CN103913445A - 一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药配方微量元素检测鉴定技术领域，具体涉及一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法。为了解决人类对肿瘤病症中药材微量元素治疗效果现有技术的不足，本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法是：将白骨壤样品在30-70℃烘干粉碎，用20-80目筛子筛取样品，将每份样品一分为二，一份为待测样品，另一份为加样回收实验样品。取待测样品，称取0.1000-1.0000g，装入特氟龙消解罐中，加入1-10ml硝酸与1-4ml过氧化氢，置于通风橱中放置过夜，同时做三个平行和空白实验。采用MARS-5型高压微波消解仪按照设定程序进行消解，将经过消解完成后的待测样品采用710-ES型电感耦合等离子体发射光谱仪进样测定。该方法操作简便、快速准确、灵敏度高。

Description

一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法

技术领域

本发明涉及中药配方微量元素检测鉴定技术领域，具体涉及一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法。

技术背景

白骨壤果实中含有多种生命元素，如Mg、Zn、Fe、Cu、V等，其中Mg含量较高，达1123.25mg/kg，这些微量元素是酶和维生素不可缺少的激活剂，对维持核酸的正常代谢有重要作用。人体内若长期缺Mg有可能导致染色体突变，而此种突变会诱发肿瘤，缺Mg可能会使免疫功能降低，使肿瘤细胞得以迅速增殖，提示Mg有抗突变、抗肿瘤、提高免疫功能，值得深入研发。Zn参与体内100多种酶的合成缺乏锌可降低有关酶的活性而影响人体生长发育、免疫防卫、创伤愈合、生殖生育等生理功能；Cu具有合成酶和活化血红蛋白功能；Fe是组织代谢不可缺少的物质，参与体内多种反应的催化，主要存在于血红蛋白、肌红蛋白和多种酶内；V促进骨骼造血，降血压促生长，参与脂肪和胆固醇及辅酶代谢等。现代研究证明Mg、Zn、Fe、Cu、V等微量元素与对抗肿瘤的发生发展过程密切相关。

发明内容

本发明的目的是为了解决人类对肿瘤病症中药材微量元素治疗效果现有技术的不足以及抵抗肿瘤对人类健康的威胁，公开一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法。

该方法操作简便、快速准确、灵敏度高，需要样品量和前处理所需试剂量均较少，能够降低污染和防止组分的挥发，且一次进样可同时测定白骨壤果实中抗肿瘤的多种微量元素，该方法也可以为测定其它果实中的微量元素提供参考方法和理论依据。

具体实施方式

本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法是：

(1)、准备实验仪器为：710-ES型电感耦合等离子体发射光谱仪；发射功率：1000-1500W；等离子气流量：10-20L/min；辅助气流量：0.5-2.0L/min；雾化气压：100-300kPa；泵速：10-20r/min；进样延迟时间为30s；观测位置自动优化；采用不自动积分；读数次数为5次。其中等离子体气、辅助气、雾化气均为氩气。

MARS-5型高压微波消解仪(美国CEM)。

Milli-Q型纯水制备系统(美国MILIIPORE)。

(2)、准备试剂与标准溶液：

通过Milli-Q型纯水制备系统制备实验用超纯水用于稀释试剂溶液。

准备硝酸(优级纯)、过氧化氢(优级纯)、浓硫酸(分析纯)。

标准储备液：Zn，Ni，Fe，Mn，Cr，Mg，V，As，Cd，Pb，Cu，Ba，Al，B元素单标，其溶液为均为1000μg/ml，基体介质为5％硝酸。

混合标准液：将标准储备液用5％硝酸逐级稀释，混合至Zn，Ni，Fe，Mn，Cr，Mg，V，As，Cd，Pb，Cu，Ba等元素的浓度分别为0.00，0.01μg/ml，0.10μg/ml，1.00μg/ml，10μg/ml和20μg/ml。

仪器调谐液：浓度为5mg/L的Mn元素标准溶液。

(3)、取样处理步骤如下：将白骨壤样品在30-70℃烘干粉碎，用20-80目筛子筛取样品，将每份样品一分为二，一份为待测样品，另一份为加样回收实验样品。取待测样品，称取0.1000-1.0000g，装入特氟龙消解罐中，加入1-10ml硝酸与1-4ml过氧化氢，置于通风橱中放置过夜，同时做三个平行和空白实验。采用MARS-5型高压微波消解仪按照设定程序(见表1)进行消解，消解完成后，取出消解罐冷却，把消解罐中的溶液全部转移至25-50ml容量瓶中，用5％硝酸定容，待测。

表1高压微波消解仪的消解程序

实施例一

本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法一是将白骨壤样品在30-70℃烘干粉碎，用20-80目筛子筛取样品，将每份样品一分为二，一份为待测样品，另一份为加样回收实验样品。取待测样品，称取0.1000-1.0000g，装入特氟龙消解罐中，加入1-10ml硝酸与1-4ml过氧化氢，置于通风橱中放置过夜，同时做三个平行和空白实验。采用MARS-5型高压微波消解仪按照设定程序进行消解，消解完成后，取出消解罐冷却，把消解罐中的溶液全部转移至25-50ml容量瓶中，用5％硝酸定容，待测。

使用调谐液对仪器条件进行最优化调节，使仪器灵敏度最高，准确度最好，然后取混合标准液各适量，将经过消解完成后的待测样品采用710-ES型电感耦合等离子体发射光谱仪进样测定，在仪器达到优化条件下进行测定，以待测物质的量为横坐标，相应的信号值为纵坐标绘制标准曲线，得线性回归方程，计算样品各种量元素的浓度。通过ICP-OES(电感耦合等离子体发射光谱法)，待等离子体点燃并稳定半小时后，进调谐液进行炬扫描，以优化ICP的观测位置。ICP-OES对每个元素的测定都同时选择多条特征谱线，而且光谱仪具有同步校正功能，因此实验中对每个测定元素选取3条谱线进行测定，每个样品测定3次，综合分析强度、干扰情况及稳定性，选择谱线干扰少、精密度好的分析线。结果见表2。在仪器的最佳工作条件下，制作各元素的标准曲线，根据标准曲线对样品进行测定。

表2元素的分析波长

对样品空白溶液和样品重复测定11次，取3倍标准偏差所对应的浓度为各元素的检出限，各元素相应的RSD为结果见表3。

表3方法的检出限与相对标准偏差

实验结论

本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法测定微量元素的相对标准偏差(RSD)在0.8-3.6％之间，表明该方法的精密度较高。

实施例二

本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法二是将白骨壤样品在30-70℃烘干粉碎，用20-80目筛子筛取样品，将每份样品一分为二，一份为待测样品，另一份为加样回收实验样品。取待测样品，称取0.1000-1.0000g，装入特氟龙消解罐中，加入1-10ml硝酸与1-4ml过氧化氢，置于通风橱中放置过夜，同时做三个平行和空白实验。采用MARS-5型高压微波消解仪按照设定程序进行消解，消解完成后，取出消解罐冷却，把消解罐中的溶液全部转移至25-50ml容量瓶中，用5％硝酸定容，待测。

使用调谐液对仪器条件进行最优化调节，使仪器灵敏度最高，准确度最好，然后取混合标准液各适量，将经过消解完成后的待测样品采用710-ES型电感耦合等离子体发射光谱仪进样测定，在仪器达到优化条件下进行测定，以待测物质的量为横坐标，相应的信号值为纵坐标绘制标准曲线，得线性回归方程，计算样品各种量元素的浓度。

通过ICP-OES(电感耦合等离子体发射光谱法)，待等离子体点燃并稳定半小时后，进调谐液进行炬扫描，以优化ICP的观测位置。在仪器的最佳工作条件下，制作各元素的标准曲线，根据标准曲线对样品进行测定。

为了评价方法的准确度，对样品进行加标回收试验，3次平行试验，取其回收率平均值。准确称取加样回收实验样品0.5000g，并加入与被测元素含量相近的混合标样，在同等条件下消解处理并测定。由表4可以看出，14种元素回收率介于95.5％～102.2％，说明此方法对于白骨壤果实中这14种微量元素的测定准确、可靠。

表4样品回收率

按上述测定方法二的测定方法每个样品重复测定三次。结果见表5。

表5白骨壤中微量元素含量

实验结论

本发明一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法测定微量元素从表5可以看出，白骨壤果实中含有丰富的微量元素，其中Mg含量较高、Fe次之，最低位As，未检出。

Claims (4)

1.一种红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法，其特征在于：取样处理步骤是：将白骨壤样品在30-70℃烘干粉碎，用20-80目筛子筛取样品，将每份样品一分为二，一份为待测样品，另一份为加样回收实验样品。取待测样品，称取0.1000-1.0000g，装入特氟龙消解罐中，加入1-10ml硝酸与1-4ml过氧化氢，置于通风橱中放置过夜，同时做三个平行和空白实验。

2.根据权利要求1所述的红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法，其特征在于：准备实验仪器为：710-ES型电感耦合等离子体发射光谱仪；MARS-5型高压微波消解仪；Milli-Q型纯水制备系统。

3.根据权利要求1所述的红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法，其特征在于：实验试剂与标准溶液为：硝酸(优级纯)、过氧化氢(优级纯)、浓硫酸(分析纯)；标准储备液：Zn，Ni，Fe，Mn，Cr，Mg，V，As，Cd，Pb，Cu，Ba，Al，B元素单标，其溶液为均为1000μg/ml，基体介质为5％硝酸。

4.根据权利要求1所述的红树植物白骨壤果实中抗肿瘤微量元素的测定方法，其特征在于：待测样品采用MARS-5型高压微波消解仪按照设定程序进行消解，消解完成后，取出消解罐冷却，把消解罐中的溶液全部转移至25-50ml容量瓶中，用5％硝酸定容，待测。