CN108675930A - 从荸荠中提取绿原酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及从荸荠中提取绿原酸的方法。利用加工荸荠淀粉或荸荠罐头等加工剩下废弃的荸荠皮和芽，通过打浆、加入提取剂制备粗提液、制备精提液、浓缩干燥和精制，制得绿原酸为白色粉末状，其中绿原酸的含量为50～100%，低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等的含量为0～50%。本发明较传统的以金银花等原料提取绿原酸的生产方法，极大地降低生产成本。传统的以金银花为原料加工时，原料成本目前每千克为300元左右，而本发明没有原料成本；另一方面，避免了加工废弃物的污染环境，一举多得。本发明工艺简便、工艺稳定、生产设备投资规模可控，生产灵活，适合各种规模的企业投资。

Description

从荸荠中提取绿原酸的方法
技术领域
本发明属于生物制品的提取制备技术领域，具体涉及从荸荠中提取绿原酸的工艺方法。
背景技术
绿原酸具有广泛的生物活性，现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、抗氧化、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用。目前，提取绿原酸的原料主要有杜仲科的杜仲的叶， 忍冬科的忍冬、 红腺忍冬、和山银花的干燥花蕾， 蔷薇科的山楂的果实，千屈菜科千屈菜花等等。荸荠皮中含绿原酸也有报道，但报道中含量都不高，因此一直没有受到重视。
绿原酸具有广泛的生物活性，具有广阔的应用领域，但传统的制备方法都是从金银花和杜仲等植物中提取，得率低，原料成本也很高，产品昂贵。
发明内容
为了降绿原酸生产成本及综合利用荸荠加工废弃物，本发明提供一种从荸荠中提取绿原酸的方法。
从荸荠中提取绿原酸的操作步骤如下：
（1）原料选用
收取用荸荠加工荸荠淀粉或荸荠罐头等加工剩下废弃的荸荠皮和芽，所述荸荠为当年11月中旬到第二年的3月中旬之间采收的荸荠；
（2）打浆
将荸荠皮和芽洗净，按重量体积比1g:0.1～2 mL加入打浆剂打浆，得到荸荠皮芽浆；
（3）制备粗提液
按重量体积比1g:0.5～5 mL，在荸荠皮芽浆中加入提取剂搅拌均匀，温度10～80℃、提取10～200分钟，然后过滤或离心或压榨即得荸荠皮芽粗提液和荸荠皮芽渣；
（4）制备提取剂或洗涤剂
在荸荠皮芽渣中加入洗涤剂搅拌洗涤，再过滤或离心或压榨，得到打浆提取液；
（5）制备精提液
将荸荠皮芽粗提液经滤膜过滤或离心分离，得到荸荠皮芽精提液；
（6）浓缩干燥
将荸荠皮芽精提液减压浓缩、减压干燥得到荸荠绿原酸粗提物，所述荸荠绿原酸粗提物中绿原酸含量为5～50%、低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等的含量为50～95%；
（7）绿原酸精制
将荸荠绿原酸粗提物上色谱柱等度洗脱或梯度洗脱，得到绿原酸精制品，所述绿原酸精制品为白色粉末状，其中绿原酸的含量为50～100%，低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等的含量为0～50%。
进一步限定的技术方案如下：
步骤（2）中，首次开机生产时，打浆剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，打浆剂为步骤（4）制得的多功能液。
步骤（3）中，首次开机生产时，提取剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，提取剂为步骤（4）制得的多功能液。
所述步骤（3）中的离心条件和步骤（4）中的离心条件相同，离心转速3000～15000转/分钟、时间10～30分钟。
所述步骤（3）中的过滤或步骤（4）中的过滤均为过40～200目筛的压滤或过40～200目筛的抽滤。
步骤（4）中，按重量体积比1g：1～10 mL在荸荠皮芽渣中加入洗涤剂；首次开机生产时，所述洗涤剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，洗涤剂为步骤（4）制得的多功能液。
步骤（5）中，离心条件：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟。
步骤（5）中，过滤为用100～600目滤膜过滤。
步骤（6）中，所述减压浓缩条件：压力小于或等于-0.08MP，温度20～98℃；减压干燥条件：压力小于或等于-0.1MP，温度-30～120℃。
步骤（6）中，所述等度洗脱：当用树脂做色谱固定相时，以浓度10～90%甲醇或乙醇等度洗脱；当用反相C18做色谱固定相时，以浓度10～90%的甲醇或乙醇等度洗脱；所述梯度洗脱条件：当用树脂做色谱固定相时，起始以浓度10～20%甲醇或乙醇洗脱，甲醇或乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后甲醇或乙醇的浓度达到80～100%；当用反相C18做色谱固定相时，起始以浓度5～20%甲醇或乙醇洗脱，甲醇或乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后甲醇或乙醇的浓度达到90～100%。
本发明的有益技术效果体现在下述几个方面：
1、本发明利用加工废料荸荠皮和芽中提取绿原酸，较传统的以金银花等原料提取绿原酸的生产方法，可极大地降低生产成本。传统的以金银花为原料加工时，原料成本目前每千克为300元左右，而本发明的荸荠皮芽是废弃物，没有原料成本。不仅降低生产成本，还避免了加工废弃物的污染环境，一举多得。
2、本发明采取新鲜的加工废料荸荠皮和芽直接提取绿原酸，不需要传统金银花等原料提取绿原酸的生产工艺中的原料干燥过程，因此更进一步降低加工成本。
3、研究发现，在荸荠的某些成熟阶段，其皮以及芽中的绿原酸含量非常高，目前尚无皮和芽中绿原酸高含量的报道。本发明采取特定成熟阶段采收的荸荠皮和芽来提取绿原酸，其产量大纯度高。本发明方法的绿原酸粗提物中绿原酸含量可达50%，目前尚未见其他原料粗提物中含如此高含量绿原酸的报道。由于杂质含量少，大大提高了进一步纯化的收率。
4、荸荠是一种食材料，故从荸荠中提取的绿原酸提取物具有更高的安全性。其粗提取中除含绿原酸外还含大量有益健康物质如低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等，可直接用于食品，因此比其他原料提取的绿原酸具有更广泛的用途。
5、按本发明工艺方法生产的绿原酸产品成本低，工艺简便、工艺稳定、生产设备投资规模可控，生产灵活，适合各种规模的企业投资。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。
实施例1
从荸荠中提取绿原酸的操作步骤如下：
1.原料选用
收取用荸荠加工荸荠淀粉或荸荠罐头等加工剩下废弃的新鲜荸荠皮和芽，新鲜荸荠皮和芽为当年11月中旬采收的荸荠上皮和芽。
2. 打浆
按料液重量体积比1g：0.1mL将新鲜的荸荠皮、芽和浓度5%的乙醇混合打浆，得到荸荠皮芽浆。浓度5%的乙醇为打浆剂，之后批次生产中，打浆剂为步骤4制得的多功能液。
3. 制备粗提液
按料液重量体积比1g:0.5mL在荸荠皮芽浆中加入浓度5%的乙醇，温度10℃，提取200分钟，然后过40目筛，得到荸荠绿原酸粗提液和残渣。浓度5%的乙醇为提取剂，之后批次生产中，提取剂为步骤4制得的多功能液。
4.制备多功能液
按料液重量体积比1g：1mL在残渣中加入浓度5%的乙醇搅拌洗涤，然后过40目筛，得到的多功能液；浓度5%的乙醇为洗涤剂，之后批次生产中，洗涤剂为本步骤制得的多功能液。
5.提取液精制
将荸荠皮芽粗提液过100目滤膜，滤液即为荸荠皮芽精提液。
6.浓缩干燥
将荸荠皮芽精提液减压浓缩，压力-0.08MP，温度20℃；干燥采用减压干燥，压力-0.1MP，温度20℃。干燥物即为荸荠绿原酸粗提物，含绿原酸5%，含低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等95%。
7.绿原酸精制
将荸荠绿原酸粗提物用10%甲醇溶解，然后上到色谱柱中，用树脂做色谱固定相，以浓度10%甲醇等度洗脱；收集目标成分，脱去溶剂得到干燥的白色或类白色粉末，即为荸荠绿原酸精制品，含绿原酸50%，含低聚糖、桂皮酸衍生物和黄酮等50%。
实施例2：
从荸荠中提取绿原酸的具体操作步骤如下：
1.原料选用
选用新鲜荸荠淀粉和罐头加工废弃物新鲜荸荠皮和芽，该荸荠的采收期应该在当年3月中旬。
2. 打浆
按料液重量体积比1g:2mL将新鲜荸荠皮、芽和乙醇混合打浆，得到荸荠皮芽浆。乙醇为打浆剂，之后批次生产中，打浆剂为步骤4制得的多功能液。
3. 制备粗提液
按料液重量体积比1g:5mL在荸荠皮芽浆中加入乙醇，温度80℃，提取10分钟，在转速15000转/分钟条件下离心分离10分钟，得到荸荠皮芽粗提液和残渣；乙醇为提取剂，之后批次生产中，提取剂为步骤4制得的多功能液。
4. 制备多功能液
按料液重量体积比1g:10mL在残渣中加入乙醇搅拌洗涤，然后转速15000转/分钟，离心10分钟，制得多功能液。本步骤的乙醇为洗涤剂，之后批次生产中，洗涤剂为本步骤制得的多功能液。
5.提取液精制
将荸荠皮芽粗提液过600目滤膜过滤，得到的滤液即为荸荠皮芽精提液。
6.浓缩干燥
将荸荠皮芽精提液减压浓缩，压力-0.15MP，温度98℃；减压干燥，压力-0.2MP，温度-30℃。干燥物即为荸荠绿原酸粗提物，含绿原酸50%，含低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等50%。
7.绿原酸精制
将荸荠绿原酸粗提物用5%甲醇溶解，然后上到色谱柱中；色谱填料为反相C18；用梯度洗脱：起始以浓度为5%甲醇洗脱，甲醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后醇的浓度达到90%。收集目标成分，脱去溶剂得到干燥的白色粉末即得荸荠绿原酸精制品，含绿原酸100%。
实施例3：
从荸荠中提取绿原酸的具体操作步骤如下：
（1）原料选用
选用新鲜荸荠皮和芽。新鲜荸荠皮和芽为当荸荠成熟第二年的1月中旬之间采收的荸荠上皮和芽。
（2）打浆
将新鲜的荸荠皮和芽和浓度50%的乙醇按料液重量体积比1g:1mL混合打浆，得到荸荠皮芽浆。浓度50%的乙醇为打浆剂，之后批次生产中，打浆剂为步骤4制得的多功能液。
（3）制备粗提液
按料液重量体积比1g:2.5mL在荸荠皮芽浆中加入浓度50%的乙醇，温度50℃，提取100分钟，然后过80目筛过滤，滤液即荸荠皮芽粗提液；浓度50%的乙醇为提取剂，之后批次生产中，提取剂为步骤4制得的多功能液。
（4）制备多功能液
按料液重量体积比1g:5mL在残渣中加入浓度50%的乙醇搅拌洗涤，然后80目筛过滤，制得多功能液。浓度50%的乙醇为洗涤剂，之后批次生产中，洗涤剂为本步骤制得的多功能液。
（5）提取液精制
将荸荠皮芽粗提液在20000转离心5分钟，得到的离心上清即为荸荠皮芽精提液。
（6）浓缩干燥
将荸荠皮芽精提液减压浓缩，压力-0.1MP，温度50℃；干燥压力-0.15MP，干燥温度40℃。干燥物即为荸荠绿原酸粗提物，含绿原酸25%，含低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等75%。
（7）绿原酸精制
将荸荠绿原酸粗提物用10%乙醇溶解，然后上到色谱柱中进行色谱法纯化，色谱填料为树脂；用梯度洗脱，起始以浓度为10%乙醇洗脱，乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后醇的浓度达到90%；收集目标成分，脱去溶剂得到干燥的白色粉末，即为荸荠绿原酸精制品，含绿原酸80%，含低聚糖、桂皮酸衍生物和黄酮20%。

Claims (10)

1.从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于操作步骤如下：
（1）原料选用
收取用荸荠加工荸荠淀粉或荸荠罐头等加工剩下废弃的荸荠皮和芽，所述荸荠为当年11月中旬到第二年的3月中旬之间采收的荸荠；
（2）打浆
将荸荠皮和芽洗净，按重量体积比1g：0.1～2 mL加入打浆剂打浆，得到荸荠皮芽浆；
（3）制备粗提液
按重量体积比1g:0.5～5 mL，在荸荠皮芽浆中加入提取剂搅拌均匀，温度10～80℃、提取10～200分钟，然后过滤或离心或压榨即得荸荠皮芽粗提液和荸荠皮芽渣；
（4）制备提取剂或洗涤剂
在荸荠皮芽渣中加入洗涤剂搅拌洗涤，再过滤或离心或压榨，得到多功能液；
（5）制备精提液
将荸荠皮芽粗提液经滤膜过滤或离心分离，得到荸荠皮芽精提液；
（6）浓缩干燥
将荸荠皮芽精提液减压浓缩、减压干燥得到荸荠绿原酸粗提物，所述荸荠绿原酸粗提物中绿原酸含量为5～50%、低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等的含量为50～95%；
（7）绿原酸精制
将荸荠绿原酸粗提物用起始流动相溶解上色谱柱，等度洗脱或梯度洗脱，得到绿原酸精制品，所述绿原酸精制品为白色粉末状，其中绿原酸的含量为50～100%，低聚糖、多糖、桂皮酸衍生物和黄酮等的含量为0～50%。
2.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（2）中，首次开机生产时，打浆剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，打浆剂为步骤（4）制得的多功能液。
3.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（3）中，首次开机生产时，提取剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，提取剂为步骤（4）制得的多功能液。
4.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的离心条件和步骤（4）中的离心条件相同，离心转速3000～15000转/分钟、时间10～30分钟。
5.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述步骤（3）中的过滤或步骤（4）中的过滤均为过40～200目筛的压滤或过40～200目筛的抽滤。
6.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（4）中，按重量体积比1g：1～10 mL在荸荠皮芽渣中加入洗涤剂；首次开机生产时，所述洗涤剂为浓度为5～100%的乙醇；之后批次生产中，洗涤剂为步骤（4）制得的多功能液。
7.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（5）中，离心条件：离心转速5000～20000转/分钟、时间5～20分钟。
8.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（5）中，过滤为用100～600目滤膜过滤。
9.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（6）中，所述减压浓缩条件：压力小于或等于-0.08MP，温度20～98℃；减压干燥条件：压力小于或等于-0.1MP，温度-30～120℃。
10.根据权利要求1所述的从荸荠中提取绿原酸的方法，其特征在于：步骤（6）中，所述等度洗脱：当用树脂做色谱固定相时，以浓度10～90%甲醇或乙醇等度洗脱；当用反相C18做色谱固定相时，以浓度10～90%的甲醇或乙醇等度洗脱；所述梯度洗脱条件：当用树脂做色谱固定相时，起始以浓度10～20%甲醇或乙醇洗脱，甲醇或乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后甲醇或乙醇的浓度达到80～100%；当用反相C18做色谱固定相时，起始以浓度5～20%甲醇或乙醇洗脱，甲醇或乙醇的浓度随洗脱时间均匀逐渐升高，最后甲醇或乙醇的浓度达到90～100%。
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仰振中: "高效毛细管电泳同时检测荸荠中的4 种黄酮类物质", 《食品与发酵工业》 *

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