CN108522884B - 一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途 - Google Patents
一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途 Download PDFInfo
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Abstract
本申请公开了一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途。所述复合微生态制剂包括植物乳杆菌P‑8(Lactobacillus plantarum P‑8)，干酪乳杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang)和双歧杆菌V9(Bifidobacterium animalis V9)，将包含植物乳杆菌P‑8的复合微生态制剂用于肉鸡饲养，有利于提高饲料能量向肉类方向转化，促进畜禽机体健康，有效地降低大规模养殖的肉鸡的腹脂，提高饲料报酬以及肉鸡的健康程度，提高经济效益，在动物饲料或保健食品领域开发具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本申请属于微生态制剂领域，特别涉及一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途。
背景技术
目前肉鸡大规模养殖行业过度追求肉鸡的生产性能，导致大多数肉鸡存在胴体脂肪(以下简称“体脂”)过多的问题。肉鸡的体脂主要分布于腹部、皮下脂肪组织和肌肉纤维中。其中，腹部是沉积脂肪的主要部位，约占体脂总重量的22％，相当于活重的2～3％，与胴体脂肪含量呈中等强度的相关性。
肉鸡腹脂沉积过多己成为肉鸡业面临的主要问题之一，其不利影响主要表现在以下几个方面：(1)由于沉积单位重量的脂肪比沉积单位重量的瘦肉多消耗3倍的能量，肉仔鸡过多的腹脂沉积降低了饲料利用率；(2)腹部脂肪没有商业价值，在加工过程中被作为废弃物而丢掉，降低了屠体产量；(3)从消费者观点来看，由于营养和健康意识增强，他们不喜欢过多的脂肪，而将腹脂丢弃，增加了消费者的负担；(4)肉种鸡腹脂沉积过多，肉鸡变得过肥，会使产蛋量、种蛋受精率和孵化率下降，并且会诱导脂肪肝综合症的发生，从而加大了产蛋期的死淘率。
发明内容
为解决肉鸡体脂过多，尤其是腹脂过多的问题，本申请提供了一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的的用途。
本申请中所用植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum P-8)，其分离自内蒙古传统自然发酵酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力，能够存活于肉鸡肠道内。植物乳杆菌P-8、干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9均已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号。植物乳杆菌P-8的微生物保藏号为：CGMCC No.6312，保藏日期为2012年6月28日；干酪乳杆菌Zhang的微生物保藏号为：CGMCC No.5469，保藏日期为2011年11月18日；乳双歧杆菌V9的微生物保藏号为：CGMCC No.5470，保藏日期为2011年11月18日。
本申请中所述植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9均为现有技术中公开的菌株。
本申请提供一种复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途，所述复合微生态制剂包括植物乳杆菌P-8(Lactobacillus plantarum P-8)，干酪乳杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang)和双歧杆菌V9(Bifidobacterium animalis V9)，其中，植物乳杆菌P-8的微生物保藏编号为：CGMCC No.6312，干酪乳杆菌Zhang(Lactobacilluscasei Zhang)的微生物保藏号为CGMCC No.5469和双歧杆菌V9(Bifidobacteriumanimalis V9)的微生物保藏号为CGMCC No.5470；所述复合微生态制剂中植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数之比为植物乳杆菌P-8的活菌数:干酪乳杆菌Zhang的活菌数:双歧杆菌V9的活菌数＝(0.5～1.5):(0.5～1.5):(0.5～1.5)。
在一种可实现的方式中，所述复合微生态制剂中植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数之比为植物乳杆菌P-8的活菌数:干酪乳杆菌Zhang的活菌数:双歧杆菌V9的活菌数＝1:1:1。
在一种可实现的方式中，在鸡饮水中添加有所述复合微生态制剂，其中，基于所述鸡饮水的总体积，所述鸡饮水中活菌总数量为(0.5～3.0)×106CFU/mL，优选为1×106CFU/mL，其中，所述活菌总数量为植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数量之和。
在一种可实现的方式中，所述复合微生态制剂由包括以下步骤的方法制备：
步骤1，将冷冻保存的植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9分别于MRS液体培养基中37℃厌氧培养24小时，如此传代培养2次得到3级种子液；
步骤2，将步骤1制得的三种3级种子液全部接种至121℃灭菌20min后的发酵培养基中，37℃恒温厌氧条件发酵，自动控制流加氨水控制发酵过程体系pH＝5.9，至产酸停止，停止流加中和剂氨水，得到高密度培养液，其中，所述发酵培养基包括：乳糖60kg，酵母蛋白胨10kg，大豆蛋白胨10kg，酪蛋白胨5kg，乙酸钠5.0kg，磷酸氢二钾2.0kg，柠檬酸钠2.0kg，MgSO4·7H2O 0.2kg，MnSO4·5H2O 0.05kg，吐温-80 0.5kg，蒸馏水1000L；发酵培养基初始pH值为7.0，并在121℃下灭菌20min；
步骤3，将高密度培养液经14000xg离心提取湿菌体，制得菌泥中活菌数约为2500亿CFU/g，该操作过程料液温度控制为37℃，且发酵罐中持续通入氮气。
在一种可实现的方式中，所述肉鸡为艾拔益加肉鸡。
在一种可实现的方式中，在养殖期内，饲喂的基础日粮包括：
其中，基于1kg计为1重量份。
在一种可实现的方式中，在养殖期内，饲喂的基础日粮包括：
其中，基于1kg计为1重量份。
本申请将包含植物乳杆菌P-8的复合微生态制剂用于肉鸡饲养，有利于提高饲料能量向肉类方向转化，促进畜禽机体健康，有效地降低大规模养殖的肉鸡的腹脂，提高饲料报酬以及肉鸡的健康程度，提高经济效益，在动物饲料或保健食品领域开发具有广泛的应用前景。
附图说明
图1为Firmicutes/Bacterorides的比值与腹脂率相关性图；
图2A为在门的水平，试验组与对照组鸡肠道菌群测定结果图；
图2B为对图2A中含量超过1％的13个菌属的分析结果图。
具体实施方式
下面结合应用实施例对本发明作进一步说明，以下实施例仅具有说明性，本发明并不受此实施例的限制。
植物乳杆菌Lactobacillus plantarum P-8(L.plantarum P-8)是内蒙古农业大学研究人员于2005年分离自内蒙古巴彦淖尔市乌拉特中旗草原上牧民家庭自然发酵酸牛乳样品中，菌种保藏于内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室乳酸菌菌种资源库(LABCC，保藏乳酸菌菌株6，686株)和国家普通微生物菌种保藏中心(CGMCCNo.6312)。
采用全基因组鸟枪法测定了L.plantarum P-8全基因组序列并进行了功能基因组学分析(Genbank号：CP005942)。结果表明：L.plantarum P-8基因组由1条染色体和6个质粒(BPp1、LBPp2、LBPp3、LBPp4、LBPp5和LBPp6)组成。其中，染色体长度为3，033，693bp，G+C含量为44.8％，共编码3，009个开放阅读框，包括65个tRNA基因和5个rRNA基因簇。分析筛查基因组发现10个涉及细菌素产生的基因簇，包括两个基因编码细菌素肽(LBP_cg0325)和其同源免疫蛋白(LBP_cg0324)，两个基因编码ABC转运系统(LBP_cg0326和LBP_cg0327)，四个基因编码的Ⅱ型CAAX蛋白酶(LBP_cg0328和LBP_cg0331)和两个基因编码细菌的生物合成(LBP_cg0332和LBP_cg0333)。此外，处于染色体基因簇外围的两个孤立细菌素相关基因(LBP_cg1338和LBP_cg2603)编码免疫蛋白。上述L.plantarum P-8的基因组中的信息将有利于分析菌株调节子的调节机制和其益生特性的理解。
人体肠道菌群试验(老年组10人、中年组12人和青年组11人)表明L.plantarum P-8在人体肠道中具有良好定植存留能力，可以在人体肠道中存活超过120天；L.plantarumP-8可以增加肠道内有益菌，例如Bifidobacterium属菌的数量，降低致病菌，例如Clostridium等潜在致病菌的数量，使肠道菌群健康化；L.plantarum P-8会改变宿主肠道微生物的菌群结构，实验表明18个OTUs(operational taxonomic unit，运算的分类单位)变化差异显著，而12个OTUs适度发生调整；L.plantarum P-8可显著降低胆汁酸(BA)代谢水平，显著提高短链脂肪酸(SCFA)代谢水平；L.plantarum P-8可显著提高肠道内分泌性免疫球蛋白A(SIgA)含量。结果表明L.plantarum P-8具有良好的人工胃肠液及胆盐耐受性。
本申请提供的包括植物乳杆菌P-8的复合微生态制剂用于预防肉鸡脂肪沉积的用途，其中，所述肉鸡选自艾拔益加肉鸡。
在一种可实现的方式中，所述用途可以为用作饲养料，所述饲养料为添加有所述复合微生态制剂的鸡饮水。
进一步地，所述鸡饮水中复合微生态制剂活菌总数量为(0.5～3.0)×106CFU/mL，如1×106CFU/mL。
可选地，所复合微生态制剂通过包括以下步骤的方法制备：
步骤1，将冷冻保存的植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9分别于MRS液体培养基中37℃厌氧培养24小时，如此传代培养2次得到3级种子液；
步骤2，将步骤1制得的三种3级种子液全部接种至121℃灭菌20min后的发酵培养基中，37℃恒温厌氧条件发酵，自动控制流加氨水控制发酵过程体系pH＝5.9，至产酸停止，停止流加中和剂氨水，得到高密度培养液，其中，所述发酵培养基包括：乳糖60kg，酵母蛋白胨10kg，大豆蛋白胨10kg，酪蛋白胨5kg，乙酸钠5.0kg，磷酸氢二钾2.0kg，柠檬酸钠2.0kg，MgSO4·7H2O 0.2kg，MnSO4·5H2O 0.05kg，吐温-80 0.5kg，蒸馏水1000L；发酵培养基初始pH值为7.0，并在121℃下灭菌20min；
步骤3，将高密度培养液经14000xg离心提取湿菌体，制得菌泥中活菌数约为2500亿CFU/g，该操作过程料液温度控制为37℃，且发酵罐中持续通入氮气。
本发明人发现，通过上述方法制备的复合微生态制剂中包含苯乳酸等代谢产物，这些代谢产物能够与所述复合微生态制剂协同作用，复合微生态制剂，特别是其中的植物乳杆菌P-8改善肠道菌群，而其代谢产物苯乳酸可以抑制肠道致病菌，从而增加降低肉鸡腹脂的效果。
所述基础日粮包括：
其中，基于1kg计为1重量份。
例如，在养殖期内，饲喂的基础日粮包括：
其中，基于1kg计为1重量份。
在一种可实现的方式中，所述玉米粉可以为现有技术中任意一种玉米粉，如天津市富牧饲料有限公司销售的玉米粉，商品名为玉米粉。
所述次粉为小麦加工的一种副产物，主要包括细碎麸屑和部分小麦胚乳，如灵寿县宝岳矿产品加工厂销售的次粉，商品名为家禽家畜饲料次粉。
所述豆粕为大豆提取豆油后得到的一种副产品，本申请中所用豆粕为一浸豆粕，即，以浸提法提取豆油后的副产品，例如无棣县德大农业有限公司销售的出口级豆粕。
所述玉米蛋白粉为玉米籽粒经食品工业生产淀粉或酿酒工业提纯后的副产品，如无棣县德大农业有限公司销售的饲料级玉米蛋白粉。
所述鱼粉为用一种或多种鱼类为原料，经去油、脱水、粉碎加工后的高蛋白质饲料原料，本申请中使用的鱼粉可以为现有技术中任意一种能够用于鸡饲料的鱼粉，例如海兴县瑞昌饲料有限公司生产销售的鱼粉。
所述石粉可以为现有技术中任意一种能够用于鸡饲料的石粉，例如灵寿县石诺矿产品加工厂生产销售的饲料兽药用滑石粉填料。
所述盐为食用盐。
所述油为食用油，选自大豆油、玉米油、葵花籽油、芝麻籽油、菜籽油、橄榄油等中的一种或者多种，优选为大豆油和/或玉米油。
肉鸡小规模养殖试验(500只)表明，在摄食包括L.plantarum P-8的复合微生态制剂后，肉鸡肠道内潜在的有害菌，如大肠杆菌、弯曲杆菌和脱硫弧菌等菌属的细菌含量显著降低，而肠道内潜在的有益菌，如乳杆菌和双歧杆等菌属的细菌含量显著增加，从而提高了肉鸡的肠粘膜局部免疫水平、体液免疫水平和肠道相关淋巴组织免疫水平，并能够显著提高肉鸡生长性能，例如降低日采食量、增加日增重量和降低料肉比，养殖效果良好。
本发明人发现，肉鸡大规模养殖试验(18万只)表明，在摄食包括L.plantarum P-8的复合微生态制剂后，肉鸡体脂沉积率，尤其是腹脂沉积率明显降低，本发明人认为，可能是因为L.plantarum P-8能够加速脂肪酸的氧化，促进甘油三酯和总胆固醇的分解，通过调节血液中载脂蛋白的代谢，增加粪便中总胆汁酸的排出，对高脂血症模型大鼠血脂代谢具有显著改善作用；L.plantarum P-8可使高血脂动物血清和肝脏中的谷胱甘肽还原酶、超氧化物歧化酶和活力总抗氧化能力显著升高，而丙二醛、血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶含量显著降低，提高宿主的抗氧化水平。具体请参见试验例部分。
此外，使用所述包括植物乳杆菌P-8的复合微生态制剂饲喂肉鸡，能够改善畜禽肠道菌群平衡、促进消化吸收、增强畜禽的免疫功能、促进畜禽健康生长等作用，从而可以提高饲料含氮营养成分利用率，减少粪便中粪臭素和吲哚的排放。
本申请还提供一种用于预防肉鸡脂肪沉积的饲养料，所述饲养料为添加有复合微生态制剂的鸡饮水，其中，所述鸡饮水中的活菌总数量为(1.5～3.0)×106CFU/mL，如2×106CFU/mL。
所述植物乳杆菌P-8发酵液的制备方法请参见前述，在此不再赘述。
试验例
试验例1
(一)复合微生态制剂发酵液的制备
步骤1，将冷冻保存的植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9分别于MRS液体培养基中37℃厌氧培养24小时，如此传代培养2次得到3级种子液；
步骤2，将步骤1制得的三种3级种子液全部接种至121℃灭菌20min后的发酵培养基中，37℃恒温厌氧条件发酵，自动控制流加氨水控制发酵过程体系pH＝5.9，至产酸停止，停止流加中和剂氨水，得到高密度培养液，其中，所述发酵培养基包括：乳糖60kg，酵母蛋白胨10kg，大豆蛋白胨10kg，酪蛋白胨5kg，乙酸钠5.0kg，磷酸氢二钾2.0kg，柠檬酸钠2.0kg，MgSO4·7H2O 0.2kg，MnSO4·5H2O 0.05kg，吐温-80 0.5kg，蒸馏水1000L；发酵培养基初始pH值为7.0，并在121℃下灭菌20min；
步骤3，将高密度培养液经14000xg离心提取湿菌体，制得菌泥中活菌数约为2500亿CFU/g，该操作过程料液温度控制为37℃，且向发酵罐中通入氮气，以保证体系内的压力。
(二)复合微生态制剂在肉鸡饲料中的应用
试验对象：艾拔益加肉鸡(Arbor Acres，简称AA)分三批次进行试验，每批18万只(分9栋鸡舍，每栋2万只)。
养殖方式：网养，公母混养(公鸡的数量:母鸡的数量＝1:1)，养殖密度为12只/m2。
试验方法：每批试验肉鸡随机分成2组，一组对照组，一组试验组，每组9万只，其中，对照组饲喂基础饲料，而试验组分别在饲喂基础饲料的基础上，在肉鸡饮水中饲喂(一)中制备的复合微生态制剂(其中，L.plantarum P-8的活菌数量大于1.5×1010CFU/mL)，试验期为37～43天，具体出栏时间根据死淘率而定，连续3天死淘率达到1％，则判断为可以出栏。
对照组以及试验组在0～30天养殖期内均在基础日粮中添加盐酸林可霉素，养殖至第30日龄时停药，停药期7天以上，直至出栏。
试验组以及对照组的饲喂参数如表1所示，基础日粮组成如表2所示。
表1 肉鸡的饲喂参数
注：养殖至第30日龄时停药，停药期7天以上。
表2 基础日粮组成及营养水平(风干基础％)
注：日粮中盐酸林可霉素添加量为3克/吨饲料，养殖至第30日龄时停药，停药期7天以上。
风干基础％是指在干燥水平下。
表3 基础日粮组成及营养水平(风干基础％)
(三)肉鸡腹脂率的测定
腹脂率＝(腹脂重+肌胃外脂肪重)/活重×100％
试验组的肉鸡腹脂率显著低于对照组(p<0.05)，分别为1.52％和1.94％。
结果如图1所示，由图1可知，摄食含有复合微生态制剂的肉鸡的腹脂率明显降低。
(四)肉鸡肠道菌群的测定
样品来源：试验组以及对照组。
1、DNA提取和16S扩增产物的测序分析
将无菌采集到的粪便样品(每组10只鸡)及时加入保护剂备用，取0.4g粪便样品，参照试剂盒QIAamp DNA Stool Mini Kit(QIAGEN，德国)提取粪便总DNA，ddH2O洗脱后在-20℃条件下贮存备用。
肉鸡粪便样品总DNA提纯后，选取16S rRNA V4-V5可变区作为目的扩增片段，利用含连接序列的引物进行PCR扩增，利用Illumina MiSeq测序仪测序，得到的原始序列经Parallel-QC过滤，剔除其中长度小于400bp和大于800bp的序列、引物或Barcode匹配错误序列和模糊碱基超过6个碱基的同聚体序列，运用Parallel-Meta 3.3平台将剩余的序列和宏基因组数据进行97％相似性的归并，然后利用Green-genes参考基因库进行分类并构建分类操作单元(OTUs)，用于计算不同水平下菌群的相对丰度。通过检测到的全部分类操作单元(OTUs)、香农指数(Shannon Index)、普森指数(Simpson Index)、Chao1指数(Chao1Index)对α多样性进行测定；通过加权Meta-Storms算法主坐标分析(PCoA)对样品间的距离矩阵(β多样性)进行测定，通过含有聚类法的Parallel-Meta 3.3平台、PCoA、α和β多样性、分类学分布和Wilcoxon检验进行数据的统计分析。
2、宏基因组测序和质量控制
所有样品使用Illumina HiSeq2000测序平台进行序列测定，测序建库大小为300bp，双端测序的序列分别从前段和后端测定100bp的长度，使用Sickle工具进行测序质量控制，同时删除属于鸡基因组的序列，剩余的高质量序列全部用于后续的分析。
以Greengene数据库作为参考，将所有的序列鉴定为45个门，在门的水平分析，结果如图2A所示。
由图2A可知，试验组和对照素组中硬壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、软壁菌门(Tenericutes)、放线菌门(Actinobacteria)和芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)六个细菌门的含量最多，分别占到了测序序列总数的63.58％、17.31％、10.87％、7.72％、0.23％和0.09％。试验组和对照组样品总体差异不显著，只有芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)在试验组中的含量(0.08％)显著低于对照组(0.11％)中的含量(p<0.05)。试验组中Firmicutes/Bacteroidetes比值显著低于抗生素组，分别为4.80和7.29(p<0.01)。
各组样品在属的水平上共检测到885个菌属，进一步将含量超过1％的13个菌属进行分析，结果如图2B所示。
由图2B可知，13个菌属中的微生物含量占之和到所有样品的58.34％。乳杆菌属(Lactobacillus)在试验组和对照组中含量分别为17.64％和15.74％，还包括肠球菌属(Enterococcus)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、拟杆菌属(Bacteroides)、明串珠菌属(Trichococcus)、丹毒丝菌(Erysipelothrix)、Facklamia(新菌属，暂无中文译文)、寡源杆菌属(Oligella)和依格纳季氏菌属(Lgnatzschineria)含量分别占14.00％、6.19％、4.56％、2.67％、2.52％、2.47％、2.13％和2.03％，还包括Gallicola(新菌属，暂无中文译文)、Acinetobacter(新菌属，暂无中文译文)、Ruminococus(新菌属，暂无中文译文)和Faecalibacterium(新菌属，暂无中文译文)。
试验组中的乳杆菌属(Lactobacillus)、肠球菌属(Enterococcus)和寡源杆菌属(Oligella)显著高于抗生素组(p<0.05)，试验组中的棒状杆菌属(Corynebacterium)、明串珠菌属(Trichococcus)和Gallicola(新菌属，暂无中文译文)显著低于对照组(p<0.05)。
分别计算试验组和对照组的Firmicutes/Bacteroidetes比值，结果如图1所示，由图1可知，试验组中Firmicutes/Bacteroidetes比值显著低于对照组，分别为4.23和8.15(p<0.01)。
Firmicutes/Bacteroidetes比值与腹脂率呈正相关，即，Firmicutes/Bacteroidetes比值越大，肉鸡的腹脂率越低。
以上结合具体实施方式和范例性实例对本申请进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本申请的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本申请精神和范围的情况下，可以对本申请技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本申请的范围内。本申请的保护范围以所附权利要求为准。
Claims (8)
1.一种用于制备预防肉鸡脂肪沉积饲料的复合微生态制剂，其特征在于，所述复合微生态制剂由植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）P-8，干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）Zhang和双歧杆菌（Bifidobacterium animalis）V9组成，其中，植物乳杆菌P-8的微生物保藏编号为：CGMCC No.6312，干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）Zhang的微生物保藏号为CGMCC No.5469和双歧杆菌（Bifidobacterium animalis）V9的微生物保藏号为CGMCCNo.5470；
所述复合微生态制剂中植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数之比为植物乳杆菌P-8的活菌数:干酪乳杆菌Zhang的活菌数:双歧杆菌V9的活菌数=（0.5~1.5）:（0.5~1.5）:（0.5~1.5）。
2.根据权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于，所述复合微生态制剂中植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数之比为植物乳杆菌P-8的活菌数:干酪乳杆菌Zhang的活菌数:双歧杆菌V9的活菌数=1:1:1。
3.根据权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于，在鸡饮水中添加有所述复合微生态制剂，其中，基于所述鸡饮水的总体积，所述鸡饮水中活菌总数量为（0.5~3.0）×106CFU/mL，其中，所述活菌总数量为植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数量之和。
4.根据权利要求3所述的复合微生态制剂，其特征在于，在鸡饮水中添加有所述复合微生态制剂，其中，基于所述鸡饮水的总体积，所述鸡饮水中活菌总数量为1×106CFU/mL，其中，所述活菌总数量为植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9的活菌数量之和。
5.根据权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于，所述复合微生态制剂由包括以下步骤的方法制备：
步骤1，将冷冻保存的植物乳杆菌P-8，干酪乳杆菌Zhang和双歧杆菌V9分别于MRS液体培养基中37℃厌氧培养24小时，如此传代培养2次得到3级种子液；
步骤2，将步骤1制得的三种3级种子液全部接种至121℃灭菌20min后的发酵培养基中，37℃恒温厌氧条件发酵，自动控制流加氨水控制发酵过程体系pH=5.9，至产酸停止，停止流加中和剂氨水，得到高密度培养液，其中，所述发酵培养基包括：乳糖60kg，酵母蛋白胨10kg，大豆蛋白胨10 kg，酪蛋白胨5kg，乙酸钠5.0kg，磷酸氢二钾2.0kg，柠檬酸钠2.0kg，MgSO4·7H2O 0.2 kg，MnSO4·5H2O 0.05kg，吐温-80 0.5kg，蒸馏水1000 L；发酵培养基初始pH值为7.0，并在121℃下灭菌20min；
步骤3，将高密度培养液经14000xg离心提取湿菌体，制得菌泥中活菌数为2500亿CFU/g，该操作过程料液温度控制为37℃，且向发酵罐中通入氮气。
6.根据权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于，所述肉鸡为艾拔益加肉鸡。
7.根据权利要求1所述的复合微生态制剂，其特征在于，在养殖期内，饲喂的基础日粮包括：
玉米粉 500~600重量份
次粉 100~200重量份
豆粕 100~200重量份
玉米蛋白粉 100~180重量份
鱼粉 6~20重量份
磷酸氢钙 7~25重量份
石粉 8~25重量份
盐 1~5重量份
油 1~20重量份，
其中，基于1kg计为1重量份。
8.根据权利要求7所述的复合微生态制剂，其特征在于，在养殖期内，饲喂的基础日粮包括：
玉米粉 525重量份
次粉 140重量份
豆粕 160重量份
玉米蛋白粉 130重量份
鱼粉 10重量份
磷酸氢钙 15重量份
石粉 15重量份
盐 2重量份
油 3重量份，
其中，基于1kg计为1重量份。
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