CN108669509A - 一种新型含有10-hda脂质体的蜂王浆口服液及其制备方法 - Google Patents

一种新型含有10-hda脂质体的蜂王浆口服液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种新型含有10‑HDA脂质体的蜂王浆口服液，由10‑HDA脂质体和蜂王浆水解液组成，10‑HDA脂质体内容物为磷脂、胆固醇、磷酸二鲸蜡酯、10‑HDA，10‑HDA脂质体在蜂王浆口服液中具有很好的稳定性。同时，提供了一种制备方法，包括10‑HDA脂质体制备、蜂王浆水解液的制备，复配以及包装，经检验合格后入库等步骤，该方法工艺简单，生产周期短。

Description

一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液及其制备方法
技术领域
本发明属于保健食品技术领域，涉及一种蜂王浆口服液及其制备方法，具体涉及一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液及其制备方法。
背景技术
蜂王浆，是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽下腺分泌乳白色或淡黄色浆状物质，是工蜂用来饲喂蜂王和幼虫的一种高级营养食物，也是蜂王终身的食物。国内外均将其视为天然的高级营养品，并对其进行了多方研究。
10-HDA是蜂王浆中特有的不包含脂肪酸，它是蜂王浆的标志性物质，也称王浆酸。其具有抗疲劳、抗辐射、调节免疫、改善记忆、抑制和杀伤癌细胞、消炎抗菌杀病毒等功效。一直以来人们认为10-HDA具有一定的热稳定性，在高温下其含量变化不明显，但近年来的研究发现，10-HDA在蜂王浆产品中其实是不稳定的，如10-HDA在蜂王浆冻干粉、蜂王浆含片、蜂王浆胶囊、蜂王浆口服液等产品中均呈现明显的不稳定，特别是蜂王浆口服液，10-HDA极不稳定，随时间下降明显，10-HDA含量的下降，直接影响到蜂王浆产品的保健和药用性能。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，该内容物配方采用蜂王浆为主料，用脂质体包埋10-HDA，通过脂质体包埋的10-HDA与蜂王浆其他成分的协同作用，大大增强了蜂王浆口服液的的保健和药用效果，同时，10-HDA稳定性得到极大提高，保证蜂王浆的效果更长久。
一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液主要通过下述的技术方案来实现的：
一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，由10-HDA脂质体和蜂王浆水解液组成。
所述10-HDA脂质体对10-HDA成分进行有效包埋，有利于提升蜂王浆口服液的稳定性。
蜂王浆中含有复杂锁链状蛋白质无法直接被人体吸收，对蜂王浆进行前处理，引入蛋白质水解形成蜂王浆水解液，使蜂王浆中复杂锁链状连接的蛋白质酶解成分子量更小的肽、缩氨酸或氨基酸，更能进一步发挥蜂王浆的营养功能和保健功能。
进一步的，所述10-HDA脂质体的组分配方为：大豆磷脂，胆固醇与磷酸二鲸蜡酯，其摩尔比为7～4.8：2～2.8：1。
进一步的，所述大豆磷脂为精制大豆磷脂。
进一步的，所述10-HDA脂质体和蜂王浆水解液的质量比为1:10。
进一步的，所述蜂王浆水解液为蜂王浆滤液依次经胃蛋白酶、胰蛋白酶二次酶解后所得到的蜂王浆水解液。
进一步的，所述10-HDA脂质体中10-HDA含量≥2％。
本发明的另外一个目的是提供一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，主要包括以下步骤：
1)10-HDA脂质体的制备：
0℃下，取出10-HDA低温粉碎成40～60目的粉末，采用乙醇浸提溶解，制备10-HDA脂质体。
制备10-HDA脂质体可采用超声波分散法。优选方式为将10-HDA乙醇溶液，加入磷脂、胆固醇、磷酸二鲸蜡酯与乙醇，搅拌，蒸发去除有机溶剂，残液经超声处理，然后混悬于磷酸盐缓冲液中。
制备10-HDA脂质体也可采用高压匀浆法。优选方式为将10-HDA乙醇溶液、磷脂、胆固醇、磷酸二鲸蜡酯加入高压乳匀机均匀分散成脂质体。
2)蜂王浆水解液的制备：将提取10-HDA所过滤的蜂王浆滤液收集，再加入1～1.5倍水，调节pH，加入胃蛋白酶水解后，调节pH，再加入胰蛋白酶二次水解，过滤，滤液即为蜂王浆水解液；
3)复配：10-HDA脂质体与蜂王浆水解液按质量比1:10进行复配，并混合均匀；
4)分装，检验，包装，经检验合格后入库。
进一步的，所述一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，还包括10-HDA天然提取步骤。
进一步的，所述步骤1)10-HDA脂质体的制备，所述10-HDA为优质蜂王浆中天然提取的10-HDA。
进一步的，所述10-HDA脂质体中的10-HDA含量≥2％。
进一步的，所述步骤3)复配步骤中，复配后可加入适量的甜味剂。
本发明配方采用蜂王浆为主料，用脂质体包埋10-HDA，精制大豆磷脂和胆固醇、磷酸二鲸蜡酯包埋10-HDA，通过脂质体包埋的10-HDA，稳定性得到极大提高，与蜂王浆其他成分的协同作用，大大增强了蜂王浆口服液的的保健和药用效果。
蜂王浆水解液使蜂王浆中复杂锁链状连接的蛋白质酶解成分子量更小的肽、缩氨酸或氨基酸，更能发挥蜂王浆的营养功能和保健功能。
同时，提供了一种制备方法，对10-HDA能够有效形成包埋，稳定性高，同时该方法工艺简单，生产周期短。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
脂质体的粒径测定采用激光测粒仪，用HPLC法测定10-HDA释放率和包埋率。
实施例1
一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备：
1)10-HDA天然提取：
将优质蜂王浆中加入等量的水混匀，置于0-4℃温度下储存18h，使10-HDA结晶出来，用180目滤布滤过，分别收集蜂王浆滤液和滤渣备用；滤渣用95％乙醇萃取2h，滤过，收集滤液，滤液用3倍的水进行反萃，混合均匀后置于0-4℃下待癸烯酸结晶，过滤收集癸烯酸结晶体，真空干燥即得10-HDA纯品。
2)10-HDA脂质体的制备
超声波法：取10-HDA 1.1g低温粉碎成40目的粉末，溶解于乙醇中，加入磷脂22g，胆固醇6.4g，磷酸二鲸蜡酯3.1g，溶于乙醇，超声分散，去除大部分乙醇，残液加入磷酸缓冲液，进一步得到10-HDA脂质体。
经测试：10-HDA脂质体的粒径为110nm；10-HDA含量为2.84％；10-HDA包埋率95.8％。
3)蜂王浆水解液的制备：将提取10-HDA所过滤的蜂王浆滤液收集，再加入1倍水，混匀；一次酶解：调节pH至2.0，加入质量比0.3％的胃蛋白酶，在37℃温度下恒温酶解2h；二次酶解：调节pH至7.5，加入质量比0.3％的胰蛋白酶，在37℃温度下恒温酶解3h；二次酶解液冰浴停止酶解反应，离心收集上清液，用1μm微孔滤膜滤过，收集滤液再经3KDa的纳滤膜滤过，滤液蜂王浆水解液；
4)复配：10-HDA脂质体与蜂王浆水解液复配比例为1:10，再加入适量的甜味剂混合均匀，复配的蜂王浆口服液中10-HDA含量为：0.22％；
5)分装，检验，包装，经检验合格后入库。
实施例2
一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备：
1)10-HDA天然提取：
在蜂王浆中加入等量的水混匀，置于0-4℃温度下储存24h，使10-HDA结晶出来，用200目滤布滤过，分别收集蜂王浆滤液和滤渣备用；滤渣用95％乙醇萃取1h，滤过，收集滤液，滤液用3倍的水进行反萃，混合均匀后置于0-4℃下待癸烯酸结晶，过滤收集癸烯酸结晶体，真空干燥即得10-HDA纯品。
2)10-HDA脂质体的制备
高压匀浆法：取10-HDA 1.1g低温粉碎成60目的粉末，溶解于乙醇中，磷脂21.5g，胆固醇8.9g，磷酸二鲸蜡酯4.5g，溶于乙醇，将上述物料各成分加入高压乳匀机均匀分散成脂质体。
经测试：10-HDA脂质体的粒径为117nm；10-HDA含量为2.45％；10-HDA包埋率95.8％。
3)蜂王浆水解液的制备：将提取10-HDA所过滤的蜂王浆滤液收集，再加入1.5倍水，混匀；一次酶解：调节pH至2.0，加入质量比0.3％的胃蛋白酶，在37℃温度下恒温酶解2h；二次酶解：调节pH至7.5，加入质量比0.3％的胰蛋白酶，在37℃温度下恒温酶解3h；二次酶解液冰浴停止酶解反应，离心收集上清液，用1μm微孔滤膜滤过，收集滤液再经3KDa的纳滤膜滤过，滤液蜂王浆水解液；
4)复配：10-HDA脂质体:蜂王浆水解液复配比例为1:10，再加入适量的甜味剂混合均匀，复配的蜂王浆口服液中10-HDA含量为：0.20％；
5)分装，检验，包装，经检验合格后入库。
实施例3
实施例1制备的新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液(II)与10-HDA未进行包埋的蜂王浆口服液(I)稳定性性能比较见下表：
表 稳定性性能测定结果
结果表明：10-HDA未进行包埋的蜂王浆口服液其中的10-HDA极不稳定，在3个月时就全部发生变化，而新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的稳定性保持良好。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液由10-HDA脂质体和蜂王浆水解液组成。
2.根据权利要求1所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述10-HDA脂质体的组分配方为：大豆磷脂，胆固醇与磷酸二鲸蜡酯，其摩尔比为7～4.8：2～2.8：1。
3.根据权利要求1所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述10-HDA脂质体和蜂王浆水解液的质量比为1:10。
4.根据权利要求1所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述蜂王浆水解液为蜂王浆依次经胃蛋白酶、胰蛋白酶二次酶解后所得到的蜂王浆水解液。
5.根据权利要求2所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述大豆磷脂为精制大豆磷脂。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液，其特征在于，所述10-HDA脂质体中10-HDA含量≥2％。
7.一种新型含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)10-HDA脂质体的制备：采用超声波分散法或高压匀浆法制备10-HDA脂质体；
采用超声波分散法：将10-HDA溶于乙醇溶液，加入磷脂、胆固醇与磷酸二鲸蜡酯，搅拌，蒸发去除有机溶剂，残液经超声处理，然后混悬于磷酸盐缓冲液中制得；
采用高压匀浆法：将10-HDA乙醇溶液、磷脂、胆固醇、磷酸二鲸蜡酯加入高压乳匀机均匀分散成脂质体；
2)蜂王浆水解液的制备：在提取10-HDA所过滤的蜂王浆滤液中，加入1～1.5倍水，依次加入胃蛋白酶和胰蛋白酶进行水解并过滤，滤液即为蜂王浆水解液；
3)复配：10-HDA脂质体与蜂王浆水解液按质量比1:10进行复配，混合均匀；
4)分装，检验，包装，经检验合格后入库。
8.根据权利要求7所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，其特征在于，还包括10-HDA天然提取步骤。
9.根据权利要求7所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤1)10-HDA脂质体的制备步骤中，所述10-HDA脂质体中10-HDA的含量≥2％。
10.根据权利要求7所述的含有10-HDA脂质体的蜂王浆口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤3)复配步骤中，复配后可加入适量的甜味剂。
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