CN106386505A - 常青白蜡组培无性繁殖方法 - Google Patents

常青白蜡组培无性繁殖方法 Download PDF

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    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008Methods for regeneration to complete plants

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Abstract

本发明提供一种常青白蜡组培无性繁殖方法,步骤如下:(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象;(2)将消毒后的组培对象均匀分切成5‑6段,接种至培养基中进行丛生芽诱导培养;(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下,取其基部2~3cm,接种至生根培养瓶中,密封进行诱导生根;(4)在生根培养瓶中生长至苗高6~8cm,然后打开瓶盖,炼苗4天,然后取出组培苗,移栽至苗床培养基中。本发明以常青白蜡的根尖为外植体,可得到完整的再生植株。采用本方法得到的再生植株,植物学性状稳定,增殖系数达到4~6,生根率达78%,移栽成活率达97%,快繁方法稳定性好,可用来快速、批量繁殖常青白蜡种苗。

Description

常青白蜡组培无性繁殖方法
技术领域
本发明涉及常青白蜡人工繁育技术领域,尤其涉及一种常青白蜡组培无性繁殖方法。
背景技术
常青白蜡为暖温带喜光树种。常青白蜡木材坚韧,供制家具、农具、车辆、胶合板等;枝条可编筐;树皮称“春皮”,中医学上用为清热药。常青白蜡在园林绿化上可谓是多功能树种,耐寒耐旱,抗盐碱,耐瘠薄,是北方地区不可多得的常绿阔叶树种,市场反映强烈。它的推广和应用前景将十分可观。依据它的耐修剪整形等生物学特性和景点配置要求,可修建成球形、独干形球、灌木状高篱、柱形高篱、行道树等。特别适合诸如京津唐地区、胶东半岛地区、山陕地区、上海地区、江浙沿海地区栽培。
春季播种放在立春后3月下旬至4月中旬,也可采用嫁接的方法,在东北地区采用常见的水曲柳做砧木,在华中、华东地区可采用普通白蜡或绒毛白蜡做砧木,时间选择春季4-5月份,采用劈接、枝接、靠接或芽接均可。接后管理十分重要,注意剪砧抹芽松绑,立支撑,保证嫁接苗的枝干笔直健壮。
目前,常青白蜡扦插繁殖易受扦插基质、温湿度和植物生长调节剂的影响,扦插苗根系为不定根,吸收能力差,形成的树体直立性差,顶端优势不明显,生长缓慢;嫁接繁殖是现在常青白蜡常用的繁殖方法,但嫁接方法易受季节和地域限制,操作复杂,繁殖系数低,小苗生长速度不一,管理繁杂,不适宜批量、规模化繁殖。
发明内容
本发明的目的在于提供一种常青白蜡组培无性繁殖方法,以解决上述技术问题。
本发明所要解决的技术问题采用以下技术方案来实现:
一种常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于,步骤如下:
(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象,在42.5℃的温水中浸泡35min,再用清水冲洗10min,沥干表面水份,再浸入消毒液A中浸泡25s,所用消毒液A中含有质量分数为65%的乙醇、5%的乙酸二氢香芹酯,余量为水;组培对象从消毒液A中取出后用无菌水连续冲洗15-30s,再沥干组培对象表面的水份,浸入消毒液B中浸泡6s,然后从消毒液B中取出,用无菌水连续冲洗20s,所用消毒液B中含有质量分数1.6%的高锰酸钾、0.05%的去甲麻黄碱,余量为水;
(2)将步骤(1)消毒后的组培对象均匀分切成5-6段,接种至培养基中进行丛生芽诱导培养,光照强度2100Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下,取其基部2~3cm,接种至生根培养瓶中,密封进行诱导生根,光照强度2400Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(4)在生根培养瓶中生长至苗高6~8cm,然后打开瓶盖,光照强度2800Lx,光照9.5h/d,温度32℃,空气相对湿度79%,通风良好的环境下,炼苗4天,然后取出组培苗,移栽至苗床培养基中,苗床培养基由泥炭土、草炭土、水苔、香桧烯按质量比3:1.2:1.6:0.01混合而成。
作为优选,步骤(2)所述的培养基组成为:GD+1.2~1.6mg/L、2,4-D+0.5~0.8mg/L、NAA+4.0~7.0mg/L、6-BA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
作为优选,所述生根培养瓶中,所用的培养基组成为:GD+0.8~1.0mg/L、NAA+1.0~3.0mg/L、IBA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
作为优选,所述生根培养瓶中,密封状态下瓶体中充入的混合气由以下体积比的气体混合而成:二氧化碳0.05、氮气78、氧气21.2、氡气0.003、乙稀1.2、乙酸0.03。
本发明的有益效果是:
本发明以常青白蜡的根尖为外植体,可得到完整的再生植株。采用本方法得到的再生植株,植物学性状稳定,增殖系数达到4~6,生根率达78%,移栽成活率达97%,快繁方法稳定性好,可用来快速、批量繁殖常青白蜡种苗。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解,下面结合具体实施例,进一步阐述本发明,但下述实施例仅仅为本发明的优选实施例,并非全部。基于实施方式中的实施例,本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例,都属于本发明的保护范围。
一种常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于,步骤如下:
(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象,在42.5℃的温水中浸泡35min,再用清水冲洗10min,沥干表面水份,再浸入消毒液A中浸泡25s,所用消毒液A中含有质量分数为65%的乙醇、5%的乙酸二氢香芹酯,余量为水;组培对象从消毒液A中取出后用无菌水连续冲洗15-30s,再沥干组培对象表面的水份,浸入消毒液B中浸泡6s,然后从消毒液B中取出,用无菌水连续冲洗20s,所用消毒液B中含有质量分数1.6%的高锰酸钾、0.05%的去甲麻黄碱,余量为水;
(2)将步骤(1)消毒后的组培对象均匀分切成5-6段,接种至培养基中进行丛生芽诱导培养,光照强度2100Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下,取其基部2~3cm,接种至生根培养瓶中,密封进行诱导生根,光照强度2400Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(4)在生根培养瓶中生长至苗高6~8cm,然后打开瓶盖,光照强度2800Lx,光照9.5h/d,温度32℃,空气相对湿度79%,通风良好的环境下,炼苗4天,然后取出组培苗,移栽至苗床培养基中,苗床培养基由泥炭土、草炭土、水苔、香桧烯按质量比3:1.2:1.6:0.01混合而成。
步骤(2)中的培养基组成为:GD+1.2~1.6mg/L、2,4-D+0.5~0.8mg/L、NAA+4.0~7.0mg/L、6-BA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
生根培养瓶中,所用的培养基组成为:GD+0.8~1.0mg/L、NAA+1.0~3.0mg/L、IBA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
生根培养瓶中,密封状态下瓶体中充入的混合气由以下体积比的气体混合而成:二氧化碳0.05、氮气78、氧气21.2、氡气0.003、乙稀1.2、乙酸0.03。
采用上述实施例的方法繁育常青白蜡,得到的再生植株,植物学性状稳定,增殖系数达到4~6,生根率达78%,移栽成活率达97%,快繁方法稳定性好,可用来快速、批量繁殖常青白蜡种苗。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的仅为本发明的优选例,并不用来限制本发明,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (4)

1.一种常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于,步骤如下:
(1)取常青白蜡的根尖3cm作为组培对象,在42.5℃的温水中浸泡35min,再用清水冲洗10min,沥干表面水份,再浸入消毒液A中浸泡25s,所用消毒液A中含有质量分数为65%的乙醇、5%的乙酸二氢香芹酯,余量为水;组培对象从消毒液A中取出后用无菌水连续冲洗15-30s,再沥干组培对象表面的水份,浸入消毒液B中浸泡6s,然后从消毒液B中取出,用无菌水连续冲洗20s,所用消毒液B中含有质量分数1.6%的高锰酸钾、0.05%的去甲麻黄碱,余量为水;
(2)将步骤(1)消毒后的组培对象均匀分切成5-6段,接种至培养基中进行丛生芽诱导培养,光照强度2100Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(3)将步骤(2)获得的丛生芽切下,取其基部2~3cm,接种至生根培养瓶中,密封进行诱导生根,光照强度2400Lx,光照8h/d,温度28℃,空气相对湿度83%;
(4)在生根培养瓶中生长至苗高6~8cm,然后打开瓶盖,光照强度2800Lx,光照9.5h/d,温度32℃,空气相对湿度79%,通风良好的环境下,炼苗4天,然后取出组培苗,移栽至苗床培养基中,苗床培养基由泥炭土、草炭土、水苔、香桧烯按质量比3:1.2:1.6:0.01混合而成。
2.根据权利要求1所述的常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于:步骤(2)所述的培养基组成为:GD+1.2~1.6mg/L、2,4-D+0.5~0.8mg/L、NAA+4.0~7.0mg/L、6-BA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
3.根据权利要求1所述的常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于:所述生根培养瓶中,所用的培养基组成为:GD+0.8~1.0mg/L、NAA+1.0~3.0mg/L、IBA+20~25g/L、蔗糖+1.0~1.5g/L、AC+5.5~7.0g/L、琼脂,pH为6.2~6.5。
4.根据权利要求1所述的常青白蜡组培无性繁殖方法,其特征在于:所述生根培养瓶中,密封状态下瓶体中充入的混合气由以下体积比的气体混合而成:二氧化碳0.05、氮气78、氧气21.2、氡气0.003、乙稀1.2、乙酸0.03。
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