CN108753668A - 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法 - Google Patents

一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN108753668A
CN108753668A CN201810831424.0A CN201810831424A CN108753668A CN 108753668 A CN108753668 A CN 108753668A CN 201810831424 A CN201810831424 A CN 201810831424A CN 108753668 A CN108753668 A CN 108753668A
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
bacterium
preparation
pregnant solution
pit mud
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810831424.0A
Other languages
English (en)
Inventor
王艳丽
何宏魁
刘国英
李安军
周庆伍
王录
孟雅静
李静心
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anhui Ruisiweier Technology Co Ltd
Original Assignee
Anhui Ruisiweier Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anhui Ruisiweier Technology Co Ltd filed Critical Anhui Ruisiweier Technology Co Ltd
Priority to CN201810831424.0A priority Critical patent/CN108753668A/zh
Publication of CN108753668A publication Critical patent/CN108753668A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。本发明通过把模拟老窖微生态功能菌液应用于制作新窖泥和窖池养护，促进窖池微生物群落结构的稳定，也为微生物的生长代谢提供了良好的环境基础，使得窖池产酒酒质明显提高，主体香更加突出，风味口感更好，浓香风格更加凸显。

Description

一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法
技术领域
本发明涉及一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，属于酿酒技术领域。
背景技术
浓香型白酒的酿造过程是以环境微生物、大曲微生物和窖泥微生物等复杂物质的能量代谢过程。泥窖固态发酵是浓香型白酒典型的特点，生产上有“千年窖池万年糟，酒好全凭窖池老”的说法，但窖泥自然老熟所需时间较长，模拟老窖池窖泥微生态以及营养成分制作人工窖泥或窖泥养护液，可以加快新窖池老熟，提高新窖产酒酒质。
目前，对模拟老窖，构建新窖泥微生态环境，以提高新窖泥的品质或利用补加功能菌液促进新窖老熟的相关研究较少，是一大技术难题。
发明内容
本发明旨在提供一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，强化制作新窖泥微生态系统和促进新窖老熟，从而提高新窖的微生物群落结构的稳态机制，缩短新窖老熟时间，防止新窖老化。本发明制备的功能菌液可以提升新窖产酒酒质、名酒率，同时可以用于养窖、护窖。
本发明通过高通量测序解析优质老窖微生态群落结构，发现优质老窖泥中在属的分类上主要有20个属，其中所占比例较高的菌系主要包括甲烷菌：Methanobacterium8.19％、Methanoculleus3.7％、Methanosarcina19.50％、Petrimonas16.83％，瘤胃梭菌：Ruminiclostridium16.57％以及未分类菌：Unclassified17.16％。本发明根据解析的优质老窖中的微生态结构群落组成，模拟其微生态结构和营养组分进行功能菌液的制备。
本发明模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。
所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。
所述甲烷菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，得到甲烷菌富集液。
所述甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：
K2HPO40.1～0.4‰，KH2PO40.2～0.5‰，NH4Cl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.1～0.4‰，半胱氨酸0.5～1.0‰，酵母膏0.6～1.0‰，乙酸钠2.0～5.0‰，甲酸钠2.0～5.0‰，Na2SO40.2～0.4‰，NaCl0.5～1.0‰，NaHCO30.2～0.5‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，蛋白胨1.0～2.5‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～5.0‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，微量元素溶液1.0～1.5％，维生素溶液1.0～1.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。
所述Petrimonas菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得Petrimonas菌富集液。
所述Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：
MES0.5～1.0‰，KH2PO40.5～1.0‰，Na2SO410.0～15.0‰，NaCl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.3～0.5‰，NaHCO34.0～6.0‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，酵母提取物1.0～2.0‰，蛋白胨1.5～2.0‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～3.0‰，L-半胱氨酸0.5～1.0‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。
所述瘤胃梭菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得瘤胃梭菌富集液。
所述瘤胃梭菌培养基参考陶勇等的发明专利(一株瘤胃菌及其应用)中的配方，按质量百分比构成如下：
MES0.5～1.0‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母膏2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青(0.1％，1000倍)1～2‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1～5‰，维生素溶液1～5‰，pH值5.5～6.0。
上述培养基配制过程中使用的酵母提取物为市购产品，又称酵母膏。
所述微量元素溶液以1L计组分构成如下：H3BO30.01g，CaCl2·2H2O0.1g，FeSO4·7H2O0.1g，ZnSO4·7H2O0.1g，MnSO4·H2O0.5g，CuSO4·5H2O0.01g，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.01g，KAl(SO4)2·12H2O0.1g，CoC12·6H2O0.1g，NaCl1.0g，MgSO4·7H2O3.0g。
所述维生素溶液以1L计组分构成如下：生物素2.0mg，叶酸2.0mg，盐酸吡哆醇10.0mg，核黄素(B2)5.0mg，硫胺素(B1)5.0mg，烟酸5.0mg，对氨基苯甲酸5.0mg，泛酸5.0mg，硫幸酸5.0mg，pH值7.0。
所述窖泥浸提液是将优质窖泥按质量1:50～100的比例加入温开水(煮沸后冷却至30～50℃的水)，搅拌混匀后静置1-2h，留取上清液即为窖泥浸提液。
所述优质窖泥为窖龄≥50年，且一直在连续使用的、产酒酒质较好(公司基酒评级为A级或B级的酒)的老窖池池底窖泥。
所述黄浆水为优质老窖(窖龄≥50年，且一直在连续使用的窖池)起窖时的新鲜黄浆水，香气要纯正，能起到带入微生物生长因子及调节培养基pH值的作用。
本发明模拟老窖微生态功能菌液的制备过程在厌氧条件下进行，避免接触太多的溶解氧。
本发明制备的模拟老窖微生态功能菌液为深棕色，气味为己酸为主的复合香味，其中总菌数≥2～5×1010个/mL。按照3～5％质量比与曲粉、酒糟和酯化红曲霉添加到窖泥原料中得到生态窖泥，窖香味明显、窖泥颜色较深，更加柔熟细腻，断面也更加均匀，有一定的粘稠感，更接近浓香型白酒老窖泥的感官要求。将新制窖泥应用酿造产酒基酒的名酒率提高4～11％。
所得模拟老窖微生态功能菌液应用于窖池养护和新窖老熟时，可以将功能菌液均匀喷洒至新窖窖壁与窖底促进新窖老熟或窖池大培养应用。
本发明的有益效果体现在：
1、解决了新窖池窖泥微生态群落结构不稳定，产酒酒质差的问题。
2、促进新窖老熟，防止窖池老化，起到养窖护窖的作用。
3、提高了新窖产酒的名酒率。
本发明通过把模拟老窖微生态功能菌液应用于制作新窖泥和窖池养护，促进窖池微生物群落结构的稳定，也为微生物的生长代谢提供了良好的环境基础，使得窖池产酒酒质明显提高，主体香更加突出，风味口感更好，浓香风格更加凸显。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明技术方案作进一步分析说明。
本发明实施例中：
所述微量元素溶液以1L计组分构成如下：H3BO30.01g，CaC12·2H2O0.1g，FeSO4·7H2O0.1g，ZnSO4·7H2O0.1g，MnSO4·H2O0.5g，CuSO4·5H2O0.01g，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.01g，KAl(SO4)2·12H2O0.1g，CoCl2·6H2O0.1g，NaCl1.0g，MgSO4·7H2O3.0g。
所述维生素溶液以1L计组分构成如下：生物素2.0mg，叶酸2.0mg，盐酸吡哆醇10.0mg，核黄素(B2)5.0mg，硫胺素(B1)5.0mg，烟酸5.0mg，对氨基苯甲酸5.0mg，泛酸5.0mg，硫幸酸5.0mg，pH值7.0。
所述窖泥浸提液是将优质窖泥按质量1:50～100的比例加入温开水，搅拌混匀后静置1-2h，留取上清液即为窖泥浸提液。
所述优质窖泥为窖龄≥50年，且一直在连续使用的、产酒酒质较好(公司基酒评级为A级或B级的酒，)的老窖池池底窖泥。
所述黄浆水为优质老窖(窖龄≥50年，且一直在连续使用的窖池)起窖时的新鲜黄浆水，香气要纯正，能起到带入微生物生长因子及调节培养基pH值的作用。
实施例1：
1、甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：
K2HPO40.1‰，KH2PO4 0.2‰，NH4Cl0.5‰，MgCl2-6H2O0.1‰，半胱氨酸0.5‰，酵母膏0.6‰，乙酸钠2.0‰，甲酸钠2.0‰，Na2SO40.2‰，NaCl0.5‰，NaHCO30.2‰，CaCl2-2H2O0.15‰，酵母提取物1.0‰，蛋白胨1.0‰，D-葡萄糖0.5‰，Na2S2.0‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，微量元素溶液1.0％，维生素溶液1.0％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5％的接种量接种优质窖泥，于30℃富集培养7天，重复上述步骤富集培养2次，获得甲烷菌富集液。
2、Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：
MES0.5‰，KH2PO40.5‰，Na2SO410.0‰，NaCl0.5‰，MgCl2-6H2O0.3‰，NaHCO34.0‰，CaCl2-2H2O0.15‰，酵母提取物1.0‰，蛋白胨1.5‰，D-葡萄糖0.5‰，Na2S2.0‰，L-半胱氨酸0.5‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水(或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5％的接种量接种优质窖泥，于30℃富集培养7天，重复上述步骤富集培养2次，获得Petrimonas菌富集液。
3、瘤胃梭菌培养基按质量百分比构成如下
MES0.5‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母汁2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1‰，维生素溶液1‰，pH值5.5。
将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5％的接种量接种优质窖泥，于30℃富集培养7天，重复上述步骤富集培养2次，获得瘤胃梭菌富集液。
4、将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。
本实施例制成的模拟老窖微生态功能菌液为深棕色，气味为己酸为主的复合香味，其中总菌数2×1010个/mL。按照3％质量比与曲粉、酒糟和酯化红曲霉添加到窖泥原料中得到生态窖泥，窖香味明显、窖泥颜色较深，更加柔熟细腻，断面也更加均匀，有一定的粘稠感，更接近浓香型白酒老窖泥的感官要求。将新制窖泥应用酿造产酒基酒的名酒率提高了4％。
实施例2：
1、甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：
K2HPO40.2‰，KH2PO40.3‰，NH4Cl0.6‰，MgCl2-6H2O0.2‰，半胱氨酸0.6‰，酵母膏0.7‰，乙酸钠2.1‰，甲酸钠2.1‰，Na2SO40.3‰，NaCl0.6‰，NaHCO30.3‰，CaCl2-2H2O0.16‰，酵母提取物1.1‰，蛋白胨1.1‰，D-葡萄糖0.6‰，Na2S2.1‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，微量元素溶液1.1％，维生素溶液1.1％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按6％的接种量接种优质窖泥，于32℃富集培养10天，重复上述步骤富集培养2次，获得甲烷菌富集液。
2、Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：
MES0.6‰，KH2PO40.6‰，Na2SO411.0‰，NaCl0.6‰，MgCl2-6H2O0.4‰，NaHCO34.1‰，CaCl2-2H2O0.16‰，酵母提取物1.1‰，蛋白胨1.6‰，D-葡萄糖0.6‰，Na2S2.1‰，L-半胱氨酸0.6‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按6％的接种量接种优质窖泥，于32℃富集培养10天，重复上述步骤富集培养2次，获得Petrimonas菌富集液。
3、瘤胃梭菌培养基按质量百分比构成如下
MES0.5‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母汁2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1‰，维生素溶液1‰，pH值5.5。
将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按6％的接种量接种优质窖泥，于32℃富集培养10天，重复上述步骤富集培养2次，获得瘤胃梭菌富集液。
4、将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。
本实施例制成的模拟老窖微生态功能菌液为深棕色，气味为己酸为主的复合香味，其中总菌数2.5×1010个/mL。按照5％质量比与曲粉、酒糟和酯化红曲霉添加到窖泥原料中得到生态窖泥，窖香味明显、窖泥颜色较深，更加柔熟细腻，断面也更加均匀，有一定的粘稠感，更接近浓香型白酒老窖泥的感官要求。将新制窖泥应用酿造产酒基酒的名酒率提高了6％。
实施例3：
1、甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：
K2HPO40.3‰，KH2PO40.4‰，NH4Cl0.7‰，MgCl2-6H2O0.3‰，半胱氨酸0.7‰，酵母膏0.8‰，乙酸钠2.2‰，甲酸钠2.2‰，Na2SO40.4‰，NaCl0.7‰，NaHCO30.4‰，CaCl2-2H2O0.17‰，酵母提取物1.2‰，蛋白胨1.2‰，D-葡萄糖0.7‰，Na2S2.2‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，微量元素溶液1.2％，维生素溶液1.2％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按7％的接种量接种优质窖泥，于34℃富集培养10天，重复上述步骤富集培养2次，获得甲烷菌富集液。
2、Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：
MES0.7‰，KH2PO40.7‰，Na2SO412.0‰，NaCl0.7‰，MgCl2-6H2O0.5‰，NaHCO34.2‰，CaCl2-2H2O0.17‰，酵母提取物1.2‰，蛋白胨1.7‰，D-葡萄糖0.7‰，Na2S2.2‰，L-半胱氨酸0.7‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5。
将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按7％的接种量接种优质窖泥，于34℃富集培养10天，重复上述步骤富集培养2次，获得Petrimonas菌富集液。
3、瘤胃梭菌培养基按质量百分比构成如下
MES0.5‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母汁2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青(0.1％，1000倍)1‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1‰，维生素溶液1‰，pH值5.5。
将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按7％的接种量接种优质窖泥，于34℃富集培养10天，重复上述步骤富集2次，获得瘤胃梭菌富集液。
4、将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。
本实施例制成的模拟老窖微生态功能菌液为深棕色，气味为己酸为主的复合香味，其中总菌数3×1010个/mL。将制得的功能菌液按质量比8％和大曲、酒糟与酯化红曲霉加入到窖池大培养的窖泥中。窖池大培养后，窖泥颜色更深，泥质更加柔熟细腻，窖香更加明显，更符合浓香型白酒酿造的要求。窖池大培养后产酒酒质明显提高，所产名酒率提高9％。
虽然本发明以将较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权力要求书界定的为准。

Claims (10)

1.一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法，其特征在于：
是将甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液以及瘤胃梭菌富集液按体积比2:1:1的比例混合，制成老窖微生态功能菌液。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
所述甲烷菌富集液、Petrimonas菌富集液和瘤胃梭菌富集液均为培养至对数期的菌液。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于所述甲烷菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将甲烷菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，得到甲烷菌富集液。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：
所述甲烷菌富集培养基按质量百分比构成如下：
K2HPO40.1～0.4‰，KH2PO40.2～0.5‰，NH4Cl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.1～0.4‰，半胱氨酸0.5～1.0‰，酵母膏0.6～1.0‰，乙酸钠2.0～5.0‰，甲酸钠2.0～5.0‰，Na2SO40.2～0.4‰，NaCl0.5～1.0‰，NaHCO30.2～0.5‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，蛋白胨1.0～2.5‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～5.0‰，刃天青1～2‰，微量元素溶液1.0～1.5％，维生素溶液1.0～1.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于所述Petrimonas菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将Petrimonas菌富集培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得Petrimonas菌富集液。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：
所述Petrimonas菌富集培养基按质量百分比构成如下：
MES0.5～1.0‰，KH2PO40.5～1.0‰，Na2SO410.0～15.0‰，NaCl0.5～1.0‰，MgCl2-6H2O0.3～0.5‰，NaHCO34.0～6.0‰，CaCl2-2H2O0.15～0.3‰，酵母提取物1.0～2.0‰，蛋白胨1.5～2.0‰，D-葡萄糖0.5～1.5‰，Na2S2.0～3.0‰，L-半胱氨酸0.5～1.0‰，刃天青1～2‰，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，pH值6.5～7.0。
7.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于所述瘤胃梭菌富集液是通过包括如下步骤的方法制备得到：
将瘤胃梭菌培养基置于厌氧发酵罐中并搅拌混匀，加入50％体积的温开水或净化水，通入氮气除氧，随后加热至121℃灭菌20min，冷却至室温，然后按5～10％体积比的接种量接种优质窖泥，于30～34℃富集培养7～15天，重复上述步骤富集培养2～3次，获得瘤胃梭菌富集液。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：
所述瘤胃梭菌培养基按质量百分比构成如下：
MES0.5～1.0‰，酪蛋白胨10.0‰，酵母膏2.5‰，碳酸氢钠4.0‰，半胱氨酸1‰，磷酸氢二钾0.45‰，磷酸二氢钾0.45‰，氯化钠0.9‰，七水硫酸镁0.09‰，氯化钙0.09‰，刃天青1～2‰，氯化血红素0.001‰，乳酸0.5％，黄浆水10％，窖泥浸提液40％，微量元素溶液1～5‰，维生素溶液1～5‰，pH值5.5～6.0。
9.根据权利要求4或8所述的制备方法，其特征在于：
所述微量元素溶液以1L计组分构成如下：H3BO30.01g，CaC12·2H2O0.1g，FeSO4·7H2O0.1g，ZnSO4·7H2O0.1g，MnSO4·H2O0.5g，CuSO4·5H2O0.01g，(NH4)6Mo7O24·4H2O0.01g，KAl(SO4)2·12H2O0.1g，CoC12·6H2O0.1g，NaCl1.0g，MgSO4·7H2O3.0g；
所述维生素溶液以1L计组分构成如下：生物素2.0mg，叶酸2.0mg，盐酸吡哆醇10.0mg，核黄素5.0mg，硫胺素5.0mg，烟酸5.0mg，对氨基苯甲酸5.0mg，泛酸5.0mg，硫幸酸5.0mg，pH值7.0。
10.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于
本发明模拟老窖微生态功能菌液的制备过程在厌氧条件下进行。
CN201810831424.0A 2018-07-26 2018-07-26 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法 Pending CN108753668A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810831424.0A CN108753668A (zh) 2018-07-26 2018-07-26 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810831424.0A CN108753668A (zh) 2018-07-26 2018-07-26 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108753668A true CN108753668A (zh) 2018-11-06

Family

ID=63971730

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810831424.0A Pending CN108753668A (zh) 2018-07-26 2018-07-26 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108753668A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110029076A (zh) * 2019-04-23 2019-07-19 中国科学院成都生物研究所 一种用于生产浓香型白酒的复合己酸菌液及其制备方法
CN111334390A (zh) * 2020-04-28 2020-06-26 安徽古井贡酒股份有限公司 一种综合提高浓香型白酒池底窖泥质量的方法
CN114933996A (zh) * 2022-06-08 2022-08-23 四川剑南春（集团）有限责任公司 一种窖泥合成微生物组及其制备与应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103666927A (zh) * 2013-12-20 2014-03-26 达州市川虎食品有限公司 一种清浓香型白酒的制备工艺
CN105420168A (zh) * 2015-12-30 2016-03-23 四川剑南春（集团）有限责任公司 利用乳酸产己酸的瘤胃梭菌及其用途
CN108034621A (zh) * 2018-01-31 2018-05-15 安徽瑞思威尔科技有限公司 一种窖泥厌氧梭菌Clostridium的富集方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103666927A (zh) * 2013-12-20 2014-03-26 达州市川虎食品有限公司 一种清浓香型白酒的制备工艺
CN105420168A (zh) * 2015-12-30 2016-03-23 四川剑南春（集团）有限责任公司 利用乳酸产己酸的瘤胃梭菌及其用途
CN108034621A (zh) * 2018-01-31 2018-05-15 安徽瑞思威尔科技有限公司 一种窖泥厌氧梭菌Clostridium的富集方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WANG MINGYUE等: "Analysis of microbial community structure in pit mud from two chinese luzhou-flavor liquor producing areas", 《INDUSTRIAL MICROBIOLOGY》 *
刘茂柯等: "浓香型白酒窖泥微生物群落结构及其选育应用研究进展", 《微生物学通报》 *
王明跃等: "不同窖龄窖泥细菌的系统发育多样性分析", 《食品科学》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110029076A (zh) * 2019-04-23 2019-07-19 中国科学院成都生物研究所 一种用于生产浓香型白酒的复合己酸菌液及其制备方法
CN111334390A (zh) * 2020-04-28 2020-06-26 安徽古井贡酒股份有限公司 一种综合提高浓香型白酒池底窖泥质量的方法
CN111334390B (zh) * 2020-04-28 2023-03-21 安徽古井贡酒股份有限公司 一种综合提高浓香型白酒池底窖泥质量的方法
CN114933996A (zh) * 2022-06-08 2022-08-23 四川剑南春（集团）有限责任公司 一种窖泥合成微生物组及其制备与应用
CN114933996B (zh) * 2022-06-08 2023-10-27 四川剑南春（集团）有限责任公司 一种窖泥合成微生物组及其制备与应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102229874B (zh) 一种浓香型白酒的生产方法
CN108753668A (zh) 一种模拟老窖微生态功能菌液的制备方法
CN105385644B (zh) 降解乳酸合成己酸的功能微生物菌剂及其在窖泥养护中的应用
CN103627738B (zh) 一种直接发酵法生产l-苹果酸的方法
CN105802827B (zh) 一种利用山楂糖液生产山楂醋的方法
CN107034108B (zh) 一种通过窖泥养护提高浓香型白酒爽净度的方法
CN104059839B (zh) 一种花香型茶叶发酵酒的加工方法
CN104694324B (zh) 一种窖泥制备工艺
CN104017853A (zh) 一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法
CN107466860A (zh) 一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料及其制备方法
CN102311902A (zh) 浓香型白酒窖泥新型培养方法
CN110029076A (zh) 一种用于生产浓香型白酒的复合己酸菌液及其制备方法
CN104974893A (zh) 一种原汁刺梨酒及其制作方法
CN104783102A (zh) 一种泡菜生产方法
CN100374536C (zh) 一种在活竹腔里发酵产酒的方法
CN102146325B (zh) 封窖泥的培养方法
CN104357277A (zh) 一种绵柔型生态窖泥微生态强化液的制备方法
CN106434113A (zh) 一种黑莓酒复合发酵助剂及其使用方法
CN103011543B (zh) 一种微生物除臭剂及其制备方法
CN102994358A (zh) 一种枇杷果醋和醋饮料及其酿造方法
CN109294934A (zh) 一种发酵葡萄酒的复合菌及酿造葡萄酒的方法和葡萄酒
CN106520496B (zh) 一种浓香型果味酒酿造方法
CN107653295A (zh) 采用冠突曲霉和酿酒酵母发酵茶叶末生产烟用香料的方法
CN103409286A (zh) 一种γ-氨基丁酸红茶果酒及其制备方法
CN106754013A (zh) 一种浓香型橘子酒酿造方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20181106

RJ01 Rejection of invention patent application after publication