CN108398555A - 一种胃蛋白酶原i（pgi）检测试剂盒及其检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，包括试剂R1和R2；试剂R1包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 300 0.5g/L、聚乙二醇6000 10g/L、曲拉通100 1g/L、TRIS 10g/L；试剂R2包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液1.3mg/mL)、Proclinc 300 0.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油90g/L。其检测方法包括如下步骤：分离血清样品，向血清样品中加入试剂R1，混匀，孵育3‑5min后，加入R2混匀孵育30s后，于700nm波长下检测吸光度值A1，5min后，于700nm波长下检测吸光度值A2，通过血清标准品数据计算胃蛋白酶原I的含量，本发明显著提高了测定试剂的灵敏度和稳定性，具有灵敏度高、精密度高、试剂稳定等特点。

Description

一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，具体为一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法。
背景技术
胃蛋白酶原(Pepsinogen，PG)是胃液中胃蛋白酶的无活性前体，是分子量42000Da的单链多肽，在胃内转变为具有活性的胃蛋白酶。根据生化性质、免疫原性、细胞来源及组织内分布，胃蛋白酶原可分成胃蛋白酶原I(PGI)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)两个亚群：其中1～5组分免疫原性近似，称为PGI(PGA)，主要由胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌；6～7组分免疫原性近似，被称为PGⅡ(PGC)，除由上述两种细胞分泌外，幽门腺的黏液细胞、贲门腺以及十二指肠上段的Brunner腺也能产生PGⅡ，胃粘膜合成的PGⅡ约为总量的25％。
正常情况下，胃粘膜产生的胃蛋白酶原大部分进入胃腔，遇酸后肽链分解活化为胃蛋白酶，发挥其消化蛋白质的作用；小部分胃蛋白酶原则透过胃粘膜毛细血管进入血循环。血清胃蛋白酶原浓度可反映胃粘膜的分泌水平，不同胃蛋白酶原浓度水平也可反映不同部位胃粘膜的功能和形态变化。PGI是检测胃泌酸腺细胞功能的指针，胃酸分泌增多PGI升高，分泌减少或胃粘膜腺体萎缩PGI降低。通过其血清测量值的不同，在各胃部疾病中均有不同程度的改变，为临床提供可靠的诊断价值。
目前现有技术中，胃蛋白酶原I(PGI)的检测方法包括酶联免疫吸附测定(ELISA)、化学发光免疫分析法(CLIA)等。酶联免疫吸附测定，该方法检测灵敏度高但操作过程略显复杂，测定时间较长，影响因素多，且不适合急诊样本的检测；化学发光免疫分析法检测，化学发光免疫分析包含两个部分，即免疫反应系统和化学发光分析系统。将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体)直接标记在抗原(化学发光免疫分析)或抗体(免疫化学发光分析)上，或酶作用于发光底物。该方法检测可以自动化操作、精确度高但设备昂贵、稳定性较差。
发明内容
本发明的目的在于提供一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，通过特定的制备方法和优化反应体系显著提高了测定试剂的灵敏度和稳定性，具有灵敏度高、精密度高、试剂稳定等优点，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，包括试剂R1和R2；所述试剂R1包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L；所述试剂R2包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、稳定剂甘油90g/L。
优选的，所述试剂盒基于胶乳免疫比浊法进行制备，胶乳免疫比浊法的测定原理为：样品中的PGI和被乳状液粒吸附的抗体引起抗原抗体反应，形成免疫复合物，在700nm波长处检测其浊度的变化，其变化程度与样本中的PGI含量成正比。
优选的，所述试剂盒中助悬剂聚乙二醇6000的用量调整为10g/L。
优选的，所述试剂盒中表面活性剂曲拉通100的用量调整为1g/L。
优选的，所述试剂盒所涉及的试剂组分或仪器均为常规市售产品，或可通过本领域的常规技术手段获得。
优选的，所述试剂R2中乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液)的制备方法如下：
S1：取2mL羧基化的胶乳微球(150nm，5％w/v)用磷酸盐缓冲液至4ml；
S2：加入50ml 0.2g/L的N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和50ml 0.2g/L的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化，搅拌均匀后37℃孵育20min；
S3：加入3mL磷酸盐缓冲液10000rpm离心30min，除去上清液，以去除未反应完的NHS和EDC，然后用磷酸盐缓冲液重悬颗粒；
S4：抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体的加入浓度以与聚苯乙烯胶乳微球颗粒的质量比为(0.2)：1的比例加入，37℃孵育4小时；
S5：加入3mL终止液终止反应，室温下搅拌3小时后，4℃保存备用，终止液为含20％BSA的磷酸盐缓冲液。
本发明提供另一种技术方案为：一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒的检测方法，包括以下步骤：
S1：分离血清样品，向血清样品中加入试剂R1，混匀，孵育3-5min；
S2：加入试剂R2混匀孵育30s后，于700nm波长下检测吸光度值A1；
S3：5min后，于700nm波长下检测吸光度值A2；
S4：通过血清标准品数据计算胃蛋白酶原I的含量。
优选的，所述步骤S4中胃蛋白酶原I的含量数据计算包括：准确度分析、灵敏度分析、精密度分析、线性分析、稳定性分析以及稳定剂甘油在试剂中的用量考察分析。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，采用胶乳免疫比浊法测定血液中的胃蛋白酶原I的含量，增强了检测信号，提高了检测灵敏度。
2、本胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，添加了助悬剂聚乙二醇6000，并调整其用量为10g/L，避免了因聚合物过多造成的非特异性反应和因聚合物太少导致的灵敏度过低。合适的聚合物用量有利于提高灵敏度和特异性。
3、本胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，添加了表面活性剂曲拉通100，并调整其用量为1g/L，有效提高了精密度。添加悬浮稳定剂甘油90g/L，增加了试剂的稳定性。
4、本胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，可在具备有400-800nm波长的全自动生化分析仪上检测血液中胃蛋白酶原I的含量，直接上机使用，快速精准，自动化程度高，大大提高工作效率。且检测样本量少，可进行少量样本和急诊样本的测定。
具体实施方式
以下将详细说明本发明实施例，然而，本发明实施例并不以此为限。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例中：提供一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，包括试剂R1和R2；试剂R1包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L；试剂R2包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液1.3mg/mL)、Proclinc3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、稳定剂甘油90g/L；其试剂盒基于胶乳免疫比浊法，并将助悬剂聚乙二醇6000的用量调整为10g/L，表面活性剂曲拉通100的用量调整为1g/L，可适用于各类全自动生化分析仪进行分析，试剂稳定的同时可以实现对胃蛋白酶原I(PGI)的准确检测。
其中，胶乳免疫比浊法的测定原理：样品中的PGI和被乳状液粒吸附的抗体引起抗原抗体反应，形成免疫复合物，在700nm波长处检测其浊度的变化，其变化程度与样本中的PGI含量成正比；试剂盒所涉及的试剂组分或仪器均为常规市售产品，或可通过本领域的常规技术手段获得。
检测方法，包括如下步骤：分离血清样品，向血清样品中加入试剂R1，混匀，孵育3-5min后，加入R2混匀孵育30s后，于700nm波长下检测吸光度值A1，5min后，于700nm波长下检测吸光度值A2，通过血清标准品数据计算胃蛋白酶原I的含量。
实施例一：
胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，加入甘油稳定剂：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L；
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油90g/L；
其中，乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液)的制备方法为：
步骤一：取2mL羧基化的胶乳微球(150nm，5％w/v)用磷酸盐缓冲液至4ml；
步骤二：加入50ml 0.2g/L的N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和50ml 0.2g/L的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化，搅拌均匀后37℃孵育20min；
步骤三：加入3mL磷酸盐缓冲液10000rpm离心30min，除去上清液，以去除未反应完的NHS和EDC，然后用磷酸盐缓冲液重悬颗粒；
步骤四：抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体的加入浓度以与聚苯乙烯胶乳微球颗粒的质量比为(0.2)：1的比例加入，37℃孵育4小时；
步骤五：加入3mL终止液终止反应，室温下搅拌3小时后，4℃保存备用，终止液为含20％BSA的磷酸盐缓冲液。
实施例二：
胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，不加甘油：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L；
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L；
其中，乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液)的制备方法为：
步骤一：取2mL羧基化的胶乳微球(150nm，5％w/v)用磷酸盐缓冲液至4ml；
步骤二：加入50ml 0.2g/L的N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和50ml 0.2g/L的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化，搅拌均匀后37℃孵育20min；
步骤三：加入3mL磷酸盐缓冲液10000rpm离心30min，除去上清液，以去除未反应完的NHS和EDC，然后用磷酸盐缓冲液重悬颗粒；
步骤四：抗人类蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体的加入浓度以与聚苯乙烯胶乳微球颗粒的质量比为(0.2)：1的比例加入，37℃孵育4小时。
步骤五：加入3mL终止液终止反应，室温下搅拌3小时后，4℃保存备用，终止液为含20％BSA的磷酸盐缓冲液。
基于上述实施例一、二中加入稳定剂甘油和不加稳定剂甘油的两种试剂盒，对血清标准品数据计算胃蛋白酶原I的含量进行一下数据分析：
实施例三：本发明试剂及方法的准确度分析：
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：40例随机血清样本和一份PGI血清样本(靶值为59.75ng/mL)
对照试剂盒：国家食品药品监督管理局已批准上市的某厂家蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒(胶乳免疫比浊法)(包括试剂R1和R2，但成分与本发明不同，以下简称为对照试剂)；
用实施例一、二的试剂和对比试剂按各自的检测方法分别同时定标后同时测定40例血清样品和一份PGI血清样本(靶值为59.75ng/mL)，结果如表1和表2所示：
表1不同检测试剂测定40例随机血清样品的结果(单位：ng/mL)
表2PGI血清样本(靶值为59.75ng/mL)检测结果(单位：ng/mL)
结果显示，根据实施例一、二检测结果计算出的R2值分别为0.9981、0.9966，计算出的相对偏差分别为-0.82、-1.10，表明本发明所述方法检测结果与对照试剂盒结果无明显差异，具有较高准确度(符合度)，而且实施例一为最优的选择。
实施例四：本发明试剂及方法的灵敏度分析：
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：1份纯化水、1份浓度为7.03ng/mL的PGI低值样本；
用实施例一的试剂和对照试剂(某厂家PGI检测试剂盒)用各自的检测方法同时定标同时对每份待测样本重复检测20次，记录吸光度数值，计算平均值和标准偏差(SD)；水的吸光度平均值加上2SD作为最低检出限对应的吸光度值，由于吸光度与浓度的关系基本为线性关系，可以通过和7.03ng/mL样本的吸光度平均值比较计算出最低检测限的浓度，即灵敏度，检测结果见表3。
表3实施例1试剂与对照试剂灵敏度分析结果(单位：ng/mL)
结果显示，本发明实施例1的灵敏度为0.048ng/mL，对照试剂的灵敏度为0.092ng/mL，表明本发明所述方法具有较高的灵敏度：
灵敏度＝(水吸光度差值平均值+2SD)*样本浓度/样本吸光度差值平均值。
实施例五：本发明试剂及方法的精密度分析：
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：1份临床血清样本(低值样本)、1份PGI血清样本(177.95ng/mL)(高值样本)；
用实施例一的试剂和检测方法对每份待测样本重复检测10次，检测结果见表4。
表4实施例一精密度分析结果(单位：ng/mL)
结果显示，本发明的精密度：低值CV为1.37、高值CV为0.37，与对照试剂相比较低值CV相对偏差为-13.8％、CV高值相对偏差为-7％，本发明所述方法具有较高的精密度。
实施例六：本发明试剂及方法的线性分析：
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：高PGI血清样本(160ng/mL)；
将高PGI血清样本(160ng/mL)用校准品稀释液稀释成6个不同浓度，分别为0ng/mL、32.0ng/mL、64.0ng/mL、96.0ng/mL、128.0ng/mL、160.0ng/mL，采用实施例一的检测方法对上述样品的每个浓度进行检测，每个浓度检测三次，计算相关系数R值，实施例1的检测结果见表5。
表5实施例一线性分析结果(单位：ng/mL)
结果显示，根据实施例一检测结果得到的回归方程为y＝0.9916x+0.9502，相关系数R2＝0.9995，表明本发明试剂在0ng/mL-160ng/mL范围内具有良好的线性度。
实施例七：本发明试剂及方法的稳定性分析：
不同检测试剂的加速稳定性考察：
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：40例随机血清样本；
将本发明实施例一的检测试剂和本发明实施例二检测试剂进行37度加速破坏性实验，以考察其组分的稳定性，结果如表6所示：
表6实施例1和实施例2未加速与经加速破坏性实验1周后的样品检测结果(单位：ng/mL)
37度加速破坏性实验：指把试剂装在瓶子里并密封保存，放在37度水浴箱里面，进行加速破坏性实验，37度破坏性实验1周的时间相当于一般储存温度(2～8度)(未加速)保存1年。
从表6可知，未加速时，实施例一的40例样品检测结果平均值为57.71ng/mL，实施例二的检测结果平均值为55.09ng/mL，与实施例一基本相当；经37度加速破坏性实验1周后，实施例一的检测结果平均值为57.74ng/mL，实施例二的检测结果平均值为28.87ng/mL。
实施例二经破坏性实验1周后的样品检测结果均显著下降，平均下降幅度达到了50.00％，而实施例一由于含量一定量的甘油作为保护剂，经破坏性实验1周后的样品检测结果并未发生明显变化，平均下降幅度仅为4.75％，属于合理范围；平均下降幅度＝(未加速时的均值－加速1周的均值)/未加速时的均值。
以上结果表明，添加甘油的实施例一试剂稳定性好于未添加甘油的实施例二的试剂，可见，甘油的添加增强了试剂的稳定性。
基于上述实施例3-7的比对，得出实施例1中添加的甘油增强了试剂盒的稳定性，以下就甘油的用量多少进行如下比对：
实施例八：
稳定剂甘油在试剂中的用量考察：配方1如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L。
配方2如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油20g/L。
配方3如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油50g/L。
配方4如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油90g/L。
配方5如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油120g/L。
配方6如下：
R1：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L。
R2：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液:1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、甘油150g/L。
注：以上六种配方中的乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液)的制备方法为：
第一步：取2mL羧基化的胶乳微球(150nm，5％w/v)用磷酸盐缓冲液至4ml；
第二步：加入50ml 0.2g/L的N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和50ml 0.2g/L的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化，搅拌均匀后37℃孵育20min；
第三步：加入3mL磷酸盐缓冲液10000rpm离心30min，除去上清液，以去除未反应完的NHS和EDC，然后用磷酸盐缓冲液重悬颗粒；
第四步：抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体的加入浓度以与聚苯乙烯胶乳微球颗粒的质量比为(0.2)：1的比例加入，37℃孵育4小时。
第五步：加入3mL终止液终止反应，室温下搅拌3小时后，4℃保存备用。终止液为含20％BSA的磷酸盐缓冲液。
试验仪器：日立7170全自动生化分析仪；
检测样本：10例血清样本；
为考察保护剂甘油在试剂中的用量，分别检测配方1至配方6在未加速和37度加速1周时样本血清PGI的浓度，结果如表7所示：
表7配方1至配方6在未加速和37度加速1周样本血清的浓度(单位：ng/mL)
从表7可以看出，配方1样本浓度明显下降，比例达到了50.00％，分别加入甘油20g/L、50g/L、90g/L、120g/L、150g/L后下降比例分别为：40.0％、20.0％、1.00％、1.00％、1.40％；说明保护剂甘油在试剂中的加样量20～150g/L时均能起到一定的保护作用，但加样量小于90g/L时，保护效果不是很理想；90～150g/L时，配方4至配方6加速与未加速下降比列分别为1.00％、1.00％、1.40％从数据下降比例可以看出120g/L、150g/L已达到饱和，所以甘油加入量为90g/L为理想状态。
因此，配方2(甘油的加入量为90g/L)的综合效果最佳。
综上所述：本胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒及其检测方法，采用化学偶联法将特异性抗体结合于胶乳颗粒表面，标本与胶乳试剂在缓冲液中混合，标本中的PGI与胶乳颗粒表面的抗体结合，与相邻的胶乳颗粒彼此交联，通过特定的制备方法和优化反应体系显著提高了测定试剂的灵敏度和稳定性，具有灵敏度高、精密度高、试剂稳定等特点。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和R2；所述试剂R1包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、Proclinc 3000.5g/L、聚乙二醇600010g/L、曲拉通1001g/L、TRIS 10g/L；所述试剂R2包括：磷酸盐缓冲液100mmoL/L、乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液1.3mg/mL)、Proclinc 3000.5g/L、小牛血清白蛋白(BSA)10g/L、稳定剂甘油90g/L。
2.根据权利要求1所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒基于胶乳免疫比浊法进行制备，胶乳免疫比浊法的测定原理为：样品中的PGI和被乳状液粒吸附的抗体引起抗原抗体反应，形成免疫复合物，在700nm波长处检测其浊度的变化，其变化程度与样本中的PGI含量成正比。
3.根据权利要求1所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中助悬剂聚乙二醇6000的用量调整为10g/L。
4.根据权利要求1所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中表面活性剂曲拉通100的用量调整为1g/L。
5.根据权利要求1所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒所涉及的试剂组分或仪器均为常规市售产品，或可通过本领域的常规技术手段获得。
6.根据权利要求1所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中乳胶颗粒抗人PGI抗体结合乳液(抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体敏感的乳状溶液)的制备方法如下：
S1：取2mL羧基化的胶乳微球(150nm，5％w/v)用磷酸盐缓冲液至4ml；
S2：加入50ml 0.2g/L的N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和50ml 0.2g/L的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)进行活化，搅拌均匀后37℃孵育20min；
S3：加入3mL磷酸盐缓冲液10000rpm离心30min，除去上清液，以去除未反应完的NHS和EDC，然后用磷酸盐缓冲液重悬颗粒；
S4：抗人类胃蛋白酶原I(小鼠)单克隆抗体的加入浓度以与聚苯乙烯胶乳微球颗粒的质量比为(0.2)：1的比例加入，37℃孵育4小时；
S5：加入3mL终止液终止反应，室温下搅拌3小时后，4℃保存备用，终止液为含20％BSA的磷酸盐缓冲液。
7.一种根据权利要求1所述的胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：分离血清样品，向血清样品中加入试剂R1，混匀，孵育3-5min；
S2：加入试剂R2混匀孵育30s后，于700nm波长下检测吸光度值A1；
S3：5min后，于700nm波长下检测吸光度值A2；
S4：通过血清标准品数据计算胃蛋白酶原I的含量。
8.根据权利要求7所述的一种胃蛋白酶原I(PGI)检测试剂盒的检测方法，其特征在于，所述步骤S4中胃蛋白酶原I的含量数据计算包括：准确度分析、灵敏度分析、精密度分析、线性分析、稳定性分析以及稳定剂甘油在试剂中的用量考察分析。
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