CN102986535B - 无籽刺梨种苗快速扩繁的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种植物无性繁殖苗木的方法，特别是一种无籽刺梨种苗快速扩繁的方法，按以下步骤进行：1.腋芽诱导启动培养阶段；2.腋芽快速增殖阶段，将伸长的腋芽切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段，接种于增殖培养基上，进行增殖培养，待小苗长高到4厘米以上后，再将小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段进行腋芽增殖诱导，重复2此过程便可进行无籽刺梨的大量扩繁；3.组培生根炼苗移栽阶段，将获得的增殖苗接种于生根培养基后，待根系长至2-3厘米后，洗净根上的培养基，移栽到炼苗基质（腐殖土：珍珠岩=5：1）中，成活后移至营养袋中。炼苗4个月后，可直接用于造林。该方法操作简单，增殖系数稳定，苗木质量有保证，可以有效地满足工厂化生产需求。

Description

无籽刺梨种苗快速扩繁的方法
技术领域
本发明属于植物组织培养中的一项苗木生产应用技术，主要是通过反复诱导无籽刺梨腋芽来进行快速培育组培苗的方法。
背景技术
无籽刺梨（Rosa sterilis）俗称搭钩刺梨，为贵州特有种，属蔷薇科攀援性多年生常绿灌木，高4-6m，生长强旺。小枝和叶柄紫红色，具稀少弯曲的皮刺，被灰白色绒毛。羽状复叶，具小叶7-9枚，小叶椭圆形或倒卵状椭圆形，长1.5-3.5厘米，宽1-2.5厘米，先端急尖或钝，基部近圆形，两侧不对称，两面无毛，托叶附生于叶柄上，披针形。花3-5朵组成伞房花序，顶生。果实扁球形，径约2厘米，灰棕色，疏被刺。成熟果暗橙黄色，果面皮刺基本脱落。由于无籽刺梨的雄蕊败育，几乎没有花粉，因此种子败育，无籽，故叫做无籽刺梨。无籽刺梨人工种植后，一般第三年便可挂果, 成熟的刺梨果肉肥厚、味酸甜, 其果实内含有丰富的维生素C，被称为“维C之王”，因其食补、药补功效明显，又被称为“延年果”，是加工保健食品的上等原料，具有多种医疗保健作用, 鲜食加工均宜。
此外，无籽刺梨生长快, 根系发达, 适宜山地造林, 特别是山区可作为重要的经济树种进行开发，有效带动当地百姓致富。由于无籽刺梨属野生资源, 分布范围窄, 资源较少, 无法通过种子繁殖, 所以自然繁殖较慢。采用传统的扦插方法进行无籽刺梨的种苗繁育，其繁殖速度相对较慢，需要的材料多；特别是对于优良无性系材料的扩繁，材料数量少，短时间内很难大量扩繁，不能有效的满足企业及种植户对优质种苗的需求，采用组培的方法其繁殖系数达3-4倍，有效解决了无籽刺梨优良材料快速扩繁的问题，从而使得优良无性系材料能够大面积推广，为高产奠定坚实的基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种遗传性状稳定、培养过程简单、易生根，移栽容易成活的无籽刺梨快速扩繁的方法。
本发明是一种无籽刺梨种苗快速扩繁的方法，按下列步骤实施：
（1）腋芽诱导的启动培养,选取优良的无籽刺梨的当年生嫩茎，将嫩茎先用流水冲洗10-15分钟后，剪成5cm长的茎段进行消毒，消毒采用75%的酒精和0.1%升汞组合消毒，酒精30秒，升汞8-12分钟,消毒后用无菌水冲洗3-4遍，用消毒过的滤纸吸干茎段上的水分，再将其切成带1个叶腋的茎段，斜插在腋芽启动培养基上，叶腋朝上，保证叶腋处能够得到充分的光照，启动培养基为MS+6-BA0.5-2.0mg/L+IBA0.1-0.3mg/L，10天后从叶腋处位置诱导出腋芽，继续培养,整个启动培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间；
（2）腋芽的增殖诱导,当腋芽长高成4厘米以上的小苗后，将其切成2厘米长的茎段，每段带1-3个叶腋，然后斜插在腋芽增殖培养基上，叶腋朝上，保证叶腋处能够得到充分的光照,增殖培养基为MS+ZT1.0-1.5mg/L+IBA0.05-0.1mg/L，15天后，诱导出腋芽，同时在腋芽基部会诱导出1-3个不定芽小苗，再经过30天的培养，待小苗长到4厘米高，再将小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段转到相同的腋芽增殖培养基上，经过45天的培养，诱导出来的小苗又可长高到4-5厘米，反复将高4-5厘米的小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段在增殖培养基上进行增殖培养，可以使得无籽刺梨进行快速大量的扩繁，其增殖倍数为3-4倍,整个腋芽增殖培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间；
（3）无籽刺梨组培苗的生根，将长高到4厘米的小苗转接到生根培养基上，生根培养基为1/2MS+IBA0.01-0.05mg/L +IAA0.01-0.05mg/L，15天后可生根，得到无籽刺梨生根苗，生根率达95%以上，整个生根培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间；
（4）无籽刺梨生根苗的清洗及移栽：当无籽刺梨生根苗的根长到2厘米以上后,直接取出生根苗，洗净沾附在根部的培养基，之后进行炼苗移栽，移栽基质配比为按体积比腐殖土：珍珠岩=5：1,移栽后注意棚内控温控湿，温度控制在25-30度之间，湿度在80%以上，15天后成活，成活率达90%以上，成活后移至10cm×10cm的营养袋中，移栽基质为按体积比腐殖土：珍珠岩=5：1。
该方法结合了组培技术及扦插技术，利用在组培过程中的无菌环境，采用微型扦插的方法，首先从无籽刺梨的叶腋处诱导出腋芽，不必经过脱分化和再分化，当试管苗长大伸长后，将其剪成带1叶或2叶的茎段，一定时间后腋芽萌发，同时腋芽也会萌生出1-2个小芽，之后茎伸长，下端不生根。尔后再将茎切成小段，利用腋芽萌发成植株，这样周而复始继代培养繁殖苗木。该方法和扦插繁殖一样，不过是在无菌条件下的试管内进行，由于没有经过脱分化和再分化阶段，每次转苗可增加2-4倍。它具有遗传性状稳定、培养过程简单、易生根，移栽容易成活的优点。
具体实施方式
实施例1：实施时间为2012年，无籽刺梨组培苗批量生产在昆明美兰花卉种苗有限责任公司进行。
按下列步骤实施：
（1）腋芽诱导的启动培养，于2012年3月选取优良的无籽刺梨的当年生嫩茎，启动培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L，消毒后共接种2000瓶，每瓶接种1个叶腋，茎段长度2厘米。10天后从叶腋处位置诱导出腋芽，去除污染后，腋芽诱导率90%以上，20天后腋芽长至4厘米以上，进行一下步操作。启动培养条件为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间。
（2）腋芽的增殖诱导，当腋芽长高到4厘米以上后，将其再切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段，接种于增殖培养基上，增殖培养基为MS+ZT1.0mg/L+IBA0.05mg/L。培养15天后，在诱导出腋芽的同时，在腋芽基部会诱导出2个不定芽小苗，待小苗长到4厘米以上后，再将小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段转到相同的增殖培养基上，重复腋芽的增殖培养过程，使得无籽刺梨进行快速大量的扩繁,其增殖系数为3。培养条件为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间。
（3）无籽刺梨组培苗的生根。2012年10月开始对小苗进行生根，生根培养基为1/2MS+IBA0.01mg/L +IAA0.01mg/L，15天后生根率达98%以上，培养条件为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间。
（4）无籽刺梨生根苗的清洗及移栽：当根长到2厘米以上后,直接取出生根苗，洗净后进行炼苗移栽，棚内温度控制在25-30度之间，湿度在80%以上，15天后小苗开始生长，成活率达99%以上，1个月后，转到营养袋中，营养袋规格为10cm×10cm,再养护3个后，苗高20厘米以上，进行上山造林。

Claims (1)

1.一种无籽刺梨种苗快速扩繁的方法，包括腋芽诱导、组培苗生根、生根苗移栽步骤，其特征在于具体是： （1）腋芽诱导的启动培养,选取优良的无籽刺梨的当年生嫩茎，将嫩茎先用流水冲洗10-15分钟后，剪成5cm左右的茎段进行消毒，消毒采用75%酒精和0.1%升汞组合消毒，酒精30秒，升汞8-12分钟,消毒后用无菌水冲洗3-4遍，用消毒过的滤纸吸干茎段上的水分，再将其切成带1个叶腋的茎段，斜插在腋芽启动培养基上，叶腋朝上，保证叶腋处能够得到充分的光照，启动培养基为MS+6-BA0.5-2.0mg/L+IBA0.1-0.3mg/L，10天后从叶腋处位置诱导出腋芽，继续培养,整个启动培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间； （2）腋芽的增殖诱导,当腋芽长高成4厘米以上的小苗后，将其切成2厘米长的茎段，每段带1-3个叶腋，然后斜插在腋芽增殖培养基上，叶腋朝上，保证叶腋处能够得到充分的光照,增殖培养基为MS+ZT1.0-1.5mg/L+IBA0.05-0.1mg/L，15天后，诱导出腋芽，同时在腋芽基部会诱导出1-3个不定芽小苗，再经过30天的培养，小苗可长到4厘米高，之后再将小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段转到相同的腋芽增殖培养基上，经过45天的培养，诱导出来的小苗又可长高到4-5厘米，反复将高4-5厘米的小苗切成2厘米长带1-3个叶腋的茎段在增殖培养基上进行增殖培养，其增殖倍数为3-4倍,整个腋芽增殖培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间； （3）无籽刺梨组培苗的生根，将长高到4厘米的小苗转接到生根培养基上，生根培养基为1/2MS+IBA0.01-0.05mg/L +IAA0.01-0.05mg/L，15天后可生根，得到无籽刺梨生根苗，整个生根培养的条件均为光强1000-2000Lux，光照时间12小时/天，温度在23-26℃间； （4）无籽刺梨生根苗的清洗及移栽：当无籽刺梨生根苗的根长到2厘米以上后,直接取出生根苗，洗净粘附在根部的培养基，之后进行炼苗移栽，移栽基质配比按体积比为腐殖土：珍珠岩=5：1,移栽后注意棚内控温控湿，温度控制在25-30℃之间，湿度在80%以上，15天后成活，成活后移至10cm×10cm的营养袋中，移栽基质为按体积比腐殖土：珍珠岩=5：1。
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