CN110787220A - 一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法 - Google Patents
一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,涉及天然化合物成分分离纯化。本发明以苦荞麦为原料,粉碎后过目筛得苦荞麸皮粉;将苦荞麸皮粉通过乙醇浸泡加热回流提取、减压浓缩至干得到苦荞麸皮总黄酮粗品。将苦荞麸皮总黄酮粗品通过大孔树脂分离纯化得到苦荞麸皮总黄酮精品。其工艺简单,成本低,易操作,无毒,得到的苦荞麸皮提取物的色素含量低,具有很好的开发利用价值。
Description
技术领域
本发明涉及一种药食两用作物有效成分的制备方法,具体涉及一种从苦荞麸皮中提取纯化总黄酮的方法,属于天然产物分离领域。
背景技术
苦荞麦俗称苦荞(Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn.),学名鞑靼荞麦(Tartarybuckwheat),属双子叶蓼科荞麦属。苦荞在我国种植历史悠久,《本草纲目》曾记载:苦荞麦味苦,性平寒,有益气力、续精神、利耳目、降气、宽肠、健胃的功效,是少有的亦食亦药粮食作物。
苦荞作为一种重要的粮食作物资源,具有较高的营养价值。其有效成分丰富,所富含的蛋白质、粗纤维、脂肪酸、维生素及一些矿物元素的含量均高于小麦和大米。此外,苦荞还含有其它多种粮食作物所没有的黄酮类化合物。四川苦荞和山西苦荞均含有大量的黄酮类化合物,其中四川苦荞中的黄酮以芦丁为主,同时含有槲皮素、山奈酚等化合物。黄酮类化合物作为苦荞中的主要活性物质,具有抗氧化、降血糖、降血脂、抗过敏、抗炎、抗癌抗肿瘤、杀菌抑菌、预防动脉粥样硬化、预防老年痴呆等多种生理功能。由此可见,开发苦荞中的黄酮类化合物具有重要意义。
研究表明,苦荞种子不同部位(种子、种壳、全粉、外层粉、心粉、麸皮等)的黄酮类化合物含量差异较大,其中苦荞麸皮中黄酮类化合物的含量最高,是苦荞加工中具有利用价值的副产物。
目前对于苦荞麸皮中黄酮类物质的提取多采用水提法、碱提取酸沉淀法、有机溶剂提取法等,但这些方法普遍存在提取时间长、提取物中杂质含量较多、提取率不高等缺点,导致提取物颜色较深,不利于诸如保健酒之类的产品酒体设计;超临界萃取法具有提取率高、无污染等优点,但其生产所用设备昂贵、生产成本高;微波提取法及超声波辅助提取法具有提取时间短、提取效率高等优点,但二者均不适用于大规模生产。因此,需要一种工艺简单、成本低、色素含量少、适用于大规模工业生产的提取分离纯化苦荞麸皮总黄酮的方法。
发明内容
针对目前存在的问题,本发明的目的在于提供一种工艺简单,成本低,易操作,适用于大规模生产,且纯化后提取物中色素含量低的大孔吸附树脂富集纯化苦荞麸皮总黄酮的方法,用于制备保健酒生产所需黄酮原料。
本发明所述的一种大孔吸附树脂富集纯化苦荞麸皮总黄酮的方法,按下列步骤进行:
(1)取苦荞麦粉碎,过60-80目筛得苦荞麸皮粉;
(2)将步骤(1)中得到的苦荞麸皮粉按料液比1:8-1:12加入50-70%食品级乙醇溶液于50-70℃进行热回流提取,提取时间为1-3h,室温过滤制得提取液;
(3)步骤(2)重复2-3次,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品;
(4)将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品;
(5)将步骤(4)中得到的第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液;
(6)将步骤(5)中的第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品;
(7)将步骤(6)中制得的第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液;
(8)将步骤(7)中制得的第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品;
(9)将步骤(4)中得到的第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液;
(10)将步骤(9)中的第二上样液以2BV/h的速度通过强吸附解吸能力大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗所述强吸附解吸能力大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品;
(11)将步骤(10)中制得的第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液;
(12)将步骤(11)中制得的第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品;
(13)将步骤(7)中的制得的第一苦荞麸皮总黄酮精品与步骤(12)中制得的第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。
优选的,步骤(2)中苦荞麸皮粉按料液比1:10加入70%食品级乙醇溶液于60℃进行热回流提取。
优选的,步骤(10)中的强吸附解吸能力大孔树脂柱具体为DM130或AB-8或D-101型大孔树脂。
优选的,步骤(6)中的ADS-7型大孔吸附树脂被重复使用,重复使用次数可以为2-30次,以25次为最佳重复使用次数。重复使用的方法为:在步骤(6)中洗脱完成后,无需如传统方法中要经过95%乙醇或酸碱处理,本发明中仅用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂至无乙醇味,即完成1次使用,下一次提取时,直接将此纯水清洗到无乙醇味的树脂用于步骤(6)中。ADS-7型大孔树脂利用率实验结果显示,树脂在重复使用30次后,黄酮吸附量仅降低8.9%,黄酮吸附率降低9.3%。
大孔吸附树脂有不同种类,不同种类的大孔吸附树脂的分离性能不同,考虑到保健酒需保留一定色泽,本发明选择的ADS-7型大孔吸附树脂在分离纯化苦荞麸皮总黄酮中能起到吸附色素的作用,同时,配合采用强吸附解吸能力大孔树脂(例如DM130、AB-8、D-101型大孔树脂)富集纯化,以提高黄酮总量。
本发明所述的一种大孔吸附树脂富集纯化苦荞麸皮总黄酮的方法,该方法具有以下优点:
(1)本发明以食品级乙醇和水作为溶剂,价格低廉、无毒,且乙醇可回收再利用;
(2)本发明采用ADS-7型大孔吸附树脂富集纯化苦荞麸皮总黄酮,用于吸附色素,同时采用强吸附解吸能力大孔树脂富集纯化苦荞麸皮总黄酮,用以提高苦荞麸皮总黄酮的总量,将两种大孔吸附树脂巧妙的结合起来,得到最符合需求的黄酮精品;
(3)本发明将ADS-7型大孔吸附树脂在未采用95%乙醇或酸碱处理的情况下重复使用了30次,最大程度地实现了ADS-7型大孔吸附树脂的重复利用,环保且经济。
附图说明
图1是AB-8(A)、ADS-7(B)型大孔树脂富集黄酮HPLC检测结果,其中1:芦丁,2:山奈酚-3-O芸香糖苷,3:槲皮素,4:山奈酚。
具体实施方式
实施例1
具体实施时,取苦荞麦粉碎,过60目筛得苦荞麸皮粉,将得到的苦荞麸皮粉按料液比1:10加入70%食品级乙醇溶液于60℃进行热回流提取3次,每次提取时间为3h,室温过滤制得提取液,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品,将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品,将第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液,第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品,将第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液,将第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品,将第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液,将第二上样液以2BV/h的速度通过AB-8型大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗AB-8型大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品,将第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液,将第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品,将第一苦荞麸皮总黄酮精品与第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。实施过程中的苦荞麸皮总黄酮参数如表1所示。
表1实施例1苦荞麸皮总黄酮参数
实施例2
具体实施时,取苦荞麦粉碎,过60目筛得苦荞麸皮粉,将得到的苦荞麸皮粉按料液比1:12加入60%食品级乙醇溶液于50℃进行热回流提取3次,每次提取时间为2h,室温过滤制得提取液,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品,将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品,将第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液,第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,所述ADS-7型大孔吸附树脂柱为实施例1中制得第一吸附品时用纯水清洗过的树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品,将第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液,将第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品,将第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液,将第二上样液以2BV/h的速度通过AB-8型大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗AB-8型大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品,将第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液,将第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品,将第一苦荞麸皮总黄酮精品与第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。实施过程中的苦荞麸皮总黄酮参数如表2所示。
表2实施例2苦荞麸皮总黄酮参数
实施例3
具体实施时,取苦荞麦粉碎,过60目筛得苦荞麸皮粉,将得到的苦荞麸皮粉按料液比1:10加入50%食品级乙醇溶液于60℃进行热回流提取3次,每次提取时间为2h,室温过滤制得提取液,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品,将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品,将第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液,第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,所述ADS-7型大孔吸附树脂柱为实施例2中制得第一吸附品时用纯水清洗过的树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品,将第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液,将第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品,将第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液,将第二上样液以2BV/h的速度通过AB-8型大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗AB-8型大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品,将第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液,将第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品,将第一苦荞麸皮总黄酮精品与第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。实施过程中的苦荞麸皮总黄酮参数如表3所示。
表3实施例3苦荞麸皮总黄酮参数
实施例4
具体实施时,取苦荞麦粉碎,过60目筛得苦荞麸皮粉,将得到的苦荞麸皮粉按料液比1:10加入60%食品级乙醇溶液于70℃进行热回流提取3次,每次提取时间为1h,室温过滤制得提取液,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品,将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品,将第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液,第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,所述ADS-7型大孔吸附树脂柱为已经重复使用过24次的树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品,将第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液,将第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品,将第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液,将第二上样液以2BV/h的速度通过AB-8型大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗AB-8型大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品,将第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液,将第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品,将第一苦荞麸皮总黄酮精品与第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。实施过程中的苦荞麸皮总黄酮参数如表4所示。
表4实施例4苦荞麸皮总黄酮参数
实施例5
具体实施时,取苦荞麦粉碎,过60目筛得苦荞麸皮粉,将得到的苦荞麸皮粉按料液比1:8加入70%食品级乙醇溶液于70℃进行热回流提取3次,每次提取时间为2h,室温过滤制得提取液,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品,将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品,将第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液,第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,所述ADS-7型大孔吸附树脂柱为重复使用过30次的树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品,将第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液,将第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品,将第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液,将第二上样液以2BV/h的速度通过AB-8型大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗AB-8型大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品,将第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液,将第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品,将第一苦荞麸皮总黄酮精品与第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。实施过程中的苦荞麸皮总黄酮参数如表5所示。
表5实施例5苦荞麸皮总黄酮参数
Claims (6)
1.一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取苦荞麦粉碎,过60-80目筛得苦荞麸皮粉;
(2)将步骤(1)中得到的苦荞麸皮粉按料液比1:8-1:12加入50-70%食品级乙醇溶液于50-70℃进行热回流提取,提取时间为1-3h,室温过滤制得提取液;
(3)将步骤(2)重复2-3次,将提取液合并后减压浓缩至干并回收乙醇,得苦荞麸皮总黄酮粗品;
(4)将苦荞麸皮总黄酮粗品按50%和50%的比例分为两份,分别称为第一苦荞麸皮总黄酮粗品和第二苦荞麸皮总黄酮粗品;
(5)将步骤(4)中得到的第一苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1mg/mL的第一上样液;
(6)将步骤(5)中的第一上样液以2BV/h的速度过ADS-7型大孔吸附树脂柱,待第一上样液过完后用纯水清洗ADS-7型大孔吸附树脂柱至流出液澄清为止,制得第一吸附品;
(7)将步骤(6)中制得的第一吸附品用90%食品级乙醇溶液以2BV/h的速度进行洗脱,制得第一洗脱液;
(8)将步骤(7)中制得的第一洗脱液浓缩干燥,制得第一苦荞麸皮总黄酮精品;
(9)将步骤(4)中得到的第二苦荞麸皮总黄酮粗品加水配制成1.5mg/mL的第二上样液;
(10)将步骤(9)中的第二上样液以2BV/h的速度通过强吸附解吸能力大孔树脂柱,待第二上样液过完后用水清洗强吸附解吸能力大孔树脂柱至流出液澄清为止,制得第二吸附品;
(11)将步骤(10)中制得的第二上样液用80%食品级乙醇溶液以1BV/h的速度进行洗脱,制得第二洗脱液;
(12)将步骤(11)中制得的第二洗脱液浓缩干燥,制得第二苦荞麸皮总黄酮精品;
(13)将步骤(7)中的制得的第一苦荞麸皮总黄酮精品与步骤(12)中制得的第二苦荞麸皮总黄酮精品混合,制得苦荞麸皮总黄酮精品。
2.如权利要求1所述的一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(2)中苦荞麸皮粉按料液比1:10加入70%食品级乙醇溶液于60℃进行热回流提取。
3.如权利要求1所述的一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,所述步骤(10)中的强吸附解吸能力大孔树脂柱为DM130或AB-8或D-101型大孔树脂。
4.如权利要求1-3任一项所述的一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,所述ADS-7型大孔树脂重复用于步骤(6)中。
5.如权利要求4所述的一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,所述ADS-7型大孔树脂重复使用2-30次。
6.如权利要求4所述的一种苦荞麸皮总黄酮的提取纯化方法,其特征在于,所述ADS-7型大孔树脂重复使用25次。
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CN114129621A (zh) * | 2021-11-11 | 2022-03-04 | 泸州品创科技有限公司 | 苦荞黄酮在制备抑菌或防治胃炎的药物或保健品中的用途 |
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CN104906200A (zh) * | 2015-05-26 | 2015-09-16 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种苦荞麦麸皮总黄酮的制备方法及其降血压应用 |
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