CN104604684A - 一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 - Google Patents
一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104604684A CN104604684A CN201510045532.1A CN201510045532A CN104604684A CN 104604684 A CN104604684 A CN 104604684A CN 201510045532 A CN201510045532 A CN 201510045532A CN 104604684 A CN104604684 A CN 104604684A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- willow
- stem
- skin
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
本发明公开了一种柳树带芽茎皮的组织培养方法，包括选枝培芽、外植体选择、培育无菌试管苗、育苗生根、炼苗等步骤。本发明具有很强的实用性，提高了柳树组培繁殖速度和繁殖率，使得繁殖的速度比其他方法快2-3倍，繁殖率高达3-5倍，成活率可保证在99％以上。
Description
技术领域
本发明涉及一种生物技术领域的组织培养方法，特别是一种柳树带芽茎皮的组织培养方法。
背景技术
柳树组织培养方法主要是先产生愈伤组织到丛生芽再到生根这样一个过程，繁殖速度比较慢。本方法直接诱导丛成芽到生根，缩短了繁殖时间。组培中一般外植体选择为芽时，在诱导过程中愈伤产生的机率的比较多，本方法中采用带茎皮的芽作为外植体目的是提高丛成芽的诱导效率。
发明内容
本发明的目的是为了克服柳树组培中的繁殖不足，提供繁殖速度快，繁殖效率高，成活率高的一种柳树带芽茎皮的组织培养方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：
本发明涉及一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 ，包括下列步骤：
（1）选枝培芽：选取生长健壮、无病虫害的1年生柳树带休眠芽枝条，剪成10cm带有侧芽的茎段，先用洗涤精水漂洗10-15min，再用自来水冲洗10-15min，浸泡在20%多菌灵溶液中15-20min后置于光照培养箱中进行水培，培养条件：温度24-26℃，光强2000Lx，水培5-6天，待水培枝条的休眠芽刚刚吐白萌动时为止；
（2）外植体选择：用刀片将含芽枝条带木质部切下约1cm，用洗涤精水浸泡20min，用自来水冲洗30min，置超净工作台无菌条件下，用70%的酒精消毒30s，用无菌水冲洗3次，用20%次氯酸钠消毒液消毒20分钟，用无菌水冲洗5次，将外植体表面用经过灭菌处理的滤纸吸干，用镊子挑去芽的外层表皮，用刀片切下与芽连接的茎皮，茎皮不带木质部；
（3）培育无菌试管苗：将带芽茎皮接种在诱导丛成芽培养基上，茎皮贴进培养基，芽保持向上，培养基配方：MS+0.4mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+0.2mg/L KT+0.6mg/L PVP，置于普通日光灯光源的环境下，光照强度为1500-2000Lx，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约20天，长成2-3cm的丛成芽的无菌试管苗；
（4）育苗生根：将丛生芽分离切成单株，对基部进行剪切，接入到增殖生根培养基中，增殖生根培养基配方：1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.8mg/L IAA+0.5mg/L NAA+1g/L 活性炭，置于普通日光灯光源的环境下，光照强度为1500-2000Lx，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约30天，长成6-8cm的试管生根苗；
（5）炼苗：将试管苗开瓶保存2天，取出试管苗洗净，移栽到含松树皮的基质中，其中松树皮，粒径7-15mm，保持温度24℃左右，相对湿度75%左右，培养两个星期。
本发明的优点在于：
缩短了柳树组培繁殖时间，提高了丛成芽的诱导率，利用带茎皮的休眠芽进行大量的繁殖，一可以有效防止木质部腐化对培育无菌试管苗时的无菌环境的影响，二提高丛成芽的诱导率，具有很强实用性；在育苗生根过程中，生根率可达到100％，从而有效地提高了成活率；本发明有效地提高了繁殖速度和繁殖率，使得繁殖的速度比其他方法快2-3倍，繁殖率高达3-5倍，成活率保证在99％以上。
具体实施方式：
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约30天，长成6-8cm的试管生根苗；
（5）炼苗：将试管苗开瓶保存2天，取出试管苗洗净，移栽到含松树皮的基质中，其中松树皮，粒径7-15mm，保持温度24℃左右，相对湿度75%左右，培养两个星期。
本发明的优点在于：
缩短了柳树组培繁殖时间，提高了丛成芽的诱导率，利用带茎皮的休眠芽进行大量的繁殖，一可以有效防止木质部腐化对培育无菌试管苗时的无菌环境的影响，二提高丛成芽的诱导率，具有很强实用性；在育苗生根过程中，生根率可达到100％，从而有效地提高了成活率；本发明有效地提高了繁殖速度和繁殖率，使得繁殖的速度比其他方法快2-3倍，繁殖率高达3-5倍，成活率保证在99％以上。
具体实施方式：
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 ，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约20天，长成2-3cm的丛成芽的无菌试管苗；
（4）育苗生根：将丛生芽分离切成单株，对基部进行剪切，接入到增殖生根培养基中，增殖生根培养基配方：1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.8mg/L IAA+0.5mg/L NAA+1g/L 活性炭，置于普通日光灯光源的环境下，光照强度为1500-2000Lx，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约30天，生根率可达100%，长成6-8cm的试管生根苗。
（5）炼苗：将试管苗开瓶保存2天，取出试管苗洗净，移栽到含松树皮的基质中，其中松树皮，粒径7-15mm，保持温度24℃左右，相对湿度75%左右，培养两个星期可适应存活。成活率在99％以上。
Claims (1)
1.一种柳树带芽茎皮的组织培养方法，其特征在于包括下列步骤：
（1）选枝培芽：选取生长健壮、无病虫害的1年生柳树带休眠芽枝条，剪成10cm带有侧芽的茎段，先用洗涤精水漂洗10-15min，再用自来水冲洗10-15min，浸泡在20%多菌灵溶液中15-20min后置于光照培养箱中进行水培，培养条件：温度24-26℃，光强2000Lx，水培5-6天，待水培枝条的休眠芽刚刚吐白萌动时为止；
（2）外植体选择：用刀片将含芽枝条带木质部切下约1cm，用洗涤精水浸泡20min，用自来水冲洗30min，置超净工作台无菌条件下，用70%的酒精消毒30s，用无菌水冲洗3次，用20%次氯酸钠消毒液消毒20分钟，用无菌水冲洗5次，将外植体表面用经过灭菌处理的滤纸吸干，用镊子挑去芽的外层表皮，用刀片切下与芽连接的茎皮，茎皮不带木质部；
（3）培育无菌试管苗：将带芽茎皮接种在诱导丛成芽培养基上，茎皮贴进培养基，芽保持向上，培养基配方：MS+0.4mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+0.2mg/L KT+0.6mg/L PVP，置于普通日光灯光源的环境下，光照强度为1500-2000Lx，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约20天，长成2-3cm的丛成芽的无菌试管苗；
（4）育苗生根：将丛生芽分离切成单株，对基部进行剪切，接入到增殖生根培养基中，增殖生根培养基配方：1/2MS+0.2mg/L 6-BA+0.8mg/L IAA+0.5mg/L NAA+1g/L 活性炭，置于普通日光灯光源的环境下，光照强度为1500-2000Lx，每日光照时间为20小时，温度25±2℃，相对湿度在65%-70%，培养约30天，长成6-8cm的试管生根苗；
（5）炼苗：将试管苗开瓶保存2天后，取出试管苗洗净，移栽到含松树皮的基质中，其中松树皮，粒径7-15mm，保持温度24℃左右，相对湿度75%左右，培养两个星期。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510045532.1A CN104604684B (zh) | 2015-01-29 | 2015-01-29 | 一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510045532.1A CN104604684B (zh) | 2015-01-29 | 2015-01-29 | 一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104604684A true CN104604684A (zh) | 2015-05-13 |
| CN104604684B CN104604684B (zh) | 2016-05-18 |
Family
ID=53139560
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510045532.1A Active CN104604684B (zh) | 2015-01-29 | 2015-01-29 | 一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104604684B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107135947A (zh) * | 2017-05-25 | 2017-09-08 | 江苏沿江地区农业科学研究所 | 柳树幼胚成苗组织培养方法 |
| CN108834898A (zh) * | 2018-07-23 | 2018-11-20 | 中国科学院昆明植物研究所 | 垫柳的组织培养方法 |
-
2015
- 2015-01-29 CN CN201510045532.1A patent/CN104604684B/zh active Active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 余如刚等: "旱柳Q106组织培养与快繁体系的建立", 《草原与草坪》, no. 5, 31 October 2005 (2005-10-31), pages 57 - 59 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107135947A (zh) * | 2017-05-25 | 2017-09-08 | 江苏沿江地区农业科学研究所 | 柳树幼胚成苗组织培养方法 |
| CN107135947B (zh) * | 2017-05-25 | 2019-11-19 | 江苏沿江地区农业科学研究所 | 柳树幼胚成苗组织培养方法 |
| CN108834898A (zh) * | 2018-07-23 | 2018-11-20 | 中国科学院昆明植物研究所 | 垫柳的组织培养方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104604684B (zh) | 2016-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104604687B (zh) | 利用切芽后的花梗茎段诱导丛生芽快速繁殖蝴蝶兰的方法 | |
| CN105145359B (zh) | 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106665357B (zh) | 一种建立石蒜再生体系的方法 | |
| CN104663450A (zh) | 一种美国红枫组培快繁方法 | |
| CN101695279B (zh) | 一种美洲黑杨湘林101组织培养方法 | |
| CN110604058A (zh) | 一种红花油茶幼胚的组培育苗方法 | |
| CN103141388A (zh) | 一种海葱组织培养的方法 | |
| CN105918128B (zh) | 一种美国红枫快速繁殖的方法 | |
| CN105532467B (zh) | 一种濒危羊踯躅离体组织培养繁殖与保存的方法 | |
| CN104322370A (zh) | 一种苦瓜离体快速繁殖的方法 | |
| CN110583488A (zh) | 石蒜属新品种‘桃红’组培快繁技术体系的建立方法 | |
| CN103651141A (zh) | 亳菊工厂化试管苗快繁的方法 | |
| CN107223566B (zh) | 一种五莲杨组织培养方法 | |
| CN105284622A (zh) | 一种快速获得鸢尾杂交优良无性系的方法 | |
| CN109042330A (zh) | 一种桃叶卫矛的组织培养方法 | |
| CN105613288A (zh) | 一种金边黄杨快繁体系的构建方法 | |
| CN103155869A (zh) | 甜樱桃砧木Colt组织培养方法 | |
| CN104604684B (zh) | 一种柳树带芽茎皮的组织培养方法 | |
| CN106665367A (zh) | 一种黄花风铃木组织培养快速繁殖方法 | |
| CN106171976A (zh) | 一种接骨木组培快繁方法 | |
| CN101574057A (zh) | 一种夏蜡梅组培快繁方法 | |
| CN105145358A (zh) | 一种黄藤组织培养快繁方法 | |
| CN104396746A (zh) | 一种黄花贝母不定芽诱导增殖方法 | |
| CN103385167B (zh) | 一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法 | |
| CN107517854A (zh) | 一种圆叶桉的组培快繁方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |