CN108707527A - 高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法及其培养组合体 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法及其培养组合体，配置蛹虫草固体培养基，并将其装入到透明瓶体中灭菌；配置蛹虫草液体菌种培养基，灭菌、冷却后无菌操作接入蛹虫草原菌种，摇床培养后无菌操作接入到上述已灭菌的瓶中蛹虫草固体培养基上，进行光调控培养；取上述长有子实体的蛹虫草培养瓶，加入一定量饮用白酒，使蛹虫草子实体悬浮在酒液中。本发明使用特定培养基和栽培种，培养过程中利用光调控诱导获得高孢子粉培养组合体。培养组合体包括一耐热透明瓶和瓶腔内的蛹虫草培养物，瓶体为变形瓶体，有利于限制菌丝体位置和品鉴酒的制作。本发明用于制作高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体，有利于蛹虫草的人工培养和市场化。

Description

高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法及其培养组合体

技术领域

本发明属于人工栽培蛹虫草技术领域，尤其是涉及一种集观赏和食用于一体的高孢子粉蛹虫草酒及其制作的方法。

背景技术

人工培养蛹虫草子实体中不仅含有与天然冬虫夏草相近的虫草素、D-甘露醇、蛹虫草多糖、SOD酶等药用成分，而且还含有对虫草素起保护作用的抗白血病成分喷司他丁，蛹虫草子实体是理想的药食材料。蛹虫草子实体中的药用有效成分含量与其孢子粉量密切相关，孢子粉含量高的子实体，其药用有效成分含量也高；目前，如何获得稳定高含量孢子粉人工栽培蛹虫草子实体仍是一个难题。同时，蛹虫草子实体培育生长的过程，也是虫（菌丝体）草（子实体）成长和转化的过程，其生长发育变化和高孢子粉子实体具有良好观赏价值。长期以来，消费者普遍对“虫草”怀有很强的好奇心，但由于蛹虫草子实体的培养对环境要求比较高，高孢子粉子实体的培养就更难，它一般是在特定的环境中，利用专们的器具进行栽培，消费者难有机会观察到其生长的过程和长成后状态。再是，子实体中的药用有效成分如虫草素，是随着子实体的发育和成长不断累积的，但随着子实体的不断成长，到一定时期后，又会逐渐减少。现有培养中，为保留子实体中药用成分，一般是在蛹虫草子实体长成后，就需及时采摘并进行加工处理，消费者得到的是处理后的子实体。而且现有的处理方法，一般是将子实体烘干进行保存。在子实体烘干过程中，部分有效成分会因受热而丧失活性；子实体失水后，其形状和大小也发生变化，不在具有观赏性。子实体上携带的孢子粉大量脱离，其本身特有的金黄色也变浅，营养价值和品相降低。也有的将蛹虫草子实体采摘后，加入到酒中制取虫草酒，虽然能够获得较高营养价值的酒液，但虫草子实体原始形态也遭到了破坏，不具备观赏价值。还有就是现有的商品化的蛹虫草子实体观赏性差，消费者认可程度低，影响其销售。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种集观赏和食用于一体，既能最大限度地获取蛹虫草中的药用有效成分，又便于欣赏蛹虫草生长发育过程和子实体长成后状态的蛹虫草酒品赏组合体制作方法及其培养组合体。

为解决上述技术问题，本发明包括以下步骤：

a.蛹虫草培养体制备：配置蛹虫草固体培养基，并将其装入到透明瓶体中，封口后整体用高温蒸汽常规灭菌；

b.高孢子粉蛹虫草栽培种培育：配置蛹虫草液体菌种培养基，并用高温蒸汽常规灭菌，冷却后无菌操作接入蛹虫草原菌种，20-22度下，摇床培养72-96小时；

c.接种培养：取上述摇床培养的蛹虫草栽培种，无菌操作接入到上述已灭菌的瓶中蛹虫草固体培养基上，培养室内控制温度在20-22度，并进行光调控培养；所述光调控包括：首先在黑暗环境下培养72-96小时，待瓶内培养基长满菌丝后，用600-800勒克斯白炽灯光连续照射192-288小时；菌丝体出现子实体原基后再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时，再用600-800勒克斯灯光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间断照射的累计时长为960-1080小时；

d.蛹虫草酒制作：取上述长有子实体的蛹虫草培养瓶，加入一定量饮用白酒，使蛹虫草子实体悬浮在酒液中，密封自然存放即可。

所述蛹虫草固体培养基的配方为：粳米750-1000克、营养液800-1000毫升；所述营养液配方为：蛋白胨3-4克，磷酸二氢钾1-2克、硫酸镁0.5-1克、复合维生素B片0.02-0.05克、水800-1000毫升、PH值6.3-6.5；蛹虫草液体菌种培养基配方为：马铃薯180-200克、葡萄糖15-20克、蛋白胨2-3克，磷酸二氢钾1-2克、硫酸镁0.5-1克、复合维生素B片0.02-0.05克、水800-1000毫升、PH值6.3-6.5。

所述高孢子粉蛹虫草栽培种培育时，摇床培养时间为72-84小时，摇床速度为130-150r/min；蛹虫草光调控培养为：避光培养72-84小时，待培养基长满菌丝后，用700-750勒克斯、波长为620-760nm光连续照射240-260小时；菌丝体出现子实体原基后间断照射时采用700-750勒克斯、波长为620-760nm 光，间隔照射处理的累计照射时长为960-1008小时。

所述蛹虫草固体培养基为富硒培养基，其配方为：粳米1000克、营养液1000毫升；所述营养液配方为：蛋白胨3克，磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、复合维生素B0.05克、有机纳米硒1毫升、水1000毫升、PH值6.5。

用于制作高孢子粉蛹虫草酒的培养组合体，包括一耐热透明瓶，所述耐热透明瓶包括瓶本体和与之活连接的瓶盖，其结构特点是所述瓶本体的瓶腔包括相互连通的第一腔体和第二腔体，所述第一腔体与第二腔体之间的连通处呈缩口状，第一腔体中设有蛹虫草菌丝体，所述第二腔体为贯通瓶口和第一腔体的子实体腔；蛹虫草子实体分生于蛹虫草菌丝体，其基部与蛹虫草菌丝体连为一体，其上部位于第二腔体中。

所述瓶本体为耐热玻璃瓶体，第一腔体和第二腔体之间的瓶体内缩成束腰状，束腰下部和上部的瓶腔分别为第一腔体和第二腔体，第一腔体为锥形腔，第二腔体呈纺锤形。

所述瓶本体的容积为500-750毫升，第一腔体容积为50-75毫升，瓶内蛹虫草固体培养基的加入量为：粳米25-30克、营养液30-36毫升，所述蛹虫草菌丝体与第一腔体壁紧密相接。

本发明的高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法采用专用透明瓶体作为培养载体，使用特定培养基和栽培种，培养过程中利用光调控诱导获得高孢子粉培养组合体，成熟子实体三分之二以上产生孢子。培养组合体适时加入饮用酒，终止菌丝体和子实体生长发育，有利于阻断虫草素、喷司他丁等有效成分的过度降解，最大量获取其所含有效成分。培养组合体包括一耐热透明瓶和瓶腔内的蛹虫草培养物，瓶腔包括相互连通的第一腔体和第二腔体，蛹虫草培养物包括连成一体的蛹虫草菌丝体和蛹虫草子实体；蛹虫草菌丝体位于第一腔体，蛹虫草子实体由蛹虫草菌丝体中长出，其绝大部分位于第二腔体中。利用耐热透明瓶作为蛹虫草栽培的载体，不仅可直接用于栽培，为蛹虫草的栽培生长提供良好的空间，又便于调控并透过瓶体观察和欣赏虫草的生长发育全过程。第一腔体呈缩口状，其腔体口径小于其内腔径。蛹虫草菌在第一腔体内发育形成的蛹虫草菌丝体核会充满该腔体，当加入食用酒后，蛹虫草菌丝体受到缩口腔的限制，不会因浮力而翻转或者漂浮，蛹虫草菌丝体和子实体会悬浮在酒液中并保持原始形态。瓶体中加入饮用酒后，菌丝体和子实体中的药用有效成分溶出到酒液中，使酒体和子实体均呈金黄色，整体的观赏性强，可供消费者欣赏和品饮，有利于人工栽培的蛹虫草作为消费品走进千家万户。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明作进一步描述：

图1是本发明蛹虫草品赏组合体示意图；

图2是本发明蛹虫草品赏组合体部分剖视图；

图3是本发明瓶本体部分剖视图；

图4是本发明蛹虫草酒品赏组合体示意图；

图5是本发明蛹虫草酒品赏组合体制作流程示意图。

具体实施方式

参照附图所示，本发明蛹虫草酒品赏组合体制作方法包括如下步骤：制备蛹虫草固体培养基和高孢子粉蛹虫草液体栽培种。蛹虫草固体培养基按量分装到干净的耐热透明瓶体中，瓶口用耐高温塑料膜或者牛皮纸封口后高温消毒灭菌；冷却后，将预先制备好的高孢子粉蛹虫草液体栽培种接入瓶中；在培养室中，保持温度20-22度，并进行光调控诱导培养产生子实体。光调控时，首先在黑暗环境下进行菌丝培育，再进行间隔照射诱导产生高孢子粉蛹虫草子实体，子实体长成后加入一定量食用白酒，常温下密封保存一定时间后，即可品饮和鉴赏。

参照图1至图4所示，本发明用于制作蛹虫草酒品赏组合体的蛹虫草培养组合体包括耐热透明瓶1，所述耐热透明瓶1包括瓶本体11和与之活连接的瓶盖12；图中所示瓶本体11为容积为500-750毫升的耐热玻璃瓶体，瓶盖12为插接的冠状盖。瓶本体11的瓶腔包括相互连通的第一腔体21和第二腔体22，第一腔体21与第二腔体22之间的连通处呈缩口状，缩口状处腔体的口径小于第一腔体21与第二腔体22的腔体内径，腔体中设有蛹虫草菌丝体31；第二腔体22为贯通瓶口和第一腔体21的子实体腔，蛹虫草子实体32分生于蛹虫草菌丝体，其基部与蛹虫草菌丝体连为一体，其上部位于第二腔体中，其上端大部分位于第二腔体22中。图中所示瓶本体11呈束腰状，第一腔体21和第二腔体22之间的瓶体内缩成束腰状，束腰下部和上部的瓶腔分别为第一腔体21和第二腔体22，且第一腔体21为锥形腔，锥形腔的容积为50-75毫升，其中蛹虫草固体培养基的加入量为：粳米25-30克、营养液30-36毫升。蛹虫草菌丝体31在第一腔体21生长发育，并逐渐充满整个锥形腔体，菌丝体发育完成后与腔体壁紧密相接，有利于限定菌丝体位置。第二腔体22呈纺锤形，它能够产生较好的光学效应，便于观察和欣赏其中的子实体形态。在瓶腔2内装有子实体浸泡酒4。

实施例1：制作高孢子粉蛹虫草液体菌种。首先制备培养基：称取新鲜马铃薯200克、葡萄糖15克、蛋白胨2克，磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.5克、复合维生素B片0.02克、自来水800毫升，将马铃薯打碎后与其它组份混合，调节PH值6.3-6.5。平均分装到5个500毫升三角瓶中，用高温蒸汽消毒灭菌并冷却后，接入蛹虫草菌原种。将三角瓶在培养室中，保持温度20-22度，摇床速度控制在130-150r/min ，摇瓶培养72-76小时。

配置固体培养基：营养液配置：蛋白胨4克，磷酸二氢钾1克、硫酸镁0.75克、复合维生素B片0.02克、水800毫升，混合后调节其PH值6.3-6.5；干净粳米750克备用。

选用瓶腔容积为500毫升，瓶体的下部内收成束腰状的耐热玻璃瓶作为栽培瓶体，瓶腔内相互连通的第一腔体和第二腔体分别为锥形腔和纺锤形腔，瓶盖为插接的冠状盖，第一腔体容积为50毫升。将瓶体用自来水洗净晾干备用。取上述粳米和配制好的营养液，每瓶按照粳米25克、营养液30毫升的量加入到栽培瓶体的第一腔体中，瓶体用耐高温塑料膜封口后，放入蒸汽灭菌锅中，120度高温蒸汽灭菌30分钟。冷却后，无菌操作接入10毫升上述摇床培养的液体栽培菌种。

子实体培养。将接种后的栽培瓶置于培养室中，保持室温20-22度，进行光调控诱导培育。首先在黑暗环境下培养72-76小时，培养基长满菌丝后，用600-700勒克斯白炽灯光连续照射260-288小时。当菌丝体出现子实体原基后，再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时后，再用波长为620-760nm、600-700勒克斯灯光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间断照射的累计时长为960-1008小时。避光即遮光处理，其光照强度为40-50勒克斯，黑暗处理为阻断一切可见光。

制作蛹虫草酒。选取上述子实体发育良好，单个子实体大部（超过子实体三分之二）长有孢子粉的栽培瓶，加入52度食用白酒，使子实体浸没在酒液中，终止菌体生长，将瓶盖盖紧密封常温保存。

选择带有锥腔的瓶体进行栽培，蛹虫草培养基预先设置在锥形腔内，培养过程中，随着菌丝体的不断发育，蛹虫草菌丝体31在锥腔内逐渐发育成长，形成一完整菌核，该菌核充满整个锥腔，并与腔体壁紧密相接。子实体长成后再加入酒液后，菌核和子实体不会漂浮到瓶体上部，且子实体受浮力作用，会保持自然悬浮状态。子实体大部分位于瓶体上部的纺锤形腔内，从外面看去，子实体呈现放大状，既有利于观察菌丝和子实体状况，又显得美观大方。栽培后期，可针对不同瓶体内子实体生长情况，适时加入白酒，一方面可适时终止其生，使菌体所含虫草素等有效成分保持在高峰值，同时能将其大部分有效成分浸出到酒液中，避免了统一采集和干燥处理过程中，有效成分的降解和流失。

实施例2：制作高孢子粉蛹虫草液体菌种。首先制备培养基：称取新鲜马铃薯190克、葡萄糖18克、蛋白胨2.5克，磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0.75克、复合维生素B片0.03克、自来水900毫升，将马铃薯打碎后与其它组份混合，调节PH值6.3-6.5。平均分装到5个500毫升三角瓶中，用高温蒸汽消毒灭菌并冷却后，接入蛹虫草菌原种。将三角瓶在培养室中，保持温度20-22度，摇床速度控制在130-150r/min ，摇瓶培养76-84小时。

配置固体培养基：营养液配置：蛋白胨3.5克，磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、复合维生素B片0.03克、水900毫升，混合后调节其PH值6.3-6.5。干净粳米900克。

选用瓶腔容积为500毫升，瓶体的下部内收成束腰状的耐热玻璃瓶作为栽培瓶体，瓶腔内相互连通的第一腔体和第二腔体分别为锥形腔和纺锤形腔，瓶盖为插接的冠状盖，子实体腔容积为60毫升。将瓶体用自来水洗净晾干备用。取上述粳米和配制好的营养液，每瓶按照粳米28克、营养液32毫升的量加入到栽培瓶体的第一腔体中，用耐高温塑料膜封口后，放入蒸汽灭菌锅中，120度高温蒸汽灭菌30分钟。冷却后，无菌操作接入15毫升上述摇床培养的液体栽培菌种。

子实体培养。将接种后的栽培瓶置于光控培养室中，保持室温20-22度，进行光调控诱导培育。首先在黑暗环境下培养84-90小时，待培养基长满菌丝后，用700-750勒克斯，波长为620-760nm 光连续照射240-260小时。当菌丝体出现子实体原基后，再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时，再用700-750勒克斯，波长为620-760nm 光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间断照射的累计时长为1008-1032小时。

制作蛹虫草酒。选取上述子实体发育良好，单个子实体大部（超过子实体三分之二）长有孢子粉的栽培瓶，加入52度食用白酒，使子实体浸没在酒液中，终止菌体生长，将瓶盖盖紧密封常温保存。

利用特定波长光进行调控，将光照强度和调节时间结合起来，有利于促进子实体的生长发育，并获得高孢子粉含量和有效成分的子实体。

实施例3：制作高孢子粉蛹虫草液体菌种。首先制备培养基：称取新鲜马铃薯180克、葡萄糖20克、蛋白胨3克，磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁1克、复合维生素B片0.05克、自来水1000毫升，将马铃薯打碎后与其它组份混合，调节PH值6.3-6.5。平均分装到6个500毫升三角瓶中，用高温蒸汽消毒灭菌并冷却后，接入蛹虫草菌原种。将三角瓶在培养室中，保持温度20-22度，摇床速度控制在130-150r/min ，摇瓶培养84-96小时。

配置固体培养基：营养液配置：蛋白胨3克，磷酸二氢钾2克、硫酸镁0.5克、复合维生素B片0.05克、水1000毫升，混合后调节其PH值6.3-6.5。干净粳米1000克

选用瓶腔容积为750毫升，瓶体的下部内收成束腰状的耐热玻璃瓶作为栽培瓶体，瓶腔内相互连通的第一腔体和第二腔体分别为锥形腔和纺锤形腔，瓶盖为插接的冠状盖，子实体腔容积为75毫升。将瓶体用自来水洗净晾干备用。取上述粳米和配制好的营养液，每瓶按照粳米30克、营养液36毫升的量加入到栽培瓶体的第一腔体中，用耐高温塑料膜封口后，放入蒸汽灭菌锅中，120度高温蒸汽灭菌30分钟。冷却后，无菌操作接入20毫升上述摇床培养的液体栽培菌种。

子实体培养。将栽培瓶置于光控培养室中，保持室温20-22度，进行光调控诱导培育。首先在黑暗环境下培养90-96小时，待培养基长满菌丝后，用750-800勒克斯，波长为650-760nm 光连续照射192-240小时。当菌丝体出现子实体原基后，再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时，再用750-800勒克斯，波长为650-760nm 灯光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间断照射的累计时长为1008-1080小时。

制作蛹虫草酒。选取上述子实体发育良好，单个子实体大部（超过子实体三分之二）长有孢子粉的栽培瓶，加入52度食用白酒，使子实体浸没在酒液中，终止菌体生长，将瓶盖盖紧密封常温保存。

实施例4：所述蛹虫草固体培养基为富硒培养基，其配方为：粳米1000克、营养液1000毫升；所述营养液配方为：蛋白胨3克，磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、复合维生素B0.05克、有机纳米硒1毫升、水1000毫升、PH值6.5。光调控时，首先在黑暗环境下培养84-96小时，待培养基长满菌丝后，用650-750勒克斯，波长为620-760nm 光连续照射240-260小时。当菌丝体出现子实体原基后，再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时，再用620-760nm 、650-750勒克斯灯光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间隔光照射的累计时长为1050-1080小时。其它同实施例3，能够得到富硒高孢子粉蛹虫草酒。

Claims (7)

1.一种高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法，其特征是包括以下步骤：

a.蛹虫草培养体制备：配置蛹虫草固体培养基，并将其装入到透明瓶体中，封口后整体用高温蒸汽常规灭菌；

b.高孢子粉蛹虫草栽培种培育：配置蛹虫草液体菌种培养基，并用高温蒸汽常规灭菌，冷却后无菌操作接入蛹虫草原菌种，20-22度下，摇床培养72-96小时；

c.接种培养：取上述摇床培养的蛹虫草栽培种，无菌操作接入到上述已灭菌的瓶中蛹虫草固体培养基上，培养室内控制温度在20-22度，并进行光调控培养；所述光调控包括：首先在黑暗环境下培养72-96小时，待瓶内培养基长满菌丝后，用600-800勒克斯白炽灯光连续照射192-288小时；菌丝体出现子实体原基后再进行间断照射处理，即避光或者黑暗处理6-10小时，再用600-800勒克斯灯光照射培养射14-18小时，暗处理和光照射处理间隔循环进行，其间断照射的累计时长为960-1080小时；

d.蛹虫草酒制作：取上述长有子实体的蛹虫草培养瓶，加入一定量饮用白酒，使蛹虫草子实体悬浮在酒液中，密封自然存放即可。

2.按照权利要求1所述的高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法，其特征是所述蛹虫草固体培养基的配方为：粳米750-1000克、营养液800-1000毫升；所述营养液配方为：蛋白胨3-4克，磷酸二氢钾1-2克、硫酸镁0.5-1克、复合维生素B片0.02-0.05克、水800-1000毫升、PH值6.3-6.5；蛹虫草液体菌种培养基配方为：马铃薯180-200克、葡萄糖15-20克、蛋白胨2-3克，磷酸二氢钾1-2克、硫酸镁0.5-1克、复合维生素B片0.02-0.05克、水800-1000毫升、PH值6.3-6.5。

3.按照权利要求2所述的高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法，其特征是所述高孢子粉蛹虫草栽培种培育时，摇床培养时间为72-84小时，摇床速度为130-150r/min；蛹虫草光调控培养为：避光培养72-84小时，待培养基长满菌丝后，用700-750勒克斯、波长为620-760nm光连续照射240-260小时；菌丝体出现子实体原基后间断照射时采用700-750勒克斯、波长为620-760nm 光，间隔照射处理的累计照射时长为960-1008小时。

4.按照权利要求3所述的高孢子粉蛹虫草酒品赏组合体制作方法，其特征是所述蛹虫草固体培养基为富硒培养基，其配方为：粳米1000克、营养液1000毫升；所述营养液配方为：蛋白胨3克，磷酸二氢钾2克、硫酸镁1克、复合维生素B0.05克、有机纳米硒1毫升、水1000毫升、PH值6.5。

5.一种用于制作高孢子粉蛹虫草酒的培养组合体，包括一耐热透明瓶（1），所述耐热透明瓶（1）包括瓶本体（11）和与之活连接的瓶盖（12），其特征是所述瓶本体（11）的瓶腔包括相互连通的第一腔体（21）和第二腔体（22），所述第一腔体（21）与第二腔体（22）之间的连通处呈缩口状，第一腔体（21）中设有蛹虫草菌丝体（31），所述第二腔体（22）为贯通瓶口和第一腔体（21）的子实体腔；蛹虫草子实体（32）分生于蛹虫草菌丝体（31），其基部与蛹虫草菌丝体（31）连为一体，其上部位于第二腔体（22）中。

6.按照权利要求5所述的用于制作高孢子粉蛹虫草酒的培养组合体，其特征是所述瓶本体（11）为耐热玻璃瓶体，第一腔体（21）和第二腔体（22）之间的瓶体内缩成束腰状，束腰下部和上部的瓶腔分别为第一腔体（21）和第二腔体（22），第一腔体（21）为锥形腔，第二腔体（22）呈纺锤形。

7.按照权利要求6所述的用于制作高孢子粉蛹虫草酒的培养组合体，其特征是所述瓶本体（11）的容积为500-750毫升，第一腔体（21）容积为50-75毫升，瓶内蛹虫草固体培养基的加入量为：粳米25-30克、营养液30-36毫升，所述蛹虫草菌丝体（31）与第一腔体（21）壁紧密相接。