CN108602805A - Mnk1和mnk2的异吲哚啉、氮杂异吲哚啉、二氢茚酮和二氢氮杂茚酮抑制剂 - Google Patents

Mnk1和mnk2的异吲哚啉、氮杂异吲哚啉、二氢茚酮和二氢氮杂茚酮抑制剂 Download PDF

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Abstract

本发明提供了式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的合成、药学上可接受的制剂和用途。对于式I的化合物，A1、A2、A3、A4、A5、W1、Y、R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7、R8、R8a、R8b、R9、R9a、R9b和R10以及下标“n”的定义如说明书所述。本发明的式I化合物是Mnk的抑制剂并且可用于许多治疗应用，包括但不限于治疗炎症和各种癌症。

Description

MNK1和MNK2的异吲哚啉、氮杂异吲哚啉、二氢茚酮和二氢氮杂 茚酮抑制剂
技术领域
本发明一般涉及具有MAP激酶相互作用性激酶(Mnk)(例如Mnk1和Mnk2)抑制剂活性的化合物，以及采用该化合物作为治疗剂用于治疗Mnk依赖疾病(包括治疗癌症)的相关组合物和方法。
背景技术
真核起始因子4E(eIF4E)是一般的翻译因子，但其具有优先增强信使RNA(mRNA)的翻译的潜力，其导致恶性相关的蛋白质的产生。该选择性可能有关于对用于翻译在5'-未翻译区域(5'-UTR)中包含大量二级结构的mRNA的eIF4E及其结合伴侣的增加的需求。这些mRNA包括编码控制细胞周期进程和肿瘤发生的某些蛋白质的那些。在正常细胞条件下，这些恶性相关的mRNA的翻译受到阻遏，因为活性eIF4E的可利用度受限；然而，当eIF4E过表达或过度活化时，它们的水平会增加。已发现许多类型的肿瘤和癌细胞系中存在升高水平的eIF4E，包括结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、前列腺癌、胃肠道癌、头颈癌、霍奇金氏淋巴瘤和成神经细胞瘤。
认为帽依赖性翻译的起始取决于eIF4F的组装，其为一种起始因子复合物，包括eIF4E、支架蛋白eIF4G，和RNA解旋酶eIF4A。因为这些蛋白质中，eIF4E是能够直接结合至mRNA帽结构的唯一一种，它是用于在5'帽处进行eIF4F组装的关键因素。支架蛋白eIF4G，也通过其与eIF3的相互作用将40S核糖体亚基招募至mRNA，并结合eIF4B，一种协助eIF4A的RNA-解旋酶功能的蛋白质，因此促进包含结构化5'-UTR的mRNA的翻译。eIF4E作为eIF4F复合物的部分的可利用度是控制翻译速率的一项限制因素，因而eIF4E是mRNA翻译的重要调节物。
eIF4E活性的调节形成了PI3K/Akt/mTOR和Ras/Raf/MAPK信号转导通路的会聚的结点。肿瘤发生和癌症治疗的敏感性与抗性中常常涉及PI3K(磷酸肌醇3-激酶)/PTEN(第10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物)/Akt/mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶标)通路。通过PI3K/PTEN/Akt/mTOR通路下调的信号转导通常是这条通路的关键组分的遗传变化和/或上游生长因子受体或信号转导组分的突变的结果。当被例如胞外生长因子、分裂素、细胞因子和/或受体激活时，PI3K引发一系列事件，PDK1活化Akt，其进而使包含TSC1和2(结节性硬化复合物1/2)的肿瘤遏制复合物磷酸化且失活，通过Rheb-GTP导致mTORC1(雷帕霉素复合物1的靶标)的活化。通过PI3K所致的PDK1和Akt的活化受到PTEN的负向调节。
PTEN是关键的肿瘤遏制物基因，并且常在人类癌症中突变或沉默。它的损失导致Akt的活化，并且增加下游mTORC1信号转导。致瘤性转化中mTOR复合物1(mTORC1)的参与似乎取决于其对eIF4F复合物的调节性作用；eIF4E的过表达能够提供对雷帕霉素的抗性。mTORC1调节eIF4F复合物组装，其为与细胞生长、防止凋亡和转化相关联的mRNA翻译的关键。这通过mTORC1使4E-BP磷酸化且失活以及后续的4E-BP从eIF4E的分离来实现。然后，这使eIF4E能够与支架蛋白eIF4G相互作用，允许eIF4F复合物组装以用于翻译结构化的mRNA。mTORC1还能促进翻译活化物S6K的活化，其使核糖体蛋白S6和其它亚基，包括eIF4B，磷酸化。mTORC1信号转导被雷帕霉素及其类似物(雷帕类似物(rapalog))抑制，但这些化合物以变构方式作用，而不是直接抑制mTOR激酶活性。
鉴于PI3K/Akt/mTOR通路在调节编码致癌性蛋白质的基因的mRNA翻译中的重要性，以及活化的mTORC1信号转导在相当多数癌中的重要性，这些激酶被积极用作肿瘤学药物靶标。已鉴定多种药学抑制剂，它们中的一些已经达到高级临床阶段。然而，最近明确的是，mTOR通路参与复杂的反馈回路，这会影响Akt活化。已显示采用mTOR抑制剂对癌细胞或患者进行长期治疗会造成升高的PI3K活性，这导致Akt和eIF4E的磷酸化，并且促进癌细胞存活。eIF4E，其作用于Akt和mTOR下游，涵盖了肿瘤发生和药物抗性中的Akt作用，并且通过eIF4E的Akt信号转导是体内肿瘤发生和药物抗性的重要机制。
除了PI3K/Akt/mTOR通路之外，eIF4E也是Ras/Raf/MAP信号转导级联的靶标，其通过生长因子活化，并且用于应激激活的p38MAP激酶通路。然后，Erk1/2和p38使MAP激酶相互作用性激酶1(Mnk1)和MAP激酶相互作用性激酶2(Mnk2)磷酸化。Erk通路还在多种癌症中活化，这反映了，例如，使Ras中的突变活化(存在于约20％的肿瘤中)或Ras GTP酶-活化物蛋白NF1的功能缺失。Mnk1和Mnk2是苏氨酸/丝氨酸蛋白质激酶，并且通过eIF4E和Mnk之间的相互作用，特异性地使eIF4F复合物中eIF4E的丝氨酸209(Ser209)磷酸化，其作用是招募Mnk以作用于eIF4E。具有突变的eIF4E(其中Ser209被丙氨酸替代)的小鼠显示无eIF4E磷酸化，以及显著减少的肿瘤生长。值得注意的是，尽管Mnk活性对于eIF4E介导的致癌性转化而言是必需的，其对于正常发育而言是非必要的。因此，从药理学上抑制Mnk能提供针对癌症的吸引人的治疗策略。
尽管对于Mnk结构和功能的了解有所增加，但在药理学Mnk抑制剂的发现方面几乎没有进展，并且已经报道的Mnk抑制剂也相对较少：CGP052088(Tschopp等，Mol Cell BiolRes Commun.3(4):205–211，2000)；CGP57380(Rowlett等，Am J Physiol GastrointestLiver Physiol.294(2):G452–459，2008)；和尾孢素酰胺(Cercosporamide)(Konicek等，Cancer Res.71(5):1849–1857，2011)。然而，这些化合物主要用于Mnk靶标验证。近期，研究者提出了用于治疗通过抑制Mnk1和/或Mnk2的激酶活性影响的疾病的其它化合物，包括例如，WO 2014/044691以及其中引用的各专利文件中公开的化合物，和Yu等，EuropeanJournal of Med.Chem.，95:116-126，2015公开的4-(二氢吡啶酮-3-基)氨基-5-甲基噻吩并[2,3,-d]嘧啶。
因此，尽管在该领域中已经取得了一些进步，本领域中仍然极其需要能特异性抑制Mnk激酶活性，尤其是Mnk在调节癌症通路的方面的作用的一些化合物以及相关联的组合物和方法。本发明致力于满足该需求，并提供其它相关的优点。
发明概述
本发明涉及抑制或调节Mnk活性的化合物，以及所述化合物的立体异构体、互变异构体和药学上可接受的盐。本发明还涉及包含所述化合物的药学上可接受的组合物，以及相关的方法，以用于治疗能从Mnk抑制中获得有益效果的病症，例如癌症。
在一个实施方式中，本发明涉及符合式I的化合物，以及所述化合物的立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中
A1和A2独立地是–N–或–CR6a；
A3是–N–或–CR7；
A4是–N–或–CR6b；
A5是–NR8或–CR8aR8b；
W1是O、S、NH、NO(R9)或CR9aR9b；
Y是–O–、–S–、–C(O)–、–NR10、–S＝O、–S(O)2–、–CH2–或–CH(OH)；
n是1、2或3；
R1和R2独立地是–H、–NHR10、NHR10-亚烷基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基或杂芳基亚烷基，使得R1和R2中至少一个不是–H；或
R1和R2与它们连接的碳原子一起形成环烷基或杂环基环；
R3、R4、R5和R6b独立地是–H、-OH、-CN、-SR10、卤素、–S(O)2(C1-C8)烷基、-C(O)NHR10、-C(O)NR10R10、-NHR10、-NR10R10、NHR10-亚烷基、NR10R10-亚烷基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)亚烷基NHR10、-O(C1-C8)亚烷基NR10R10、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基、杂芳基亚烷基、烷基胺基、烷基羰基胺基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基或杂环基胺基；或
R4和R5与它们连接的各自的碳原子一起形成稠合的芳基、环烷基、杂环基或杂芳基环；
R6a是–H、–OH、卤素、–CN、乙酰基、–(C1-C8)烷基、–S(C1-C8)烷基、-(C2-C8)烯基、-(C2-C8)炔基、-O(C1-C8)烷基、–(C1-C8)卤代烷基、-NHR10、-NR10R10、NHR10-亚烷基、NR10R10-亚烷基或-O(C1-C8)卤代烷基；
R7是–H、-OH、-SH、-CN、-S(O)2R10、卤素、-S(C1-C8)烷基、-NHR10、-NR10R10、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)亚烷基NHR10、-O(C1-C8)亚烷基NR10R10、-(C1-C8)亚烷基NHR10、-(C1-C8)亚烷基NR10R10、-S(C1-C8)烷基、环烷基、杂环基、杂芳基或芳基；
R8是–H、-OH、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R8a和R8b独立地是–H、-OH、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)烷基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R9、R9a和R9b独立地是–H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基或杂芳基亚烷基；或
R9a和R9b与它们连接的碳原子一起形成环烷基或杂环基环；
R10是–H、-OH、-C(O)O(C1-C8)烷基、-C(O)(C1-C8)烷基、-C(O)-NH2、-C(O)-NH(C1-C8)烷基、NH2-C(O)-亚烷基、-S(C1-C8)烷基、乙酰基、-(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、-O(C1-C8)烷基、-(C1-C8)卤代烷基、烷基羰基胺基、烷基胺基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、芳基、杂芳基、杂环基或环烷基；
其中，任何烷基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基、杂芳基亚烷基、烷基胺基、烷基羰基胺基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基或杂环基胺基任选地被1、2或3个选自以下的基团取代：–OH、-CN、-SH、-S(O)NH2、-S(O)NH2、卤素、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N[(C1-C4)烷基]2、-C(O)NH2、–COOH、-COOMe、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)烷基(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、卤代烷基、硫代烷基、氰基亚甲基、烷基胺基、NH2-C(O)-亚烷基、NH2-C(O)-亚烷基、-NH(Me)-C(O)-亚烷基、-CH2-C(O)-低级烷基、-C(O)-低级烷基、烷基羰基胺基、环烷基、环烷基亚烷基、环烷基亚烯基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基、-CH2-C(O)-环烷基、-C(O)-环烷基、-CH2-C(O)-芳基、-CH2-芳基、-C(O)-芳基、-CH2-C(O)-杂环烷基、-C(O)-杂环烷基、杂环基胺基或杂环基。
本发明还提供了一种药物组合物，其包含：(i)治疗有效量的至少一种式I的化合物，或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐；(ii)与药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂组合。
本发明还提供了在过度表达Mnk的至少一种细胞中减弱或抑制MnK活性的方法，包括使所述至少一种细胞与权利要求1所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐相接触。
根据本发明的方法，至少一种细胞是结肠癌细胞，胃癌细胞，甲状腺癌细胞，肺癌细胞，白血病细胞，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，毛细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤细胞，非霍奇金淋巴瘤细胞，伯基特淋巴瘤细胞，胰腺癌细胞，黑素瘤细胞，多发性黑素瘤细胞，脑癌细胞，CNS癌细胞，肾癌细胞，前列腺癌细胞，卵巢癌细胞或乳腺癌细胞。
根据另一实施方式，本发明提供了在需要的哺乳动物中治疗Mnk依赖性病症的方法，包括给予所述哺乳动物(i)治疗有效量的至少一种权利要求1所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐；或(ii)本发明所述的药物组合物。
根据本发明的化合物和药学上可接受的制剂可用于治疗Mnk依赖性病症，例如结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，毛细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，伯基特淋巴瘤，胰腺癌，黑素瘤，多发性黑素瘤，脑癌，CNS癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。
在下面的详细描述中，本发明的上述实施方式和其他方面是显而易见的。为此，本文阐述了各种参考文献，其更详细地描述了某些背景信息，过程，化合物和/或组合物，并且各自通过引用整体并入本文。
发明详述
在以下描述中，为了提供对本发明各实施方式的透彻理解，陈述了一些具体的细节。然而，本领域技术人员应理解，可以在不要求这些细节的情况下实施本发明。除非上下文中另有说明，贯穿本发明说明书和权利要求书，词语“包含”及其变化形式，例如，“包含”和“包括”理解为开放、可兼形式(即，“包括(包含)但不限于”)。
说明书中提及的“一个实施方式”或“一种实施方式”表示连同实施方式描述的具体特征、结构或特性包括在本发明的至少一个实施方式中。因此，在说明书中各处出现的短语“在一个实施方式中”或“在一种实施方式中”不一定全部都涉及同一个实施方式。而且，具体的特征、结构、或性质可以任何合适的方式组合在一个或多个实施方式中。
定义
除非另有说明，本文中所用的如下术语和短语具有下述含义。
“氨基”指-NH2取代基。
“氨基羰基”指：–C(O)NH2取代基。
“羧基”指：–CO2H取代基。
“羰基”指：–C(O)-或–C(＝O)-基团。本说明书中，两种表示法可互换使用。
“氰基”指：–C≡N取代基。
“氰基亚烷基”指：-(亚烷基)C≡N取代基。
“乙酰基”指：–C(O)CH3取代基。
“羟基(hydroxy)”或“羟基(hydroxyl)”指：-OH取代基。
“羟基亚烷基”指：-(亚烷基)OH取代基。
“氧代”指(＝O)取代基。
“硫代”或“巯基”指：–SH取代基。
“烷基”指：饱和、直链或支化的烃链基团，其仅由碳和氢原子组成，具有一至十二个碳原子(C1-C12烷基)、一至八个碳原子(C1-C8烷基)或一至六个碳原子(C1-C6烷基)，并且其通过单键与分子的剩余部分相连。示例性的烷基基团包括：甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基等。
“低级烷基”与上述烷基的含义相同，但具有一至四个碳原子(C1-C4烷基)。
“烯基”指：不饱和烷基基团，其具有至少一个双键和二至十二个碳原子(C2-C12烯基)、二至八个碳原子(C2-C8烯基)或二至六个碳原子(C2-C6烯基)，并且其通过单键与分子的剩余部分相连，例如，乙烯基，丙烯基，丁烯基，戊烯基，己烯基等。
“炔基”指：不饱和烷基基团，其具有至少一个三键，和二至十二个碳原子(C2-C12炔基)、二至十个碳原子(C2-C10炔基)、二至八个碳原子(C2-C8炔基)或二至六个碳原子(C2-C6炔基)，并且其通过单键与分子的剩余部分相连，例如，乙炔基，丙炔基，丁炔基，戊炔基，己炔基等。
“亚烷基”或“亚烷基链”指：直链或支化的二价烃(烷基)链，其将分子的剩余部分与原子团基团相连，分别仅由碳和氢组成。亚烷基可具有一至十二个碳原子，例如，亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚正丁基等。亚烷基链通过单键或双键连接至分子的剩余部分。亚烷基链与分子的剩余部分的连接点可通过该链中的一个碳或任何两个碳。“任选取代的亚烷基”指：亚烷基或取代的亚烷基。
“亚烯基”指：二价烯烃。亚烯基的示例包括但不限于，亚乙烯基(-CH＝CH-)及其全部立体异构体形式和构象异构体形式。"取代的亚烯基"指：二价的取代的烯烃。"任选取代的亚烯基"指：亚烯基或取代的亚烯基。
"亚炔基"指：二价炔烃。亚炔基的示例包括但不限于，亚乙炔基，亚丙炔基。"取代的亚炔基"指：二价的取代的炔烃。
“烷氧基”指：式-ORa的基团，其中，Ra是具有如上定义的指示数量的碳原子的烷基。烷氧基基团的示例包括但不限于：–O-甲基(甲氧基)，-O-乙基(乙氧基)，-O-丙基(丙氧基)，-O-异丙基(异丙氧基)等。
“烷基胺基”指：式-NHRa或-NRaRa的基团，其中，各Ra独立地是，具有如上定义的指示数量的碳原子的烷基基团。
“环烷基胺基(cycloalkylaminyl)”指：式-NHRa的基团，其中，Ra是本文中定义的环烷基基团。
“烷基羰基胺基”指：式–NHC(O)Ra的基团，其中Ra是具有如本文限定所示数量的碳原子的烷基基团。
“环烷基羰基胺基”指：式-NHC(O)Ra的基团，其中Ra是如本文定义的环烷基基团。
“烷基氨基羰基”指：式-C(O)NHRa或-C(O)NRaRa的基团，其中各Ra独立地是，具有如本文限定所示数量的碳原子的烷基基团。
“环烷基氨基羰基”指：式-C(O)NHRa的基团，其中Ra是如本文定义的环烷基基团。
“芳基”指：包含氢、6-18个碳原子和至少一个芳环的烃环系基团。示例性的芳基是包含氢和6-9个碳原子和至少一个芳环的烃环系基团；包含氢和9-12个碳原子和至少一个芳环的烃环系基团；包含氢和12-15个碳原子和至少一个芳环的烃环系基团；或包含氢和15-18个碳原子和至少一个芳环的烃环系基团。出于本发明目的，芳基基团可以是单环、双环、三环或四环环系，其可包括稠合或桥接环系。芳基基团包括但不限于，源自如下构成的芳基基团：醋蒽烯(aceanthrylene)、苊烯、荧蒽(acephenanthrylene)、蒽、薁、苯、荧蒽、芴、不对称引达省(as-indacene)、对称引达省(s-indacene)、茚满、茚、萘、非那烯、菲、七曜烯、芘，和苯并菲。“任选取代的芳基”指：芳基基团或取代的芳基基团。
"亚芳基"指：二价芳基，而"取代的亚芳基"指：二价的取代的芳基。
“芳烷基”或“亚芳烷基(araalkylene)”可互换使用，并且指：式-Rb-Rc的基团，其中，Rb是本文中定义的亚烷基链，而Rc是一个或多个本文中定义的芳基基团，例如，苄基、二苯基甲基等。
“环烷基”指：稳定的非芳族单环或多环烃基团，其仅由碳和氢原子组成，其可包括稠合或桥接环系，具有三至十五个碳原子，优选具有三至十个碳原子，三至九个碳原子，三至八个碳原子，三至七个碳原子，三至六个碳原子，三至五个碳原子，具有四个碳原子的环，或具有三个碳原子的环。环烷基环可以是饱和或不饱和的，并且通过单键与分子的剩余部分相连。单环基团包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。多环基团包括，例如，金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-二环[2.2.1]庚基等。
“环烷基亚烷基”或“环烷基烷基”可互换使用，并且指：式-RbRe的基团，其中，Rb是本文中定义的亚烷基链，而Re是本文中定义的环烷基基团。在某些实施方式中，Rb还被环烷基基团取代，从而该环烷基亚烷基包含两个环烷基部分。环丙基亚烷基和环丁基亚烷基是示例性的环烷基亚烷基基团，分别包含至少一个环丙基或至少一个环丁基基团。
“稠合”指：本文中所述的任何环结构，其与本发明化合物中已有的环结构稠合。当稠合环是杂环基环或杂芳基环时，成为稠合杂环基环或稠合杂芳基环的部分的已有环结构上的任何碳原子可被氮原子替代。
“卤代”或“卤素”指：溴代(溴)、氯代(氯)、氟代(氟)或碘代(碘)。
“卤代烷基”指：如本文中定义的，具有指示数量的碳原子的烷基基团，其中所述烷基基团的一个或多个氢原子被卤素(卤代基团)取代，如上定义。卤素原子可以相同或不同。示例性的卤代烷基有：三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。
“杂环基”，“杂环”，或“杂环环”指：稳定的3-18元饱和或不饱和基团，其由二至十二个碳原子和选自氮、氧和硫的一至六个杂原子，例如，一至五个杂原子、一至四个杂原子、一至三个杂原子，或一至二个杂原子组成。示例性的杂环包括但不限于：稳定的3-15元饱和或不饱和基团、稳定的3-12元饱和或不饱和基团、稳定的3-9元饱和或不饱和基团、稳定的8元饱和或不饱和基团、稳定的7元饱和或不饱和基团、稳定的6元饱和或不饱和基团，或稳定的5元饱和或不饱和基团。
除非说明书中另有特定说明，杂环基基团可以是单环、双环、三环或四环环系，其可包括稠合或桥接环系；并且，所述杂环基基团中的氮、碳或硫原子可以任选地被氧化；氮原子可任选地季铵化；并且杂环基基团可部分或完全饱和。非芳族杂环基基团的示例包括但不限于，吖丁啶基、二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、硫杂环丁基(thietanyl)、三噻烷基(trithianyl)、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫杂吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基，和1,1-二氧代-硫代吗啉基。杂环基包括本文定义的杂芳基，并且芳族杂环基的示例列于下文中的杂芳基的定义中。
“杂环基烷基”或“杂环基亚烷基”指：式-RbRf的基团，其中，Rb是本文定义的亚烷基链，而Rf是如上定义的杂环基基团，并且，如果所述杂环基是含氮杂环基，则所述杂环基可在氮原子处连接至烷基基团。
“杂芳基”或“杂亚芳基”指：5-14元环系基团，其包含氢原子、一至十三个碳原子、选自氮、氧和硫的一至六个杂原子，和至少一个芳环。出于本发明目的，杂芳基基团可以是稳定的5-12元环、稳定的5-10元环、稳定的5-9元环、稳定的5-8元环、稳定的5-7元环，或稳定的6元环，其包含至少1个杂原子、至少2个杂原子、至少3个杂原子、至少4个杂原子、至少5个杂原子或至少6个杂原子。杂芳基可以是单环、双环、三环或四环环系，其可包括稠合或桥接环系；并且，杂芳基基团中的氮、2碳或硫原子可任选地被氧化；氮原子可任选地季铵化。杂原子可以是芳族或非芳族环的成员，限制条件是该杂芳基中的至少一个环是芳族的。示例包括但不限于，氮杂基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并二氧杂环戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基(benzooxazolyl)、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚三烯基(benzo[b][1,4]dioxepinyl)、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基(benzoxazolyl)、苯并二氧杂环戊烯基_、苯并二噁英基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基(苯并硫代苯基)、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、二苯并呋喃基、二苯并硫代苯基、呋喃基、呋喃酮基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、异喹啉基、吲嗪基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、2-氧代氮杂基、噁唑基、环氧乙烷基、1-氧吡啶基、1-氧嘧啶基、1-氧吡嗪基、1-氧哒嗪基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、四氢喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基，和硫代苯基(即，噻吩基)。
“杂芳基烷基”或“杂芳基亚烷基”指：式-RbRg的基团，其中，Rb是如上定义的亚烷基链，而Rg是如上定义的杂芳基基团。
“硫代烷基”指：式-SRa的基团，其中，Ra是如上定义的烷基基团，其包含一至十二个碳原子、至少1-10个碳原子、至少1-8个碳原子、至少1-6个碳原子，或至少1-4个碳原子。
“杂环基胺基”指：式–NHRf的基团，其中，Rf是如上定义的杂环基基团。
“硫酮”指：连接至饱和或不饱和(C3-C8)环或(C1-C8)非环部分的碳原子的＝S基团。
“亚砜”指：–S(O)-基团，其中硫原子共价连接至两个碳原子。
“砜”指：–S(O)2-基团，其中，六价硫通过双键连接至两个氧原子中的每个氧原子，并且通过单共价键进一步连接至两个碳原子。
术语"肟"指：–C(Ra)＝N-ORa基团，其中Ra是氢、低级烷基、亚烷基或亚芳基基团，如上定义。
本发明化合物可以多种异构形式，以及一种或多种互变异构形式存在，包括两种单一互变异构体，和互变异构体的混合物。术语"异构体"意在涵盖本发明化合物的全部异构形式，包括所述化合物的互变异构形式。
本文所述的一些化合物可具有不对称中心，并因此以不同的对映和非对映异构形式存在。本发明化合物可以是光学异构体或非对映异构体的形式。因此，本发明涵盖本发明的化合物和它们如本文所述的以其光学异构体、非对映异构体及其混合物，包括外消旋混合物的形式的应用。本发明化合物的光学异构体可通过已知技术获得，例如不对称合成、手性色谱法，或通过利用光学活性拆分剂对立体异构体进行化学分离。
除非另有指示，"立体异构体"指，化合物的一种立体异构体，其基本不含该化合物的其它立体异构体。因此，具有一个手性中心的立体异构纯的化合物基本不含该化合物的相反对映异构体。具有两个手性中心的立体异构纯的化合物基本不含该化合物的其他非对映异构体。典型的立体异构纯的化合物包含大于约80重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约20重量％的该化合物的其它立体异构体，例如，大于约90重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约10重量％的该化合物的其它立体异构体，或大于约95重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约5重量％的该化合物的其它立体异构体，或大于约97重量％的该化合物的一种立体异构体和小于约3重量％的该化合物的其它立体异构体。
如果在描述的结构和对该结构给定的名称之间存在差异，则以描述的结构为准。此外，若结构或结构的部分的立体化学未用例如粗或虚线指示，则该结构或结构的部分应被理解为涵盖其全部立体异构体。然而，在其中存在多于一个手性中心的一些情况中，结构和名称可以单一对映异构体的形式表示，以助于描述相关的立体化学。有机合成领域的技术人员应知晓用制备所述化合物的单一对映异构体的方法制备它们的情况。
本说明书中，"药学上可接受的盐"是本发明化合物的药学上可接受的、有机或无机酸或碱盐。典型的药物上可接受的盐例如包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐、水溶性盐和水不溶性盐，例如乙酸盐、氨茋磺酸盐(4,4-二氨基茋-2,2-二磺酸盐)、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁酸盐、钙、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、克拉维酸盐(clavulariate)、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯月桂硫酸盐(estolate)、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸基阿散酸盐(glycollylarsanilate)、六氟磷酸盐、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、哈胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘酸盐、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲磺酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺铵盐、3-羟基-2-萘甲酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(1，1-亚甲基-双-2-羟基-3-萘甲酸盐，双羟萘酸盐(einbonate))、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、苦味酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺基水杨酸盐、苏拉酸盐(suramate)、鞣酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙碘化物和戊酸盐。药学上可接受的盐可在其结构中具有超过一个的带电原子。在该情况中，该药学上可接受的盐可具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
术语"治疗"、"处理"和"疗法"指：减轻或根除疾病或与疾病相关的症状。在某些实施方式中，此类术语指：通过给予一种或多种预防或治疗剂至患有疾病的患者，使该疾病的扩散或恶化最小化。本发明的内容中，术语"治疗"、"处理"和"疗法"也指：
(i)预防所述疾病或病症在哺乳动物中发生，具体是在所述哺乳动物倾向于患上该病症但尚未诊断患有该病症时；
(ii)抑制该疾病或病症，即阻止其发展；
(iii)减轻该疾病或病症，即，使该疾病或病症消退；或
(iv)减轻由该疾病或病症所致的症状，即，减轻痛苦但不解决潜在的疾病或病症。本文中所用术语“疾病”和“病症”可互换使用，或可不同，其中具体的疾病或病症可不具有已知的致病物(从而病因尚不知晓)，因此其尚未被视作疾病而仅仅是作为不希望的病症或综合征，其中由临床医师或多或少地鉴定出了具体的一组症状。
术语"调节"、"调控"等指：化合物增加或减少，例如，MAP激酶相互作用性激酶(Mnk)的功能或活性的能力。"调节"及其各种形式意在涵盖抑制、拮抗、部分拮抗、活化、激动和/或部分激动与Mnk相关的活性。Mnk抑制剂是结合至、部分或完全阻断刺激、降低、防止、延迟活化、灭活、降低敏感性或下调信号转导的化合物。化合物调节Mnk活性的能力可在酶测定法或细胞型测定法中证实。
"患者"或"对象"包括动物，例如人、奶牛、马、绵羊、羔羊、猪、鸡、火鸡、鹌鹑、猫、狗、小鼠、大鼠、兔或豚鼠。该动物可以是哺乳动物，例如非灵长类和灵长类(例如，猴子和人类)。在一个实施方式中，患者是人，例如，人类婴儿、孩童、青少年或成人。
术语"前药"指：药物的前体，其为一种化合物，该化合物在给予患者后必需通过代谢过程经历化学转化，随后成为活性药理学物质。式I化合物的示例性前药是酯、乙酰胺，和酰胺。
本发明化合物
本发明一般涉及由式I类涵盖的化合物，其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。
对于式I的化合物，A1、A2、A3、A4、A5、W1、Y、R1、R2、R3、R4、R5、R6a、R6b、R7、R8、R8a、R8b、R9、R9a、R9b和R10以及下标“n”的定义如说明书所述。下文还描述了式I化合物的具体实施方式。
在一个实施方式中，A1和A2是–CR6a。
在另一个实施方式中，A1是–N，A2是–CH或–C(Me)。在又一个实施方式中，A1是–CH且A2是–N。
在一个实施方式中，A3是–CR7。
在一个实施方式中，A4是–CR6b。
在一个实施方式中，A5是–NR8。在另一个实施方式中，A5是–NH或–N(烷基)。
在一个实施方式中，A5是–CR8aR8b。在另一个实施方式中，A5是–CH2。
在一个实施方式中，Y是–NH或–N(Me)。在另一个实施方式中，Y是–NH。
在一个实施方式中，W1是O。
在一个实施方式中，下标“n”是1或2。在另一个实施方式中，下标“n”是1。
在一个实施方式中，R1和R2中至少一个独立地是(C1-C8)烷基、–NHR10或–NHR10-亚烷基。
在一个实施方式中，R1或R2中至少一个是(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R1或R2中至少一个是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基、戊基或己基。
在一个实施方式中，R1或R2中至少一个是卤素取代的(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基或杂芳基亚烷基。
在一个实施方式中，R1或R2中至少一个是NH2或–NH2-亚烷基。在另一个实施方式中，R1或R2中至少一个是氨基亚甲基。
在一个实施方式中，R1或R2中至少一个是任选取代的杂芳基。在另一实施方式中，杂芳基是噻吩。
在一个实施方式中，R1和R2与它们连接的各自的碳原子一起形成稠合的环烷基环。在另一个实施方式中，环烷基是环丁基、环戊基、环己基、2,2-二甲基环丁基、4-氨基环己基、4-甲基环己基、4-乙基环己基、2,2-二氟乙基-4-环己基、4,4-二氟环己基、4-氰基环己基、4-三氟甲基环己基、4-羟基环己基、3-羟基环戊基、3-氨基环戊基或3-甲基环戊基环体系。在另一个实施方式中，环烷基是环丁基、环戊基或环己基。
在一个实施方式中，R1和R2与它们连接的各自的碳原子一起形成稠合的杂环基。在另一个实施方式中，杂环基是哌啶、1-(2,2-二氟乙基哌啶)、N-甲基哌啶、四氢吡喃或吡咯烷。
在一个实施方式中，R3是–H、烷基、卤素或–NHR10。在另一个实施方式中，R3是甲基、乙基、-NH2、Cl或F。在另一个实施方式中，R3是–H。
在一个实施方式中，R4是–H、卤素、-NHR10、-SMe或烷基。在另一个实施方式中，R4是甲基、乙基或丙基。在另一个实施方式中，R4是–NH2、–NHC(O)环丙基、-NHC(O)CH3、-NHC(O)-C(Me)3、-NH(Me)或-NH(1-甲基吡唑)。在又一实施方式中，R4是–H或–NH2。
在一个实施方式中，R5是–H、–OH、卤素或–(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R5是甲基、乙基、丙基或丁基。
在一个实施方式中，R5是-O(C1-C8)亚烷基NHR10或-C(O)NH2。在另一个实施方式中，R5是–O(CH2)2NH2或–O(CH2)3NH2。
在一个实施方式中，R5是–O(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R5是–O(Me)或–O(Et)。
在一个实施方式中，R5是–O(C1-C8)卤代烷基。在另一个实施方式中，R5是–O(CHF2)或–O(CF3)。
在一个实施方式中，R3、R4和R5是–H。在另一个实施方式中，R3是–H且R4和R5独立地是-CN、氯、氟、甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、–NHR10或-O(C1-C8)烷基NHR10。
在一个实施方式中，R4和R5与它们连接的碳原子一起形成杂芳基或杂环基。在另一个实施方式中，R4和R5与它们连接的碳原子一起形成噻唑、噻吩、吡唑、N-甲基吡唑、吡咯、吡咯-2-酮或咪唑。在又一实施方式中，R4和R5与它们连接的碳原子一起形成吗啉、吡咯烷或吡咯烷-2-酮。
在一个实施方式中，R6a是–H、-OH、卤素、-CN、乙酰基或-(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R6a是甲基、乙基、丙基或丁基。在又一实施方式中，R6a是–H。
在一个实施方式中，R6b是–H、-OH、-CN、-Cl、-F或-(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R6b是甲基、乙基或丙基。在又一实施方式中，R6b是–H。
在一个实施方式中，R6b是NH2-(C1-C8)亚烷基。在另一个实施方式中，R6b是-NH2-亚甲基或-NH2-亚乙基。
在一个实施方式中，R6b是-O(C1-C8)烷基或-(C1-C8)卤代烷基。在另一个实施方式中，R6b是–OMe和–OEt。在又一实施方式中，R6b是–CHF2、–CH2Cl或–CF3。
在一个实施方式中，R6b是–C(O)(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R6b是–C(O)甲基或–C(O)乙基。
在一个实施方式中，R7是–H、-OH、-SH、-CN、-卤素或–NHR10。
在一个实施方式中，R7是甲基或乙基。
在一个实施方式中，R7是-(C1-C8)卤代烷基。在一个实施方式中，R7是–CHF2或–CF3。
在一个实施方式中，R7是-O(C1-C8)烷基。在另一个实施方式中，R7是–OMe或-OEt。
在一个实施方式中，R8、R8a和R8b是氢。
在一个实施方式中，R9、R9a和R9b独立地是–H或–(C1-C8)烷基。
在一个实施方式中，R10是–H、-OH、甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、乙酰基、–COOMe、–NH2、–NH(Me)或–N(Me)2。在另一个实施方式中，R10是–H或甲基。
在一个实施方式中，A1是–N，A2、A3、A4是–CH，A5是–NH，W1是O，下标“n”是1。
在一个实施方式中，A1是–N，A2和A4是–CH，A3是–C(OH)、-C(CN)、-C(F)、-C(Cl)、-C(OMe)、-C(Me)、-C(Et)、-C(CHF2)或–C(CF3)，A5是–NH，W1是O，下标“n”是1。
在一个实施方式中，A1是–N，A2和A3是–CH，A4是–CR6b，A5是–NH，W1是O，下标“n”是1。
在一个实施方式中，A2是–N，A1、A3、A4是–CH，A5是–NH，W1是O，下标“n”是1。
在一个实施方式中，A1是–N–，A2、A3和A4独立地是–CH，W1是O，下标“n”是2。
在一个实施方式中，R1和R2是–H、-NH2或(C1-C8)烷基，R3、R4和R5是–H、-OH或甲基，下标“n”是2。
本发明式I的化合物可以是其中一个或多个原子被具有不同原子质量或质量数的原子代替的同位素标记的。可被纳入式I化合物的同位素的示例包括：氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯或碘的同位素。此类同位素的示例分别是：2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。这些带有放射性标记的化合物可用于检测生物分布、组织浓度，和从生物组织，包括给予该带标记的化合物的对象，运输和排出的动力学。带标记的化合物还用于确定治疗效果、作用位点或模式，以及候选治疗物对药理学上重要的靶标的结合亲和性。因此，式I的某些放射性物质标记的化合物可用于药物和/或组织分布研究。放射性同位素氚，即3H，和碳-14，即14C，特别有用于该目的，因为它们易于纳入并且检测手段现成。
用重同位素如氘即2H取代能提供因代谢稳定性较高(例如含氘化合物的体内半衰期延长)而产生的某些治疗优势。用氘取代氢能减小获得疗效所需的剂量，并因此可优选用于发现或临床环境。
正电子发射型同位素(例如11C，18F，15O和13N)的取代能提供本发明化合物的经标记的类似物，其有用于正电子成象术(PET)研究，例如，用于检测物质受体占用率。同位素标记的式I的化合物可一般地通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与下文所述的制备和实施例部分中描述的那些类似的方式，采用合适的同位素标记试剂来制备。
本文所述的本发明实施方式还意在涵盖式I化合物的体内代谢产物。这些产物可源自，例如，主要归因于本发明化合物给予后的酶促活性的氧化、还原、水解、酰胺化、酯化等过程。因此，本发明包括这样的化合物，它们在将本发明化合物给予哺乳动物足以产生代谢产物的一段时间之后，以基于对本发明化合物发挥酶促或非酶促活性的副产物的形式产生。代谢产物，尤其是具有药物活性的代谢物，通常通过如下方式鉴定：向对象，例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人类给予可检测剂量的放射性标记的本发明化合物，其持续在此过程中发生代谢的一段足够的时间，和，从获自接受所述放射性标记的化合物的对象的尿液、血液或其它生物样品分离所述代谢产物。
本发明还提供式I化合物的药学上可接受的盐形式。本发明范围涵盖酸加成盐和碱加成盐，其通过使药学上合适的酸或药学上合适的碱与本发明化合物接触来形成。
“药学上可接受的酸加成盐”指：保留生物有效性和游离碱的性质的那些盐，它们不是在生物或其它方面中不希望的，并且它们的形成采用无机酸，例如但不限于，盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，以及有机酸，例如但不限于，乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、藻酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、丙酸、焦谷氨酸、丙酮酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟乙酸、十一碳烯酸等。
“药学上可接受的碱加成盐”指：保留生物有效性和游离酸的性质的那些盐，它们不是生物学或其它方面中不希望的。这些盐通过向游离酸添加无机碱或有机碱来制备。源自无机碱的盐包括但不限于钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。优选的无机盐是铵、钠、钾、钙、和镁盐。源自有机碱的盐包括但不限于，如下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺，包括天然产生的取代的胺、环胺和碱性离子交换树脂，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、苯乙苄胺、苄星青霉素、乙二胺、葡糖胺、甲基葡萄糖胺、可可碱、三乙醇胺、氨基丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。特别优选的有机碱是异丙基胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺、胆碱和咖啡因。
结晶化通常产生本发明化合物的溶剂合物。本文中所用术语“溶剂合物”指：包含本发明化合物的一个或多个分子与溶剂的一个分子或多个分子的聚集体。溶剂可以是水，此时溶剂合物可以是水合物。或者，溶剂可以是有机溶剂。因此，本发明化合物可以水合物形式存在，包括一水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物等，以及对应的溶剂合物形式。本发明化合物可以是真溶剂合物，而在其它情况中，本发明化合物可以仅保留不定水或是水加上一些不定溶剂的混合物。
“立体异构体”指：一种化合物，其通过由相同键键连的相同原子组成，但具有不同的三维结构，它们是不可互换的。本发明设想各种立体异构体及其混合物，并且包括“对映异构体”，其指：两个立体异构体的分子不可重叠地彼此互成镜像。
本发明化合物，或其药学上可接受的盐，可包含一个或多个不对称中心，由此产生对映异构体、非对映异构体，和就绝对立体化学而言可确定的其它立体异构形式，例如(R)-或(S)-，或者，对于氨基酸而言如(D)-或(L)-。本发明意在包括所有这些可能的异构体，以及它们的外消旋和光学纯形式。光学活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-或者(D)-和(L)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分，例如色谱和分级结晶。用于制备/分离个体对映体的传统技术包括从合适的光学纯前体手性合成或采用例如手性高压液相色谱法(HPLC)来拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。当本文所述的化合物包含烯双键或其它几何不对称中心时，除非另有说明，其意在表示该化合物包括E和Z几何异构体。同样，还意在包括全部互变异构形式。
术语“互变异构体”指：从分子的一个原子到同一分子的另一个原子的质子迁移。例如，当W1是氧代基且A5是-NH时，本发明提供式I化合物的互变异构体，如下所示：
本发明化合物采用传统合成方法合成，更具体地，采用如下所述的通用方法合成。对于本发明化合物的具体合成方案描述于如下实施例中。
药物制剂
在一个实施方式中，式I的化合物，以药学上可接受的组合物的形式配制，所述组合物包含一定量的式I化合物，在给予所述药物组合物至哺乳动物后，该量有效于治疗感兴趣的特定疾病或病症。本发明的药物组合物可包含式I化合物，其与药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂相组合。
就此而言，“药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂”包括但不限于任何佐剂、运载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、风味增强剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等渗剂、溶剂，或乳化剂，其均被美国食品和药物管理局批准为是人类或家畜可接受的。
此外，“哺乳动物”包括人和家畜，例如，实验动物和家养宠物(例如，猫、狗、猪、牛、绵羊、山羊、马、兔)，和非家畜，例如，野生动物等。
本发明的药物组合物可通过将本发明化合物与合适的药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂联合来制备，并且可制成固体、半固体、液体或气体形式的制剂，例如，片剂、胶囊、粉末、颗粒、软膏、溶液、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶、微球，和气溶胶。给予此类药物组合物的典型途径包括但不限于，口服、局部、经皮、吸入、肠胃外、舌下、颊、直肠、阴道，和鼻内。本文所用术语肠胃外包括，皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术。本发明的药物组合物配制为允许其中含有的活性成分在将组合物给予患者后是生物可利用的。将给予对象或患者的组合物可使用一种或多种剂量单位的形式，例如片剂可以是单个剂量单位，且气溶胶形式的本发明的化合物的容器可含有多个剂量单位。制备这种剂型的实际方法是已知的，或是本领域技术人员所明白的；例如参见《雷明顿：药物科学和实践》(Remington:The Science和Practice of Pharmacy)，第20版(费城药物与科学学院(Philadelphia College of Pharmacy和Science)，2000)。在任何情况下待给予的组合物含有治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，以根据本发明的教导治疗感兴趣的疾病或病症。
本发明的药物组合物可以是固体或液体形式。一方面，运载体是颗粒，从而组合物是，例如，片剂或粉末形式。运载体可以是液体，其中，所述组合物是，例如，口服型糖浆、可注射的液体，或气溶胶，其可用于，例如，吸入式给予。意图用于经口给予时，所述药物组合物优选是固体或液体形式，其中，半固体、半液体、悬液和凝胶形式包括在本文考虑的固体或液体形式中。
作为用于经口给予的固体组合物，该药物组合物可配制成粉末、颗粒、压缩片剂、丸剂、胶囊、咀嚼胶、薄片等形式。此类固体组合物将通常包含一种或多种惰性稀释剂或可食用运载体。此外，可存在一种或多种如下物质：粘合剂，如羧甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、黄蓍胶或明胶；赋形剂，如淀粉、乳糖或糊精，崩解剂，如藻酸、藻酸钠、普利莫尔(Primogel)、玉米淀粉等；润滑剂，如硬脂酸镁或斯泰特(Sterotex)；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；调味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橙味调味剂；和着色剂。
若该药物组合物是胶囊(例如，明胶胶囊)形式，除了上述类型的物质之外，其可包含液体运载体，例如，聚乙二醇或油。
该药物组合物可以是液体形式，例如酏剂、糖浆、溶液、乳液或悬浮液。作为两个示例，该液体可以是用于口服给药或用于通过注射递送。若旨在进行经口给药，除了本发明化合物之外，优选的组合物可含有一种或多种甜味剂、防腐剂、染料/着色剂和风味增强剂。对于旨在通过注射给药的组合物，可包含表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、缓冲剂、稳定剂和等张剂中的一种或多种。
本发明的液体药物组合物，无论它们是溶液、悬液还是其它类似形式，可包括一种或多种如下佐剂：无菌稀释剂，如注射用水、盐水溶液，优选生理盐水、林格氏溶液、等渗氯化钠；不挥发油，例如可用作溶剂或悬浮介质的合成甘油单酯或甘油二酯、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它溶剂；抗菌剂，如苄醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲剂，如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐，和用于调节张力的试剂，如氯化钠或葡萄糖。胃肠道外制剂可封装在安瓿、一次性注射器或由玻璃或塑料制成的多剂量小瓶中。生理盐水是优选的佐剂。可注射的药物组合物优选是无菌的。
意在用于胃肠外或经口给予的本发明的液体药物组合物应包含一定量的本发明化合物，从而将获得合适的剂量。
本发明的药物组合物可旨在用于局部给药，其中运载体可合适地包含溶液、乳液、油膏或凝胶基底。例如，该基底可以包含一种或多种以下物质：凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、蜂蜡、矿物油、稀释剂(如水和醇)，以及乳化剂和稳定剂。增稠剂可存在于药物组合物中用于局部给药。如果旨在进行透皮给药，该组合物可包含透皮贴或离子电渗装置。
本发明的药物组合物可考虑用于直肠给予，以例如栓剂形式，其将融化在直肠中并释放药物。用于直肠给予的组合物可包含油质基底作为合适的无刺激性赋形剂。此类基底包括但不限于，羊毛脂、可可脂和聚乙二醇。
本发明的药物组合物可包含多种物质，其改良固体或液体剂量单位的物理形态。例如，组合物可包括形成围绕活性成分的包被壳的物质。形成该包被壳的物质通常是惰性的，并且可选自，例如，糖、虫胶，和其它肠溶包衣剂。或者，活性成分可包封在明胶胶囊中。
本发明的固体或液体形式的药物组合物可包括与本发明化合物结合且由此协助该化合物的递送的物质。可发挥该作用的合适的物质包括单克隆或多克隆抗体、蛋白质或脂质体。
本发明的药物组合物可由能以气溶胶形式给予的计量单位组成。术语气溶胶用于表示从具有胶体性质的那些到由加压包装组成的体系的各种体系。递送可通过液化或压缩气体或通过合适的分配该活性成分的泵系统来进行。本发明化合物的气溶胶可在单相、双相或三相系统中递送，以递送一种或多种活性成分。气溶胶的递送包括：必要的容器、活化物、阀门、子容器等，其一起可形成药盒。本领域技术人员无需繁杂实验即可确定优选的气溶胶。
本发明的药物组合物可通过药学领域中熟知的任何方法制备。例如，意图通过注射给予的药物组合物可通过将本发明化合物与无菌、蒸馏水组合以形成溶液来制备。可添加表面活性剂来促进形成均一溶液或悬液。表面活性剂是与本发明化合物非共价相互作用的化合物，从而促进所述化合物在水性递送系统中的溶解或均匀悬浮。
在某些实施方式中，将一定量的包含式I化合物的药物组合物给予哺乳动物，该量足以在给予后抑制Mnk活性，并且优选对其具有可接受的毒性。式I化合物的Mnk活性可由本领域技术人员，例如，如下文实施例所述来确定。合适的浓度和剂量可由本领域技术人员容易地确定。
治疗应用
给予治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，所述治疗有效量根据各种因素而变化，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时长、患者的年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、给予方式和时间、排泄速率、联合用药、具体疾病或病症的严重程度和接受治疗的对象。
“有效量”或“治疗有效量”指：本发明化合物的一定量，其(当给予哺乳动物，优选人类时)足以提供对于该哺乳动物(优选人类)中Mnk相关病症或疾病的有效治疗，如下所述。构成“治疗有效量”的本发明化合物的量将根据化合物、病症及其严重性、给予方式，以及待治疗的哺乳动物的年龄而变化，但可由本领域技术人员根据其所掌握的知识和本发明内容来常规地确定。
本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，也可在一种或多种其它治疗剂的给予之前、同时或之后给予。此类联合治疗包括给予单一药物剂量制剂，其包含本发明化合物和一种或多种其它活性物质，以及在分开的药物剂量制剂中给予本发明化合物和各活性物质。例如，本发明化合物和其它活性物质可在单一口服剂量组合物(例如片剂或胶囊)中一起给予患者，或各物质在分开的口服剂量制剂中给予。使用单独的剂量制剂时，本发明的化合物和一种或多种其他活性剂可在基本相同时间(即同时)给予，或在单独的交错时间(即依次)给予；应理解组合疗法包括所有这些方案。
在某些实施方式中，本文公开的化合物有用于抑制Mnk活性和/或可用于在模型系统中分析Mnk信号转导活性，和/或用于预防、治疗或减轻与涉及Mnk的疾病、紊乱或病理性状况相关联的症状，优选是使人类痛苦的症状。能够抑制Mnk活性的化合物将有用于预防、治疗、减轻或减少如下事件中的症状或疾病进程：失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应，或与失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应相伴的疾病，尤其是其中该失控的细胞生长、增殖和/或存活、不当的细胞免疫反应，或不当的细胞炎性反应由Mnk介导的情况，例如，血液肿瘤、实体瘤和/或其转移，包括白血病和骨髓增生异常综合征，瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症和恶性淋巴瘤，例如B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和伯基特(Burkitts)淋巴瘤，头颈部肿瘤，包括脑肿瘤和脑转移，胸部肿瘤，包括非小细胞和小细胞肺肿瘤，胃肠肿瘤，内分泌肿瘤，乳腺和其它妇科肿瘤，泌尿系统肿瘤，包括肾、膀胱和前列腺肿瘤，皮肤肿瘤，和肉瘤，和/或其转移。
此外，本发明化合物及其药物组合物是用于预防和/或治疗细胞因子相关疾病，例如炎性疾病、过敏，或与促炎性细胞因子相关联的其它病症的候选治疗剂。示例性的炎性疾病包括但不限于，慢性或急性炎症、关节炎症，例如慢性炎性关节炎、类风湿性关节炎、银屑病关节炎、骨关节炎、幼年型类风湿性关节炎、莱特尔综合征、类风湿性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎和痛风性关节炎；炎性皮肤疾病如晒伤、牛皮癣、红皮病性牛皮癣、脓疱性牛皮癣、湿疹、皮炎、急性或慢性移植物形成、特应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹和硬皮病；胃肠道炎症如炎性肠病、克罗恩病和相关病症、溃疡性结肠炎、结肠炎和憩室炎；肾炎、尿道炎、输卵管炎、卵巢炎、子宫内膜炎、脊柱炎、系统性红斑狼疮和相关疾病、多发性硬化、哮喘、脑膜炎、脊髓炎、脑脊髓炎、脑炎、静脉炎、血栓性静脉炎、呼吸系统疾病如哮喘、支气管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、炎性肺病和成人呼吸窘迫综合征、和过敏性鼻炎；心内膜炎、骨髓炎、风湿热、风湿性心包炎、风湿性心内膜炎、风湿性心肌炎、风湿性二尖瓣病、风湿性主动脉瓣疾病、前列腺炎(prostatitis)、前列腺炎(prostatocystitis)、脊柱关节病、强直性脊柱炎、滑膜炎、腱鞘炎、肌炎、咽炎、风湿性多肌痛、肩腱炎或滑囊炎、痛风、假性痛风、血管炎、选自肉芽肿性甲状腺炎、淋巴细胞性甲状腺炎、浸润性纤维性甲状腺炎、急性甲状腺炎的甲状腺炎症性病症；桥本氏甲状腺炎、川崎病、雷诺现象、干燥综合征、神经炎症性疾病、脓毒症、结膜炎、角膜炎、虹膜睫状体炎、视神经炎、耳炎、淋巴腺炎、鼻咽炎、鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎、喉炎、会厌炎、支气管炎、肺炎、口腔炎、龈炎。食管炎、胃炎、腹膜炎、肝炎、胆石病、胆囊炎、肾小球肾炎、良性肺炎、新月体性肾小球肾炎、胰腺炎、子宫内膜炎、子宫肌炎、子宫炎、子宫颈炎、子宫颈内膜炎、外宫颈炎、子宫旁炎、结核、阴道炎、外阴炎、硅肺病、肉状瘤病、肺尘症、脓疮、炎性多关节病、银屑病关节病、肠纤维化、支气管扩张和肠病性关节病。
尽管炎症是这些疾病的统一致病性病程，目前的疗法仅治疗所述疾病的症状而不治疗炎症的潜在病因。本发明的组合物有用于治疗和/或预防炎性疾病和相关并发症及紊乱。
因此，某些实施方式涉及用于治疗有需要的哺乳动物中的Mnk依赖性病症的方法，所述方法包括：给予有效量的上文所述的药物组合物(即，包含任何一种或多种式I化合物的药物组合物)至哺乳动物。
如上所述，蛋白质合成的失调是人类癌症的常见事件。翻译控制的关键调节物是eIF4E，其活性是致瘤性的关键决定因素。因为eIF4E的活化涉及由MAP激酶相互作用性激酶(Mnk)特异性作用的关键丝氨酸(Ser209)的磷酸化，Mnk抑制剂是用于治疗细胞增生性疾病(例如，癌症)的合适的候选治疗剂。本文所述的组合物与方法可用于治疗包括实体肿瘤、淋巴瘤和白血病在内的多种癌症。可被治疗的癌症类型包括但不限于，乳腺、前列腺和结肠腺癌；所有形式的肺支气管癌；骨髓；黑素瘤；肝癌；神经母细胞瘤；乳头状瘤；胺前体摄取脱羧细胞瘤；迷芽瘤；分支瘤；恶性类癌综合征；类癌心脏病；和癌(例如Walker、基底细胞、基底鳞状细胞、Brown-Pearce、导管、Ehrlich瘤、Krebs 2、默克细胞、粘液、非小细胞肺、燕麦细胞、乳头状细胞、硬癌、支气管、支气管源性、鳞状细胞和过渡细胞)。可被治疗的其它癌症类型包括：组织细胞疾病；急性和慢性白血病，骨髓和淋巴样/成淋巴细胞的，包括毛细胞白血病；恶性组织细胞增多症；霍奇金病；免疫增殖小瘤；霍奇金淋巴瘤；B细胞和T细胞非霍奇金淋巴瘤，包括弥漫性大B细胞和伯基特淋巴瘤；浆细胞瘤；网状内皮组织增殖；黑色素瘤；多发性骨髓瘤；软骨母细胞瘤；软骨瘤；软骨肉瘤；纤维瘤；纤维肉瘤；骨髓纤维化；巨细胞瘤；组织细胞瘤；脂肪瘤；脂肪肉瘤；间皮瘤；粘液瘤；粘液肉瘤；骨瘤；骨肉瘤；脊索瘤；颅咽管瘤；无性细胞瘤；错构瘤；间充质瘤；中肾瘤；肌肉瘤；成釉细胞瘤；牙骨质瘤；牙瘤；畸胎瘤；胸腺瘤；滋养细胞肿瘤。。
可采用本发明化合物治疗的其它癌症包括但不限于：腺瘤；胆管瘤；胆脂瘤；圆柱瘤；囊腺癌；囊腺瘤；粒层细胞肿瘤；两性母细胞瘤；肝细胞瘤；汗腺腺癌；胰岛细胞癌；睾丸间质(Leydig)细胞瘤；乳头状瘤；睾丸支持(Sertoli)细胞瘤；膜细胞瘤；平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；成肌细胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；横纹肌瘤；横纹肌肉瘤；室管膜瘤；神经节瘤；胶质瘤；成神经管细胞瘤；脑脊膜瘤；神经鞘瘤；神经母细胞瘤；神经上皮瘤；神经纤维瘤；神经瘤；副神经节瘤；非嗜铬性副神经节瘤。
在一个实施方式中，本发明化合物是用于治疗如下癌症的候选治疗剂，例如，血管瘤；伴随嗜酸粒细胞增多的血管淋巴细胞增生；硬化性血管瘤；血管瘤病；血管球瘤；血管内皮瘤；血管瘤；血管外皮细胞瘤；血管肉瘤；淋巴管瘤；淋巴管肌瘤；淋巴管肉瘤；松果体瘤；癌肉瘤；软骨肉瘤；叶状囊肉瘤；纤维肉瘤；血管肉瘤；平滑肌肉瘤；白细胞肉瘤；脂肪肉瘤；淋巴管肉瘤；肌肉瘤；粘液肉瘤；卵巢癌；横纹肌肉瘤；肉瘤；赘生物；神经纤维瘤病；和宫颈非典型增生。
在具体实施方式中，本发明提供了治疗如下病症的方法：结肠癌，结直肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑素瘤，多发性黑素瘤，脑癌，原发性和继发性CNS癌症，包括恶性神经胶质瘤和成胶质细胞瘤，肾癌，前列腺癌，包括去势抵抗性前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌，包括三阴性，HER2阳性和激素受体阳性乳腺癌。根据所述方法，可给予已诊断患有细胞增生性疾病(例如癌症)的对象治疗有效量的至少一种式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐。或者，可向已诊断患有癌症的对象给予包含至少一种式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的药物组合物。
在某些实施方式中，向患癌对象联合给予本发明的化合物和其它传统癌治疗物，例如，放疗或手术。放疗是本领域熟知的并且包括X射线治疗，例如伽马放射，和放射药物治疗。
在某些实施方式中，本发明Mnk抑制剂化合物与至少一种抗癌剂联用。抗癌剂包括化疗药物。化疗剂包括但不限于，染色质功能抑制剂、拓朴异构酶抑制剂、微管抑制性药物、DNA破坏剂、抗代谢剂(例如叶酸拮抗剂、嘧啶类似物、嘌呤类似物和糖修饰类似物)、DNA合成抑制剂、DNA相互作用剂(例如嵌入剂)，和DNA修复抑制剂。
示例性的化疗剂包括但不限于下组：抗代谢物/抗癌剂，例如嘧啶类似物(5-氟尿嘧啶、氟尿苷、卡培他滨、吉西他滨和阿糖胞苷)和嘌呤类似物、叶酸拮抗剂和相关抑制剂(巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和2-氯脱氧腺苷(克拉屈滨))；抗增殖剂/抗有丝分裂剂、包括天然产物如长春花生物碱(长春花碱、长春新碱和长春瑞滨)、微管干扰剂如紫杉烷(紫杉醇、多西他赛)、长春新碱、长春花碱、诺考达唑、埃坡霉素和长春瑞滨、表鬼臼毒素(依托泊苷、替尼泊苷)、DNA损伤剂(放线菌素、安吖啶、氨茴环霉素、博来霉素、白消安、喜树碱、卡铂、苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺、癌得星、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、六甲蜜胺肟酸、异磷酰胺、美法仑、美洛欣、丝裂霉素、米托蒽醌、亚硝基脲、普卡霉素、丙卡巴肼、紫杉醇、泰索帝、替莫唑胺、替尼泊苷、三乙烯硫代磷酰胺和依托泊苷(VP16))；抗生素、例如、更生霉素(放线菌素D)、柔红霉素、多柔比星(阿霉素)、伊达比星、蒽环霉素、米托蒽醌、博莱霉素、光神霉素(米利霉素)和丝裂霉素；酶(L-天冬酰胺酶、其全身代谢L-天冬酰胺并剥夺不具有合成其自身天冬酰胺的能力的细胞)；抗血小板剂；抗增殖/抗有丝分裂烷基化剂、例如氮芥(甲氮芥、环磷酰胺和类似物、美法仑、苯丁酸氮芥)、乙烯亚胺和甲基三聚氰胺(六甲蜜胺和噻替派)、烷基磺酸盐-白消安、亚硝基脲(卡莫司汀(BCNU)和类似物、链脲霉素)、曲马沙明(DTIC)；抗增殖性/抗有丝分裂的抗代谢物、例如、叶酸类似物(甲氨蝶呤)；铂配位络合物(顺铂、卡铂)、丙卡巴肼、羟基脲、米托坦、氨鲁米特；激素，激素类似物(雌激素、他莫昔芬、戈舍瑞林、比卡鲁胺、尼鲁米特)和芳香酶抑制剂(来曲唑、阿那曲唑)；抗凝血剂(肝素、合成的肝素盐和其他凝血酶抑制剂)；纤维蛋白溶解剂(例如组织纤溶酶原激活剂、链激酶和尿激酶)、阿司匹林、双嘧达莫、噻氯匹定、氯吡格雷、阿昔单抗；抗霉剂；抗分泌剂(breveldin)；免疫抑制剂(环孢菌素、他克莫司(FK-506)、西罗莫司(雷帕霉素)、硫唑嘌呤、霉酚酸吗乙酯)；抗血管生成化合物(TNP470、染料木素)和生长因子抑制剂(血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、成纤维细胞生长因子(FGF)抑制剂)；血管紧张素受体阻断剂；一氧化氮供体；反义寡核苷酸；抗体(曲妥珠单抗、利妥昔单抗)；嵌合抗原受体；细胞周期抑制剂和分化诱导剂(维甲酸)；mTOR抑制剂、拓扑异构酶抑制剂(多柔比星(阿霉素)、安吖啶、喜树碱、柔红霉素、更生霉素、依诺比星、表柔比星、依托泊苷、伊达比星、伊立替康(CPT-11)和泼尼松龙、拓扑替康、伊立替康)；皮质类固醇(可的松、地塞米松、氢化可的松、甲泼尼龙、泼尼松和泼尼松龙)；生长因子信号转导激酶抑制剂；线粒体功能障碍诱导剂、毒素例如霍乱毒素、蓖麻毒素、假单胞菌外毒素、百日咳博德特氏菌腺苷酸环化酶毒素或白喉毒素，和胱天蛋白酶激活剂；和，染色质破坏剂。
在某些实施方式中，本发明的Mnk抑制剂在相同或分开的制剂中与作为联合治疗方案的部分的其它试剂同时使用，或与所述其它试剂依次使用。
式I的Mnk抑制剂，包括其对应的盐和式I化合物的药物组合物作为治疗剂也能有效治疗或预防细胞因子介导的病症，例如，患者(优选人类)中的炎症。在一个实施方式中，本发明的化合物或组合物特别有利于治疗或预防选自下组的疾病：慢性或急性炎症、慢性炎性关节炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、COPD、炎性肠病、败血性休克、克罗恩病、溃疡性结肠炎、多发性硬化和哮喘。
本发明的化合物及其对应的盐和药学上可接受的组合物是用于治疗脑相关病症(包括但不限于孤独症，脆性X综合症，帕金森病和阿尔茨海默病)的候选治疗剂。治疗可通过给予需要治疗的对象式I的化合物，其药学上可接受的盐形式，或式I的化合物或其盐的药学上可接受的组合物来实现。
在本发明的另一个方面中，提供本发明化合物或本发明化合物的药学上可接受的制剂作为Mnk活性抑制剂。所述抑制通过将表达Mnk的细胞与化合物或药学上可接受的制剂接触来实现，以降低或抑制Mnk活性，以提供针对有需要的哺乳动物中Mnk依赖性病症的治疗功效。
式I化合物或式I化合物的组合物的治疗有效剂量的一般范围将是：约1-2000mg/天、约10-约1000mg/天、约10-约500mg/天、约10-约250mg/天、约10-约100mg/天，或约10-约50mg/天。治疗有效剂量将以一个或多个剂量给予。然而，应理解，对于任何特定患者的本发明化合物的特定剂量将取决于多种因素，例如，待治疗的患者的年龄、性别、体重、一般健康状况、饮食、个体响应，给予时间、待治疗的疾病的严重性、施用的具体化合物的活性、剂型、应用模式和伴用药物。给定情况的治疗有效量能用常规实验测定，并在临床医生或医师能力和判断范围内。在任何情况中，所述化合物或组合物将基于患者的个体情况以多个剂量给予并以允许递送治疗有效量的方式给予。
一般合成方法
方法1:
通过以下过程形成I(Y是–NR10)：使化合物II(P1是任选的保护基团)和化合物III(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P2是任选的保护基团)在布赫瓦尔德-哈特维希(Buchwald-Hartwig)条件下(例如钯催化剂，配体，碱，溶剂和热)反应，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
可选地，通过以下过程形成I(Y是–NR10,-O-)：使化合物II(P1是任选的保护基团)和化合物III(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P2是任选的保护基团)在铜介导的乌尔曼型条件下(例如碘化铜(I)，碱，溶剂和热)反应，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
可选地，通过以下过程形成I(Y是–NR10,-O-,-S-)：使化合物II(P1是任选的保护基团)和化合物III(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P2是任选的保护基团)在亲核芳族取代条件下(例如碱或酸，溶剂和热)反应，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
通过以下过程形成I(Y是–S＝O,-S(O)2-)：使用氧化剂例如间氯过氧苯甲酸氧化I(Y是–S-)。
方法2:
通过以下过程形成I(Y是–NR10)：使化合物IV(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P1是任选的保护基团)与化合物V(P2是任选的保护基团)在布赫瓦尔德-哈特维希条件下(例如钯催化剂，配体，碱，溶剂和热)接触，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
可选地，通过以下过程形成I(Y是–NR10,-O-)：使化合物IV(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P1是任选的保护基团)与化合物V(P2是任选的保护基团)在铜介导的乌尔曼型条件下(例如碘化铜(I)，碱，溶剂和热)接触，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
可选地，通过以下过程形成I(Y是–NR10,-O-,-S-)：使化合物IV(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P1是任选的保护基团)与化合物V(P2是任选的保护基团)在亲核芳族取代条件下(例如碱或酸，溶剂和热)接触，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
方法3:
通过以下过程形成I(Y是-C(O)-)：使化合物VI(P1是任选的保护基团)与化合物III(X是离去基团，例如卤素、-OTf、-OTs或-OMs，P2是任选的保护基团)在碱(例如正丁基锂)存在下接触，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
通过以下过程形成I(Y是-CH(OH))：在还原剂例如硼氢化钠存在下还原I(Y是-C(O)-)，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
通过以下过程形成I(Y是–CH2–)：使I(Y是-C(O)–)暴露于克莱门森(Clemmensen)还原(例如锌汞汞齐，酸，热)或沃尔夫－基希纳(Wolff-Kishner)还原(例如肼，碱，热)条件，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
方法4:
通过以下过程形成中间体VIII(Z是-NR10H,OH,SH或卤素)：使化合物VII(NH,OH或SH质子被适当保护)在碱性条件下(例如四氢呋喃中的氢化钠)暴露于烷基卤化物，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
方法5:
通过以下过程形成X(Z是-NR10H,OH,SH或卤素)：使IX(NH,OH或SH质子被适当保护)暴露于维蒂希(Wittig)烯化条件(例如Ph3P＝CR9aR9b，溶剂和热)，然后脱保护和/或如果需要的话进一步官能基团操纵。
式I化合物的合成
提供以下实施例仅用于说明的目的。
实施例1
合成5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号1F)
合成5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号1F)
6-氯-9H-嘌呤(1,0.15g,0.97mmol),5-氨基异吲哚啉-1-酮(2,0.14g,0.97mmol)和(1S)-(+)-樟脑-10-磺酸(0.27g,1.16mmol)在异丙醇(10mL)中的混合物在密封管中于100℃加热4小时。反应完成后，浓缩混合物。将获得的固体过滤并用乙醇和异丙醇重结晶，得到灰白色固体形式的5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号1F)。产率：0.15g,58％；MS(ESI)m/z 267[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),8.66(s,2H),8.44(s,1H),8.31(d,J＝1.9Hz,1H),7.99(dd,J＝8.3,1.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,1H),4.40(s,2H)。
实施例2
合成5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)-2-甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号2F)
合成5-溴-2-甲基异吲哚啉-1-酮(2)
在密封管中，4-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(1,1g,3.26mmol)，2M在四氢呋喃中的甲胺(1.95mL,3.9mmol)和三乙胺(0.9mL,6.52mmol)的混合物于100℃加热12小时。反应完成后，将混合物减压浓缩。得到的残留物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物用己烷研磨得到5-溴-2-甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.5g,68％；MS(ESI)m/z226,228[M+1]+。
合成2-甲基-5-((9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
过程A:将9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-9H-嘌呤-6-胺(3,0.10g,0.37mmol)，5-溴-2-甲基异吲哚啉-1-酮(2,0.10g,0.45mmol)，叔丁醇钠(54mg,0.56mmol)和XPhos(5mg,0.01mmol)在甲苯(10mL)中的混合物用氩气脱气30分钟。氩气气氛下加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(20mg,0.022mmol)并将反应混合物于100℃加热12小时。反应完成后，将反应混合物过滤通过硅藻土垫并将滤液浓缩。粗品残留物采用己烷中的0-10％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到2-甲基-5-((9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(4)。产率：0.11g,71％；MS(ESI)m/z 411[M+1]+。
合成5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)-2-甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号2F)
向2-甲基-5-((9-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-9H-嘌呤-6-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(4,0.11g,0.26mmol)的乙醇(2mL)溶液中加入3M盐酸(3mL)，将反应混合物在70℃加热3小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩并用饱和碳酸氢钠水溶液中和。将残留物过滤并用甲醇/乙腈/水(2:2:1)研磨后得到白色固体形式的5-((9H-嘌呤-6-基)氨基)-2-甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号2F)。产率：0.04g,54％；MS(ESI)m/z 281[M+1]+；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(s,1H),10.10(s,1H),8.46(s,1H),8.35(d,J＝10.6Hz,2H),8.00(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(d,J＝8.3Hz,1H),4.46(s,2H),3.05(s,3H)。
实施例3
合成5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号3F)
合成2-(4-甲氧基苄基)-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.05g,32％；MS(ESI)m/z 347[M+1]+。
合成5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号3F)
过程B:将2-(4-甲氧基苄基)-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(3,0.048g,0.14mmol)在三氟乙酸(0.5mL)中的混合物回流加热24小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物冷却至0℃并用饱和碳酸氢钠水溶液碱化。将残留物过滤，用水然后用己烷洗涤，干燥后得到灰白色固体形式的5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号3F)。产率：0.03g,96％；MS(ESI)m/z 227[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,1H),8.70(s,1H),8.38-8.30(m,2H),8.12(s,1H),7.68-7.57(m,2H),6.95(s,1H),4.36(s,2H)。
实施例4
合成5-((6-氯嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号4F)
合成2-(4-甲氧基苄基)-5-硝基异吲哚啉-1-酮(2)
向搅拌的2-(溴甲基)-4-硝基苯甲酸乙酯(1,1.5g,4.85mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中逐滴加入三乙胺(0.74g,7.27mmol)和对甲氧基苄基胺(0.59g,4.36mmol)，将反应混合物于室温下搅拌15小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物倒入水中并用二氯甲烷萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩后得到2-(4-甲氧基苄基)-5-硝基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：1.1g,76％。
合成5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(3)
向2-(4-甲氧基苄基)-5-硝基异吲哚啉-1-酮(2,1.1g,3.69mmol)的甲醇(25mL)溶液中加入10％钯碳(1.1g)并将反应混合物在气囊压力下于室温氢化10小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物过滤通过硅藻土垫并用乙酸乙酯洗涤。滤液减压浓缩后得到5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(3)。产率：0.8g,81％；MS(ESI)m/z 269[M+1]+。
合成5-((6-氯嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(5)
向搅拌的5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(3,0.3g,1.11mmol)和4,6-二氯嘧啶(4,0.33g,2.23mmol)的异丙醇(15mL)溶液中加入(1S)-(+)-10-樟脑磺酸(0.28g,1.22mmol)，并将反应混合物于90℃加热4小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物冷却并减压浓缩。残留物用乙醇和乙腈(1:4)研磨后得到5-((6-氯嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(5)。产率：0.19g,45％；MS(ESI)m/z 381[M+1]+。
合成5-((6-氯嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号4F)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物4F。灰白色固体；产率：0.03g,31％；MS(ESI)m/z 261[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.38(s,1H),8.02(s,1H),7.62(t,J＝6.4Hz,2H),6.90(s,1H),4.36(s,2H),3.68(s,1H)。
实施例5
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号5)
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号5)
将5-氨基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(1,0.1g,0.68mmol),4-氯嘧啶(2,0.20g,1.36mmol)和碳酸钾(0.23g,1.7mmol)在二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物于110℃加热15小时。将反应混合物冷却至室温并倒入水中。水层用乙酸乙酯萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物采用在二氯甲烷中的3％甲醇，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到浅黄色固体形式的5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号5)。产率：0.08g,52％；MS(ESI)m/z 226[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.09(s,1H),8.76(s,1H),8.39(d,J＝5.9Hz,1H),8.12(s,1H),7.66-7.53(m,2H),6.93(dd,J＝6.0,1.3Hz,1H),3.12-3.04(m,2H),2.63-2.51(m,2H)。
实施例6
合成5-((6-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号6F)
合成(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
向搅拌的6-氯嘧啶-4-胺(1,0.54g,4.18mmol)的四氢呋喃(12mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(1.92g,8.8mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(0.026g,0.21mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物用戊烷研磨后得到(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)。产率：0.64g,66％；MS(ESI)m/z 230[M+1]+。
合成(6-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。产率：0.39g,58％；MS(ESI)m/z 291[M+1]+。
合成N4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4,6-二胺(5)
过程C：将(6-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4,0.38g,1.31mmol)在4M二噁烷中的氯化氢(4mL)中的混合物于室温下搅拌3小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物减压浓缩。残留物用二氯甲烷稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层在硫酸钠上干燥，过滤，浓缩后得到粗产物N4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4,6-二胺(5)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：0.3g,粗产物；MS(ESI)m/z 191[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-5-((6-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。白色固体。产率：0.12g,30％；MS(ESI)m/z 442[M+1]+。
合成5-((6-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号6F)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物6F。灰白色固体。产率：0.025g,31％；MS(ESI)m/z 322[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),8.91(s,1H),8.27(d,J＝11.0Hz,2H),8.01(s,1H),7.85(s,1H),7.53(s,2H),7.41(s,1H),6.03(s,1H),4.32(s,2H),3.81(s,3H)。
实施例7
合成5-(甲基(嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号7)
合成2-(4-甲氧基苄基)-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.25g,80％；MS(ESI)m/z 347[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-5-(甲基(嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
向2-(4-甲氧基苄基)-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(3,0.3g,0.86mmol)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入碳酸铯(0.56g,1.73mmol)。将混合物搅拌10分钟。加入碘代甲烷(0.12g,0.86mmol)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物采用在二氯甲烷中的3％甲醇作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到2-(4-甲氧基苄基)-5-(甲基(嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(4)。产率：0.14g,38％；MS(ESI)m/z 361[M+1]+。
合成5-(甲基(嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号7)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物7。浅黄色固体；产率：0.045g,48％；MS(ESI)m/z 241[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(d,J＝1.3Hz,2H),8.16(d,J＝6.1Hz,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.57(dd,J＝1.8,0.9Hz,1H),7.44(dd,J＝8.1,1.9Hz,1H),6.52(dd,J＝6.2,1.3Hz,1H),4.39(s,2H),3.45(s,3H)。
实施例8
合成3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号8)
合成5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(2)
氮气气氛下，向冰冷却的氢化钠(0.072g,60％在矿物油中的分散体，1.8mmol)的无水四氢呋喃(5mL)悬浮液中逐滴加入5-溴-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(1,0.5g,1.5mmol在5mL无水四氢呋喃中)溶液。将反应混合物搅拌1小时并加入碘代甲烷(0.14mL,2.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用冰水淬灭并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物采用在己烷中的0-8％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.29g,57％；MS(ESI)m/z 246,248[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。产率：0.12g,58％；MS(ESI)m/z 361[M+1]+。
合成3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号8)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物8。灰白色固体；产率：0.015g,19％；MS(ESI)m/z 241[M+1]+；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.67(s,1H),8.27(d,J＝6.1Hz,1H),8.13(s,1H),7.74–7.61(m,2H),6.86(d,J＝6.0Hz,1H),4.69(q,J＝6.8Hz,1H),1.48(d,J＝6.7Hz,3H),1.15(d,J＝6.2Hz,1H)。
实施例9
合成5-((5-氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号9)
合成5-((5-氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号9)
将吡咯烷-2,4-二酮(1,18mg,0.18mmol)和5-氨基异吲哚啉-1-酮(2,27mg,0.18mmol)在甲醇(1mL)中的混合物在60℃搅拌1小时。冷却后，将混合物过滤，然后用甲醇冲洗。固体真空干燥后得到灰白色固体形式的5-((5-氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号9)。产率：23mg,55％；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),8.28(s,1H),7.57(d,J＝4.8Hz,1H),7.32(s,1H),7.19(s,1H),7.15(dd,J＝1.2,5.1Hz,1H),5.40(s,1H),4.32(s,2H),4.01(s,2H)。
实施例10
合成6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮
(化合物编号10)
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.48g,44.98％
合成6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号10)
-15℃在10分钟的时间内，向搅拌的5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(3,0.48g,2.1mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入甲磺酸(1.01ml,15.5mmol)。搅拌15分钟后，-15℃在3小时的时间内分批加入叠氮化钠(0.42g,6.39mmol)，将反应混合物在-15℃再搅拌1小时。使反应混合物升温至0℃并在0-5℃搅拌2小时。用4M氢氧化钠溶液淬灭反应。水层用乙酸乙酯萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物通过快速柱色谱纯化，得到浅黄色固体形式的6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号10)。产率：0.075g,15％；MS(ESI)m/z 241[M+1]+；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.66(d,J＝1.0Hz,1H),8.26(d,J＝6.1Hz,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,1H),7.79(d,J＝2.2Hz,1H),7.61(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),6.86(dd,J＝6.1,1.3Hz,1H),3.51(t,J＝6.7Hz,2H),3.35(d,J＝2.5Hz,1H),3.28(s,1H),2.99(t,J＝6.7Hz,2H)。
实施例11
合成N-(6-((1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)乙酰胺(化合物编号11)
合成(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
向搅拌的6-氯嘧啶-4-胺(1,2g,15.5mmol)的四氢呋喃(40mL)溶液中逐滴加入4-(二甲基氨基)吡啶(0.035g,0.78mmol)和二碳酸二叔丁酯(7.1g,32.55mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤。水层用乙酸乙酯再次萃取。合并的有机层用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物用乙醚研磨后得到(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：2.4g,68％；MS(ESI)m/z 230[M+1]+。
合成(6-乙酰氨基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。灰白色固体；产率：0.81g,61％；MS(ESI)m/z 253[M+1]+。
合成N-(6-氨基嘧啶-4-基)乙酰胺盐酸盐(4)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体4。产率：0.42g,粗产物；MS(ESI)m/z153[M+1]+。
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)乙酰胺(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。灰白色固体；产率：0.38g,44％；MS(ESI)m/z 404[M+1]+。
合成N-(6-((1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)乙酰胺(化合物编号11)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物11。灰白色固体；产率：0.086g,33％；MS(ESI)m/z 284[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.58(s,1H),9.94(s,1H),8.46(s,1H),8.32(s,1H),8.10(s,1H),7.70-7.53(m,3H),4.34(s,2H),2.11(s,3H)。
实施例12
合成N-(6-((1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号12)
合成N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
向搅拌的6-氯嘧啶-4-胺(1,1g,7.75mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中逐滴加入4-(二甲基氨基)吡啶(0.047g,0.387mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.55g,16.27mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后(TLC监测)，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩后得到N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(2)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：1.3g,51％；MS(ESI)m/z 330[M+1]+。
合成N-叔丁氧基羰基-N-(6-(环丙烷甲酰胺基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。黄色固体；产率：0.55g,96％；MS(ESI)m/z 379[M+1]+。
合成N-(6-氨基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(5)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体5。产率：0.3g,粗产物；MS(ESI)m/z179[M+1]+。
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。产率：0.3g,42％；MS(ESI)m/z 430[M+1]+。
合成N-(6-((1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号12)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物12。灰白色固体；产率：0.066g,46％；MS(ESI)m/z 310[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),9.91(s,1H),8.47(d,J＝1.1Hz,1H),8.32(s,1H),8.10-8.05(m,1H),7.69-7.53(m,3H),4.34(s,2H),2.03(p,J＝6.2Hz,1H),1.23(s,1H),0.84(d,J＝6.3Hz,4H)。
实施例13
合成3-异丙基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号13)
合成5-溴-3-异丙基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(3)
0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(1,2g,6mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中分批加入氢化钠(0.29g,7.2mmol)，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。加入2-碘代丙烷(2,0.9mL,9mmol)并将反应混合物在90℃搅拌16小时。反应混合物用水淬灭，在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用在己烷中的30％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-溴-3-异丙基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(3)。产率：0.56g,25％；MS(ESI)m/z 375[M+1]+。
合成3-异丙基-2-(4-甲氧基苄基)-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。产率：0.18g,30％；MS(ESI)m/z 389[M+1]+。
合成3-异丙基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号13)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物13。产率：0.11g,96％；MS(ESI)m/z269[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),8.94(s,1H),8.63(s,1H),8.41(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.96-7.91(m,1H),7.75-7.64(m,2H),7.04(dd,J＝6.9,1.0Hz,1H),4.55(d,J＝3.3Hz,1H),2.2-2.18(m,1H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.62(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例14
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(化合物编号14)
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(化合物编号14)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物14。产率：0.044g,12％；MS(ESI)m/z262[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.04(s,1H),8.73(d,J＝1.1Hz,1H),8.38(d,J＝5.9Hz,1H),8.00(d,J＝1.7Hz,1H),7.79-7.62(m,2H),6.90(dd,J＝5.9,1.3Hz,1H),3.55(dd,J＝7.5,6.2Hz,2H),3.40-3.27(m,2H)。
实施例15
合成3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号15)
合成5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)
0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(1,1g,3mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中分批加入氢化钠(0.3g,7.5mmol)，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。加入甲基碘(0.57mL,9mmol)并将反应混合物在70℃搅拌16小时。反应混合物用水淬灭，在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用在己烷中的30％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.4g,37％；MS(ESI)m/z 361[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。产率：0.2g,65％；MS(ESI)m/z 375[M+1]+。
合成3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号15)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物15。产率：0.038g,22％；MS(ESI)m/z255[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.66(s,1H),8.42(s,1H),8.30(d,J＝5.9Hz,1H),7.87(d,J＝1.9Hz,1H),7.69(dd,J＝8.3,1.9Hz,1H),7.52(d,J＝8.3Hz,1H),6.83(dd,J＝5.9,1.3Hz,1H),1.40(s,6H)。
实施例16
合成3-甲基-5-((6-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号16)
合成2-(3,4-二甲基苄基)-3-甲基-5-((6-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。泡沫状浅黄色固体；产率：66mg,21％；MS(ESI)m/z 437[M+1]+。
合成3-甲基-5-((6-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号16)
向2-(3,4-二甲基苄基)-3-甲基-5-((6-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(3,47mg,0.11mmol)的苯甲醚(3mL)溶液中加入三氟乙酸(2.0mL,26.1mmol)。反应在95℃搅拌16.5小时。将反应混合物减压浓缩，产生栗色残留物。将残留物用醚(5 x 2mL)研磨后得到驼色无定形固体，高真空下干燥后得到纯驼色固体形式的3-甲基-5-((6-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号16)。产率：23mg,75％；MS(ESI)m/z 287[M+1]+；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.87(bs,1H),8.52(s,1H),8.43(s,1H),7.96(s,1H),7.63(dd,J＝8.5,2.0Hz,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),6.70(d,J＝1Hz,1H),4.60(q,J＝6.5Hz,1H),1.35(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例17
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号17)
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.17g,68％；MS(ESI)m/z 444[M+1]+。
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号17)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物17。灰白色固体；产率：0.04g,32％；MS(ESI)m/z 324[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.91(s,1H),8.49-8.39(m,2H),8.00-7.94(m,1H),7.72-7.59(m,2H),7.54(d,J＝8.3Hz,1H),4.59(q,J＝6.7Hz,1H),2.03(m,1H),1.35(d,J＝6.7Hz,3H),0.84(d,J＝6.1Hz,4H)。
实施例18
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)新戊酰胺(化合物编号18)
合成N-叔丁氧基羰基-N-(6-新戊酰氨基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.5g,84％；MS(ESI)m/z 395[M+1]+。
合成N-(6-氨基嘧啶-4-基)新戊酰胺(4)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体4。产率：0.3g,粗产物：MS(ESI)m/z195[M+1]+。
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)新戊酰胺(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。产率：0.18g,54％；MS(ESI)m/z 460[M+1]+。
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)新戊酰胺(化合物编号18)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物18。灰白色固体；产率：0.055g,42％；MS(ESI)m/z 340[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.92(d,J＝3.1Hz,2H),8.48(s,1H),8.41(s,1H),7.99(s,1H),7.72-7.64(m,2H),7.55(d,J＝8.3Hz,1H),4.59(q,J＝6.9Hz,1H),3.17(s,1H),1.35(d,J＝6.6Hz,3H),1.24(s,9H)。
实施例19
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号19)
合成N-(6-((3-甲基-1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号19)
向搅拌的N-(6-氨基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.64g,3.5mmol)的1,4-二噁烷(20mL)溶液中加入5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(2,0.8g,3.5mmol)和磷酸钾(2.28g,10.7mmol)。将反应混合物用氩气气囊脱气15分钟。然后将反式-1,2-环己烷二胺(0.34g,1.79mmol)和碘化铜(I)(0.20g,1.79mmol)加入反应混合物中并将反应液再脱气15分钟。将反应液在110℃搅拌16小时。反应进程通过TLC进行监测。原料消耗之后，将反应混合物冷却至室温，用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水溶液洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。所得残留物采用二氯甲烷中的2-5％甲醇，在硅胶(100-200目)上用柱色谱进行纯化。将需要的馏分浓缩后得到棕色固体形式的N-(6-((3-甲基-1-氧代-2,3-二氢-1H-茚-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号19)。产率：0.057g,4％；MS(ESI)m/z 323.09[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.931(s,1H),10.066(s,1H),8.518(s,1H),8.042(s,1H),7.69-7.66(m,2H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),3.32(m,1H),2.87(m,1H),2.20-2.14(m,1H),2.06-2.00(m,1H),1.329-1.312(d,J＝6.8Hz,3H),0.85(s,4H)。
实施例20
合成2,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号20)
合成5-溴-2,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)
-78℃向5-溴-2-甲基异吲哚啉-1-酮(1,1g,4.42mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入六甲基二硅氮烷钠(4.4mL,4.86mmol 1M的四氢呋喃溶液)，并将反应混合物在该温度下搅拌15分钟。加入甲基碘(0.55mL,8.85mmol)并将反应混合物在-78℃搅拌2小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，分离，在硫酸钠上干燥并减压浓缩。残留物采用己烷中的30％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-溴-2,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.1g,9％；MS(ESI)m/z 240[M+1]+。
合成2,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号20)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物20。产率：0.07g,22％；MS(ESI)m/z255[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.93(s,1H),8.70(s,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),8.02(s,1H),7.70(d,J＝8.3Hz,1H),7.60(d,J＝8.2Hz,1H),6.87(d,J＝5.9Hz,1H),4.54(q,J＝6.7Hz,1H),2.98(s,3H),1.41(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例21
合成3-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(化合物编号21)
合成6-溴-3-甲基-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(2)
65℃向5-溴-2-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(1,5.0g,22.2mmol)的甲苯(50mL)溶液中加入浓硫酸(21.7g,222.0mmol)，然后分批加入叠氮化钠(1.8gm,28.8mmol)。在65℃继续加热3小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应物质用冷水淬灭，用碳酸钠碱化，用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，无水硫酸钠上干燥并减压浓缩。残留物采用在己烷中的18％乙酸乙酯，通过柱色谱进行纯化，得到黄色固体形式的6-溴-3-甲基-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(2)。产率：1.6g,30％；MS(ESI)m/z 240.95[M+1]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(bs,1H),7.29(s,1H),7.27(d,J＝5.7Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),2.97(dd,J＝5.2,15.6Hz,1H),2.73(t,J＝13.0Hz,1H),2.63(m,1H),1.28(d,J＝6.8Hz,3H)。
合成3-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(化合物编号21)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物21。灰白色固体；产率：0.035g,13％；MS(ESI)m/z 255.09[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),9.42(s,1H),8.54(s,1H),8.19(d,J＝6.0Hz,1H),7.45(s,1H),7.34(d,J＝8.4 8Hz,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),6.69(d,J＝5.6Hz,1H),2.91(dd,J＝5.6Hz,J＝15.6Hz,1H),2.64(m,1H),2.46(bs,与溶剂峰合并,1H),1.12(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例22
合成4-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号22)
合成5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(2)
将氯化钠(22.33g,382.35mmol)和氯化铝(101.93g,764.7mmol)在室温下混合并在130℃加热1小时。加入1-(4-溴苯基)-4-氯-丁烷-1-酮(1,20.0g,76.47mmol)并将反应混合物在180℃搅拌30分钟。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应混合物用冰水淬灭并用1M盐酸酸化至pH＝3-4。所得混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用己烷中的5％乙酸乙酯通过柱色谱进行纯化，得到浅棕色固体形式的5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(2)。产率：14.02g,83％；MS(ESI)m/z 224.82[M+1]+。
合成6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(3)
65℃向搅拌的5-溴-3-甲基-茚满-1-酮(2,4.0g,17.77mmol)的甲苯溶液中缓慢加入硫酸(17.42g,177.71mmol)。然后分批加入叠氮化钠(1.5g,23.1mmol)。将反应液在65℃保持2小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应物质用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭。混合物用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用己烷中的20％乙酸乙酯通过柱色谱进行纯化，得到白色固体形式的6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(3)。产率：0.5g,12％；MS(ESI)m/z 240.02[M+1]+。
合成4-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号22)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物22。白色固体；产率：0.045g,13％；MS(ESI)m/z 255.09[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.87(s,1H),8.69(s,1H),8.33(s,1H),7.72(m,4H),6.87(s,1H),3.44(s,1H),3.07(m,2H),1.25(s,3H)。
实施例23
合成3-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号23)
合成2-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(3)
室温下向4-氯嘧啶(1,0.83g,7.31mmol)和5-氨基-2-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(2,0.98g,6.09mmol)的正丁醇溶液中加入6M盐酸(0.1mL)。将反应混合物在室温下搅拌10分钟，然后于120℃在微波中保持0.5小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应物质用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩，得到棕色固体形式的2-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(3)。所得残留物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：0.6g,41％；质量m/z 240.3[M+1]+。
合成3-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号23)
65℃向2-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(3,0.5g,2.09mmol)的甲苯溶液中加入浓硫酸(2.05g,20.9mmol)然后分批加入叠氮化钠(0.18g,2.72mmol)。在65℃继续保持加热3小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应物质用冷水淬灭，用碳酸钠碱化，用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。残留物采用在己烷中的18％乙酸乙酯通过柱色谱进行纯化，得到白色固体形式的3-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号23)。产率：0.018g,4％；MS(ESI)m/z255.09[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.70(s,1H),8.33(d,J＝6.0Hz,1H),7.79(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(s,1H),7.66(s,1H),7.63(d,J＝9.6Hz,1H),6.87(d,J＝6.0Hz,1H),3.68(bs,1H),2.92(d,J＝12.4Hz,1H),2.69(t,J＝9.2Hz,1H),1.19(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例24
合成N-(4-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号24)
合成(2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
将5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(1,0.6g,1.74mmol)、氨基甲酸叔丁酯(0.30g,2.61mmol)和碳酸铯(1.6g,5.22mmol)的甲苯(12ml)溶液用氩气脱气15分钟。然后在氮气气氛下加入乙酸钯(0.039g,0.17mmol)和XantPhos(0.1g,0.17mmol)，继续吹扫10分钟。将反应液在110℃回流16小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，反应物质用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水进一步洗涤，分离，硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。所得残留物采用己烷中的10-20％乙酸乙酯在硅胶(100-200目)上通过柱色谱进行纯化，得到黄色固体形式的(2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2)。产率：0.36g,54％；MS(ESI)m/z383.08[M+1]+。
合成5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
将(2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2,0.31g,0.81mmol)溶解在二氯甲烷(10ml)中，加入4M在二噁烷中的氯化氢(3.1ml)。将反应混合物在40℃回流3小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，除去溶剂，反应物质用水进行稀释。所得水层用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机层在硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩，得到棕色固体形式的5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)。产率：0.22g,粗产物；MS(ESI)m/z 283.13[M+1]+。
合成N-(4-((2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。黄色固体；产率：0.18g,50％；MS(ESI)m/z 443.14[M+1]+。
合成N-(4-((3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号24)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物24。白色固体；产率：0.03g,24％；MS(ESI)m/z 323.10[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.55(s,1H),9.19(s,1H),8.41(s,1H),8.00(d,J＝5.6Hz,1H),7.89(s,1H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.32(s,1H),7.20(d,J＝8.8Hz,1H),6.75(t,J＝5.6Hz,1H),4.56(m,1H),1.98(bs,1H),1.35(d,J＝6.4Hz,3H),0.78(bs,4H)。
实施例25
合成3-甲基-5-((2-(甲基氨基)吡啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号25)
合成2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-((2-(甲基氨基)吡啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.22gm,25％；MS(ESI)m/z 389.30[M+1]+。
合成3-甲基-5-((2-(甲基氨基)吡啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号25)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物25。白色固体；产率：0.042g,27％；MS(ESI)m/z 269.13[M+1]+；NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(s,1H),8.37(s,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),7.52(d,J＝8.4Hz,1H),7.26(s,1H),7.16(d,J＝7.2Hz,1H),6.34(s,1H),6.27(d,J＝5.6Hz,1H),6.14(s,1H),4.55(m,1H),2.73(d,J＝4.8Hz,3H),1.35(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例26
合成3-甲基-5-((6-甲基嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号26)
合成(2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
室温下将5-溴-2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(1,643mg,1.71mmol)、氨基甲酸叔丁酯(200mg,1.71mmol)和碳酸铯(1.11g,3.41mmol)的悬浮液用氩气吹扫30分钟。加入乙酸钯(26mg,0.11mmol)和XantPhos(66mg,0.11mmol)，将反应混合物用氩气再吹扫10分钟。将反应液在100℃搅拌16小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。合并的有机层然后用硫酸钠干燥，倾滗并减压浓缩。然后黄橙色粗产物固体通过硅胶色谱进行纯化，用梯度(ISCO黄金系列–24g二氧化硅；20-60％乙酸乙酯/己烷)洗脱所需产物，得到浅橙色固体形式的(2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2)。产率：112mg,24％。
合成5-氨基-2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
向(2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2,112mg,0.27mmol)的甲醇(1.4mL)溶液中加入三氟乙酸(0.1mL,1.36mmol)。TCL显示原料被消耗后，将反应混合物浓缩以提供纯残留物。将残留物在减压下进一步干燥，无需进一步纯化即可使用。
合成2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基-5-((6-甲基嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。产率：15mg,48％。MS(ESI)m/z 405[M+1]+。
合成3-甲基-5-((6-甲基嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号26)
向2-(2,4-二甲氧基苄基)-3-甲基-5-((6-甲基嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(5,15mg,0.04mmol)的苯甲醚(1mL)溶液中加入三氟乙酸(0.7mL,9.14mmol)。将反应液在95℃搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩。所得红棕色残留物随后用醚(5 x 3mL)研磨后得到驼棕色固体形式的3-甲基-5-((6-甲基嘧啶-4-基)氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号26)。产率：6.3mg,66％；MS(ESI)m/z 255[M+1]+；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.74(s,1H),7.92(s,1H),7.75(d,J＝8.1Hz,1H),7.64(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),6.86(s,1H),4.68(q,J＝6.6Hz,1H),2.49(s,3H),1.43(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例27
合成6-(嘧啶-4-基氨基)苯并[d]异噻唑-3(2H)-酮(化合物编号27)
合成6-溴苯并[d]异噻唑-3(2H)-酮(3)
0℃向苯甲硫醇(2,1.29g,10.0mmol)的四氢呋喃(26mL)溶液中分批加入氢化钠(0.48g,12.0mmol)，将反应混合物在室温下搅拌1小时。加入4-溴-2-氟苯甲酰胺(1,2.38g,10.0mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液，将反应混合物在70℃加热4小时。反应液用水淬灭，在乙酸乙酯中萃取。将有机层分离，硫酸钠上干燥，倾滗并减压浓缩。残留物溶解在二氯甲烷(85mL)中并冷却至0℃。向该溶液中加入磺酰氯(1mL)。将反应液在室温下搅拌1小时。将反应混合物用戊烷(64mL)稀释，过滤并干燥后得到6-溴苯并[d]异噻唑-3(2H)-酮(3)。粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：1.2g,47％；MS(ESI)m/z 231[M+1]+。
合成6-(嘧啶-4-基氨基)苯并[d]异噻唑-3(2H)-酮(化合物编号27)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物27。产率：0.042g,6％；MS(ESI)m/z245.10[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.0(brs,1H),10.06(s,1H),8.72(s,1H),8.51(d,J＝1.7Hz,1H),8.36(d,J＝5.9Hz,1H),7.79(d,J＝8.6Hz,1H),7.55(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),6.92(dd,J＝6.0,1.2Hz,1H)。
实施例28
合成3-氨基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号28)
合成(3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：0.27g,64％；MS(ESI)m/z 341[M+1]+。
合成3-氨基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号28)
采用过程C的一般方法如上所述合成化合物28。产率：0.093g,51％；MS(ESI)m/z241[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.09(s,1H),8.74(d,J＝1.2Hz,1H),8.39(d,J＝5.9Hz,1H),8.20–8.14(m,1H),7.72(dd,J＝8.4,1.9Hz,1H),7.56(d,J＝8.4Hz,1H),6.94(dd,J＝5.9,1.3Hz,1H),4.41(dd,J＝7.1,3.5Hz,1H),2.93(dd,J＝18.4,7.1Hz,1H),2.58–2.51(m,1H),2.46–2.40(m,1H),2.28(dd,J＝18.4,3.6Hz,1H)。
实施例29
合成6-(嘧啶-4-基氨基)-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(化合物编号29)
合成2-溴-N-环丙基-N-(4-甲氧基苄基)-4-硝基苯甲酰胺(3)
9-91:向N-[(4-甲氧基苯基)甲基]环丙胺(1,0.72g,4.06mmol)、2-溴-4-硝基-苯甲酸(2,1g,4.06mmol)和HATU(1.7g,4.47mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(0.71mL,4.06mmol)。将反应液在室温下搅拌2小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，按顺序用饱和碳酸氢钠水溶液、1M盐酸和盐水洗涤。将有机物合并，硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷＝5-50％)，得到2-溴-N-环丙基-N-(4-甲氧基苄基)-4-硝基苯甲酰胺(3)。产率：1.30g,79％。
合成2-(4-甲氧基苄基)-6-硝基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(4)
向2-溴-N-环丙基-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]-4-硝基-苯甲酰胺(3,1g,2.47mmol)的甲苯溶液中加入乙酸钯(II)(28mg,0.12mmol)、二叔丁基(甲基)鏻四氟硼酸盐(61mg,0.25mmol)、磷酸三钾(786mg,3.7mmol)和新戊酸铯(173mg,0.74mmol)。将反应液用氮气吹扫5分钟并在回流下搅拌16小时。一旦冷却，将混合物用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土垫。将滤液浓缩并通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷＝0-40％)，得到灰白色粉末形式的2-(4-甲氧基苄基)-6-硝基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(4)。产率：110mg,14％。
合成6-硝基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(5)
采用过程B的一般方法如上所述合成中间体5。产率：189mg,100％。
合成6-硝基-3-氧代-1,1a,3,7b-四氢-2H-环丙烷并[c]异喹啉-2-羧酸叔丁酯(6)
向2-(4-甲氧基苄基)-6-硝基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(5,250mg,1.22mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(267mg,1.22mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(150mg,1.22mmol)。将反应液在室温下搅拌直到所有固体溶解。将粗产物浓缩并通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷＝0-100％)，得到6-硝基-3-氧代-1,1a,3,7b-四氢-2H-环丙烷并[c]异喹啉-2-羧酸叔丁酯(6)。产率：242mg,65％；MS(ESI)m/z 305.2[M+1]+。
合成6-氨基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(7)
向6-硝基-3-氧代-1,1a,3,7b-四氢-2H-环丙烷并[c]异喹啉-2-羧酸叔丁酯(6,124mg,0.41mmol)的乙醇(10mL)悬浮液中加入铁(750mg,0.41mmol)和浓盐酸(0.5mL)。将反应液在55℃搅拌20分钟。一旦冷却，将混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水(25mL)洗涤。将有机物合并，硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，甲醇/二氯甲烷＝0-5％)，得到6-氨基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(7)。产率：68mg,96％。
合成6-(嘧啶-4-基氨基)-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(化合物编号29)
向6-氨基-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(7,35mg,0.20mmol)的2-丙醇(2.5mL)溶液中加入4-氯嘧啶盐酸盐(30mg,0.20mmol)。将反应液在70℃搅拌1小时。一旦冷却，将混合物用乙酸乙酯稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。将有机层在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，甲醇/二氯甲烷＝0-8％)。所得固体用二氯甲烷进一步研磨后得到6-(嘧啶-4-基氨基)-1,1a,2,7b-四氢-3H-环丙烷并[c]异喹啉-3-酮(化合物编号29)。产率：20mg,39％；MS(ESI)m/z 253.1[M+1]+；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),8.72(s,1H),8.34(dd,J＝0.6,6.0Hz,1H),8.31(d,J＝3.0Hz,1H),7.97(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.54(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H),6.88(dd,J＝1.2,6.0Hz,1H),3.19-3.12(m,1H),2.34-2.27(m,1H),1.36-1.29(m,1H),0.13-0.09(m,1H)。
实施例30
合成3-氨基-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号30)
合成3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸乙酯(3)
将锌(4.95g,76.15mmol)和氯化亚铜(0.89g,9.13mmol)的四氢呋喃(28mL)溶液回流30分钟。将反应混合物冷却至室温并逐滴加入溴乙酸乙酯(2,2.1mL,19.03mmol)，将反应混合物在50℃搅拌45分钟。反应混合物冷却至0℃，加入(E)-N-(1-(3-溴苯基)亚乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1,2.3g,7.61mmol)的四氢呋喃(28mL)溶液并将反应混合物搅拌30分钟。反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并过滤通过硅藻土床。滤液减压浓缩，在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥并减压浓缩后得到3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸乙酯(3)。该化合物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：2.7g,粗产物；MS(ESI)m/z 390[M+1]+。
合成3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸(4)
向搅拌的3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸乙酯(3,2g,5.12mmol)的甲醇和水(20mL,4:1)的溶液中加入氢氧化锂一水合物(0.71g,16.92mmol)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，用饱和氯化铵溶液淬灭。反应混合物用1M盐酸水溶液酸化，将沉淀的固体过滤，用水洗涤，干燥后得到3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸(4)。该化合物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：1.6g,粗产物；MS(ESI)m/z 362[M+1]+。
合成3-氨基-3-(3-溴苯基)丁酸三氟乙酸盐(5)
将3-(3-溴苯基)-3-(1,1-二甲基乙基亚磺酰氨基)丁酸(4,1g,2.76mmol)的三氟乙酸(20mL)溶液在室温下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，得到粘稠油状的3-氨基-3-(3-溴苯基)丁酸三氟乙酸盐(5)。该化合物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：1.1g,粗产物；MS(ESI)m/z 258[M+1]+。
合成3-(3-溴苯基)-3-(2,2,2-三氟乙酰氨基)丁酸(6)
将3-氨基-3-(3-溴苯基)丁酸三氟乙酸盐(5,1.1g,2.95mmol)的三氟乙酸酐(20mL)溶液在室温下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，残留物采用50％在己烷中的乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶(100:200目)柱色谱进行纯化，得到3-(3-溴苯基)-3-(2,2,2-三氟乙酰氨基)丁酸(6)。产率：0.85g,81％。
合成N-(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2,2,2-三氟乙酰胺(7)
将3-(3-溴苯基)-3-(2,2,2-三氟乙酰氨基)丁酸(6,0.85g,2.4mmol)的亚硫酰氯(20mL)溶液回流3小时。将反应混合物减压浓缩，残留物溶解在二氯甲烷中并冷却至0℃-5℃。分批加入三氯化铝(0.64g,4.8mmol)，将反应混合物回流2小时。反应混合物用冰淬灭，分离有机层。有机层在硫酸钠上干燥，减压浓缩，残留物通过快速柱色谱进行纯化，得到N-(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2,2,2-三氟乙酰胺(7)。产率：0.35g,43％。
合成3-氨基-5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮盐酸盐(8)
将N-(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2,2,2-三氟乙酰胺(7,0.35g,1.04mmol)的6M盐酸水溶液(20mL)回流12小时。将反应混合物浓缩至干，残留物用乙醚研磨。将残留物过滤，干燥后得到白色固体形式的3-氨基-5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮盐酸盐(8)。该化合物无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：0.28g,粗产物；MS(ESI)m/z 240[M+1]+。
合成(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸叔丁酯(9)
0℃在3-氨基-5-溴-3-甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-酮盐酸盐(8,0.28g,1.01mmol)的四氢呋喃和水(5mL,4:1)的溶液中加入碳酸氢钠(0.34g,4.05mmol)和二碳酸二叔丁酯(0.35mL,1.52mmol)，将反应混合物在室温下搅拌8小时。反应混合物用水稀释，在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用二氯甲烷中的5％甲醇作为洗脱液通过硅胶柱色谱进行纯化，得到(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸叔丁酯(9)。产率：0.26g,76％。
合成(1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-基)氨基甲酸叔丁酯(11)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体11。产率：0.19g,92％；MS(ESI)m/z355[M+1]+。
合成3-氨基-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)-2,3-二氢-1H-茚-1-酮(化合物编号30)
采用过程C的一般方法如上所述合成化合物30。产率：0.08g,56％；MS(ESI)m/z255[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),8.74(s,1H),8.38(d,J＝5.9Hz,1H),8.04(d,J＝1.9Hz,1H),7.78(dd,J＝8.4,1.9Hz,1H),7.53(d,J＝8.4Hz,1H),6.93(dd,J＝5.9,1.3Hz,1H),2.71–2.51(m,2H),2.48(s,1H),1.43(s,3H)。
实施例31
合成5-(吡咯并[1,2-b]哒嗪-5-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号31)
合成5-硝基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2)
向搅拌的5-硝基异吲哚啉-1-酮(1,0.4g,2.24mmol)的乙腈(20mL)溶液中加入N,N-二甲基氨基吡啶(0.41g,3.37mmol)然后是二碳酸二叔丁酯(0.75mL,3.37mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。粗产物采用己烷中的25％乙酸乙酯，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-硝基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2)。产率：0.36g,57％；MS(ESI)m/z279[M+1]+。
合成5-氨基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(3)
向搅拌的5-硝基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2,0.36g,1.29mmol)的乙醇(30mL)溶液中加入10％钯碳(0.07g)，将反应混合物在氢气气氛下于室温搅拌2小时。将反应混合物过滤通过硅藻土滤床并用甲醇洗涤。滤液减压浓缩后得到5-氨基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(3)。产率：0.3g,93％；MS(ESI)m/z 249[M+1]+。
合成1-氧代-5-(吡咯并[1,2-b]哒嗪-5-基氨基)异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。产率：0.24g,54％；MS(ESI)m/z 365[M+1]+。
合成5-(吡咯并[1,2-b]哒嗪-5-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号31)
采用过程C的一般方法如上所述合成化合物31。产率：0.032g,29％；MS(ESI)m/z265[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(s,1H),8.09(dd,J＝4.4,1.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.86–7.74(m,2H),7.39(d,J＝8.3Hz,1H),6.88–6.74(m,3H),6.55(dd,J＝9.1,4.4Hz,1H),4.18(s,2H)。
实施例32
合成4-氨基-4-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号32)
合成N-(6-溴-4-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)-2,2,2-三氟-乙酰胺(2)
向N-(6-溴-1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-2,2,2-三氟乙酰胺(1,0.8g,2.38mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入甲磺酸(1.54mL,23.80mmol)，反应液冷却至0℃，然后分批加入叠氮化钠(0.46g,7.14mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应液用2M氢氧化钠溶液碱化，用二氯甲烷萃取。将有机层分离，用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，减压浓缩。粗产物采用在氯仿中的2％甲醇作为洗脱液通过Combi-快速色谱进行纯化，得到N-(6-溴-4-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)-2,2,2-三氟-乙酰胺(2)。产率：0.7g,84％。
合成4-氨基-6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(3)
向N-(6-溴-4-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)-2,2,2-三氟-乙酰胺(2,0.3g,0.85mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入氢氧化钡(4.39g,25.64mmol)，反应液在室温下搅拌16小时。将反应混合物用水稀释，化合物用乙酸乙酯萃取。将水层分离，用在二氯甲烷中的10％甲醇萃取，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。粗产物采用在氯仿中的5％甲醇作为洗脱液，通过Combi-快速柱色谱进行纯化，得到4-氨基-6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(3)。产率：0.16g,74％。
合成(6-溴-4-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)
0℃向4-氨基-6-溴-4-甲基-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(3,0.16g,0.63mmol)的四氢呋喃和水(6mL,2:1)的溶液中加入碳酸氢钠(0.26g,3.13mmol)，然后加入二碳酸二叔丁酯(0.27g,1.25mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应混合物用水稀释，化合物用二氯甲烷萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。粗产物采用在氯仿中的3％甲醇作为洗脱液，通过Combi-快速柱色谱进行纯化，得到(6-溴-4-甲基-1-氧代-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)。产率：0.14g,63％。
合成(4-甲基-1-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。产率：0.12g,83％；MS(ESI)m/z 370[M+1]+。
合成4-氨基-4-甲基-6-(嘧啶-4-基氨基)-3,4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(化合物编号32)
采用过程C的一般方法如上所述合成化合物32。产率：0.043g,50％；MS(ESI)m/z270[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.68(s,1H),8.32(d,J＝5.9Hz,1H),7.86(d,J＝7.8Hz,2H),7.77(d,J＝7.4Hz,2H),6.88(d,J＝5.9Hz,1H),3.28(dd,J＝12.1,4.3Hz,1H),3.11(dd,J＝12.1,4.3Hz,1H),2.14(s,2H),1.29(s,3H)。
实施例33
合成3,7-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号33)
合成5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3,7-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)
0℃，氮气气氛下向搅拌的甲基5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(1,2.2g,6.30mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(1.39g,7.60mmol)和碘代甲烷(1.17g,8.20mmol)。将反应混合物在0℃搅拌4小时。反应进程通过TLC进行监测。原料消耗后，反应混合物用水稀释，在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层用盐水溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残留物采用在己烷中的0-20％乙酸乙酯通过Combi快速柱色谱进行纯化，所需馏分浓缩后得到白色固体形式的5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3,7-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：1.0g,44％。MS(ESI)m/z360.16[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-3,7-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。白色固体；产率：0.27g,58％。MS(ESI)m/z 375.16[M+1]+。
合成3,7-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号33)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物33。灰白色固体；产率：0.05g,30％；MS(ESI)m/z 253[M-1]-；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.82(s,1H),8.68(s,1H),8.33-8.23(m,2H),7.80(s,1H),7.39(s,1H),6.85(d,J＝5.6Hz,1H),4.52(m,1H),2.56(s,3H),1.32(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例34
合成3-甲基-5-(嘧啶-4-基氧基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号34)
合成5-甲氧基-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2)
-78℃向5-甲氧基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(1,1.7g,6.45mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中逐滴加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(7.1mL,12.91mmol)。将反应液搅拌15分钟。加入甲基碘(1.83g,12.91mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3小时。反应混合物用水淬灭并在乙酸乙酯中萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用在己烷中的8％乙酸乙酯作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化，得到5-甲氧基-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2)。产率：1.6g,89％；MS(ESI)m/z 278[M+1]+。
合成5-羟基-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
-0℃向5-甲氧基-3-甲基-1-氧代异吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(2,1g,3.60mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入氯化铝(3.8g,28.8mmol)，将反应液搅拌15分钟。加入乙硫醇(1.79g,28.8mmol)并将反应混合物在室温下搅拌16小时。反应混合物依次用水和碳酸氢钠淬灭，用正丁醇萃取化合物。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩后得到5-羟基-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)。产率：0.3g,粗产物；MS(ESI)m/z 164[M+1]+。
合成3-甲基-5-(嘧啶-4-基氧基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号34)
向5-羟基-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3,0.12g,0.73mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL)溶液中加入4-氯嘧啶(0.13g,0.88mmol)，叔丁醇钠(0.177g,1.83mmol)和反式-N,N二甲基环己烷-1,2-二胺(0.052g,0.36mmol)，将反应混合物用氩气脱气15分钟。加入碘化铜(I)(0.028g,0.15mmol)，将反应混合物在120℃加热18小时。将反应混合物减压浓缩，用乙酸乙酯稀释。反应混合物过滤通过硅藻土滤床。滤液减压浓缩，残留物通过制备型HPLC进行纯化，得到3-甲基-5-(嘧啶-4-基氧基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号34)。产率：0.072g,29％；MS(ESI)m/z 242[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(d,J＝1.1Hz,1H),8.75-8.66(m,2H),7.70(d,J＝8.2Hz,1H),7.50(d,J＝2.1Hz,1H),7.31(dd,J＝8.2,2.1Hz,1H),7.23(dd,J＝5.9,1.2Hz,1H),4.64(q,J＝6.7Hz,1H),1.37(d,J＝6.7Hz,3H)。
实施例35
合成7-氯-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号35)
合成5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(2)
0℃，氮气气氛下向搅拌的5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(1,1.6g,4.38mmol)的四氢呋喃(44mL)溶液中加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(0.95g,5.19mmol)和碘代甲烷(2.7mL,43.80mmol)。将反应混合物在0℃搅拌3小时。反应进程通过TLC进行监测。原料消耗后，反应混合物用水稀释，在乙酸乙酯中萃取。有机层用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。所得残留物采用在己烷中的0-30％乙酸乙酯通过Combi快速柱色谱进行纯化，所需馏分浓缩后得到黄色固体形式的5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.72g,粗产物；MS(ESI)m/z 380[M+1]+。
合成7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。灰白色固体；产率：0.32g,粗产物；MS(ESI)m/z 395.1[M+1]+。
合成7-氯-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号35)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物35。产率：0.028g,50％；MS(ESI)m/z275.03[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),8.75(s,1H),8.56(s,1H),8.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.83(s,1H),6.88(d,1H),4.57(q,1H),1.34(d,3H)。
实施例36
合成7-氯-3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号36)
合成5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)
0℃，氮气气氛下向搅拌的5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(1,1.6g,4.38mmol)的四氢呋喃(44mL)溶液中加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(0.95g,5.19mmol)和碘代甲烷(2.7mL,43.80mmol)。将反应混合物在0℃搅拌3小时。反应进程通过TLC进行监测。原料消耗后，反应混合物用水稀释，在乙酸乙酯中萃取。有机层用盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩。所得残留物采用在己烷中的0-30％乙酸乙酯通过Combi快速柱色谱进行纯化，所需分馏物浓缩后得到黄色固体形式的5-溴-7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.72g,粗产物；MS(ESI)m/z 396[M+1]+。
合成7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。灰白色固体；产率：0.16g,粗产物；MS(ESI)m/z 409.1[M+1]+。
合成7-氯-3,3-二甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号35)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物35。产率：0.015g,35％；MS(ESI)m/z289.03[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.83(s,1H),8.75(s,1H),8.58(s,1H),8.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.92(d,1H),7.72(d,1H),6.88(d,1H),1.42(s,6H)。
实施例37
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号37)
合成5-溴-3-羟基-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(3)
向1,2-二溴乙烷(20ml,230.35mmol)的醚/苯(270ml/100ml)溶液中加入搅拌的镁条(turning)(8.64g,355.6mmol)的醚(100ml)悬浮液。将反应液在室温下搅拌2小时。向其中加入正丁基锂(110ml,177.6mmol)和3-溴噻吩(2,29g,177.6mmol)的四氢呋喃(200ml)溶液(在-78℃制备)并将反应液在室温下搅拌1小时。然后加入4-溴邻苯二甲酰亚胺(1,4g,17.7mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液并将反应液在室温下搅拌1小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，将反应混合物用饱和氯化铵淬灭，用二氯甲烷萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用己烷中的25％乙酸乙酯通过Combi快速柱色谱进行纯化，得到黄色固体形式的5-溴-3-羟基-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(3)的混合物。产率：0.97g,粗产物；MS(ESI)m/z 307.95[M-1]-。
合成5-溴-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(4)
向搅拌的5-溴-3-羟基-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(3,0.97g,3.13mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入氰基硼氢化钠(0.43g,6.89mmol)。然后加入三氟乙酸(2ml)，将反应液在室温下保持48小时。反应进程通过TLC进行监测。反应完成后，反应物质用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取两次。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，减压浓缩。残留物采用在己烷中的20％乙酸乙酯，通过Combi快速柱色谱进行纯化，得到灰白色固体形式的5-溴-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(4)。产率：368mg,40％；MS(ESI)m/z294.02[M+1]+。
合成5-(嘧啶-4-基氨基)-3-(噻吩-3-基)异吲哚啉-1-酮(化合物编号37)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物37。产率：0.16g,31％；MS(ESI)m/z309.23[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.91(s,1H),8.86(s,1H),8.65(s,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(s,J＝4Hz,1H),7.73(s,1H),7.64(s,J＝8Hz,1H),7.53(m,J＝8Hz,2H),6.90(d,J＝4Hz,1H),6.81(d,J＝4Hz,1H),5.80(s,1H)。
实施例38
合成5-(7,8-二氢-6H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-4-基氨基)-3-甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号38)
合成4-氯-6,7-二氢嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-8-羧酸叔丁酯(2)
向含有4-氯-7,8-二氢-6H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪(1,560mg,3.26mmol)和叔丁氧基羰基叔丁基碳酸酯(1.07g,4.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)和四氢呋喃(4mL)中的混合物中加入4-(二甲基氨基)吡啶(199mg,1.63mmol)和三乙胺(1.0mL,7.18mmol)。反应放出气体，反应液在室温下搅拌过夜。随后将反应液真空浓缩，然后在乙酸乙酯和1M盐酸之间进行分配。将有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到4-氯-6,7-二氢嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-8-羧酸叔丁酯(2)。产率：632mg,71％；MS(ESI)m/z272[M+1]+。
合成4-[[2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基]氨基]-6,7-二氢嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-8-羧酸叔丁酯(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。产率：15mg,35％；MS(ESI)m/z 548[M+1]+。
合成5-(7,8-二氢-6H-嘧啶并[5,4-b][1,4]噁嗪-4-基氨基)-3-甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号38)
采用过程B的一般方法如上所述合成其三氟乙酸盐形式的化合物38。产率：9mg,62％；MS(ESI)m/z 297[M+1]+；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.04(bs,1H),7.83(m,1H),7.74-7.63(m,2H),4.69(q,1H),4.37(t,2H),3.69(t,2H),1.47(d,3H)。
实施例39
合成5-(6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基氨基)-3-甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号39)
合成2-(2,4-二甲氧基苄基)-5-((7-(2,4-二甲氧基苄基)-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。产率：25mg,52％；MS(ESI)m/z 582[M+1]+。
合成5-(6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基氨基)-3-甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号39)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物39。产率：13mg,100％；MS(ESI)m/z282[M+1]+；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.16(s,1H),7.75-7.70(m,2H),7.45(dd,1H),4.70(q,1H),3.90(t,2H),3.08(t,2H),1.47(d,3H)。
实施例40
合成3-(氨基甲基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(化合物编号40)
合成2-(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(3)
-78℃，向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基异吲哚啉-1-酮(1,1g,2.89mmol)的四氢呋喃(42mL)溶液中逐滴加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(530mg,2.89mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液。将反应液搅拌15分钟，然后逐滴加入在四氢呋喃(10mL)中的2-溴乙酸乙酯(2,555mg,3.32mmol)。将反应液在-78℃搅拌20分钟，然后使其缓慢升温至室温。将反应混合物倒入半饱和的氯化铵水溶液中，用乙酸乙酯萃取。将有机物合并，用盐水洗涤，在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷＝0-10％)，得到2-(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(3)。产率：0.52g,42％；MS(ESI)m/z 432.0[M+1]+。
合成2-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。灰白色易碎泡沫；产率：329mg,95％；MS(ESI)m/z 469.3[M+1]+。
合成2-(6-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(6)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体6。驼色固体。产率：308mg,95％；MS(ESI)m/z 369.2[M+1]+。
合成2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(8)
将2-(6-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(6,300mg,0.81mmol)和4-氯嘧啶盐酸盐(7,123mg,0.81mmol)在2-丙醇(10mL)中的混合物在60℃搅拌16小时。将所得混合物浓缩并重新溶解在二氯甲烷中。混合物用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/己烷＝0-40％)，得到2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(8)。产率：156mg,43％；MS(ESI)m/z 447.2[M+1]+。
合成2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸(9)
向2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸乙酯(8,150mg,0.34mmol)的甲醇(4mL)和四氢呋喃(4mL)的溶液中加入1M氢氧化锂(4mL,1.36mmol)溶液。将反应液在室温下搅拌4小时，然后通过添加1M盐酸中和至pH～6.8。所得混合物用乙酸乙酯萃取。将有机物合并，在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩后得到白色粉末形式的2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸(9)。产率：90mg,64％；MS(ESI)m/z 419.3[M+1]+。
合成3-(氨基甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(10)
向2-(2-(4-甲氧基苄基)-1-甲基-3-氧代-6-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-基)乙酸(9,82mg,0.20mmol)的甲苯(18mL)和四氢呋喃(4mL)的悬浮液中加入叔丁醇(290mg,3.92mmol)、三乙胺(51mg,0.39mmol)和二苯基磷酰基叠氮化合物(54mg,0.20mmol)。将反应液在85℃搅拌16小时。加入4M盐酸(8mL)，将反应液剧烈搅拌2小时。所得混合物用甲醇稀释并浓缩。粗产物通过反相HPLC进行纯化(C18,乙腈/水＝5-60％)，得到油状的3-(氨基甲基)-2-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(10)。产率：40mg,42％；MS(ESI)m/z 390.2[M+1]+。
合成3-(氨基甲基)-3-甲基-5-(嘧啶-4-基氨基)异吲哚啉-1-酮盐酸盐(化合物编号40)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物40。灰白色固体；产率：9mg,29％；MS(ESI)m/z 270.1[M+1]+。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.94(s,1H),8.40(s,1H),8.18(s,1H),7.89-7.83(m,2H),7.20(d,J＝6.0Hz,1H),3.66(d,J＝13.8Hz,1H),3.37(d,J＝13.5Hz,1H),1.65(s,3H)。
实施例41
合成4-[(3-甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基)氨基]-5,7-二氢吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(化合物编号41)
合成7-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-[[2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基]氨基]-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(3)
将5-氨基-2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-甲基-异吲哚啉-1-酮(2,50mg,0.16mmol)、4-氯-7-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(1,51mg,0.16mmol)和对甲苯磺酸一水合物(15mg,0.08mmol)的1-甲基-2-吡咯烷酮(0.1mL)和1,2-二甲氧基乙烷(0.3mL)的溶液置于微波反应瓶内。反应液在200℃辐射2小时。将反应液用乙腈稀释，通过HPLC进行纯化，得到7-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-4-[[2-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基]氨基]-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(3)。产率：15mg,95％；MS(ESI)m/z596[M+1]+。
合成4-[(3-甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基)氨基]-5,7-二氢吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(化合物编号41)
采用过程B的一般方法如上所述合成化合物41。产率：3mg,40％；MS(ESI)m/z 367[M+1]+；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.37(s,1H),8.04(d,1H),7.68(d,1H),4.69(q,1H),3.56(s,2H),1.48(d,3H)。
实施例42
合成N-(4-((1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号42)
合成4-乙酰基-6-氯烟酸甲酯(2)
0℃，向4-乙酰基-6-氯烟酸(1,6.0g,301.01mmol)的四氢呋喃(60mL)溶液中缓慢加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷(6mL)。将反应液在室温下搅拌2小时。反应完成后，反应混合物用水和盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩，得到白色固体形式的4-乙酰基-6-氯烟酸甲酯(2)。产率：4.3g,68％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.87(s,1H),7.83(s,1H),3.85(s,3H),2.52(s,3H)。
合成4-乙酰基-6-((2-(环丙烷甲酰氨基)吡啶-4-基)氨基)烟酸甲酯(4)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体4。白色固体；产率：0.32g,25％；MS(ESI)m/z 355.01[M+1]+。
合成N-(4-((1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号42)
在10mL微波瓶中将4-乙酰基-6-((2-(环丙烷甲酰氨基)吡啶-4-基)氨基)烟酸甲酯(4,0.20g,0.56mmol)溶解在甲醇(4mL)中。加入乙酸铵(0.66g,8.40mmol)，然后是氰基硼氢化钠(0.35g,5.60mmol)。将微波瓶在130℃的微波下辐射30分钟。反应完成后，真空下除去溶剂，加入水(5mL)，混合物用在二氯甲烷中的10％甲醇萃取(2×10mL)。将有机物在硫酸钠上干燥，真空下浓缩至干。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用在二氯甲烷中的2％甲醇洗脱。所需馏分真空下浓缩至干，得到灰白色固体形式的N-(4-((1-甲基-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-6-基)氨基)吡啶-2-基)环丙烷羧酰胺(化合物编号42)。产率：0.030g,16％；MS(ESI)m/z 324.32[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.60(s,1H),9.98(s,1H),8.49(m,2H),8.16(m,1H),8.09(m,1H),7.79(d,J＝4.4Hz,1H),7.02(s,1H),4.64(m,1H),2.00(m,1H),1.34(d,J＝6.4Hz,3H),1.05(m,4H)。
实施例43
合成5-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-7-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号43)
合成5-溴-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]异吲哚啉-1-酮(2)
室温氮气条件下在烧瓶中加入在四氢呋喃(35mL)中的4-溴-2-(溴甲基)-6-氯-苯甲酸甲酯(1,5g,14.6mmol)，然后加入4-甲氧基苄基胺(4.0g,29.2mmol)和二异丙基乙胺(3.8g,29.2mmol)。将反应物质在室温下搅拌12小时。反应完成后，将沉淀的固体过滤，用冷的正戊烷洗涤。固体干燥后得到黄色固体形式的5-溴-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]异吲哚啉-1-酮(2)。产率：3.3g,62％；MS(ESI)m/z 366[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88-7.80(m,2H),7.23(d,J＝8.44Hz,2H),6.89(d,J＝8.44Hz,2H),4.63(s,2H),4.36(s,2H),3.79(s,3H)。
合成5-溴-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(3)
氮气条件下在烧瓶中加入在四氢呋喃(25mL)中的5-溴-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]异吲哚啉-1-酮(2,2.5g,6.82mmol)，室温下加入氢化钠(818mg,34.09mmol)。将悬浮液在室温下搅拌30分钟，然后加入碘代甲烷(4839mg,34.09mmol)。将反应液在室温下再搅拌5小时。反应完成后，反应物质在0℃用饱和氯化铵溶液淬灭。残留物溶解在乙酸乙酯(100mL)中，有机层用水(2×10mL)，然后用盐水(10mL)洗涤。将有机物分离并干燥(硫酸镁)，然后浓缩至干。然后粗产物采用在己烷中的10％乙酸乙酯洗脱，通过快速柱色谱进行纯化。所需馏分在真空下浓缩至干，得到黄色固体的5-溴-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(3)。产率：1.8g,66％；MS(ESI)m/z 394.28[M-1]-；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(s,1H),7.76(s,1H),7.31(d,J＝8.5Hz,2H),6.87(d,J＝8.5Hz,2H),4.58(s,2H),3.72(s,3H),1.36(s,6H)。
合成N-[6-[[7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基]氨基]嘧啶-4-基]环丙烷羧酰胺(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。棕色固体；产率：0.5g,33％；MS(ESI)m/z 492[M+1]+。
合成5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(6)
过程D：向N-[6-[[7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-1-氧代-异吲哚啉-5-基]氨基]嘧啶-4-基]环丙烷羧酰胺(5,0.49g,1mmol)的四氢呋喃(10mL)和乙醇(10mL)溶液中加入3M氢氧化钾水溶液(8mL)。将反应液在40℃搅拌18小时。反应完成后，反应物质用乙酸乙酯稀释。将有机层用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。所得粗产物采用在二氯甲烷中的1-2％甲醇通过柱色谱进一步纯化。所需馏分浓缩后得到浅棕色固体形式的5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(6)。产率：400mg,95％；MS(ESI)m/z 424.26[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H),7.86(s,1H),7.65(s,1H),7.30(d,J＝8.44Hz,2H),6.87(d,J＝8.44Hz,2H),6.57(brs,1H),5.83(s,1H),4.56(s,2H),3.71(s,3H),1.31(s,6H)。
合成5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号43)
过程E：氮气下向搅拌的5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(6,0.08g,0.19mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(215mg,1.89mmol)。将反应瓶密封并在110℃加热28小时。反应完成后，反应混合物冷却至室温并浓缩。粗产物与二氯甲烷共蒸发，然后加入液氨以中和反应物质。将沉淀的固体过滤，干燥后得到棕色固体形式的5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号43)。产率：0.040g,69％；MS(ESI)m/z 304.3[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.60(s,1H),8.34(s,1H),7.71(s,1H),7.64(s,1H),7.36(brs,2H),5.90(s,1H),1.41(s,6H)。
实施例44
合成5-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-3,3,7-三甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号44)
合成5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3,7-三甲基-异吲哚啉-1-酮(2)
过程F：在含有1,4-二噁烷(15mL)的反应瓶中加入5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-7-氯-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3-二甲基-异吲哚啉-1-酮(1,0.26g,0.61mmol)、三甲基环硼氧烷(380mg,3.04mmol)和磷酸钾(0.5g,1.52mmol)。将反应液用氩气吹扫10分钟，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(55.7mg,0.06mmol)和三环己基膦(17.05mg,0.06mmol)。继续再吹扫5分钟。将反应瓶密封，反应混合物在130℃搅拌16小时。反应完成后，将反应液用在二氯甲烷中的10％甲醇(150mL)稀释，过滤通过硅藻土滤床并浓缩。粗产物用二氯甲烷和甲醇研磨，高真空下干燥后得到黄色固体形式的5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-2-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3,3,7-三甲基-异吲哚啉-1-酮(2)。产率：0.21g,88％；MS(ESI)m/z 404.3[M+1]+。
合成5-[(6-氨基嘧啶-4-基)氨基]-3,3,7-三甲基-异吲哚啉-1-酮(化合物编号44)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物44。灰白色固体；产率：0.040g,28％；MS(ESI)m/z 284.03[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.16(s,1H),8.24(s,1H),8.09(s,1H),7.55(s,1H),7.31(s,1H),6.42(brs,2H),5.83(s,1H),1.33(s,6H)。
实施例45
合成5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酰胺(化合物编号45)
合成5-溴-2-萘甲酸乙酯(2)
0℃向5-溴-2-萘甲酸(1,2.0g,8.0mmol)的乙醇(50mL)溶液中加入亚硫酰氯(5mL)。将反应混合物在80℃回流5小时。反应完成后，反应液在0℃用饱和碳酸氢钠水溶液碱化，用乙酸乙酯稀释。有机层用盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，浓缩后得到白色固体形式的5-溴-2-萘甲酸乙酯(2)。产率：2.2g,98％；MS(ESI)m/z 279[M+1]+。
合成5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-萘甲酸乙酯(4)
将5-溴-2-萘甲酸乙酯(2,2.0g,7.19mmol),4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(3,2.3g,9.3mmol)和乙酸钾(1.7g,17.9mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物用氩气吹扫5分钟。加入与二氯甲烷络合的二氯[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)(293mg,0.36mmol)，再继续吹扫5分钟。将反应瓶密封并在110℃加热3小时。反应完成后，减压除去溶剂，加入水。沉淀的固体过滤，用正戊烷和乙醚洗涤。将化合物在真空下干燥后得到白色固体形式的5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-萘甲酸乙酯(4)。产率：1.2g,52％；MS(ESI)m/z 327.2[M+1]+。
合成5-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-4-基)-2-萘甲酸乙酯(6)
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2-萘甲酸乙酯(4,1.0g,3.06mmol)、N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5,1.5g,4.6mmol)和碳酸钠(0.81g,7.60mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物用氩气吹扫5分钟。加入与二氯甲烷络合的二氯[1,1′-二(二苯基膦)二茂铁]钯(II)(124mg,0.15mmol)，再继续吹扫5分钟。将反应瓶密封并在110℃加热3小时。反应完成后，减压除去溶剂，加入水。沉淀的固体过滤，用正戊烷和乙醚洗涤。将化合物在真空下干燥后得到棕色固体形式的5-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-4-基)-2-萘甲酸乙酯(6)。产率：1.0g,83％；MS(ESI)m/z 394.1[M+1]+。
合成5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酸(7)
0℃，在含有乙醇(50mL)的密封管中加入5-(6-((叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-4-基)-2-萘甲酸乙酯(6,1.0g,2.53mmol)和氢氧化铵(20mL)。将反应混合物在100℃回流8小时。减压除去溶剂后得到棕色固体形式的5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酸(7)。产率：0.5g,74％；MS(ESI)m/z 266.6[M+1]+。
合成5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酰胺(化合物编号45)
0℃，在烧瓶中加入5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酸(7,0.5g,1.88mmol)和亚硫酰氯(10mL)。将反应混合物在100℃回流3小时。反应完成后，减压除去亚硫酰氯。粗产物用二氯甲烷稀释，0℃加入液体氨。将反应液在室温下搅拌18小时。反应完成后，减压除去溶剂后得到粗产物。粗产物通过制备型HPLC纯化后得到白色固体形式的5-(6-氨基嘧啶-4-基)-2-萘甲酰胺(化合物编号45)。产率：0.15g,30％；MS(ESI)m/z 265.30[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(d,J＝1.4Hz,1H),8.52(s,1H),8.19(d,J＝8.9Hz,1H),8.16(brs,1H),8.10(dd,J＝7.2,2.4Hz,1H),7.96(dd,J＝9.2,1.8Hz,1H),7.68-7.63(m,2H),7.50(brs,1H),7.02(s,2H),6.65(s,1H)。
实施例46
合成4'-氯-6'-(嘧啶-4-基氨基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号46)
合成7'-氯-2'-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5'-(嘧啶-4-基氨基)螺[环己烷-1,3'-异吲哚啉]-1'-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。灰白色固体；产率：0.05g,19％；MS(ESI)m/z 447.43[M+1]+。
合成4'-氯-6'-(嘧啶-4-基氨基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号46)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物46。灰白色固体；产率：0.025g,43％；MS(ESI)m/z 329.19[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.07(s,1H),9.09(s,1H),8.75(s,1H),8.39(d,J＝5.7Hz,1H),7.89(d,J＝1.5Hz,1H),7.76(d,J＝1.5Hz,1H),6.88(d,J＝3.8Hz,1H),1.83-1.76(m,2H),1.68(m,4H),1.43-1.35(m,2H)。
实施例47
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环戊烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号47)
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环戊烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号47)
采用过程F的一般方法如上所述合成化合物47。白色固体；产率：0.015g,46％；MS(ESI)m/z 310.34[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.13(s,1H),8.49(s,1H),8.08(s,1H),7.56(s,1H),7.30(s,1H),6.42(s,2H),5.82(s,1H),2.55(s,3H),1.91-1.87(m,8H)。
实施例48
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氯螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号48)
合成N-(6-((4'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体。产率：0.53g,粗产物；MS(ESI)m/z 532.4[M+1]+。
合成N-(6-((4'-氯-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：85mg,粗产物；MS(ESI)m/z 412.34[M+1]+。
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氯螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号48)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物48。灰白色固体；产率：17mg,33％；MS(ESI)m/z 344.04[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,1H),8.98(s,1H),8.14(s,1H),7.81(s,1H),7.63(s,1H),6.54(s,2H),5.83(s,1H),1.75-1.68(m,8H),1.42(m,2H)。
实施例49
合成1-(6-氨基嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酰胺(化合物编号49)
合成4-氟-N-(4-甲氧基苄基)-3-硝基苯甲酰胺(2)
0℃，氮气气氛下将亚硫酰氯(15.9g,135.1mmol)加入4-氟-3-硝基苯甲酸(1,5g,27.0mmol)的甲苯(100mL)溶液中。将反应混合物回流5小时，然后减压去除挥发物。粗产物用四氢呋喃(100mL)提取并冷却至0℃。加入三乙胺(8.1g,80.1mmol)，然后加入对甲氧基苄基胺(5.5g,40.1mmol)。继续搅拌16小时。反应完成后，加入水(50mL)并将混合物用乙酸乙酯(250mL)萃取。将有机层分离，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩至干，得到4-氟-N-(4-甲氧基苄基)-3-硝基苯甲酰胺(2)。产率：6.5g,粗产物；MS(ESI)m/z 304.28[M+1]+。
合成4-氨基-N-(4-甲氧基苄基)-3-硝基苯甲酰胺(3)
环境温度下将4-氟-N-(4-甲氧基苄基)-3-硝基苯甲酰胺(2,6.5g,21.38mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液用氨水处理。将反应混合物在60℃加热16小时。反应完成后，蒸发一半的溶剂并将粗产物混合物用冰水研磨。将固体用水(50mL)洗涤，真空干燥后得到黄色固体形式的4-氨基-N-(4-甲氧基苄基)-3-硝基苯甲酰胺(3)。产率：3.0g,粗产物；MS(ESI)m/z302.21[M+1]+。
合成(6-((4-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)-2-硝基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。黄色固体；产率：2.1g,64％；MS(ESI)m/z 495.37[M+1]+。
合成(6-((2-氨基-4-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6)
室温下向(6-((4-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)-2-硝基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5,1.38g,2.80mmol)的乙醇和四氢呋喃(2:1,60mL)溶液中加入10％钯碳(138mg)。对反应物进行吹扫并用氢气填充和搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物过滤通过硅藻土滤床。将硅藻土滤床用10％甲醇的二氯甲烷(100mL)溶液洗涤。将滤液浓缩，真空干燥后得到(6-((2-氨基-4-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。产率：1.3g,粗产物；MS(ESI)m/z465.12[M+1]+。
合成(6-(5-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(7)
将(6-((2-氨基-4-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6,1.2g,2.58mmol)的原甲酸三乙酯(4.3mL,25.8mmol)溶液在100℃搅拌2小时。反应完成后，将混合物用10％甲醇的二氯甲烷(200mL)溶液稀释并用冷水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将粗产物用甲醇和戊烷研磨，得到棕色固体形式的(6-(5-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(7)。产率：0.81g,66％；MS(ESI)m/z 475.39[M+1]+。
合成1-(6-氨基嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酰胺(化合物编号49)
0℃，向(6-(5-((4-甲氧基苄基)氨基甲酰基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(7,0.60g,1.26mmol)的二氯甲烷(5mL)悬浮液中加入三氟乙酸(10mL)，然后加入三氟甲磺酸(3mL)。使反应物达到室温并在70℃加热2小时。反应完成后，将反应混合物在搅拌的条件下倒到冰冷却的氨水上。将形成的沉淀过滤并用水洗涤，干燥后得到粗产物。最后将粗产物通过快速柱色谱纯化，用二氯甲烷中的10％甲醇洗脱。所需馏分浓缩并用乙醚和戊烷研磨，得到灰白色固体形式的1-(6-氨基嘧啶-4-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酰胺。产率：0.22g,70％；MS(ESI)m/z 255.03[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(s,1H),8.45(s,1H),8.33(s,1H),8.22(d,J＝8.8Hz,1H),8.08(brs,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.39(brs,1H),7.26(brs,2H),6.82(s,1H)。
实施例50
合成5-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-7-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号50)
合成N-(5-氯-6-((7-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体。产率：0.19g,粗产物；MS(ESI)m/z 526[M+1]+。
合成N-(5-氯-6-((7-氯-3,3-二甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：80mg,58％；MS(ESI)m/z406[M+1]+。
合成5-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-7-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号50)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物50。灰白色固体；产率：23mg,40％；MS(ESI)m/z 338.04[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),8.55(s,1H),8.06(s,1H),7.91(s,1H),7.79(s,1H),6.98(s,2H),1.4(s,6H)。
实施例51
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号51)
合成4-溴-2-(溴甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(2)
室温下向4-溴-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(1,5.5g,22.63mmol)的四氯化碳溶液中加入N-溴代琥珀酰胺(4.4g,24.89mmol)和过氧苯甲酰(0.5g,2.23mmol)。将反应液回流16小时。TLC监测反应完成后，将混合物冷却至室温，过滤并用四氯化碳(30mL)洗涤。将滤液减压浓缩至干，得到棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(2)。产率：7.5g,粗产物；MS(ESI)m/z 322.12[M+1]+。
合成5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
0℃向4-溴-2-(溴甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(2,7.5g,23.29mmol)的二甲基甲酰胺(70mL)溶液中加入二异丙基乙胺(9.0g,69.87mmol)和对甲氧基苄基胺(4.7g,34.93mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC监测反应完成后，加入水(150mL)并将混合物用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的15％乙酸乙酯洗脱。将所需馏分浓缩，真空干燥后得到浅黄色固体形式的5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)。产率：3.5g,38％；MS(ESI)m/z346.19[M+1]+。
合成6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
0℃向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3,1.5g,4.34mmol)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入氢化钠(0.5g,10.86mmol)。将反应液在室温下搅拌30分钟。加入1,5-二溴戊烷(4,1.29g,5.65mmol)并将反应液在室温下搅拌16小时。TLC监测反应完成后，加水以淬灭反应，将混合物用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将有机层合并，无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空下浓缩至干，得到浅黄色固体形式的6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)。产率：0.45g,25％；MS(ESI)m/z 414.04[M+1]+。
合成N-叔丁氧基羰基-N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。浅黄色固体；产率：0.2g,26％；MS(ESI)m/z 644.43[M+1]+。
合成6'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号51)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物51。浅黄色固体；产率：0.05g,26％；MS(ESI)m/z 324.36[M+1]+；NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.16(s,1H),8.74(s,1H),8.09(s,1H),7.57(s,1H),7.30(s,1H),6.42(s,2H),5.83(s,1H),2.48(s,3H),1.67(m,7H),1.35(m,3H)。
实施例52
合成5-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号52)
合成4-溴-3-氯-2-甲基苄腈(2)
将氰化铜(I)(5.28g,59.0mmol)和亚硝酸叔丁基酯(14g,136.1mmol)的二甲亚砜(100mL)溶液在60℃搅拌30分钟。在30分钟的时间内向该混合物中逐滴加入4-溴-3-氯-2-甲基苯胺(1,10.0g,45.4mmol)的DMSO溶液。将反应液在60℃搅拌1小时。反应完成后，将反应液用6M盐酸淬灭，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的5-10％乙酸乙酯洗脱，得到黄色固体形式的4-溴-3-氯-2-甲基苄腈(2)。产率：4.5g,43％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.84(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝6.4Hz,1H),2.62(s,3H)。
合成4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酰胺(3)
将4-溴-3-氯-2-甲基苄腈(2,4.4g,19.08mmol)与5M氢氧化钠的水(25mL)溶液混合。将混合物在100℃加热16小时。反应完成后，用柠檬酸的水溶液淬灭反应直至pH 8。灰白色固体沉淀出来。将其过滤，用水洗涤，真空干燥后得到灰白色固体形式的4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酰胺(3)。产率：3.5g,74％；MS(ESI)m/z 250.16[M+1]+。
合成4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸(4)
0℃向4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酰胺(3,2.5g,10.0mmol)在50％硫酸(50mL)中的混合物中加入饱和亚硝酸钠水溶液(2.0g,27.0mmol)。将反应液在100℃搅拌16小时。反应完成后，将反应液冷却并加入冰冷的水。将沉淀出来的白色固体过滤，用冷的正戊烷洗涤，真空干燥后得到白色固体形式的4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸(4)。产率：2.0g,61％；MS(ESI)m/z248.88[M-1]-。
合成4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸甲酯(5)
室温下向4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸(4,4.5g,18.03mmol)和碳酸钾(4.97g,36.07mmol)在二甲基甲酰胺(100mL)中的混合物中缓慢加入碘代甲烷(3.83g,27.0mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时，用冰冷的水淬灭。将混合物用乙酸乙酯萃取。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的2-5％乙酸乙酯洗脱，得到棕色液体形式的4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸甲酯(5)。产率：2.2g,38％。
合成4-溴-2-(溴甲基)-3-氯苯甲酸甲酯(6)
向4-溴-3-氯-2-甲基苯甲酸甲酯(5,2.0g,7.59mmol)的四氯化碳(50mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(1.35g,7.59mmol)和偶氮二异丁腈(125mg,0.75mmol)。将反应液在100℃加热24小时。反应完成后，反应液冷却至室温并过滤。将滤液浓缩和干燥后得到无色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-3-氯苯甲酸甲酯(6)。产率：2.2g,84％。
合成5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(7)
向4-溴-2-(溴甲基)-3-氯苯甲酸甲酯(6,2.2g,6.42mmol)的四氢呋喃(35mL)溶液中加入4-甲氧基苄基胺(1.05g,7.71mmol)和二异丙基乙胺(2.49g,19.27mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后，将沉淀的固体过滤，用冷的正戊烷洗涤，干燥后得到黄色固体形式的5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(7)。产率：1.45g,61％；MS(ESI)m/z 366.2[M+1]+。
合成5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(8)
向5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(7,1.4g,3.81mmol)的二甲基甲酰胺(25mL)溶液中加入氢化钠(0.45g,19.09mmol)。将悬浮液在室温下搅拌30分钟，然后加入碘代甲烷(5.95g,38.18mmol)。将反应液再搅拌2小时。反应完成后，反应液用0℃的饱和氯化铵水溶液淬灭。将混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用水(2×50mL)和盐水(50mL)洗涤。有机层在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的5-50％乙酸乙酯洗脱，得到黄色固体形式的5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(8)。产率：0.5g,33％；MS(ESI)m/z 394.28[M+1]+。
合成(6-((4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(10)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体10。棕色固体；产率：0.2g,50％；MS(ESI)m/z252[M+1]+。
合成5-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号52)
向搅拌的(6-((4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-3,3-二甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(10,0.3g,0.57mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)和三氟甲磺酸(2mL)。将反应瓶密封并在70℃加热48小时。反应完成后，将反应液冷却至室温并浓缩。粗产物与二氯甲烷共蒸发，加入液氨以中和反应物质。固体沉淀过滤并通过制备型HPLC纯化，得到黄色固体形式的5-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-3,3-二甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号52)。产率：0.018g,10％；MS(ESI)m/z 304.09[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(s,1H),8.60(s,1H),8.01(s,1H),7.90-7.89(m,1H),7.52(m,1H),6.46(brs,2H),5.87(s,1H),1.58(s,6H)。
实施例53
合成6'-((6-氨基-5-乙基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号53)
合成N-(5-乙基-6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。浅黄色固体；产率：0.25g,38％；MS(ESI)m/z 540.5[M+1]+。
合成N-(5-乙基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。浅黄色固体；产率：0.16g,84％；MS(ESI)m/z 418.17[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-乙基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号53)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物53。浅黄色固体；产率：0.03g,25％；MS(ESI)m/z 352.28[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.10(s,1H),7.95(s,1H),7.58(s,1H),7.43(s,1H),6.26(s,2H),2.50(m,5H),1.80-1.62(m,6H),1.40-1.30(m,4H),1.01(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例54
合成6'-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号54)
合成4'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-6'-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.47g,粗产物；MS(ESI)m/z 479.4[M+1]+。
合成2'-(4-甲氧基苄基)-6'-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程F的一般方法如上所述合成中间体4。黄色固体；产率：0.42g,粗产物；MS(ESI)m/z 459.3[M+1]+。
合成6'-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号54)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物54。棕色固体；产率：0.13g,28％；MS(ESI)m/z 337.01[M-1]-；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.83(s,1H),8.35(s,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.70(s,1H),3.95(s,3H),2.55(s,3H),1.76-1.69(m,7H),1.40-1.34(m,3H)。
实施例55
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号55)
合成N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。浅黄色固体；产率：0.5g,79％；MS(ESI)m/z 526.62[M+1]+。
合成N-(5-甲基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。浅黄色固体；产率：0.15g,39％；MS(ESI)m/z 406.43[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号55)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物55。浅黄色固体；产率：0.03g,14％；MS(ESI)m/z 338.40[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72(s,1H),8.14(s,1H),7.98(s,1H),7.54(s,1H),7.39(s,1H),6.25(s,2H),5.83(s,1H),2.48(s,3H),1.96(s,3H),1.68(m,7H),1.36(m,3H)。
实施例56
合成6'-((5-乙基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号56)
合成4'-氯-6'-((5-乙基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.45g,粗产物；MS(ESI)m/z 477.12[M+1]+。
合成4'-氯-6'-((5-乙基嘧啶-4-基)氨基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。黄色固体；产率：0.35g,粗产物；MS(ESI)m/z 357.23[M+1]+。
合成6'-((5-乙基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号56)
采用过程F的一般方法如上所述合成化合物56。黄色固体；产率：0.050g,18％；MS(ESI)m/z 337.01[M-1]-；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(s,1H),8.61(s,1H),8.52(s,1H),8.20(s,1H),7.71(s,1H),7.55(s,1H),2.66(q,J＝7.6Hz,2H),1.82-1.69(m,7H),1.40-1.34(m,3H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例57
合成6'-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号57)
合成N-(5-甲氧基-6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.35g,粗产物；MS(ESI)m/z 542.46[M+1]+。
合成N-(5-甲氧基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：195mg,粗产物；MS(ESI)m/z422.46[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号57)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物57。灰白色固体；产率：50mg,31％；MS(ESI)m/z 354.21[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),8.56(s,1H),7.89(s,1H),7.76(s,1H),7.60(s,1H),6.44(s,2H),3.62(s,3H),2.55(s,1H),1.75-1.68(m,7H),1.34(m,3H)。
实施例58
合成6'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号58)
合成N-(5-氯-6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。浅黄色固体；产率：0.15g,23％；MS(ESI)m/z 546.41[M+1]+。
合成N-(5-氯-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。浅黄色固体；产率：0.09g,81％；MS(ESI)m/z 426.14[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号58):
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物58。白色固体；产率：25mg,32％；MS(ESI)m/z 358.13[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),8.55(s,1H),8.00(s,1H),7.63(s,1H),7.49(s,1H),6.87(brs,2H),2.53(s,3H),1.82-1.64(m,7H),1.42-1.30(m,3H)。
实施例59
合成6'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-氯螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号59)
合成N-(5-氯-6-((4'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.21g,粗产物；MS(ESI)m/z 566.4[M+1]+。
合成N-(5-氯-6-((4'-氯-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(4)
采用过程E的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：150mg,粗产物。
合成6'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-氯螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号59)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物59。MS(ESI)m/z310.34[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.85(s,1H),8.07(s,1H),7.90(s,1H),7.81(s,1H),7.02(brs,2H),1.83-1.63(m,7H),1.45-1.30(m,3H)。
实施例60
合成6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号60)
合成5-溴-3,3-二(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(1,3.0g,8.66mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中加入氢化钠(694mg,17.32mmol)。将反应液在40℃搅拌30分钟，然后加入(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(2,6.2g,25.92mmol)。将反应液在80℃搅拌16小时。反应完成后，反应液冷却至0℃，用饱和氯化铵水溶液淬灭。混合物用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用水(2×20mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱。所需馏分在真空下浓缩至干，得到灰白色固体形式的5-溴-3,3-二(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)。产率：2.8g,24％；MS(ESI)m/z 584.5[M+1]+。
合成5-溴-3,3-二(2-羟基乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(4)
0℃向5-溴-3,3-二(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3,2.8g,4.22mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入四正丁基氟化铵溶液(1M在四氢呋喃中，21.0mL,21.0mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应液用冰冷的水淬灭并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到白色固体形式的5-溴-3,3-二(2-羟基乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(4)。产率：1.7g,93％；MS(ESI)m/z 434.0[M+1]+。
合成(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代异吲哚啉-1,1-二基)二(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(5)
0℃向5-溴-3,3-二(2-羟基乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(4,1.7g,3.91mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中加入甲磺酰氯(0.7g,8.61mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应液用冰冷的水和二氯甲烷淬灭。将有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到白色固体形式的(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代异吲哚啉-1,1-二基)二(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(5)。产率：2.1g,91％；MS(ESI)m/z592.0[M+1]+。
合成6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(6)
室温下在密封管中加入6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代异吲哚啉-1,1-二基)二(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(5,1.0g,1.69mmol)和在甲醇(10mL)中的甲胺。将瓶密封并加热到80℃保持16小时。反应完成后，反应液冷却至室温并浓缩。然后将粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到白色固体形式的(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(6)。产率：2.1g,91％；MS(ESI)m/z 592.0[M+1]+。
合成2-(4-甲氧基苄基)-6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。黄色固体；产率：0.2g,90％；MS(ESI)m/z 354.2[M+1]+。
合成6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号60)
过程G：向2-(4-甲氧基苄基)-6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(8,0.2g,0.42mmol)的1,2-二氯乙烷(5mL)溶液中加入三氟乙酸(5mL)。将反应瓶密封并在微波中于100℃加热1.5小时。反应完成后，将反应液冷却至室温并浓缩。粗产物用氨水中和并浓缩。将粗产物用柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的5-6％甲醇洗脱。所需馏分浓缩后得到棕色固体形式的6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号60)。产率：100mg,67％；MS(ESI)m/z 354.1[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.87(s,1H),8.35(s,1H),8.13(s,1H),7.96(s,1H),7.69(s,1H),3.95(s,3H),2.78(m,2H),2.55(s,3H),2.30(s,3H),2.05-2.03(m,2H),1.42-1.39(m,2H)。
实施例61
合成4-((1',4-二甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-5-腈三氟乙酸盐(化合物编号61)
合成4-((2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-5-腈(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.14g,66％；MS(ESI)m/z 469.45[M+1]+。
合成4-((1',4-二甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-5-腈三氟乙酸盐(化合物编号61)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物61。棕色固体；产率：4mg,38％；MS(ESI)m/z 349.1[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(s,1H),9.68(s,1H),9.19(s,1H),8.89(s,1H),8.79(s,1H),7.57(s,1H),7.51(s,1H),3.48-3.61(m,2H),3.20(m,2H),2.82(s,3H),2.58(s,3H),2.36-2.22(m,2H),1.71-1.62(m,2H)。
实施例62
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号62)
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.60g,粗产物；MS(ESI)m/z 541.2[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：0.31g,粗产物；MS(ESI)m/z473.29[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号62)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物62。棕色固体；产率：75mg,33％；MS(ESI)m/z 353.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(s,1H),8.19(s,1H),7.99(s,1H),7.64(s,1H),7.37(s,1H),6.28(s,2H),2.75-2.65(m,2H),2.52(s,3H),2.4(m,2H),2.25(s,3H),2.01(m,2H),1.97(s,3H),1.41-1.35(m,2H)。
实施例63
合成4-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号63)
合成4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.45g,41％；MS(ESI)m/z 454.24[M+1]+。
合成4-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号63)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物63。浅黄色固体；产率：30mg,21％；MS(ESI)m/z 332.07[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),9.10(s,1H),8.92(s,1H),8.78(s,1H),7.55(s,1H),7.42(s,1H),2.56(s,3H),1.83-1.68(m,7H),1.39-1.33(m,3H)。
实施例64
合成4-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-羧酰胺(化合物编号64)
合成4-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-羧酰胺(化合物编号64)
氮气下在反应瓶中加入三氟乙酸(5mL)中的4-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(1,0.1g,0.22mmol)。将反应瓶密封并在微波下100℃辐射1小时。反应完成后，反应混合物冷却至室温并浓缩。粗产物用饱和碳酸氢钠水溶液中和并再次浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的5-6％甲醇洗脱。所需馏分浓缩后得到浅黄色固体形式的4-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-羧酰胺(化合物编号64)。产率：30mg,38％；MS(ESI)m/z352.19[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),8.97(s,1H),8.85(s,1H),8.78(s,1H),7.58(s,1H),7.42(s,1H),2.66(s,3H),1.78-1.68(m,7H),1.39-1.36(m,3H)。
实施例65
合成1'-(2,2-二氟乙基)-6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号65)
合成6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(2)
室温下，在密封管中加入(6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代异吲哚啉-1,1-二基)二(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(1,1.0g,1.69mmol)和甲醇(10mL)中的氨。将反应瓶密封并加热至80℃ 16小时。反应完成后，将反应液冷却至室温并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的10％甲醇洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到白色固体形式的6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(2)。产率：0.5g,68％；MS(ESI)m/z 416[M+1]+。
合成6-溴-1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)
室温下，在密封管中加入在二甲基甲酰胺中的6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(2,0.50g,1.2mmol)、碳酸钾(0.50g,3.6mmol)和1,1-二氟-2-碘乙烷(3,0.69g,3.6mmol)。将反应瓶密封并加热至100℃ 16小时。反应完成后，反应液用冰冷的水淬灭并用乙酸乙酯(100mL)萃取。将有机层用水(2×20mL)和盐水(10mL)洗涤。然后在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。所需馏分浓缩后得到白色固体形式的6-溴-1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)。产率：0.4g,粗产物；MS(ESI)m/z481.0[M+1]+。
合成1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。黄色固体；产率：0.2g,粗产物；MS(ESI)m/z 524.2[M+1]+。
合成1'-(2,2-二氟乙基)-6-((5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号65)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物65。灰白色固体；产率：50mg,33％；MS(ESI)m/z 404.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00(s,1H),8.92(s,1H),8.37(s,1H),8.14(brs,1H),7.99(s,1H),7.69(s,1H),6.34-6.04(tt,J＝55.6,4.16Hz,1H),3.96(s,1H),2.95-2.76(m,4H),2.7-2.64(m,2H),2.56(s,3H),2.01(m,2H),1.43-1.36(m,2H)。
实施例66
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号66)
合成N-(6-((1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.3g,粗产物；MS(ESI)m/z591.2[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：0.21g,粗产物；MS(ESI)m/z 523.3[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号66)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物66。灰白色固体；产率：50mg,33％；MS(ESI)m/z 403.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(s,1H),8.15(s,1H),8.01(s,1H),7.68(s,1H),7.37(s,1H),6.26(s,2H),6.33-6.02(tt,J＝55.72,4.16Hz,1H),2.19-2.79(m,4H),2.68-2.60(m,3H),2.53(s,3H),2.01(m,2H),1.97(s,3H),1.40-1.32(m,2H)。
实施例67
合成4-((1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号67)
合成6-溴-1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(2)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体2。棕色固体；产率：0.2g,89％；MS(ESI)m/z359.0[M+1]+。
合成4-((1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号67)
采用过程A的一般方法如上所述合成化合物67。黄色固体；产率：0.08g,36％；MS(ESI)m/z 399.1[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.03(s,1H),9.05(s,1H),8.85(s,1H),8.80(s,1H),7.68(s,1H),7.41(s,1H),6.32-6.02(m,1H),2.89-2.86(m,2H),2.85-2.84(m,2H),2.67-2.64(m,2H),2.57(s,3H),2.07-2.02(m,2H),1.39-1.36(m,2H)。
实施例68
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号68)
合成N-(5-甲氧基-6-((2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。棕色固体；产率：0.60g,粗产物；MS(ESI)m/z 557.2[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。黄色固体；产率：0.31g,粗产物；MS(ESI)m/z 489.1[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1',4-二甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号68)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物68。黄色固体；产率：75mg,50％；MS(ESI)m/z 369.1[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(s,1H),8.61(s,1H),7.90(s,1H),7.88(s,1H),7.56(s,1H),6.45(s,2H),3.63(s,3H),2.8-2.69(m,2H),2.52(s,3H),2.49-2.35(m,2H),2.27(s,3H),2.05-1.95(m,2H),1.42-1.35(m,2H)。
实施例69
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号69)
合成N-(6-((1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-6-基)氨基)-5-甲氧基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.4g,粗产物；MS(ESI)m/z 607.3[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：0.3g,84％；MS(ESI)m/z 539.3[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-1'-(2,2-二氟乙基)-4-甲基螺[异吲哚啉-1,4'-哌啶]-3-酮(化合物编号69)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物69。灰白色固体；产率：50mg,33％；MS(ESI)m/z 418.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),8.57(s,1H),7.92(s,1H),7.90(s,1H),7.56(s,1H),6.45(s,2H),6.31-6.04(tt,J＝55.6,5.2Hz,1H),3.63(s,3H),2.89-2.79(m,4H),2.66-2.60(m,2H),2.52(s,3H),1.99-1.90(m,2H),1.39-1.36(m,2H)。
实施例70
合成2'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号70)
合成N-(6-((4'-甲基-5'-氧代-5',6'-二氢螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.3g,76％；MS(ESI)m/z 392.2[M+1]+。
合成2'-((6-氨基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号70)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物70。粉色固体；产率：0.24g,97％,MS(ESI)m/z 345.2[M+1]+；1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.88(s,1H),8.10(s,1H),7.28(s,1H),6.99(s,2H),6.63(S,2H),2.50(s,3H),2.02-1.96(m,2H),1.70-1.62(m,5H),1.44-1.42(m,1H),1.34-1.31(m,2H)。
实施例71
合成2'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号71)
合成2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(3)
向搅拌的2,4-二甲基烟酸乙酯(1,10g,0.055mol)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入1,3,5-三氯-1,3,5-三嗪烷-2,4,6-三酮(2,19.35g,0.083mol)。将反应液在室温下搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物浓缩并用饱和碳酸钠水溶液淬灭直至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×150mL)萃取。将有机物合并，硫酸镁上干燥，过滤并浓缩，得到黄色油状2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(2)。产率：10.0g,84％；MS(ESI)m/z 214.2[M+1]+。
合成2-(氯甲基)-4-甲基-1-(l1-氧基(oxidanyl))-1l4-吡啶-3-羧酸乙酯(4)
0℃，向2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(3,15g,0.070mol)的二氯甲烷(250mL)溶液中分批加入3-氯过苯甲酸(30.28g,0.18mol)。加入完成后，将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应物质用饱和碳酸钠水溶液淬灭，用二氯甲烷(2×150mL)萃取。将合并的有机物用盐水(100mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，减压浓缩后得到棕色液体形式的2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯n-氧化物(4)。产率：15g,85％；MS(ESI)m/z 230.1[M+1]+。
合成6-氯-2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(5)
0℃，在烧瓶中加入2-(氯甲基)-4-甲基-1-(l1-氧基(oxidanyl))-1l4-吡啶-3-羧酸乙酯(4,15g,0.065mol)，滴加磷酰氯(60mL)。加入完成后，将反应液在90℃加热16小时。反应完成后，将反应混合物浓缩，用水(200mL)稀释，用二氯甲烷(2×150mL)萃取。将合并的有机提取物用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)洗涤，在硫酸钠上干燥，减压浓缩后得到粗产物。粗产物通过快速色谱进行纯化，用二氯甲烷中的0-5％甲醇洗脱，得到黄色液体形式的6-氯-2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(5)。产率：6g,38％；MS(ESI)m/z 248.2[M+1]+。
合成2-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(6)
在含有乙腈(50mL)的烧瓶中加入6-氯-2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙酯(5,5.0g,20.15mmol)、4-甲氧基苄基胺(4.15g,30.25mmol)和二异丙基乙胺(7.86g,60.46mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，减压蒸发溶剂，粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的2.5％甲醇洗脱，得到黄色固体形式的2-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(6)。产率：6.1g,65％；MS(ESI)m/z 302.2[M+1]+。
合成2'-氯-6'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(7)
向2-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-5-酮(6,1.0g,3mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中缓慢加入氢化钠(240mg,6mmol,60％)和1,5-二碘戊烷(1.18g,3.4mmol)。将反应液在室温下搅拌3小时。反应完成后，将反应液用0℃的饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用水(2×20mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到黄色固体形式的2'-氯-6'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(7)。产率：0.4g,33％；MS(ESI)m/z 370.2[M-1]-。
合成2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(8)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体8。黄色固体；产率：40mg,30％；MS(ESI)m/z 250.7[M+1]+。
合成N-(5-甲基-6-((4'-甲基-5'-氧代-5',6'-二氢螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(10)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体10。黄色固体。产率：0.3g,粗产物；MS(ESI)m/z 407.2[M+1]+。
合成2'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号71)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物71。粉色固体；产率：0.05g,24％；MS(ESI)m/z 339.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(brs,1H),8.98(s,1H),8.17(s,1H),7.46(s,1H),6.80(brs,2H),2.49(s,3H),1.98(s,3H),1.94-1.91(m,2H),1.70-1.64(m,5H),1.44-1.42(m,1H),1.36-1.33(m,2H)。
实施例72
合成2'-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号72)
合成N-(5-甲氧基-6-((4'-甲基-5'-氧代-5',6'-二氢螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.3g,75％；MS(ESI)m/z 423.2[M+1]+。
合成2'-((6-氨基-5-甲氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号72)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物72。粉色固体；产率：0.24g,97％；MS(ESI)m/z 355.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(s,1H),8.30(s,1H),8.08(s,1H),7.97(s,2H),6.67(s,1H),3.73(s,3H),2.55(s,3H),1.93-1.92(m,2H),1.72-1.60(m,5H),1.37-1.30(m,2H)。
实施例73
合成2'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号73)
合成N-(5-氯-6-((4'-甲基-5'-氧代-5',6'-二氢螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。黄色固体；产率：0.2g,47％；MS(ESI)m/z 425.8[M+1]+。
合成2'-((6-氨基-5-氯嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-吡咯并[3,4-b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号73)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物73。灰白色固体；产率：0.24g,97％；MS(ESI)m/z 359.12[M+1]+；1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ8.98(s,1H),8.40(s,1H),8.13(s,1H),7.95(s,1H),7.10(brs,2H),2.56(s,3H),1.94-1.91(m,2H),1.72-1.66(m,5H),1.37-1.30(m,3H)。
实施例74
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-3-酮(化合物编号74)
合成6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-3-酮(3)
向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(1,1.0g,2.89mmol)的二甲基甲酰胺(25mL)溶液中加入氢化钠(0.35g,8.66mmol)。将反应液搅拌15分钟。加入1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(2,0.871mg,3.75mmol)并将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应液用0℃的饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用水(2×20mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层分离，硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到灰白色固体形式的6-溴-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-3-酮(3)。产率：0.65g,54％；MS(ESI)m/z 418.0[M+1]+。
合成N-(6-((2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-3-氧代-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-6-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。黄色固体；产率：0.51g；粗产物；MS(ESI)m/z 528.0[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-3-酮(6)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体6。黄色固体；产率：0.30g,70％；MS(ESI)m/z458.2[M+1]+。
合成6-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4-甲基-2',3',5',6'-四氢螺[异吲哚啉-1,4'-吡喃]-3-酮(化合物编号74)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物74。棕色固体；产率：43mg,19％；MS(ESI)m/z 344.04[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),9.12(s,1H),8.26(s,1H),7.52(s,1H),7.45(brs,2H),7.29(s,1H),3.90-3.80(m,2H),3.80-3.70(m,2H),2.57(s,3H),2.15-2.07(m,2H),2.04(s,3H),1.37-1.29(m,2H)。
实施例75
合成6'-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号75)
合成4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(2)
将4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1,0.5g,3.26mmol)、三乙胺(0.99g,9.80mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.71g,3.26mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.08g,0.65mmol)在二噁烷(15mL)中的混合物在室温下搅拌16小时。TLC显示反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的30-40％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到灰白色固体形式的4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(2)。产率：0.6g,73％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),7.96-7.95(d,J＝4.0Hz,1H),6.83-6.82(d,J＝4.0Hz,1H),1.62(s,9H)。
合成6'-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号75)
向4-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(2,0.09g,0.36mmol)和6'-氨基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3,0.095g,0.36mmol)的1,4-二噁烷(12mL)溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(7mg,0.035mmol)，将所得混合物在120℃搅拌2天。反应完成后，将反应混合物浓缩至干，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭直至pH 8，用二氯甲烷中的10％甲醇(2×10mL)萃取。将合并的有机层在硫酸镁上干燥并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的0-5％甲醇洗脱，得到灰白色固体形式的6'-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号75)。产率：0.07g,73％；MS(ESI)m/z 348.19[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),9.46(s,1H),8.81(s,1H),8.34(s,1H),7.92(s,1H),7.73(s,1H),7.27(s,1H),6.82(s,1H),2.58(s,3H),1.86-1.74(m,2H),1.73-1.65(m,5H),1.46-1.32(m,3H)。
实施例76
合成6'-((6-氨基-5-乙氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号76)
合成6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-胺(2)
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-醇(1,0.5g,3.43mmol)和碘代乙烷(0.80g,5.15mmol)的丙酮(20mL)溶液中加入碳酸铯(3.35g,10.2mmol)。将反应液在50℃加热16小时。TLC显示完成之后，减压除去溶剂，得到粗产物，将粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到灰白色固体形式的6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-胺(2)。产率：0.25g,42％；MS(ESI)m/z 173.88[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.95(s,1H),7.20(brs,2H),3.96-3.90(q,J＝6.8Hz,2H),1.34-1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。
合成N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
向6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-胺(2,0.25g,1.44mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(0.78g,3.60mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.087g,0.72mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，将反应物质用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到浅黄色固体形式的N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯-5-乙氧基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3)。产率：0.20g,37％；MS(ESI)m/z 374.23[M+1]+。
合成N-叔丁氧基羰基-N-(5-乙氧基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。黄色固体；产率：0.080g,17％；MS(ESI)m/z 568.39[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-乙氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号76)
0℃，向N-叔丁氧基羰基-N-(5-乙氧基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5,80mg,0.14mmol)的二氯甲烷(10mL)和甲醇(2mL)溶液中加入二噁烷(5mL)中的4M氯化氢。将反应液搅拌16小时。反应完成后，减压除去溶剂，所得残留物用乙醚和戊烷洗涤，得到灰白色固体形式的6’-((6-氨基-5-乙氧基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号76)。产率：0.025g,48％；MS(ESI)m/z 368.17[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(s,1H),8.92(s,1H),8.17(s,1H),7.60(brs,2H),7.53(s,1H),7.36(s,1H),3.91-3.86(q,J＝7.6Hz,2H),2.55(s,3H),1.79(m,2H),1.67(m,5H),1.39-13.2(m,6H)。
实施例77
合成4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号77)
合成(4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。灰白色固体；产率：2.0g,89％；MS(ESI)m/z 331.18[M+1]+。
合成6'-氨基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体4。棕色固体；产率：1.5g,94％；MS(ESI)m/z 231.0[M+1]+。
合成4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号77)
在反应瓶中加入6'-氨基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(4,150mg,0.57mmol)、(6-氯-5-氰基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5,140mg,0.57mmol)和2-丙醇(8mL)。在上述搅拌的混合物中加入二异丙基乙胺(0.2mL,1.13mmol)，将反应混合物在100℃加热24小时。TLC显示更多原料，再次将反应液在120℃加热48小时。除去溶剂。残留物用水稀释，用在二氯甲烷中的10％甲醇萃取。粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用在二氯甲烷中的4.5％甲醇洗脱。减压浓缩合适的馏分，得到灰白色固体形式的4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-腈(化合物编号77)。产率：0.05g,19％；MS(ESI)m/z 349.20[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.34(s,1H),8.87(s,1H),8.15(s,1H),7.54(s,1H),7.45-7.56(brs,2H),7.39(s,1H),2.54(s,3H),1.80-1.62(m,7H),1.41-1.30(s,3H)。
实施例78
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号78)
合成4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸乙酯(2)
向4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸(1,5.0g,20.5mmol)的乙腈(100mL)溶液中加入碳酸钾(7.8g,56.5mmol)然后是乙基碘化物(3.2g,20.5mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应液用冰水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到白色固体形式的4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸乙酯(2)。产率：3.3g,60％。
合成4-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基苯甲酸乙酯(3)
向4-溴-2-甲氧基-6-甲基苯甲酸乙酯(2,2.5g,9.19mmol)的四氯化碳(50mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(1.96g,11.9mmol)和过氧化苯甲酰(220mg,0.92mmol)。将反应液在90℃搅拌12小时，然后冷却至室温。混合物用二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩后得到浅棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基苯甲酸乙酯(3)。产率：2.8g,粗产物。
合成5-溴-7-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4)
向4-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基苯甲酸乙酯(3,2.5g,7.14mmol)的甲苯(30mL)溶液中加入4-甲氧基苄基胺(1.4g,10.7mmol)然后是碳酸钾(3.05g,22.1mmol)。然后将混合物在120℃加热2小时。反应完成后，蒸发溶剂，粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。合适的柱馏分减压浓缩，得到黄色粘稠固体形式的5-溴-7-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4)。产率：2.0g,78％；MS(ESI)m/z 362.13[M+1]+。
合成6'-溴-4'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
向5-溴-7-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4,1.3g,3.6mmol)的二甲基甲酰胺(18mL)溶液中加入氢化钠(0.55g,14.4mmol)。将悬浮液在室温下搅拌30分钟，然后加入1,5-二溴戊烷(1.65g,7.2mmol)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液。将反应液在室温下再搅拌12小时，用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到黄色固体形式的6'-溴-4'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)。产率：1.15g,73％；MS(ESI)m/z 430.03[M-1]-。
合成N-(6-((4'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。棕色固体；产率：370mg,28％；MS(ESI)m/z 542.19[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体8。棕色固体；产率：250mg；MS(ESI)m/z474.38[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号78)
在反应瓶中加入6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8,150mg,0.32mmol)和二噁烷(5mL)中的4M氯化氢。然后将反应液在60℃加热16小时。将混合物浓缩，用氨水碱化，用二氯甲烷中的10％2-丙醇萃取。将有机层浓缩，通过制备型HPLC纯化，得到黄色固体形式的6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号78)。产率：29mg,26％；MS(ESI)m/z 354.21[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19(s,1H),8.72(s,1H),8.27(s,1H),7.62(s,2H),7.21(s,1H),7.10(s,1H),3.80(s,3H),2.05(s,3H)1.76-1.73(m,2H),1.68-1.64(m,5H),1.37-1.29(m,3H)。
实施例79
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号79)
合成4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苄腈(2)
将氰化铜(I)(11.1g,123.9mmol)和亚硝酸叔丁酯(42.58g,413mmol)在二甲亚砜(200mL)中的混合物在60℃搅拌30分钟。30分钟的时间内向上述混合物中逐滴加入4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯胺(1,21g,82.6mmol)的二甲亚砜(100mL)溶液。将反应液在60℃搅拌30分钟。反应完成后，反应液用6M盐酸猝灭，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱。将合适的柱馏分减压浓缩，得到灰白色固体形式的4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苄腈(2)。产率：12g,55％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.76(s,1H),7.72(s,1H),2.62(s,3H)。
合成4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酰胺(3)
将4-溴-3-氯-2-甲基苄腈(2,12g,45.4mmol)在5M氢氧化钠水溶液(46mL)中的混合物于120℃搅拌48小时。将反应液冷却至室温。将沉淀过滤，用水和戊烷洗涤，真空干燥后得到浅棕色固体形式的4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酰胺(3)。产率：12.05g,94％；MS(ESI)m/z 279.91[M-1]-。
合成4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸(4)
0℃，向4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酰胺(3,2.5g,10.0mmol)在50％硫酸(50mL)中的混合物中加入亚硝酸钠水溶液(11.74g,170.18mmol)。将反应液在130℃搅拌16小时。反应完成后，反应混合物冷却并加入冰冷的水。将沉淀的白色固体过滤，用水和正戊烷洗涤。将化合物真空干燥，得到灰白色固体形式的4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸(4)。产率：8.0g,66％；MS(ESI)m/z 280.82[M-1]-。
合成4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(5)
向4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸(4,8.0g,28.2mmol)和碳酸钾(7.8g,56.5mmol)在二甲基甲酰胺(500mL)中的混合物中缓慢加入碘代甲烷(6.0g,42.3mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。将反应液用冰水淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到稠厚的棕色液体形式的4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(5)。产率：8.5g,粗产物；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.65(s,1H),7.58(s,1H),3.92(s,2H),2.34(s,3H)。
合成4-溴-2-(溴甲基)-6-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(6)
向4-溴-2-甲基-6-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(5,8.5g,28.6mmol)的四氯化碳(200mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(6.11g,34.3mmol)和过氧化苯甲酰(692mg,2.86mmol)。然后将反应液在90℃加热16小时。反应完成后，反应液冷却至室温，用二氯甲烷稀释。有机层用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到浅棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-6-(三氟甲基)苯甲酸酯(6)。产率：10.5g,粗产物。
合成5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-(三氟甲基)异吲哚啉-1-酮(7)
向4-溴-2-(溴甲基)-6-(三氟甲基)苯甲酸酯(6,5.0g,13.2mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中加入4-甲氧基苄基胺(2.18g,15.9mmol)然后是二异丙基乙胺(4.32g,33.1mmol)。将混合物在室温搅拌16小时。反应完成后，蒸发溶剂，粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。将合适的柱馏分减压浓缩，得到灰白色固体形式的5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-(三氟甲基)异吲哚啉-1-酮(7)。产率：2.5g,47％；MS(ESI)m/z 401.11[M+1]+。
合成6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)
向5-溴-2-(4-甲氧基苄基)-7-(三氟甲基)异吲哚啉-1-酮(7,2.0g,3.81mmol)的二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入氢化钠(0.36g,15.0mmol)。将悬浮液在室温下搅拌30分钟，然后加入二溴戊烷(2.3g,10mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液。将反应液在室温下再搅拌3小时。反应完成后，反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱，得到黄色固体形式的6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)。产率：0.65g,28％；MS(ESI)m/z 467.16[M-1]-。
合成N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(10)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体10。黄色固体；产率：450mg,粗产物。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(11)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体11。黄色固体；产率：300mg,粗产物；MS(ESI)m/z 498.16[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号79)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物79。白色固体；产率：5mg,3％；MS(ESI)m/z 378.15[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(s,1H),8.59(s,1H),8.08(s,2H),8.03(s,1H),6.39(s,2H),1.99(s,3H),1.90(s,1H)1.80-1.77(m,2H),1.72-1.68(m,5H),1.42-1.35(m,2H)。
实施例80
合成6'-((6-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号80)
合成6'-((6-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号80)
向6-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(1,0.10g,0.50mmol)和6'-氨基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(2,0.13g,0.50mmol)的1,4-二噁烷(3.5mL)溶液中加入对甲苯磺酸一水合物(20mg,0.10mmol)，将所得混合物在100℃搅拌30小时。反应完成后，将反应液浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭直至pH 8，用二氯甲烷中的10％甲醇(2×10mL)萃取。然后将有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，用二氯甲烷中的0-5％甲醇洗脱，得到白色固体形式的6'-((6-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号80)。产率：0.05g,26％；MS(ESI)m/z392.15[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),8.41(s,1H),8.06(s,1H),7.43(s,1H),7.26(s,1H),6.9-7.1(brs,2H),2.53(s,3H),1.82-1.75(m,2H),1.72-1.60(m,5H),1.37-1.34(m,3H)。
实施例81
合成6'-((6-氨基-5-(2-氨基乙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号81)
合成(2-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3)
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-醇(1,1.0g,6.87mmol)和(2-溴乙基)氨基甲酸叔丁酯(2,1.85g,8.24mmol)的二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入碳酸铯(4.48g,13.7mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，蒸发溶剂，粗产物通过柱色谱进行纯化，用己烷中的30-35％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到无色粘稠固体形式的(2-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3)。产率：210mg,11％；MS(ESI)m/z 289.09[M+1]+。
合成N-叔丁氧基羰基-N-(2-((4-((二叔丁氧基羰基)氨基)-6-氯嘧啶-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(4)
将(2-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(3,0.21g,0.73mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.40g,0.18mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.044g,0.36mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液在室温下搅拌24小时。TLC显示完成后，将反应液用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将有机物用水和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到无色油状N-叔丁氧基羰基-N-(2-((4-((二-叔丁氧基羰基)氨基)-6-氯嘧啶-5-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(4)。产率：0.49g,59％；MS(ESI)m/z 487.24[M-1]-。
合成(2-((4-((二叔丁氧基羰基)氨基)-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-基)氧基)乙基)(叔丁氧基羰基)氨基甲酸叔丁酯(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。灰白色固体；产率：0.20g,28％；MS(ESI)m/z 783.48[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-(2-氨基乙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号81)
向叔丁氧基羰基-(5-(2-((二叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)-6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6,200mg,0.22mmol)的乙醇(3mL)溶液中加入浓盐酸(8mL)。将反应液在100℃加热18小时。反应完成后，反应液用二氯甲烷中的10％甲醇洗涤。将水层浓缩。得到的固体用甲醇(1mL)然后是乙醚洗涤，真空干燥后得到白色结晶固体形式的6'-((6-氨基-5-(2-氨基乙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号81)。产率：41mg,48％；MS(ESI)m/z 383.19[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(s,1H),8.92(s,1H),8.26(brs,3H),8.14(s,1H),7.61(s,1H),7.52(s,1H),7.40(s,1H),3.99-3.97(m,2H),3.30-3.29(m,2H),2.56(s,3H),1.78-1.75(m,2H),1.68(m,5H),1.39-1.36(m,2H),1.31-1.29(m,1H)。
实施例82
合成6'-((6-氨基-5-(二氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号82)
合成4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-醛(3)
室温下，向4-氨基-6-氯嘧啶-5-醛(1,0.16g,1mmol)和6'-氨基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(2,0.23g,1mmol)的2-丙醇溶液中加入二异丙基乙胺(0.52mL,3mmol)。将反应液在100℃搅拌48小时。反应完成后，减压蒸发溶剂。粗产物通过制备型HPLC纯化，得到4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-醛(3)。
合成6'-((6-氨基-5-(二氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号82)
0℃，向4-氨基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-5-醛(3,0.35g,1mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中缓慢加入(二乙基氨基)三氟化硫(1.32mL,10mmol)。将反应液在40℃搅拌16小时。反应完成后，将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，用二氯甲烷中的5％甲醇萃取。将合并的有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到6'-((6-氨基-5-(二氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号82)。
实施例83
合成6'-((6-氨基-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号83)
合成叔丁氧基羰基-(5-甲氧基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。灰白色固体；产率：1.4g,58％；MS(ESI)m/z 554.57[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-羟基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
0℃，向叔丁氧基羰基-(5-甲氧基-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(3,1.0g,1.81mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入三溴化硼(1.36g,5.42mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，将反应液冷却至-40℃，用甲醇(2mL)淬灭。用氢氧化铵将反应液的pH调节至7。所得混合物用二氯甲烷中的10％甲醇萃取，得到浅棕色固体形式的6'-((6-氨基-5-羟基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)。产率：0.20g,20％；MS(ESI)m/z 340.12[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号83)
向6'-((6-氨基-5-羟基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4,200mg,0.589mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入1-(三氟甲基)-1l3-苯并[d][1,2]碘杂氧杂环戊烷-3(1H)-酮(223mg,0.71mmol)和碳酸铯(480mg,1.47mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应物质用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用饱和氯化铵水溶液和盐水溶液洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的50-70％乙酸乙酯洗涤。将合适的柱馏分减压浓缩后得到黄色固体，通过制备型HPLC进一步纯化后得到白色固体形式的6'-((6-氨基-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号83)。产率：7.5mg,3％；MS(ESI)m/z 408.21[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.01(s,1H),8.81(s,1H),7.97(s,1H),7.62(s,1H),7.46(s,1H),6.96(s,2H),2.49(s,3H),1.80-1.67(m,7H),1.39-1.33(s,3H)。
实施例84
合成6'-((6-氨基-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号84)
合成6-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-胺(3)
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-醇(1,1.0g,6.87mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(2,2.09g,10.3mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液中加入碳酸铯(4.48g,13.7mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，反应液用冰水淬灭，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用饱和氯化铵水溶液，水和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到棕色粘稠物质的6-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-胺(3)。产率：1.2g,粗产物。
合成叔丁基-N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(4)
向6-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-胺(3,1.2g粗产物,6.15mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(3.35g,15.3mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.075g,0.615mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，将混合物用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。有机层用水和盐水洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的30-40％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到浅黄色粘稠液体形式的叔丁基-N-叔丁氧基羰基-N-(6-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(4)。产率：0.52g,21％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),6.70-6.34(t,J＝72Hz,1H),1.42(s,18H)。
合成叔丁基-N-叔丁氧基羰基-(5-(二氟甲氧基)-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。灰白色固体；产率：78g,26％。MS(ESI)m/z 590.43[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号84)
向叔丁基-N-叔丁氧基羰基-(5-(二氟甲氧基)-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(6,75mg,0.13mmol)的甲醇(3mL)和二氯甲烷(9mL)溶液中加入在二噁烷(3mL)中的4M氯化氢。将反应液在室温下搅拌18小时。反应完成后，蒸馏掉溶剂。所得固体用甲醇(2mL)然后是乙醚和戊烷洗涤。固体真空干燥后得到白色固体形式的6'-((6-氨基-5-(二氟甲氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号84)。产率：32mg,65％；MS(ESI)m/z 390.17[M+1]+；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(s,1H),8.89(s,1H),8.16(s,1H),7.56(s,1H),7.46(s,1H),7.38(s,1H),7.13-6.76(t,J＝72Hz,1H),2.55(s,3H),1.77-1.74(m,2H),1.68-1.64(m,5H),1.39-1.36(m,2H)。
实施例85
合成6'-((6-氨基-5-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮三氟乙酸盐(化合物编号85)
合成4-氨基-3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑-5-羧酰胺(3)
在1-(异硫氰酸基甲基)-4-甲氧基苯(1,6.0g,33mmol)的二甲亚砜(30mL)溶液中加入硫(1.07g,33mmol)、三乙胺(3.39g,33mmol)和2-氰基乙酰胺(2,3.81g,33mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC监测完成后，将混合物用水(100mL)稀释。将黄色固体沉淀物过滤，用甲醇(20mL)和乙醚(50mL)洗涤，减压干燥后得到黄色固体形式的4-氨基-3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑-5-羧酰胺(3)。产率：6.0g,60％；MS(ESI)m/z 296.29[M+1]+。
合成3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑并[4,5-d]嘧啶-7(6H)-酮(4)
室温下，向原甲酸三乙酯和乙酸酐(1:1)(30mL)的混合物中加入4-氨基-3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑-5-羧酰胺(3,5.0g,16.9mmol)。将反应液在130℃搅拌5小时。反应完成后，将混合物冷却。将固体过滤，用乙醇(30mL)和乙醚(30mL)洗涤，减压干燥后得到灰白色固体形式的3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑并[4,5-d]嘧啶-7(6H)-酮(4)。产率：4.5g,86％；MS(ESI)m/z 305.94[M+1]+。
合成6-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(5)
将3-(4-甲氧基苄基)-2-硫代-2,3-二氢噻唑并[4,5-d]嘧啶-7(6H)-酮(4,4.0g,13.1mmol)在4M氢氧化钠(25mL)中的混合物在110℃搅拌4小时。完成后，混合物冷却至0℃，缓慢加入碘代甲烷(2.7g,19.1mmol)的1,4-二噁烷(4mL)溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后，将混合物再次冷却至0℃，用浓HCl(3mL)将pH调节至4。所得混合物搅拌10分钟。将沉淀的固体过滤，用冰冷的水(30mL)、乙醚(20mL)和戊烷(20mL)洗涤。最终减压干燥后得到灰白色固体形式的6-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(5)。产率：3.2g,88％；MS(ESI)m/z 278.01[M+1]+。
合成6-氯-N-(4-甲氧基苄基)-5-(甲硫基)嘧啶-4-胺(6)
0℃，在密封管中，向6-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-(甲硫基)嘧啶-4(3H)-酮(5,1.0g,3.6mmol)中加入磷酰氯(10mL)。将反应液在110℃加热2小时。反应完成后，减压除去磷酰氯。残留物用乙酸乙酯(10mL)稀释，用冷水(10mL)洗涤。水层用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。残留物采用3％甲醇/二氯甲烷作为洗脱液，在硅胶(100-200目)上通过柱色谱进行纯化。收集合适的馏分，减压浓缩后得到灰白色固体形式的6-氯-N-(4-甲氧基苄基)-5-(甲硫基)嘧啶-4-胺(6)。产率：0.61g,57％；MS(ESI)m/z 296.20[M+1]+。
合成6'-((6-((4-甲氧基苄基)氨基)-5-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。灰白色固体；产率：0.29g,29％；MS(ESI)m/z 490[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮三氟乙酸盐(化合物编号85)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物85。灰白色固体；产率：0.17g,80％；MS(ESI)m/z 370.19[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19(b,1H),8.91(s,1H),8.18(s,1H),7.61(s,1H),7.49(brs,2H),7.43(s,1H),2.56(s,3H),2.22(s,3H),1.84-1.80(m,2H),1.77-1.68(s,5H),1.39-1.32(s,3H)。
实施例86
合成6'-((6-氨基-5-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号86)
合成N-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)
0℃，向N-(6-氨基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,5.0g,28mmol)的二噁烷(40mL)溶液中分批加入N-碘琥珀酰亚胺(7.58g,33mmol)然后是三氟甲磺酸(4.2g,28mmol)。将反应混合物在室温下搅拌26小时。TLC监测反应完成后，减压除去溶剂。残留物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。合并的有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物采用2％甲醇/二氯甲烷作为洗脱液，通过硅胶柱色谱进行纯化。收集合适的馏分，减压浓缩后得到灰白色固体形式的N-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)。产率：3.7g,43％；MS(ESI)m/z 304.91[M+1]+。
合成N-(6-氨基-5-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
将N-(6-氨基-5-碘嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2,2.0g,6.5mmol)、甲烷亚磺酸钠(1.6g,16mmol),、N,N’-二甲基乙二胺(N,N’-dimethylehelene diamine)和三氟甲磺酸铜(II)(0.23g,0.65mmol)在二甲亚砜中的混合物在115℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用乙酸乙酯(50mL)稀释，过滤通过硅藻土滤床。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。残留物采用10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱液，通过硅胶柱色谱纯化，得到灰白色固体形式的N-(6-氨基-5-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)。产率：0.77g,粗产物。
合成N-(6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。灰白色固体；产率：1.18g.
合成6'-((6-氨基-5-(甲基磺酰基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号86)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物86。灰白色固体；产率：0.11g,11％；MS(ESI)m/z 402.2[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),8.92(s,1H),8.17(s,1H),7.61(s,1H),7.46(brs,1H),3.46(s,3H),2.55(s,3H),1.87-1.83(m,2H),1.65-1.58(m,5H),1.34-1.19(s,3H)。
实施例87
合成6'-((6-氨基-5-(3-氨基丙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号87)
合成(3-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(3)
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-醇(1,500mg,3.44mmol)和(3-溴丙基)氨基甲酸叔丁酯(2,1.23g,5.17mmol)的丙酮(50mL)溶液中加入碳酸铯(2.25g,6.89mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，蒸发溶剂。粗产物通过柱色谱进行纯化，用己烷中的30-35％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到灰白色固体形式的(3-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(3)。产率：300mg,29％；MS(ESI)m/z 303.35[M+1]+。
合成(叔丁氧基羰基)(5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙氧基)-6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)
将(3-((4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)氧基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(3,0.30g粗产物,0.99mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.64mL,2.98mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.025g,0.20mmol)在四氢呋喃(15mL)中的混合物在室温下搅拌16小时。TLC显示完成后，将反应液用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到无色油状的(叔丁氧基羰基)(5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙氧基)-6-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(4)。产率：0.48g,96％；MS(ESI)m/z 503.22[M+1]+。
合成(叔丁氧基羰基)(5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙氧基)-6-((4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。灰白色固体；产率：0.44g,60％；MS(ESI)m/z 817.73[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-(3-氨基丙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号87)
向(叔丁氧基羰基)(5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙氧基)-6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(6,400mg,0.49mmol)的乙醇(5mL)溶液中加入浓盐酸(8mL)。将反应液在100℃搅拌36小时。反应完成后，将反应物质用二氯甲烷中的10％甲醇洗涤。将水层浓缩，通过制备型HPLC纯化，得到白色固体形式的6'-((6-氨基-5-(2-氨基乙氧基)嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(化合物编号87)。产率：50mg,23％；MS(ESI)m/z397.23[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(s,1H),8.68(s,1H),8.01(s,1H),7.68(brs,2H),7.63(s,1H),7.40(s,1H),6.87(brs,2H),3.87-3.84(t,J＝6.4Hz,2H),3.00-2.96(q,J＝6.4Hz,2H),2.54(s,3H),2.09.2.02(m,2H),1.82-1.68(m,7H),1.39-1.32(m,3H)。
实施例88
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(二氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号88)
合成(4'-(1,1-二氟-2-氧代-2-苯基乙基)-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(3)
将催化剂(0.096g,0.17mmol)、(4'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(1,0.8g,1.7mmol)、碳酸铯(1.1g,3.4mmol)和2,2-二氟-1-苯基乙烷-1-酮(2,0.53g,3.4mmol)在甲苯(12mL)中的混合物用氩气吹扫5分钟。将反应液在120℃加热72小时。反应完成后，将反应液用二氯甲烷(150mL)中的5％甲醇稀释，通过氧化铝滤床。将滤液浓缩，通过快速色谱进行纯化，用己烷中的20％乙酸乙酯洗脱。减压除去溶剂，得到棕色固体形式的(4'-(1,1-二氟-2-氧代-2-苯基乙基)-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(3)。产率：0.15g,粗产物；MS(ESI)m/z591.76[M+1]+。
合成6'-氨基-4'-(1,1-二氟-2-氧代-2-苯基乙基)-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体4。黄色固体；产率：0.12g,96％；MS(ESI)m/z491[M+1]+。
合成6'-((6-(二叔丁氧基羰基)氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(1,1-二氟-2-氧代-2-苯基乙基)-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。黄色固体；产率：0.05g,粗产物；MS(ESI)m/z 798[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(1,1-二氟-2-氧代-2-苯基乙基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(7)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体7。黄色固体；产率：40mg,粗产物。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-(二氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号88)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物88。棕色固体；产率：1.8mg,6％；MS(ESI)m/z 374[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.17(s,1H),8.49(s,1H),8.02(s,1H),7.97(s,2H),7.73(t,J＝55.6Hz,1H),6.35(s,2H),1.99(s,3H),1.83-1.79(m,2H),1.77-1.67(m,5H),1.44-1.41(m,2H),1.30-1.40(m,1H)。
实施例89
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氟螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号89)
合成4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(2)
向4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸(1,10.0g,43.2mmol)的二甲基甲酰胺(100mL)溶液中加入碳酸钾(11.9g,86.5mmol)和碘代甲烷(12.0g,86.5mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。将反应液用冰水淬灭，用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层依次用饱和氯化铵水溶液和盐水洗涤，硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱。将合适的柱馏分减压浓缩，得到粘稠棕色液体形式的4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(2)。产率：7.5g,70％；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.55-7.52(d,J＝9.6Hz,1H),7.45(s,1H),3.86(s,3H),2.32(s,3H)。
合成4-溴-2-(溴甲基)-6-氟苯甲酸甲酯(3)
向4-溴-2-氟-6-甲基苯甲酸甲酯(2,8.0g,32.3mmol)的四氯化碳(100mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(7.49g,42.1mmol)和过氧化苯甲酰(784mg,3.23mmol)。将反应液在90℃加热16小时。反应完成后，将反应液冷却至室温，用二氯甲烷稀释，用水和盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到浅棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-6-氟苯甲酸酯(3)。产率：12g,粗产物。
合成5-溴-7-氟-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4)
向4-溴-2-(溴甲基)-6-氟苯甲酸酯(3,12.0g,36.8mmol)的四氢呋喃(150mL)溶液中加入4-甲氧基苄基胺(7.5g,55.2mmol)和二异丙基乙胺(19mL,110mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应液用冰水淬灭，用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用水然后是盐水洗涤，硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。将合适的柱馏分减压浓缩，得到灰白色固体形式的5-溴-7-氟-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4)。产率：5.5g,43％；MS(ESI):m/z 347.93[M-1]-。
合成6'-溴-4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
-40℃，向5-溴-7-氟-2-(4-甲氧基苄基)异吲哚啉-1-酮(4,4.3g,12.2mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中加入二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠(1M溶液，在四氢呋喃中)(36.8mL,36.8mmol)。将悬浮液在相同温度下搅拌30分钟，然后在20分钟的时间内加入1,5-二碘代戊烷(4.83g,14.7mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液。将反应液在-40至-20℃再搅拌1小时。反应完成后，将反应液用饱和氯化铵水溶液淬灭，用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。将合并的有机层用水然后是盐水洗涤，在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱进行纯化，用己烷中的15-25％乙酸乙酯洗脱。将合适的柱馏分减压浓缩，得到灰白色固体形式的6'-溴-4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)。产率：0.85g,16％；MS(ESI)m/z 418.10[M+1]+。
合成(4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。浅棕色固体；产率：800mg,粗产物；MS(ESI)m/z 455.13[M+1]+。
合成6'-氨基-4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(7)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体7。黄色固体；产率：350mg,41％；MS(ESI)m/z 355.40[M-1]+。
合成叔丁基-N-叔丁氧基羰基-(6-((4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)氨基甲酸酯(9)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体9。棕色固体；产率：200mg,粗产物；MS(ESI)m/z 362.36[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氟-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮盐酸盐(10)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体10。黄色固体；产率：275mg,粗产物；MS(ESI)m/z 462.24[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氟螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号89)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物89。白色固体；产率：30mg,11％；MS(ESI)m/z 342.22[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(s,1H),8.52(s,1H),8.05(s,1H),7.62(d,J＝12.8Hz,1H),7.51(s,1H),6.49(brs,2H),1.99(s,3H),1.82-1.69(m,7H),1.45-1.41(m,2H),1.35-1.33(m,1H)。
实施例90
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-乙基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号90)
合成(4'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
将乙基硼酸(0.24g,3.19mmol)、(4'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(1,0.30g,0.63mmol)和磷酸钾(0.40g,1.89mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物用氩气吹扫5分钟。加入三环己基膦(18mg,0.063mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(58mg,0.063mmol)，继续吹扫5分钟。将反应液密封并在搅拌的同时于微波辐射下在120℃保持2小时。反应完成后，将反应液用二氯甲烷(150mL)中的5％甲醇稀释，通过氧化铝滤床。将滤液浓缩，用二氯甲烷和甲醇研磨，得到棕色固体形式的(4'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基甲酸叔丁酯(2)。产率：0.30g,粗产物；MS(ESI)m/z 465.2[M+1]+。
合成6'-氨基-4'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体3。黄色液体；产率：0.10g,42％；MS(ESI)m/z 365.14[M+1]+。
合成6'-((6-(二叔丁氧基羰基)氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。棕色固体；产率：0.13g,粗产物；MS(ESI)m/z 672.4[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-乙基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号90)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物90。黄色固体；产率：10mg,33％；MS(ESI)m/z 352.15[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(s,1H),8.16(s,1H),7.98(s,1H),7.59(s,1H),7.40(s,1H),6.25(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.96(s,3H),1.74-1.68(m,3H)1.38-1.23(m,7H),1.17(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例91
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-4'-腈(化合物编号91)
合成6'-(((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-4'-腈(化合物编号91)
在反应瓶中加入在乙腈和水中的6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-氯螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1,0.08g,0.22mmol)、乙酸钯(100mg,0.44mmol)、SPhos(0.21g.0.44mmol)、三乙胺(0.5ml)、碳酸钠(0.023g,0.22mmol)和亚铁氰化钾(0.46g,1.1mmol)。将反应瓶密封，将反应液在110℃搅拌16小时。反应完成后，将反应液用在二氯甲烷(50mL)中的5％甲醇稀释，用水洗涤。有机层浓缩，通过制备型HPLC纯化后得到白色固体形式的6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-4'-腈(化合物编号91)。产率：0.010g,13％；MS(ESI)m/z349.17[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.58(s,1H),8.19(s,1H),8.04(s,2H),6.42(s,2H),1.99(s,3H),1.78-1.69(m,8H),1.44-1.41(m,2H)。
实施例92
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-羟基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号92)
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-羟基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号92)
-78℃，向6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲氧基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1,150mg,0.42mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(318mg,1.27mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。将反应液用甲醇淬灭，用氨水碱化。混合物用在二氯甲烷中的10％异丙醇(5×20mL)萃取。合并的有机层分离，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过制备型HPCL纯化，得到灰白色固体形式的6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-羟基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号92)。产率：40mg,28％；MS(ESI):m/z340.20[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.11(s,1H),8.68(s,1H),8.14(s,1H),7.99(s,1H),7.18(s,1H),7.10(s,1H),6.28(s,2H),1.96(s,3H),2.05(s,3H)1.68-1.60(m,7H),1.44-1.41(m,2H),1.37-1.30(m,1H)。
实施例93
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号93)
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号93)
0℃，向6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1,0.37g,1mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三溴化硼(0.28mL,3mmol)。将反应液在室温下搅拌18小时。反应完成后，反应液冷却至0℃，用甲醇淬灭。将混合物用氨水中和至pH 7。除去溶剂，残留物用乙醚和戊烷洗涤，得到6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号93)。
实施例94
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号94)
合成4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯胺(2)
0℃，向3-甲氧基-2,6-二甲基苯胺(1,31.2g,206.6mmol)的二甲基甲酰胺(250mL)溶液中分批加入N-溴琥珀酰亚胺(44.16g,247.9mmol)。将反应液在室温下搅拌4小时。反应完成后，反应液用冷的氯化铵溶液(200mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将合并的有机层用水(300mL)和盐水(200mL)洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到深棕色液体形式的4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯胺(2)。产率：28.3g,60％；MS(ESI)m/z 230.29[M+1]+。
合成1-溴-4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基苯(3)
-5℃至0℃，向4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯胺(2,28.3g,122.9mmol)的盐酸(25mL)和丙酮(246mL)溶液中缓慢加入亚硝酸钠(10.18g,147.5mmol)的水(410mL)溶液。将反应液搅拌30分钟后，加入碘化钠(36.8g,245.18mmol)的水(41mL)溶液。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应液用饱和硫代硫酸钠水溶液淬灭，用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将合并的有机层用水(300mL)和盐水(200mL)洗涤。有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到棕色液体形式的1-溴-4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基苯(3)。产率：41g,98％。
合成4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸(4)
-78℃，向1-溴-4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基苯(3,30.8g,90.58mmol)的四氢呋喃(350mL)溶液中缓慢加入异丙基氯化镁(181.2mL,362.3mmol,2M在四氢呋喃中)。将反应液在-20℃搅拌30分钟，然后在1小时的时间内缓慢加入过量的干冰。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应液用2M盐酸(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。将合并的有机层用水(2×500mL)和盐水(200mL)洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物用戊烷研磨后得到白色固体形式的4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸(4)。产率：18g,77％；MS(ESI)m/z 256.92[M-1]-。
合成4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(5)
向4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸(4,18.0g,69.5mmol)的二甲基甲酰胺(160mL)溶液中加入碳酸钾(19.2g,138.99mmol)然后是碘代甲烷(5.2mL,83.39mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，将反应液用冷水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×200mL)和盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到浅黄色液体形式的4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(5)。产率：18.8g,99％；MS(ESI)m/z274.44[M+1]+。
合成4-溴-2-(溴甲基)-3-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯(6)
向4-溴-3-甲氧基-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(5,18.8g,69.11mmol)的四氯化碳(200mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(13.53g,76.02mmol)然后是过氧化苯甲酰(1.68g,6.91mmol)。将反应液回流16小时。反应完成后，反应液用冷水(100mL)淬灭，用二氯甲烷(2×150mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到浅棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-3-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯(6)。产率：24g,粗产物。
合成5-溴-4-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(7)
向4-溴-2-(溴甲基)-3-甲氧基-6-甲基苯甲酸酯(24.0g,68.17mmol)的四氢呋喃(200mL)溶液中加入对甲氧基苄基胺(10.7mL,81.81mmol)和二异丙基乙胺(35.6mL,204.53mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应液用水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×200mL)和盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱色谱纯化，用己烷中的20-30％乙酸乙酯洗脱。收集所需馏分，减压浓缩后得到白色固体形式的5-溴-4-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(7)。产率：15.2g,59％；MS(ESI)m/z 377.8[M+1]+。
合成6'-溴-7'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)
0℃，向5-溴-4-甲氧基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(6.3g,16.75mmol)的二甲基甲酰胺(70mL)溶液中加入氢化钠(1.67g,41.86mmol)。将反应液搅拌20分钟，缓慢加入1,5-二溴戊烷(2.5mL,18.41mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应液用饱和氯化铵水溶液(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机层用水(2×150mL)和盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物采用己烷中的8-10％乙酸乙酯作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到浅黄色粘稠固体形式的6'-溴-7'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(8)。产率：1.1g,15％；MS(ESI)m/z 444.01[M+1]+。
合成N-(6-((7'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(10)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体10。浅棕色固体；产率：0.12g,21％；MS(ESI)m/z 556.27[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-甲氧基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(11)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体11。灰白色固体；产率：60mg,53％；MS(ESI)m/z 488.25[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号94)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物94。白色固体；产率：18mg,40％；MS(ESI)m/z 368.25[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(s,1H),7.89(s,1H),7.55(s,1H),7.43(s,1H),6.22(s,2H),3.68(s,3H),2.48(s,3H),2.22-2.10(m,2H),1.97(s,3H),1.76-1.62(m,5H),1.38-1.25(m,3H)。
实施例95
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号95)
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号95)
0℃，向6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1,0.35 g,1 mmol)的二氯甲烷(3 mL)溶液中加入(二乙基氨基)三氟化硫(0.26 mL,2 mmol)。将反应液在室温下搅拌6小时。反应完成后，反应液冷却至0℃，用饱和碳酸氢钠水溶液缓慢淬灭。将混合物用在二氯甲烷中的10％甲醇萃取。有机层用水和盐水洗涤，无水硫酸钠上干燥，过滤并减压浓缩，得到6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号95)。
实施例96
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号96)
合成3-氨基-4-溴-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(2)
0℃，向3-氨基-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(1,17.5g,97.64mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(19.11g,107.40mmol)。将混合物搅拌30分钟。反应完成后，将反应液用冷水(250mL)淬灭，用二氯甲烷(2×250mL)萃取。将合并的有机层用水(2×300mL)和盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到深棕色液体形式的3-氨基-4-溴-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(2)。产率：22.10g,87％；MS(ESI)m/z 258[M+1]+。
合成4-溴-3-氯-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(3)
0℃，向亚硝酸叔丁酯(87.9g,852.30mmol)的乙腈(200mL)溶液中加入氯化铜(II)(13.74g,102.27mmol)。将3-氨基-4-溴-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(2,22.0g,85.23mmol)的乙腈(150mL)溶液缓慢加入上述悬浮液中，将反应液搅拌16小时。反应完成后，用冷水(250mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。有机层用水(2×250mL)和盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，用在己烷中的3-5％乙酸乙酯洗脱，得到浅黄色液体形式的4-溴-3-氯-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(3)。产率：18.0g,76％；MS(ESI)m/z277[M+1]+。
合成4-溴-2-(溴甲基)-3-氯-6-甲基苯甲酸甲酯(4)
向4-溴-3-氯-2,6-二甲基苯甲酸甲酯(3,18.0g,64.85mmol)的四氯化碳(250mL)溶液中加入N-溴琥珀酰亚胺(12.7g,71.34mmol)然后是过氧化苯甲酰(3.1g,12.97mmol)。反应液回流24小时。反应完成后，反应液过滤通过棉塞。将滤液浓缩至干，得到浅棕色液体形式的4-溴-2-(溴甲基)-3-氯-6-甲基苯甲酸甲酯(4)。产率：25.1g,粗产物；MS(ESI)m/z355[M+1]+。
合成5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(5)
0℃，向4-溴-2-(溴甲基)-3-氯-6-甲基苯甲酸甲酯(4,25.0g,70.13mmol)的二甲基甲酰胺(200mL)溶液中缓慢加入对甲氧基苄基胺(9.6g,70.13mmol)然后是二异丙基乙胺(36.7mL,210.41mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应液用冷水(500mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。将有机层用水(2×500mL)和盐水(200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，用在己烷中的3-5％乙酸乙酯洗脱，得到灰白色固体形式的5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(5)。产率：6.0g,22％；MS(ESI)m/z 380[M+1]+。
合成6'-溴-7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(6)
0℃，向5-溴-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(5,2.0g,5.23mmol)的二甲基甲酰胺(35mL)溶液中加入氢化钠(0.63g,15.76mmol)。将反应液搅拌10分钟，缓慢加入1,5-二溴戊烷(1.45g,6.30mmol)的二甲基甲酰胺(35mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，反应液用冷水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。有机层用水(2×150mL)和盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物采用己烷中的10-15％乙酸乙酯作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到灰白色固体形式的6'-溴-7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(6)。产率：0.80g,34％；MS(ESI)m/z 448[M+1]+。
合成N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。浅棕色固体；产率：0.25g,80％；MS(ESI)m/z 560.0[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(9)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体9。黄色固体；产率：0.21g,粗产物；MS(ESI)m/z 492[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号96)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物96。白色固体；产率：11mg,10％；MS(ESI)m/z 372[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(s,1H),7.94(s,1H),7.89(s,1H),7.69(s,1H),6.35(s,2H),2.68(s,3H),1.99(s,3H),1.83-1.73(m,2H),1.72-1.62(m,5H),1.39-1.33(m,2H)。
实施例97
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4',7’-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号97)
合成N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4',7'-二甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)
将N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)、三甲基环硼氧烷(0.21mL,1.5mmol)和碳酸钠(0.32g,3mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入与二氯甲烷(82mg,0.1mmol)络合的[1,1′-二(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)，继续再吹扫5分钟。将反应液在120℃搅拌16小时。反应完成后，反应液用乙酸乙酯稀释，通过硅藻土滤床。滤液浓缩，采用20-40％乙酸乙酯和己烷作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4',7'-二甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4',7'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体3。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4',7’-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号97)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物97。
实施例98
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-乙基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号98)
合成N-(6-((7'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
将N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)、乙基硼酸(1.5mmol)和碳酸钠(0.32g,3mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入与二氯甲烷(82mg,0.1mmol)络合的[1,1′-二(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)，继续再吹扫5分钟。将反应液在120℃搅拌16小时。反应完成后，反应液用乙酸乙酯稀释，通过硅藻土滤床。将滤液浓缩，采用20-40％乙酸乙酯和己烷作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到N-(6-((7'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-乙基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-乙基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号98)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物98。
实施例99
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-7'-(甲硫基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号99)
合成N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-7'-(甲硫基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)
将N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)和甲烷硫醇钠(0.35g,5mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入四(三苯基膦)钯(0)(116mg,0.10mmol)，再继续吹扫5分钟。将反应液在75℃搅拌24小时。反应完成后，反应液用在二氯甲烷中的5％甲醇(150mL)稀释，通过氧化铝滤床。将滤液浓缩，采用乙酸乙酯和己烷作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-7'-(甲硫基)-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-7'-(甲硫基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体3。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-7'-(甲硫基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号99)
采用过程E的一般方法如上所述合成化合物99。
实施例100
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-7'-腈(化合物编号100)
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(2)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体2。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体3。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-7'-腈(化合物编号100)
将6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-3'-酮(3,0.37g,1mmol)、亚铁氰化钾(1.84g,5mmol)、三乙胺(0.42mL,3mmol)和碳酸钠(0.21g,2mmol)在N,N-二甲基乙酰胺和水(4:1)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入SPhos(0.82g,2mmol)和乙酸钯(II)(0.45g,2mmol)，继续再吹扫5分钟。将反应液在微波下于120℃搅拌1小时。反应完成后，反应液用在二氯甲烷中的5％甲醇稀释，通过氧化铝滤床。将滤液浓缩，通过制备型HPLC纯化，得到6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-7'-腈(化合物编号100)。
实施例101
合成7'-乙酰基-6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号101)
合成N-(6-((7'-乙酰基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
将N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3’氧代螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2,0.36g,1.2mmol)在甲苯(8mL)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入四(三苯基膦)钯(0)(0.12g,0.1mmol)，继续再吹扫5分钟。将反应液在110℃搅拌16小时。反应完成后，反应液用乙酸乙酯稀释，通过氧化铝滤床。将滤液用饱和氟化钾水溶液洗涤并浓缩。粗产物采用20-40％乙酸乙酯和己烷作为洗脱液，通过快速色谱进行纯化，得到N-(6-((7'-乙酰基-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1’-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)。
合成7'-乙酰基-6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。
合成7'-乙酰基-6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号101)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物101。
实施例102
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-(2-氨基乙基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号102)
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-(2-氨基乙基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号102)
室温下，向2-(6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-7'-基)乙腈(1,0.76g,1mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入10％钯碳(76mg)。将反应液在氢气下于室温搅拌16小时。反应完成后，反应液过滤通过硅藻土滤床。将滤液浓缩，通过快速柱色谱进行纯化，得到6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7'-(2-氨基乙基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号102)。
实施例103
合成2-(6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-7'-基)乙腈(化合物编号103)
合成N-(6-((7'-(氰基甲基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
室温下，在N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)在均三甲苯(10mL)中的混合物中加入氰基乙酸钠(2,80mg,0.75mmol)。将混合物用氩气脱气5分钟。加入烯丙基氯化钯(II)二聚体(36mg,0.01mmol)、SPhos(12mg,0.03mmol)，将混合物再脱气5分钟。反应液在140℃搅拌6小时。反应完成后，将混合物冷却至室温并浓缩。粗产物用水稀释，用在二氯甲烷中的5％甲醇萃取。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到N-(6-((7'-(氰基甲基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)。
合成2-(6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-7'-基)乙腈(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。
合成2-(6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-7'-基)乙腈(化合物编号103)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物103。
实施例104
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-7'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号104)
合成N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代-7'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)
向N-(6-((7'-氯-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(1,0.56g,1mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入三氟乙酸钠(0.27g,2mmol)和碘化铜(I)(0.38g,2mmol)。将反应液在140℃搅拌16小时。反应完成后，将混合物冷却至室温，用水稀释，用二氯甲烷中的5％甲醇萃取。将有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到N-(6-((2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-3'-氧代-7'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(2)。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基-7'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(3)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体3。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基-7'-(三氟甲基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号104)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物104。
实施例105
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-4-腈(化合物编号105)
合成N-(6-((4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(4)
采用过程D的一般方法如上所述合成中间体4。
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-7-甲基异吲哚啉-1-酮(5)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体5。
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-4-腈(化合物编号105)
将5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4-氯-7-甲基异吲哚啉-1-酮(5,0.30g,1mmol)、亚铁氰化钾(1.84g,5mmol)、三乙胺(0.42mL,3mmol)和碳酸钠(0.21g,2mmol)在N,N-二甲基乙酰胺和水(10mL,4:1)中的混合物用氩气吹扫10分钟。加入SPhos(0.82g,2mmol)和乙酸钯(0.45g,2mmol)，继续再吹扫5分钟。反应液在微波下于120℃保持1小时。反应完成后，反应液用二氯甲烷中的5％甲醇稀释，通过氧化铝滤床。将滤液浓缩，通过制备型HPLC纯化，得到5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-4-腈(化合物编号105)。
实施例106
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号106)
合成(2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体2。黄色固体；产率：0.8g,83％；MS(ESI)m/z 383[M+1]+。
合成5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)
0℃，向(2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基甲酸叔丁酯(2,200mg,0.52mmol)的二氯甲烷(20mL)和甲醇(5mL)溶液中加入二噁烷中的4M氯化氢(5mL)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，减压除去溶剂。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用在二氯甲烷中的2.5％甲醇洗脱，得到黄色固体形式的5-氨基-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(3)。产率：0.14g,95％；MS(ESI)m/z 283.2[M+1]+。
合成(6-((2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体5。黄色固体；产率：0.39g,62％；MS(ESI)m/z 590.3[M+1]+。
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(6)
0℃，向(6-((2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基-1-氧代异吲哚啉-5-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5,0.38g,0.64mmol)的二氯甲烷(20mL)和甲醇(5mL)溶液中加入二噁烷中的4M氯化氢(10mL)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物冷却至室温并浓缩。粗产物用醚洗涤，真空干燥后得到黄色固体形式的5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2-(4-甲氧基苄基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(6)。产率：0.2g,80％；MS(ESI)m/z 390.2[M+1]+。
合成5-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-7-甲基异吲哚啉-1-酮(化合物编号106)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物106。黄色固体；产率：30mg,16％；MS(ESI)m/z 270.11[M+1]+；1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ9.11(s,1H),8.32(s,1H),8.25(s,1H),7.50(s,1H),7.25(s,1H),4.27(s,2H),2.49(s,3H),2.04(s,2H)。
实施例107
合成6'-((2-氨基-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(化合物编号107)
合成6'-((2-氯-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(3)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体3。
合成6'-((2-氨基-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(4)
0℃向6'-((2-氯-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(3,0.48g,1mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液中加入甲醇氨(5mL)。将反应液在90℃搅拌16小时。反应完成后，蒸发溶剂，残留物用水然后是乙醚研磨，减压干燥后得到6'-((2-氨基-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(4)。
合成6'-((2-氨基-3-甲基吡啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-吡咯并[3,4-c]吡啶]-3'(2'H)-酮(化合物编号107)
采用过程G的一般方法如上所述合成化合物107。
实施例108
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2,2,4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号108)
合成4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3)
向4-溴-2-碘-6-甲基苯甲酸(2,0.34g,1mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入2,2-二甲基环己烷-1-胺(1,0.13g,1mmol)、二异丙基乙胺(0.52mL,3mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.38g,2mmol)和1-羟基苯并三唑(0.27g,2mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应液用水稀释，用二氯甲烷中的5％甲醇萃取。将有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3)。
合成4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4)
0℃，向4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3,0.45g,1mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入氢化钠(48mg,2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌10分钟，然后加入4-甲氧基苄基氯(0.16mL,1.2mmol)。将反应液在室温下搅拌4小时。反应完成后，反应液用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4)。
合成6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-2,2,4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
向4-溴-N-(2,2-二甲基环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4,0.57g,1mmol)和维生素E(22mg,0.05mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中加入叔丁醇钾(0.34g,3mmol)。将反应液在100℃搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用水稀释，用二氯甲烷中的5％甲醇萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到6'-溴-2'-(4-甲氧基苄基)-2,2,4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)。
合成6'-溴-2,2,4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(6)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体6。
合成N-(5-甲基-6-((2,2,4'-三甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2,2,4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号109)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物109。
实施例109
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号109)
合成4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3)
向4-溴-2-碘-6-甲基苯甲酸(2,0.34g,1mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入2,2-二氟环己烷-1-胺(1,0.14g,1mmol)、二异丙基乙胺(0.52mL,3mmol)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.38g,2mmol)和1-羟基苯并三唑(0.27g,2mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应液用水稀释，用二氯甲烷中的5％甲醇萃取。将有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3)。
合成4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4)
0℃，向4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-6-甲基苯甲酰胺(3,0.46g,1mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入氢化钠(48mg,2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌10分钟后加入4-甲氧基苄基氯(0.16mL,1.2mmol)。将反应液在室温下搅拌4小时。反应完成后，将反应液用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4)。
合成6'-溴-2,2-二氟-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)
向4-溴-N-(2,2-二氟环己基)-2-碘-N-(4-甲氧基苄基)-6-甲基苯甲酰胺(4,0.58g,1mmol)和维生素E(22mg,0.05mmol)的二甲亚砜(10mL)溶液中加入叔丁醇钾(0.34g,3mmol)。将反应液在100℃搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用水稀释，用在二氯甲烷中的5％甲醇萃取。将有机层在无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到6'-溴-2,2-二氟-2'-(4-甲氧基苄基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(5)。
合成6'-溴-2,2-二氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(6)
采用过程G的一般方法如上所述合成中间体6。
合成N-(6-((2,2-二氟-4'-甲基-3'-氧代螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二氟-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(化合物编号109)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物109。
实施例110
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(化合物编号110)
合成5-(1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)环己基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(3)
将1-溴-3-甲氧基-5-甲基苯(2,8.0g,39.80mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液逐滴加入在四氢呋喃(30mL)中含有镁条(1.36g,55.72mmol)的烧瓶中。将催化碘加入混合物中并将反应液回流2小时。
0℃，向5-亚环己基-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(1,8.0g,35.71mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中缓慢加入新鲜制备的(3-甲氧基-5-甲基苯基)溴化镁。将反应液在室温下搅拌12小时。一旦完成，将反应混合物用1M盐酸淬灭，用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机层用水和盐水洗涤，无水硫酸钠上干燥，过滤并浓缩，得到无色液体形式的5-(1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)环己基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮。产率：8.0g,粗产物；MS(ESI)m/z347.12[M+1]+。
合成6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(4)
将在250mL烧瓶中的5-(1-(3-甲氧基-5-甲基苯基)环己基)-2,2-二甲基-1,3-二噁烷-4,6-二酮(8.0g,23.18mmol)的甲磺酸(50mL)溶液在100℃加热8小时。反应完成后，反应液用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭至pH 8，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。然后合并的有机物在硫酸钠上干燥，真空下浓缩至干。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的5％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到无色液体形式的6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(4)。产率：2.4g,42％；MS(ESI)m/z 245.15[M+1]+。
合成6'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(5)
-78℃，向6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(4,2.4g,9.8mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(4.91g,19.67mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭调节至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的10％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到无色液体形式的6'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(5)。产率：1.50g,66％；MS(ESI)m/z 231.07[M+1]+。
合成4'-甲基-3'-氧代-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲烷磺酸酯(6)
-30℃，向6'-羟基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(5,1.50g,6.55mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.44g,11.13mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(2.03g,7.20mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×10mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过快速柱色谱进行纯化，用己烷中的5％乙酸乙酯洗脱。所需馏分真空浓缩至干，得到无色液体形式的4'-甲基-3'-氧代-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲磺酸酯(6)。产率：1.10g,47％；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.19(s,1H),7.00(s,1H),2.66(s,3H),2.61(s,2H),1.82(m,2H),1.68(m,2H),1.56(m,3H),1.42(m,3H)。
合成N-(5-甲基-6-((4'-甲基-3'-氧代-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(8)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体8。灰白色固体；产率：1.10g,粗产物；MS(ESI)m/z 405.14[M+1]+。
合成6'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(化合物编号110)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物110。白色固体；产率：0.090g,10％；MS(ESI)m/z 337.25[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10(s,1H),8.28(s,1H),7.51(s,1H),7.47(s,2H),7.31(s,1H),2.46(s,3H),2.44(s,2H),2.03(s,3H),1.63(m,5H),1.38(m,4H),1.20(m,1H)。
实施例111
合成2'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号111)
合成6-氯-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4-甲基烟酸甲酯(3)
将2-溴-6-氯-4-甲基烟酸甲酯(1,0.26g,1mmol)、(1-乙氧基环丙氧基)三甲基硅烷(2,0.26g,1.5mmol)、三苯基膦(52mg,0.2mmol)、乙酸钯(II)(22mg,0.10mmol)在苯(10mL)中的混合物用氩气吹扫5分钟。将反应液在100℃搅拌5小时。混合物冷却至室温，过滤通过硅藻土薄层。混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。残留物通过柱色谱纯化，得到6-氯-2-(3-乙氧基-3-氧代丙基)-4-甲基烟酸甲酯(3)。
合成2-氯-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶-5-酮(4)
0℃，向6-氯-2-(3-甲氧基-3-氧代丙基)-4-甲基烟酸甲酯(3,0.27g,1mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入甲醇钠(0.11g,2mmol)。反应液回流下搅拌3小时。冷却至室温后，除去溶剂，残留物在冰浴中溶解在浓盐酸(20mL)中。所得混合物在100℃搅拌2小时。减压除去溶剂后，将残留物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，得到2-氯-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶-5-酮(4)。
合成5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-4-甲基-7H-环戊烷并[b]吡啶(5)
向搅拌的2-氯-4-甲基-6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶-5-酮(4,0.18g,1mmol)的苯(15mL)溶液中加入叔丁基氯二甲基硅烷(0.23g,1.5mmol)和1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.30mL,2mmol)。将反应液在室温下搅拌14小时。反应完成后，反应混合物用水(25mL)稀释，用二氯甲烷(2×50mL)萃取。减压除去溶剂，柱色谱纯化后得到5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-4-甲基-7H-环戊烷并[b]吡啶(5)。
合成5'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶](6)
0℃，向六甲基二硅氮烷(0.32g,2mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入正丁基锂(2.5M在己烷中)(1.2mL,3mmol)。将反应液在0℃搅拌1小时，然后加入在四氢呋喃(5mL)中的5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-4-甲基-7H-环戊烷并[b]吡啶(0.30g,1mmol)。将反应液在0℃搅拌1小时。加入1,5-二溴戊烷(0.14mL,1mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液。室温下搅拌过夜之后，将反应液用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱纯化，得到5'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶](6)
合成2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶]-5'(6'H)-酮(7)
向5'-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊二烷并[b]吡啶](0.36g,1mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液中加入四丁基氟化铵(1M，在THF中)(2mL,2mmol)。将反应液在室温下搅拌14小时。完成后，将反应混合物用水稀释，用二氯甲烷(2×15mL)萃取。有机层在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速柱色谱进行纯化，得到2'-氯-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶]-5'(6'H)-酮(7)。
合成N-(5-甲基-6-((4'-甲基-5'-氧代-5',6'-二氢螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶]-2'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(9)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体9。
合成2'-((6-氨基-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-4'-甲基螺[环己烷-1,7'-环戊烷并[b]吡啶]-5'(6'H)-酮(化合物编号111)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物111。
实施例112
合成N4-(3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)-5-甲基嘧啶-4,6-二胺(化合物编号112)
合成6'-甲氧基-4'-甲基-3'-亚甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](2)
向叔丁醇钾(1.75g,15.60mmol)的四氢呋喃(20mL)悬浮液中加入甲基三苯基溴化鏻(5.46g,15.28mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时，然后冷却至0℃。加入6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-3'(2'H)-酮(1,3.15g,12.89mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液。将混合物在室温下搅拌16小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取。将有机相在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱进行纯化，得到6'-甲氧基-4'-甲基-3'-亚甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](2)。
合成6'-甲氧基-3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](3)
向6'-甲氧基-4'-甲基-3'-亚甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](2,1.00g,4.13mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入10％钯碳(100mg)。将反应液用氢气吹扫并在室温下搅拌过夜。将混合物过滤通过硅藻土滤垫，浓缩并通过柱色谱进行纯化，得到6'-甲氧基-3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](3)。
合成3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(4)
-78℃，向6'-甲氧基-3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](3,1.00g,4.09mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(0.79mL,8.18mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭调节至pH 8。将混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(4)。
合成3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲磺酸酯(5)
-30℃，向3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(4,1.00g,4.34mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.28mL,7.38mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.80mL,4.77mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×10mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲磺酸酯(5)。
合成N-(6-((3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。
合成N4-(3',4'-二甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)-5-甲基嘧啶-4,6-二胺(化合物编号112)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物112。
实施例113
合成5-甲基-N4-(3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号113)
合成2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(2)
0℃，向2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)乙酸甲酯(1,1.00g,5.15mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中分批加入氢化钠(0.31g,12.88mmol)，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。加入碘代甲烷(0.96mL,15.45mmol)并将反应混合物在70℃搅拌16小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残留物通过硅胶柱色谱纯化，得到2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(2)。
合成2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸(3)
向2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸甲酯(2,1.00g,4.50mmol)的四氢呋喃(10mL)和乙醇(10mL)溶液中加入1M氢氧化锂水溶液(10mL)。将反应液在室温下搅拌过夜。混合物用水稀释，用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。所得粗产物通过柱色谱进一步纯化，得到2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸(3)。
合成1-重氮基-3-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-3-甲基丁烷-2-酮(4)
0℃，向2-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-2-甲基丙酸(3,1.00g,4.80mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入草酰氯(1M在二氯甲烷中，5.28mL,5.28mmol)然后是两滴N,N-二甲基甲酰胺。将反应液在室温下搅拌1小时。将混合物浓缩并在真空下干燥。残留物溶解在二氯甲烷(10mL)中。0℃，将该溶液用重氮甲烷吹扫。将反应液配备氯化钙干燥管并在室温下静置16小时。混合物用氮气吹扫并浓缩。残留物通过柱色谱进行纯化，得到1-重氮基-3-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-3-甲基丁烷-2-酮(4)。
合成5-甲氧基-1,1,7-三甲基-1,3-二氢-2H-茚-2-酮(5)
向1-重氮基-3-(4-甲氧基-2-甲基苯基)-3-甲基丁烷-2-酮(4,1.00g,4.30mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入乙酸铑(II)二聚体二水合物(105mg,0.22mmol)。将反应液在室温下搅拌过夜。混合物过滤通过硅藻土滤垫，浓缩并通过柱色谱纯化，得到5-甲氧基-1,1,7-三甲基-1,3-二氢-2H-茚-2-酮(5)。
合成6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-2'(3'H)-酮(7)
0℃，向5-甲氧基-1,1,7-三甲基-1,3-二氢-2H-茚-2-酮(5,1.00g,4.90mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中分批加入氢化钠(0.29g,12.25mmol)，将反应混合物在室温下搅拌30分钟。加入1,5-二溴戊烷(6,1.13g,4.9mmol)并将反应混合物在70℃搅拌16小时。反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残留物通过硅胶柱色谱进行纯化，得到6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-2'(3'H)-酮(7)。
合成6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](8)
向6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-茚]-2'(3'H)-酮(7,1.00g,3.67mmol)的乙二醇(40mL)溶液中加入水合肼溶液(78-82％,0.25g,4.04mmol)，然后是氢氧化钾(0.62g,11.01mmol)。反应液配备迪安斯塔克(Dean-Stark)阱并在120℃搅拌3小时蒸馏掉水和多余的肼。然后将反应液在回流下搅拌过夜。混合物冷却至室温，用水稀释，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，得到6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](8)。
合成3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(9)
-78℃，向6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](8,1.00g,3.87mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(0.74mL,7.74mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭以调节至pH8。混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(9)。
合成3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲磺酸酯(10)
-30℃，向3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-醇(9,1.00g,4.09mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(1.21mL,6.95mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.76mL,4.50mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基三氟甲磺酸酯(10)。
合成N-(5-甲基-6-((3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(12)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体12。
合成5-甲基-N4-(3',3',4'-三甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号113)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物113。
实施例114
合成N4-(3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)-5-甲基嘧啶-4,6-二胺(化合物编号114)
合成6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉](2)
向6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-3'-酮(1,1.00g,4.08mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中逐滴加入硼烷二甲基硫化物络合物(12.24mL,24.48mmol,2M在四氢呋喃中)。将反应液在65℃搅拌7小时，然后在室温下搅拌过夜。逐滴加入0.5M盐酸(8mL)并将混合物回流2小时。混合物冷却至室温，用1M氢氧化钠水溶液碱化至pH＝8，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱进行纯化，得到甲基6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉](2)。
合成N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(4)
向甲基6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉](2,1.00g,4.32mmol)的甲苯(20mL)溶液中加入硫酸铵(1.14g,8.64mmol)，然后是N'-叔丁基-N,N-二甲基甲脒(3,0.83g,6.48mmol)。将反应液回流过夜。混合物冷却至室温，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化，得到N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(4)。
合成N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(5)
-78℃，向N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-4'-甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(4,1.00g,3.18mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中逐滴加入正丁基锂(1.6M在己烷中,2.19mL,3.50mmol)并将反应液搅拌30分钟。加入碘代甲烷(0.30mL,4.77mmol)并将反应液升温至室温并搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。残留物通过柱色谱纯化，得到N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(5)。
合成3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(6)
-78℃，向N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(5,1.00g,3.04mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(0.59mL,6.08mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭以调节至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱纯化，得到3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(6)。
合成6'-羟基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(7)
向3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(6,1.00g,4.32mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.19mL,5.18mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入碳酸钾(1.49g,10.80mmol)的水(20mL)溶液。将反应液在室温下搅拌过夜。混合物用盐水稀释，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到6'-羟基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(7)。
合成3',4'-二甲基-6'-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(8)
-30℃，向6'-羟基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(7,1.00g,3.02mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.89mL,5.13mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.56mL,3.32mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH8。混合物用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',4'-二甲基-6'-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(8)。
合成6'-((6-(环丙烷甲酰氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(10)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体10。
合成N-(6-((3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(11)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体11。
合成N4-(3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)-5-甲基嘧啶-4,6-二胺(化合物编号114)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物114。
实施例115
合成5-甲基-N4-(3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号115)
合成N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(2)
-78℃，向N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(1,1.00g,3.04mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中逐滴加入正丁基锂(1.6M在己烷中，2.09mL,3.34mmol)，将反应液搅拌30分钟。加入碘代甲烷(0.28mL,4.56mmol)，反应液升温至室温并搅拌1小时。将反应混合物用水淬灭，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。残留物通过柱色谱进行纯化，得到N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(2)。
合成3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(3)
-78℃，向N-叔丁基-1-(6'-甲氧基-3',4'-二甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-基)甲亚胺(2,1.00g,2.92mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(0.56mL,5.84mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭以调节至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(3)。
合成6'-羟基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(4)
向3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-醇(3,1.00g,4.08mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.12mL,4.90mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中加入碳酸钾(1.41g,10.20mmol)的水(20mL)溶液。将反应液在室温下搅拌过夜。混合物用盐水稀释，用乙酸乙酯萃取。合并的有机物在硫酸镁上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱纯化，得到6'-羟基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(4)。
合成3',3',4'-三甲基-6'-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(5)
-30℃，向6'-羟基-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(4,1.00g,2.89mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.86mL,4.91mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.54mL,3.18mmol)。将反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH8。混合物用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过柱色谱进行纯化，得到3',3',4'-三甲基-6'-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(5)。
合成6'-((6-(环丙烷甲酰氨基)-5-甲基嘧啶-4-基)氨基)-3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-2'-羧酸叔丁酯(7)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体7。
合成N-(5-甲基-6-((3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(8)
采用过程C的一般方法如上所述合成中间体8。
合成5-甲基-N4-(3',3',4'-三甲基螺[环己烷-1,1'-异吲哚啉]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号115)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物115。
实施例116
合成5-甲基-N4-(4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号116)
合成6'-甲氧基-4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷](2)
将1.1M二乙基锌(15.02mL,16.52mmol)的甲苯溶液加入含有二氯甲烷(20mL)的反应容器中并冷却至0℃。将三氟乙酸(1.26mL,16.52mmol)加入所得溶液中，并将反应液在0℃搅拌15分钟。向冷却的溶液中加入二碘代甲烷(1.33mL,16.52mmol)，反应液在0℃再搅拌15分钟。然后，加入6'-甲氧基-4'-甲基-3'-亚甲基-2',3'-二氢螺[环己烷-1,1'-茚](1,1.00g,4.13mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液。反应液在0℃再保持15分钟，然后逐渐升温至室温。一旦完成，反应液用饱和氯化铵水溶液(40mL)淬灭，用二氯甲烷(40mL)稀释。合并的有机物用盐水(40mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗产物通过快速色谱进行纯化，得到6'-甲氧基-4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷](2)。
合成4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-醇(3)
-78℃，向6'-甲氧基-4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷](2,0.75g,2.92mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中缓慢加入三溴化硼(0.56mL,5.84mmol)。将反应液在室温下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭以调节至pH8。将混合物用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并浓缩。然后粗产物通过柱色谱纯化，得到4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-醇(3)。
合成4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-基三氟甲磺酸酯(4)
-30℃，向4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-醇(3,0.70g,2.89mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0.86mL,4.91mmol)，然后缓慢加入三氟甲磺酸酐(0.54mL,3.18mmol)。反应液在室温下搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。混合物用二氯甲烷(2×20mL)萃取。合并的有机物在硫酸钠上干燥，过滤并在真空下浓缩至干。然后粗产物通过柱色谱纯化，得到4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-基三氟甲磺酸酯(4)。
合成N-(5-甲基-6-((4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-基)氨基)嘧啶-4-基)环丙烷羧酰胺(6)
采用过程A的一般方法如上所述合成中间体6。
合成5-甲基-N4-(4'-甲基-2'H-二螺[环己烷-1,1'-茚-3',1”-环丙烷]-6'-基)嘧啶-4,6-二胺(化合物编号116)
采用过程D的一般方法如上所述合成化合物116。
实施例117:MNK生物化学酶测定
利用ADP-Glo激酶测定试剂盒(普洛麦格(Promega)，目录号V9101)筛选MNK抑制化合物。所有激酶反应均在反应缓冲液E(15mM HEPES pH7.4，20mM NaCl，1mM EGTA，10mMMgCl2，0.1mg/ml BGG，和0.02％吐温-20)中进行。最终MNK1反应包含10nM重组MNK1(生命科学公司(Life Technologies)，PR9138A)、100μM MNK底物肽Ac-TATKSGSTTKNR-NH2(美国肽公司(American Peptide Company))、300μM ATP，和不同浓度的感兴趣的抑制性化合物。最终MNK2反应包含3nM重组MNK2(生命科学公司，PV5607)、50μM MNK底物肽Ac-TATKSGSTTKNR-NH2(美国肽公司)、10μM ATP，和不同浓度的感兴趣抑制性化合物。各反应中的最终DMSO浓度是1％。
激酶反应在96-孔半区白平底聚苯乙烯板中以终体积25μl进行。MNK1/2酶与化合物和肽底物预孵育5分钟，然后添加ATP。添加ATP之后，激酶反应在室温孵育40分钟。反应后续通过添加25μl的ADP-Glo试剂来终止，并且另孵育40分钟。用于激酶活性读出的最终发光信号通过添加45μl的激酶检测试剂(ADP-Glo试剂盒，普洛麦格)并孵育40分钟来产生。发光信号用Victor 2多标记计数器(Perkin Elmer)检测，并且利用来自8-点化合物稀释系列的信号来计算实现50％酶活性抑制所需的化合物浓度(IC50)。
这些测定的结果列于下表1。就此而言，小于0.01μM的IC50值标记为“+++”，从0.01到0.1μM标记为“++”，并且大于0.1至10.0μM标记为“+”(NA表示“未测得”)。
表1
MNK生物化学酶测定IC50)
实施例118：peIF4E信号转导细胞测定
磷酸化eIF4E采用CisBio peIF4E 测定试剂盒(CisBio，目录号64EF4PEG)来测定。细胞铺板于96孔组织培养处理板中的合适生长培养基(90μL)中。化合物(10X)用三倍连续稀释度在细胞培养液中稀释并添加至细胞。板在37℃孵育两小时。通过析出上清液或通过轻弹板来小心移出细胞上清液。立即添加50μL的补充裂解缓冲液(1X)，并室温振荡孵育至少30分钟。通过捶打均质化之后，将16μL的细胞裂解物从96孔细胞培养板转移至384孔小体积白板。在检测缓冲液中制备4μL的预混抗体溶液(体积/体积)并添加。该板用封板器覆盖并室温孵育过夜。在Wallac Victor2仪器上读取两个不同波长的荧光发射(665nm和620nm)。发射比率转化成抑制百分比，并导入GraphPad Prism软件。实现酶活性50％抑制所需的化合物浓度(IC50)采用20μM～0.1nM范围内的浓度计算(12-点曲线)。IC50值利用GraphPad Prism 5中可用的非线性回归模型来确定。
这些测定的结果列于下表2。就此而言，小于0.05μM的IC50值标为“+++”，0.05～1.0μM标为“++”，大于1.0至100μM标为“+”，并且NA指“未测得”。
表2
peIF4E信号转导细胞测定(IC50)
实施例119：药代动力学研究
向Balb/c小鼠或SD(Sprague-Dawley)大鼠组(n≥3/给药组)给予单一剂量的测试化合物。化合物以溶液形式在10％N-甲基吡咯烷酮、90％聚乙二醇400中配制，或以悬液形式在水中的0.5％甲基纤维素中配制，以供以10mg/kg的标称剂量水平经口饲喂给予。化合物在10％二甲基异山梨醇、15％乙醇、35％丙二醇和40％盐水(或40％D5W)中配制，用于以1mg/kg的标称剂量水平静脉内给予。对于静脉内给药的动物，血样在给药后0.083、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时收集。对于经口给药的动物，血样在给药后0.25、0.5、1、2、4、8和24小时收集。血样依次通过下颌下静脉(各约0.1mL)或最后通过心穿刺(各约0.5mL)从小鼠收集。血样通过颈静脉导管(各约0.2mL)依次从大鼠收集。各血样收集于管中，该管经冷冻并包含钾EDTA作为抗凝剂。血浆经分离并贮存于约-80C直至分析。在蛋白质用包含内标的乙腈沉淀之后，血浆样品采用液相色谱/高分辨质谱(LC-HRMS)法分析以确定血浆浓度。采用PhoenixTM (Certara LP)对血浆浓度与时间关系的数据进行非区划药物动力学分析，以确定药代动力学参数，包括曲线下面积(AUC)、清除率(Cl)、稳态分布体积(Vss)，和终末半衰期(T1/2)。来自经口和静脉内给药的数据分别在表3和4中强调。
表3
以10mg/kg单次口服强饲给予后雄性SD大鼠的平均药代动力学参数(N＝3/组)
aN＝2(3只动物中的1只的血浆水平异常低，因而从PK计算中排除)
制剂:1＝10％NMP/90％PEG400；2＝10％DMA/90％PEG300
表4
以1mg/kg单次静脉推注给予后雄性SD大鼠的平均药代动力学参数(N＝3/组)
制剂:1＝10％NMP/15％EtOH/35％PEG400/40％D5W；2＝10％DMA/15％EtOH/35％PEG400/40％D5W
也可以组合所述各种实施方式以提供其他实施方式。本说明书中提及的和/或列于申请数据表单中的所有美国专利、美国专利申请公开文本、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利公开文本均通过引用其全文纳入本文。所述实施方式的各方面可被修改，必要时可应用各种专利、申请和出版物的概念，以提供更多的实施方式。
根据上述详细说明可对实施方式进行这些和其他改变。总体而言，权利要求中所用的术语应不被认为是将权利要求限制到本说明书和权利要求中公开的具体的实施方式，而应认为是包括遵循与所列权利要求等同的完全范围的所有可能的实施方式。因此，权利要求并不受本公开内容限制。

Claims (20)

1.式(I)的化合物：
或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
A1和A2独立地是–N–或–CR6a；
A3是–N–或–CR7；
A4是–N–或–CR6b；
A5是–NR8或–CR8aR8b；
W1是O、S、NH、NO(R9)或CR9aR9b；
Y是–O–、–S–、–C(O)–、–NR10、–S＝O、–S(O)2–、–CH2–或–CH(OH)；
n是1、2或3；
R1和R2独立地是–H、–NHR10、NHR10-亚烷基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基或杂芳基亚烷基，使得R1或R2中至少一个不是–H；或
R1和R2与它们连接的碳原子一起形成环烷基或杂环基环；
R3、R4、R5和R6b独立地是–H、-OH、-CN、-SR10、卤素、–S(O)2(C1-C8)烷基、-C(O)NHR10、-C(O)NR10R10、-NHR10、-NR10R10、NHR10-亚烷基、NR10R10-亚烷基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)亚烷基NHR10、-O(C1-C8)亚烷基NR10R10、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基、杂芳基亚烷基、烷基胺基、烷基羰基胺基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基或杂环基胺基；或
R4和R5与它们连接的各自的碳原子一起形成稠合的芳基、环烷基、杂环基或杂芳基环；
R6a是–H、–OH、卤素、–CN、乙酰基、–(C1-C8)烷基、–S(C1-C8)烷基、-(C2-C8)烯基、-(C2-C8)炔基、-O(C1-C8)烷基、–(C1-C8)卤代烷基、-NHR10、-NR10R10、NHR10-亚烷基、NR10R10-亚烷基或-O(C1-C8)卤代烷基；
R7是–H、-OH、-SH、-CN、-S(O)2R10、卤素、-S(C1-C8)烷基、-NHR10、-NR10R10、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)卤代烷基、-O(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)亚烷基NHR10、-O(C1-C8)亚烷基NR10R10、-(C1-C8)亚烷基NHR10、-(C1-C8)亚烷基NR10R10、-S(C1-C8)烷基、环烷基、杂环基、杂芳基或芳基；
R8是–H、-OH、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R8a和R8b独立地是–H、-OH、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)烷基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R9、R9a和R9b独立地是–H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基、或杂芳基亚烷基；或
R9a和R9b与它们连接的碳原子一起形成环烷基或杂环基环；
R10是–H、-OH、-C(O)O(C1-C8)烷基、-C(O)(C1-C8)烷基、-C(O)-NH2、-C(O)-NH(C1-C8)烷基、NH2-C(O)-亚烷基、-S(C1-C8)烷基、乙酰基、-(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、-O(C1-C8)烷基、(C1-C8)卤代烷基、烷基羰基胺基、烷基胺基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)O-(C1-C8)烷基、芳基、杂芳基、杂环基或环烷基；
其中，任意烷基、环烷基、杂环基、杂芳基、芳基、芳基亚烷基、环烷基亚烷基、杂环基亚烷基、杂芳基亚烷基、烷基胺基、烷基羰基胺基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基、或杂环基胺基任选地被1、2或3个选自以下的取代基取代：–OH、-CN、-SH、-S(O)NH2、-S(O)NH2、卤素、-NH2、-NH(C1-C4)烷基、-N[(C1-C4)烷基]2、-C(O)NH2、–COOH、-COOMe、乙酰基、-(C1-C8)烷基、-O(C1-C8)烷基(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、卤代烷基、硫代烷基、氰基亚甲基、烷基胺基、NH2-C(O)-亚烷基、NH2-C(O)-亚烷基、-NH(Me)-C(O)-亚烷基、-CH2-C(O)-低级烷基、-C(O)-低级烷基、烷基羰基胺基、环烷基、环烷基亚烷基、环烷基亚烯基、环烷基羰基胺基、环烷基胺基、-CH2-C(O)-环烷基、-C(O)-环烷基、-CH2-C(O)-芳基、-CH2-芳基、-C(O)-芳基、-CH2-C(O)-杂环烷基、-C(O)-杂环烷基、杂环基胺基或杂环基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中，W1是O，A5是–NR8且R8是–H。
3.如权利要求1所述的化合物，其中，Y是–NR10且下标“n”是1。
4.如权利要求3所述的化合物，其中，R10是–H或–(C1-C8)烷基。
5.如权利要求1所述的化合物，其中，R1或R2中至少一个是甲基、乙基、i-丙基、-NH2、氨基亚甲基、CH3-OC(O)NH-亚甲基或噻吩。
6.如权利要求1所述的化合物，其中，R1和R2与它们连接的碳原子一起形成选自以下的环烷基环：环丁基、环戊基、环己基、2,2-二甲基环丁基、4-氨基环己基、4-甲基环己基、4-乙基环己基、2,2-二氟乙基-4-环己基、4,4-二氟环己基、4-氰基环己基、4-三氟甲基环己基、4-羟基环己基、3-羟基环戊基、3-氨基环戊基和3-甲基环戊基。
7.如权利要求1所述的化合物，其中，A2是–CH、A4是–CR6b且–CR6b是–C(OH)、-C(CN)、-C(F)、-C(Cl)、-C(OMe)、-C(Me)、-C(Et)、–C(CF3)、-C(氨基亚烷基)、-C(SMe)或–C[C(O)Me]。
8.如权利要求1所述的化合物，其中，A2是–CH、A3是–CR7且–CR7-是–C(OH)、-C(CN)、-C(F)、-C(Cl)、-C(OMe)、-C(Me)、-C(Et)、-C(CHF2)或–C(CF3)。
9.如权利要求1所述的化合物，其中，R3、R4和R5独立地是–H。
10.如权利要求1所述的化合物，其中，R3是–H，且R4和R5独立地是氯、氟、甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、-CN、–NHR10或-O(C1-C8)烷基NHR10。
11.如权利要求9所述的化合物，其中，R10是–H、-C(O)烷基或-C(O)环烷基。
12.如权利要求1所述的化合物，其中，R3是–H，且R4和R5与它们连接的各自的碳原子一起形成稠合的环烷基、杂环基或杂芳基环。
13.如权利要求11所述的化合物，其中，杂环基环是吗啉、吡咯烷或吡咯烷-2-酮。
14.如权利要求11所述的化合物，其中，杂芳基环是咪唑、噻唑、噻吩、吡唑、N-甲基吡唑或吡啶。
15.如权利要求1所述的化合物，选自：
16.一种药物组合物，其包含：(i)治疗有效量的如权利要求1所述的至少一种化合物，或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐；(ii)与药学上可接受的运载体、稀释剂或赋形剂组合。
17.一种在过度表达Mnk的至少一种细胞中减弱或抑制MnK活性的方法，包括使所述至少一种细胞与权利要求1所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐接触。
18.如权利要求17所述的方法，其中至少一种细胞是结肠癌细胞，胃癌细胞，甲状腺癌细胞，肺癌细胞，白血病细胞，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，毛细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤细胞，非霍奇金淋巴瘤细胞，伯基特淋巴瘤细胞，胰腺癌细胞，黑素瘤细胞，多发性黑素瘤细胞，脑癌细胞，CNS癌细胞，肾癌细胞，前列腺癌细胞，卵巢癌细胞或乳腺癌细胞。
19.一种在有需要的哺乳动物中治疗Mnk依赖性病症的方法，包括给予所述哺乳动物(i)治疗有效量的至少一种权利要求1所述的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐；或(ii)权利要求16所述的药物组合物。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述Mnk依赖性病症是结直肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，B细胞淋巴瘤，T细胞淋巴瘤，毛细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，伯基特淋巴瘤，胰腺癌，黑素瘤，多发性黑素瘤，脑癌，CNS癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。
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