3.81(m,3H),3.71–3.55(m,4H),3.49–3.40(m,1H),2.81(dd,J＝13.2,6.8Hz,2H),2.63(dd,J＝13.1,6.7Hz,2H),1.28(s,2H),1.03(t,J＝7.0Hz,6H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ170.11(s),159.73(s),151.91(s),150.50(s),135.28(s),133.74(s),130.66(s),128.68(s,2C),123.50(s,2C),105.38(s),87.34(s),65.77(s),50.45(s),49.75(s),45.30(s),44.33(s,C),41.90(s),29.71(s),13.04(s,2C).
II-4：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(吡咯-1-基)乙酮，棕色固体，产率64.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):11.87(s,1H),8.36(s,1H),7.38(dd,J＝42.1,7.4Hz,4H),4.37(s,1H),3.71(dd,J＝98.1,45.4Hz,7H),3.26(s,1H),2.61(d,J＝26.6Hz,4H),1.81(s,4H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):168.76(s),159.55(s),152.09(s),151.09(s),132.91(s),130.84(s),128.90(s,2C),124.84(s,2C),104.96(s),86.24(s),67.78(s),51.74(s),50.30(s,2C),45.24(s,2C),42.02(s,2C),23.44(s,2C),14.55(s).
II-5：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(3,5-二甲基哌啶-1-基)乙酮，棕色固体，产率51.0％，Mp:114～117℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):11.85(s,1H),8.38(s,1H),7.38(d,J＝8.5Hz,2H),7.33(d,J＝8.5Hz,2H),4.39(s,1H),3.95–3.71(m,4H),3.70-3.47(m,3H),3.47-3.33(m,1H),2.85(t,J＝8.3Hz,2H),1.83-1.62(m,4H),1.54-1.43(m,1H),1.25(s,2H),0.83-0.78(m,6H),0.55-0.47(m,1H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ(ppm):169.38,159.70,151.92,150.65,133.82,130.54,128.72,123.23,105.30,87.52,71.53,59.43,58.51,50.39,49.70,45.26,42.10,31.94,31.34,31.15,29.71,29.38,22.71,19.61,14.15.
II-6：1-[4-(5-溴-7H-[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-吗啉乙酮，浅棕色固体，产率70.0％，Mp:110～114℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):11.91(s,1H),8.38(s,1H),7.40(d,J＝8.5Hz,2H),7.35(d,J＝8.5Hz,2H),7.28(s,1H),4.00–3.62(m,10H),3.56(dd,J＝16.1,11.5Hz,2H),3.30(dd,J＝10.0,7.3Hz,1H),2.55(s,4H).13C NMR(100MHz,CDCl3)δ(ppm):168.65,159.67,151.92,150.64,134.38,133.47,130.45,129.06,123.33,105.36,87.45,71.15,66.89,60.43,51.75,50.38,49.58,45.30,42.15.
II-7：叔丁基4-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基}-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸酯，浅棕色固体，产率76.2％，Mp:131～135℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):12.02(s,1H),8.30(s,1H),7.40–7.23(m,4H),7.20(s,1H),4.30(s,1H),3.93–3.14(m,12H),2.58–2.28(m,4H),1.36(s,10H).
II-8：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙酮，浅棕色固体，产率51.6％，Mp:85～87℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.37(s,1H),7.39(d,J＝8.5Hz,2H),7.33(d,J＝8.5Hz,2H),7.26(s,1H),4.31(s,1H),3.95–3.46(m,8H),3.32(dd,J＝10.0,7.2Hz,1H),2.54(d,J＝26.6Hz,7H),2.28(s,3H).13CNMR(100MHz,CDCl3)δ(ppm):168.87,159.67,151.96,150.68,134.12,133.92,130.37,128.91,123.42,105.37,87.31,71.28,54.95,51.17,50.38,49.63,46.08,45.87,45.26,42.19,10.76.
II-9：叔丁基{{1-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}哌啶-4-基}甲基}氨基甲酸酯，浅棕色固体，产率54.5％，Mp:140～143℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):11.63(s,1H),8.36(s,1H),7.37(d,J＝8.5Hz,2H),7.33(d,J＝8.5Hz,2H),4.42(d,J＝52.5Hz,2H),3.93–3.40(m,9H),3.32(s,1H),3.00–2.75(m,2H),2.32(s,1H),2.19–1.99(m,2H),1.91(t,J＝14.5Hz,2H),1.58–1.35(m,12H).
(2)目标化合物II-10～II-12的制备
将目标产物II-1、II-7、II-9混悬于2ml甲醇溶液中，加入4N饱和氯化氢的二氧六环溶液，室温反应48h后，析出白色固体，过滤，得目标产物II-10～II-12。
II-10：2-氨基-1-(4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-(4-氯苯)乙酮盐酸盐，白色固体，产率72.5％，Mp:264～266℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.08(s,1H),7.39(d,J＝8.6Hz,2H),7.35(d,J＝8.7Hz,2H),7.32(s,1H),5.50(s,1H),3.99–3.88(m,1H),3.86–3.73(m,1H),3.71–3.47(m,5H),3.46–3.34(m,1H),3.02–2.90(m,1H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):166.38,154.28,146.67,143.18,136.26,130.14,129.94,129.51,126.60,103.01,88.85,66.52,54.53,49.63,48.75,44.33,41.97.
II-11：1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(哌嗪基)乙酮盐酸盐，白色固体，产率98.9％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.10(s,1H),7.43(s,5H),7.35(s,1H),5.54(s,1H),4.05–3.94(m,1H),3.83(qd,J＝12.9,4.5Hz,2H),3.76–3.68(m,1H),3.67–3.30(m,15H),3.29–3.16(m,3H),2.93–2.82(m,1H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):164.96,154.30,146.52,143.05,137.33,131.14,130.53,126.65,125.98,103.02,88.91,69.29,49.61,48.51,48.08,44.45,42.06,40.80.
II-12：2-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)乙酮盐酸盐，白色固体，产率99.2％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.11(s,1H),7.45(s,5H),7.37(s,1H),5.52(s,1H),4.09–3.96(m,1H),3.97–3.28(m,14H),3.26–2.81(m,6H),2.27-2.21(m,3H),2.05–1.76(m,3H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):164.76,154.54,151.00,146.71,143.36,137.35,130.49,130.42,126.57,125.95,103.14,88.81,66.52,62.47,49.57,49.02,48.49,45.23,44.46,44.28,42.10.
实施例4中间体8的制备
(1)4-氯-6-取代氨基嘧啶(中间体6)的制备
将4,6-二氯嘧啶(5，30mmol)混悬于20ml异丙醇中。冰浴条件下加入取代胺(75mmol)。加毕，室温反应2h。减压蒸除溶剂，残渣加20ml乙酸乙酯溶解和20ml水。水相用20ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，20ml饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅胶短柱柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝5/1，得中间体6。
中间体6a：4-氯-6-甲氨基嘧啶，白色固体，收率为88.0％，Mp:138～140℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.28(s,1H),7.68(s,1H),6.50(s,1H),2.82(s,3H).MS(ESI)m/z:144[M-H]-.
中间体6b：4-氯-6-乙氨基嘧啶，白色固体，收率为81.4％，Mp:116～118℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.25(s,1H),7.71(s,1H),6.47(s,1H),3.14(s,2H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z:158[M+H]+.
中间体6c：4-氯-6-异丙氨基嘧啶，白色固体，收率为53.4％,Mp:78～80℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.25(s,1H),7.61(s,1H),6.45(s,1H),4.10(s,1H),1.14(d,J＝9.6Hz,6H).MS(ESI)m/z:172[M+H]+.
中间体6d：4-氯-6-叔丁氨基嘧啶，白色固体，收率为44.9％，Mp:126～128℃。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.26(s,1H),7.41(s,1H),6.53(s,1H),1.38(s,9H).MS(ESI)m/z:186[M+H]+.
(2)4-[4-(6-取代氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体7a-7d)的制备
将中间体6(15mmol)和1-叔丁氧羰基哌嗪(22.5mmol)溶于3ml二氧六环中，加入无水碳酸钾(4.15g,30mmol)，150℃微波反应1～2h，反应毕，过滤，滤饼甲醇洗涤，合并滤液，滤液减压蒸除溶剂，得棕色油状物，硅胶柱层析，洗脱系统为二氯甲烷/甲醇＝10/1，得中间体7a-7d。
中间体7a：4-[4-(6-甲氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色微黄固体，收率56.8％,Mp:191～192℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.98(s,1H),6.68(s,1H),5.54(s,1H),3.46-3.45(m,4H),3.38-3.36(m,4H),2.72(d,J＝4.8Hz,3H),1.41(s,9H).MS(ESI)m/z:294[M+H]+.
中间体7b：4-[4-(6-乙氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为60.5％。Mp:182～185℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.00(s,1H),6.70(s,1H),5.58(s,1H),3.42-3.35(m,4H),3.21-3.14(m,4H),3.22-3.19(m,2H),1.32(s,9H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z:308[M+H]+.
中间体7c：4-[4-(6-异丙基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色微黄固体，收率为73.6％，Mp:180～182℃。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.14(s,1H),5.37(s,1H),4.73(d,J＝7.6Hz,1H),3.84-3.76(m,1H),3.54-3.52(m,8H),1.48(s,9H),1.23(d,J＝6.4Hz,6H).MS(ESI)m/z:322[M+H]+.
中间体7d：4-[4-(6-叔丁基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，类白色固体，收率为80％,Mp:171～176℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):8.02(s,1H),6.41(s,1H),5.66(s,1H),3.32(s,3H),2.51-2.49(m,5H),1.41(s,9H),1.35(s,9H).MS(ESI)m/z:336[M+H]+.
(3)4-[4-(5-卤代-6-取代氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体7e-7l)的制备
中间体7a-7d(0.4mmol)和NCS/NBS,(0.48mmol)溶于3ml冰醋酸中，室温反应2h。反应毕，减压蒸除冰醋酸，用2N氢氧化钠调节溶液pH大于7，用30ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用30ml水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚/乙酸乙酯＝3/1～5/1～10/1，二氯甲烷/甲醇＝3/1～30/1，得中间体7e-7i。中间体7e-7i未经结构确证直接投入下一步反应。
中间体7e：4-[4-(5-氯-6-甲氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为71.7％；
中间体7f：4-[4-(5-氯-6-乙氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为82.3％；
中间体7g：4-[4-(5-氯-6-异丙基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色微黄固体，收率为66.0％；
中间体7h：4-[4-(5-氯-6-叔丁基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为89.2％；
中间体7i：4-[4-(5-溴-6-甲氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为71.7％；
中间体7j：4-[4-(5-溴-6-乙氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为88.1％；
中间体7k：4-[4-(5-溴-6-异丙基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色微黄固体，收率为85.0％；
中间体7l：4-[4-(5-溴-6-叔丁基氨基)嘧啶基]-哌嗪-1-羧酸叔丁酯，白色固体，收率为53.7％。
(4)4-取代嘧啶基哌嗪盐酸盐(中间体8)的制备
将中间体7(1mmol)溶于1ml甲醇中，加入4N氯化氢二氧六环溶液4ml，室温搅拌，反应24h。反应毕，析出白色固体，过滤，滤饼少量甲醇洗涤，得中间体8。
中间体8a：4-(6-甲氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为87.8％,Mp:270～273℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.10(s,1H),6.73(s,1H),3.93(t,J＝4.8Hz,4H),3.31(t,J＝4.8Hz,4H),2.83(s,3H).MS(ESI)m/z:194[M+H]+.
中间体8b：4-(6-乙氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为96.4％，Mp:292～296℃，收率67.6％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.08(s,1H),5.72(s,1H),3.91(t,J＝4.8Hz,4H),3.29(t,J＝4.8Hz,4H),3.25(q,J＝7.2Hz,2H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z:208[M+H]+.
中间体8c：4-(6-异丙基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，浅棕色固体，收率为93.6％,Mp:260～265℃,收率66.4％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.07(s,1H),5.71(s,1H),3.89(t,J＝4.8Hz,4H),3.77(m,J＝6.4Hz,1H),3.29(t,J＝4.8Hz,4H),1.16(t,J＝6.4Hz,6H).MS(ESI)m/z:222[M+H]+.
中间体8d：4-(6-叔丁基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色微黄固体，收率为94.8％,Mp:305～310℃,收率81.8％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.08(s,1H),5.73(s,1H),3.90(t,J＝5.2Hz,4H),3.30(t,J＝5.2Hz,4H),1.33(s,9H).MS(ESI)m/z:236[M+H]+.
中间体8e：4-(5-氯-6-甲氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为99.0％，Mp:235～239℃,收率71.9％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.14(s,1H),3.88(t,J＝4.8Hz,4H),3.33(t,J＝4.8Hz,4H),2.96(s,3H).MS(ESI)m/z:228[M+H]+.
中间体8f：4-(5-氯-6-乙氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为84.1％,Mp:223～226℃,收率87.9％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.12(s,1H),3.86(t,J＝4.8Hz,4H),3.43(q,J＝7.2Hz,2H),3.33(t,J＝4.8Hz,4H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z:242[M+H]+.
中间体8g：4-(5-氯-6-异丙基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为94.6％,Mp:196～199℃,收率69.2％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.10(s,1H),4.04(m,J＝6.4Hz,1H),3.82(t,J＝4.8Hz,4H),3.33(t,J＝4.8Hz,4H),1.19(t,J＝6.4Hz,6H).MS(ESI)m/z:256[M+H]+.
中间体8h：4-(5-氯-6-叔丁基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率95.8％,Mp:230～233℃,收率59.5％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.08(s,1H),3.66(t,J＝4.8Hz,4H),3.30(t,J＝5.2Hz,4H),1.35(s,9H).MS(ESI)m/z:270[M+H]+.
中间体8i：4-(5-溴-6-甲氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为91％，Mp:255～260℃,收率81.2％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.13(s,1H),3.85(t,J＝5.2Hz,4H),3.33(t,J＝5.2Hz,4H),2.95(s,3H).MS(ESI)m/z:272[M+H]+.
中间体8j：4-(5-溴-6-乙氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色固体，收率为61.5％，Mp:295～300℃，收率51.6％,1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.12(s,1H),3.86(t,J＝5.2Hz,4H),3.43(q,J＝7.2Hz,2H),3.33(t,J＝5.2Hz,4H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI)m/z:286[M+H]+.
中间体8k：4-(5-溴-6-异丙基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，白色微黄固体，收率为84.2％，Mp:255～260℃,收率78.8％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.13(s,1H),4.04(m,J＝6.4Hz,1H),3.88(t,J＝4.8Hz,4H),3.34(t,J＝4.8Hz,4H),1.21(t,J＝6.4Hz,6H).MS(ESI)m/z:300[M+H]+.
中间体8l：4-(5-溴-6-叔丁基氨基)嘧啶基哌嗪盐酸盐，浅黄色固体，收率97.3％，Mp:185～188℃,收率78.7％。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.15(s,1H),3.74(t,J＝4.8Hz,4H),3.35(t,J＝5.2Hz,4H),1.40(s,9H).MS(ESI)m/z:314[M+H]+.
实施例5中间体N的制备
(1)叔丁基二(2-氯乙基)氨基甲酸酯(中间体16)的制备
将二(2-氯乙基)胺盐酸盐(15，73.5mmol)和10％氢氧化钠溶液(161.7mmol)混悬于二氯甲烷中。冰浴条件下滴加(Boc)2O(66.8mmol)。加毕，室温反应24h。反应毕，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝20/1，得无色油状物中间体16，收率为96.4％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):3.71-3.66(m,4H),3.54(t,J＝6.4Hz,4H),1.40(s,9H).MS(ESI)m/z:242[M+H]+.
(2)叔丁基4-(4-氯苯基)-4-氰基哌啶-1-羧酸酯(中间体17)的制备
将4-氯苯乙腈(10mmol)和中间体16(11mmol)溶于5ml重蒸DMF中，冰浴条件下，缓慢加入40％氢化钠(30mmol)，1h，加毕，室温反应30min，60℃反应18h。反应完毕，将反应液倾入50ml冰水中，50ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用50ml水和饱和氯化钠溶液洗涤三次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝15:1，得白色固体中间体17，收率66.7％，Mp:102～105℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):7.59(d,J＝8.8Hz,2H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),4.14-4.11(d,J＝12.4Hz,2H),3.01(s,2H),2.13(d,J＝12.4Hz,2H),1.95(td,J1＝12.8Hz,J2＝4.0Hz,2H),1.42(s,9H).MS(ESI)m/z:321[M+H]+.
(3)1-(羰基叔丁氧羰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(中间体N)的制备
将中间体17(7.5mmol)溶于20ml乙醇中，加入10N氢氧化钠溶液(225mmol)，80℃回流反应48h。反应毕，减压蒸除乙醇，用1N盐酸溶液调pH小于3，过滤，得白色微黄固体，用乙酸乙酯/甲醇重结晶，得白色固体中间体N，收率为74.5％，Mp:173～176℃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ(ppm):12.66(s,1H),7.41(s,4H),3.79(d,J＝13.6Hz,2H),2.96(s,2H),2.35(d,J＝13.2Hz,2H),1.74-1.66(m,2H),1.39(s,9H).MS(ESI)m/z:338[M-H]-.
实施例6目标化合物III-1～III-12的制备
(1)叔丁基4-{4-[5-卤代-6-(取代氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯(中间体9)的合成通法
将中间体酸N(0.5mmol)和DIEA(2.5mmol)溶于2ml DMF中，冰浴条件下，加入EDCI(0.6mmol)，HOBt(0.6mmol)，搅拌1h，加入中间体8a-l(0.5mmol)，室温搅拌12h。反应完毕，将反应液倾入20ml冰水中，20ml乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯，依次用20ml水和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯＝8:1～2:1，得中间体9。
中间体9a：叔丁基4-(4-氯苯基)-4-{4-[6-(甲氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}哌啶-1-羧酸酯，白色固体，收率72.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.05(s,1H),7.37–7.32(m,2H),7.24–7.18(m,2H),5.66(br,1H),5.26(s,1H),3.99(d,J＝52.5Hz,2H),3.21(d,J＝75.1Hz,10H),2.86(d,J＝5.0Hz,3H),2.27(d,J＝13.0Hz,2H),1.87(d,J＝80.2Hz,2H),1.45(s,8H),1.45(s,1H).
中间体9b：叔丁基4-(4-氯苯基)-4-{4-[6-(乙胺基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}哌啶-1-羧酸酯，微粉红色固体，收率为67.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.06(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.21(d,J＝8.6Hz,2H),5.30(s,1H),5.27(s,1H),3.99(d,J＝55.4Hz,3H),3.48–3.04(m,10H),2.27(d,J＝13.1Hz,2H),1.86(d,J＝85.3Hz,2H),1.45(s,9H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H).
中间体9c：叔丁基4-(4-氯苯基)-4-{4-[6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}哌啶-1-羧酸酯，浅棕色固体，收率为66.4％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.08(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.27(s,1H),4.63(d,J＝6.8Hz,1H),3.99(d,J＝56.6Hz,2H),3.77(dt,J＝12.6,6.6Hz,1H),3.20(d,J＝66.2Hz,8H),2.27(d,J＝13.0Hz,2H),1.86(d,J＝88.5Hz,4H),1.45(s,9H),1.21(d,J＝6.4Hz,6H).
中间体9d：叔丁基4-{4-[6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色微黄固体，收率为81.8％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),7.44(d,J＝8.5Hz,2H),7.30(d,J＝8.5Hz,2H),6.37(s,1H),5.55(s,1H),3.81(d,J＝12.2Hz,2H),3.08(s,8H),2.21(d,J＝13.3Hz,2H),1.83–1.72(m,2H),1.39(s,9H),1.33(s,9H).
中间体9e：叔丁基4-{4-[5-氯-6-(甲氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色固体，71.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.18(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.7Hz,2H),5.34(s,1H),5.30(s,1H),3.99(d,J＝58.1Hz,2H),3.27(s,8H),3.05(d,J＝4.8Hz,3H),2.27(d,J＝13.0Hz,2H),1.85(d,J＝81.1Hz,3H),1.45(s,9H).
中间体9f：叔丁基4-{4-[5-氯-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色固体，收率为87.9％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.15(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.24(s,1H),3.97(d,J＝52.5Hz,2H),3.54–3.46(m,2H),3.22(d,J＝53.9Hz,8H),2.27(d,J＝13.1Hz,2H),1.86(d,J＝83.5Hz,2H),1.57(s,2H),1.41(s,9H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H).
中间体9g：叔丁基4-{4-[5-氯-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，微黄色固体，收率为68.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.14(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.06(d,J＝7.7Hz,1H),4.32–4.21(m,1H),3.99(d,J＝65.1Hz,3H),3.21(d,J＝60.0Hz,8H),2.26(d,J＝13.1Hz,2H),1.85(d,J＝87.5Hz,3H),1.45(s,9H),1.24(d,J＝6.5Hz,6H).
中间体9h：叔丁基4-{4-[6-(叔丁基氨基)-5-氯嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，微黄色固体，收率为59.5％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.13(s,1H),7.33(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.25(s,1H),3.98(d,J＝62.5Hz,2H),3.20(d,J＝67.3Hz,8H),2.26(d,J＝12.8Hz,2H),1.85(d,J＝86.7Hz,4H),1.47(d,J＝7.1Hz,9H),1.45(s,9H).
中间体9i：叔丁基4-{4-[5-溴-6-(甲氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色固体，收率48.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.20(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.42(s,1H),3.98(d,J＝54.4Hz,3H),3.27(s,8H),3.09(d,J＝4.5Hz,3H),2.27(d,J＝13.5Hz,2H),1.85(d,J＝78.3Hz,3H),1.45(s,9H).
中间体9j：叔丁基4-{4-[5-溴-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色固体，收率为51.6％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.15(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.7Hz,2H),5.25(s,1H),3.98(d,J＝57.5Hz,3H),3.50(dt,J＝12.8,6.5Hz,2H),3.21(d,J＝74.9Hz,8H),2.27(d,J＝13.0Hz,2H),1.84(d,J＝89.7Hz,3H),1.45(s,9H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H).
中间体9k：叔丁基4-(4-(5-溴-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基)哌嗪-1-羰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，白色微黄固体，收率为78.8％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.14(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.7Hz,2H),5.06(d,J＝7.7Hz,1H),4.31–4.20(m,1H),3.99(d,J＝62.9Hz,2H),3.20(d,J＝64.0Hz,10H),2.27(d,J＝13.0Hz,2H),1.85(d,J＝78.8Hz,2H),1.45(s,9H),1.24(d,J＝6.5Hz,6H).
中间体9l：叔丁基4-{4-[5-溴-6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪-1-羰基}-4-(4-氯苯基)哌啶-1-羧酸酯，浅黄色固体，收率为78.7％。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm):8.12(s,1H),7.33(d,J＝8.6Hz,2H),7.20(d,J＝8.6Hz,2H),5.21(s,1H),3.99(d,J＝59.2Hz,2H),3.22(d,J＝66.9Hz,8H),2.26(d,J＝13.1Hz,2H),2.04–1.57(m,4H),1.46(s,9H),1.45(s,9H).
(2)目标化合物III-1～III-12的制备
将中间体9a-9l(1mmol)溶于1mL甲醇溶液中，加入4N的氯化氢二氧六环溶液4ml，室温搅拌，反应24h。反应毕，析出固体，过滤，滤饼用甲醇重结晶，得目标产物III。
III-1：[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐，白色固体，产率：72.2％，Mp:220～223℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.93(s,1H),7.31(d,J＝8.6Hz,2H),7.19(d,J＝8.7Hz,2H),5.35(s,1H),3.68–3.53(m,4H),3.51(s,2H),3.34-3.32(m,2H),3.25(br,2H),3.17(t,J＝12.0Hz,2H),3.02(br,2H),2.73(s,3H),2.43(d,J＝14.5Hz,2H),2.12–2.01(m,2H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.28(s),159.43(s),154.51(s),148.25(s),140.25(s),133.15(s),129.45(s,2C),126.77(s,2C),62.44(s),47.68(s,2C),41.41(s,2C),31.47(s,2C),27.74(s),20.35(s).
III-2：[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐，白色固体，产率：81.3％，Mp:193～198℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.92(s,1H),7.30(d,J＝8.6Hz,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,2H),5.36(s,1H),3.65–3.48(m,10H),3.33(d,J＝13.3Hz,3H),3.15–3.09(m,3H),3.01(s,2H),2.43(d,J＝14.5Hz,2H),2.07(t,J＝13.4Hz,2H),1.07(t,J＝7.3Hz,3H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.24(s),148.28(s),140.30(s),133.12(s),129.45(s,2C),126.78(s,2C),66.50(s,3C),62.45(s),47.69(s 2C),41.43(s,2C),36.56(s,2C),31.49(s),12.71(s,2C).
III-3：[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐，白色固体，产率：98.0％，Mp:273～275℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.97(s,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,2H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),5.42(s,1H),3.75–3.58(m,9H),3.38(d,J＝13.3Hz,2H),3.22(t,J＝12.2Hz,2H),3.08(s,2H),2.48(d,J＝14.6Hz,2H),2.19–2.07(m,2H),1.14(d,J＝6.4Hz,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):171.20(s),142.50(s),132.36(s),129.82(s,2C),127.47(s,2C),63.28(s),55.40(s),48.05(s,2C),43.63(s,2C),41.43(s,2C),32.10(s),22.42(s,2C).
III-4：4-[6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：72.6％，Mp:277～278℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.94(s,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,2H),7.21(d,J＝8.7Hz,2H),5.42(s,1H),3.62(m,4H),3.37-3.33(m,3H),3.27(br,2H),3.19(t,J＝11.8Hz,3H),3.05(br,2H),2.45(d,J＝14.4Hz,2H),2.15–2.04(m,2H),1.29(s,9H).13C NMR(100MHz,D2O)δ173.30(s),148.61(s),140.29(s),133.16(s),129.46(s,2C),126.81(s,2C),80.63(s),66.52(s),52.06(s,2C),47.72(s,2C),41.45(s,2C),31.49(s),27.69(s,4C).
III-5：{4-[5-氯-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色微黄固体，产率：61.9％，Mp:204～208℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.97(s,1H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),7.19(d,J＝8.6Hz,2H),3.59(d,J＝14.9Hz,8H),3.33(d,J＝13.3Hz,2H),3.26–3.13(m,4H),2.99(s,2H),2.89(s,3H),2.42(d,J＝14.5Hz,2H),2.08(t,J＝11.8Hz,2H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.13(s),155.51(s),155.00(s),146.31(s),140.45(s),133.13(s),129.50(s,2C),126.78(s,2C),94.10(s),66.50(s,3C),62.45(s),47.68(s,2C),41.42(s,2C),31.57(s),28.36(s,2C).
III-6：{4-[5-氯-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，微黄色固体，产率：85.0％，Mp:259～261℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ8.04(s,1H),7.39(d,J＝8.6Hz,2H),7.27(d,J＝8.6Hz,2H),3.74–3.62(m,7H),3.45–3.38(m,4H),3.30–3.22(m,3H),3.06(s,2H),2.50(d,J＝14.5Hz,2H),2.21–2.10(m,2H),1.17(t,J＝7.2Hz,3H).13CNMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.12(s),155.39(s),154.35(s),146.25(s),140.48(s),133.12(s),129.49(s,2C),126.79(s,2C),94.02(s),66.51(s,3C),47.69(s,2C),41.43(s,2C),37.18(s,2C),31.59(s),13.31(s,C).
III-7：{4-[5-氯-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：76.2％，Mp:189～193℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):8.01(s,1H),7.38(d,J＝8.5Hz,2H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),4.01(dt,J＝13.0,6.5Hz,1H),3.63(d,J＝27.5Hz,8H),3.38(d,J＝13.3Hz,2H),3.26–3.20(m,2H),3.02(s,2H),2.47(d,J＝14.5Hz,2H),2.18–2.07(m,2H),1.19(d,J＝6.5Hz,6H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ(ppm):171.00(s),157.80(s),152.91(s),142.63(s),132.29(s),129.76(s,2C),127.45(s,2C),97.11(s),66.83(s,2C),48.02(s,2C),43.39(s,2C),41.47(s,2C),32.22(s),22.57(s,2C).
III-8：{4-[6-(叔丁基氨基)-5-氯嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：75.1％，Mp:185～187℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ8.08(s,1H),7.42(d,J＝8.5Hz,2H),7.28(d,J＝8.6Hz,2H),5.39(s,1H),3.72(s,2H),3.50(s,2H),3.40(d,J＝13.4Hz,3H),3.29–3.22(m,4H),2.93(s,2H),2.50(d,J＝14.8Hz,2H),2.22–2.11(m,2H),1.42(s,9H).13C NMR(100MHz,D2O)δ173.21(s),152.43(s),146.29(s),140.40(s),133.22(s),129.55(s,2C),126.81(s,2C),96.33(s),66.53(s),62.48(s,2C),54.27(s,2C),47.70(s,2C),41.43(s,2C),31.57(s),27.86(s,3C).
III-9：{4-[5-溴-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：81.3％，Mp:262～265℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.98(s,1H),7.32(d,J＝8.6Hz,2H),7.19(d,J＝8.6Hz,2H),3.59(d,J＝14.9Hz,8H),3.32(d,J＝13.3Hz,2H),3.25–3.12(m,4H),3.01(s,2H),2.89(s,3H),2.42(d,J＝14.5Hz,2H),2.14–2.00(m,2H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ170.98(s),153.19(s),152.66(s),143.82(s),138.25(s),130.96(s),127.32(s,2C),124.61(s,2C),91.74(s),60.28(s,2C),59.47(s),45.50(s,2C),39.24(s,2C),29.38(s),26.21(s,2C).
III-10：{4-[5-溴-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：85.8％，Mp:260～263℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.95(s,1H),7.29(d,J＝8.6Hz,2H),7.18(d,J＝8.6Hz,2H),3.57(d,J＝17.4Hz,8H),3.34-3.30(m,4H),3.20-3.14(m,4H),2.96(br,2H),2.41(d,J＝14.5Hz,2H),2.10-2.04(m,2H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.10(s),155.41(s),154.35(s),146.29(s),140.49(s),133.11(s),129.49(s),126.79(s),94.03(s),66.50(s),47.68(s),41.43(s),37.18(s),31.58(s),13.31(s).
III-11：{4-[5-溴-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：90.2％，Mp:247～249℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ(ppm):7.96(s,1H),7.31(d,J＝8.3Hz,2H),7.19(d,J＝8.4Hz,2H),3.95(dt,J＝12.9,6.4Hz,1H),3.60-3.55(m,8H),3.33(d,J＝13.1Hz,2H),3.26–3.12(m,4H),2.97(s,2H),2.42(d,J＝14.6Hz,2H),2.07(t,J＝12.1Hz,2H),1.14(d,J＝6.4Hz,6H).13C NMR(100MHz,D2O)δ(ppm):173.15(s),155.45(s),153.90(s),146.42(s),140.44(s),133.14(s),129.49(s,2C),126.78(s,2C),94.15(s),66.50(s,3C),47.68(s,2C),45.01(s,2C),41.42(s,2C),31.57(s),21.13(s,2C).
III-12：{4-[5-溴-6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐，白色固体，产率：85.4％，Mp:278～280℃。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.94(s,1H),7.32(d,J＝8.7Hz,2H),7.20(d,J＝8.7Hz,2H),3.62(m,4H),3.37-3.33(m,3H),3.27(br,2H),3.19(t,J＝11.8Hz,3H),3.05(br,2H),2.45(d,J＝14.4Hz,2H),2.15–2.04(m,2H),1.29(s,9H).13C NMR(100MHz,D2O)δ173.30(s),148.61(s),140.29(s),133.16(s),129.46(s,2C),126.81(s,2C),80.63(s),66.52(s),52.06(s,2C),47.72(s,2C),41.45(s,2C),31.49(s,2C),27.69(s,4C).
实验例化合物对Akt1抑制活性测试及对套细胞淋巴瘤(MCL)细胞株的生长抑制测 定实验
(1)化合物对Akt1激酶抑制活性实验：
实验材料和仪器：TR-FRET酶活性测定试剂盒(德国Cisbio公司)、二甲基亚砜DMSO(美国Sigma-Aldrich公司)、电子分析天平ER-182A型(日本A&D公司)、Akt1激酶200ng/μL(日本Carna Biosciences公司)、384微孔板(美国Perkin Elmer公司)、酶标仪(PerkinElmer Inspire多功能酶标仪)、二氧化碳培养箱(美国Forma Scientific公司)、台式离心机(美国Thermo Scientific公司)。
实验方法：在0℃条件下，将4μL不同浓度的化合物，2μL生物素化的底物HTRFKinEASE STK S2或S3(Akt的底物)和2μL Akt激酶依次加入到384孔板上，混匀离心，加入2μL ATP混匀离心，37℃下孵育45分钟。依次加入5μL anti-Eu(K)-STK抗体溶液和5μLStreptavidin-XL665缓冲液(内含EDTA可终止酶反应)，室温孵育1h，使抗体与底物的磷酸化位点及Streptavidin-XL665与底物相连的生物素充分结合，用BioTek多功能酶标仪Synnergy 2TM检测发射波长620nm和665nm的荧光值。
实验中需设定化合物测试组(C)、阳性对照组(P)和阴性对照组(N)。测试组是将不同浓度待测化合物溶液(4μL/孔)加入到384孔板中，阳性对照组则是加入相同体积的1×激酶缓冲液，其他与测试组相同；阴性对照组不加待测化合物，也不加Akt1激酶溶液，用6μL/孔的1×激酶缓冲液代替，其他与测试组相同。
抑制率的计算公式为：
其中c为测试组，n为背景组，p为空白组。
用软件Graghpad Prism6.0以浓度的对数为横坐标，抑制率为纵坐标拟合曲线，计算IC50。
目标化合物对Akt1激酶抑制活性测定实验结果见表1。
表1.化合物Akt激酶的抑制活性测定数据
N表示无活性。
表1实验数据表明，化合物II-2、II-3、II-4、II-8、II-10、II-11、II-12和III-12对Akt1的抑制活性较好。
(2)化合物对套细胞淋巴瘤(MCL)细胞株的生长抑制活性实验：
实验材料与仪器：
细胞及培养试剂：人套细胞淋巴瘤细胞株Mino,Rec-1,Jeko-1,Maver-1,Z-138,Granta-519,JVM-2,JVM-13(美国典型培养物保藏中心-American Type CultureCollection，ATCC)、RPMI-1640培养基(美国Sigma公司)、胎牛血清(美国Sigma公司)、HEPES缓冲液(美国CORNING公司)、青霉素纳(10000units/mL)-硫酸链霉素(10mg/mL)(美国Sigma公司)、台盼蓝试剂-Trypan blue solution(美国Sigma公司)、倒置光学显微镜(美国Fisher Scientific公司)、细胞培养箱(美国NUAIER公司)、超净工作台(美国NUAIER公司)、细胞计数器-TC20TM Automated Cell Counter)(美国Bio-Rad公司)、电热恒温水浴锅(美国Fisher Scientific公司)、台式离心机(美国Thermo Scientific公司)、酶标仪(BioTekSynergy HTX多功能检测仪)、超低温冰箱(美国Thermo Scientific公司)。
实验方法：取对数生长期MCL细胞株，接种于96孔培养板中，细胞数为1×104/孔，加入不同浓度所测化合物的细胞培养液，使其终浓度为0.93-60μM，同时设立阳性对照组和DMSO空白对照组，调整DMSO浓度≤1‰。每个浓度设3个复孔，加毕，置37℃，5％CO2恒温培养箱中孵育72h。随后每孔加入30μL CellTiter-试剂，用BioTek Synergy HTX多功能检测仪(BioTek,USA)检测仪测定其在570nm波长下的发光度值，所得数值与阴性DMSO对照组进行归一化处理，应用Prism 6.0软件(GraphPad Software,USA)计算IC50值。化合物抑制率由公式：抑制率(IR％)＝(空白组OD值-给药组OD值)/空白组OD值×100％，计算，再根据抑制率浓度曲线得IC50值。
化合物对MCL细胞株的生长抑制活性测定结果见表2-1、2-2。
表2-1.化合物对MCL细胞株的生长抑制活性测定数据
a数值为三组独立实验的平均值
表2-2.化合物对MCL细胞株的生长抑制活性测定数据
a数值为三组独立实验的平均值
表2-1实验数据表明，与GSK690693相比，II系列化合物对MCL的生长抑制活性明显提高。与对Akt酶的活性相一致，对Akt激酶活性较强的化合物II-2、II-3、II-4、II-8、II-10对MCL细胞株的生长抑制活性亦较强，半数抑制浓度都在低微摩尔级(1μM左右)，其生长抑制活性明显优于MCL上市药物依鲁替尼(Ibrutinib)。
表2-2实验数据表明，III系列化合物虽然丧失了对Akt激酶的抑制活性，其中大部分化合物对MCL细胞的半数生长抑制浓度都较强，大部分化合物对MCL的半数生长抑制浓度低于10μM。其中多个化合物对MCL的生长抑制活性与GSK690693相当甚至更优，活性最好化合物III-8对MCL细胞株的半数生长抑制浓度为低微摩尔级，远优于GSK690693，和依鲁替尼活性相当。

Claims (10)

1.一种式(I)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐：
其中，X选自H、-CH-、-C-Br和卤素；Y选自H、-CH-、C1-C18的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N。
2.根据权利要求1所述的式(I)所示化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，其特征在于，X选自H、-CH-、-C-Br和卤素；Y选自H、-CH-和C1-C8的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、F、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；其中，所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；其中，所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自氨基、取代氨基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C3的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，X选自H、-CH-、-C-Br、Cl和Br；Y选自H、-CH-和C1-C5的直链或支链烷基；X与Y之间的为无键或双键；
R1选自-CHR2-和其中，R2选自
3.根据权利要求1或2所述的化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，其特征在于，X与Y之间的为双键，X选自-CH-和-C-Br；Y为-CH-；
进一步地，所述化合物具有如下所示的结构：
其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，R2选自
进一步地，X与Y之间的为无键；X选自H和卤素；Y为C1-C18的直链或支链烷基；
进一步地，R1为
进一步地，所述化合物具有如下所示的结构：
其中，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C8的直链或支链烷基；
进一步地，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C5的直链或支链烷基；
进一步地，X为H、Cl或Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的式(I)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，其特征在于，其选自以下结构：
叔丁基{2-[4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}氨基甲酸酯(II-1)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二甲氨基)乙酮(II-2)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(二乙氨基)乙酮(II-3)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(吡咯-1-基)乙酮(II-4)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(3,5-二甲基哌啶-1-基)乙酮(II-5)；
1-[4-(5-溴-7H-[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-吗啉乙酮(II-6)；
叔丁基4-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基}-2-氧乙基)哌嗪-1-羧酸酯(II-7)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(4-甲基哌嗪基)乙酮(II-8)；
叔丁基{{1-{2-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-1-(4-氯苯基)-2-氧乙基}哌啶-4-基}甲基}氨基甲酸酯(II-9)；
2-氨基-1-(4-(5-溴-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)-2-(4-氯苯)乙酮盐酸盐(II-10)；
1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)-2-(哌嗪基)乙酮盐酸盐(II-11)；
2-[4-(氨基甲基)哌啶-1-基)-1-[4-(5-溴-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌嗪基]-2-(4-氯苯基)乙酮盐酸盐(II-12)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-1)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-2)；
[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]{4-[6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}甲酮盐酸盐(III-3)；
4-[6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-4)；
{4-[5-氯-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-5)；
{4-[5-氯-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-6)；
{4-[5-氯-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-7)；
{4-[6-(叔丁基氨基)-5-氯嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-8)；
{4-[5-溴-6-(甲基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-9)；
{4-[5-溴-6-(乙氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-10)；
{4-[5-溴-6-(异丙基胺)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-11)；
{4-[5-溴-6-(叔丁基氨基)嘧啶-4-基]哌嗪基}[4-(4-氯苯基)哌啶-4-基]甲酮盐酸盐(III-12)。
5.一种制备式(II)所示化合物或其可药用盐的方法，所述方法按如下所示反应路线(反应路线1)进行：
其中，R2选自卤素、硝基、氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C18的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，R2选自氨基、取代氨基、氰基、含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基，所述杂原子选自O、S和N；所述取代氨基为被叔丁氧羰基(Boc)和/或C1-C8的直链或支链烷基所取代的氨基；所述含一个或多个杂原子的五元或六元环烷基选自吡咯、哌啶、取代哌啶、吗啉、哌嗪和取代哌嗪；
进一步地，所述取代哌啶或取代哌嗪各自独立地选自被C1-C5的直链或支链的烷基、氨基、被叔丁氧羰基取代的氨基和叔丁氧羰基；
进一步地，所述取代氨基选自
进一步地，所述取代哌啶选自
进一步地，所述取代哌嗪选自
进一步地，R2选自
进一步地，所述方法包括：以起始原料1在DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中与NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)反应得中间体2；中间体2、1-Boc-哌嗪和DIEA(N,N-二异丙基乙胺)在DMF中反应生成中间体3；中间体3在甲醇溶液中与氯化氢二氧六环溶液反应，脱掉Boc保护基，得中间体4；中间体4在EDCI(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、DIEA和DMF存在条件下，与中间体酸M反应后，得式(II)化合物；和/或，进一步地，用得到的式(II)化合物的甲醇溶液与氯化氢的二氧六环溶液反应，得新的式(II)化合物；
进一步地，所述中间体酸M具有如下所示的结构：
其中，R2选自
6.一种制备式(III)所示化合物或其可药用盐的方法，所述方法按如下所示反应路线(反应路线2)进行：
其中，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C8的直链或支链烷基；
进一步地，X选自H、F、Cl、Br；Y为C1-C5的直链或支链烷基；
进一步地，X为H、Cl或Br；Y为甲基、乙基、异丙基或叔丁基；
进一步地，所述方法包括：以起始原料5溶于异丙醇中，与取代胺反应得中间体6a-6d；中间体6a-6d与1-Boc-哌嗪在二氧六环和K2CO3存在下反应生成中间体7a-7d；中间体7a-7d在冰醋酸存在条件下，与NCS/NBS反应，得中间体7e-7l；中间体7e-7l在甲醇溶液中，与氯化氢二氧六环溶液反应，脱掉Boc保护基，得中间体8a-8l；中间体8a-8l在EDCI、HOBt、DIEA和DMF存在下与中间体酸N反应后，得中间体9a-9l；将中间体9a-9l的甲醇溶液，与氯化氢的二氧六环溶液反应，得式(III)化合物的盐酸盐；
进一步地，所述中间体酸N为
7.一种药物组合物，其包含权利要求1或2中所述的式(I)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求3所述的式(II)或式(III)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求4中所述的任一项化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐。
8.权利要求1或2中所述的式(I)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求3所述的式(II)或式(III)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求4中所述的任一项化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求7所述的药物组合物在制备Akt抑制剂中的应用。
9.权利要求1或2中所述的式(I)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求3所述的式(II)或式(III)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求4中所述的任一项化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求7所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的应用；
进一步地，所述肿瘤为套细胞淋巴瘤。
10.一种联合用药组合，其包括权利要求1或2中所述的式(I)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求3所述的式(II)或式(III)化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求4中所述的任一项化合物或其异构体或溶剂化物或可药用盐，或权利要求7所述的药物组合物与抗肿瘤药物的联合应用。
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