CN108633878A - 一种离体器官保护液 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种离体器官保护液，该保护液的溶剂为水，包括以下质量浓度或摩尔浓度的组分：细胞肿胀抑制剂：0.8～1.6g/L；细胞膜稳定剂：0.01～0.015g/L；腺苷：0.005～0.008mol/L；别嘌呤醇：0.001～0.002mol/L；谷胱甘肽：0.001～0.005mol/L；H+缓冲剂：0.1～0.12mol/L；硫酸镁：0.003～0.006mol/L；其中，所述细胞肿胀抑制剂包括聚乙烯醇、氢氧化钾和氢氧化钠。与现有技术相比，本发明减小溶液粘度、保护细胞膜且降低制作成本。
Description
技术领域
本发明涉及器官移植技术，具体涉及一种离体器官保护液。
背景技术
器官保存液对提高器官利用率，进而提升移植手术成功率具有重大意义。Belzer等人认为保护液若想成功保存离体器官必须满足以下六点：1、减少因低温保存导致的细胞水肿；2、防止细胞的酸化作用；3、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；4、防止或减轻再灌注损伤；5、提供再生高能磷酸化合成的底物；6、保持细胞内环境稳定。
目前，医院用的最多的器官保存液为UW液——由Belter设计得出，并已证实用其保存的肝，肾等离体器官等均具有良好的临床应用效果。UW液中添加了地塞米松，青霉素等，使得器官的平均安全离体时间从12分钟延长至15小时，UW液使得保护液进入了一个新时期。
然而UW液仍存在以下缺陷，1、羟乙基淀粉粘度太高，不利于灌注。2、细胞膜稳定度较低3、价格昂贵。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种保存效果好、成本低的离体器官保护液及其制备方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种离体器官保护液，该保护液的溶剂为水，包括以下质量浓度或摩尔浓度的组分：
其中，所述细胞肿胀抑制剂包括聚乙烯醇、氢氧化钾和氢氧化钠。
上述成分中，细胞肿胀抑制剂能够有效抑制离体器官细胞的肿胀，采用聚乙烯醇，能够减小整个保护液的粘度，防止细胞因低温引起的水肿，另外，细胞肿胀抑制剂还包含氢氧化钠和氢氧化钾，Na+、K+为渗透压成分，调节细胞渗透压，抑制细胞肿胀，且这两种物质还可调节pH，pH呈弱碱性有助于离体器官的保存。
上述成分中，添加细胞膜稳定剂，可以稳定细胞膜，防止糖类渗透；添加H+缓冲剂，可以抑制酸中毒，降低糖酵解，防止酸化。
另外，腺苷为核酸腺嘌呤合成前体，别嘌呤醇可以抑制黄嘌呤氧化及超氧化物生成，谷胱甘肽可以消除氧自由基，防止细胞内物质被氧化失活，硫酸镁作为酶辅助因子，可用于能量传递，这些都是离体器官长时间保存不可缺少的。
所述的细胞肿胀抑制剂中聚乙烯醇、氢氧化钾和氢氧化钠的质量比为(800～1500)：(10～20)：(5～10)。
优选的，所述的细胞膜稳定剂包括海藻糖和地塞米松，所述海藻糖和地塞米松的质量比为(3～6)：(5～10)。
优选的，所述的H+缓冲剂包括磷酸二氢钾和组氨酸，所述磷酸二氢钾和组氨酸的摩尔比为(1～2)：(3～5)。
优选的，所述的保护液的pH值为7.35～7.55。
优选的，所述保护液的保藏温度小于4℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：
1、使用用聚乙烯醇代替昂贵的羟乙基淀粉，减小溶液粘度、抑止细胞肿胀且降低制作成本；
2、以海藻糖作为保存液中的主要非通透性成分，抑止细胞肿胀的同时保护细胞膜，降低细胞膜的通透性；
3、使用的都是常见的物质，大大降低了成本。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1
一种离体器官保护液，具体配方如表1所示：
表1离体器官保护液组成成分
| 成分 | 含量 |
| 聚乙烯醇(PVA) | 1g/L |
| 海藻糖 | 0.005g/L |
| 组氨酸 | 0.09mol/L |
| 氢氧化钠(0.05mol/L) | 4-6ml |
| 氢氧化钾(0.005mol/L) | 19-21ml |
| 腺苷 | 0.006mol/L |
| 别嘌呤醇 | 0.001mol/L |
| 谷光甘肽 | 0.003mol/L |
| 磷酸二氢钾 | 0.025mol/L |
| 硫酸镁 | 0.005mol/L |
| 地塞米松 | 8mg/l |
配制方法如下：
使用电子天平精确称量上表配方药物，用适量无菌蒸馏水(约700ml)完全溶解后，加蒸馏水至足量(1000ml)，测定PH值、渗透压、离子浓度。上述配制过程均在无菌条件下进行，并采用无菌过滤消毒。本器官保护液必须保存在4℃温度下。
本发明的优点如下：
提供了一种配制新的更为有效的多器官保护液，配制方法简单，易于操作。这种新型多器官保护液和UW液相比，适当降低其浓度，抑制了因低温造成的细胞肿胀，使得细胞膜更加稳定，且降低了制作成本。
具体配制过程如下(以1L为例)：
1、蒸馏水：在1L的容器内先加入400ml的蒸馏水。
2、组氨酸：添加13.95g组氨酸，搅拌直至液体清澈。
3、氢氧化钾：添加20.00ml的0.005mol/L的氢氧化钾，搅拌6分钟。
4、氢氧化钠：添加5.00ml的0.05mol/L的氢氧化钠，搅拌6分钟。
5、腺苷：添加腺苷1.60g的，搅拌直至液体清澈。
6、别嘌呤醇：添加0.136g别嘌呤醇，搅拌至液体清澈。
7、磷酸二氢钾：添加3.4g磷酸二氢钾，搅拌至液体清澈。
8、硫酸镁：添加0.60g硫酸镁，搅拌至液体清澈。
9、海藻糖：添加1.71g海藻糖，搅拌至液体清澈。
10、聚乙烯醇：添加1g聚乙烯醇，搅拌6分钟。
11、谷胱甘肽：添加0.92g谷胱甘肽。搅拌至液体清澈。
12、地塞米松：添加8mg地塞米松，搅拌至液体清澈。
12、pH调节:以0.05mol/L的氢氧化钠作调节剂，将pH调至7.45±0.10.
13、容量：加入无菌蒸馏水至1000ml，并搅拌6分钟。
上述操作均在无菌配液室完成，所有用具均经过无菌处理。
将上述制备得到的保护液，用于小鼠肝脏的离体保存，使用本发明保护液保存48小时后，组织含水量与正常对照组相当，优于UW液，透明质酸摄取值与UW液组持平。
Claims (6)
1.一种离体器官保护液，其特征在于，该保护液的溶剂为水，包括以下质量浓度或摩尔浓度的组分：
其中，所述细胞肿胀抑制剂包括聚乙烯醇、氢氧化钾和氢氧化钠。
2.根据权利要求1所述的一种离体器官保护液，其特征在于，所述的细胞肿胀抑制剂中聚乙烯醇、氢氧化钾和氢氧化钠的质量比为(800～1500)：(10～20)：(5～10)。
3.根据权利要求1所述的一种离体器官保护液，其特征在于，所述的细胞膜稳定剂包括海藻糖和地塞米松，所述海藻糖和地塞米松的质量比为(3～6)：(5～10)。
4.根据权利要求1所述的一种离体器官保护液，其特征在于，所述的H+缓冲剂包括磷酸二氢钾和组氨酸，所述磷酸二氢钾和组氨酸的摩尔比为(1～2)：(3～5)。
5.根据权利要求1所述的一种离体器官保护液，其特征在于，所述的保护液的pH值为7.35～7.55。
6.根据权利要求1所述的一种离体器官保护液，其特征在于，所述保护液的保藏温度小于4℃。
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