CN108366572A - 天然抗氧化剂的组合 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中：‑生育酚的量小于约500ppm，和‑鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1。本发明还涉及包含该抗氧化剂组合的抗氧化含脂肪组合物。本发明还涉及用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用的方法，以及抗氧化剂组合用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用的用途。

Description

天然抗氧化剂的组合
技术领域
本发明总体上涉及脂肪的抗氧化作用领域。
更确切地，本发明涉及特定的天然抗氧化剂的抗氧化剂组合，其特别用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用。
背景技术
脂肪和油是化妆品、药品和食品(特别是宠物食品)的主要组分。对于前两者，脂肪和油有助于它们的质地、气味和/或风味以及其中包含的活性成分的适当活性。在后者中，脂肪和油有助于它们的质地、气味和/或风味、营养价值、结构和适口性。
然而，脂质在加工或储存的过程中极易受到氧化作用的影响，这能够导致酸败和/或降低最终使用的产品的营养价值。特别地，这导致食品例如宠物食品不适口，并且在营养上无法满足受试者例如宠物。
因此，通常将抗氧化剂添加至含脂肪组合物，例如化妆品、药品或食品(例如宠物食品)中，以延迟不可避免的脂肪氧化过程并延长含脂肪组合物例如食品产品(例如宠物食品产品)的保质期。
为了评估抗氧化剂在含脂肪组合物中的功效，使用数个指标，例如保护期，即脂肪开始氧化之前的时段，或者主要脂肪氧化产物的定量(例如过氧化物值(PV))或次要脂肪氧化产物的定量(例如己醛值(HV))。
合成抗氧化剂广泛用于保护化妆品、药品和食品/宠物食品工业中的油和脂肪。由于合成防腐剂对健康可能产生不利影响，过去数十年中消费者对天然抗氧化剂的需求大幅增加。已经研究了各种植物提取物，并且已经将数百种具有不同化学结构的分子鉴定为有效的天然抗氧化剂(Brewer,2011；Pokorny等人,2001)。
专利申请JP19880240514提到含有(a)绿茶叶提取物和(b)生育酚和/或迷迭香提取物以及任选的(c)没食子酸的试剂。但是，该专利申请没有提及这些化合物的量和/或比例。如本领域技术人员所熟知，绿茶叶主要包含多酚(儿茶素、表儿茶素等)，但仅含痕量槲皮素。在一篇综述中，Namal Senanayake(2013)报道了以绿茶叶的干重量计25至35％的量的多酚(主要为儿茶素)。出版物“Effect of dietary rosemary andα-tocopherolsacetate on the oxidative stability of raw and cooked pork following oxidizedlinseed oil administration”,L.Haak等人,Meat Science 78(2008)239-247研究了与含有例如α-生育酚乙酸酯和/或迷迭香提取物和/或没食子酸的抗氧化剂组合或不组合的氧化亚麻籽油对以2％膳食施用至猪的生猪肉和熟猪肉的氧化稳定性的作用。然而，这些化合物并未保护饲料免受氧化，因为它们被包封以便仅在猪的消化期间释放出来。此外，观察到迷迭香提取物和没食子酸的组合的显著脂质助氧化作用。
生育酚是目前最商业化的天然抗氧化剂之一。它们存在于大多数植物油中并且已经被广泛研究。生育酚广泛用于化妆品、药品和食品/宠物食品工业的领域中，特别是因为这些天然抗氧化剂不会负面影响将获得的产品的基本功能性质(例如宠物食品的适口性)。
然而，使用生育酚的主要问题在于相对较短的保护期，与使用其它抗氧化剂例如合成抗氧化剂相比，生育酚通常使含脂肪组合物中的脂肪氧化作用经时延迟得更短。
此外，当使用生育酚作为含脂肪组合物中的唯一抗氧化剂时，观察到高过氧化物值和己醛值。
而且，已经发现当被添加至(例如在挤出期间)进一步经受物理和/或热处理的含脂肪组合物中时，大量的生育酚损失。
公认的是，需要天然抗氧化剂的抗氧化剂组合，所述组合有用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用。
因此，本发明的目的是提供天然抗氧化剂的组合，其显著增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用。
本发明的另一个目的是提供天然抗氧化剂的组合，其能够用于显著延迟含脂肪组合物中经时的脂肪氧化作用和/或降低在物理和/或热处理含脂肪组合物下生育酚的损失。
本发明的另一个目的是提供天然抗氧化剂的组合，其与不含本发明的天然抗氧化剂的组合的产品相比，具有至少保持适口性的能力。
发明内容
本发明涉及具至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中：
-生育酚的量小于约500ppm，和
-鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1。
本发明还涉及包含该抗氧化剂组合的抗氧化含脂肪组合物。
本发明还涉及用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用的方法，以及抗氧化剂组合用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用的用途。
附图说明
通过参考以下附图来说明本发明：
图1：本发明的一些优选实施方案的示意图。
图2：含有通过包合被添加的120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁以及不同量的生育酚的干燥挤出粗粒在14周期间释放的总己醛值(ppm)。
图3：在含有400ppm鼠尾草酸和200ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为2:1)以及不同量的生育酚的鲑鱼油上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图4：在含有100ppm鼠尾草酸和400ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)以及不同量的生育酚的鲑鱼油上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图5：在含有400ppm生育酚、50ppm鼠尾草酸和100ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:2)以及不同量的槲皮素的家禽脂肪上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图6：在含有400ppm生育酚、100ppm鼠尾草酸和400ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)以及不同量的槲皮素的家禽脂肪上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图7：在含有200ppm生育酚、100ppm鼠尾草酸和100ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:1)以及不同量的槲皮素的家禽脂肪上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图8：在含有100ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸和20ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为3:1)以及不同量的槲皮素的家禽脂肪上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图9：在含有500ppm生育酚、50ppm鼠尾草酸和200ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)以及不同量的羟基酪醇的鲑鱼油上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
图10：在含有300ppm生育酚、100ppm鼠尾草酸和100ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:1)以及不同量的羟基酪醇的鲑鱼油上确定的保护时间(以小时表示的时段)。
具体实施方式
定义
除非另有特别说明，在本文中以参考产品(例如根据本发明的含脂肪组合物)的重量表示量(特别是以ppm计的量)或百分比。
在本公开中，范围以简写(shorthand)描述，以避免不得不详尽阐述和描述范围内的每个值。当适当时，可选择范围内的任何适当的值作为范围的上限值、下限值或端值。例如，0.1-1.0(0.1至1)的范围代表0.1和1.0的端值，以及0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9的中间值，和涵盖在0.1-1.0内的所有中间范围，例如0.2-0.5、0.2-0.8、0.7-1.0等。此外，术语“至少”和“小于”涵盖此后引用的值。例如，“至少5％”必须理解为还涵盖“5％”，而“小于5ppm”必须理解为还涵盖“5ppm”。
当提及可测量的值(例如量、时距等)时，在本文中使用的术语“约”意在涵盖能够容易地由涉及的技术领域中的技术人员确定的标准差。优选地，除非另有特别说明，这些值意在涵盖±5％的变差。
如在本发明中使用的术语“比例之外”意指鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例在根据本发明的比例范围之外。
如在全文所用，词语的单数形式包括复数，反之亦然，除非上下文另外明确说明。因此，引述“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”通常包括各自术语的复数。例如，引述“一种方法”或“一种食品”包括多种这样的“方法”或“食品”。类似地，非排他地理解词语“包含(comprise)”、“包含(comprises)”、和“包含(comprising)”。同样地，术语“包括(include)”、“包括(including)”和“或”均应被解释为非排他的。然而，必须将所有这些术语视为涵盖专一的实施方案，还可使用如“由……组成”的词语提及所述专一的实施方案。
本文所列举的方法和组合物以及其它实施方案不局限于在本文中描述的特定的方法学、方案和试剂，因为如本领域技术人员所理解的，它们可以变化。
除非另有定义，在本文中所使用的所有技术和科学术语、专门术语和缩略词具有本发明领域的技术人员或使用该术语的领域的技术人员所通常理解的含义。尽管在本发明的实践中能够使用类似于或等同于在本文中描述的那些的任何产品、方法、或者其它手段或材料，但在本文中描述优选的组合、组合物、方法、或者其它手段或材料。
术语“ppm”在本文中根据其常规含义来使用。更确切地，在本文中其是指以抗氧化剂组合的总重量计的重量(mg/kg)(除非另有说明)。
术语“受试者”在本文中是指宠物或人。
术语“宠物”和“动物”是同义的，并且意指任何动物，包括但不限于猫、狗、虾、鱼、兔子、豚鼠、白鼬、仓鼠、小鼠、沙鼠、鸟、马、牛、山羊、绵羊、驴、猪等。在本发明的上下文中，优选宠物为狗、猫和鱼。更特别的，狗和猫是优选的。
如在本文中所使用，术语“抗氧化剂”是指延迟或防止可氧化的脂肪进行氧化作用的任何分子。在本发明的上下文中，抗氧化剂因此至少作用于脂质(即脂肪)的抗氧化作用。抗氧化剂通过以下方式作用：清除生物学上重要的反应性自由基或其它活性氧物质，防止氧自由基形成，将自由基或其它活性氧物质催化转化为活性较低的物质，螯合过渡金属，和/或再生主要的抗氧化剂。
如在本文中所使用，必须要理解的是，在考虑组合物处方时，在本发明中使用的抗氧化剂为被添加的天然抗氧化剂，即外源性天然抗氧化剂。换言之，从计算所有要求保护的抗氧化剂的量和比例中，特别排除内源性抗氧化剂和合成抗氧化剂。这意味着作为组合物处方的结果，无论存在一种还是多种内源性(固有的)抗氧化剂，均将外部的天然抗氧化剂添加至本文所描述的组合物中。
抗氧化剂为亲脂性或亲水性抗氧化剂。
此外，本发明的抗氧化剂能够以任何合适的形式来使用。在一个特别的实施方案中，能够使用诸如植物材料的材料，或者材料的提取物，或材料的部位，或材料的部位提取物，包括浓缩物或汁液，它们含有不可忽略的量的抗氧化剂。在另一个特别的实施方案中，能够使用纯的抗氧化剂。
术语“抗氧化(antioxidated)”或“抗氧化产品X(antioxidated product“X”)”意指产品X包含本发明的抗氧化剂组合。在下文中为了清楚起见，“抗氧化剂组合”可以简称为“组合”。
如在本文中所使用，“增强(enhancing)生育酚的抗氧化作用”或“增强(enhance)生育酚的抗氧化作用”意指在具有根据本发明的组合(即，使至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合)的含脂肪组合物中获得的抗氧化作用显著优于在具有单独的生育酚的含脂肪组合物中获得的抗氧化作用。特别地，通过显著延迟含脂肪组合物中经时的脂肪氧化作用(即，与使用单独的生育酚相比)和/或通过降低在物理和/或热处理含脂肪组合物下生育酚的损失来增强生育酚的抗氧化作用。
如在本文中所使用，“延迟经时的脂肪氧化作用”意指保护时间得以增加。术语“保护时间”或“保护时段”或“保护期”是指与对照脂肪开始氧化之前的时段相比的脂肪开始氧化之前的时段。其如下计算：保护时间(小时)＝含有抗氧化剂的脂肪的氧化作用诱导时间(小时)–没有添加抗氧化剂的对照脂肪的氧化作用诱导时间(小时)。
如在本文中所使用，“降低在物理和/或热处理含脂肪组合物下生育酚的损失”意指在所述物理和/或热处理结束时，测试的含脂肪组合物中生育酚的残留比例在组合物包含本发明的组合时比在组合物包含仅生育酚作为天然抗氧化剂时更高。
术语“生育酚”是指生育酚的异构体α、β、γ和/或δ，和/或其衍生物。当提及“天然混合生育酚”时，其意指天然形式(特别是未酯化)的α、β、γ和δ生育酚的组合。
术语“鼠尾草酸”是指具有化学式C20H28O4的酚二萜和/或其衍生物，例如在植物材料如迷迭香(rosemary)(迷迭香(Rosmarinus oficinalis))或普通鼠尾草(sage)(鼠尾草(Salvia oficinalis))中所找到的。如在本文中使用的术语“鼠尾草酸”涵盖鼠尾草酸和/或鼠尾草酚(化学式C20H26O4)。
“迷迭香(rosemary)”是指植物材料(迷迭香(Rosmarinus oficinalis))的全部，或者植物材料的任何提取物、部位、或部位提取物，例如来自叶子。除了鼠尾草酸(和鼠尾草酚)之外，迷迭香还可以包含迷迭香酸和/或迷迭香酚。
术语“可水解没食子单宁”为没食子酸(一种多酚单体)与多元醇碳水化合物(例如葡萄糖)的羟基结合而形成的聚合物。如在本文中使用的“可水解没食子单宁”涵盖可水解的没食子单宁例如单宁酸，以及水解产物例如没食子酸。
术语“槲皮素”是指具有化学式C15H10O7的多酚黄酮化合物和/或其衍生物例如二氢槲皮素(化学式C15H12O7)，其可以在数种植物如落叶松(Larch)或巴西芸香(Dimorphandramolis)中找到。在一个特别的实施方案中，槲皮素因此为二氢槲皮素的形式。
术语“羟基酪醇”是指具有化学式C8H10O3的3,4-二羟基苯基乙醇和/或其衍生物例如对羟苯基乙醇，其可以从植物材料例如橄榄中获得。
“橄榄”是指植物材料的全部，或者来自植物材料的任何提取物、部位、或部位提取物，例如来自叶子、果实、果肉、核、橄榄油生产的植物水和/或橄榄油。除了羟基酪醇(和对羟苯基乙醇)以外，橄榄还可以包含橄榄苦苷和/或女贞苷(ligstroside)。
术语“合适的载体”(在本文中也称为“载体”)在本文中意指与本发明的组合联合使用的通常为非活性的物质(即，非活性分子或非活性分子混合物)。典型地，载体有助于所述组合的应用。合适的载体可以为粉末或液体形式并且可以具有亲水性和/或亲脂性。液体形式的合适的载体例子为水或油(例如油菜籽油、大豆油、葵花油)。粉末形式的合适的载体例子为碳水化合物(例如麦芽糖糊精、环糊精)、微生物蛋白质(例如酵母)、植物蛋白质(例如大豆粉、大豆蛋白质浓缩物、大豆蛋白质分离物)、动物蛋白质、矿物或有机化合物(例如粘土、膨润土、二氧化硅)等。
如在本文中所使用，“含脂肪组合物”为含有至少一种可氧化脂肪的任何成分、组合物或材料。含脂肪组合物是指含有至少一种可氧化脂肪并且可用于开发化妆品、药品和食品的成分、组合物或材料。根据本发明的“含脂肪组合物”的脂肪含量不是“痕量的脂肪”。在本文中使用的术语“痕量的脂肪”意指可以忽略的脂肪量，或微不足道的脂肪量，或无法检测到的脂肪量(低于通过标准方法(例如在欧洲法规EC n°152/2009原油和脂肪的确定-程序B中所描述的-可在线获得)确定的阈值水平)。
脂肪的例子包括来自任何来源(例如动物脂肪、植物油或海洋油)的脂肪或油。可大量得到的植物油典型地为芥花籽油(canola oil)、大豆油、玉米油、橄榄油、葵花油、亚麻籽油、棕榈油、油菜籽油、芝麻油、椰子油、红花油等，以及它们的副产品。典型的动物脂肪为猪脂肪、鸡脂肪、家禽脂肪、羔羊脂或牛脂等，以及它们的副产品。海洋油典型地为金枪鱼油、沙丁鱼油、鲑鱼油、鲱鱼油(herring oil)、鲭鱼油、沙鳗油(sand eel oil)、鳟鱼油、罗非鱼油、鲶鱼油、鳀鱼油、金鱼油(fish oil)、油鲱油(menhaden oil)等，以及它们的副产品。本文也涵盖源自动物、植物、海洋来源的脂肪。
脂肪为例如饱和或不饱和的脂肪酸酯或游离脂肪酸，并且它们可以是内源性的(例如动物消化物、动物或植物粉(meal)等中含有的脂肪)或外源性的。
如在本文中使用的术语“食品”或“食品产品”或“食品组合物”意指含有至少一种可氧化脂肪且旨在由受试者摄取并向受试者提供至少一种营养物的产品或组合物。“食品”涵盖这样的任何形式的产品，固体、液体、凝胶、或者它们的混合物或组合。根据本发明的组合可以被添加至任何食品产品(含有至少一种如上定义的脂肪)中。食品组合物的非限制性例子为营养配方、冰淇淋、乳制品、奶精(creamers)、宠物食品产品、饮料、营养品、食品添加剂、食品补充剂、糖果、巧克力基产品、调味品、蛋黄酱、汤、冷冻粉(frozen meals)、蛋糕、烘焙产品、谷物基产品和甜点。在本文中使用的食品组合物还涵盖可以被进一步加工的食物制剂，例如进一步经受热处理和/或挤出和/或蒸馏的食品制剂。
术语“宠物食品”或“宠物食品产品”或“宠物食品组合物”是指旨在由宠物消耗的食品。例如，“狗食品”或“狗食品产品”意指旨在由狗消耗的组合物。作为另一个例子，“猫食品”或“猫食品产品”意指由猫消耗的组合物。“宠物食品”涵盖宠物饲料，例如鱼饲料，在下文称为“鱼食品”。“鱼食品”因此意指由鱼消耗的组合物。
宠物食品在本文中涵盖干燥的宠物食品(具有小于约14％的水分)，罐装的或湿的或高含水分的宠物食品(具有大于约50％的水分)以及半湿润的宠物食品(具有约14％至约50％的水分)。宠物食品的例子为挤出宠物食品(例如粗粒(kibble))、“X”块状产品(chunk-in-"X"product)、肉糕(loaf)、小吃、奖励品(treats)、饮料或宠物食品补充剂。
“营养全面的”、“营养均衡的”或“全面的且营养均衡的食品”为一种食品，其含有对于食品的预期接受者或消耗者合适的量和比例的所有已知必须的营养物，所述合适的量和比例是基于例如伴侣动物营养领域中认可或主管的当局的推荐。因此，这样的食品能够用作膳食摄取的唯一来源以维持生命，而无需添加补充营养源。因此，这样的食品不包含如下定义的食品补充剂、小吃、饮料和奖励品。营养全面的食品可以为例如如下所定义的挤出宠物食品(例如粗粒)、“X”块状产品和肉糕的形式。
“挤出”产品(例如食品或宠物食品)是指已通过挤出或成丸加工被转化的任何产品。优选地，挤出产品为干燥的挤出产品。在一个特别的实施方案中，挤出产品为粗粒。在另一个特别的实施方案中，挤出产品为鱼丸。
术语“鱼丸”是指鱼食品，特别是能够通过挤出或成丸加工(优选成丸加工)获得的干燥挤出产品(含有小于约14％的水分，优选小于约9％的水分)。鱼丸典型地由一种或多种蛋白质源组成，所述蛋白质源例如但不限于海洋蛋白质(尤其包括鱼粉和磷虾粉)、植物蛋白质和屠宰场副产物。鱼丸进一步典型地含有被包合到丸中或涂布到丸上的脂肪，例如海洋油和/或植物油和/或动物脂肪。
在本文中使用的术语“粗粒”是指通过成丸或挤出加工(优选挤出加工)形成的颗粒状块或段。典型地，粗粒被制备用以产生干燥和半湿润的宠物食品。在一个特别的实施方案中，粗粒为干燥的粗粒。取决于方法或设备，段的尺寸和形状能够变化。例如，粗粒能够具有球形、圆柱形、椭圆形或类似的形状。例如，它们能够具有小于约2cm的最大尺寸。粗粒典型地含有被包合到粗粒中或涂布到粗粒上的脂肪，例如动物脂肪和/或植物油和/或海洋油。
术语““X”块状产品”在本文中意指在混合物(所述混合物为“X混合物”)中包含块的所有可食用湿的食料。其经典例子为胶冻块状产品(chunk-in-jellyproduct)、肉汁块状产品等。这种类别的“X块状”产品还涵盖可包含于X混合物(例如胶冻、肉汁等)中的除了块之外的可食用形式。例如，块以外的其它形式可以为切片产品、磨碎产品等。“X”块状产品典型地包含脂肪，例如动物脂肪和/或植物油和/或海洋油。
在本文中使用的术语“肉糕”是指作为湿润产品而获得的可食用食料，并且包括肉冻(terrine)、肉酱奶油冻等。肉糕典型地包含脂肪，例如动物脂肪和/或植物油和/或海洋油。
术语“食品补充剂”或“膳食补充剂”或“补充剂”意指旨在除了正常膳食之外还被摄取的产品。补充剂可以为任何形式，例如固体、液体、凝胶、片剂、胶囊、粉末剂等。优选地，它们以方便的剂型提供。在一些实施方案中，它们以散装销售包装(例如散装粉末、液体、凝胶或油)提供。在其它实施方案中，补充剂以批量提供以包含于其它食品(例如小吃、奖励品、补充剂棒、饮料等)中。食品补充剂典型地含有被包合到食品补充剂中或涂布到食品补充剂上的脂肪，例如动物脂肪和/或植物油和/或海洋油。
术语“奖励品”意指设计为由所有者优选在非用餐时间喂养宠物，以协助、促进或维持宠物与其所有者之间的联系过程的任何食品。奖励品的例子为骨头、生皮(rawhide)、棍、枕头、饼干等。奖励品可以为营养的或非营养的，完全或部分可消耗的(例如可消耗的玩具)。奖励品通常以可比得上营养均衡的食品的方式含有适口性增强剂。奖励品典型地含有被包合到奖励品中或涂布到奖励品上的脂肪，例如动物脂肪和/或植物油和/或海洋油。
如在本文中所使用，“食品成分”为适合于消耗并且能够被添加至食品组合物中的任何化合物、组合物或材料。
特别地，“宠物食品成分”为适合于宠物消耗并且能够被添加至宠物食品组合物中的任何化合物、组合物或材料。宠物食品成分的非限制性例子为蛋白质、多肽、氨基酸、谷物、碳水化合物、脂肪或脂质、营养物、适口性增强剂、动物消化物、肉粉(meat meal)、麸质、防腐剂、表面活性剂、结构化(texturing)剂或组织化(texturizing)剂或稳定剂、着色剂、无机磷酸盐化合物、调味剂、调味料等。
如在本文中所使用，“含脂肪食品成分”是指含有至少一种可氧化脂肪并且可以被进一步添加至食品组合物(特别是宠物食品组合物)中的“食品成分”，例如特别是宠物食品成分。
如在本文中所使用，“不含脂肪食品成分”是指不含任何可氧化脂肪或仅含痕量脂肪并且可以被进一步添加至食品组合物(特别是宠物食品组合物)中的“食品成分”，例如特别是宠物食品成分。
如在本文中所使用，术语“适口性”是指受试者食用某种食品组合物的总体意愿。每当受试者例如对两种或更多种食品中的一种显示出偏好时，偏爱的食品是更“适口的”，并具有“增强的适口性”。这样的偏好能够源自受试者的任何感官，但典型地与尤其是味道、香味、滋味、质地、气味和/或口感相关。
存在不同的方法来评价适口性，例如宠物的适口性。这样的方法的例子涉及同时(例如，在并排式、自由选择比较中，例如，通过测量至少两种不同的宠物食品的相对消耗)或顺序地(例如，使用单碗测试方法学)将宠物暴露于宠物食品。有利地，可使用至少两种不同的方法，以巩固由此获得的有关给定宠物食品的适口性的结果。
从功能的角度来看，术语“适口性增强剂(PE)”、“适口剂(palatant)”、“调味剂”、“适口性试剂”、“开胃因子”、“调味组合物”、“适口性增强组合物(PEC)”、“调味增强剂”和任何其它类似的术语等同地意指增强食品组合物对于受试者的适口性的任何材料。典型地，用于食品的适口性增强剂是提供对于受试者有吸引力或合意的香味、味道、回味、气味、口感、质地和/或感官感觉的可食用组合物。
例如，适口性增强组合物可以通过其气味而有助于初始食品吸引力，和/或不仅通过其气味、还通过其味道和/或其回味和/或其口感和/或其质地而有助于连续消耗。例如对于宠物，“初始吸引力”为诱导宠物最初品尝或尝试食品的适口性的一方面，其能够通过标准“第一选择”或“第一消耗食品”测得。“持续消耗”为诱导宠物持续消耗最初仅品尝或尝试的食品的适口性的一方面。
从结构的角度来看，术语“适口性增强剂(PE)”、“适口剂(palatant)”、“调味剂”、“适口性试剂”、“开胃因子”、“调味组合物”、“适口性增强组合物(PEC)”、“调味增强剂”和任何其它类似的术语可以是指单一材料或材料共混物，所述材料可以为天然的、加工的或未加工的、合成的，或部分天然和部分合成的材料。
适口性增强组合物的适口性增强成分的非限制性例子为动物消化物、素食的适口性增强组合物成分、无机磷酸盐化合物、美拉德成分、美拉德反应产物、蛋白质、多肽、氨基酸、碳水化合物、脂肪、营养物、防腐剂、表面活性剂、结构化剂、调味剂等。成分可以包含于适口性增强组合物中，或者它们能够在宠物食品中接触并原位反应，以产生也由术语“适口性增强组合物”涵盖的经转化的材料。在组合物中一起反应的成分的例子为且不限于脂肪、多肽、氨基酸和碳水化合物，以获得经转化的材料例如美拉德反应产物等。
在本文中使用的术语“无机磷酸盐化合物”意指包含至少一个磷原子的化学化合物。该化学化合物可以为天然的或合成的、电离的或非电离的。无机磷酸盐化合物的例子包括多磷酸盐、焦磷酸盐和单磷酸盐。
术语“动物消化物”在本文中意指产生于清洁的、未分解的动物组织的化学和/或酶水解的材料。在一些实施方案中，在本文中使用的动物消化物与美国饲料管制协会股份有限公司(Association Of American Feed Control Officials,Inc.)(AAFCO)所发布的定义完全一致。动物消化物优选源自动物组织，包括冷血的海产动物，不包括毛发、角、牙齿、蹄和羽毛。本领域技术人员将理解，尽管这样的组织不是优选的，但即使在良好的制造实践中，也会不可避免地发现痕量。还不包括内脏内容物或外来物或排泄物，尽管有时存在痕量污染量。动物消化物可为干燥的或非干燥的。动物消化物的例子为：
-家禽(或猪、牛、绵羊、羔羊、鱼等)的消化物：产生自清洁的和未分解的组织的化学和/或酶水解的来自家禽(猪、牛等)的材料；
-猪(或牛、绵羊、羔羊、鱼等)副产物的消化物：产生自清洁的和未分解的组织的化学和/或酶水解的来自猪(牛等)的材料，所述清洁的和未分解的组织来自家畜(猪、绵羊、羔羊等)的除了肉之外的未提炼的清洁部分，例如肺、脾脏、肾脏、大脑、肝脏、血液、部分脱脂的低温脂肪组织，以及清除了内容物的胃和肠；
-家禽副产物的消化物：产生自清洁的和未分解的组织的化学和/或酶水解的材料，所述清洁的和未分解的组织来自家禽的除了肉之外的未提炼的清洁部分，例如肝脏、心脏、头部、脚部和内脏。如在本文中所使用，“家禽”涵盖鸟的任何物种或类别，优选鸡、火鸡、鸭子等；以及
-鱼副产物的消化物：产生自清洁的和未分解的组织的化学和/或酶水解的材料，所述清洁的和未分解的组织来自鱼的除了肉之外的未提炼的清洁部分。如在本文中所使用，“鱼”涵盖鱼或甲壳类的任何物种或类别，优选金枪鱼、鲑鱼、鳕鱼、白鲑鱼、虾、沙丁鱼等。
动物消化物还可以被称为“动物产物”或“动物副产物”，所有这些术语作为同义词在本文中使用。
“蛋白质”包括可与动物消耗相容的所有常见蛋白质源，尤其是植物蛋白质、动物蛋白质(例如酪蛋白或白蛋白或动物消化物或肉粉)以及微生物蛋白质(例如酵母或真菌或海藻)。术语“肉粉”意指从上述动物(即家禽、猪、牛、绵羊、羔羊、鱼)的畜体获得的粉状物。“蛋白质”还包括蛋白质水解产物，其水解程度能够根据目标来控制。
术语“酵母”在本文中是指任何酵母(优选为非活性的)，以及可与动物消耗的组合物相容的酵母副产物。酵母在本领域公知为富含蛋白质的。酵母包括但不限于啤酒酵母、面包酵母、圆酵母、糖蜜酵母等。酵母副产物包括但不限于酵母提取物、酵母水解产物、酵母乳等。
术语“谷物”意指可以用作营养物(例如蛋白质、淀粉、矿物质和维生素)来源的谷物。谷物的例子为玉米、蜀黍、苜蓿、小麦、大麦、稻、大豆、高粱等。
术语“麸质”意指来自小麦、玉米、黑麦、大麦、燕麦或它们的杂交品种及其衍生物的蛋白质部分。
在本文中使用的术语“植物(vegetables)”涵盖植物(plants)。植物的例子为芥花 籽(canola)、大豆、玉米、橄榄、向日葵、亚麻籽、棕榈、红花、油菜籽、小麦、玉米、羽扇豆、豌 豆或稻。
术语“素食适口性增强组合物成分”在本文中意指不含肉或动物产物而源自或分离自植物、细菌、真菌或海藻来源的材料，或者非获自动物来源的单一化合物。素食适口性增强组合物成分可以为干燥的或液体的。
碳水化合物的例子包括右旋糖、果糖、蔗糖、多糖、纤维、淀粉等。
“纤维来源”或“膳食纤维”是指对应于植物中抵抗动物消化酶消化的组分的食品成分。纤维可以为可溶的或不可溶的。用于本文公开的膳食中的膳食纤维的来源包括但不限于甜菜浆、瓜尔胶、菊苣根、车前草、纤维素、小麦燕麦、玉米糠、亚麻籽等。
营养物的例子包括但不限于维生素、矿物质和电解质，例如维生素A、C、E、B12、D3、叶酸、D-生物素、氰钴维生素、烟酰胺、硫胺素、核黄素、吡哆醇、甲萘醌、β-胡萝卜素、泛酸钙、胆碱、纤维醇、钙、钾、钠、锌、铁、锰、铜、碘等。
可在本发明上下文中使用的表面活性剂、调味料、结构化剂或组织化剂、防腐剂、稳定剂为本领域技术人员所公知。
“药物组合物”或“药物产品”是指含有至少一种脂肪的药学上可接受的组合物，例如片剂(例如咀嚼片、泡腾片或薄膜包衣片)或者胶囊(例如硬壳胶囊)或者液体或溶解的粉末。药物组合物可以通过各种常规施用途径例如通过口服、肠胃外、局部或经皮施用而被施用于受试者。
如在本文中所使用，“含脂肪药物成分”为含有至少一种可氧化脂肪并且能够被添加至药物组合物中的任何化合物、组合物或材料。含脂肪药物成分能够典型地以粉末形式被添加至成片剂混合物中或者以本身已知用于生产胶囊的方式被填充至胶囊中。
在本文中使用的术语“化妆品”或“化妆品产品”涵盖含有至少一种可氧化脂肪的化妆品、化妆用具和皮肤产品。例子为皮肤和头发护理产品，例如霜剂、洗剂、浴液、洗发剂、调理剂、唇膏、防晒化妆品、化妆化妆品、喷雾剂或凝胶。
如在本文中所使用，“含脂肪化妆品成分”为含有至少一种可氧化脂肪并且能够被添加至化妆品组合物中的任何化合物、组合物或材料。
如在本文中所使用，“涂布(coating)”或“涂布(coated)”是指例如通过喷雾、撒粉等将产品或组合物(例如本发明的含脂肪组合物)局部沉积到食品的表面上。本发明的组合可以通过涂布并典型地以与一种或多种脂肪和/或适口性增强组合物(特别是包含脂肪的适口性增强组合物)的混合物的方式被添加至食品。
如在本文中所使用，“包合(inclusion)”或“包合(included)”是指在食品(例如宠物食品)的核心中添加产品或组合物(例如本发明的含脂肪组合物)。例如，含脂肪组合物在食品(例如宠物食品)中的包合能够通过将含脂肪组合物与其它食品成分(例如含脂肪宠物食品成分)混合来进行。如有必要，能够进行进一步的加工步骤(包括热处理和/或挤出和/或蒸馏等)以获得最终的宠物食品产品。
“容器”包括但不限于袋、盒子、纸箱、瓶、任何类型或设计或材料的包装、透明带、收缩胶膜、装订的或另外附着的组件、或它们的组合。
术语“单独包装”意指试剂盒的组件在一个或多个容器中物理组合或与一个或多个容器物理组合，并被认为是用于制造、配送、销售或使用的一个单元。“容器”包括但不限于袋、盒子、纸箱、瓶、任何类型或设计或材料的包装、透明带、收缩胶膜、装订的或另外附着的组件、或它们的组合。单独包装可为物理组合的单独组件的容器，使得它们被认为是用于制造、配送、销售或使用的一个单元。
如在本文所使用，“用于传递信息或指令的装置”为适用于提供信息、指示、推荐和/或保证等的任意形式的试剂盒组件。这样的装置能够包括含有信息的文件、数字储存媒体、光储存媒体、音频展示、视觉显示。传递方式能够为显示的网址、手册、产品标签、包装说明书、广告、视觉显示等。
本发明一些实施方案的说明
本发明人在本文中首次显示，与单独的生育酚相比，包含生育酚的天然抗氧化剂组合出人意料地有利。特别地，这样的组合能够延迟含脂肪组合物中经时的脂肪氧化(即，与使用单独的生育酚作为天然抗氧化剂相比)并且降低生育酚在物理和/或热处理含脂肪组合物中的损失。
此外，本发明人在本文中显示，与使用单独的生育酚相比，根据本发明的天然抗氧化剂组合不会负面影响宠物食品对于猫和狗的适口性。更特别地，本发明人显示，与使用单独的生育酚相比，天然抗氧化剂组合能够增强对于宠物的食品适口性，特别是对于狗的适口性。
抗氧化剂组合
在第一方面，本发明涉及至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中：
-生育酚的量小于约500ppm，优选小于500ppm，和
-鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1，优选1:4至3:1。
因此除了生育酚之外，该抗氧化剂组合还含有鼠尾草酸和可水解没食子单宁。宠物食品工业目前关注天然抗氧化剂例如鼠尾草酸(特别是当由迷迭香提供时)的使用，因为它们对宠物的食品适口性具有潜在的负面影响。然而，本发明人在本文中显示，与使用单独的生育酚相比，根据本发明的天然抗氧化剂组合不会负面影响宠物食品对于猫和狗的适口性。本发明人甚至显示，与使用单独的生育酚相比，天然抗氧化剂组合能够增强适口性，特别是对于狗的适口性。
在一个特别的实施方案中，生育酚为天然混合生育酚。如上所述，天然混合生育酚为α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚的组合。优选地，所述天然混合生育酚包含约7％至约20％的α-生育酚、约1％至约7％的β-生育酚、约50％至约80％的γ-生育酚和约10％至约30％的δ-生育酚。天然生育酚的使用避免了合成或改性产品的添加，所述合成或改性产品被公众负面认知。此外，与使用单一形式的生育酚相比，本发明人在使用混合形式的生育酚时观察到更有效的脂肪抗氧化作用。
在一个优选的实施方案中，鼠尾草酸来自迷迭香。
在一个优选的实施方案中，可水解没食子单宁为没食子酸和/或单宁酸。在一个特别的实施方案中，可水解没食子单宁为没食子酸。
在一个优选的实施方案中，抗氧化剂组合含有大于3ppm的鼠尾草酸，更优选大于5ppm的鼠尾草酸。事实上，当鼠尾草酸以非常低的量存在时，观察不到显著的效果。在一个的实施方案中，抗氧化剂组合含有大于10ppm的鼠尾草酸，更优选大于20ppm的鼠尾草酸，还更优选大于30ppm的鼠尾草酸，甚至更优选大于40ppm的鼠尾草酸。
在一个优选的实施方案中，抗氧化剂组合含有大于3ppm的没食子酸，更优选大于5ppm的没食子酸。事实上，当没食子酸以非常低的量存在时，观察不到显著的效果。在一个特别的实施方案中，抗氧化剂组合含有大于10ppm的没食子酸，更优选大于15ppm的没食子酸。
优选地，组合中鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例为1:3至3:1，更优选1:3至2:1。事实上，与单独的生育酚相比，当使用这些优选的比例时，脂肪抗氧化作用更得以增强。
在一个特别的实施方案中，抗氧化剂组合含有大于3ppm，更优选大于5ppm的生育酚。
在一个特别的实施方案中，本发明的抗氧化剂组合为生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合。换言之，生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁为该组合的唯一抗氧化剂。
有利地，根据本发明的抗氧化剂组合进一步包含至少一种选自羟基酪醇和槲皮素的抗氧化剂。
在一个特别的实施方案中，根据本发明的抗氧化剂组合进一步包含至少槲皮素。
在一个特别的实施方案中，本发明的抗氧化剂组合为生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁和槲皮素的组合。换言之，生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁和槲皮素为该组合的唯一抗氧化剂。
有利地，槲皮素的量低于约150ppm，优选低于150ppm。事实上，本发明人已经发现，用生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合观察到的保护期在添加槲皮素时得以显著增加。当槲皮素不超过150ppm时，槲皮素的添加是特别有利的。事实上，与用生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合获得的保护期相比，直到150ppm的槲皮素的添加以指数方式增加了保护期，而与约150ppm的槲皮素的添加相比，大于150ppm的添加导致保护期减少。
更优选地，槲皮素的量范围为2ppm至150ppm，更优选5ppm至150ppm。事实上，如果槲皮素以可以忽略的量存在于抗氧化剂组合物中，则观察不到显著的效果。
在一个特别的实施方案中，根据本发明的抗氧化剂组合进一步包含至少羟基酪醇。
在一个的实施方案中，本发明的抗氧化剂组合为生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁和羟基酪醇的组合。换言之，生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁和羟基酪醇为该组合的唯一抗氧化剂。
在一个优选的实施方案中，羟基酪醇来自橄榄提取物。
有利地，羟基酪醇的量高于约50ppm，优选高于50ppm。事实上，本发明人已经发现，生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合的保护期在添加羟基酪醇时得以显著增加。当添加大于50ppm的羟基酪醇时，羟基酪醇的添加是特别有利的，保护期从该50ppm值得以以指数方式增加
有利地，根据本发明的抗氧化剂组合进一步包含至少羟基酪醇和槲皮素。
在一个特别的实施方案中，本发明的抗氧化剂组合为生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁、羟基酪醇和槲皮素的组合。换言之，生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁、羟基酪醇和槲皮素为该组合的唯一抗氧化剂。
优选地，羟基酪醇来自橄榄提取物。
优选地，羟基酪醇的量高于约50ppm，更优选高于50ppm。
优选地，槲皮素的量低于约150ppm，更优选低于150ppm。
有利地，根据本发明的组合含有亲脂性抗氧化剂和亲水性抗氧化剂。事实上，生育酚和鼠尾草酸为亲脂性抗氧化剂，而可水解没食子单宁为亲水性抗氧化剂。此外，羟基酪醇和槲皮素为亲水性抗氧化剂。这些性质使得组合能够作用于亲脂性产品和/或亲水性产品，以及作用于油包水或水包油乳液的界面。
有利地，本发明的组合为粉末形式或液体形式。因此，一个特别的实施方案涉及本发明的组合，其进一步包含合适的载体。技术人员能够根据用途、特别是根据组合的形式(即液体或粉末)、和/或根据组合的亲水或疏水形式来确定合适的载体。
特别地，当期望本发明的组合为液体形式时，使用液体形式的合适的载体，其优选地选自油，例如油菜籽油、大豆油、葵花油及其组合。
特别地，当期望本发明的组合为粉末形式时，使用粉末形式的合适的载体，其优选地选自碳水化合物例如麦芽糖糊精和/或环糊精，无机或有机化合物例如粘土、二氧化硅、膨润土，以及它们的组合。
含脂肪组合物
在第二方面，本发明涉及抗氧化含脂肪组合物，其包含至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中在所述组合中：
-生育酚的量小于约500ppm，优选小于500ppm，和
-鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1，优选1:4至3:1。
如上所述，根据本发明的组合能够被掺入任何的含脂肪组合物中。
例如，含脂肪组合物为食品组合物、含脂肪食品成分、药物组合物、含脂肪药物成分、化妆品组合物或含脂肪化妆品成分。
在特别的食品技术领域中，本发明的抗氧化含脂肪组合物可以为如上所定义的食品组合物，或者可以为转而被掺入食品组合物中的含脂肪食品成分(详见图1)。
在第一个特别的实施方案中，本发明的抗氧化含脂肪组合物为抗氧化含脂肪食品成分。换言之，该特别的实施方案涉及包含本发明的抗氧化剂组合的抗氧化含脂肪食品成分(图1中的产品P2)。
优选地，抗氧化含脂肪组合物为选自抗氧化脂肪、包含脂肪的抗氧化适口性增强组合物或包含脂肪的抗氧化粉(antioxidated meal)的抗氧化含脂肪食品成分(图1中的产品P2)。
更特别地，所述抗氧化含脂肪组合物为抗氧化含脂肪食品成分，其为优选地选自动物脂肪、植物油或海洋油，更优选动物脂肪或海洋油的抗氧化脂肪。
还更特别地，所述动物脂肪选自猪脂肪、鸡脂肪、家禽脂肪、羔羊脂或牛脂等，以及它们的副产物。更优选地，所述动物脂肪为家禽脂肪。
还更特别地，所述植物油选自芥花籽油、大豆油、玉米油、橄榄油、葵花油、亚麻籽油、棕榈油、油菜籽油、芝麻油、椰子油、红花油等，以及它们的副产物。更优选地，所述植物油为葵花油。
还更特别地，所述海洋油选自金枪鱼油、沙丁鱼油、鲑鱼油、鲱鱼油、鲭鱼油、沙鳗油、鳟鱼油、罗非鱼油、鲶鱼油、鳀鱼油、金鱼油、油鲱油等，以及它们的副产物。更优选地，所述海洋油为鲑鱼油。
特别地，所述抗氧化含脂肪组合物为抗氧化含脂肪食品成分，其为优选地选自动物粉或植物粉的包含脂肪的抗氧化粉。
特别地，所述抗氧化含脂肪组合物为抗氧化含脂肪食品成分，其为包含脂肪的抗氧化适口性增强组合物。
在第二个特别的实施方案中，本发明的抗氧化含脂肪组合物为抗氧化食品组合物(图1中的产品P6至P10)。
在第一替代性选择中，所述抗氧化食品组合物为已用本发明的抗氧化剂组合(图1中的产品P7)抗氧化的食品组合物(图1中的产品P3)。换言之，所述抗氧化食品组合物的抗氧化性质是用被直接掺入食品组合物中的本发明的抗氧化剂组合获得的。
在第二替代性选择中，本发明的所述抗氧化食品组合物为已用一种或多种抗氧化含脂肪食品成分抗氧化的食品组合物(图1中的产品P6)。换言之，所述抗氧化食品组合物的抗氧化性质是用一种或多种被掺入食品组合物中的抗氧化含脂肪食品成分获得的。
在第三替代性选择中，本发明的所述抗氧化食品组合物为(已经)抗氧化食品组合物(图1中的产品P8)，其抗氧化作用已用一种或多种抗氧化含脂肪食品成分来维持。换言之，所述抗氧化食品组合物的抗氧化性质是用一种或多种被掺入抗氧化食品组合物中的抗氧化含脂肪食品成分维持的。
在第四替代性选择中，本发明的抗氧化食品组合物为已用一种或多种不含脂肪食品成分连同本发明的抗氧化剂组合抗氧化的食品组合物(图1中的产品P9)。换言之，所述抗氧化食品组合物的抗氧化性质是用本发明的抗氧化剂组合连同一种或多种不含脂肪食品成分获得的，所述抗氧化剂组合连同不含脂肪食品成分一起被掺入食品组合物中。
在第五替代性选择中，本发明的所述抗氧化食品组合物为(已经)抗氧化食品组合物(图1中的产品P10)，其抗氧化作用已用一种或多种抗氧化含脂肪食品成分来维持。换言之，所述抗氧化食品组合物的抗氧化性质是用一种或多种被掺入抗氧化食品组合物中的抗氧化含脂肪食品成分维持的。
优选地，所述抗氧化食品组合物为挤出抗氧化食品组合物。
更优选地，所述抗氧化食品组合物为经涂布的挤出抗氧化食品组合物。
对于所有这些特定的实施方案，食品组合物优选为宠物食品组合物。
用于制备抗氧化含脂肪组合物的方法/用于增强生育酚抗氧化作用的方法
本发明进一步的目的涉及用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用的方法，其包括：
a)提供含脂肪组合物，
b)将如上定义的组合掺入所述含脂肪组合物中，由此获得其中脂肪抗氧化作用得以增强的抗氧化含脂肪组合物。
优选地，所述组合的鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例为1:3至3:1，更优选1:3至2:1。事实上，当使用这些优选的比例时，脂肪抗氧化作用更得以增强。
本发明进一步的目的涉及用于制备抗氧化含脂肪组合物的方法，其包括：
a)提供含脂肪组合物，
b)将如上定义的组合掺入所述含脂肪组合物中，由此获得其中脂肪抗氧化作用得以增强的抗氧化含脂肪组合物。
如上所述，能够将根据本发明的组合掺入任何的含脂肪组合物中。
例如，含脂肪组合物为食品组合物、含脂肪食品成分、药物组合物、含脂肪药物成分、化妆品组合物或含脂肪化妆品成分。
在特定的食品技术领域中并且如上所述，步骤a)的含脂肪组合物可以为如上定义的食品组合物，或为含脂肪食品成分(详见图1)。
首先，步骤a)的含脂肪组合物可以为食品组合物(图1中的产品P3)，由此在步骤b)获得抗氧化食品组合物(图1中的产品P7或P9)。
优选地，所述步骤b)通过包合进行。
本文中，因此能够将本发明的组合直接掺入食品组合物(图1中的产品P3)中，而没有预先掺入食品成分例如含脂肪食品成分中，由此在步骤b)获得抗氧化食品组合物(图1中的产品P7)。因此，本文中抗氧化食品组合物的抗氧化性质是通过本发明的抗氧化剂组合实现的。
作为替代性选择，能够将本发明的组合在步骤b)掺入食品组合物之前预先添加到食品成分中，前提是该食品成分中不含脂肪(在本文中称为“不含脂肪食品成分”，图1中的产品P4)，以制备与不含脂肪食品成分组合的抗氧化剂组合(图1中的产品P5)。因此，在步骤b)获得抗氧化食品组合物(图1中的产品P9)。因此，本文中抗氧化食品组合物的抗氧化性质是通过在本文中与不含脂肪食品成分组合的本发明的抗氧化剂组合实现的。
该替代性选择能够例如通过将本发明的组合与不含脂肪食品成分(例如一种或多种优选地选自维生素、矿物质和/或电解质的营养物)混合来进行。
其次，步骤a)的含脂肪组合物为如上所定义的含脂肪食品成分(图1中的产品P1)，由此在步骤b)获得抗氧化含脂肪食品成分(图1中的产品P2)。因此，本文中抗氧化含脂肪食品成分的抗氧化性质是通过本发明的抗氧化剂组合实现的。
有利地，所述方法能够进一步包括步骤c1)：将所述抗氧化含脂肪食品成分(图1中的产品P2)包合至食品组合物中，由此获得抗氧化食品组合物。
本文中，所述食品组合物为食品组合物(图1中的产品P3)，或有利地为(已经)抗氧化食品组合物(图1中的产品P7或产品P9)，由此获得抗氧化食品组合物(图1中的产品P6、P8或P10)。因此，本文中抗氧化食品组合物的抗氧化性质是通过抗氧化含脂肪食品成分实现(或维持)的。
获得的抗氧化食品组合物(图1中的产品P6、P7、P8、P9或P10)可以为能被进一步加工(特别是通过物理和/或热处理)的食品制剂。如上所解释，生育酚在物理和/或热处理下发生的损失通过使用本发明的抗氧化剂组合来补偿。例如，由此获得的抗氧化食品组合物能够被蒸馏或挤出。
作为示例，获得的抗氧化食品组合物(图1中的产品P6、P7、P8、P9或P10)可以为宠物食品制剂，其进一步经受蒸馏以获得湿宠物食品组合物。
作为替代性选择，本发明的方法能够包括步骤c2)：挤出所述抗氧化食品组合物(图1中的产品P6、P7、P8、P9或P10)，由此获得挤出抗氧化食品组合物(图1中的产品P11、P12、P13、P14或P15)。作为示例，获得的抗氧化食品组合物(图1中的产品P6、P7、P8、P9或P10)可以为宠物食品制剂，其进一步经受挤出步骤c2)以获得干燥挤出粗粒或干燥挤出丸。
特别地，所述步骤c1)和c2)能够同时或相继进行。
在第一替代性选择中，在挤出所述食品组合物之前，能够将抗氧化含脂肪食品成分包合至食品组合物，优选抗氧化食品组合物中。
在第二替代性选择中，在挤出食品组合物期间，能够将抗氧化含脂肪食品成分包合至食品组合物，优选抗氧化食品组合物中。
有利地，所述方法进一步包括步骤c3)：将步骤b)的抗氧化含脂肪组合物涂布到挤出食品组合物上，由此获得经涂布的挤出抗氧化食品组合物。
本文中，所述食品组合物为挤出食品组合物(图1中的产品P16)，或有利地为(已经)抗氧化食品组合物(图1中的产品P11、P12、P13、P14或P15)，由此获得经涂布的挤出抗氧化食品组合物(图1中的产品P17、P18、P19、P20、P21或P22)。因此，本文中抗氧化食品组合物的抗氧化性质是通过抗氧化含脂肪食品成分实现(或维持)的。
作为示例，挤出食品组合物(产品P11、P12、P13、P14、P15或P16)可以为干燥挤出粗粒或干燥挤出丸，其进一步经受涂布步骤c3)以获得涂布有抗氧化含脂肪食品成分(例如本发明的抗氧化适口性增强组合物和/或抗氧化脂肪)的干燥挤出粗粒或干燥挤出丸。
优选地，如上所定义的组合的抗氧化剂的总量为至多约1500ppm，优选至多1500ppm，优选至多约1300ppm，优选至多1300ppm，优选700至1300ppm，优选700至1300ppm。
所述特别的实施方案明显可组合。例如，能够在食品组合物特别是抗氧化食品组合物(将其有利地预先与本发明的组合混合)中通过包合和/或通过涂布来添加一种或多种抗氧化含脂肪食品成分。
优选地，在最终的抗氧化食品组合物中进一步获得本发明的组合的技术特征。因此，优选的是生育酚的总量小于约500ppm，优选小于500ppm，并且在抗氧化食品组合物中鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1，优选1:4至3:1。
用途
如上所述，本发明的抗氧化剂组合能够用于增强含脂肪组合物中生育酚的抗氧化作用，所述抗氧化剂组合具有的鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为1:3至3:1，更优选1:3至2:1。
事实上，本发明人在本文中首次显示，与单独的生育酚相比，包含生育酚的天然抗氧化剂组合出人意料地有利。特别地，这样的组合能够延迟含脂肪组合物中经时的脂肪氧化作用(即与使用单独的生育酚作为天然抗氧化剂相比)并且降低生育酚在物理和/或热处理含脂肪组合物下的损失。
更特别地，本发明因此涉及抗氧化剂组合用于延迟含脂肪组合物中经时的脂肪氧化作用以及降低生育酚在物理和/或热处理所述含脂肪组合物下的损失的用途。
试剂盒
本发明的另一个方面涉及一种试剂盒，其在单独包装中的一个或多个容器中包括：
-一种或多种如上所定义的含脂肪组合物；和
-根据本发明的抗氧化剂组合。
更特别地，试剂盒能够在单独包装中的一个或多个容器中包括：
-一种或多种宠物食品成分，其中所述一种或多种宠物食品成分包含至少一种如上所定义的含脂肪宠物食品成分；和
-根据本发明的抗氧化剂组合。
根据本发明的特定的试剂盒进一步包括用于传达信息或说明的手段，以协助使用试剂盒的元件。
实施例
1.材料和方法
1.1.抗氧化剂的组合的制备
1.1.1.抗氧化剂
所提供的生育酚为含有约70％生育酚的液体提取物的形式(Guardian TM T-70IP，Danisco)，或从液体提取物制得的含有约35％生育酚的粉末形式(Decanox MTS-70，ADM，含有约70％的生育酚)。含有约70％生育酚的液体提取物(GuardianTM T-70IP，Danisco)中生育酚同分异构体的比例如下：约15％的α-生育酚、约2％的β-生育酚、约60％γ-生育酚和约23％的δ-生育酚。含有约35％生育酚的粉末提取物(Decanox MTS-70，ADM)中生育酚同分异构体的比例如下：约10％的α-生育酚、约2％的β-生育酚、约68％的γ-生育酚和约20％的δ-生育酚。
所提供的鼠尾草酸(CA)为含有约10％的鼠尾草酸和鼠尾草酚的液体提取物的形式(在油菜籽油上的液体迷迭香提取物，E392，Robertet)，或含有约10％的鼠尾草酸和鼠尾草酚的粉末的形式(Herbor P31，Robertet)。
所提供的可水解没食子单宁为从没食子获得的含有约99％没食子酸的没食子酸(GA)粉末提取物的形式(五倍子(Gala chinensis)提取物，Wuhu Tianci精细化学有限公司)，或从没食子(gallnut)获得的、含有获自没食子(Quercus infectoria)的约96％单宁酸的单宁酸(TA)粉末提取物的形式(Tanal02，Ajinomoto)。
所提供的槲皮素为从巴西芸香(Dimorphandra molis)或落叶松(Larch)获得的含有约95％二氢槲皮素的粉末提取物(二氢槲皮素，Quimdis)的形式。
所提供的羟基酪醇为从橄榄提取物获得的、含有约28％的羟基酪醇和如对羟苯基乙醇的衍生物的液体提取物的形式(Hytolive糖浆，PL Thomas)。
1.1.2.用液体载体的抗氧化剂组合的制备
抗氧化剂组合通过将它们混合成粉末形式或液体形式，并通过添加合适的液体载体葵花油来制备。
特别地，根据本发明的抗氧化剂组合通过将生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁与葵花油混合来制备。
对比抗氧化剂组合通过在不考虑本发明的必要和最小组合，即生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的必要和最小组合的情况下，将生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁与葵花油混合来制备。
这些组合用于实施例1、7至9中。
1.1.3.用粉末载体的抗氧化剂组合的制备
抗氧化剂组合通过将它们混合成粉末形式或液体形式，并通过添加合适的载体膨润土来制备。
特别地，根据本发明的抗氧化剂组合物通过将生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁以及任选的槲皮素和/或羟基酪醇与膨润土混合来制备。
对比抗氧化剂组合通过在不考虑本发明的必要和最小组合，即生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的必要和最小组合的情况下，将生育酚、鼠尾草酸、可水解没食子单宁与膨润土混合来制备。
这些组合用于实施例2至6中。
1.2.包含抗氧化剂的含脂组合物的制备
1.2.1.包含抗氧化剂的脂肪的制备
包含抗氧化剂的脂肪通过将如在实施例1.1.2获得的抗氧化剂组合混合到脂肪中或通过将单独的抗氧化剂混合到脂肪中来制备。在这些产品中，包含至少生育酚(GuardianTM T-70IP，Danisco)、鼠尾草酸(液体迷迭香提取物，Robertet)和可水解没食子单宁(来自五倍子的没食子酸，Wuhu Tianci精细化学有限公司；来自没食子的单宁酸：Tanal02，Ajinomoto)的脂肪为根据本发明的含脂肪组合物。
使用两种不同的脂肪：家禽脂肪(由法国的Diana Food提供)和鲑鱼油(由法国的Daudruy提供)。
1.2.2.包含通过涂布添加的抗氧化剂的宠物食品组合物的制备
制备适于宠物消耗并在挤出和干燥加工之后获得的营养均衡干燥粗粒形式的宠物食品组合物。
通过涂布将如在实施例1.2.1获得的包含抗氧化剂的脂肪以6％添加到这些干燥粗粒上。在这些产品中，用至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁涂布的干燥粗粒为根据本发明的食品组合物，即宠物食品组合物。
由此获得的宠物食品组合物在50℃储存。
1.2.3.包含通过包合掺入的抗氧化剂的宠物食品的制备
制备适于宠物消耗的营养均衡干燥粗粒形式的宠物食品组合物。
将如在实施例1.1.3获得的抗氧化剂组合与预混物(即维生素、矿物质和电解质)在双螺带混合机中混合，将所得共混物与其它宠物食品成分一起进行预处理(pre-congditioning)、挤出和干燥加工。
在这些产品中，至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁包含于其中的干燥粗粒为根据本发明的含脂肪组合物。
由此获得的宠物食品组合物在50℃储存。
1.3.包含通过涂布添加的抗氧化剂的宠物食品组合物的己醛值的确定
分析如在实施例1.2.2获得的宠物食品组合物以确定己醛值。为此，将粗粒粉碎，然后在90℃的水中用氘代己醛通过静态顶空(static head-space)进行提取。通过气相色谱法在极性柱上进行分离，然后通过质谱(SIM)进行检测和定量。
1.4.包含通过涂布添加的抗氧化剂的宠物食品组合物的过氧化物值的确定
分析如在实施例1.2.2获得的宠物食品组合物以确定过氧化物值。根据NFV03-030进行脂肪提取，然后根据NF EN ISO 3960(2010年6月的版本)确定过氧化物值。
1.5.包含通过包合掺入的抗氧化剂的宠物食品组合物的己醛值的确定
分析如在实施例1.2.3获得的宠物食品组合物，以根据AOCS方法Cg 4-94(AOCS.1997)确定己醛值。
1.6.包含通过包合掺入的抗氧化剂的宠物食品组合物的过氧化物值的确定
分析如在实施例1.2.3获得的宠物食品组合物以确定过氧化物值。进行脂肪提取，然后根据AOCS官方方法Cd 8b-90确定过氧化物值。
1.7.在确定的期间释放的总己醛值和过氧化物值的计算
制备膳食后在不同的时间测量己醛值和过氧化物值。
1.8.在确定的期间释放的总己醛值和过氧化物值的计算
制备膳食后在不同的时间测量己醛值和过氧化物值。例如，“在14周的己醛值”是指在14周时测得的己醛值。
“总己醛值”或“总过氧化物值”是指在研究期间释放的己醛或过氧化物的总量，其是基于在代表随时间变化的己醛值或过氧化物值(在储存期间的不同时期测得)的曲线下的面积。
1.9.保护时段的确定
保护时间通过使用Rancimat(743Rancimat，Metrohm)来确定。将在实施例1.2.1制备的3mL包含抗氧化剂的脂肪引入Rancimat反应器中，并且在110℃对家禽脂肪进行热处理而在80℃对鲑鱼油进行热处理。基于导电计的测量，对由Rancimat形成的氧化产物进行直接评估。一旦导电度超过一定值，就会自动评估诱导期。
1.10.适口性测试
双碗测试的原理：
该测试基于以下假设：食品被消耗越多，其适口性越好。
基于两种食品之间的比较，进行单个对此(双碗)适口性测试。根据测试目的，测试在36只狗的评价组上或在40只猫的评价组上进行。
测试的操作方法：
-称量相同量的食品A和食品B，并置于相同的碗中。每一配给量中存在的量能够满足每日需要。
-碗的分布：
狗测试：将碗放置在狗可接近的单独饲料槽中。
猫测试：将碗同时呈现给单独散放箱(loose box)中的每只猫，并且在每一餐时交换碗的位置以避免由偏手性导致的选择。
-测试的持续时间：
*猫测试：约15分钟至约20小时(如果在测试结束之前两个碗之一被完全吃完，则移出两个碗，并停止测试)。
*狗测试：约15分钟至约30分钟(如果在测试结束之前两个碗之一被完全吃完，则移出两个碗，并停止测试)。
研究的参数
-测量的参数：第一消耗食品(“初始吸引力”)和在测试结束时所消耗的每种食品的量；
-计算的参数：以％计的单个消耗比例(CR)
CRA＝A的消耗(g)×100/(A+B的消耗)(g)
CRB＝B的消耗(g)×100/(A+B的消耗)(g)；
如果相比于预定值(其与例如动物重量和/或新陈代谢相关)，动物具有更高或更低的消耗，则不将它们考虑到统计学处理中。
统计学分析：
使用统计学分析来确定2个比例之间是否存在显著性差异。进行具有3个误差阈值(即5％、1％和0.1％)的学生t检验。
使用卡方检验来确定在食品A作为第一食用的食品的宠物数量与食品B作为第一食用的食品的宠物数量之间是否存在显著性差异。
显著性水平如下所记：
2.结果
对于所有以下实施例，实验膳食为包含本发明的抗氧化剂组合的膳食，而对比膳食为不包含本发明的抗氧化剂组合的膳食。
2.1.实施例1-通过涂布添加到挤出的宠物食品组合物上的本发明的组合对己醛 值和过氧化物值的作用
根据实施例1.2.2，通过将包含抗氧化剂的家禽脂肪(6％)涂布到干燥粗粒“VV”上来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“VV”。
下表1显示用于家禽脂肪中的抗氧化剂的类型和量。
表1
在下表2中，10周的HV(以ppm计)和10周的PV(meq/kg脂肪)分别对应于在制备膳食后的正好10周测得的HV值和PV值，而10周的总HV(在ppm)或10周的总PV(meq/kg脂肪)分别对应于从制备膳食直至10周释放的己醛和过氧化物的总量。
如在下表2中所示，与生育酚与可水解没食子单宁和鼠尾草酸两者的组合相比，鼠尾草酸或可水解没食子单宁中仅一者与生育酚的组合提供了更高的己醛值(HV)和过氧化物值(PV)(参见与实验膳食1相比的对比膳食7、8)。这证明具有生育酚与可水解没食子单宁和鼠尾草酸两者的组合是有益的。
用实验膳食n°2，即生育酚、可水解没食子单宁、鼠尾草酸和羟基酪醇的组合(例如与实验膳食n°1相比)获得了较低的己醛和过氧化物值，这表明添加羟基酪醇是有益的。
此外，还显示，单独槲皮素的使用比单独生育酚的使用提供更低的己醛值和过氧化物值(参见与对比膳食n°3相比的对比膳食n°4)。然而，当与鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合时，生育酚提供比槲皮素低得多的己醛值和过氧化物值(参见与对比膳食n°8相比的实验膳食n°1)。这证明了生育酚、可水解没食子单宁和鼠尾草酸的有益组合作用。
表2
10周的HV 10周的PV 10周的总HV 10周的总PV
对比膳食n°1 9 21.4 55 187
对比膳食n°2 43 113 99 267
对比膳食n°3 54 81.5 118 250
对比膳食n°4 24 66.9 72 222
对比膳食n°5 58 143 113 294
对比膳食n°6 11 20 70 202
对比膳食n°7 33 73 88 220
实验膳食n°1 12 31.4 59 189
对比膳食n°8 40 106 104 215
实验膳食n°2 11 43 56 210
实验膳食n°3 1 11 40 184
2.2.实施例2-通过包合被掺入挤出宠物食品组合物中的与单独的生育酚相比或 与本发明之外的抗氧化剂组合(即CA:GA比例为4:1)相比的本发明抗氧化剂组合对己醛值 的作用
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“WW”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“WW”。将50ppm的生育酚包合到所有的膳食中。
对比膳食n°9为包含50ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°4为包含50ppm生育酚、40ppm鼠尾草酸(CA)和40ppm可水解没食子单宁(GA)(CA:GA比例为1:1)的“WW”。
实验膳食n°5为包含50ppm生育酚、80ppm鼠尾草酸和40ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为2:1)的“WW”。
实验膳食n°6为包含50ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和40ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为3:1)的“WW”。
对比膳食n°10为包含50ppm生育酚、160ppm鼠尾草酸和40ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为4:1)的“WW”。
如在下表3中所示，与使用单独的生育酚获得的己醛值相比，使用生育酚与比例为1:1至3:1的鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合获得的在50℃储存14周后测得的己醛值(HV)至少等同，甚至可更低。然而，当将生育酚与CA:GA比例在根据本发明的比例之外的鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合时，干燥粗粒中测得的己醛值显著高于使用单独的生育酚时的己醛值。这些结果清楚地表明，生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合能够在不使用在本发明范围之外的鼠尾草酸:可水解没食子单宁比例的前提下，通过降低己醛值(或通过至少使它稳定)来增强生育酚的抗氧化作用。
表3
2.3.实施例3-通过包合被掺入挤出宠物食品组合物中的与单独的生育酚相比或 与本发明之外的抗氧化剂组合(即CA:GA比例为1:5)相比的本发明抗氧化剂组合对己醛值 的作用
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“WW”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“WW”。将5ppm的生育酚包合到所有的膳食中。
对比膳食n°11为包含5ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°7为包含5ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸(CA)和60ppm可水解没食子单宁(GA)(CA:GA比例为1:1)的“WW”。
实验膳食n°8为包含5ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸和120ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:2)的“WW”。
实验膳食n°9为包含5ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸和180ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:3)的“WW”。
实验膳食n°10为包含5ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸和240ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)的“WW”。
对比膳食n°12为包含5ppm生育酚、60ppm鼠尾草酸和300ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:5)的“WW”。
如在下表4中所示，与使用单独的生育酚获得的己醛值相比，使用生育酚与比例为1:1至1:4的鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合获得的在50℃储存14周后测得的己醛值(HV)至少等同，甚至可更低。然而，当将生育酚与在根据本发明的比例之外的鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合时，干燥粗粒中测得的己醛值显著高于使用单独的生育酚时的己醛值。这些结果清楚地表明，生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合能够在不使用在本发明的比例之外的鼠尾草酸:可水解没食子单宁比例的前提下，通过降低己醛值(或通过至少使它稳定)来增强生育酚的抗氧化作用。
表4
2.4.实施例4-通过包合被掺入挤出宠物食品组合物中的与单独的生育酚相比或 与本发明之外的抗氧化剂组合(即CA:GA比例为4:1或1:5)相比的本发明抗氧化剂组合对己 醛值的作用
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“WW”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“WW”。将200ppm的生育酚包合到所有的膳食中。
对比膳食n°13为包含200ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°11为包含200ppm生育酚、150ppm鼠尾草酸(CA)和50ppm可水解没食子单宁(GA)(CA:GA比例为3:1)的“WW”。
对比膳食n°14为包含200ppm生育酚、200ppm鼠尾草酸和50ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为4:1)的“WW”。
实验膳食n°12为包含200ppm生育酚、55ppm鼠尾草酸和220ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)的“WW”。
对比膳食n°16为包含200ppm生育酚、55ppm鼠尾草酸和275ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:5)的“WW”。
如在下表5中所示，与使用单独的生育酚获得的己醛值相比，使用生育酚与比例为3:1或1:4的鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合获得的在50℃储存14周后测得的己醛值(HV)至少等同。然而，当将生育酚与在根据本发明的比例之外的鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合时，干燥粗粒中测得的己醛值显著高于使用单独的生育酚时的己醛值。这些结果清楚地表明，生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合能够在不使用在本发明的比例之外的鼠尾草酸:可水解没食子单宁比例的前提下，通过降低己醛值(或通过至少使它稳定)来增强生育酚的抗氧化作用。
表5
2.5.实施例5-通过包合被掺入挤出宠物食品组合物中的包含不大于500ppm生育 酚的本发明抗氧化剂组合对己醛值的作用
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“WW”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“WW”。将120ppm的鼠尾草酸和80ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1.5:1)包合到所有的膳食中。
对比膳食n°16为仅包含120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°13为包含5ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°14为包含100ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°15为包含200ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°16为包含300ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°17为包含400ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
实验膳食n°18为包含500ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
对比膳食n°17为包含600ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和80ppm可水解没食子单宁(GA)的“WW”。
如在图2中所示，与仅使用鼠尾草酸和可水解没食子单宁时相比，小于500ppm的生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的使用提供了在50℃14周后获得的更低(或等同)的总己醛值。当超过500ppm时，己醛值变得比不使用生育酚时更高(参见对比膳食n°16、n°17和实验膳食n°18)。这证明，鼠尾草酸和可水解没食子单宁可用于增强生育酚的抗氧化作用，前提是所使用的生育酚的量不超过500ppm。
2.6.实施例6-本发明的组合对在热和/或物理处理下生育酚的损失的作用
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“WW”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“WW”。
对比膳食n°18为包含200ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°19为包含200ppm生育酚、50ppm鼠尾草酸(CA)和200ppm可水解没食子单宁(GA)(CA:GA比例为1:4)的“WW”。
对比膳食n°19为包含200ppm生育酚、50ppm鼠尾草酸和250ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:5)的“WW”。
对比膳食n°20为包含300ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°20为包含300ppm生育酚、90ppm鼠尾草酸(CA)和30ppm可水解没食子单宁(GA)(CA:GA比例为3:1)的“WW”。
对比膳食n°21为包含300ppm生育酚、120ppm鼠尾草酸和30ppm可水解没食子单宁(CA:GA比例为4:1)的“WW”。
对比膳食n°22为包含324ppm生育酚的“WW”。
实验膳食n°21为包含324ppm生育酚、65ppm鼠尾草酸(CA)和130ppm可水解没食子单宁(GA)(比例CA:GA为1:2)的“WW”。
实验膳食n°22为包含324ppm生育酚、65ppm鼠尾草酸(CA)和130ppm可水解没食子单宁(TA，单宁酸)(比例CA:TA为1:2)的“WW”。
如在下表6和7中所示，与使用单独的生育酚时获得的生育酚损失相比，在使用生育酚与比例为3:1或1:4的鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合后产生的生育酚损失至少等同。然而，当将生育酚与比例在根据本发明的比例之外的鼠尾草酸和可水解没食子单宁组合时，生育酚损失显著高于使用单独的生育酚时的生育酚损失。这些结果清楚地表明，生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合能够在不使用在本发明的比例之外的鼠尾草酸:可水解没食子单宁比例的前提下，通过降低生育酚在物理处理下的损失来增强生育酚的抗氧化作用。
表6
表7
如在表8中所示，与使用单独的生育酚(对比膳食n°22)相比，使用与鼠尾草酸以及作为可水解没食子单宁的没食子酸(实验膳食n°21)或单宁酸(实验膳食n°22)组合的生育酚降低了生育酚在物理处理下的损失。这些结果清楚地显示，无论可水解没食子单宁的类型如何(单宁酸或没食子酸)，生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合能够增强生育酚的抗氧化作用。
表8
2.7.实施例7-被掺入脂肪中的本发明抗氧化剂组合对保护时间的作用
根据实施例1.2.1，通过将抗氧化剂掺入鲑鱼油中来制备包含抗氧化剂的脂肪。
在不同的脂肪上测量的保护时间示于图3和图4中。
在图3中，将400ppm的鼠尾草酸和200ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为2:1)添加到鲑鱼油中，与或不与生育酚组合，生育酚的量示于图3中。
在图4中，将100ppm的鼠尾草酸和400ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)添加到鲑鱼油中，与或不与生育酚组合，生育酚的量示于图4中。
如在图3和图4中所示，与仅使用鼠尾草酸和可水解没食子单宁相比，小于500ppm的生育酚与鼠尾草酸和可水解没食子单宁的使用显著增加了鲑鱼油的保护时间。当超过500ppm时，保护时间不再增加。因此，添加比500ppm更多的生育酚是不利的。这证明本发明的组合可用于增强脂肪(例如鲑鱼油)的保护时间，前提是所使用的生育酚的量不超过500ppm。
2.8.实施例8-被掺入脂肪中并包含槲皮素的本发明组合对保护时间的作用
根据实施例1.2.1，通过将抗氧化剂掺入家禽脂肪中来制备包含抗氧化剂的脂肪。
在不同的脂肪上测量的保护时间示于图5至图8中。
在图5中，将400ppm的生育酚、50ppm的鼠尾草酸和100ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:2)添加到家禽脂肪中，与或不与槲皮素组合，槲皮素的量示于图5中。
在图6中，将400ppm的生育酚、100ppm的鼠尾草酸和400ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)添加到家禽脂肪中，与或不与槲皮素组合，槲皮素的量示于图6中。
在图7中，将200ppm的生育酚、100ppm的鼠尾草酸和100ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:1)添加到家禽脂肪中，与或不与槲皮素组合，槲皮素的量示于图7中。
在图8中，将100ppm的生育酚、60ppm的鼠尾草酸和20ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为3:1)添加到家禽脂肪中，与或不与槲皮素组合，槲皮素的量示于图8中。
如在图5至图8中所示，无论鼠尾草酸和可水解没食子单宁的比例如何(1:2、1:4、1:1或3:1)并且无论生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的量如何，生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合在添加槲皮素时的保护时间得以显著增加。当槲皮素不超过150ppm时，槲皮素的添加是特别有利的。事实上，槲皮素直到150ppm的添加以指数方式增加保护时间，而大于150ppm的添加则导致保护时间减少。
2.9.实施例9-被掺入脂肪中并包含羟基酪醇的本发明组合对保护时间的作用
根据实施例1.2.1，通过将抗氧化剂掺入鲑鱼油中来制备包含抗氧化剂的脂肪。
在不同的脂肪上测量的保护时间示于图9和图10中。
在图9中，将500ppm的生育酚、50ppm的鼠尾草酸和200ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:4)添加到鲑鱼油中，与或不与羟基酪醇组合，羟基酪醇的量示于图9中。
在图10中，将300ppm的生育酚、100ppm的鼠尾草酸和100ppm的可水解没食子单宁(CA:GA比例为1:1)添加到鲑鱼油中，与或不与羟基酪醇组合，羟基酪醇的量示于图10中。
如在图9和图10中所示，无论鼠尾草酸和可水解没食子单宁的比例如何(1:4、1:1)并且无论生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的量如何，生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的组合在添加羟基酪醇时的保护时间得以显著增加。当添加大于50ppm的羟基酪醇时，羟基酪醇的添加是特别有利的，保护时间得以以指数方式增加。
2.10.实施例10-本发明的组合对狗的适口性的作用
A.包含没食子酸作为可水解没食子单宁的抗氧化剂组合
根据实施例1.2.2，通过将包含抗氧化剂和2％家禽肝脏消化物的家禽脂肪(6％)涂布到干燥粗粒“XX”上来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“XX”。
下表9示出用于家禽脂肪中的抗氧化剂的类型和量。
表9
组合物 生育酚 鼠尾草酸 没食子酸 GA:CA比例
对比膳食n°23 360 0 0 -
对比膳食n°24 400 0 0 -
对比膳食n°25 200 150 10 15:1
实验膳食n°23 200 120 40 3:1
实验膳食n°24 200 40 160 1:4
进行对比测试，以便比较具有在本发明之外的CA:GA比例的对比膳食23/24/25与具有根据本发明的GA:CA比例的实验膳食23/24对狗的适口性。结果示于表10中。
表10
如在表10中所示，与仅含有生育酚的膳食相比，当膳食含有根据本发明的组合时狗的消耗显著更高。然而，与仅含有生育酚的膳食相比，当膳食含有CA:GA比例在本发明之外的组合时狗的消耗没有显著差异。
B.包含单宁酸作为可水解没食子单宁的抗氧化剂组合
根据实施例1.2.3，通过包合将抗氧化剂掺入干燥粗粒“ZZ”中来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“ZZ”。
进行对比测试，以便比较仅包含生育酚(210ppm)的对比膳食26与包含105ppm生育酚、20ppm鼠尾草酸、75ppm单宁酸(GA:CA比例为1:3.75)的实验膳食25对狗的适口性。结果示于表11中。
表11
如在表11中所示，与仅含有生育酚的膳食相比，当膳食含有根据本发明的组合时狗的消耗显著更高。
2.11.实施例11-本发明的组合对猫的适口性的作用
根据实施例1.2.2，通过将包含抗氧化剂以及3％猪肝脏消化物的家禽脂肪(6％)涂布到干燥粗粒“YY”上来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“YY”。
下表12示出用于家禽脂肪中的抗氧化剂的类型和量。
表12
进行对比测试，以便比较具有在本发明之外的CA:GA比例的对比膳食27/28与具有根据本发明的GA:CA比例的实验膳食26/27对猫的适口性。结果示于表13中。
表13
如在表13中所示，与仅含有生育酚的膳食相比，当膳食含有根据本发明的CA:GA比例的组合时猫的消耗没有显著差异。然而，与仅含有生育酚的膳食相比，当膳食含有CA:GA比例在本发明之外的组合时猫的消耗显著更低。
2.12.实施例12-与合成抗氧化剂相比本发明的组合对狗的适口性的作用
根据实施例1.2.2，通过将包含抗氧化剂以及2％家禽肝脏消化物的家禽脂肪(6％)涂布到干燥粗粒“XX”上来制备营养均衡干燥粗粒，在本文中称为“XX”。
进行对比测试，以便比较实验膳食n°24与涂有包含合成抗氧化剂混合物(BHA、柠檬酸和没食子酸丙酯)的家禽脂肪的对比膳食29对狗的适口性。
还进行对比测试，以便比较对比膳食29与涂有家禽脂肪的实验膳食n°28对狗的适口性，所述家禽脂肪包含200ppm的生育酚、66ppm的鼠尾草酸、134ppm的没食子酸、100ppm的羟基酪醇和100ppm的槲皮素。
结果示于表14中。
表14
如在表14中所示，与合成抗氧化剂相比，当膳食含有根据本发明的(天然)组合物时狗的消耗没有显著差异。
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Claims (21)

1.一种至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中：
-生育酚的含量小于500ppm，和
-鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为1:4至3:1。
2.根据权利要求1所述的抗氧化剂组合，其中，所述生育酚为天然混合生育酚。
3.根据权利要求1或2所述的抗氧化剂组合，其中，所述鼠尾草酸来自迷迭香。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗氧化剂组合，其中，所述可水解没食子单宁为没食子酸。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗氧化剂组合，其中，所述抗氧化剂组合进一步包含至少一种选自羟基酪醇和槲皮素的抗氧化剂。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的抗氧化剂组合，其中，所述抗氧化剂组合进一步包含高于约50ppm的量，优选高于50ppm的量的羟基酪醇。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的抗氧化剂组合，其中，所述羟基酪醇来自橄榄提取物。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗氧化剂组合，其中，所述抗氧化剂组合进一步包含低于约150ppm的量，优选低于150ppm的量的槲皮素。
9.一种抗氧化含脂肪组合物，其包含至少生育酚、鼠尾草酸和可水解没食子单宁的抗氧化剂组合，其中，在所述组合中：
-生育酚的量小于约500ppm，优选小于500ppm，和
-鼠尾草酸:可水解没食子单宁的比例范围为约1:4至约3:1，优选1:4至3:1。
10.根据权利要求9所述的抗氧化含脂肪组合物，其中，所述抗氧化含脂肪组合物为抗氧化食品组合物，优选抗氧化宠物食品组合物。
11.根据权利要求9所述的抗氧化含脂肪组合物，其中，所述抗氧化含脂肪组合物为抗氧化含脂肪食品成分，所述抗氧化含脂肪食品成分优选地选自抗氧化脂肪、包含脂肪的抗氧化适口性增强组合物或包含脂肪的抗氧化餐食。
12.一种用于制备抗氧化含脂肪组合物的方法，其包括：
a)提供含脂肪组合物，
b)将根据权利要求1至8中任一项所述的组合掺入所述含脂肪组合物中，由此获得其中脂肪抗氧化作用得以增强的抗氧化含脂肪组合物。
13.根据权利要求12所述的方法，其中，步骤a)的所述含脂肪组合物为食品组合物，由此在步骤b)获得抗氧化食品组合物。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述步骤b)通过包合进行。
15.根据权利要求12所述的方法，其进一步包括步骤c1)：将步骤b)的所述抗氧化含脂肪组合物包合到食品组合物中，优选如从权利要求13或14获得的抗氧化食品组合物中，由此获得抗氧化食品组合物。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法，其进一步包括步骤c2)：挤出所述抗氧化食品组合物，由此获得挤出抗氧化食品组合物。
17.根据权利要求12所述的方法，其进一步包括步骤c3)：将步骤b)的所述抗氧化含脂肪组合物涂布到挤出食品组合物上，优选如从权利要求16获得的挤出抗氧化食品组合物上，由此获得经涂布的挤出抗氧化食品组合物。
18.根据权利要求1至8中任一项所述的抗氧化剂组合用于延迟含脂肪组合物中的经时脂肪氧化作用和/或降低在物理和/或热处理含脂肪组合物下生育酚的损失的用途。
19.一种试剂盒，其在单独包装中的一个或多个容器中包括：
-一种或多种含脂肪组合物；和
-根据权利要求1至8中任一项所述的抗氧化剂组合。
20.根据权利要求13所述的方法，根据权利要求18所述的用途，根据权利要求19所述的试剂盒，其中所述含脂肪组合物为宠物食品组合物。
21.根据权利要求12所述的方法，根据权利要求18所述的用途，根据权利要求19所述的试剂盒，其中所述含脂肪组合物为含脂肪食品成分，所述含脂肪食品成分优选地选自脂肪、包含脂肪的适口性增强组合物或包含脂肪的餐食。
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