CN102422812A

CN102422812A - 一种红叶石楠快速繁育培养基的制备方法

Info

Publication number: CN102422812A
Application number: CN2011103064514A
Authority: CN
Inventors: 王美霞; 张爱莲; 王创云; 侯雅静; 李海燕; 张丽娜; 秦作霞
Original assignee: SHANXI TENGDA SEED CO Ltd
Current assignee: SHANXI TENGDA SEED CO Ltd
Priority date: 2011-10-11
Filing date: 2011-10-11
Publication date: 2012-04-25

Abstract

一种红叶石楠快速繁育培养基的制备方法，属于植物栽培技术领域，包括启动培养基配制、增殖培养基配制、生根培养配制，其中启动培养基以MS为基本培养基，添加2.0mg/L6-BA、0.15mg/LNAA、0.1%的活性炭、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；增殖培养基以1/2MS为基本培养基，添加2.5mg/L6-BA、0.5mg/LNAA、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加1.5mg/LIBA、NAA0.2mg/L，1.5%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8。本发明可大大提高繁殖数量，加快繁殖速度，降低成本。

Description

一种红叶石楠快速繁育培养基的制备方法

技术领域

本发明属于树木无性繁殖领域，具体涉及一种红叶石楠快速繁育培养基的制备方法。

背景技术

红叶石楠在生产上多采用扦插繁殖，扦插一般采用枝条作繁殖材料，传统方法是选择当年粗壮的木质化或半木质化枝条，剪取长约8-15cm的插穗，切口平整光滑，上切口距顶芽1cm左右，将技条顶部的叶片剪取一半，其余叶片剪除，剪好的插穗基部用生根剂处理后插入基质中等待生根。

此方法一是需要大量的繁殖材料，二是对被取材的母树生长影响大，不利树形培养，三是在剪取插穗要注意保持上切口距顶芽1cm的距离，费时费工，四是繁殖系数较低，一般国外为30%，而国内只有20%。

发明内容：

本发明提供繁殖用材少、速度快、数量大的一种红叶石楠的快速繁育方法。

本发明的技术方案如下：

步骤1：培养基配制：包括启动培养基配制、增殖培养基配制、生根培养配制，其中启动培养基以MS为基本培养基，添加2.0 mg/L 6-BA 、0.15 mg/L NAA、0.1%的活性炭、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；增殖培养基以1/2MS为基本培养基，添加2.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加1.5 mg/L IBA、NAA 0.2 mg/L， 1.5%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8。

步骤2：外植体的采集及预处理。在夏季晴天上午，采集半木质化新枝作为外植体，除去多余的茎叶，置于烧杯中用0.1%的洗洁精溶液，浸泡15 min，期间不断搅动，将烧杯口用纱布覆盖扎紧，用自来水冲洗30 min，再用蒸馏水冲洗3～4次，洗去表面污垢。然后置于超净工作台，用75％酒精表面消毒30 s后转入0.1％ HgCl₂溶液中浸泡5～7 min，期间不断摇动，用无菌水（高压蒸汽灭菌的蒸馏水）冲洗5～6次后，无菌滤纸（经高压蒸汽灭菌的滤纸）吸干水分，用无菌解剖刀（经高压蒸汽的解剖刀）切取顶芽或带1个腋芽的茎段。

所述超净工作台是在开机后，用紫外灯照射15分钟后，再用酒精喷洒台面，开机后一直有风吹出，细菌不会再进入台内，属于无菌操作过程。

步骤3：离体培养：包括启动培养、增殖培养、生根培养，其中，启动培养，将顶芽或带1个腋芽的茎段接种到启动培养基后，置于23～27℃的培养室内，以日光灯为光源，光照强度为1500Lx～2 000 Lx，光照时间10h/d，培养室相对湿度70%～80%，培养20-30 d；将生成的不定芽转入增殖培养基，培养20-25 d，产生更多的不定芽，将生长健壮的小苗转入生根培养；生根培养条件是室内温度为20℃，以日光灯为光源，光照强度为1500 Lx，光照时间12h/d，培养室相对湿度70%～80%，生根培养20-25天后，根系长至3-5cm，进行炼苗移栽。所述增殖培养条件与启动培养条件相同。

步骤4：生根苗驯化：根系长至3-5cm时，打开培养瓶盖注入5-10ml蒸馏水使培养基浸泡在蒸馏水中，炼苗3-5 d。

步骤5：移栽：将市售的泥炭、珍珠岩、蛭石，按体积比，泥炭：珍珠岩：蛭石=5：3：1，混合均匀后经过高压灭菌消毒，置于花盆内；将根系长至3-5cm的培养基上的小苗拔起，冲洗掉根系上所带的培养基，用20%的灭菌灵深液灌根；移栽到花盆内的基质上，每天早晚各喷水一次，保持70%以上的湿度，炼苗1个月后即可移到室外，移栽成活率达90%以上。

与传统方法比较，本发明采取外植体数量少，不影响母树生长发育和树形培养；采取一个顶芽或茎段，就可以繁殖数百株成苗，而传统繁殖一个插穗只能繁殖一棵植株。

因此，使用本发明进行红叶石楠植株繁殖，可大大提高繁殖数量，有助于开展规模化、工厂化育苗，加快繁殖速度，降低成本。在红叶石楠苗木的生产中具有重要的实践和推广意义。

具体实施方式：

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。

2009年4月至2010年12月，在山西省农业科学院作物科学研究所组培研究室，研究人员经过反复试验，获得了红叶石楠的组培快繁技术，并成功培育成组培苗。主要经过为：在2009年夏季晴天上午，采集半木质化新枝作为外植体，除去多余的茎叶，置于烧杯中用0.1%的洗洁精溶液，浸泡15 min，期间不断搅动，将烧杯口用纱布覆盖扎紧，用自来水冲洗30 min，再用蒸馏水冲洗3～4次，洗去表面污垢。然后置于超净工作台，用75％酒精表面消毒30 s后转入0.1％ HgCl₂溶液中浸泡5～7 min，期间不断摇动，用无菌水（高压蒸汽灭菌的蒸馏水）冲洗5～6次后，无菌滤纸（经高压蒸汽的滤纸）吸干水分，用无菌解剖刀（经高压蒸汽的解剖刀）切取顶芽或带1个腋芽的茎段，接种到启动培养基（以MS为基本培养基添加2.0 mg/L 6-BA 、0.15 mg/L NAA、0.1%的活性炭、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8），置于23～27℃的培养室内，以日光灯为光源，光照强度为1500Lx～2 000 Lx，光照时间10h/d，培养室相对湿度70%～80%，培养20-30天，转入增殖培养基（以1/2MS为基本培养基添加2.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA，3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8）后，培养条件同启动培养。培养20-25天，产生不定芽，转入生根培养基（以1/2MS为基本培养基添加1.5 mg/L IBA、NAA 0.2 mg/L， 1.5%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8）。生根培养室内温度为20℃，以日光灯为光源，光照强度为1500Lx，光照时间12h/d，培养室相对湿度70%～80%，培养20-25天后，根系长至3-5cm左右时，打开培养瓶盖注入5-10ml蒸馏水，炼苗3-5天。再移栽至装有移栽基质（泥炭：珍珠岩：蛭石=5：3：1）的花盆中。移栽前对移栽基质通过高压灭菌锅消毒；用20%的灭菌灵深液灌根，移栽时要注意将根系上所带的培养基冲洗掉，以防霉菌污染，影响根系生长，同时每天早晚各喷水一次，保持70%以上的湿度。炼苗1个月后即可移入大田，移栽成活率达90%以上。

备注:

激素成分：

6-BA 中文化学名：6-苄氨基嘌呤

IBA 中文化学名：吲哚丁酸

NAA 中文化学名：萘乙酸

MS基本培养基（Murashige & Skoog 1962）：

Figure 2011103064514100002DEST_PATH_IMAGE001

。

Claims

1. 一种红叶石楠快速繁育培养基的制备方法，包括启动培养基配制、增殖培养基配制、生根培养配制，其中启动培养基以MS为基本培养基，添加2.0 mg/L 6-BA 、0.15 mg/L NAA、0.1%的活性炭、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；增殖培养基以1/2MS为基本培养基，添加2.5 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA、3%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8；生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加1.5 mg/L IBA、NAA 0.2 mg/L， 1.5%的蔗糖和0.65%的琼脂粉，pH5.8。