CN108743624A - 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用 - Google Patents

植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108743624A
CN108743624A CN201810628781.7A CN201810628781A CN108743624A CN 108743624 A CN108743624 A CN 108743624A CN 201810628781 A CN201810628781 A CN 201810628781A CN 108743624 A CN108743624 A CN 108743624A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
pedv
virus
cell
epidemic diarrhea
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201810628781.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN108743624B (zh
Inventor
金梅林
杨丽
滑亚锋
康超
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Huazhong Agricultural University
Original Assignee
Huazhong Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Huazhong Agricultural University filed Critical Huazhong Agricultural University
Priority to CN201810628781.7A priority Critical patent/CN108743624B/zh
Priority to JP2020546913A priority patent/JP6968467B2/ja
Priority to PCT/CN2018/094559 priority patent/WO2019242046A1/zh
Publication of CN108743624A publication Critical patent/CN108743624A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN108743624B publication Critical patent/CN108743624B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/25—Lactobacillus plantarum

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明属于畜禽抗病毒微生态制剂技术领域，具体公开了植物乳杆菌ZN‑3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用。本发明中的植物乳杆菌菌体或发酵上清液，均能在一定程度上降低PEDV病毒对宿主细胞的感染活性，抑制PEDV病毒入侵对细胞的感染，本发明中植物乳杆菌ZN‑3菌体悬液的3种处理方式都对病毒有直接抑制作用；对于植物乳杆菌ZN‑3发酵上清，先加发酵上清后加PEDV稀释液、同时加发酵液和PEDV稀释液2种方式对病毒也有直接抑制作用，抑制率分别为32.08%、13.21%。植物乳杆菌菌体或pH7.0发酵上清液，对细胞无毒副作用，可有效用于预防和治疗猪的流行性腹泻。

Description

植物乳杆菌ZN-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的 药物中的应用
技术领域
本发明涉及畜禽抗病毒微生态制剂技术领域，特别涉及植物乳杆菌ZN-3在制备治疗及预防猪流行性腹泻病毒感染中的应用。
背景技术
肠道疾病是现代养猪业中普遍存在的问题，而腹泻类疾病在仔猪阶段比较易发，包括细菌性腹泻、病毒性腹泻，营养性腹泻、以及寄生虫引起的腹泻，其中病毒性腹泻发生率高、传播快、传播范围广、死亡率高，治疗效果不明显，主要以预防为主。特别是2010年至今不断爆发的猪流行性腹泻病毒(PEDV)，流行性腹泻是一种急性高度传染性疾病，主要表现出腹泻、呕吐、脱水等临床症状，在部分规模化猪场死亡率高达80％以上，是引起新生仔猪肠炎和死亡的重要原因，给养殖业造成重大的经济损失。
对于疾病来说，一般预防效果会好于治疗效果，特别是病毒性疾病，PEDV也不例外， PEDV具有严格的细胞趋性和宿主特异性。然而，由于病毒的遗传变异，有效的疫苗保护受到影响；抗病毒药物通常有严重的毒副作用，使用量和效果有限。因此，需要不断寻求可控制病毒性疾病的有效方法，益生菌因其无毒、无抗药性、无残留、抗菌、抗病毒、促生长、绿色安全的优点受到广泛关注。
乳酸类益生菌已被广泛用于预防及治疗人和动物胃肠道紊乱性疾病。乳酸菌能够耐受机体胃肠道酸碱环境，多为厌氧或兼性厌氧菌，能够在肠道上皮细胞定植。乳酸菌还可以产生乳酸，降低肠道内pH，抑制沙门氏菌、大肠杆菌等有害菌的入侵。Giang等(2010)在断奶仔猪日粮中添加屎肠球菌、嗜酸乳杆菌、戊糖片球菌、植物乳杆菌复合微生态制剂，与未添加空白对照组比较仔猪腹泻发生率下降。乳酸杆菌口服疫苗的作用效果也得到一些研究结果的证实，已有资料显示乳酸菌不仅有抗菌活性，还具有抗病毒活性。粘膜是许多细菌和病毒入侵感染机体的最主要途径，因此，粘膜免疫在预防这类感染中具有重要作用。通过粘膜途径的口服疫苗能够有效诱导机体潜在的体液免疫和粘膜免疫，是应对这类疾病的有效策略。研究报道(Van Niel等2002；张等2008)嗜酸乳杆菌能够作为轮状病毒疫苗的口服佐剂增强疫苗免疫效果。Kritas和Morrison(2007)也报道口服乳酸杆菌可以提高疫苗对PRRSV 病毒感染的保护效率，而且可以提高已感染PRRSV猪的日增重。Wang XN等(2017)使用干酪乳杆菌作为抗PEDV的口服疫苗载体，结果表明干酪乳杆菌能够有效诱导机体的粘膜免疫、体液免疫、Th2类型细胞免疫，预防PEDV对机体的感染及发病。此外，益生菌作为口服疫苗具有使用方便、安全、无免疫应激、经济效益高等优点。这些资料均证明，益生菌能够促进肠道黏膜免疫，可以作为预防和治疗肠道疾病的制剂，但是关于益生菌直接抗病毒活性的研究还处于起步阶段，特别是非基因工程改造的野生型菌株的抗病毒活性鲜有报道，关于植物乳杆菌对PEDV的抗病毒活性效果目前更是没有研究，本发明旨在通过研究获得对猪流行性腹泻病毒(PEDV)有抗病毒活性的益生菌。
发明内容
本发明的目的在于公开了植物乳杆菌ZN-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用，植物乳杆菌ZN-3可通过消化道进入肠道，抑制肠道病毒PEDV的入侵和增殖，有效预防和治疗流行性腹泻病毒引起的疾病。
为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：
植物乳杆菌ZN-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用，包括利用植物乳杆菌ZN-3制备成流行腹泻病毒(PEDV)的抑制剂，或是制备成流行腹泻病毒(PEDV) 感染的治疗药物或是预防药物；
以上所述的植物乳杆菌ZN-3的保藏编号为：CCTCC NO：M 2017286。
以上所述的应用中，所述的植物乳杆菌ZN-3包括植物乳杆菌ZN-3发酵液或发酵上清液。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
本发明中用益生菌植物乳杆菌ZN-3进行抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)对细胞感染，植物乳杆菌作为潜在的抗病毒微生态制剂与传统的抗病毒化学药物相比较具有如下优点：
1、无毒副作用、无残留、抗菌、抗病毒、促生长、绿色安全。
2、具有使用方便、安全、无免疫应激、经济效益高等优点
3、通过消化道进入肠道，抑制肠道病毒PEDV对细胞的入侵和增殖，有效预防和治疗流行性腹泻病毒引起的疾病。本发明中植物乳杆菌ZN-3菌体悬液的3种处理方式都对病毒有直接抑制作用，抑制率分别为28.30％、20.75％、22.64％；对于植物乳杆菌ZN-3发酵上清，先加发酵上清后加PEDV稀释液、同时加发酵液和PEDV稀释液2种方式对病毒也有直接抑制作用，抑制率分别为32.08％、13.21％。
4、本发明中的植物乳杆菌菌体或pH7.0发酵上清液，对细胞无毒副作用，且均能在一定程度上降低PEDV病毒对vero细胞的感染活性，抑制PEDV病毒对细胞的入侵和感染，预防和治疗猪的流行性腹泻。
5、益生菌的应用已经有十几年，虽然在临床上对消化道疾病的疗效已经得到一定程度的证实，而且益生菌对免疫功能的保护和增强作用及抗病毒作用也愈加受到关注，但其作用机理尚不清楚，本发明从细胞水平阐述益生性植物乳杆菌对流行腹泻病毒(PEDV)的抑制作用。
附图说明
图1为PEDV病毒在VERO细胞上增殖及病变示意图；
其中，左图：未感染PEDV细胞对照，右图：感染PEDV形成的病变。
图2为PEDV扩增病毒液PCR检测示意图；
其中，1号泳道为阳性对照；2、3、4号泳道为不同胰酶浓度(0、5、10ug/ml)增殖PEDV病毒样品；5号泳道为阴性对照；6、7、8为2、3、4样品重复；9号泳道为Maker。
图3为PEDV在96孔板TCID50测定中病变细胞与对照细胞示意图；
其中，左图：对照细胞；右图：病变细胞。
图4为植物乳杆菌对PEDV病毒的抑制作用示意图；
其中，左上图：正常对照细胞；右上图：先加ZN-3后加PEDV稀释液组；左下图：先加PEDV稀释液后加ZN-3组；右下图：病毒对照组。
具体实施方式
本发明实施例中试验方法和条件如无特别说明，均为常规方法。这些实施例仅用于说明本发明，本发明的保护范围不受这些实施例的限制。本发明所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。
实施例1：
植物乳杆菌ZN-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用：
(1)细胞培养：
VERO细胞用10％FBS的DMEM培养48小时左右传代；
细胞传代：传代时用0.25％的胰酶消化，约10分钟左右即可消化下来。具体步骤如下：
贴壁细胞用滴管或移液管吸去培养器皿中的旧培养液，用PBS溶液洗去残留的旧培养基；
向瓶内加入1-2ml消化液(0.25％胰酶)轻轻摇动培养瓶，使消化液流遍所有细胞表面；
在倒置显微镜下观察，当细胞收回突起变圆或细胞间隙增大后，应立即终止消化(吸除或倒掉消化液，加入少量的含血清的新鲜培养液，终止消化)；
用移液管吸取瓶内培养液，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，形成细胞悬液；
计数，分装到新培养瓶中，并补加一定量的含血清的新鲜培养液；
盖上瓶盖，适度拧紧后再稍回转，以利于CO2气体的进入，将培养瓶放回CO2培养箱。
(2)PEDV病毒增殖：
将消化好的Vero细胞接T75细胞培养瓶，放37℃5％CO2恒温培养箱培养至长出单层细胞；
将-80℃保存的PEDV病毒液(CV777)0.1ml接种到长有单层Vero细胞的培养瓶中，37℃5％CO2恒温培养箱孵育1h；
用移液器小心吸出病毒孵育液，加入10ml含2％FBS的DMEM细胞维持液，同时添加不同量的胰酶，最终浓度为0、5、10ug/ml胰酶，37℃5％CO2恒温培养箱培养48-72h；
每天观察细胞状态，80％以上细胞出现病变时收获病毒细胞增殖液；
病毒细胞增殖液反复冻融3次，4000rpm离心10min，收集上清病毒液-80℃保存备用。
病毒增殖产物RT-PCR检测：收集的病毒液扩增PEDV的M基因片段，对病毒增殖产物进行验证。PEDV病毒属于RNA病毒，需要做反转录PCR。
反转录体系如下(20ul)：
体系体积(ul)
5×AMV buffer5
反转录反应程序：42℃，60分钟；94℃，5分钟；4℃，10分钟。
基因扩增反应体系(25ul)如下：
体系体积
反应程序：94℃,3分钟；94℃，45秒、53℃，45秒、72℃，1分30秒、30个循环；72℃，10分钟；16℃，10分钟。
PDEV病毒液毒价测定：采用TCID50测定增殖的PEDV病毒液中病毒的滴度(TCID50/0.1ml)，具体步骤如下：
将消化好的Vero细胞接96孔板，放37℃5％CO2恒温培养箱培养至长出单层细胞；
在2ml无菌离心管中用DMEM将PEDV病毒液连续10倍稀释至10-6；
将稀释好的病毒液接种到长有单层Vero细胞的96孔板中，每一稀释度接种一纵排，共 8孔，每孔接种病毒量为100ul,第7、8纵排接无病毒的DMEM培养基做对照，37℃5％CO2 恒温培养箱孵育1h；
用移液器小心吸出病毒孵育液和DMEM培养基，加入100ul含2％FBS的DMEM细胞维持液，37℃5％CO2恒温培养箱培养120h；
每天观察并记录细胞病变(CPE)情况，按Reed-Muerch法计算PEDV病毒液的TCID50
由TCID50测定结果可知，胰酶浓度对PEDV在VERO细胞上的增殖有一定影响，在胰酶浓度5ug/ml条件下，病毒滴度最高为10-4.43/0.1ml。
(3)益生菌(植物乳杆菌ZN-3的保藏号编为CCTCC NO：M 2017286)菌液及其代谢产物的制备：
将平板复壮的植物乳杆菌ZN-3接种于150ml MRS液体培养基中，37℃培养24h，2400rpm离心10min，取上清并检测上清液的pH值，4℃保存备用。离心后的菌体沉淀用无菌PBS重悬，调整菌悬液浓度为109CFU/ml，4℃保存备用。
(4)益生菌及代谢产物的细胞毒性检测：
在96孔板中接种细胞悬液，培养至长出单层细胞；
取植物乳杆菌ZN-3的菌悬液及代谢产物，菌悬液10倍梯度稀释，选取107CFU/ml、108CFU/ml、109CFU/ml 3个梯度，代谢产物取发酵上清原液和用无菌NaOH调节至pH7.0 的发酵上清液；
不同处理各做一纵排，每孔加入100ul不同处理液，37℃，5％CO2培养箱中孵育90分钟；
孵育后分2种处理：
一种是弃掉孵育液后直接加入细胞维持液继续培养；
另一种是弃掉孵育液用PBS洗涤一次后加入细胞维持液继续培养，同时设立空白细胞对照和病毒对照；
每天观察细胞病变情况，当病毒对照组细胞CPE达到80％以上时，用MTT法测定细胞活性。
细胞毒性＝(对照组OD490－处理组OD490)/对照组OD490×100％
通过MTT法间接测定益生菌ZN-3或其代谢产物对VERO细胞的毒性作用，结果表明，107CFU/ml、108CFU/ml、109CFU/ml 3个梯度的菌悬液对VERO细胞均没有毒性作用，在孵育90min后弃掉孵育液，不用PBS洗涤直接加入维持液还可以在一定程度上(12％-14％) 促进细胞的生长，在孵育90min弃掉孵育液并用PBS洗涤后，107CFU/ml、108CFU/ml、109CFU/ml 3个梯度也有有一定程度促生长作用(2％-4％)；对于发酵上清，未调pH处理组，无论洗或不洗，细胞活性极显著下降(下降93％左右)，pH调至7.0的发酵上清，未洗涤组活性不受影响，洗涤组活性增加4.37％。基于此，在后续试验中分别选择108CFU/ml和pH 值调至7.0的发酵上清液测定益生菌及其代谢产物的病毒抑制作用。
(5)MTT法间接检测益生菌对PEDV病毒的抑制率：试验分为8组
1～2组分别用益生菌或其代谢产物预处理组，再接入病毒：益生菌或代谢产物先接种于细胞共培养90min，洗涤后以100TCID50/0.1ml的PEDV感染细胞，置培养箱中吸附90min，洗涤后加入细胞维持液，继续培养。
3～4组分别为益生菌或其代谢产物同时接入细胞：益生菌或其代谢产物与100TCID50/0.1ml PEDV等体积混合后加入长成单层的96孔培养板中，共培养90min，弃混合液并用PBS洗涤，加入细胞维持液继续培养。
5～6组分别为先加病毒感染细胞，在接入益生菌或其代谢产物：以100TCIC50/0.1ml PEDV感染细胞，培养箱中吸附90min后洗涤，在加入益生菌或其代谢产物，置温箱培养 90min后PBS洗涤，加入细胞维持液继续培养。
7组为病毒对照：100TCID50/0.1ml PEDV感染VERO细胞，置温箱中吸附90min后PBS洗涤，加入细胞维持液继续培养
8组为正常细胞对照。
病毒抑制率＝(益生菌处理组OD490－病毒对照组OD490)/(细胞对照组OD490－病毒对照组OD490)×100％
益生菌及其代谢产物在细胞水平对PEDV病毒的抑制作用结果：
分别用不同方式处理测定益生菌及其代谢产物对PEDV病毒的抑制作用，从实验结果可以得知，对于ZN-3菌悬液，3种处理方式都对病毒有抑制作用，抑制率分别为28.30％、20.75％、22.64％；对于发酵上清，先加发酵上清后加PEDV稀释液、同时加发酵液和PEDV 稀释液2种方式对病毒有抑制作用，抑制率分别为32.08％、13.21％；而先加PEDV稀释液，后加发酵上清液没有抑制作用。

Claims (3)

1.植物乳杆菌ZN-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用，所述植物乳杆菌ZN-3的保藏编号为：CCTCC NO：M 2017286。
2.植物乳杆菌ZN-3在制备猪流行性腹泻病毒抑制剂中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用，所述的植物乳杆菌ZN-3为植物乳杆菌ZN-3的菌悬液或发酵上清液。
CN201810628781.7A 2018-06-19 2018-06-19 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用 Active CN108743624B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810628781.7A CN108743624B (zh) 2018-06-19 2018-06-19 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用
JP2020546913A JP6968467B2 (ja) 2018-06-19 2018-07-04 豚流行性下痢ウイルス感染症の予防または治療のための医薬品の調製におけるラクトバチルスプランタラムｚｎ−３の使用
PCT/CN2018/094559 WO2019242046A1 (zh) 2018-06-19 2018-07-04 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810628781.7A CN108743624B (zh) 2018-06-19 2018-06-19 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN108743624A true CN108743624A (zh) 2018-11-06
CN108743624B CN108743624B (zh) 2020-06-09

Family

ID=63978876

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810628781.7A Active CN108743624B (zh) 2018-06-19 2018-06-19 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JP6968467B2 (zh)
CN (1) CN108743624B (zh)
WO (1) WO2019242046A1 (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110051701A (zh) * 2019-05-29 2019-07-26 中国农业大学 唾液乳杆菌在抑制猪流行性腹泻病毒增殖中的应用
CN110144307A (zh) * 2019-05-13 2019-08-20 华中农业大学 一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用
CN114984114A (zh) * 2022-06-06 2022-09-02 湖北武当动物药业有限责任公司 一种液态发酵中药微生态制剂及其在抗猪流行性腹泻病毒方面的应用
CN116139180A (zh) * 2022-10-12 2023-05-23 吉林农业大学 一种抗pedv的组合物、制剂及其制备方法和应用
CN117701475A (zh) * 2024-01-25 2024-03-15 江苏省农业科学院 一种猪源植物乳杆菌zhr8及其后生元

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117866858B (zh) * 2023-11-30 2024-06-21 吉林农业大学 一种表达猪轮状病毒抗原的重组植物乳杆菌及其应用
CN117695370B (zh) * 2023-12-19 2024-08-16 青岛市畜牧工作站(青岛市畜牧兽医研究所) 一种寡肽在制备猪流行性腹泻病毒抑制药物中的应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101656791B1 (ko) * 2016-05-19 2016-09-12 이우철 항바이러스 활성을 가지는 사료 첨가제 조성물
CN106754984A (zh) * 2016-12-13 2017-05-31 华中农业大学 表达猪流行性腹泻病毒s318基因的重组乳酸乳球菌及应用
CN107312726A (zh) * 2017-05-27 2017-11-03 武汉科缘生物发展有限责任公司 一株植物乳杆菌zn‑3及应用
CN107802651A (zh) * 2016-09-08 2018-03-16 潍坊华英生物科技有限公司 灭活乳酸菌在防治病毒性疾病药物中的应用
CN107961373A (zh) * 2017-11-14 2018-04-27 东北农业大学 一种用于预防猪流行性腹泻的基因工程亚单位口服疫苗株及其构建方法和用途

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108142641A (zh) * 2018-03-07 2018-06-12 余姚辉农农业科技有限公司 一种仔猪用天然酵素及包含该酵素的仔猪饲料

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101656791B1 (ko) * 2016-05-19 2016-09-12 이우철 항바이러스 활성을 가지는 사료 첨가제 조성물
WO2017200192A1 (ko) * 2016-05-19 2017-11-23 이우철 항바이러스 활성을 가지는 사료 첨가제 조성물
CN107802651A (zh) * 2016-09-08 2018-03-16 潍坊华英生物科技有限公司 灭活乳酸菌在防治病毒性疾病药物中的应用
CN106754984A (zh) * 2016-12-13 2017-05-31 华中农业大学 表达猪流行性腹泻病毒s318基因的重组乳酸乳球菌及应用
CN107312726A (zh) * 2017-05-27 2017-11-03 武汉科缘生物发展有限责任公司 一株植物乳杆菌zn‑3及应用
CN107961373A (zh) * 2017-11-14 2018-04-27 东北农业大学 一种用于预防猪流行性腹泻的基因工程亚单位口服疫苗株及其构建方法和用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HUANG KY 等: "Construction and immunogenicity analysis of Lactobacillus plantarum expressing a porcine epidemic diarrhea virus S gene fused to a DC-targeting peptide", 《VIRUS RES》 *
岳璐 等: "重组PEDV-S干酪乳杆菌的构建及其表达", 《黑龙江八一农垦大学学报》 *
杨丽 等: "一株植物乳杆菌ZN-3的筛选及应用", 《动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会论文集》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110144307A (zh) * 2019-05-13 2019-08-20 华中农业大学 一种抗肠出血性大肠杆菌的格氏乳杆菌及制备的禽用复合益生菌制剂及应用
CN110051701A (zh) * 2019-05-29 2019-07-26 中国农业大学 唾液乳杆菌在抑制猪流行性腹泻病毒增殖中的应用
CN114984114A (zh) * 2022-06-06 2022-09-02 湖北武当动物药业有限责任公司 一种液态发酵中药微生态制剂及其在抗猪流行性腹泻病毒方面的应用
CN114984114B (zh) * 2022-06-06 2023-12-29 湖北武当动物药业有限责任公司 一种液态发酵中药微生态制剂及其在抗猪流行性腹泻病毒方面的应用
CN116139180A (zh) * 2022-10-12 2023-05-23 吉林农业大学 一种抗pedv的组合物、制剂及其制备方法和应用
CN116139180B (zh) * 2022-10-12 2023-08-08 吉林农业大学 一种抗pedv的组合物、制剂及其制备方法和应用
CN117701475A (zh) * 2024-01-25 2024-03-15 江苏省农业科学院 一种猪源植物乳杆菌zhr8及其后生元
CN117701475B (zh) * 2024-01-25 2024-05-17 江苏省农业科学院 一种猪源植物乳杆菌zhr8及其后生元

Also Published As

Publication number Publication date
JP2021509118A (ja) 2021-03-18
CN108743624B (zh) 2020-06-09
JP6968467B2 (ja) 2021-11-17
WO2019242046A1 (zh) 2019-12-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108743624A (zh) 植物乳杆菌zn-3在制备治疗或预防猪流行性腹泻病毒感染的药物中的应用
CN107502575B (zh) 一株具有α-葡萄糖苷酶高抑制活性的植物乳杆菌
CN106282072B (zh) 一种复合乳酸菌微生态制剂及其制备方法与应用
CN109679882B (zh) 一株屎肠球菌dt1-1及其应用
CN113293113B (zh) 一株长双歧杆菌mi-186及其应用
CN109161509B (zh) 一株能防治牛羊腹泻病的菌株
CN106434411B (zh) 一种大熊猫源植物乳酸杆菌及应用
CN109576185B (zh) 一种具有抗流感能力的益生菌混合制剂及其应用
CN110495522B (zh) 一种饲料用中药微生态制剂
CN113293118B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌lr3001及其应用
CN113337431A (zh) 一株抑制幽门螺杆菌的罗伊氏乳杆菌nsl0501及其生物菌剂和应用
CN112574924A (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株及其微生态制剂和应用
CN112438998A (zh) 一种防治幽门螺杆菌感染的益生菌菌剂papch及其制备方法
CN112940985A (zh) 一种增强人体免疫力的鼠李糖乳杆菌制剂及其制备方法
CN114146100A (zh) 动物双歧杆菌乳亚种BLa80在制备抗轮状病毒感染致腹泻的药物或食物中的应用
CN117487766A (zh) 沙门氏菌噬菌体rdp-sa-17119及其应用
CN117305187B (zh) 一种改善肠道健康状况的乳酸片球菌及其应用
CN117004538B (zh) 一种罗伊氏粘液乳杆菌及应用
CN117431219A (zh) 耐高温型产气荚膜梭菌噬菌体及其应用
CN115786175B (zh) 一株粘膜乳杆菌及其用途
CN115975870B (zh) 一株具有抗猪流行性腹泻病毒功能的屎肠球菌及其应用
CN114015598B (zh) 分离自藏灵菇的乳酸片球菌及其在防治轮状病毒感染中的应用
CN113005066A (zh) 抗过敏、增加免疫力、降血糖、降脂减肥的复合双歧杆菌制剂及其制备方法
CN116162557B (zh) 一株葡萄牙棒孢酵母和用于防治反刍动物腹泻的中药微生态制剂及制备方法
CN117402794B (zh) 一种加氏乳杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant