CN108575188B - 一种组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法，包括种子的采集、种子的接种前处理、种子的消毒灭菌、接种、统计种子发芽率等步骤。本发明方法可使组培条件下白蜡种子的发芽率达到91.11%，与对照组相比，本发明方法可使白蜡种子发芽率提高40.37%。
Description
技术领域
本发明涉及一种提高白蜡种子发芽率的方法。
背景技术
白蜡种子经过常规的75％酒精和0.1％升汞消毒灭菌后，种子的发芽率很低，而且发芽慢，发芽不整齐，因此严重制约了白蜡外植体的获得率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种发芽率高的组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法。
本发明的技术解决方案是：
一种组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法，其特征是：包括下列步骤：
(1)种子的采集
将白蜡种子剥除种翅，选取生长饱满无病虫害的种子，将其用铝箔纸包好，存放于4℃冰箱中，放置一个月后待用；
(2)种子的接种前处理
A.将90粒白蜡种子浸泡在80ml新鲜的苹果汁中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉苹果汁，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
B.对照组：将90粒白蜡种子浸泡在80ml自来水中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉自来水，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
(3)种子的消毒灭菌
将经过步骤(2)处理的白蜡种子放在小烧杯中，在超净工作台上先用75％酒精消毒30s，然后用无菌水冲洗1次；再用0.1％的升汞灭菌6min，然后用无菌水冲洗4～5次；
(4)接种
将经过步骤(3)消毒灭菌后的白蜡种子接种于MS培养基上，放置于黑暗环境26℃条件下培养；
(5)统计种子发芽率
待白蜡种子露白后，分别统计对照组和苹果汁处理后两种方法的白蜡种子发芽率。
本发明方法可使组培条件下白蜡种子的发芽率达到91.11％，与对照组相比，本发明方法可使白蜡种子发芽率提高40.37％。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
图1是本发明方法处理后组培条件下白蜡种子的萌发情况图。
图2是对照组组培条件下白蜡种子的萌发情况图。
具体实施方式
一种组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法，包括下列步骤：
(1)种子的采集
将白蜡种子剥除种翅，选取生长饱满无病虫害的种子，将其用铝箔纸包好，存放于4℃冰箱中，放置一个月后待用；
(2)种子的接种前处理
A.将90粒白蜡种子浸泡在80ml新鲜的苹果汁中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉苹果汁，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
B.对照组：将90粒白蜡种子浸泡在80ml自来水中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉自来水，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
(3)种子的消毒灭菌
将经过步骤(2)处理的白蜡种子放在小烧杯中，在超净工作台上先用75％酒精消毒30s，然后用无菌水冲洗1次；再用0.1％的升汞灭菌6min，然后用无菌水冲洗4～5次；
(4)接种
将经过步骤(3)消毒灭菌后的白蜡种子接种于MS培养基上，放置于黑暗环境26℃条件下培养；
(5)统计种子发芽率
待白蜡种子露白后，分别统计对照组和苹果汁处理后两种方法的白蜡种子发芽率。
发明人为了培养获得白蜡无菌苗，用白蜡无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴等为外植体，试图建立白蜡的遗传转化体系，但在实验过程中发现，白蜡种子经过常规的75％酒精和0.1％升汞消毒灭菌后，种子的发芽率很低，而且发芽慢，发芽不整齐，因此严重制约了白蜡外植体的获得率。但同样温度条件下，将吸水充足的种子放在有滤纸的培养皿中，培养皿中始终保持湿润，种子的发芽率可高达91.11％，为什么经过一系列的消毒处理以后白蜡种子的发芽率急剧下降，发芽率仅仅不到50.74％，笔者做了三次重复试验，都是同样的实验结果。后来笔者分别用苹果汁、香蕉泥、土豆泥对白蜡种子做了相同的处理，以空白组为对照，竟然发现苹果汁处理方法能显著提高白蜡种子的发芽率，土豆泥组处理的发芽率与空白组几乎没有差异，香蕉泥处理组白蜡种子的发芽率也能提高一些，但远远不如苹果汁组的处理，实验均做了三次重复，每次处理90粒白蜡种子，结果非常一致，都是苹果汁处理组白蜡种子的发芽率最高，比对照组能提高40.37％，因此产生了本专利的发明技术方案。
表1不同处理方法后组培条件下白蜡种子的发芽率
由此可见本发明的优异技术效果。
Claims (1)
1.一种组培条件下提高白蜡种子发芽率的方法，其特征是：包括下列步骤：
（1）种子的采集
将白蜡种子剥除种翅，选取生长饱满无病虫害的种子，将其用铝箔纸包好，存放于4℃冰箱中，放置一个月后待用；
（2）种子的接种前处理
A．将90粒白蜡种子浸泡在80ml新鲜的苹果汁中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉苹果汁，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
B.对照组：将90粒白蜡种子浸泡在80ml自来水中，放置于4℃冰箱3d，3d后倒掉自来水，室温条件下，再将白蜡种子浸泡在超纯水中3d，每隔半天换一次超纯水；
（3）种子的消毒灭菌
将经过步骤（2）处理的白蜡种子放在小烧杯中，在超净工作台上先用75%酒精消毒30s，然后用无菌水冲洗1次；再用0.1%的升汞灭菌6min，然后用无菌水冲洗4～5次；
（4）接种
将经过步骤（3）消毒灭菌后的白蜡种子接种于MS培养基上，放置于黑暗环境26℃条件下培养；
（5）统计种子发芽率
待白蜡种子露白后，分别统计对照组和苹果汁处理后两种方法的白蜡种子发芽率。
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