CN108901843A - 一种提高三叶青块根离体诱导效果的方法 - Google Patents

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尹明华
蔡红
李远芳
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Alpine Special Economic Crop Planting Association Of Yushan County
Shangrao Normal University
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Abstract

提高三叶青块根离体诱导效果的方法：用四种含有碳纳米管或石墨烯量子点的培养基依次对三叶青带芽茎段进行块根的离体诱导，培养60‑90d后，三叶青试管苗可形成微型块根。本发明与现有技术比较，三叶青块根离体诱导时间短、数量多、效果好。

Description

一种提高三叶青块根离体诱导效果的方法
技术领域：
本发明涉及一种提高植物块根离体诱导效果的方法，确切地说是一种提高三叶青块根离体诱导效果的方法。
背景技术：
三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)是中国特有的珍稀药用植物，为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤，分布于中国长江中下游及南方地区海拔300-1000m的阴湿地区。《中国植物志》记载三叶崖爬藤有清热解毒、祛风化痰、活血止痛等功效，可用于治疗毒蛇咬伤、扁桃体炎、淋巴结结核、跌打损伤、小儿高热惊厥等。怀玉山三叶青分布在江西怀玉山山脉，2016年3月获批为国家地理标志农产品。怀玉山三叶青药用部位为三叶青的块根、果实或全草，以地下块根和果实的药用效果最好，全年均可采收，晒干或鲜用均可。南昌大学食品科学与技术国家重点实验室的邓泽元教授、孙永教授及其团队对怀玉山三叶青的化学成分分析和药理学作用进行了深入研究，他们的研究表明，怀玉山三叶青不但能减慢癌细胞生长、抑制癌细胞增殖、促进癌细胞凋亡，还可作为癌症预防治疗的功能性食品。通过在离体培养条件下诱导试管块根，是研究块根发生发育和形成机理的一个重要途径，也可通过人工种子技术取代试管苗应用生产。目前，三叶青离体诱导试管块根的体系仍不完善，还存在形成的数量少、形成时间长、效果欠佳等问题，导致生产效率不高，生产实践应用困难。针对这些问题，本发明开发了一种提高三叶青块根离体诱导效果的方法，可为三叶青块根的离体诱导提供技术基础。
发明内容：
本发明的目的是提供一种时间短、数量多、效果好的提高三叶青块根离体诱导效果的方法。实现本发明目的的技术方案是，一种提高三叶青块根离体诱导效果的方法，其特征在于有以下步骤：(1)在超净工作台内，切取三叶青带芽茎段并将其接种于培养基一：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(2)在培养基一上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基二：MS+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(3)在培养基二上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基三：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(4)在培养基三上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基四：MS+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L NAA+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+90g/L蔗糖+7.5g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；(5)在培养基四上培养60-90d后，三叶青试管苗可形成数量较多的微型块根，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx。
具体实施方式：
结合下述实施例对本发明作进一步说明：
(1)第一次培养
在超净工作台内，切取三叶青带芽茎段并将其接种于培养基一：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；
(2)第二次培养
在培养基一上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基二：MS+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；
(3)第三次培养
在培养基二上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基三：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；
(4)第四次培养
在培养基三上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基四：MS+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L NAA+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+90g/L蔗糖+7.5g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，培养室培养条件为：温度25±2℃，光照时间14h/d，光强1000-1500lx；
在培养基四上培养60-90d后，三叶青试管苗可形成数量较多的微型块根。

Claims (1)

1.提高三叶青块根离体诱导效果的方法，其特征在于有以下步骤：(1)在超净工作台内，切取三叶青带芽茎段并将其接种于培养基一：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5mg/LIAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养；(2)在培养基一上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基二：MS+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L IBA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养；(3)在培养基二上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基三：MS+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+0.3-0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+0g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养；(4)在培养基三上培养7-10d后，将三叶青带芽茎段转入培养基四：MS+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L NAA+0.3-0.5g/L碳纳米管+0.3-0.5g/L石墨烯量子点+90g/L蔗糖+7.5g/L琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养；(5)在培养基四上培养60-90d后，三叶青试管苗可形成数量较多的微型块根。
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