CN108739371A

CN108739371A - 一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法

Info

Publication number: CN108739371A
Application number: CN201810289749.0A
Authority: CN
Inventors: 陈风雷
Original assignee: Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd
Current assignee: Hubei Xiang Yuan Ecological Agriculture Technology Co Ltd
Priority date: 2018-03-30
Filing date: 2018-03-30
Publication date: 2018-11-06

Abstract

本发明涉及一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法，包括以下步骤：（1）八月瓜腋芽采集与消毒；（2）接种；（3）分化培养；（4）生根壮苗培养；（5）炼苗移栽。本发明在对八月瓜进行接种之前对八月瓜腋牙进行清洗、消毒，以提高八月瓜腋牙接种的成功率，控制的温度、光照强度可使得八月瓜腋牙在短期内快速实现繁育，采用分化培养，并将分化出茎叶的八月瓜幼苗转接至生根壮苗培养基上，在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗，利用本方法培育繁殖的八月瓜腋牙繁殖系数高，个体健壮，根系发达，提高了成苗率高，能够保证果实成熟度和大小差别不大。

Description

一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法

技术领域

本发明涉及育苗技术领域，尤其涉及腋芽组培快繁育苗，具体为一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法。

背景技术

八月瓜是木通科木通属三叶木通的果实，别称牛腰子果、狗腰子、八月炸、九月炸等，因八月果熟开裂而得名，果形似香蕉，富含糖、维生素C和12种氨基酸，以及人体不能合成的缬基酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸等。果味香甜，为无污染的绿色食品，为无污染的绿色食品，有“土香蕉”之称，分布在贵州、湖南一带，其中以贵州铜仁、湖南张家界天子山景区、四川雅安石棉居多，农历八月瓜熟开口，索溪峪、杨家界等山麓谷地、林缘灌木丛中野生资源丰富。

八月瓜常绿木质藤本。茎与枝具明显的线纹，掌状复叶有小叶3-9片;叶柄稍纤细，长3.5-10厘米；小叶近革质光滑，卵形、卵状长圆形、狭披针形或线状披针形，长5.5-14厘米，宽(2.5) 3.5-5厘米，先端渐尖或尾状渐尖，基部圆或阔楔形，有时近截平，上面暗绿色，有光泽，下面淡绿色；侧脉每边5-6条，至近叶缘处网结，与中脉及纤细的网脉均于下面清晰凸起；小叶柄纤细，长2-4厘米，中间1枚最长。其入药具有疏肝理气、活血止痛、散结利尿的功效，用于脘胁胀痛、痛经经闭、痰核痞块、小便不利等症。八月瓜也可作为水果鲜食，具有极高的栽培价值。八月瓜目前的繁殖方式为：种子繁殖、分根繁殖和扦插繁殖。

1、种子繁殖：在9~10月八月瓜果实成熟时，摘下八月瓜果实，食用果肉，留下种子及时秋播。种子先用碱水搓洗，用清水漂洗干净，沥干水分，晒干，农历约11月沙藏50-70天，来年春季二月初及时撒播在已整理好的苗床内。种子繁殖简单易行，繁育出来的苗木结果迟，一般3年以后方能结果。生产上一般不采用。

2、埋条繁殖：八月瓜藤茎萌芽力强，选1~2年生枝蔓埋人土中，1个月后即可生根，一年四季均可繁殖。一般定植后第2年即可开花结实。

3、分根繁殖：分根繁殖在早春萌芽前进行。一兜多株的八月瓜用手从根部分成多株。在不剪断枝蔓的情况下，当年定植当前结果。

4、扦插繁殖：一年四季均可进行扦插。选择生长健壮，无病虫害的1~2年生枝蔓，剪成10厘米长的枝条，扦插到已整理好的苗床内，注意水渍、遮荫、防旱。

这些常规繁殖方式繁殖系数低、生根率较差、果实成熟度和大小不一致。

因此，寻找一种如何提高繁殖方式繁殖系数、生根率以及保持果实成熟度和大小一致的方法是目前亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法，以解决繁殖方式繁殖系数低，生根率较差，果实成熟度和大小不一致的问题。

为了实现以上目标，本发明通过以下的技术方案实现：（1）摘取优良无病虫害的八月瓜大树腋芽，取5—10厘米长，去掉幼叶。用流动的自来水冲洗3—5分钟，在70％酒精中浸泡30—40秒钟，用蒸馏水冲洗2—3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5—6次后备用；（2）在超净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中。芽痕高于培养基面3—5毫米，每管插1—3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25—28℃，以后光照时间每天可延长12—14小时，光照强度为1000—1500勒克斯。所述诱导培养基配方为:1/2MS+NAA0.1-0.2mg/L+KT0.2-0.5mg/L+BA0.1-0.3mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖，PH为5.5——5.8；（3）将诱导出的愈伤组织接入分化培养基中。培养基配方为：MS+NAA0.3-0.5mg/L+BA0.4-0.8mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖+15-20g/L马铃薯汁，PH为5.5——5.8。光照强度不变。培养10天，出现茎叶分化；（4）将分化出茎叶的八月瓜幼苗转接至生根壮苗培养基上。培养基配方为：MS+NAA0.8-1.0mg/L+BA0.2-0.4mg/L+6-7g/L琼脂粉+20g蔗糖+15-20g/L香蕉泥，PH为5.6。光照强度为2000-2500勒克斯。培养10一15天开始生根，30—35天可长成5.6片叶的小苗。在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗；（5）八月瓜试管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗。要求温度在20—25℃，经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4—5天。用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的腐殖土或粗砂里，浇透底水。棚内湿度保持在90％左右。10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000—5000勒克斯。15—20天后见幼叶变绿时，即可移植到大田，成活率达80％以上。如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明在对八月瓜进行接种之前对八月瓜腋牙进行清洗、消毒，以提高八月瓜腋牙接种的成功率，控制的温度、光照强度可使得八月瓜腋牙在短期内快速实现繁育，采用分化培养，并将分化出茎叶的八月瓜幼苗转接至生根壮苗培养基上，在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗，利用本方法培育繁殖的八月瓜腋牙繁殖系数高，个体健壮，根系发达，提高了成苗率高，能够保证果实成熟度和大小差别不大。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

一、操作器材：剪子、镊子、无菌培养皿、试管培养基、分化培养基、生根壮苗培养基。

二、操作过程：

1、八月瓜腋芽采集与消毒

在早春萌芽前，摘取优良无病虫害的八月瓜大树腋芽，取八月瓜腋芽其中5-10厘米长，将八月瓜腋芽的幼叶去掉后，先用流动的自来水冲洗3—5分钟，再将八月瓜腋芽放在70％酒精中浸泡30—40秒钟，浸泡结束后，使用蒸馏水冲洗2—3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5—6次后放入密封无菌培养皿中进行备用。

2、接种（茎段试管诱导培养）

在超净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中，芽痕高于培养基面3—5毫米，每管插1—3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25—28℃，以后光照时间每天可延长12—14小时，光照强度为1000—1500勒克斯。

3、分化培养

将诱导出的愈伤组织接入分化培养基中。光照强度为1000—1500勒克斯。培养10天，出现茎叶分化后，进行下一步操作。

4、生根壮苗培养

将分化出茎叶的八月瓜幼苗转接至生根壮苗培养基上。光照强度为2000-2500勒克斯。培养10一15天开始生根，30—35天可长成5.6片叶的小苗。在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗。

5、炼苗移栽

八月瓜试管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗。要求温度在20—25℃，经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4—5天。用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的腐殖土或粗砂里，浇透底水。棚内湿度保持在90％左右。10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000—5000勒克斯。15—20天后见幼叶变绿时，即可移植到大田，成活率达80％以上。如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。

三、操作注意事项：

1、试管培养基的配方为：1/2MS+NAA0.1-0.2mg/L+KT0.2-0.5mg/L+BA0.1-0.3mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖，PH为5.5——5.8；

2、分化培养基的配方为：MS+NAA0.3-0.5mg/L+BA0.4-0.8mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖+15-20g/L马铃薯汁，PH为5.5——5.8；

3、生根壮苗培养基的配方为：MS+NAA0.8-1.0mg/L+BA0.2-0.4mg/L+6-7g/L琼脂粉+20g蔗糖+15-20g/L香蕉泥，PH为5.6。

四、实验结果：

1、成活率达80％以上；

2、在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗。

尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）八月瓜腋芽采集与消毒：摘取优良无病虫害的八月瓜大树腋芽，取5—10厘米长，去掉幼叶；用流动的自来水冲洗3—5分钟，在70％酒精中浸泡30—40秒钟，用蒸馏水冲洗2—3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5—6次后备用；

（2）接种：在超净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中；芽痕高于培养基面3—5毫米，每管插1—3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25—28℃，以后光照时间每天可延长12—14小时，光照强度为1000—1500勒克斯；所述诱导培养基配方为:1/2MS+NAA0.1-0.2mg/L+KT0.2-0.5mg/L+BA0.1-0.3mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖，PH为5.5——5.8；

（3）分化培养：将诱导出的愈伤组织接入分化培养基中；培养基配方为：MS+NAA0.3-0.5mg/L+BA0.4-0.8mg/L+6-7g/L琼脂粉（纯度1400）+20g蔗糖+15-20g/L马铃薯汁，PH为5.5——5.8；光照强度不变；培养10天，出现茎叶分化；

（4）生根壮苗培养：将分化出茎叶的八月瓜幼苗转接至生根壮苗培养基上；培养基配方为：MS+NAA0.8-1.0mg/L+BA0.2-0.4mg/L+6-7g/L琼脂粉+20g蔗糖+15-20g/L香蕉泥，PH为5.6；光照强度为2000-2500勒克斯；培养10一15天开始生根，30—35天可长成5.6片叶的小苗；在适宜条件下，1年内一瓶八月瓜母种苗可繁殖数万株试管生根苗；

（5）炼苗移栽：八月瓜试管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗；要求温度在20—25℃，经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4—5天；用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的腐殖土或粗砂里，浇透底水；棚内湿度保持在90％左右；10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000—5000勒克斯；15—20天后见幼叶变绿时，即可移植到大田，成活率达80％以上；如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。