CN104322370A - 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 - Google Patents
一种苦瓜离体快速繁殖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104322370A CN104322370A CN201410572618.5A CN201410572618A CN104322370A CN 104322370 A CN104322370 A CN 104322370A CN 201410572618 A CN201410572618 A CN 201410572618A CN 104322370 A CN104322370 A CN 104322370A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- balsam pear
- medium
- explant
- bitter gourd
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明公开了一种苦瓜离体快速繁殖的方法，通过对获取的大田栽培的苦瓜苗顶芽或腋芽作为外植体，接种于MS+6-BA的培养基中，诱导出芽后，切取诱导出的芽接种于MS+6-BA的培养基中，使芽增殖并伸长，取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA的生根培养基中，10d左右即可出现不定根，在生根培养基中培养25d左右有大量不定根产生，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。本发明技术方法使苦瓜苗的繁殖速度加快，每代苦瓜苗的繁殖只需要1～2个月时间，为加快培育苦瓜新品种提供了技术支持。
Description
技术领域
本发明属于农业栽培技术领域，具体涉及一种苦瓜离体快速繁殖的方法。
背景技术
苦瓜又名凉瓜，学名Momordica charantia L.是葫芦科苦瓜属蔬菜作物，因其具有明显的降血糖、降血脂、抗炎、抑制组织癌细胞生长、利尿活血和消炎退热等药理作用，越来越受到人们的喜爱。作为一种蔬菜作物和药用植物，苦瓜有着重要的研究价值,对其进行抗病、延迟成熟和品质改良的研究具有重要的理论和实践意义。然而目前苦瓜栽培依赖于种子育苗，具有繁种成本高、育苗速度慢、成苗率低等缺点，育成一个新的苦瓜品种更是需要5年以上的时间，优良品种种子供不应求，价格昂贵。
目前关于苦瓜的研究主要集中在大田栽培方法、遗传多样性、苦瓜营养价值和药用价值等方面，有关组织培养方面国内外曾做了一些研究工作，但进展不显著。关于快速繁殖研究主要停留在取无菌苗的胚轴或子叶为外植体或由外植体诱导出愈伤组织再诱导出芽进行离体再生繁殖，总的来看，苦瓜外植体易于形成愈伤组织而再生不定芽较困难。此外，不同研究者所得的结论差异较大,可重复性差。目前还缺乏对采用苦瓜大田正常植株顶芽或腋芽作为外植体进行组织培养技术的研究，这一研究的成功再应用于苦瓜杂交育种，将能大大缩短苦瓜杂交育种的年限，有力推动现代生物技术在苦瓜上的应用。
发明内容
本发明旨在提供一种苦瓜离体快速繁殖的方法，该技术目的在于解决苦瓜杂交育种时亲本需要反复纯化、耗时长的问题。
本发明通过以下技术方案实现：
一种苦瓜离体快速繁殖的方法，包含以下步骤：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的顶芽或腋芽作为外植体，并进行处理；
2)将消毒好的外植体接种于MS+6-BA的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，十天后诱导出芽；
3)切取诱导出的芽接种于MS+6-BA的培养基中，使芽增殖并伸长；
4)取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA的生根培养基中，15d左右出现不定根；
5)在生根培养基中培养25d后产生大量不定根，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
本发明步骤(1)对顶芽或腋芽的处理方法为：用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7～10min，无菌水冲洗6～8次，切去伤口部位后用无菌纸巾吸干表面水分；
本发明步骤(2)中培养基中6-BA的浓度为0.5～1mg/L；
本发明步骤(3)中培养基中6-BA的浓度为1.0～2.0mg/L；
本发明步骤(4)所述的生根培养基中IAA的浓度为0.5～1.0mg/L。
本发明的有益效果为：1)繁殖速度快，通常育成一个苦瓜品种需要5年以上，而应用高效的苦瓜离体快繁技术结合田间杂交技术选育苦瓜新品种只需1至2年时间；2)已建立的苦瓜组织培养体系多是采用消毒后的种子萌发几天后的胚轴或子叶等作为外植体，现有的苦瓜组培体系无法将大田中具有优良性状的苦瓜品种保留下来，为苦瓜的离体繁殖提供了技术基础，具有开拓创新的意义。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
实施例1
一种苦瓜离体快速繁殖的方法，通过以下步骤完成：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的顶芽作为外植体，用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7-10min，无菌水冲洗6～8次，切去伤口部位后用纸巾吸干表面水分；
2)将消毒好的顶芽外植体接种于MS+6-BA0.5mg/L的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，10d后诱导出芽；
3)切取诱导出的芽接种于MS+6-BA1.0mg/L的培养基中，使芽增殖并伸长；
4)取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA0.5mg/L的生根培养基中，15d左右即可出现不定根；
5)在生根培养基中培养25d左右有大量不定根产生，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
实施例2
一种苦瓜离体快速繁殖的方法，通过以下步骤完成：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的腋芽作为外植体，用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7-10min，无菌水冲洗6～8次，切去伤口部位后用纸巾吸干表面水分；
2)将消毒好的腋芽外植体接种于MS+6-BA0.8mg/L的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，10d后诱导出芽；
3)切取诱导出的芽接种于MS+6-BA1.5mg/L的培养基中，使芽增殖并伸长；
4)取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA0.8mg/L的生根培养基中，10d左右即可出现不定根；
5)在生根培养基中培养20d左右有大量不定根产生，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
实施例3
一种苦瓜离体快速繁殖的方法，通过以下步骤完成：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的腋芽作为外植体，用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7-10min，无菌水冲洗6～8次，切去伤口部位后用纸巾吸干表面水分；
2)将消毒好的腋芽外植体接种于MS+6-BA1.0mg/L的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，十天后诱导出芽；
3)切取诱导出的芽接种于MS+6-BA2.0mg/L的培养基中，使芽增殖并伸长；
4)取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA1.0mg/L的生根培养基中，10d左右即可出现不定根；
5)在生根培养基中培养25d左右有大量不定根产生，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
实施例4
一种苦瓜离体快速繁殖的方法，通过以下步骤完成：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的顶芽作为外植体，用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7min，无菌水冲洗6～8次，切去伤口部位后用纸巾吸干表面水分；
2)将消毒好的顶芽外植体接种于MS+6-BA0.5mg/L的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，使顶芽伸长，分节；
3)切取伸长的顶芽接种于MS+6-BA0.8mg/L的培养基中，诱导侧芽的生长；
4)切取无菌苗上半部分伸长至1.5cm左右健壮的顶芽和侧芽接种于1/2MS+IAA1.0mg/L的培养基中，10d左右即可出现不定根；
5)无菌苗的下半部分，切去伤口，继续接种于MS+6-BA0.5mg/L培养基中，诱导出芽；
6)在生根培养基中培养25d左右有大量不定根产生，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
Claims (5)
1.一种苦瓜离体快速繁殖的方法，其特征在于：包含以下步骤：
1)大田中选取生长健壮的苦瓜植株的顶芽或腋芽作为外植体，并进行处理；
2)将消毒好的外植体接种于MS+6-BA的培养基中，温度27±1℃，光照时间16h/d，光照强度1500lx，十天后诱导出芽；
3)切取诱导出的芽接种于MS+6-BA的培养基中，使芽增殖并伸长；
4)取株高1.5cm左右的健壮的无根苗，转入1/2MS+IAA的生根培养基中，10d左右出现不定根；
5)在生根培养基中培养25d后产生大量不定根，进行炼苗，炼苗3d后，移栽至土壤获得再生植株。
2.根据权利要求1所述的一种苦瓜离体快速繁殖的方法，其特征在于：步骤(1)中对顶芽或腋芽的处理方法为：用75％的酒精消毒30s，无菌水冲洗3次，切去伤口部位，再用0.1％的HgCl2溶液消毒7～10min，无菌水冲洗6-8次，切去伤口部位后用纸巾吸干表面水分。
3.根据权利要求1所述的一种苦瓜离体快速繁殖的方法，其特征在于：步骤(2)中培养基中6-BA的浓度为0.5～1mg/L。
4.根据权利要求1所述的一种苦瓜离体快速繁殖的方法，其特征在于：步骤(3)中培养基中6-BA的浓度为1.0～2.0mg/L。
5.根据权利要求1所述的一种苦瓜离体快速繁殖的方法，其特征在于：步骤(4)所述的生根培养基中IAA的浓度为0.5～1.0mg/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410572618.5A CN104322370A (zh) | 2014-10-23 | 2014-10-23 | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410572618.5A CN104322370A (zh) | 2014-10-23 | 2014-10-23 | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104322370A true CN104322370A (zh) | 2015-02-04 |
Family
ID=52397300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410572618.5A Pending CN104322370A (zh) | 2014-10-23 | 2014-10-23 | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104322370A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104620989A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-05-20 | 北京农学院 | 培育苦瓜再生苗的方法 |
| CN106359089A (zh) * | 2016-08-29 | 2017-02-01 | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 | 一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法 |
| CN112005885A (zh) * | 2020-09-21 | 2020-12-01 | 广东农垦热带作物科学研究所 | 一种砂仁高效再生体系建立的方法 |
| CN112772166A (zh) * | 2021-01-18 | 2021-05-11 | 福州市蔬菜科学研究所 | 一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法 |
| CN116235783A (zh) * | 2023-04-28 | 2023-06-09 | 海南大学三亚南繁研究院 | 一种苦瓜离体再生的培养基及培养方法 |
-
2014
- 2014-10-23 CN CN201410572618.5A patent/CN104322370A/zh active Pending
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 唐懿等: "苦瓜不定芽再生体系研究进展", 《长江蔬菜（学术版）》 * |
| 唐琳等: "用离体培养无性繁殖苦瓜", 《四川大学学报（自然科学版）》 * |
| 潘绍坤等: "不同激素组合对苦瓜不定芽诱导的影响", 《安徽农业科学》 * |
| 王小荣等: "不同激素组合对苦瓜离体快速繁殖的调控", 《湖南师范大学自然科学学报》 * |
| 郑岩松等: "广东苦瓜育种研究现状及其发展方向", 《广东农业科学》 * |
| 郭辉等: "苦瓜快繁技术研究", 《广西热带农业》 * |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104620989A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-05-20 | 北京农学院 | 培育苦瓜再生苗的方法 |
| CN104620989B (zh) * | 2015-02-13 | 2017-01-18 | 北京农学院 | 培育苦瓜再生苗的方法 |
| CN106359089A (zh) * | 2016-08-29 | 2017-02-01 | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 | 一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法 |
| CN106359089B (zh) * | 2016-08-29 | 2017-09-15 | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 | 一种提高苦瓜离体胚挽救成苗的方法 |
| CN112005885A (zh) * | 2020-09-21 | 2020-12-01 | 广东农垦热带作物科学研究所 | 一种砂仁高效再生体系建立的方法 |
| CN112772166A (zh) * | 2021-01-18 | 2021-05-11 | 福州市蔬菜科学研究所 | 一种苦瓜枝条离体快速繁殖的方法 |
| CN116235783A (zh) * | 2023-04-28 | 2023-06-09 | 海南大学三亚南繁研究院 | 一种苦瓜离体再生的培养基及培养方法 |
| CN116235783B (zh) * | 2023-04-28 | 2023-08-22 | 海南大学三亚南繁研究院 | 一种苦瓜离体再生的培养基及培养方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104335903B (zh) | 一种促进白及快速繁殖的方法 | |
| CN105340747A (zh) | 一种甘草无性快速繁殖方法 | |
| CN106942051B (zh) | 一种矾根叶片的组织培养快速繁殖的培养基及繁殖方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN104322370A (zh) | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 | |
| CN106386491A (zh) | 一种瓦氏秋海棠的离体再生方法 | |
| CN105265316B (zh) | 一种葱属植物鳞茎盘快速繁殖方法 | |
| CN105265320B (zh) | 一种绵毛马兜铃的组织培养繁殖方法 | |
| CN110506630A (zh) | 藜麦茎段组培快速繁殖方法 | |
| CN103416308A (zh) | 一种野生甜樱桃木组培快繁的方法 | |
| CN107155880A (zh) | 一种药用白芨组织培养种苗繁育方法 | |
| CN101548646B (zh) | 一种通过体细胞胚及次生体细胞胚发生途径快繁龙牙楤木的方法 | |
| CN113331059B (zh) | 一种以鸟王茶树胚轴为外植体建立高效再生体系的方法 | |
| CN103070078A (zh) | 一种利用芋头茎尖进行组织培养的快繁方法 | |
| CN106973796A (zh) | 一种毛叶山桐子的组织培养育苗方法 | |
| CN103548695B (zh) | 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法 | |
| CN105613288A (zh) | 一种金边黄杨快繁体系的构建方法 | |
| CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
| CN106165648B (zh) | 一种紫荆组培培养基及培养方法 | |
| CN102232359B (zh) | 双瓣茉莉的离体快速繁殖方法 | |
| CN101703003B (zh) | 象草的快速繁殖方法 | |
| CN104012406A (zh) | 甜樱桃品种晚红珠的离体再生方法 | |
| KR100620799B1 (ko) | 재분화 및 재분화된 물푸레나무과 식물체의토양순화이식방법 | |
| CN102657098A (zh) | 樱桃砧木嫩茎段离体培养方法 | |
| CN105830926B (zh) | 一种独脚金的组织培养快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150204 |