CN108896380A - 一种化学发光仪在机用血清稀释液及其制备方法 - Google Patents

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凌云
凌天阳
金可心
夏戊君
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    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples

Abstract

本发明公开了一种化学发光仪在机用血清稀释液及其制备方法，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾21～45份，磷酸二氢钾22～50份，碳酸氢钠11～22份，硫酸锌11～19份，肝素钠15～31份，山梨醇7～17份，甘氨酸3～11份，聚氧化乙烯3～7份，聚乙二醇4～9份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚1～4份，酪蛋白钠0.1～0.4份，庆大霉素0.2～0.6份，叠氮化钠0.1～0.4份，去离子水80～180份。本发明利用各组分间的协同作用，制备获得化学发光仪在机用血清稀释液，能有效用于血清样本的稀释，能迅速与血清混合均匀，对检测结果无干扰，且能降低非特异性吸附。

Description

一种化学发光仪在机用血清稀释液及其制备方法
技术领域
本发明涉及免疫试剂技术领域，尤其涉及一种化学发光仪在机用血清稀释液及其制备方法。
背景技术
随着生物学的飞速发展，对人体认知也越来越深入、细化，针对蛋白质、核算等生物大分子的检测日益增多，其技术手段也不断创新、完善。其中免疫学是现代医学生物研究中尤其突出的一项分支，该技术研究基础是建立在抗原与抗体的特异性结合下完成的。基于抗原与抗体的特异性结合，起初是运用在放射性免疫检测技术中，而后因为其污染问题衍生出酶免疫技术，虽然酶免疫技术很好的解决了污染问题，可是其灵敏度却不能达到放免的高度，继而化学发光免疫技术的诞生很多的解决了这两个问题。然而，在抗原与抗体发生特异性结合反应用于检测时，会出现假阳性或假阴性，这个问题不仅给患者带来伤害也会对医院造成相应的损失；其中这种情况的发生，一部分原因是由待测标志物浓度过高，进行捕获标识物量不足出现检测结果偏低，或者待测物浓度过高大量结合压缩空间控制反应失败出现假阴性的结果。因而，对存在疑问的样本或已知高值的样本进行相应的稀释，从而提高仪器检测的准确率是十分必要的。
发明内容
本发明解决的技术问题：获得一种化学发光仪在机用血清稀释液，该稀释液能有效稀释血清样本，且不干扰测定结果，同时降低非特异性吸附提高检测结果的准确率。
技术方案：一种化学发光仪在机用血清稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾21～45份，磷酸二氢钾22～50份，碳酸氢钠11～22份，硫酸锌11～19份，肝素钠15～31份，山梨醇7～17份，甘氨酸3～11份，聚氧化乙烯3～7份，聚乙二醇4～9份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚1～4份，酪蛋白钠0.1～0.4份，庆大霉素0.2～0.6份，叠氮化钠0.1～0.4份，去离子水80～180份。
优选的一种化学发光仪在机用血清稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾33份，磷酸二氢钾39份，碳酸氢钠16份，硫酸锌15份，肝素钠26份，山梨醇11份，甘氨酸7份，聚氧化乙烯5份，聚乙二醇6份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚2份，酪蛋白钠0.2份，庆大霉素0.5份，叠氮化钠0.3份，去离子水120份。
一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白钠加入去离子水中，在2～8℃下以30～60rpm的搅拌速度搅拌48～72h，再加入叠氮化钠，继续搅拌10～30min，制得溶液A；
第2步、将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并100～150rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至37～48℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以80～120rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.1～7.7，再用0.22或0.45μm滤膜进行过滤，制得溶液B；
第3步、将溶液A倒入溶液B内，用0.22或0.45μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以60～90rpm的搅拌速度混匀20～40min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
优选的，第1步、用将酪蛋白钠加入去离子水中，在5℃下以50rpm的搅拌速度搅拌70h，再加入叠氮化钠，继续搅拌20min，制得溶液A。
优选的，第2步中将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并130rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至42℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以100rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.3，再用0.45μm滤膜进行过滤，制得溶液B。
优选的，第3步中将溶液A倒入溶液B内，用0.22μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以70rpm的搅拌速度混匀25min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
有益效果：本发明利用各组分间的协同作用，制备获得化学发光仪在机用血清稀释液，能有效用于血清样本的稀释，能迅速与血清混合均匀，对检测结果无干扰，且能降低非特异性吸附。
具体实施方式
实施例1
一种化学发光仪在机用血清稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾33份，磷酸二氢钾39份，碳酸氢钠16份，硫酸锌15份，肝素钠26份，山梨醇11份，甘氨酸7份，聚氧化乙烯5份，聚乙二醇6份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚2份，酪蛋白钠0.2份，庆大霉素0.5份，叠氮化钠0.3份，去离子水120份。
一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白钠加入去离子水中，在5℃下以50rpm的搅拌速度搅拌70h，再加入叠氮化钠，继续搅拌20min，制得溶液A；
第2步、将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并130rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至42℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以100rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.3，再用0.45μm滤膜进行过滤，制得溶液B；
第3步、将溶液A倒入溶液B内，用0.22滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以70rpm的搅拌速度混匀25min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
实施例2
一种化学发光仪在机用血清稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾38份，磷酸二氢钾33份，碳酸氢钠16份，硫酸锌16份，肝素钠19份，山梨醇12份，甘氨酸8份，聚氧化乙烯4份，聚乙二醇6份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚1份，酪蛋白钠0.2份，庆大霉素0.4份，叠氮化钠0.2份，去离子水130份。
一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白钠加入去离子水中，在4℃下以50rpm的搅拌速度搅拌68h，再加入叠氮化钠，继续搅拌15min，制得溶液A；
第2步、将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并140rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至40℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以100rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.3，再用0.22滤膜进行过滤，制得溶液B；
第3步、将溶液A倒入溶液B内，用0.45μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以80rpm的搅拌速度混匀25min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
实施例3
一种化学发光仪在机用血清稀释液，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾29份，磷酸二氢钾29份，碳酸氢钠16份，硫酸锌13份，肝素钠19份，山梨醇9份，甘氨酸8份，聚氧化乙烯5份，聚乙二醇6份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚2份，酪蛋白钠0.2份，庆大霉素0.5份，叠氮化钠0.1份，去离子水100份。
一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白钠加入去离子水中，在6℃下以50rpm的搅拌速度搅拌60h，再加入叠氮化钠，继续搅拌20min，制得溶液A；
第2步、将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并110rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至38℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以90rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.2，再用0.22μm滤膜进行过滤，制得溶液B；
第3步、将溶液A倒入溶液B内，用0.22μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以70rpm的搅拌速度混匀30min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
实施例4
将实施例1～3制备获得的化学发光仪在机用血清稀释液用于化学免疫诊断试剂高浓度样本检测，稀释后检测结果乘以稀释倍数与其靶值进行比对，结果如下：
实施例1 实施例2 实施例3
样本1 102.1％ 104.1％ 104.8％
样本2 96.2％ 97.4％ 95.1％
样本3 103.9％ 102.7％ 105.9％
样本4 104.9％ 106.1％ 106.7％
样本5 97.8％ 96.6％ 99.6％

Claims (6)

1.一种化学发光仪在机用血清稀释液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾21～45份，磷酸二氢钾22～50份，碳酸氢钠11～22份，硫酸锌11～19份，肝素钠15～31份，山梨醇7～17份，甘氨酸3～11份，聚氧化乙烯3～7份，聚乙二醇4～9份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚1～4份，酪蛋白钠0.1～0.4份，庆大霉素0.2～0.6份，叠氮化钠0.1～0.4份，去离子水80～180份。
2.根据权利要求1所述一种化学发光仪在机用血清稀释液，其特征在于，由以下组分按重量份数配比组成：磷酸氢二钾33份，磷酸二氢钾39份，碳酸氢钠16份，硫酸锌15份，肝素钠26份，山梨醇11份，甘氨酸7份，聚氧化乙烯5份，聚乙二醇6份，壬基酚聚氧乙烯(10)醚2份，酪蛋白钠0.2份，庆大霉素0.5份，叠氮化钠0.3份，去离子水120份。
3.权利要求1所述一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
第1步、将酪蛋白钠加入去离子水中，在2～8℃下以30～60rpm的搅拌速度搅拌48～72h，再加入叠氮化钠，继续搅拌10～30min，制得溶液A；
第2步、将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并100～150rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至37～48℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以80～120rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.1～7.7，再用0.22或0.45μm滤膜进行过滤，制得溶液B；
第3步、将溶液A倒入溶液B内，用0.22或0.45μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以60～90rpm的搅拌速度混匀20～40min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
4.根据权利要求3所述一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，其特征在于，第1步、用将酪蛋白钠加入去离子水中，在5℃下以50rpm的搅拌速度搅拌70h，再加入叠氮化钠，继续搅拌20min，制得溶液A。
5.根据权利要求3所述一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，其特征在于，第2步中将磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠、硫酸锌依次加入去离子水中，并130rpm的搅拌速度搅拌至溶解，再将水加热至42℃，依次加入肝素钠、山梨醇、甘氨酸、聚氧化乙烯、聚乙二醇、壬基酚聚氧乙烯(10)醚，以100rpm的搅拌速度搅拌至溶解，调节pH至7.3，再用0.45μm滤膜进行过滤，制得溶液B。
6.根据权利要求3所述一种化学发光仪在机用血清稀释液的制备方法，其特征在于，第3步中将溶液A倒入溶液B内，用0.22μm滤膜进行过滤，再加入庆大霉素、叠氮化钠，以70rpm的搅拌速度混匀25min，即可制得化学发光仪在机用血清稀释液。
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