CN108434267A - 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用 - Google Patents

一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108434267A
CN108434267A CN201810603544.5A CN201810603544A CN108434267A CN 108434267 A CN108434267 A CN 108434267A CN 201810603544 A CN201810603544 A CN 201810603544A CN 108434267 A CN108434267 A CN 108434267A
Authority
CN
China
Prior art keywords
petroleum ether
extract
cauline leaf
avicennia marina
extraction
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810603544.5A
Other languages
English (en)
Inventor
侯小涛
邓家刚
郝二伟
杜正彩
罗花
谢金玲
谭德超
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi University of Chinese Medicine
Original Assignee
Guangxi University of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi University of Chinese Medicine filed Critical Guangxi University of Chinese Medicine
Priority to CN201810603544.5A priority Critical patent/CN108434267A/zh
Publication of CN108434267A publication Critical patent/CN108434267A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/85—Verbenaceae (Verbena family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明提供一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用，涉及医药技术领域，本本发明提供的白骨壤茎叶石油醚萃取物制备工艺简单可控，提取效率高，且活性成分不易被破坏，得到的白骨壤茎叶石油醚萃取物对人非小细胞肺癌细胞A549具有非常明显的抑制作用，有望进一步开发成为抗肿瘤的药物。

Description

一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的 应用
【技术领域】
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用。
【背景技术】
白骨壤是红树林的一种，因其茎秆呈白色而得名。白骨壤具有以种子进行有性繁殖的能力，根系发达，分布在土壤浅层的水平根系宽度相当于其树冠的3-5倍，最长可达8米多，营养面宽能广泛吸收土壤中的养分，具有发达的指状气生根，适宜生长于贫瘠的沙质裸露潮滩上。因此，白骨壤被称为红树林先锋树种。
白骨壤的果实富含淀粉，直径1-2cm，无毒，可作为人类食物或猪的饲料，在60年代困难时期，曾大量采摘作为食物，主要用于配制各类菜肴，如加油盐炒制肉类，具独特风味。广西白骨壤果实已作为宴会上的珍肴。福建厦门沧海镇居民，曾采摘果实，去涩后，盐浸作早菜配稀饭用。民间经验表明不同土壤上生长的白骨壤，果实食用品质迥异。在泥质滩涂上生长的无苦味，质软；在沙质滩涂上生长的则略带苦味，质硬。白骨壤果实除作为粮食,菜肴或以盐浸做早菜的形式直接作为人类食物外，还能作为酿酒的原料，现也较多用做猪的饲料。白骨壤的树叶是牛羊喜欢啃食的青饲料。
通过查阅大量文献，申请人发现，现有对白骨壤的利用中，多是对其果实进行加工，生产酒类、饲料以及各类食品等，而对白骨壤茎叶的利用少之又少，对其茎叶石油醚萃取物的制备方法、应用的研究至今未见报道。
【发明内容】
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用，本发明提供的白骨壤茎叶石油醚萃取物制备工艺简单可控，提取效率高，且活性成分不易被破坏，得到的白骨壤茎叶石油醚萃取物对人非小细胞肺癌细胞A549具有非常明显的抑制作用，有望进一步开发成为抗肿瘤的药物。
为了解决上述技术问题，本发明采用了如下的技术方案：
一种白骨壤茎叶石油醚萃取物，由包括以下步骤的方法萃取得到：
(1)将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
(2)取步骤(1)所得白骨壤粉末加入pH为4.0-5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于90-98％(v/v)的乙醇内进行冷浸6-8天；
(3)将步骤(2)处理后的物料，利用超声波提取1-2h，然后进行震荡处理，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
(4)将步骤(3)所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为4-9:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1-1.5:1，用力振摇后，静置1.5-2.5小时，分出上层石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为35-40℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
(5)将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
本发明中，进一步地，所述步骤(3)中超声波提取法的操作参数为：超声频率为25-35KHz，超声功率为450-550W，提取温度为35-45℃。
本发明中，进一步地，所述步骤(3)中震荡处理的时间为20-24h。
本发明中，进一步地，所述步骤(4)中的萃取是采用石油醚对所述粗提物液进行连续萃取2-4次，并合并石油醚层。
本发明还提供一种白骨壤茎叶石油醚萃取物的制备方法，包括以下步骤：
a.将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
b.取步骤a所得白骨壤粉末加入pH为4.0-5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于90-98％(v/v)的乙醇内进行冷浸6-8天；
c.将步骤b处理后的物料，利用超声波提取1-2h，超声波提取法的操作参数为：超声频率为25-35KHz，超声功率为450-550W，提取温度为35-45℃；然后进行震荡处理20-24h，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
d.将步骤c所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为4-9:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1-1.5:1，用力振摇后，静置1.5-2.5小时，分出上层石油醚层，连续萃取2-4次，并合并石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为35-40℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
e.将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
本发明中，进一步地，所述步骤c中超声波提取法的操作参数为：超声频率为30KHz，超声功率为500W，提取温度为40℃。
最后，本发明提供白骨壤茎叶石油醚萃取物在肺癌防治或治疗中的应用。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1.本发明提供的白骨壤茎叶石油醚萃取物首先在体积百分浓度为85-98％的乙醇中的提取，得到粗提取物，将粗提取物浸膏用水溶解得到粗提液，接着依次用石油醚进行多次萃取并合并石油醚层，再将浓缩液减压干燥至恒重，即可得到白骨壤茎叶石油醚萃取物；研究表明，本发明的白骨壤石油醚萃取物对人非小细胞肺癌细胞A549具有非常明显的抑制作用，有望进一步开发成为抗肿瘤的药物，应用于肺癌的治疗或制备治疗肺癌的药物，为肺癌疾病的预防治疗指明了新的方向。
2.本发明提供的白骨壤茎叶石油醚萃取物的制备方法中，针对乙醇的提取率进行深入研究，为后续石油醚的萃取奠定良好基础，在乙醇提取阶段，提取前添加缓冲溶液有效地减小或消除白骨壤从生长环境中携带的各种复杂基质，在其自然界存在的边界范围内影响提取物的纯度，另外，缓冲溶液能够维持pH相对稳定性能，使得pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生变化；在提取过程中在采用超声提取后结合震荡处理，此时超声波作用于液体介质引起介质的振动，当振动处于稀疏状态在介质中形成许多类似真空的空洞，这些空洞的瞬间闭合引起高压，同时还将产生局部高温，可造成白骨壤茎叶细胞壁以及整个生物体瞬间破裂，使得溶液能够渗透到白骨壤茎叶的细胞中，细胞对组织的破坏性更彻底，加速白骨壤茎叶中的有效成分溶解，可大大提高了提取率，缩短提取时间，得到的化学成分结构和性质也不会改变，根据实验研究，该阶段的提取率高达93.23％以上。
综上所述，本发明提供的白骨壤茎叶石油醚萃取物制备工艺简单可控，提取效率高，且条件温和，活性成分不易被破坏，得到的白骨壤茎叶石油醚萃取物对人非小细胞肺癌细胞A549具有较好的抑制作用，有望进一步开发成为抗肿瘤的药物。
【附图说明】
图1为不同浓度白骨壤石油醚萃取物对A549增殖的抑制作用对比图。
【具体实施方式】
下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明，但不可以以任何方式限制本发明。
实施例1
本实施例所提供的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物是通过以下方法提取得到的：
a.将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
b.取步骤a所得白骨壤粉末加入pH为4.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于90％(v/v)的乙醇内进行冷浸6天；
c.将步骤b处理后的物料，利用超声波提取1h，超声波提取法的操作参数为：超声频率为25KHz，超声功率为450W，提取温度为35℃；然后进行震荡处理20h，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
d.将步骤c所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为4:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1:1，用力振摇后，静置1.5小时，分出上层石油醚层，连续萃取2次，并合并石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为35℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
e.将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
本实施例中的白骨壤茎叶石油醚萃取物应用在肺癌防治或治疗中。
实施例2
本实施例所提供的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物是通过以下方法提取得到的：
a.将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
b.取步骤a所得白骨壤粉末加入pH为4.7的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于95％(v/v)的乙醇内进行冷浸7天；
c.将步骤b处理后的物料，利用超声波提取1.5h，超声波提取法的操作参数为：超声频率为30KHz，超声功率为500W，提取温度为40℃；然后进行震荡处理22h，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
d.将步骤c所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为7:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1.2:1，用力振摇后，静置2小时，分出上层石油醚层，连续萃取3次，并合并石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为37℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
e.将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
本实施例中的白骨壤茎叶石油醚萃取物应用在肺癌防治或治疗中。
实施例3
本实施例所提供的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物是通过以下方法提取得到的：
a.将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
b.取步骤a所得白骨壤粉末加入pH为5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于98％(v/v)的乙醇内进行冷浸8天；
c.将步骤b处理后的物料，利用超声波提取2h，超声波提取法的操作参数为：超声频率为35KHz，超声功率为550W，提取温度为45℃；然后进行震荡处理24h，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
d.将步骤c所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为9:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1.5:1，用力振摇后，静置2.5小时，分出上层石油醚层，连续萃取4次，并合并石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为40℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
e.将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
本实施例中的白骨壤茎叶石油醚萃取物应用在肺癌防治或治疗中。
对比例
本对比例提供白骨壤茎叶在乙醇提取阶段中采用超声提取的效果对比。
对于白骨壤茎叶的超声波提取中，主要考虑超声波的频率、功率、温度和时间，不同的植物成分所需的参数不同，超声提取时间对天然产物提取率和对其有效时间成分有影响：
a.一些有效成分提取率，随着超声作用时间增加而增大；
b.提取率随着超声时间的增加逐渐增高，超过一定时间后，超声时间再延长，提取率增加缓慢；
c.提取率随着超声作用时间增加，在某一时刻达到一个极限值后，提取率反而减小。
申请人在发现白骨壤石油醚萃取物对于肺癌治疗具有积极作用后，致力于研究如何提高白骨壤提取物的提取率，白骨壤在进行石油醚萃取之前首先进行乙醇提取，乙醇提取的提取率关乎后期石油醚的萃取率，为了提高原料利用率，申请人按照以下参数分别进行乙醇提取阶段的实验，除了超声波提取参数不同，其他方法均相同，数据记录如表1所示：
表1超声波提取参数对白骨壤茎叶乙醇提取阶段提取率的影响
根据上表得知，在超声频率为30KHz，超声功率为500W，提取温度为40℃，提取时间为1.5h时，白骨壤茎叶乙醇提取物的提取率最高，高达95.32％，而在提取参数分别低于上述参数或者高于上述参数时，其提取率都低于本发明实施例2中的提取参数(即超声频率为30KHz，超声功率为500W，提取温度为40℃，提取时间为1.5h)，说明了本发明实施例2中所述的超声提取参数为白骨壤乙醇提取的最佳提取参数，为后期石油醚萃取奠定了良好基础。
试验例
本实施例是对白骨壤茎叶石油醚萃取物的应用进行试验，即本发明提供白骨壤茎叶石油醚萃取物在肺癌防治或治疗中的应用。
以下采用的白骨壤茎叶石油醚萃取物均为实施例2中所述的白骨壤茎叶石油醚萃取物。
一、细胞株及培养条件
细胞株：采用人非小细胞肺癌细胞A549作为细胞株，培养条件：将该细胞培养在含有10％胎牛血清、100U/mL的青霉素、100μg/mL链霉素的培养基F12K中，于37℃，5％CO2恒温孵箱中培养。
二、体外肿瘤细胞生长抑制实验(MTS法)
将对数生长期的细胞种植在96孔板中，每孔2000个细胞，每组设置3个复孔，置于37℃，5％CO2恒温孵箱中过夜贴壁后给药。石油醚萃取物设六个给药梯度组(46.875，62.5，93.75，125，187.5，250μg/mL)，每组给药组分别设置相应的药物颜色扣除孔，以及培养液对照组、DMSO对照组，设置3块板，分别进行24、48、72h的检测。给药后置于37℃，5％CO2恒温孵箱中进行常规培养。
分别在培养24、48、72h后，每孔加入20μL完全融化后的Cell Titer 96 AqueousOne Solution Reagent，然后将细胞放回培养箱中继续培养2h，于酶标仪上在490nm波光处处读取吸光度值。
其中，细胞活力(％)＝药物干预组/对照组×100％。用SPSS 21检验统计分析，求出IC50。
三、试验结果
1.白骨壤茎叶石油醚萃取物对人肺非小细胞癌细胞A549的抑制作用
如图1所示，结果表明，白骨壤石油醚萃取物干预24h、48h、72h，在46.88μg/mL、62.50μg/mL、125μg/mL、187.5μg/mL、250μg/mL浓度时，均对人肺非小细胞癌细胞A549有非常明显的抑制作用，且成剂量依赖性。
2.白骨壤茎叶石油醚萃取物抑制人非小细胞肺癌细胞A549的IC50
表1白骨壤茎叶石油醚萃取物抑制人非小细胞肺癌细胞A549的IC50
综上所述，可知白骨壤茎叶石油醚萃取物对人非小细胞肺癌细胞A549具有非常明显的抑制作用，本发明的白骨壤茎叶石油醚萃取物，作为活性成分在肺癌防治或治疗中具有重要用途，有望进一步开发成为抗肿瘤的药物。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (7)

1.一种白骨壤茎叶石油醚萃取物，其特征在于，由包括以下步骤的方法提取得到：
(1)将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
(2)取步骤(1)所得白骨壤粉末加入pH为4.0-5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于90-98％(v/v)的乙醇内进行冷浸6-8天；
(3)将步骤(2)处理后的物料，利用超声波提取1-2h，然后进行震荡处理，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
(4)将步骤(3)所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为4-9:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1-1.5:1，用力振摇后，静置1.5-2.5小时，分出上层石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为35-40℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
(5)将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
2.根据权利要求1所述的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物，其特征在于，所述步骤(3)中超声波提取法的操作参数为：超声频率为25-35KHz，超声功率为450-550W，提取温度为35-45℃。
3.根据权利要求1所述的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物，其特征在于，所述步骤(3)中震荡处理的时间为20-24h。
4.根据权利要求1所述的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物，其特征在于，所述步骤(4)中的萃取是采用石油醚对所述粗提物液进行连续萃取2-4次，并合并石油醚层。
5.一种白骨壤茎叶石油醚萃取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.将白骨壤晒干，分拣茎叶、叶，粉碎；
b.取步骤a所得白骨壤粉末加入pH为4.0-5.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，然后于90-98％(v/v)的乙醇内进行冷浸6-8天；
c.将步骤b处理后的物料，利用超声波提取1-2h，超声波提取法的操作参数为：超声频率为25-35KHz，超声功率为450-550W，提取温度为35-45℃；然后进行震荡处理20-24h，滤过后，使用真空旋转蒸发仪在温度低于60℃的条件下回收乙醇，减压浓缩至无醇味，得到粗提取物浸膏；
d.将步骤c所得粗提取物浸膏加水，其中加水与粗提取物浸膏的重量比为4-9:1，在充分混合后，得到粗提取液，接着用石油醚进行萃取，体积比为石油醚:水＝1-1.5:1，用力振摇后，静置1.5-2.5小时，分出上层石油醚层，连续萃取2-4次，并合并石油醚层，于旋转蒸发仪中减压回收石油醚，温度为35-40℃，浓缩液放入真空干燥箱中减压干燥至恒重，得到白骨壤茎叶石油醚提取物；
e.将通过肿瘤细胞的细胞毒性筛选的萃取物溶解于DMSO中，配成100mg/mL的储备液，并用0.22μm过滤筛过滤后分装于EP管，保存于-20℃下待用。
6.根据权利要求5所述的一种白骨壤茎叶石油醚萃取物的制备方法，其特征在于，所述步骤c中超声波提取法的操作参数为：超声频率为30KHz，超声功率为500W，提取温度为40℃。
7.根据权利要求1所述的白骨壤茎叶石油醚萃取物在肺癌防治或治疗中的应用。
CN201810603544.5A 2018-06-12 2018-06-12 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用 Pending CN108434267A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810603544.5A CN108434267A (zh) 2018-06-12 2018-06-12 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810603544.5A CN108434267A (zh) 2018-06-12 2018-06-12 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108434267A true CN108434267A (zh) 2018-08-24

Family

ID=63206184

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810603544.5A Pending CN108434267A (zh) 2018-06-12 2018-06-12 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108434267A (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102731242A (zh) * 2011-04-12 2012-10-17 中国科学院上海药物研究所 二萜化合物豆荚丙素或丁素及其在制备药物中的用途
CN103141781A (zh) * 2013-03-20 2013-06-12 黎雁欣 白骨壤果实的加工工艺
CN103913445A (zh) * 2013-01-08 2014-07-09 广西壮族自治区民族医药研究院(广西壮医医院) 一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102731242A (zh) * 2011-04-12 2012-10-17 中国科学院上海药物研究所 二萜化合物豆荚丙素或丁素及其在制备药物中的用途
CN103913445A (zh) * 2013-01-08 2014-07-09 广西壮族自治区民族医药研究院(广西壮医医院) 一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法
CN103141781A (zh) * 2013-03-20 2013-06-12 黎雁欣 白骨壤果实的加工工艺

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LE THANH PHUOC: "白骨壤的化学成分，石油醚萃取物生物活性和营养成分研究", 《TAP CHI KHOA HOC TRUONG DAI HOC CAN THO》 *
周东坡 等: "《生物制品学》", 31 May 2007, 化学工业出版社 *
孔令义: "《天然药物化学》", 31 August 2015, 中国医药科技出版社 *
韩丽: "《实用中药制剂新技术》", 30 November 2002, 化学工业出版社 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103931454B (zh) 一种水蜜桃的种植方法
CN102209550B (zh) 含有来自包括野山参或人参的人参类形成层的植物干细胞系为有效成分的用于预防或治疗癌症的组成物
CN108157948A (zh) 一种燕窝提取物及冰糖燕窝的加工方法
JP2008100999A (ja) ジンセノサイド成分含量の多い人参果実と人参花柄の製造方法
CN104335811B (zh) 一种紫甘薯的栽培方法及加工紫甘薯全粉的方法
CN105154297A (zh) 一种养生、保健虫草酒的制备新方法
CN108434267A (zh) 一种白骨壤茎叶石油醚萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用
CN108434265A (zh) 一种白骨壤茎叶乙酸乙酯萃取物及其制备方法与在肺癌中的应用
CN108434266A (zh) 一种白骨壤茎叶乙醇提取物及其制备方法与在肺癌中的应用
KR100610983B1 (ko) 인삼배지를 이용한 동충하초의 재배방법
JPS60149321A (ja) きのこ類の栽培方法
CN102048165B (zh) 用于生产具有一被降低的嘌呤化合物含量的食品产品的方法及该食品产品
KR20100053179A (ko) 미생물 발효를 통한 발효산물로 기능성 벌꿀을 제조하는 방법 및 기능성 벌꿀
KR102143704B1 (ko) 사포닌을 함유한 액상 첨가제의 제조방법
Hutami et al. Shoot multiplication of taro (Colocasia esculenta var. Antiquorum) through in vitro culture
CN106386968A (zh) 一种虫草花养生蛋糕
CN115011485A (zh) 桑黄之菌丝体及/或其衍生物、其制造方法及其用于制备改善睡眠之组成物的用途
CN105506021B (zh) 一种含紫杉醇培养组合物及其制备方法
KR101797663B1 (ko) 동충하초로 고상발효된 사포닌 함유 생약재 조성물의 제조방법
CN108611279A (zh) 一种囊孔附毛菌的驯化方法及驯化的囊孔附毛菌和应用
JPH0959172A (ja) Ｎｇｆ産生誘導剤及び飲食品
CN109875031A (zh) 一种改良蛹虫草功效组分提取物的复合方法
CN107929331A (zh) 一种珊瑚拟青霉提取物在抗糖尿病中的应用
CN107711283A (zh) 一种鸡腿菇的栽培方法
CN106381270A (zh) 利用水稻叶片提取液提高小球藻叶绿素产量的培养方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20180824