CN101574057A - 一种夏蜡梅组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种夏蜡梅杂种组培快繁方法,通过对夏蜡梅杂种离体培养,建立起夏蜡梅杂种组培快繁体系,包括材料选择、材料清洗、初代接种、增殖培养、生根培养和炼苗移栽,成活率达95%。夏蜡梅杂种组培快繁方法的建立,解决了夏蜡梅杂种不育问题,适用于夏蜡梅杂种产业化育苗。
Description
方法领域
本发明涉及夏蜡梅杂种Sinocalycanthus chinensis XCalycanthus floridus组培快繁方法,属于生物技术领域。
背景技术
夏蜡梅杂种Sinocalycanthus chinensis X Calycanthusfloridus为江苏省中国科学所自主培育的园艺花卉新品种,亲本夏蜡梅和美国蜡梅,杂种保持母本花型,继承父本花色,观赏价值高于亲本,且耐强光暴晒,适应性好于亲本,表现杂种优势,但同时它又表现为杂种不育,组培快繁技术正好解决了这一难题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种夏蜡梅杂种组培快繁方法,为夏蜡梅杂种的规模化育苗提供一条有效途径。
本发明的夏蜡梅杂种组培快繁方法,是通过对夏蜡梅杂种的离体培养,建立起夏蜡梅杂种的快繁体系,步骤包括材料选择、清洗、初代接种、增殖培养、生根培养和炼苗移栽,具体做法:采集夏蜡梅杂种半木质化新枝为外植体,去除叶片,剪成3-5cm长度,消毒后切成1cm大小带节间的茎段,吸干表面水分放入启动培养基培养,待长出不定芽后切下,放入增殖培养基培养,苗高2cm时转入生根培养基培养,生根后炼苗移栽。其特征在于最佳启动培养基为WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂;最佳增殖培养基为WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂和MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂;最佳生根培养基为3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L IBA+1%蔗糖+0.8%琼脂+0.05%活性炭;培养条件为培养基pH5.8,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。增殖培养过程中交替使用培养基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂和MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂,增殖效果佳;初代接种的消毒方法用75%酒精浸泡1分钟,再用0.1%HgCl2灭菌8min,无菌水清洗3次;
本发明的优越性在于成活率达95%以上,为夏蜡梅杂种的规模化育苗提供了一条有效途径。
具体实施方式
1.4-5月上午采集夏蜡梅杂种新枝,去除叶片,自来水清洗备用。
2.将清洗干净的外植体材料置于超净工作台上,剪成3-5cm,放在三角瓶内,用用75%酒精浸泡1-2分钟,再用0.1%HgCl2灭菌8-10min,无菌水清洗2-4次,切成1cm大小带节间的茎段,无菌滤纸吸干表面水分,放入启动培养基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8上培养,温度26±2℃、光照16h/天以及光强1600~2000lx。
3.待长出不定芽后,切下,放入增殖培养基MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8增殖,温度26±2℃、光照16h/天以及光强1600~2000lx。
4.将增殖培养基中2cm以上的有效苗转入生根培养基培养3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L IBA+1%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8培养,温度26±2℃、光照16h/天以及光强1600~2000lx。
5.根长1-2cm并有2条以上侧根时炼苗2-3天移栽。
实施例1
1.2007年4月25日上午采集夏蜡梅杂种新枝,去除叶片,自来水清洗备用。
2.将清洗干净的外植体材料置于超净工作台上,剪成3-5cm,放在三角瓶内,用用75%酒精浸泡1分钟,再用0.1%HgCl2灭菌8min,无菌水清洗3次,切成1cm大小带节间的茎段,无菌滤纸吸干表面水分,放入启动培养基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8上培养,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
3.15d后长出不定芽,切下,放入增殖培养基MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8增殖,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
4.25d后将增殖培养基中2cm以上的有效苗切下,放入生根培养基培养3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L IBA+1%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8培养,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
5.当无菌苗根长1-2cm并有2条以上侧根时,打开瓶盖炼苗炼苗2天移栽,30d后检查成活率,成活率90%。
实施例2
1.2008年5月8日上午采集夏蜡梅杂种新枝,去除叶片,自来水清洗备用。
2.将清洗干净的外植体材料置于超净工作台上,剪成3-5cm,放在三角瓶内,用75%酒精浸泡2分钟,再用0.1%HgCl2灭菌10min,无菌水清洗3次,切成1cm大小带节间的茎段,无菌滤纸吸干表面水分,放入启动培养基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8上培养,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。3.5月22日切下不定芽,转入增殖培养基MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8增殖,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
4.6月25d将增殖培养基中2cm以上的有效苗转入生根培养基培养3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L IBA+1%蔗糖+0.8%琼脂pH5.8培养,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
5.7月10日选根长1-2cm并有2条以上侧根的无菌苗,打开瓶盖炼苗炼苗3天移栽,8月10日检查成活率,成活率100%。
Claims (8)
1.一种夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于所述的夏蜡梅杂种以以下方法组培快繁:
4-5月采集夏蜡梅杂种半木质化新枝为外植体,去除叶片,剪成3-5cm长度,清洗消毒后切成1cm大小带节间的茎段,吸干表面水分放入诱导培养基培养,待长出不定芽后切下,放入增殖培养基培养,在培养基pH,温度、光照的条件下,苗高2cm时转入生根培养基培养,最后炼苗移栽。
2.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于最佳启动培养基为WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂。
3.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于最佳增殖培养基为WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂和MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂。
4.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于最佳生根培养基为3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L IBA+1%蔗糖+0.8%琼脂+0.05%活性炭。
5.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于培养条件为培养基pH5.8,温度26±2℃、光照16h/天、光强1600~2000lx。
6.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于增殖培养过程中交替使用培养基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂和MS大量元素+WPM其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L IBA+2%蔗糖+0.8%琼脂,增殖效果佳。
7.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于初代接种的消毒方法用75%酒精浸泡1-2分钟,再用0.1%HgCl2灭菌6-10min,无菌水清洗2-4次。
8.根据权利1要求所述的夏蜡梅杂种组培快繁方法,其特征在于将在增殖培养基上长至2cm高的无菌苗转接于生根培养基上培养,生根率高。
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