CN107466860A - 一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,所述饮料包括如下重量组分:红豆杉细胞悬浮培养物1%‑19%、乳酸菌发酵液72.4%‑86.8%、低聚果糖0.5%‑3%、白砂糖3%‑5%、乳酸0.2%‑0.6%、纯净水0‑8.5%。本发明的饮料有益效果在于,利用红豆杉细胞悬浮培养物、乳酸菌、低聚果糖的有益成分,通过科学配伍,利用先进配方工艺精制而成,提高人体免疫力,改善亚健康。本发明如能得到广泛应用,将为红豆杉资源的开发利用提供一种新思路,也将产生巨大的经济效益与社会效益。
Description
技术领域
本发明属于食品饮料领域,具体涉及一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料。
背景技术
红豆杉是红豆杉科红豆杉属植物的总称,红豆杉属包括10余种濒危药用植物,为国家一级重点保护植物,其含有的紫杉醇等物质是一种对治疗肺癌、卵巢癌等有特效的抗癌药物,是紫杉醇生产的主要原料植物,属高档珍贵药材。目前获得紫杉醇的主要方式是通过人工种植大片的红豆杉林来为紫杉醇的提取提供原料。但是其紫杉醇含量低,加之红豆杉的生长速度缓慢,使得野生红豆杉的数量急剧下降。红豆杉作为中草药服用对人类健康起到了一定的作用,红豆杉属植物药用功能最早记载于《本草纲目》,可用于治疗霍乱、伤寒等症。《本草推陈》中也对其药用功能有过相关记载。现在我国栽培的红豆杉只限于以中药材的形式配药服用,且红豆杉生长较缓慢,资源贫乏,这使得红豆杉的医疗保健作用受到了较大的局限性。随着植物组织培养技术的发展,使得愈伤组织的可以快速培养以及大量获得,为红豆杉资源的广泛利用提供了可能。植物组织培养以外植体诱导产生愈伤组织,通过悬浮培养愈伤组织细胞,使其大量增殖后,直接用于生产原料。
乳酸菌具有促进消化,调节菌群平衡,保护肠胃健康,提高人体免疫力。其制成的饮料产品气味芳香,酸甜可口,在消费群体中广受欢迎。低聚果糖是一种新型的功能性糖源,能明显改善肠道内微生物种群比例,调节肠道内平衡;可减少肝脏毒素,能在肠中生成抗癌的有机酸,有显著的防癌功能。
发明内容
本发明的目的在于将具有保健价值的红豆杉细胞、乳酸菌、低聚果糖通过科学合理的搭配,提供了一种口感好,可有效改善人体亚健康的红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料。
为实现上述目的,本发明通过以下技术方案来实现:
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,其特征在于,包括如下重量组分:红豆杉细胞悬浮培养物1%-19%、乳酸菌发酵液72.4%-86.8%、低聚果糖0.5%-3%、白砂糖3%-5%、乳酸0.2%-0.6%、纯净水0-8.5%。
进一步地,所述红豆杉细胞悬浮培养物为红豆杉细胞悬浮培养细胞、红豆杉细胞悬浮培养液的一种或两种组合。
进一步地,所述乳酸菌发酵液包括如下重量组分:葡萄糖1%-1.5%、低聚果糖(55%)0.5%-1%、乳糖0.1-0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%-1%、碳酸氢钠(食品级)0.1%-0.2%、吐温80(食品级)0.05%、琼脂0.008%-0.013%、番茄汁9.5%-14.2%、发酵剂0.0005%-0.002%、纯净水81.42%-88.14%。
进一步地,所述发酵剂为:嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、乳酸乳球菌乳酸亚种、乳双岐杆菌的一种、两种或两种以上的组合。
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,其特征在于,按照如下步骤进行制备:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:
(1)制备红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,由硝酸钾1900 mg、硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5 mg、2,4-D 1.0 mg-1.5mg、NAA 1.0 mg -2.0mg、6-BA 0.5 mg -1.5mg、琼脂8-12g、蔗糖20g-40g和余量的水组成,pH调整为5.8-6.0,分装后115℃灭菌30min,冷却至室温;
(2)取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min-1min、0.1%氯化汞浸泡8min -12min,蒸馏水洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将愈伤组织切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织;
步骤2:红豆杉细胞悬浮培养物的制备:
(1)制备红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,由硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙113.24 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370mg 、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0 mg 、2,4-D0.3 mg-0.5 mg、NAA0.2mg-0.7 mg、6-KT1.0 mg-1.5 mg、蔗糖20g-40g和余量的水组成, pH调整为5.8-6.0,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;
(2)接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.06-0.12g/mL,23℃-25℃悬浮培养18-21 d,无菌条件下收集培养物,100℃沸水浴10-15min,冷却至37℃以下;
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:分别选取如下按重量组分的原料:
葡萄糖1%-1.5%、低聚果糖(55%)0.5%-1%、乳糖0.1-0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%-1%、碳酸氢钠(食品级)0.1%-0.2%、吐温80(食品级)0.05%、琼脂0.008%-0.013%、番茄汁9.5%-14.2%、纯净水88.14%-81.42%,将上述原料加热搅拌溶解,115℃灭菌30min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.0005%-0.002%,37℃-43℃发酵9-12h;
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:分别选取如下按重量组分的原料:
红豆杉细胞悬浮培养物1%-19%,乳酸菌发酵液72.4%-86.8%,低聚果糖0.5%-3%,白砂糖3%-5%,乳酸0.2%-0.6%,纯净水0-8.5%,
将上述红豆杉细胞悬浮培养物和乳酸菌发酵液混合,加入低聚果糖、白砂糖、乳酸、纯净水,边加边搅拌,使其充分混匀,37℃-43℃再次发酵4h;
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
本发明的饮料有益效果在于,红豆杉细胞悬浮培养物、乳酸菌、低聚果糖的有益成分,提高人体免疫力、预防癌症、改善人体亚健康状态。
附图说明
图1是本发明制备红豆杉细胞低聚果糖乳酸菌活性饮料的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明作进一步说明。
实施例1:
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,它包括以下质量分数的原料组分组成:
红豆杉悬浮培养细胞及培养液9.5%,乳酸菌发酵液84.2%,白砂糖3%,低聚果糖3%,乳酸0.3%。
上述红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,按照以下步骤顺序进行:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,硝酸钾1900mg、硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇 100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5mg、2,4-D 1.3 mg、NAA 1.0 mg、6-BA 1.3 mg、琼脂10 g、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后115 ℃灭菌30 min,冷却至室温;取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min、0.1%氯化汞浸泡8min,蒸馏水充分洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将愈伤组织切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织。
步骤2:红豆杉细胞悬浮培养物的制备:红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,由硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙440 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0mg 、2,4-D0.4mg、NAA0.3 mg、6-KT1.2 mg、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.09 g/mL,23℃-25℃悬浮培养21 d,无菌条件下收集红豆杉悬浮培养细胞及培养液,100 ℃沸水浴10 min,冷却至37 ℃以下。
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:葡萄糖1%、低聚果糖(55%)0.5%、乳糖0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%、碳酸氢钠(食品级)0.2%、吐温80(食品级)0.005%、琼脂0.01%、番茄汁9.5%、纯净水87.68%,加热搅拌溶解,115℃灭菌30 min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.001%,42℃发酵12h。
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:将步骤2所制备的红豆杉悬浮培养细胞及培养液9.5%和步骤3所制备的乳酸菌发酵液84.2%混合,加入乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%,边加边搅拌,使其充分混匀,42℃再次发酵4h。
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
实施例2:
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,它包括以下质量分数的原料组分组成:
红豆杉悬浮培养细胞1%,乳酸菌发酵液84.2%,乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%、纯净水8.5%。
上述红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,按照以下步骤顺序进行:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,硝酸钾1900mg、
硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇 100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5mg、2,4-D 1.3 mg、NAA 1.0 mg、6-BA 1.3 mg、琼脂10 g、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后115 ℃灭菌30 min,冷却至室温;取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min、0.1%氯化汞浸泡8min,蒸馏水充分洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将其切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织。
步骤2:红豆杉悬浮培养细胞的制备:红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙440 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370 mg 、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0 mg 、2,4-D0.4mg、NAA0.3 mg、6-KT1.2 mg、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.09 g/mL,23℃-25℃悬浮培养21d,无菌条件下除去培养液收集红豆杉细胞,100 ℃沸水浴10 min,冷却至37 ℃以下。
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:葡萄糖1%、低聚果糖(55%)0.5%、乳糖0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%、碳酸氢钠(食品级)0.2%、吐温80(食品级)0.005%、琼脂0.01%、番茄汁9.5%、纯净水87.68%,加热搅拌溶解,115℃灭菌30 min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.001%,42℃发酵12h。
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:将步骤2所制备的红豆杉悬浮培养细胞1%和步骤3所制备的乳酸菌发酵液84.2%混合,加入乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%、纯净水8.5%,边加边搅拌,使其充分混匀,42℃再次发酵4h。
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
实施例3
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,它包括以下质量分数的原料组分组成:
红豆杉悬浮培养液9.5%,乳酸菌发酵液84.2%,乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%。
上述红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,按照以下步骤顺序进行:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,硝酸钾1900mg、
硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇 100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5mg、2,4-D 1.3 mg、NAA 1.0 mg、6-BA 1.3 mg、琼脂10 g、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后115 ℃灭菌30 min,冷却至室温;取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min、0.1%氯化汞浸泡8min,蒸馏水充分洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将愈伤组织切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织。
步骤2:红豆杉细胞悬浮培养物的制备:红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,由硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙440 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0mg 、2,4-D0.4mg、NAA0.3 mg、6-KT1.2 mg、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.09 g/mL,23℃-25℃悬浮培养21 d,无菌条件下除去红豆杉细胞收集培养液,100 ℃沸水浴10 min,冷却至37 ℃以下。
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:葡萄糖1%、低聚果糖(55%)0.5%、乳糖0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%、碳酸氢钠(食品级)0.2%、吐温80(食品级)0.005%、琼脂0.01%、番茄汁9.5%、纯净水87.68%,加热搅拌溶解,115℃灭菌30 min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.001%,42℃发酵12h。
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:将步骤2所制备的红豆杉悬浮培养液9.5%和步骤3所制备的乳酸菌发酵液84.2%混合,加入乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%,边加边搅拌,使其充分混匀,42℃再次发酵4h。
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
实施例4
一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,它包括以下质量分数的原料组分组成:
红豆杉悬浮培养细胞及培养液19 %,乳酸菌发酵液74.7%,白砂糖3%,低聚果糖3%,乳酸0.3%。
上述红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,按照以下步骤顺序进行:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,硝酸钾1900mg、
硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇 100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5mg、2,4-D 1.3 mg、NAA 1.0 mg、6-BA 1.3 mg、琼脂10 g、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后115 ℃灭菌30 min,冷却至室温;取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min、0.1%氯化汞浸泡8min,蒸馏水充分洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将愈伤组织切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织。
步骤2:红豆杉细胞悬浮培养物的制备:红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,由硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙440 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0mg 、2,4-D0.4mg、NAA0.3 mg、6-KT1.2 mg、蔗糖30 g和余量的水组成, pH调整为5.8,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.09 g/mL,23℃-25℃悬浮培养21 d,无菌条件下收集培养物,100 ℃沸水浴10 min,冷却至37 ℃以下。
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:葡萄糖1%、低聚果糖(55%)0.5%、乳糖0.5%、蛋白胨(食品级)0.6%、碳酸氢钠(食品级)0.2%、吐温80(食品级)0.005%、琼脂0.01%、番茄汁9.5%、纯净水87.68%,加热搅拌溶解,115℃灭菌30 min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.001%,42℃发酵12h。
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:将步骤2所制备的红豆杉细胞悬浮培养物19%和步骤3所制备的乳酸菌发酵液74.7%混合,加入乳酸0.3%、低聚果糖3%、白砂糖3%,边加边搅拌,使其充分混匀,42℃再次发酵4h。
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
本发明所提供的方法制备的红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料颜色为棕黄色,口感酸甜可口、细腻柔和,具有乳酸菌发酵的香气,有较好的流动性,含有一定含量的紫杉醇和乳酸菌活菌。
Claims (5)
1.一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,其特征在于,所述饮料包括如下重量组分:红豆杉细胞悬浮培养物1%-19%、乳酸菌发酵液72.4%-86.8%、低聚果糖0.5%-3%、白砂糖3%-5%、乳酸0.2%-0.6%、纯净水0-8.5%。
2.根据权利要求1所述的一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,其特征在于,所述红豆杉细胞悬浮培养物为红豆杉细胞悬浮培养细胞、红豆杉细胞悬浮培养液的一种或两种组合。
3.根据权利要求1所述的一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,其特征在于,所述乳酸菌发酵液包括如下重量组分:葡萄糖1%-1.5%、55%低聚果糖0.5%-1%、乳糖0.1-0.5%、食品级蛋白胨0.6%-1%、食品级碳酸氢钠0.1%-0.2%、食品级吐温80 0.05%、琼脂0.008%-0.013%、番茄汁9.5%-14.2%、发酵剂0.0005%-0.002%、纯净水81.42%-88.14%。
4.根据权利要求3所述的一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料,其特征在于,所述发酵剂为:嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、乳酸乳球菌乳酸亚种、乳双岐杆菌的一种、两种或两种以上的组合。
5.一种红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料的制备方法,其特征在于,按照如下步骤进行制备:
步骤1:红豆杉愈伤组织的制备:
(1)制备红豆杉愈伤组织诱导培养基,按每升计算,由硝酸钾1900 mg、硝酸铵1650 mg、磷酸二氢钾170 mg、无水硫酸镁370 mg、无水氯化钙440 mg、碘化钾0.83 mg、硼酸6.2 mg、二水合硫酸锰22.3 mg、七水合硫酸锌8.6 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025mg、六水合氯化钴0.025 mg、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg、七水合硫酸亚铁27.8 mg、肌醇100 mg、甘氨酸 2 mg、维生素B1 0.1 mg、维生素B6 0.5 mg、烟酸0.5 mg、2,4-D 1.0 mg-1.5mg、NAA 1.0 mg -2.0mg、6-BA 0.5 mg -1.5mg、琼脂8-12g、蔗糖20g-40g和余量的水组成,pH调整为5.8-6.0,分装后115℃灭菌30min,冷却至室温;
(2)取红豆杉当年生枝条,消毒方式为75%酒精浸泡0.5 min-1min、0.1%氯化汞浸泡8min -12min,蒸馏水洗净后切成1 cm左右的小段,斜插入红豆杉愈伤组织诱导培养基中,于23℃-25℃黑暗培养,待长出愈伤组织后将愈伤组织切下,于培养基中继代培养至10代以上,得到稳定生长的红豆杉愈伤组织;
步骤2:红豆杉细胞悬浮培养物的制备:
(1)制备红豆杉细胞悬浮培养基,按每升计算,由硝酸钾2500 mg、磷酸二氢钠150 mg 、无水氯化钙113.24 mg、硫酸铵134 mg、无水硫酸镁370mg 、乙二胺四乙酸二钠37.3 mg 、七水合硫酸亚铁27.8 mg、二水合硫酸锰10.0 mg、七水合硫酸锌2.0 mg、硼酸3.0 mg、二水合钼酸钠0.25 mg、五水合硫酸铜0.025 mg、六水合氯化钴0.025 mg、碘化钾0.75 mg 、维生素B110.0 mg 、维生素B61.0 mg、烟酸1.0 mg 、肌醇100.0 mg 、2,4-D0.3 mg-0.5 mg、NAA0.2mg-0.7 mg、6-KT1.0 mg-1.5 mg、蔗糖20g-40g和余量的水组成, pH调整为5.8-6.0,分装后121℃灭菌20min,冷却至室温;
(2)接入红豆杉愈伤组织,接种量为0.06-0.12g/mL,23℃-25℃悬浮培养18-21 d,无菌条件下收集培养物,100℃沸水浴10-15min,冷却至37℃以下;
步骤3:乳酸菌发酵液的制备:
分别选取如下按重量组分的原料:葡萄糖1%-1.5%、55%低聚果糖 0.5%-1%、乳糖 0.1-0.5%、食品级蛋白胨0.6%-1%、食品级碳酸氢钠 0.1%-0.2%、食品级吐温80 0.05%、琼脂0.008%-0.013%、番茄汁9.5%-14.2%、纯净水88.14%-81.42%,
将上述原料加热搅拌溶解,115℃灭菌30min,冷却至37℃以下,加入发酵剂0.0005%-0.002%,37℃-43℃发酵9-12h;
步骤4:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料混配:
分别选取如下按重量组分的原料:红豆杉细胞悬浮培养物1%-19%,乳酸菌发酵液72.4%-86.8%,低聚果糖0.5%-3%,白砂糖3%-5%,乳酸0.2%-0.6%,纯净水0-8.5%,
将上述红豆杉细胞悬浮培养物和乳酸菌发酵液混合,加入低聚果糖、白砂糖、乳酸、纯净水,边加边搅拌,使其充分混匀,37℃-43℃再次发酵4h;
步骤5:红豆杉低聚果糖乳酸菌活性饮料分装采用无菌条件下分装,2-8℃贮存。
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