CN112772166A - 一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，通过如下步骤繁殖而成：步骤一、选取枝条并剪成9～13cm，并留有一片叶子和一个芽点，步骤二、培养用品处理，步骤三、插穗处理，将滤纸铺设在培养皿的内底面上，苦瓜插穗平放至滤纸上，在基部上盖柔软吸水纸，加入超纯水；步骤四、插穗生根培养，生出不定根；步骤五、移栽与炼苗，步骤六、定植，待步骤五苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至1cm以上，苦瓜插穗的不定根抱紧基质土时，定植至大田获得再生苦瓜植株。本发明的方法，其可促进苦瓜插穗快速生根，形成的不定根数量多且根系发达，有效提高了苦瓜枝条扦插成活率，大大缩短了苦瓜无性繁殖的周期，显著提高苦瓜繁殖系数和育种效率。
Description
技术领域
本发明涉及农作物的繁殖方法，特别涉及一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法。
背景技术
苦瓜(Momordica charantia L.)起源于东南亚的热带地区，广泛分布于热带、亚热带及温带地区，在中国、印度、东南亚等地栽培历史悠久。随着人们对其营养价值和多种食疗功效的深入认识，苦瓜市场需求逐年增加，栽培面积逐年扩大。
苦瓜单瓜种子数少，平均单瓜种子数一般在30粒左右，繁殖系数远低于南瓜、丝瓜、黄瓜等其他葫芦科蔬菜，且苦瓜枝条扦插生根较困难，成活率低，制约着苦瓜优异种质资源的保存与利用。目前，针对苦瓜无性繁殖的操作是：一、无菌实生苗的获得，二、芽增殖操作，三、生根培养，四、试管苗移栽，整个操作主要集中在顶芽组织培养，操作步骤繁琐，仪器设备要求较高，繁殖周期较长，不适合大范围推广。
有鉴于此，本发明人对上述问题进行深入研究，遂由本案产生。
发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简易，提高苦瓜扦插成活率，缩短苦瓜无性繁育周期的苦瓜枝条离体快速繁殖的方法。
为实现上述目的，本发明采用这样的技术方案：
一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，通过如下步骤繁殖而成：
步骤一、选植珠，选取苦瓜植株上生长健壮、无病斑的主蔓或强壮的侧蔓作为枝条，且枝条剪成9～13cm，并留有一片叶子和一个芽点，剪好的枝条进行消毒处理，得到苦瓜插穗；
步骤二、培养用品处理，选取已高压灭菌处理的培养用品，上述培养用品包括直径为15cm的培养皿、与培养皿的直径相匹配的滤纸、呈正方形的柔软吸水纸和超纯水，
步骤三、插穗放置，将上述滤纸铺设在培养皿的内底面上，再将步骤一的苦瓜插穗平放至滤纸上，之后在苦瓜插穗的基部上盖一层柔软吸水纸，最后，往培养皿中加入8～15ml的上述超纯水，且柔软吸水纸和滤纸充分吸收水份，培养皿中不积水；
步骤四、插穗生根培养，将经步骤三后的培养皿放置于人工气候箱中恒温培养，9～12天后培养皿内的苦瓜插穗生出不定根；
步骤五、移栽与炼苗，待步骤四中苦瓜插穗的不定根长至3cm 以上时移栽至具有栽培基质土的营养杯中，并置于人工气候箱中进行炼苗，炼苗时，先用薄膜覆盖3天，且薄膜内的环境湿度在95％以上， 3天后揭开薄膜进行常规培养；
步骤六、定植，待步骤四的苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至 1cm以上，苦瓜插穗的不定根抱紧基质土时，定植至大田获得再生苦瓜植株。
上述步骤一中对剪好的枝条的消毒处理方法为：先用浓度为75％的酒精浸泡消毒20～30s，之后无菌水冲洗2～3次，再用浓度为2％的次氯酸钠浸泡消毒8～10min，之后无菌水冲洗3～4次，即完成枝条的消毒。
上述步骤二中培养用品的高压灭菌处理方法为：将培养用品放置在121℃、103kPa的高压灭菌锅内灭菌30min即可。
在步骤四中培养皿放在温度25～28℃，光照强度70～80μmol ·m-2·s-1，相对湿度为75％～80％环境下的人工气候箱中培养。
在步骤五中营养杯放置在昼温25～28℃，夜温18～20℃，光周期为12h，光照强度180～200μmol·m-2·s-1，相对湿度75％～80％环境下的人工气候箱中炼苗。
上述柔软吸水纸为面巾纸。
采用上述技术方案后，本发明的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，在繁殖过程中苦瓜插穗在无菌环境下能避免常规扦插操作中苦瓜插穗易受菌类感染的风险，且在人工气候室内培养能有效控制环境的温度和湿度，有利用苦瓜插穗的快速生根，插穗培养7-9天后枝条切口能形成愈伤组织，9-12天枝条切口能形成不定根，形成的不定根数量多且根系发达，有效提高了苦瓜枝条扦插成活率，每代苦瓜扦插苗的繁殖仅需15-25天，大大缩短了苦瓜无性繁殖的周期，显著提高苦瓜繁殖系数和育种效率，对苦瓜繁殖培育起到十分重要的意义。
附图说明
图1为枝条在圆形培养皿内放置的示意图；
图2为苦瓜插穗基部形成愈伤组织的示意图；
图3为苦瓜插穗基部产生不定根的示意图；
图4为苦瓜插穗的炼苗示意图；
图5为苦瓜插穗生出侧芽的示意图；
图6为苦瓜插穗的不定根会抱紧基质土的示意图；
图7为苦瓜插穗在大田的定植示意图。
具体实施方式
为了进一步解释本发明的技术方案，下面通过具体实施例来对本发明进行详细阐述。
实施例一：
一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，实施例一，通过如下步骤繁殖而成：
步骤一、选植株，选取苦瓜植株上生长健壮、无病斑的主蔓或强壮的侧蔓作为枝条，且枝条剪成12cm，并留有一片叶子和一个芽点，剪好的枝条进行消毒处理，消毒时，先用浓度为75％的酒精浸泡消毒 30s，之后无菌水冲洗2～3次，再用浓度为2％的次氯酸钠浸泡消毒8～ 10min，之后无菌水冲洗3～4次，即完成枝条的消毒，最终得到苦瓜插穗；
步骤二、培养用品处理，
选取已高压灭菌处理的培养用品，培养用品包括直径为15cm的圆形培养皿、直径为15cm的圆形滤纸、5×5cm的正方形的柔软吸水纸和超纯水，柔软吸水纸为面巾纸，培养用品的高压灭菌处理方法为：将培养用品放置在121℃、103kPa的高压灭菌锅内灭菌30min即可；
步骤三、插穗放置，将圆形滤纸铺设在圆形培养皿的内底面上，再将步骤一的苦瓜插穗平放至滤纸上，且苦瓜插穗的叶子朝上设置，之后在苦瓜插穗的基部(即切口处)上盖一层面巾纸，苦瓜插穗的叶子处于面巾纸外，最后，往圆形培养皿中加入12ml的超纯水，且滤纸和面巾纸充分吸足水分，圆形培养皿中不积水，插穗放置完成，如图1所示；
步骤四、插穗生根培养，将经步骤三后的培养皿放置于在温度 26℃，光照强度75μmol·m-2·s-1，相对湿度为78％环境下的人工气候箱中恒温培养，7天后培养皿内的苦瓜插穗基部(即切口处)开始形成愈伤组织，如图2所示，继续培养2天后愈伤组织产生出不定根，如图3所示；
步骤五、移栽与炼苗，待步骤四中苦瓜插穗的不定根长至3cm以上时移栽至具有栽培基质土的营养杯中，营养杯的直径为8cm，栽培基质土由泥炭、蛭石和珍珠岩混合而成，且泥炭、蛭石和珍珠岩的体积比为7：2：1，并置于在昼温27℃，夜温19℃，光周期为12h，光照强度180μmol·m-2·s-1，相对湿度80％环境下的人工气候箱中进行炼苗，炼苗时，先用薄膜覆盖3天，且薄膜内的环境湿度在95％以上， 3天后揭开薄膜进行常规培养，如图4所示；
步骤六、定植，待步骤五的苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至1cm 以上，苦瓜插穗的不定根会抱紧基质土如图5、6所示，之后定植至大田获得再生苦瓜植株，如图7所示。
本发明的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，本发明的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，在繁殖过程中苦瓜插穗在无菌环境下能避免了常规扦插操作中苦瓜插穗易受菌类感染的风险，且在人工气候室内培养能有效控制环境的温度和湿度，有利用苦瓜插穗的快速生根，插穗培养7-9天后枝条切口能形成愈伤组织，9-12天枝条切口能形成不定根，形成的不定根数量多且根系发达，有效提高了苦瓜枝条扦插成活率，每代苦瓜扦插苗的繁殖仅需15-25天，大大缩短了苦瓜无性繁殖的周期，显著提高苦瓜繁殖系数和育种效率，对苦瓜繁殖培育起到十分重要的意义。
实施例二：
一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，实施例二，通过如下步骤繁殖而成：
步骤一、选植株，选取苦瓜植株上生长健壮、无病斑的主蔓或强壮的侧蔓作为枝条，且枝条剪成10cm，并留有一片叶子和一个芽点，剪好的枝条进行消毒处理，消毒时，先用浓度为75％的酒精浸泡消毒 25s，之后无菌水冲洗2～3次，再用浓度为2％的次氯酸钠浸泡消毒8～ 10min，之后无菌水冲洗3～4次，即完成枝条的消毒，最终得到苦瓜插穗；
步骤二、培养用品处理，
选取已高压灭菌处理的培养用品，培养用品包括直径为15cm的圆形培养皿、直径为15cm的圆形滤纸、5×5cm的正方形的面巾纸和超纯水，培养用品的高压灭菌处理方法为：将培养用品放置在121℃、 103kPa的高压灭菌锅内灭菌30min即可；
步骤三、插穗放置，将圆形滤纸铺设在圆形培养皿的内底面上，再将步骤一的苦瓜插穗平放至滤纸上，且苦瓜插穗的叶子朝上设置，之后在苦瓜插穗的基部(即切口处)上盖一层面巾纸，苦瓜插穗的叶子处于面巾纸外，最后，往圆形培养皿中加入10ml的超纯水，滤纸和面巾纸充分吸足水分，且圆形培养皿中不积水；
步骤四、插穗生根培养，将经步骤三后的培养皿放置于在温度 28℃，光照强度80μmol·m-2·s-1，相对湿度为80％环境下的人工气候箱中恒温培养，7天后培养皿内的苦瓜插穗基部(即切口处)开始形成愈伤组织，继续培养2天后愈伤组织产生出不定根；
步骤五、移栽与炼苗，待步骤四中苦瓜插穗的不定根长至3cm以上时移栽至具有栽培基质土的营养杯中，营养杯的直径为8cm，栽培基质土由泥炭、蛭石和珍珠岩混合而成，且泥炭、蛭石和珍珠岩的体积比为7：2：1，并置于在昼温28℃，夜温20℃，光周期为12h，光照强度200μmol·m-2·s-1，相对湿度80％环境下的人工气候箱中进行炼苗，炼苗时，先用薄膜覆盖3天，且薄膜内的环境湿度在95％以上， 3天后揭开薄膜进行常规培养；
步骤六、定植，待步骤五的苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至1cm 以上，苦瓜插穗的不定根会抱紧基质土，之后定植至大田获得再生苦瓜植株。
实施例三：
一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，实施例三，通过如下步骤繁殖而成：
步骤一、选植株，选取苦瓜植株上生长健壮、无病斑的主蔓或强壮的侧蔓作为枝条，且枝条剪成11cm，并留有一片叶子和一个芽点，剪好的枝条进行消毒处理，消毒时，先用浓度为75％的酒精浸泡消毒 25s，之后无菌水冲洗2～3次，再用浓度为2％的次氯酸钠浸泡消毒8～ 10min，之后无菌水冲洗3～4次，即完成枝条的消毒，最终得到苦瓜插穗；
步骤二、培养用品处理，选取已高压灭菌处理的培养用品，培养用品包括直径为15cm的圆形培养皿、直径为15cm的圆形滤纸、 5×5cm的正方形的面巾纸和超纯水，培养用品的高压灭菌处理方法为：将培养用品放置在121℃、103kPa的高压灭菌锅内灭菌30min即可；
步骤三、插穗放置，将圆形滤纸铺设在圆形培养皿的内底面上，再将步骤一的苦瓜插穗平放至滤纸上，且苦瓜插穗的叶子朝上设置，之后在苦瓜插穗的基部(即切口处)上盖一层面巾纸，苦瓜插穗的叶子处于柔软吸水纸外，最后，往圆形培养皿中加入10ml的超纯水，滤纸和面巾纸充分吸足水分，且圆形培养皿中不积水；
步骤四、插穗生根培养，将经步骤三后的培养皿放置于在温度 27℃，光照强度78μmol·m-2·s-1，相对湿度为79％环境下的人工气候箱中恒温培养，9天后培养皿内的苦瓜插穗基部(即切口处)开始形成愈伤组织，继续培养3天后愈伤组织产生出不定根；
步骤五、移栽与炼苗，待步骤四中苦瓜插穗的不定根长至3cm以上时移栽至具有栽培基质土的营养杯中，营养杯的直径为8cm，栽培基质土由泥炭、蛭石和珍珠岩混合而成，且泥炭、蛭石和珍珠岩的体积比为7：2：1，并置于在昼温28℃，夜温20℃，光周期为12h，光照强度185μmol·m-2·s-1，相对湿度79％环境下的人工气候箱中进行炼苗，炼苗时，先用薄膜覆盖3天，且薄膜内的环境湿度在95％以上， 3天后揭开薄膜进行常规培养；
步骤六、定植，待步骤五的苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至1cm 以上，苦瓜插穗的不定根会抱紧基质土，之后定植至大田获得再生苦瓜植株。
上述实施例并非限定本发明的方式，任何所属技术领域的普通技术人员对其所做的适当变化或修饰，皆应视为不脱离本发明的专利范畴。
Claims (7)
1.一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于，通过如下步骤繁殖而成：
步骤一、选植株，选取苦瓜植株上生长健壮、无病斑的主蔓或强壮的侧蔓作为枝条，且枝条剪成9～13cm，并留有一片叶子和一个芽点，剪好的枝条进行消毒处理，得到苦瓜插穗；
步骤二、培养用品处理，选取已高压灭菌处理的培养用品，上述培养用品包括直径为15cm的培养皿、与培养皿的直径相匹配的滤纸、呈正方形的柔软吸水纸和超纯水，
步骤三、插穗放置，将上述滤纸铺设在培养皿的内底面上，再将步骤一的苦瓜插穗平放至滤纸上，之后在苦瓜插穗的基部上盖一层柔软吸水纸，最后，往培养皿中加入8～15ml的上述超纯水，且柔软吸水纸和滤纸充分吸收水份，培养皿中不积水；
步骤四、插穗生根培养，将经步骤三后的培养皿放置于人工气候箱中恒温培养，9～12天后培养皿内的苦瓜插穗生出不定根；
步骤五、移栽与炼苗，待步骤四中苦瓜插穗的不定根长至3cm以上时移栽至具有栽培基质土的营养杯中，并置于人工气候箱中进行炼苗，炼苗时，先用薄膜覆盖3天，且薄膜内的环境湿度在95％以上，3天后揭开薄膜进行常规培养；
步骤六、定植，待步骤四的苦瓜插穗的叶片基部的侧芽伸长至1cm以上，苦瓜插穗的不定根抱紧基质土时，定植至大田获得再生苦瓜植株。
2.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：上述步骤一中对剪好的枝条的消毒处理方法为：先用浓度为75％的酒精浸泡消毒20～30s，之后无菌水冲洗2～3次，再用浓度为2％的次氯酸钠浸泡消毒8～10min，之后无菌水冲洗3～4次，即完成枝条的消毒。
3.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：上述步骤二中培养用品的高压灭菌处理方法为：将培养用品放置在121℃、103kPa的高压灭菌锅内灭菌30min即可。
4.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：在步骤四中培养皿放在温度25～28℃，光照强度70～80μmol·m-2·s-1，相对湿度为75％～80％环境下的人工气候箱中培养。
5.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：在步骤五中营养杯放置在昼温25～28℃，夜温18～20℃，光周期为12h，光照强度180～200μmol·m-2·s-1，相对湿度75％～80％环境下的人工气候箱中炼苗。
6.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：上述柔软吸水纸为面巾纸。
7.根据权利要求1所述的一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法，其特征在于：在步骤五中栽培基质土由泥炭、蛭石和珍珠岩混合而成，且泥炭、蛭石和珍珠岩的体积比为7：2：1。
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|---|---|---|---|---|
| CN104322370A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-02-04 | 广州市农业科学研究院 | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 |
| CN108739371A (zh) * | 2018-03-30 | 2018-11-06 | 湖北襄草源生态农业科技有限公司 | 一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法 |
-
2021
- 2021-01-18 CN CN202110061580.5A patent/CN112772166A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104322370A (zh) * | 2014-10-23 | 2015-02-04 | 广州市农业科学研究院 | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 |
| CN108739371A (zh) * | 2018-03-30 | 2018-11-06 | 湖北襄草源生态农业科技有限公司 | 一种八月瓜腋芽组培快繁育苗的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
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| 王国莉;李希陶;: "苦瓜离体再生体系建立的研究" * |
| 胡繁荣;罗军;: ""碧绿"苦瓜扦插栽培技术" * |
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| 高安辉等: "苦瓜栽培种和野生种的繁殖比较试验及野生苦瓜繁殖技术研究" * |
| 高燕;姜艳;李薇莎;李桂琳;李泽生;杨燕芳;: "木鳖子茎蔓无菌培养及植株再生研究" * |
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