JP2019501639A - 天然酸化防止剤の組合せ物 - Google Patents

Abstract

本発明は、少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物であって、
トコフェロール類の量は約５００ｐｐｍ未満であり、かつ
カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は約１：４〜約３：１の範囲である、酸化防止剤組合せ物に関する。
本発明はまた、この酸化防止剤組合せ物を含んでなる抗酸化脂肪含有組成物に関する。
本発明はまた、脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するための方法、ならびに脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するための酸化防止剤組合せ物の使用に関する。

Description

本発明は、全体として、脂肪の酸化防止の分野に関する。

より詳細には、本発明は、特に、肪脂含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するのに有用な、特定の天然酸化防止剤の酸化防止剤組合せ物に関する。

油脂は、化粧品、医薬品および食物、特に、ペットフードの主成分である。化粧品、医薬品では、油脂は、それらのテクスチャー、臭気および／または風味ならびにそれらの中に含まれる有効成分の適切な活性に寄与する。食物では、油脂は、それらのテクスチャー、臭気および／または風味、栄養価、テクスチャーおよび嗜好性に寄与する。

しかしながら、脂質は、加工または貯蔵中に酸化の影響を非常に受けやすく、これにより、最終的に使用される製品の酸敗を招き、かつ／または栄養価を低下させる可能性がある。具体的には、これにより、ペットフードなどの食物は口に合わないものとなり、ペットなどの対象にとって栄養的に満足させるものではなくなる。

その結果、不可避の脂肪酸化プロセスを遅延させ、かつ、脂肪含有組成物、例えば、ペットフードなどの食物の貯蔵寿命を延ばすために、脂肪含有組成物、例えば、化粧品、医薬品またはペットフード製品などの食品に酸化防止剤が一般的に添加される。

脂肪含有組成物中の酸化防止剤の効力を評価するために、例えば、保護の期間、すなわち、脂肪の酸化が始まるまでの時間の期間、または一次脂肪酸化生成物（過酸化物価（ＰＶ）など）もしくは二次脂肪酸化生成物（ヘキサナール値(the hexanal value)（ＨＶ）など）の定量などのいくつかの指標が使用される。

合成酸化防止剤は、化粧品、医薬品および食物／ペットフード産業において油脂を保護するために広く使用されている。合成防腐剤の健康に対して起こり得る悪影響から、天然酸化防止剤に対する消費者の需要は、過去数十年間で劇的に増加している。様々な植物性抽出物が研究され、異なる化学構造を有する数百の分子が有効な天然酸化防止剤として同定されている(Brewer, 2011; Pokorny et al., 2001)。

特許出願第ＪＰ１９８８０２４０５１４号には、（ａ）緑茶葉の抽出物と、（ｂ）トコフェロール類および／またはローズマリーの抽出物とともに、所望により、（ｃ）没食子酸を含有する薬剤が記述されている。しかしながら、この特許出願には、これらの化合物の量および／または比については言及されていない。当業者にはよく知られているように、緑茶葉は、主にポリフェノール類（カテキン類、エピカテキン類など）を含んでなるが、ケルセチンは微量しか含まない。概説すると、Ｎａｍａｌ Ｓｅｎａｎａｙａｋｅ（２０１３）には、主にカテキン類の緑茶葉の乾燥重量で２５〜３５％の量のポリフェノール類が報告されている。刊行物"Effect of dietary rosemary and α-tocopherols acetate on the oxidative stability of raw and cooked pork following oxidized linseed oil administration", L.Haak et al., Meat Science 78(2008)239-247では、（例えば、α−トコフェロール酢酸エステルおよび／またはローズマリー抽出物および／または没食子酸を含有する）酸化防止剤と組み合わせたまたは組み合わさない酸化亜麻仁油のブタへの２％食餌投与についての、生豚肉および調理済み豚肉の酸化安定性に対する効果が研究されている。しかしながら、これらの化合物は、ブタの消化中にのみ放出されるようにカプセル化されていたため、飼料を酸化から保護しなかった。さらに、ローズマリー抽出物と没食子酸との組合せの重大な脂質酸化促進作用が観察された。

トコフェロール類は、現在、最も多く商品化されている天然酸化防止剤の１つである。それらは、植物油の大部分に存在し、広範に研究されている。トコフェロール類は化粧品、医薬品および食物／ペットフード産業の分野で広く使用されており、これは、特に、これらの天然酸化防止剤が、得られる製品の本質的な機能特性（例えば、ペットフードの嗜好性）に悪影響を与えないことが理由である。

しかしながら、トコフェロール類の使用に関する主要な問題は、保護期間が比較的短いことにあり、脂肪含有組成物中の脂肪酸化は、合成酸化防止剤などの他の酸化防止剤を使用する場合よりも経時的に遅延させにくいことが多い。

さらに、脂肪含有組成物中の唯一の酸化防止剤としてトコフェロール類を使用すると、高い過酸化物価およびヘキサナール値が観察された。

さらに、押出成形中など、さらに物理的および／または熱的処理に供される脂肪含有組成物に添加されると、大量のトコフェロール類が失われることが見出されている。

脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するのに有用である、天然酸化防止剤の酸化防止剤組合せ物が必要であることが認識されている。

従って、本発明の目的は、脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を著しく増強する天然酸化防止剤の組合せ物を提供することである。

本発明の別の目的は、脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を著しく遅延させるためならびに／または脂肪含有組成物の物理的および／もしくは熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させるために使用することができる天然酸化防止剤の組合せ物を提供することである。

本発明の別の目的は、本発明の天然酸化防止剤の組合せ物を含有しない製品と比較して嗜好性を少なくとも維持する能力を有する、天然酸化防止剤の組合せ物を提供することである。

本発明は、少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物であって、
トコフェロール類の量は約５００ｐｐｍ未満であり、かつ
カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は約１：４〜約３：１の範囲である、酸化防止剤組合せ物に関する。

本発明はまた、この酸化防止剤組合せ物を含んでなる抗酸化脂肪含有組成物に関する。

本発明はまた、脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するための方法、ならびに脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するための酸化防止剤組合せ物の使用に関する。

以下の添付図面を参照して、本発明を説明する：

図１：本発明のいくつかの好ましい実施形態の概略図。 図２：封入により添加された、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類と種々の量のトコフェロール類とを含有する乾燥押出成形キブルの、１４週間の間に放出された総ヘキサナール値（ｐｐｍ）。 図３：４００ｐｐｍのカルノシン酸および２００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比２：１）と種々の量のトコフェロール類とを含有するサーモン油で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図４：１００ｐｐｍのカルノシン酸および４００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）と種々の量のトコフェロール類とを含有するサーモン油で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図５：４００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：２）と種々の量のケルセチンとを含有する家禽脂で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図６：４００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および４００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）と種々の量のケルセチンとを含有する家禽脂で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図７：２００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：１）と種々の量のケルセチンとを含有する家禽脂で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図８：１００ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および２０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比３：１）と種々の量のケルセチンとを含有する家禽脂で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図９：５００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸および２００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）と種々の量のヒドロキシチロソールとを含有するサーモン油で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。 図１０：３００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：１）と種々の量のヒドロキシチロソールとを含有するサーモン油で測定した保護の時間（期間は時間で表す）。

定義
特に断りのない限り、量（特に、ｐｐｍでの量）またはパーセンテージは、本明細書では、製品参照、例えば、本発明による脂肪含有組成物の重量で表される。

本開示において、範囲は、詳細に設定しかつその範囲内のありとあらゆる値を記載する必要がないように、省略して記載されている。必要に応じて、その範囲の上限値、下限値、または終点として、範囲内の任意の適当な値を選択することができる。例えば、０．１〜１．０（０．１から１まで）の範囲は、０．１および１．０の終値、ならびに０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９の中間値、０．１〜１．０内に包含される総ての中間範囲、例えば、０．２〜０．５、０．２〜０．８、０．７〜１．０などを表す。さらに、用語「少なくとも」および「未満」は、それ以下に引用される値を包含する。例えば、「少なくとも５％」は「５％」も包含することと理解する必要があり、「５ｐｐｍ未満」は「５ｐｐｍ」も包含することと理解する必要がある。

量、時間的持続期間などのような測定可能な値を指す場合に本明細書において使用される用語「約」とは、関係技術的領域内で当業者によって容易に決定され得る標準的な変動を包含することを意味する。好ましくは、特に断りのない限り、これらの値は、±５％の変動を包含することを意味する。

本発明において使用される用語「比の範囲外」とは、カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比が本発明による比の範囲外であることを意味する。

全体にわたって使用される通り、文脈上明確に指示されない限り、単語の単数形は複数形を含み、逆もまた同様である。従って、「１つの(a)」、「１つの(an)」および「その(the)」という指示語は、全体として、それぞれの用語の複数形を含む。例えば、１つの「方法」または「食物」への言及は、複数のそのような「方法」または「食物」を含む。同様に、「含んでなる(comprise）」、「含んでなる(comprises)」および「含んでなること(comprising)」という単語は、包括的に解釈されるべきである。同様に、「含む(include)」、「含むこと(including)」および「または」という用語は、総て包括的であると解釈されるべきである。しかしながら、これら総ての用語は、「からなる(consist of)」などの単語を使用して言及し得る排他的な実施形態を包含するものとして考えなければならない。

本明細書において例示される方法および組成物ならびに他の実施形態は、当業者が理解するように、それらは変化し得るため、本明細書において記載される特定の方法、プロトコール、および試薬に限定されない。

他に定義されない限り、本明細書において使用される総ての技術用語および科学用語、専門用語、ならびに頭字語は、本発明の分野またはその用語が使用される分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。本明細書において記載されるものと類似または等価の任意の製品、方法、または他の手段もしくは材料を本発明の実施において使用することができるが、好ましい組合せ物、組成物、方法、または他の手段もしくは材料を本明細書において記載している。

用語「ｐｐｍ」とは、その従来の意味に従って本明細書において使用される。より正確には、それは、本明細書では、酸化防止剤組合せ物の総重量に対する重量（ｍｇ／ｋｇ）の量を指す（特に断りのない限り）。

用語「対象」とは、本明細書では、ペットまたはヒトを指す。

用語「ペット」および「動物」は同義語であり、限定されるものではないが、ネコ、イヌ、エビ、魚、ウサギ、モルモット、フェレット、ハムスター、マウス、アレチネズミ、トリ、ウマ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、ロバ、ブタなどを含む任意の動物を意味する。本発明に関連して、イヌ、ネコおよび魚などのペットが好ましい。より詳細には、イヌおよびネコが好ましい。

本明細書において使用される場合、用語「酸化防止剤」とは、易酸化性脂肪の酸化を遅延させるかまたは防止する任意の分子を指す。従って、本発明に関連して、酸化防止剤は、少なくとも、脂質、すなわち、脂肪の酸化防止に作用する。酸化防止剤は、以下により作用する：生物学的に重要な反応性フリーラジカルまたは他の活性酸素種の捕捉、酸素ラジカル形成の防止、フリーラジカルまたは他の活性酸素種のより反応性の低い種への触媒的変換、遷移金属のキレート化および／または一次酸化防止剤の再生。

本明細書において使用される場合、本発明において使用される酸化防止剤は、組成レシピを考慮するときに添加される、すなわち、外因性の天然酸化防止剤であると理解する必要がある。言い換えれば、内因性酸化防止剤および合成酸化防止剤は、総ての特許請求された酸化防止剤の量および比の計算から明確に除外される。これは、組成物レシピの結果として、１種以上の内因性（固有の）酸化防止剤の存在が何であれ、本明細書において記載される組成物に外部の天然酸化防止剤が添加されることを意味する。

酸化防止剤は親油性酸化防止剤または親水性酸化防止剤のいずれかである。

さらに、本発明の酸化防止剤は、任意の適当な形態で使用することができる。特定の実施形態では、無視できない量の酸化防止剤を含有する、植物性材料などの材料、または濃縮物またはジュースを含む抽出物もしくは一部もしくは材料の一部の抽出物を使用することができる。別の特定の実施形態では、純粋な酸化防止剤を使用することができる。

用語「抗酸化処理された」または「抗酸化製品Ｘ」とは、製品Ｘが本発明の酸化防止剤組合せ物を含んでなることを意味する。以下では、明確にするために、「酸化防止剤組合せ物」を短く「組合せ物」と呼ぶことがある。

本明細書において使用される場合、「トコフェロール類の抗酸化作用を増強すること」または「トコフェロール類の抗酸化作用を増強する」とは、本発明による組合せ物を含む脂肪含有組成物、すなわち、少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類とを組み合わせることで得られる抗酸化作用は、トコフェロール類単独を含む脂肪含有組成物で得られる抗酸化作用よりも著しく優れていることを意味する。具体的には、トコフェロール類の抗酸化作用は、脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を（つまり、トコフェロール類単独の使用と比較して）著しく遅延させることによってかつ／または脂肪含有組成物の物理的および／もしくは熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させることによって増強される。

本明細書において使用される場合、「経時的な脂肪酸化を遅延させること」とは、保護の時間が増加することを意味する。用語「保護の時間」または「保護の時期」または「保護の期間」とは、対照脂肪において酸化が始まるまでの時間の期間と比較した、脂肪において酸化が始まるまでの時間の期間を指す。これは以下のように計算される：保護の時間（時間）＝酸化防止剤（単数または複数）を含有する脂肪についての酸化の誘導時間（時間）−酸化防止剤を添加していない対照脂肪についての酸化の誘導時間（時間）。

本明細書において使用される場合、「脂肪含有組成物の物理的および／または熱的処理下でトコフェロール類の損失を減少させること」とは、前記物理的および／または熱的処理の終了時の試験脂肪含有組成物中のトコフェロール類の残留割合が、その組成物が天然酸化防止剤としてトコフェロール類単独を含んでなる場合よりもその組成物が本発明の組合せ物を含んでなる場合により高いことを意味する。

用語「トコフェロール類」とは、トコフェロール類のα、β、γおよび／またはδ異性体および／またはそれらの誘導体のいずれかを指す。「天然混合トコフェロール類」に言及する場合、それは（特に、エステル化されていない）天然形態のα、β、γおよびδトコフェロール類の組合せ物を意味する。

用語「カルノシン酸」とは、例えば、ローズマリー(Rosmarinus officinalis）またはコモンセージ(Salvia officinalis)などの植物性材料において見出される、化学式Ｃ_２０Ｈ_２８Ｏ_４を有するフェノール性ジテルペンおよび／またはその誘導体を指す。本明細書において使用される用語「カルノシン酸」は、カルノシン酸および／またはカルノソール（化学式Ｃ_２０Ｈ_２６Ｏ_４）を包含する。

「ローズマリー」とは、その植物性材料(Rosmarinus officinalis)の総てまたは任意の抽出物、一部、もしくはその植物性材料の一部の、例えば、葉からの抽出物のいずれかを指す。ローズマリーは、カルノシン酸（およびカルノソール）に加えて、ロスマリン酸および／またはロスマノールを含んでなり得る。

用語「加水分解型ガロタンニン」とは、ポリフェノールモノマーの没食子酸で形成され、グルコースなどのポリオール炭水化物のヒドロキシル基と結合したポリマーである。本明細書において使用される「加水分解型ガロタンニン類」は、加水分解型ガロタンニン類、例えば、タンニン酸など、ならびに没食子酸などの加水分解生成物を包含する。

用語「ケルセチン」とは、カラマツまたはジモルファンドラ・モリス(Dimorphandra mollis)などいくつかの植物において見出され得る、化学式Ｃ_１５Ｈ_１０Ｏ_７を有するポリフェノール性フラボノイド化合物および／またはその誘導体、例えば、ジヒドロケルセチン（化学式Ｃ_１５Ｈ_１２Ｏ_７）などを指す。従って、特定の実施形態では、ケルセチンはジヒドロケルセチンの形態である。

用語「ヒドロキシチロソール」とは、オリーブなどの植物性材料から得られ得る、化学式Ｃ_８Ｈ_１０Ｏ_３を有する３，４−ジヒドロキシフェニルエタノールおよび／またはその誘導体、例えば、チロソールなどを指す。

「オリーブ」とは、その植物性材料の総てまたは任意の抽出物、一部、もしくはその植物性材料由来の一部の、例えば、葉、果実、果肉、仁、オリーブ油製造の採油廃液および／またはオリーブの油からの、抽出物のいずれかを指す。オリーブは、ヒドロキシチロソール（およびチロソール）に加えて、オレウロペインおよび／またはリグストロシドを含んでなり得る。

用語「適当な担体」（本明細書では「担体」とも呼ばれる）とは、本明細書では、本発明の組合せ物に関連して使用される通常は不活性な物質（すなわち、不活性分子または不活性分子混合物）を意味する。典型的には、担体は、前記組合せ物の適用を助ける。適当な担体は、粉末または液体の形態で存在し得、親水性および／または親油性の特性を有し得る。液体形態の適当な担体の例は、水または油（例えば、ナタネ油、大豆油、ヒマワリ油）である。粉末形態の適当な担体の例は、炭水化物（例えば、マルトデキストリン、シクロデキストリン）、微生物性タンパク質（例えば、酵母）、植物性タンパク質（例えば、大豆粉、大豆タンパク質濃縮物、大豆タンパク質単離物）、動物性タンパク質、無機または有機化合物（例えば、クレー、ベントナイト、シリカ）などである。

本明細書において使用される場合、「脂肪含有組成物」は、易酸化性の少なくとも１種の脂肪を含有する任意の成分、組成物または材料である。脂肪含有組成物とは、易酸化性でありかつ化粧品、医薬品および食物の開発に使用可能な少なくとも１種の脂肪を含有する成分、組成物または材料のいずれかを指す。本発明による「脂肪含有組成物」の脂肪含量は、「微量の脂肪」ではない。本明細書において使用される用語「微量の脂肪」とは、無視できる脂肪量、またはわずかな脂肪量、または検出不能な脂肪量（オンラインで入手可能な欧州規則（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）ＥＣ ｎ°１５２／２００９ 粗油脂の決定−手順Ｂ（Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｕｄｅ ｏｉｌｓ ａｎｄ ｆａｔｓ−Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ Ｂ）に記載されているような標準的な方法によって決定される閾値レベルより低い）を意味する。

脂肪の例としては、任意の起源の脂肪または油、例えば、動物性脂肪、植物油または海洋性油などが挙げられる。大量に入手可能な植物油は、典型的には、カノーラ油、大豆油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヒマワリ油、亜麻仁油、パーム油、ナタネ油、胡麻油、ヤシ油、ベニバナ油など、ならびにそれらの副産物である。典型的な動物性脂肪は、豚脂、鶏脂、家禽脂、子羊脂または牛脂など、ならびにそれらの副産物である。海洋性油は、典型的には、マグロ油、イワシ油、サーモン油、ニシン油、サバ油、イカナゴ油、マス油、ティラピア油、ナマズ油、アンチョビー油、魚油、ニシン油など、ならびにそれらの副産物である。本明細書では、動物起源、植物起源、海産物起源に由来する脂肪も包含される。

脂肪は、例えば、飽和または不飽和である脂肪酸エステルまたは遊離脂肪酸であり、それらは内因性（例えば、動物消化物、動物性または植物性の食物に含まれる脂肪など）または外因性であり得る。

本明細書において使用される用語「食物」または「食品」または「食物組成物」とは、易酸化性でありかつ対象による経口摂取を目的とし、その対象に少なくとも１つの栄養素を提供する少なくとも１種の脂肪を含有する製品または組成物を意味する。「食物」は、固体、液体、ゲル、またはそれらの混合物もしくは組合せ物である任意の形態のそのような製品を包含する。本発明による組合せ物は、（上に定義した少なくとも１種の脂肪を含有する）任意の食品に添加され得る。食物組成物の限定されない例は、栄養調整乳、アイスクリーム、乳製品、クリーマ、ペットフード製品、飲料、栄養補助食品、食品添加物、食品補給物、菓子、チョコレートベースの製品、調味料製品、マヨネーズ、スープ、冷凍食品、ケーキ、ベーキング製品、シリアルベースの製品、およびデザートである。本明細書において使用される食物組成物は、例えば、さらに熱処理および／または押出成形および／またはレトルト加熱に供される食物調製物などのさらに加工され得る食物調製物も包含する。

用語「ペットフード」または「ペットフード製品」または「ペットフード組成物」とは、ペットによる摂取を目的とした食物を指す。例えば、「ドッグフード」または「ドッグフード製品」とは、イヌによる摂取を目的とした組成物を意味する。別の例として、「キャットフード」または「キャットフード製品」とは、ネコによる摂取を目的とした組成物を意味する。「ペットフード」は、魚飼料（以下、「フィッシュフード」と呼ばれる）などのペット飼料を包含する。従って、「フィッシュフード」とは、魚による摂取を目的とした組成物を意味する。

ペットフードは、本明細書において、乾燥したペットフード（約１４％未満の水分量を有する）、缶入りまたはウェットなまたは高水分を含むペットフード（約５０％を超える水分量を有する）および半湿性のペットフード（約１４％〜約５０％の水分量を有する）を包含する。ペットフードの例は、キブルなどの押出成形ペットフード、チャンクイン「Ｘ」製品、ローフ、スナック、おやつ、飲料またはペットフードサプリメントである。

「栄養学的に完全な」、「栄養的にバランスの取れた」または「完全かつ栄養的にバランスの取れた食物」とは、例えば、コンパニオンアニマル栄養の分野で認知されたまたは管轄権を持つ当局の勧告に基づいて、その食物の意図された受容者または消費者に必要な既知の栄養素総てを、適当な量および割合で含有するものである。従って、そのような食物は、補助栄養源を追加することなく、生活を維持するための唯一の食事摂取源として役立つことができる。従って、そのような食物は、以下に定義されるように、食品補給物、スナック、飲み物およびおやつを含まない。栄養学的に完全な食物は、例えば、以下に定義される、キブルなどの押出成形ペットフード、チャンクイン「Ｘ」製品およびローフの形態であり得る。

食物またはペットフードなどの「押出成形された」製品は、押出成形プロセスまたはペレット化プロセスによって変換された任意の製品を指す。好ましくは、押出成形された製品は乾燥押出成形製品である。特定の実施形態では、押出成形された製品はキブルである。別の特定の実施形態では、押出成形された製品はフィッシュペレットである。

用語「フィッシュペレット」とは、押出成形プロセスまたはペレット化プロセス、好ましくは、ペレット化プロセスによって得ることができるフィッシュフード、特に、乾燥押出成形製品（約１４％未満の水分、好ましくは、約９％未満の水分を含有する）を指す。フィッシュペレットは、典型的には、例えば、限定されるものではないが、とりわけ、フィッシュミールおよびオキアミミールを含む海洋性タンパク質、植物性タンパク質および食肉処理場の副産物などの１種以上のタンパク質源からなる。フィッシュペレットは、さらに、典型的には、ペレットに封入されたかまたはペレット上にコーティングされた、海洋性油および／または植物油および／または動物性脂肪などの脂肪を含有する。

本明細書において使用される用語「キブル」とは、ペレット化プロセスまたは押出成形プロセス、好ましくは、押出成形プロセスのいずれかによって形成された粒状チャンクまたはピースを指す。典型的には、キブルは、乾燥および半湿性のペットフードを与えるように製造される。特定の実施形態では、キブルは乾燥キブルである。ピースは、方法または装置によって大きさおよび形状が変化し得る。例えば、キブルは、球形、円筒形、卵形、または同様の形状を有し得る。それらは、例えば、約２ｃｍ未満の最大寸法を有し得る。キブルは、典型的には、キブルに封入されたかまたはキブル上にコーティングされた、動物性脂肪および／または植物油および／または海洋性油などの脂肪を含有する。

用語「チャンクイン「Ｘ」製品」とは、本明細書において、混合物（前記混合物は「Ｘ混合物」である）中にチャンクを含んでなる食用のウェットな食材総てを意味する。その典型例は、チャンクインゼリー製品、チャンクイングレイビー製品などである。このカテゴリーの「チャンクインＸ」製品は、ゼリー、グレイビーなどのようなＸ混合物中に含まれ得るチャンク以外の食用形態も包含する。例えば、チャンク以外の形態は、スライスした製品、すりつぶした製品などであり得る。チャンクイン「Ｘ」製品は、典型的には、動物性脂肪および／または植物油および／または海洋性油などの脂肪を含む。

本明細書において使用される用語「ローフ」とは、湿性製品として得られる食用食材を指し、テリーヌ、パテ、ムースなどを含む。ローフは、典型的には、動物性脂肪および／または植物油および／または海洋性油などの脂肪を含む。

用語「食物サプリメント」または「栄養補助食品」または「サプリメント」とは、通常の食事に加えて摂取されることを目的とした製品を意味する。サプリメントは、任意の形態、例えば、固体、液体、ゲル、錠剤、カプセル剤、粉末などであり得る。好ましくは、それらは、都合のよい投与形で提供される。いくつかの実施形態では、それらは、バルク粉末、液体、ゲル、または油のようなバルク消費者パッケージで提供される。他の実施形態では、サプリメントは、スナック、おやつ、サプリメントバー、飲み物などのような他の食物品目中に含まれるように大量に提供される。食物サプリメントは、典型的には、食物サプリメントに封入されたかまたは食物サプリメント上にコーティングされた、動物性脂肪および／または植物油および／または海洋性油などの脂肪を含む。

用語「おやつ」とは、ペットとその所有者との間の緊密な結びつきを確立するプロセスを助け、促進しまたは持続させるために、所有者によって、好ましくは、非食事時間に、ペットに与えられるように設計された任意の食物品目を意味する。おやつの例は、骨、生皮、スティック、ピロー、ビスケットなどである。おやつは、栄養的であるかまたは栄養的ではなく、完全にまたは部分的に消耗可能であり得る（例えば、消耗可能なおもちゃ）。おやつは、栄養的にバランスの取れた食物に匹敵する方法で嗜好性向上剤を含む場合が多い。おやつは、典型的には、おやつに封入されたかまたはおやつ上にコーティングされた、動物性脂肪および／または植物油および／または海洋性油などの脂肪を含む。

本明細書において使用される場合、「食物成分」は、摂取に適し、食物組成物中に添加することができる任意の化合物、組成物または材料である。

具体的には、「ペットフード成分」は、ペットの摂取に適し、ペットフード組成物中に添加することができる任意の化合物、組成物または材料である。ペットフード成分の限定されない例は、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、穀類、炭水化物、脂肪または脂質、栄養素、嗜好性向上剤、動物消化物、食肉、グルテン、防腐剤、界面活性剤、テクスチャリング剤もしくはテクスチャー付与剤または安定化剤、着色剤、無機リン酸化合物、フレーバー、調味料などである。

本明細書において使用される場合、「脂肪含有食物成分」とは、易酸化性でありかつさらに、食物組成物、特に、ペットフード組成物中に添加され得る少なくとも１種の脂肪を含有する、特に、ペットフード成分などの「食物成分」を指す。

本明細書において使用される場合、「除脂肪食物成分」とは、任意の易酸化性脂肪を含まないかまたは微量の脂肪しか含まずかつ食物組成物、特に、ペットフード組成物に添加され得る、特に、ペットフード成分、などの「食物成分」を指す。

本明細書において使用される場合、用語「嗜好性」とは、特定の食物組成物を食べるための対象の全体的な意欲を指す。対象が、例えば、２つ以上の食物のうちの１つに対して嗜好を示す場合はいつでも、その好ましい食物はより「美味しく」、「嗜好性が増強され」ている。そのような嗜好は、対象の感覚のいずれかから生じ得るが、典型的には、とりわけ、味、芳香、風味、テクスチャー、臭いおよび／または口当たりに関連する。

ペットの嗜好性などの嗜好性を評価するための種々の方法が存在する。そのような方法の例は、ペットを同時に（例えば、少なくとも２つの異なるペットフードの相対的な食物消費量を測定することによる、例えば、並べて自由選択比較）、または逐次に（例えば、シングルボウル試験方法を用いて）ペットフードに曝すことを含む。有利には、少なくとも２つの異なる方法を用いて、所与のペットフードの嗜好性についてこのようにして得られた結果を集約し得る。

機能性の観点から、用語「嗜好性向上剤（ＰＥ）」、「パラタント(palatants)」、「フレーバー」、「嗜好性薬剤(palatability agent)」、「食欲増進因子」、「風味組成物」、「嗜好性向上組成物（ＰＥＣ）」、「風味向上剤」、および任意の他の同様の用語は、同等に、対象の食物組成物の嗜好性を向上させる任意の材料を意味する。典型的には、食物の嗜好性向上剤は、対象にとって魅力的であるかまたは快い、芳香、味、後味、臭い、口当たり、テクスチャー、および／または官能感覚を提供する食用組成物である。

例えば、嗜好性向上組成物は、その臭いにより最初の食物アピールに寄与し得かつ／またはその臭いだけでなくその味および／もしくはその後味、ならびに／またはその口当たり、ならびに／またはそのテクスチャーにより継続的摂取に寄与し得る。例えば、ペットの場合、「最初のアピール」とは、ペットが食物を最初に味見したりまたは試したりするよう誘う嗜好性の態様であり、それは、「最初の選択」または「最初の摂取食物」という基準によって測定することができる。「継続的摂取」は、最初に味見したまたは試しただけの食物をペットが摂取し続けるように誘う嗜好性の態様である。

構造的観点から、用語「嗜好性向上剤（ＰＥ）」、「パラタント」、「フレーバー」、「嗜好性薬剤」、「食欲増進因子」、「風味組成物」、「嗜好性向上組成物（ＰＥＣ）」、「風味向上剤」、および任意の他の同様の用語は、天然材料、加工材料もしくは未加工材料、合成材料、または天然材料の一部および合成材料の一部であり得る、単一材料もしくは材料のブレンドを指し得る。

嗜好性向上組成物の嗜好性を向上させる成分の限定されない例は、動物消化物、ベジタリアンの嗜好性向上組成物成分、無機リン酸化合物、メイラード成分、メイラード反応生成物、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、炭水化物、脂肪、栄養素、防腐剤、界面活性剤、テクスチャリング剤、フレーバーなどである。成分は、嗜好性向上組成物中に含まれ得るし、または用語「嗜好性向上組成物」に包含される変換された材料を生産するために、ペットフードに接触させ、ｉｎ ｓｉｔｕで反応させることができる。前記組成物中で共に反応する成分の例は、限定されるものではないが、脂肪、ペプチド、アミノ酸、および炭水化物であり、メイラード反応生成物などのような変換された材料が得られる。

本明細書において使用される用語「無機リン酸化合物」とは、少なくとも１個のリン原子を含んでなる化学化合物を意味する。この化学化合物は、イオン化されているかまたはイオン化されていない天然物または合成物であり得る。無機リン酸化合物の例としては、ポリリン酸塩、ピロリン酸塩、および一リン酸塩が挙げられる。

用語「動物消化物」とは、本明細書において、清浄な、未分解の動物組織の化学的および／または酵素的加水分解から生じる材料を意味する。いくつかの実施形態では、本明細書において使用される動物消化物は、米国飼料検査官協会(the Association Of American Feed Control Officials,Inc.)(ＡＡＦＣＯ）によって公布された定義と完全に合致している。動物消化物は、好ましくは、毛、角、歯、蹄および羽毛を除く、冷血の海洋動物を含む動物組織から誘導される。当業者であれば、そのような組織は好ましくないが、適正薬品製造基準の下でさえも微量は不可避に見出され得ることを理解するであろう。また、内臓内容物または異物または糞便も含まれないが、微量の汚染物質は存在することがある。動物消化物は、乾燥させてあっても乾燥させてなくてもよい。動物消化物の例は、以下である：
−家禽肉（または豚肉、牛肉、ヒツジ(sheep)、子羊肉、魚肉など）の消化物：清浄で未分解の組織の化学的および／または酵素的加水分解から生じる家禽肉（豚肉、牛肉など）由来の材料；
−豚肉（または牛肉、ヒツジ(sheep)、子羊肉、魚肉など）副産物の消化物：家畜(cattle)（ブタ、ヒツジ、子羊など）の、肉以外の、レンダリングされていない清浄な部分（例えば、内容物を含まない、肺、脾臓、腎臓、脳、肝臓、血液、部分的に脱脂された低温脂肪組織、および胃腸）の清浄な未分解の組織の化学的および／または酵素的加水分解から生じる豚肉（牛肉など）由来の材料；
−家禽肉副産物の消化物：家禽の、肉以外の、レンダリングされていない清浄な部分（肝臓、心臓、頭部、足、および内臓など）の清浄な未分解の組織の化学的および／または酵素的加水分解から生じる材料（本明細書において使用される場合、「家禽」とは、任意の種または種類の鳥類、好ましくは、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒルなどを包含する）；および
−魚肉副産物の消化物：魚の、肉以外の、レンダリングされていない清浄な部分の清浄な未分解の組織の化学的および／または酵素的加水分解から生じる材料（本明細書において使用される場合、「魚」とは、任意の種または種類の魚類または甲殻類、好ましくは、マグロ、サケ、タラ、白身魚、エビ、イワシなどを包含する）。

動物消化物はまた、「畜産物」または「動物由来成分」とも呼称され、これら総ての用語は、本明細書において同義的に使用される。

「タンパク質」とは、動物の摂取に適合する総ての従来のタンパク質源、特に、植物性タンパク質、動物性タンパク質（カゼインまたはアルブミンまたは動物消化物または食肉など）、および微生物性タンパク質（酵母または真菌または藻類など）を含む。用語「食肉」とは、上述の動物の屠体から得られる食物、すなわち、家禽肉、豚肉、牛肉、ヒツジ(sheep)、子羊肉、魚肉を意味する。「タンパク質」はまた、タンパク質加水分解物を含み、その加水分解の程度は、目的に応じて制御することができる。

本明細書における用語「酵母」とは、任意の酵母、好ましくは、不活性なもの、ならびに動物の摂取のための組成物と適合する酵母副産物を指す。酵母はタンパク質が豊富なものとして当技術分野においてよく知られている。酵母としては、限定されるものではないが、ビール酵母、パン酵母、トルラ酵母、糖蜜酵母などが挙げられる。酵母副産物としては、限定されるものではないが、酵母抽出物、酵母加水分解物、クリーム酵母などが挙げられる。

用語「穀類」とは、栄養源（例えば、タンパク質、デンプン、無機物、およびビタミン類）として使用され得る穀物を意味する。穀類の例は、トウモロコシ、マイロ、アルファルファ、小麦、大麦、米、大豆、モロコシなどである。

用語「グルテン」とは、小麦、トウモロコシ、ライ麦、大麦、オート麦またはそれらの交配品種およびそれらの誘導体のタンパク質画分を意味する。

本明細書において使用される用語「植物」は、植物体を包含する。植物の例は、セイヨウアブラナ、大豆、トウモロコシ、オリーブ、ヒマワリ、亜麻仁、ヤシ、ベニバナ、ナタネ、小麦、トウモロコシ、ルピナス、エンドウまたは米である。

用語「ベジタリアンの嗜好性向上組成物成分」とは、本明細書において、肉または畜産物を含まない、植物源、細菌源、真菌源または藻類源から誘導または単離された材料、または動物源から得られない単一化合物を意味する。ベジタリアンの嗜好性向上組成物成分は、乾燥しまたは液体であり得る。

炭水化物の例としては、デキストロース、フルクトース、スクロース、多糖類、繊維、デンプンなどが挙げられる。

「繊維源」または「食物繊維」とは、動物の消化酵素による消化に耐性のある植物成分に対応する食物成分を指す。繊維は、可溶性または不溶性であり得る。本明細書において開示された食餌における使用のための食物繊維源としては、限定されるものではないが、ビートパルプ、グアーガム、チコリー根、オオバコ、セルロース、小麦 オーツ麦(wheat oat)、トウモロコシふすま、亜麻仁などが挙げられる。

栄養素の例としては、限定されるものではないが、ビタミン類、無機物および電解質、例えば、ビタミンＡ、Ｃ、Ｅ、Ｂ１２、Ｄ３、葉酸、Ｄ−ビオチン、シアノコバラミン、ナイアシンアミド、チアミン、リボフラビン、ピリドキシン、メナジオン、β−カロテン、パントテン酸カルシウム、コリン、イノシトール、カルシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛、鉄、マンガン、銅、ヨウ素などが挙げられる。

本発明の文脈において使用され得る、界面活性剤、調味料、テクスチャリング剤またはテクスチャー付与剤、防腐剤、安定化剤は、当業者に周知である。

「医薬組成物」または「医薬品」とは、少なくとも１種の脂肪を含有する薬学上許容可能な組成物、例えば、錠剤（例えば、チュアブル錠、発泡錠もしくはフィルムコート錠）、またはカプセル剤（例えば、ハードシェルカプセル剤）、または液体もしくは溶解性粉末などを指す。医薬組成物は、様々な従来の投与経路により、例えば、経口、非経口、局所または経皮投与によって対象に投与され得る。

本明細書において使用される場合、「脂肪含有医薬品成分」は、易酸化性でありかつ医薬組成物中に添加することができる少なくとも１種の脂肪を含有する任意の化合物、組成物または材料である。脂肪含有医薬品成分は、典型的には、粉末として錠剤混合物に添加することができまたはカプセル剤の製造のためのそれ自体公知の方法でカプセル剤中に充填することができる。

本明細書において使用される用語「化粧品」または「化粧品製品」は、易酸化性である少なくとも１種の脂肪を含有する、化粧品、洗面用品および皮膚に関する製品を包含する。例は、クリーム、ローション、溶液、シャンプー、コンディショナー、口紅、日焼け止め化粧品、メイクアップ化粧品、スプレーまたはゲルなどの皮膚および毛髪ケア製品である。

本明細書において使用される場合、「脂肪含有化粧品成分」は、易酸化性でありかつ化粧用組成物中に添加することができる少なくとも１種の脂肪を含有する任意の化合物、組成物または材料である。

本明細書において使用される「コーティングすること」または「コーティングされた」とは、例えば、噴霧、散粉などによる、食物の表面への、本発明の脂肪含有組成物などの、製品または組成物の局所的堆積を指す。本発明の組合せ物は、典型的には、１種以上の脂肪および／または嗜好性向上組成物、特に、脂肪を含んでなる嗜好性向上組成物との混合物でコーティングすることによって、食物に添加され得る。

本明細書において使用される「封入」または「封入された」とは、本発明の脂肪含有組成物などの製品または組成物を、ペットフードなどの食物のコア中へ添加することを指す。例えば、ペットフードなどの食物中への脂肪含有組成物の封入は、それを他の食物成分、例えば、脂肪含有ペットフード成分と混合することによって行うことができる。必要に応じて、最終的なペットフードを得るために、さらなる加工工程（熱処理および／または押出成形および／またはレトルト加熱などを含む）を実施することができる。

「容器」としては、限定されるものではないが、袋、箱、カートン、ボトル、任意のタイプまたはデザインまたは材料のパッケージ、オーバーラップ、シュリンクラップ、ホチキス留めまたは別の方法で固定された構成要素、またはそれらの組合せ物が挙げられる。

用語「単一パッケージ」とは、キットのコンポーネントが１つ以上の容器中でまたは１つ以上の容器と物理的に関連し、製造、流通、販売、または使用のための単位とみなされることを意味する。容器としては、限定されるものではないが、袋、箱、カートン、ボトル、任意のタイプまたはデザインまたは材料のパッケージ、オーバーラップ、シュリンクラップ、ホチキス留めまたは別の方法で固定されたコンポーネント、またはそれらの組合せ物が挙げられる。単一パッケージは、製造、流通、販売、または使用のための単位とみなされるように物理的に関連した個々のコンポーネントの容器であり得る。

本明細書において使用される場合、「情報または指示を伝達するための手段」は、情報、指示、勧告、および／または保証などを提供するのに好適な任意の形態のキットコンポーネントである。そのような手段は、情報を含む文書、デジタル記憶媒体、光学記憶媒体、音声プレゼンテーション、画像表示を含んでなり得る。伝達の手段は、ウェブサイト表示、パンフレット、製品ラベル、パッケージ挿入物、広告、画像表示などであり得る。

発明のいくつかの実施形態の説明
本発明者らは、本明細書において、トコフェロール類を含む天然酸化防止剤組合せ物はトコフェロール類単独と比較して驚くほど有利であることを初めて示している。具体的には、そのような組合せ物は、脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を遅延させることができ（すなわち、天然酸化防止剤としてのトコフェロール類単独の使用と比較）、また、脂肪含有組成物の物理的および／または熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させることもできる。

さらに、本発明者らは、本明細書において、本発明による天然酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類単独の使用と比較して、ネコおよびイヌのペットフード嗜好性に悪影響を及ぼさないことを示している。より詳細には、本発明者らは、天然酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類単独の使用と比較して、ペットの食物嗜好性、特に、イヌの嗜好性を向上させることができることを示している。

酸化防止剤組合せ物
第１の態様では、本発明は、少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物であって、
トコフェロール類の量は約５００ｐｐｍ未満、好ましくは、５００ｐｐｍ未満であり、かつ
カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は約１：４〜約３：１、好ましくは、１：４〜３：１の範囲である、
酸化防止剤組合せ物に関する。

従って、この酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類に加えて、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類を含有する。ペットフード産業は、現在、ペットの食物嗜好性への潜在的な悪影響のために、特に、ローズマリーによって提供される場合、カルノシン酸などの天然酸化防止剤の使用を懸念している。しかしながら、本発明者らは、本明細書において、本発明による天然酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類単独の使用と比較して、ネコおよびイヌのペットフード嗜好性に悪影響を及ぼさないことを示している。本発明者らは、天然酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類単独の使用と比較して、嗜好性、特に、イヌの嗜好性を向上させることができることも示している。

特定の実施形態では、トコフェロール類は天然混合トコフェロール類である。上述のように、天然混合トコフェロール類は、α−トコフェロール類、β−トコフェロール類、γ−トコフェロール類およびδ−トコフェロール類の組合せ物である。好ましくは、前記天然混合トコフェロール類は、約７％〜約２０％のα−トコフェロール類、約１％〜約７％のβ−トコフェロール類、約５０％〜約８０％のγ−トコフェロール類および約１０％〜約３０％のδ−トコフェロール類を含んでなる。天然トコフェロール類の使用は、一般に否定的に認識されている合成または修飾製品の添加を回避する。さらに、本発明者らは、混合形態のトコフェロール類を使用する場合、単一形態のトコフェロール類の使用と比較して、より効率的な脂肪酸化防止を観察した。

好ましい実施形態では、カルノシン酸はローズマリー由来である。

好ましい実施形態では、加水分解型ガロタンニン類は没食子酸および／またはタンニン酸である。特定の実施形態では、加水分解型ガロタンニン類は没食子酸である。

好ましい実施形態では、前記酸化防止剤組合せ物は、３ｐｐｍを超える高いカルノシン酸、より好ましくは、５ｐｐｍを超えるカルノシン酸を含有する。実際には、カルノシン酸が非常に少量で存在する場合、大きな効果は観察されない。特定の実施形態では、前記酸化防止剤組合せ物は、１０ｐｐｍを超えるカルノシン酸、より好ましくは、２０ｐｐｍを超えるカルノシン酸、さらに好ましくは、３０ｐｐｍを超えるカルノシン酸、さらに一層好ましくは、４０ｐｐｍを超えるカルノシン酸を含有する。

好ましい実施形態では、前記酸化防止剤組合せ物は、３ｐｐｍを超える没食子酸、より好ましくは、５ｐｐｍを超える没食子酸を含有する。実際には、没食子酸がごく少量で存在する場合、大きな効果は観察されない。特定の実施形態では、前記酸化防止剤組合せ物は、１０ｐｐｍを超える没食子酸、より好ましくは、１５ｐｐｍを超える没食子酸を含有する。

好ましくは、前記組合せ物のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は、１：３〜３：１、より好ましくは、１：３〜２：１の範囲である。実際には、これらの好ましい比を使用する場合、トコフェロール類単独と比較して、脂肪の酸化防止はさらに増強される。

特定の実施形態では、前記酸化防止剤組合せ物は、３ｐｐｍを超える、より好ましくは、５ｐｐｍを超えるトコフェロール類を含有する。

特定の実施形態では、本発明の酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物である。換言すれば、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類は、前記組合せ物の唯一の酸化防止剤群である。

有利には、本発明による酸化防止剤組合せ物は、ヒドロキシチロソールおよびケルセチンから選択される少なくとも１種の酸化防止剤をさらに含んでなる。

特定の実施形態では、本発明による酸化防止剤組合せ物は、少なくともケルセチンをさらに含んでなる。

特定の実施形態では、本発明の酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類およびケルセチンの組合せ物である。換言すれば、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類およびケルセチンは前記組合せ物の唯一の酸化防止剤群である。

有利には、ケルセチンは約１５０ｐｐｍを下回る、好ましくは、１５０ｐｐｍを下回る量で存在する。実際には、本発明者らは、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物を用いて観察される保護の期間は、ケルセチンを添加した場合に、著しく向上することを発見した。ケルセチンの添加は、１５０ｐｐｍのケルセチンを超えない場合に特に有利である。実際には、１５０ｐｐｍまでのケルセチンの添加により、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物を用いて得られる保護の期間と比較して、保護の期間は指数関数的に向上するが、１５０ｐｐｍを超える添加により、約１５０ｐｐｍのケルセチンの添加と比較して、保護の期間の減少が生じる。

より好ましくは、ケルセチンは、２ｐｐｍ〜１５０ｐｐｍ、より好ましくは、５ｐｐｍ〜１５０ｐｐｍの範囲の量で存在する。実際には、ケルセチンが前記酸化防止剤組成物中に無視できる量で存在する場合、大きな効果は観察されない。

特定の実施形態では、本発明による酸化防止剤組合せ物は、少なくともヒドロキシチロソールをさらに含んでなる。

特定の実施形態では、本発明の酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類およびヒドロキシチロソールの組合せ物である。換言すれば、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類およびヒドロキシチロソールは前記組合せ物の唯一の酸化防止剤群である。

好ましい実施形態では、ヒドロキシチロソールはオリーブ抽出物由来である。

有利には、ヒドロキシチロソールは、約５０ｐｐｍを上回る、好ましくは、５０ｐｐｍを上回る量で存在する。実際には、本発明者らは、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物の保護の期間は、ヒドロキシチロソールを添加した場合に、著しく向上することを発見した。ヒドロキシチロソールの添加は、５０ｐｐｍを超えるヒドロキシチロソールを添加した場合に特に有利であり、保護の期間はこの５０ｐｐｍ値から指数関数的に増加する。

有利には、本発明による酸化防止剤組合せ物は、少なくともヒドロキシチロソールおよびケルセチンをさらに含んでなる。

特定の実施形態では、本発明の酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類、ヒドロキシチロソールおよびケルセチンの組合せ物である。換言すれば、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類、ヒドロキシチロソールおよびケルセチンは、前記組合せ物の唯一の酸化防止剤群である。

好ましくは、ヒドロキシチロソールはオリーブ抽出物由来である。

好ましくは、ヒドロキシチロソールは、約５０ｐｐｍを上回る、より好ましくは、５０ｐｐｍを上回る量で存在する。

好ましくは、ケルセチンは、約１５０ｐｐｍを下回る、より好ましくは、１５０ｐｐｍを下回る量で存在する。

有利には、本発明による組合せ物は、親油性酸化防止剤および親水性酸化防止剤を含有する。実際には、トコフェロール類およびカルノシン酸は親油性酸化防止剤であり、一方、加水分解型ガロタンニン類は親水性酸化防止剤である。さらに、ヒドロキシチロソールおよびケルセチンは親水性酸化防止剤である。これらの特性により、前記組合せ物が親油性製品および／または親水性製品に対してだけでなく、油中水型または水中油型エマルジョンの界面で作用することが可能になる。

有利には、本発明の組合せ物は粉末形態または液体形態である。従って、特定の実施形態は、適当な担体をさらに含んでなる本発明の組合せ物に関する。当業者は、使用に応じて、特に、組合せ物の形態、すなわち、液体もしくは粉末に応じて、かつ／または組合せ物の親水性もしくは疎水性の形態に応じて、適当な担体を決定することができる。

具体的には、本発明の組合せ物が液体形態であることが望ましい場合、液体形態の適当な担体が使用され、好ましくは、油、例えば、ナタネ油、大豆油、ヒマワリ油およびそれらの組合せ物などから選択される。

具体的には、本発明の組合せ物が粉末形態であることが望ましい場合、粉末形態の適当な担体が使用され、好ましくは、炭水化物、例えば、マルトデキストリンおよび／またはシクロデキストリンなど、ならびに無機または有機化合物、例えば、クレー、シリカ、ベントナイトおよびそれらの組合せ物などから選択される。

脂肪含有組成物
第２の態様では、本発明は、少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物を含んでなる抗酸化脂肪含有組成物であって、前記組合せ物において
トコフェロール類の量は約５００ｐｐｍ未満、好ましくは、５００ｐｐｍ未満であり、かつ
カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は約１：４〜約３：１、好ましくは、１：４〜３：１の範囲である、
抗酸化脂肪含有組成物に関する。

上述のように、本発明による組合せ物は、任意の脂肪含有組成物中に組み込むことができる。

例えば、脂肪含有組成物は、食物組成物、脂肪含有食物成分、医薬組成物、脂肪含有医薬品成分、化粧用組成物または脂肪含有化粧品成分である。

特定の食物技術分野では、本発明の抗酸化脂肪含有組成物は、上に定義した食物組成物であり得るし、または次に食物組成物中に組み込み得る脂肪含有食物成分であり得る（詳細については図１を参照）。

第１の特定の実施形態では、本発明の抗酸化脂肪含有組成物は、抗酸化脂肪含有食物成分である。換言すれば、この特定の実施形態は、本発明の酸化防止剤組合せ物を含んでなる抗酸化脂肪含有食物成分に関する（図１の製品Ｐ２）。

好ましくは、抗酸化脂肪含有組成物は、抗酸化脂肪、脂肪を含んでなる抗酸化嗜好性向上組成物または脂肪を含んでなる抗酸化食から選択される抗酸化脂肪含有食物成分である（図１の製品Ｐ２）。

より詳細には、抗酸化脂肪含有食物成分である前記抗酸化脂肪含有組成物は、好ましくは、動物性脂肪、植物油または海洋性油、より好ましくは、動物性脂肪または海洋性油から選択される、抗酸化脂肪である。

さらに詳細には、前記動物性脂肪は、豚脂、鶏脂、家禽脂、子羊脂または牛脂など、ならびにそれらの副産物から選択される。より好ましくは、前記動物性脂肪は家禽脂である。

さらに詳細には、前記植物油は、カノーラ油、大豆油、トウモロコシ油、オリーブ油、ヒマワリ油、亜麻仁油、パーム油、ナタネ油、胡麻油、ヤシ油、ベニバナ油など、ならびにそれらの副産物から選択される。より好ましくは、前記植物油はヒマワリ油である。

さらに詳細には、前記海洋性油は、マグロ油、イワシ油、サーモン油、ニシン油、サバ油、イカナゴ油、マス油、ティラピア油、ナマズ油、アンチョビー油、魚油、ニシン油など、ならびにそれらの副産物から選択される。より好ましくは、前記海洋性油はサーモン油である。

具体的には、抗酸化脂肪含有食物成分である前記抗酸化脂肪含有組成物は、好ましくは、動物性食物または植物性食物から選択される、脂肪を含んでなる抗酸化食である。

具体的には、抗酸化脂肪含有食物成分である前記抗酸化脂肪含有組成物は、脂肪を含んでなる抗酸化嗜好性向上組成物である。

第２の特定の実施形態では、本発明の抗酸化脂肪含有組成物は抗酸化食物組成物である（図１の製品Ｐ６〜Ｐ１０）。

第１の代替例では、前記抗酸化食物組成物は、本発明の酸化防止剤組合せ物（図１の製品Ｐ７）を用いて抗酸化処理された食物組成物である（図１の製品Ｐ３）。換言すれば、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性は、食物組成物中に直接組み込まれた本発明の酸化防止剤組合せ物を用いて得られる。

第２の代替例では、本発明の前記抗酸化食物組成物は、１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて抗酸化処理された食物組成物である（図１の製品Ｐ６）。換言すれば、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性は、食物組成物中に組み込まれた１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて得られる。

第３の代替例では、本発明の前記抗酸化食物組成物は（さらに）抗酸化処理された食物組成物であり、その抗酸化は１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて維持されている（図１の製品Ｐ８）。換言すれば、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性は、抗酸化食物組成物中に組み込まれた１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて維持される。

第４の代替例では、本発明の抗酸化食物組成物は、本発明の酸化防止剤組合せ物と組み合わせた１種以上の除脂肪食物成分を用いて抗酸化処理された食物組成物である（図１の製品Ｐ９）。換言すれば、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性は、１種以上の除脂肪食物成分と組み合わせた本発明の酸化防止剤組合せ物を用いて得られ、総てが食物組成物中に組み込まれている。

第５の代替例では、本発明の前記抗酸化食物組成物は（さらに）抗酸化処理された食物組成物であり、その抗酸化は１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて維持された（図１の製品Ｐ１０）。換言すれば、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性は、抗酸化食物組成物中に組み込まれた１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分を用いて維持される。

好ましくは、前記抗酸化食物組成物は、押出成形された抗酸化食物組成物である。

より好ましくは、前記抗酸化食物組成物は、コーティングされた押出成形抗酸化食物組成物である。

これらの特定の実施形態の総てについて、食物組成物は、好ましくは、ペットフード組成物である。

抗酸化脂肪含有組成物を調製するための方法／トコフェロール類の抗酸化作用を増強するための方法
本発明のさらなる目的は、脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するための方法であって、
ａ）脂肪含有組成物を準備する工程、
ｂ）上に定義した組合せ物を前記脂肪含有組成物中に組み込み、それによって、脂肪の酸化防止が増強された抗酸化脂肪含有組成物を得る工程
を含んでなる方法に関する。

好ましくは、前記組合せ物のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は、１：３〜３：１、より好ましくは、１：３〜２：１の範囲である。実際には、これらの好ましい比を使用する場合、脂肪の酸化防止はさらに増強される。

本発明のさらなる目的は、抗酸化脂肪含有組成物を調製するための方法であって
ａ）脂肪含有組成物を準備する工程、
ｂ）上に定義した組合せ物を前記脂肪含有組成物中に組み込み、それによって、脂肪の酸化防止が増強された抗酸化脂肪含有組成物を得る工程
を含んでなる方法に関する。

上述のように、本発明による組合せ物は、任意の脂肪含有組成物中に組み込むことができる。

例えば、脂肪含有組成物は、食物組成物、脂肪含有食物成分、医薬組成物、脂肪含有医薬品成分、化粧用組成物または脂肪含有化粧品成分である。

特定の食物技術分野では、上に説明したように、工程ａ）の脂肪含有組成物は、上に定義した食物組成物であり得るし、または脂肪含有食物成分であり得る（詳細については図１を参照）。

第１に、工程ａ）の脂肪含有組成物は、食物組成物であり得（図１の製品Ｐ３）、それによって、工程ｂ）において抗酸化食物組成物が得られる（図１の製品Ｐ７またはＰ９）。

好ましくは、前記工程ｂ）は封入によって行われる。

従って、ここで、本発明の組合せ物は、脂肪含有食物成分などの食物成分中に予め組み込まれていなくても、食物組成物中に直接組み込むことができ（図１の製品Ｐ３）、それによって、工程ｂ）において抗酸化食物組成物が得られる（図１の製品Ｐ７）。このようにして、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性はこの場合、本発明の酸化防止剤組合せ物によって達成される。

あるいは、この食物成分に脂肪が含まれていない（本明細書において「除脂肪食物成分」と呼称する、図１の製品Ｐ４）ことを条件に、除脂肪食物成分と組み合わせた酸化防止剤組合せ物（図１の製品Ｐ５）を調製するために、工程ｂ）において食物組成物中に組み込む前に、本発明の組合せ物を食物成分に予め添加しておくことができる。その結果、抗酸化食物組成物は工程ｂ）において得られる（図１の製品Ｐ９）。このようにして、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性はこの場合、ここでは除脂肪食物成分と組み合わせた、本発明の酸化防止剤組合せ物によって達成される。

この代替例は、例えば、本発明の組合せ物と、除脂肪食物成分、例えば、好ましくは、ビタミン類、無機物および／または電解質から選択される１種以上の栄養素などとを混合することによって行うことができる。

第２に、工程ａ）の脂肪含有組成物は、上に定義した脂肪含有食物成分であり（図１の製品Ｐ１）、それによって、工程ｂ）において抗酸化脂肪含有食物成分が得られる（図１の製品Ｐ２）。このようにして、前記抗酸化脂肪含有食物成分の抗酸化特性はこの場合、本発明の酸化防止剤組合せ物によって達成される。

有利には、前記方法は、前記抗酸化脂肪含有食物成分（図１の製品Ｐ２）を食物組成物中に封入し、それによって、抗酸化食物組成物を得るという工程ｃ１）をさらに含んでなることができる。

ここで、前記食物組成物は、食物組成物（図１の製品Ｐ３）であるか、または、有利には、（さらに）抗酸化処理された食物組成物（図１の製品Ｐ７または製品Ｐ９）であり、それによって、抗酸化食物組成物が得られる（図１の製品Ｐ６、Ｐ８またはＰ１０）。このようにして、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性はこの場合、前記抗酸化脂肪含有食物成分によって達成される（または維持される）。

得られた抗酸化食物組成物（図１の製品Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９またはＰ１０）は、特に、物理的および／または熱的処理によって、さらに加工することができる食物調製物であり得る。上に説明したように、物理的および／または熱的処理下で起こるトコフェロール類の損失は、本発明の酸化防止剤組合せ物を使用することによって補償される。例えば、このようにして得られた抗酸化食物組成物は、レトルト加熱しまたは押出成形することができる。

一例として、得られた抗酸化食物組成物（図１の製品Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９またはＰ１０）は、ペットフード調製物であり得、ウェットなペットフード組成物を得るためにレトルト加熱にさらに供される。

あるいは、本発明の方法は、前記抗酸化食物組成物を押出成形し（図１の製品Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９またはＰ１０）、それによって、押出成形された抗酸化食物組成物を得る（図１の製品Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４またはＰ１５）という工程ｃ２）を含んでなり得る。一例として、得られた抗酸化食物組成物（図１の製品Ｐ６、Ｐ７、Ｐ８、Ｐ９またはＰ１０）は、ペットフード調製物であり得、乾燥押出成形キブルまたは乾燥押出成形ペレットを得るために押出成形するという工程ｃ２）にさらに供される。

具体的には、前記工程ｃ１）およびｃ２）は、同時にまたは逐次に行うことができる。

第１の代替例では、抗酸化脂肪含有食物成分は、前記食物組成物の押出成形の前に、食物組成物、好ましくは、抗酸化食物組成物中に封入することができる。

第２の代替例では、抗酸化脂肪含有食物成分は、前記食物組成物の押出成形中に、食物組成物、好ましくは、抗酸化食物組成物中に封入することができる。

有利には、前記方法は、工程ｂ）の抗酸化脂肪含有組成物を、押出成形された食物組成物上にコーティングし、それによって、コーティングされた押出成形抗酸化食物組成物を得るという工程ｃ３）をさらに含んでなる。

ここで、前記食物組成物は、押出成形された食物組成物（図１の製品Ｐ１６）であるか、または、有利には、（さらに）抗酸化処理された食物組成物（図１の製品Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４またはＰ１５）であり、それによって、コーティングされた押出成形抗酸化食物組成物（図１の製品Ｐ１７、Ｐ１８、Ｐ１９、Ｐ２０、Ｐ２１またはＰ２２）が得られる。このようにして、前記抗酸化食物組成物の抗酸化特性はこの場合、前記抗酸化脂肪含有食物成分によって達成される（または維持される）。

一例として、押出成形された食物組成物（製品Ｐ１１、Ｐ１２、Ｐ１３、Ｐ１４、Ｐ１５またはＰ１６）は、乾燥押出成形キブルまたは乾燥押出成形ペレットであり得、抗酸化脂肪含有食物成分、例えば、本発明の抗酸化嗜好性向上組成物および／または抗酸化脂肪などでコーティングされた乾燥押出成形キブルまたは乾燥押出成形ペレットを得るためにコーティングするという工程ｃ３）にさらに供される。

好ましくは、上に定義した組合せ物の酸化防止剤の総量は、最大約１５００ｐｐｍ、好ましくは、最大１５００ｐｐｍ、好ましくは、最大約１３００ｐｐｍ、好ましくは、最大１３００ｐｐｍ、好ましくは、７００〜１３００ｐｐｍ、好ましくは、７００〜１３００ｐｐｍである。

前記特定の実施形態は、明らかに組み合わせ可能である。例えば、１種以上の抗酸化脂肪含有食物成分は、封入によりかつ／またはコーティングにより食物組成物、特に、抗酸化食物組成物（有利には、本発明の組合せ物を用いて予め組み込まれている）中に添加することができる。

好ましくは、本発明の組合せ物の技術的特徴は、最終的な抗酸化食物組成物において依然として得られる。従って、トコフェロール類の総量は約５００ｐｐｍ未満、好ましくは、５００ｐｐｍ未満であること、および抗酸化食物組成物において、カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比は約１：４〜約３：１、好ましくは、１：４〜３：１の範囲であることが好ましい。

使用
上述のように、本発明の酸化防止剤組合せ物は、脂肪含有組成物中のトコフェロール類の抗酸化作用を増強するために使用することができ、前記酸化防止剤組合せ物は、カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比が１：３〜３：１、より好ましくは、１：３〜２：１の範囲である。

実際には、本発明者らは、本明細書において、トコフェロール類を含む天然酸化防止剤組合せ物はトコフェロール類単独と比較して驚くほど有利であることを初めて示している。具体的には、そのような組合せ物は、脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を遅延させることができ（すなわち、天然酸化防止剤としてのトコフェロール類単独の使用と比較）、また、脂肪含有組成物の物理的および／または熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させることもできる。

従って、より詳細には、本発明は、脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を遅延させかつ／または前記脂肪含有組成物の物理的および／もしくは熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させるための酸化防止剤組合せ物の使用に関する。

キット
本発明の別の態様は、単一パッケージ内の１つ以上の容器中に
上に定義した１種以上の脂肪含有組成物；および
本発明による酸化防止剤組合せ物
を含んでなるキットに関する。

より詳細には、キットは、単一パッケージ内の１つ以上の容器中に
上に定義した少なくとも１種の脂肪含有ペットフード成分を含んでなる、１種以上のペットフード成分；および
本発明による酸化防止剤組合せ物
を含んでなることができる。

本発明による特定のキットは、キットの要素の使用を助けるために、情報または指示を伝達するための手段をさらに含んでなる。

１．材料および方法
１．１．酸化防止剤の組合せ物の調製
１．１．１．酸化防止剤
トコフェロール類は、約７０％のトコフェロール類を含有する液体抽出物の形態（Ｇｕａｒｄｉａｎ（商標）Ｔ−７０ ＩＰ、Ｄａｎｉｓｃｏ）または液体抽出物から調製された、約３５％のトコフェロール類を含有する粉末の形態（Ｄｅｃａｎｏｘ ＭＴＳ−７０、ＡＤＭ、約７０％のトコフェロール類を含有）で準備した。約７０％のトコフェロール類を含有する液体抽出物（Ｇｕａｒｄｉａｎ（商標）Ｔ−７０ ＩＰ、Ｄａｎｉｓｃｏ）中のトコフェロール異性体の比は以下の通りであった：約１５％のα−トコフェロール類、約２％のβ−トコフェロール類、約６０％のγ−トコフェロール類および約２３％のδ−トコフェロール類。約３５％のトコフェロール類（Ｄｅｃａｎｏｘ ＭＴＳ−７０、ＡＤＭ）を含有する粉末抽出物中のトコフェロール異性体の比は以下の通りであった：約１０％のα−トコフェロール類、約２％のβ−トコフェロール類、約６８％のγ−トコフェロール類および約２０％のδ−トコフェロール類。

カルノシン酸（ＣＡ）は、約１０％のカルノシン酸およびカルノソールを含有する液体抽出物の形態（ナタネ油による液体ローズマリー抽出物、Ｅ３９２、Ｒｏｂｅｒｔｅｔ）または約１０％のカルノシン酸およびカルノソールを含有する粉末の形態（Ｈｅｒｂｏｒ Ｐ３１、Ｒｏｂｅｒｔｅｔ）で準備した。

加水分解型ガロタンニン類は、約９９％の没食子酸を含有する、没食子から得られる没食子酸（ＧＡ）の粉末抽出物の形態（ガラ・チネンシス(Galla chinensis)抽出物、Ｗｕｈｕ Ｔｉａｎｃｉ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｉｍｉｔｅｄ）またはクェルクス・インフェクトリア(Quercus infectoria)から得られる約９６％のタンニン酸を含有する、没食子から得られるタンニン酸（ＴＡ）の粉末抽出物の形態（Ｔａｎａｌ０２、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ）で準備した。

ケルセチンは、約９５％のジヒドロケルセチンを含有する、ジモルファンドラ・モリスまたはカラマツから得られる粉末抽出物の形態（ジヒドロケルセチン、Ｑｕｉｍｄｉｓ）で準備した。

ヒドロキシチロソールは、約２８％のヒドロキシチロソールおよび誘導体（チロソールとして）を含有する、オリーブ抽出物から得られる液体抽出物の形態（Ｈｙｔｏｌｉｖｅシロップ、ＰＬ Ｔｈｏｍａｓ）で準備した。

１．１．２．酸化防止剤と液体担体との組合せ物の調製
酸化防止剤の組合せ物は、それらを粉末形態または液体形態に混ぜ、適当な液体担体であるヒマワリ油を添加することにより調製した。

具体的には、本発明による酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類を、ヒマワリ油とともに混合することにより調製した。

酸化防止剤の比較組合せ物は、本発明の本質的かつ最小限の組合せ物、すなわち、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類を守ることなく、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類を、ヒマワリ油とともに混合することにより調製した。

これらの組合せ物は、実施例１、７〜９で使用した。

１．１．３．酸化防止剤と粉末担体との組合せ物の調製
酸化防止剤の組合せ物は、それらを粉末形態または液体形態に混ぜ、適当な担体であるベントナイトを添加することにより調製した。

具体的には、本発明による酸化防止剤組合せ物は、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類と、所望により、ケルセチンおよび／またはヒドロキシチロソールとを、ベントナイトとともに混合することにより調製した。

酸化防止剤の比較組合せ物は、本発明の本質的かつ最小限の組合せ物、すなわち、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類を守ることなく、トコフェロール類、カルノシン酸、加水分解型ガロタンニン類を、ベントナイトとともに混合することにより調製した。

これらの組合せ物は、実施例２〜６で使用した。

１．２．酸化防止剤を含んでなる脂肪含有組成物の調製
１．２．１．酸化防止剤を含んでなる脂肪の調製
酸化防止剤を含んでなる脂肪は、実施例１．１．２で得られた酸化防止剤の組合せ物を混合することによりまたは酸化防止剤単独を脂肪に混ぜることにより調製した。これらの製品の中で、少なくともトコフェロール類（Ｇｕａｒｄｉａｎ（商標）Ｔ−７０ ＩＰ、Ｄａｎｉｓｃｏ）、カルノシン酸（液体ローズマリー抽出物、Ｒｏｂｅｒｔｅｔ）および加水分解型ガロタンニン類（ガラ・チネンシス由来の没食子酸、Ｗｕｈｕ Ｔｉａｎｃｉ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｉｍｉｔｅｄ；クェルクス・インフェクトリア由来のタンニン酸：Ｔａｎａｌ０２、Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ）を含んでなる脂肪が、本発明による脂肪含有組成物である。

２種の異なる脂肪を使用した：家禽脂（Ｄｉａｎａ Ｆｏｏｄ（フランス）提供）およびサーモン油（Ｄａｕｄｒｕｙ（フランス）提供）。

１．２．２．コーティングにより添加された酸化防止剤を含んでなるペットフード組成物の調製
ペットによる摂取に適した、押出成形および乾燥工程後に得られる、栄養的にバランスの取れた乾燥キブルの形態のペットフード組成物を調製した。

実施例１．２．１で得られた酸化防止剤を含んでなる脂肪を、これらの乾燥キブル上に６％でコーティングすることにより添加した。これらの製品の中で、少なくともトコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類でコーティングされた乾燥キブルが、本発明による食物組成物、すなわち、ペットフード組成物である。

このようにして得られたペットフード組成物を５０℃で保存した。

１．２．３．封入により組み込まれた酸化防止剤を含んでなるペットフードの調製
ペットによる摂取に適した、栄養的にバランスの取れた乾燥キブルの形態のペットフード組成物を調製した。

実施例１．１．３で得られた酸化防止剤の組合せ物を、二重リボンミキサー中で、プレミックス、すなわち、ビタミン類、無機物および電解質と混合し、得られたブレンドは、他のペットフード成分とともに、前準備、押出成形および乾燥工程を経た。

これらの製品の中で、少なくともトコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類が封入された乾燥キブルが、本発明による脂肪含有組成物である。

このようにして得られたペットフード組成物を５０℃で保存した。

１．３．コーティングにより添加された酸化防止剤を含んでなるペットフード組成物のヘキサナール値の決定
実施例１．２．２で得られたペットフード組成物を分析し、ヘキサナール値を決定した。この目的のために、キブルを粉砕し、重水素化ヘキサナールを用いて静的ヘッドスペース法により水中、９０℃で抽出を行った。極性カラムでのガスクロマトグラフィーによる分離、検出および定量は、質量分析（ＳＩＭ）により行った。

１．４．コーティングにより添加された酸化防止剤を含んでなるペットフード組成物の過酸化物価の決定
実施例１．２．２で得られたペットフード組成物を分析し、過酸化物価を決定した。ＮＦＶ０３−０３０に従って脂肪抽出を行い、ＮＦ ＥＮ ＩＳＯ ３９６０（２０１０年６月版）に従って過酸化物価を決定した。

１．５．封入により組み込まれた酸化防止剤を含んでなるペットフード組成物のヘキサナール値の決定
実施例１．２．３で得られたペットフード組成物を分析し、ＡＯＣＳ法Ｃｇ ４−９４（ＡＯＣＳ．１９９７）に従ってヘキサナール値を決定した。

１．６．封入により組み込まれた酸化防止剤を含んでなるペットフード組成物の過酸化物価の決定
実施例１．２．３で得られたペットフード組成物を分析し、過酸化物価を決定した。脂肪抽出を行い、ＡＯＣＳ公定法Ｃｄ ８ｂ−９０に従って過酸化物価を決定した。

１．７．定められた期間中に放出された総ヘキサナール値および過酸化物価の計算
食餌の調製後の異なる時点で、ヘキサナール値および過酸化物価を測定した。

１．８．定められた期間中に放出された総ヘキサナール値および過酸化物価の計算
食餌の調製後の異なる時点で、ヘキサナール値および過酸化物価を測定した。例えば、「１４週間時点でのヘキサナール値」とは、１４週間時点での測定されたヘキサナール値を指す。

「総ヘキサナール値」または「総過酸化物価」とは、時間の関数でヘキサナール値または過酸化物価（貯蔵中の異なる時間の段階で測定）を表す曲線下の面積に基づいて、研究中に放出されたヘキサナールまたは過酸化物の総量を指す。

１．９．保護の時期の決定
時間保護(The time protection)は、ランシマット（Ｒａｎｃｉｍａｔ）（７４３ Ｒａｎｃｉｍａｔ、Ｍｅｔｒｏｈｍ）を使用することにより決定した。実施例１．２．１．で調製した酸化防止剤を含んでなる脂肪３ｍＬをのランシマットの反応器に導入し、家禽脂については１１０℃で、サーモン油については８０℃で熱処理を行った。電気伝導測定に基づき、ランシマットによる酸化生成物形成の直接評価を行った。電気伝導測定が一定値を超えると誘導期間が自動評価される。

１．１０．嗜好性試験
２ボウル試験の原理：
この試験は、より多くの食物が消費されるほど、それがより口に合うという仮定に基づいている。

２つの食物間の比較に基づいた、個別の対比（２ボウル）嗜好性試験を行った。試験の目的に応じて、３６匹のイヌのパネルまたは４０匹のネコのパネルのいずれかにおいて試験を行う。

試験の操作方法：
−同量のフードＡおよびフードＢを秤量し、同じボウルに入れた。各配給に存在する量は一日所要量を満たすことができるものとする。
−ボウルの配置：
イヌの試験：ボウルは、イヌが接近可能な個別の飼槽に入れた。
ネコの試験：ボウルは、個別のゆったりした箱の中に入れて各ネコに同時に提供され、利き手につながる選択を避けるために食餌ごとにボウルの位置を入れ替えた。
−試験の継続時間：
＊ネコの試験：約１５分〜約２０時間（２つのボウルのうち１つが試験終了前に完食された場合、２つのボウルを除去し、試験を中止した）；
＊イヌの試験：約１５分〜約３０分（２つのボウルのうち１つが試験終了前に完食された場合、２つのボウルを除去し、試験を中止した）；

調査したパラメーター
−実測パラメーター：消費された最初の食物（「最初のアピール」）および試験終了までに消費された各食物の量；
−理論パラメーター：個別の消費率％（ＣＲ）
ＣＲＡ＝Ａの消費量（ｇ）×１００／（Ａ＋Ｂの消費量）（ｇ）
ＣＲＢ＝Ｂの消費量（ｇ）×１００／（Ａ＋Ｂの消費量）（ｇ）；
⇒平均消費率（ＡＣＲ）＝個々の比率総ての平均（その大きさおよびその対応する消費量にかかわらず、各動物に同等の重要性が与えられる）。

動物が、所定の値（これは、例えば、動物の体重および／または代謝の関数である）と比較して、より高いまたはより低い消費量を示す場合、これらは統計処理には考慮されない。

統計分析：
統計分析を用いて、２つの比の間に有意差があるかどうかを判定した。３つの誤差閾値、すなわち、５％、１％および０．１％によるスチューデントｔ検定を実施した。

カイ二乗検定を用いて、食べた最初の食物がフードＡのペットの数と食べた最初の食物がフードＢのペットの数との間に有意差があるかどうかを判定した。

有意水準は以下のように記している：
ＮＳ 有意性なし （ｐ＞０．０５）
^＊ 有意性あり （ｐ＜０．０５）
^＊＊ 高い有意性あり （ｐ＜０．０１）
^＊＊＊ 非常に高い有意差あり （ｐ＜０．００１）

２．結果
以下の総ての実施例では、実験食は本発明の酸化防止剤組合せ物を含んでなる食餌であり、比較食は本発明の酸化防止剤組合せ物を含まない食餌である。

２．１．実施例１−押出成形ペットフード組成物上へのコーティングにより添加された本発明の組合せ物の、ヘキサナール値および過酸化物価に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＶＶ」と呼称する）を、実施例１．２．２に従って、酸化防止剤を含んでなる家禽脂（６％）を乾燥キブル「ＶＶ」上にコーティングすることにより調製した。

下記の表１は、家禽脂に使用した酸化防止剤の種類および量を示す。

下記表２では、ＨＶ １０週間（単位ｐｐｍ）およびＰＶ １０週間（ミリ当量／ｋｇ脂肪）は、それぞれ、食餌調製の１０週間後に正確に測定されたＨＶ値およびＰＶ値に対応し、一方、総ＨＶ １０週間（単位ｐｐｍ）または総ＰＶ １０週間（ミリ当量／ｋｇ脂肪）は、それぞれ、食餌調製から１０週間までに放出されたヘキサナールおよび過酸化物の総量に対応する。

下記表２に示すように、カルノシン酸または加水分解型ガロタンニン類の一方のみとトコフェロール類との組合せ物は、トコフェロール類と加水分解型ガロタンニン類およびカルノシン酸の両方との組合せ物と比較して、より高いヘキサナール値（ＨＶ）および過酸化物価（ＰＶ）を与える（実験食１と比較して比較食７、８を参照）。これは、トコフェロール類と加水分解型ガロタンニン類およびカルノシン酸の両方との組合せ物を有することの重要性を示している。

トコフェロール類、加水分解型ガロタンニン類、カルノシン酸およびヒドロキシチロソールの組合せ物である実験食ｎ°２では（例えば、実験食ｎ°１と比較して）より低いヘキサナール値および過酸化物価が得られ、ヒドロキシチロソールを添加することの重要性を示している。

さらに、ケルセチン単独使用は、トコフェロール類単独使用より低いヘキサナール値および過酸化物価を与えることが示されている（比較食ｎ°３と比較して比較食ｎ°４を参照）。しかしながら、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類と組み合わせた場合、トコフェロール類は、ケルセチンよりはるかに低いヘキサナール値および過酸化物価を与える（比較食ｎ°８と比較して実験食ｎ°１を参照）。これは、トコフェロール類、加水分解型ガロタンニン類およびカルノシン酸の興味深い併用効果を示している。

２．２．実施例２−トコフェロール類単独または本発明の範囲外の酸化防止剤組合せ物（すなわち、ＣＡ：ＧＡ比４：１を有する）のいずれかと比較した、封入により押出成形ペットフード組成物中に組み込まれた本発明の酸化防止剤組合せ物のヘキサナール値に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＷＷ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＷＷ」中に組み込むことにより調製した。食餌の総てに５０ｐｐｍのトコフェロール類を封入した。

比較食ｎ°９は、５０ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°４は、５０ｐｐｍのトコフェロール類、４０ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および４０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比１：１）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°５は、５０ｐｐｍのトコフェロール類、８０ｐｐｍのカルノシン酸および４０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比２：１）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°６は、５０ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および４０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比３：１）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１０は、５０ｐｐｍのトコフェロール類、１６０ｐｐｍのカルノシン酸および４０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比４：１）を含む「ＷＷ」であった。

下記表３に示すように、５０℃での貯蔵の１４週間後に測定した、トコフェロール類と１：１〜３：１の比のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物を用いて得られたヘキサナール値（ＨＶ）は、少なくとも同等であり、トコフェロール類単独を用いて得られたヘキサナール値と比較してさらに一層低い場合もある。しかしながら、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類とを、本発明による比の範囲外のＣＡ：ＧＡ比で組み合わせた場合、乾燥キブルで測定したヘキサナール値は、トコフェロール類単独を使用した場合より著しく高かった。これらの結果は、本発明の範囲外のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類比を使用しないという条件で、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物が、ヘキサナール値を減少させることによって（またはそれを少なくとも安定化させることによって）トコフェロール類の抗酸化作用を増強することができることを明らかに示している。

２．３．実施例３−トコフェロール類単独または本発明の範囲外の酸化防止剤組合せ物（すなわち、ＣＡ：ＧＡ比１：５を有する）のいずれかと比較した、封入により押出成形ペットフード組成物中に組み込まれた本発明の酸化防止剤組合せ物のヘキサナール値に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＷＷ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＷＷ」中に組み込むことにより調製した。食餌の総てに５ｐｐｍのトコフェロール類を封入した。

比較食ｎ°１１は、５ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°７は、５ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および６０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比１：１）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°８は、５ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および１２０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：２）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°９は、５ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および１８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：３）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１０は、５ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および２４０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１２は、５ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および３００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：５）を含む「ＷＷ」であった。

下記表４に示すように、５０℃での貯蔵の１４週間後に測定した、トコフェロール類と１：１〜１：４の比のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物を用いて得られたヘキサナール値（ＨＶ）は、少なくとも同等であり、トコフェロール類単独を用いて得られたヘキサナール値と比較してさらに一層低い場合もある。しかしながら、トコフェロール類と、本発明による比の範囲外のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類とを組み合わせた場合、乾燥キブルで測定したヘキサナール値は、トコフェロール類単独を使用した場合より著しく高かった。これらの結果は、本発明の比の範囲外のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類比を使用しないという条件で、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物が、ヘキサナール値を減少させることによって（またはそれを少なくとも安定化させることによって）トコフェロール類の抗酸化作用を増強することができることを明らかに示している。

２．４．実施例４−トコフェロール類単独または本発明の範囲外の酸化防止剤組合せ物（すなわち、ＣＡ：ＧＡ比４：１または１：５を有する）のいずれかと比較した、封入により押出成形ペットフード組成物中に組み込まれた本発明の酸化防止剤組合せ物のヘキサナール値に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＷＷ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＷＷ」中に組み込むことにより調製した。食餌の総てに２００ｐｐｍのトコフェロール類を封入した。

比較食ｎ°１３は、２００ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１１は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、１５０ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および５０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比３：１）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１４は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、２００ｐｐｍのカルノシン酸および５０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比４：１）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１２は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、５５ｐｐｍのカルノシン酸および２２０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１６は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、５５ｐｐｍのカルノシン酸および２７５ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：５）を含む「ＷＷ」であった。

下記表５に示すように、５０℃での貯蔵の１４週間後に測定した、トコフェロール類と３：１または１：４の比のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物を用いて得られたヘキサナール値（ＨＶ）は、トコフェロール類単独を用いて得られたヘキサナール値と比較して少なくとも同等であった。しかしながら、トコフェロール類と本発明による比の範囲外のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類とを組み合わせた場合、乾燥キブルで測定したヘキサナール値は、トコフェロール類単独を使用した場合より著しく高かった。これらの結果は、本発明の比の範囲外のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類比を使用しないという条件で、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物が、ヘキサナール値を減少させることによって（またはそれを少なくとも安定化させることによって）トコフェロール類の抗酸化作用を増強することができることを明らかに示している。

２．５．実施例５−封入により押出成形ペットフード組成物中に組み込まれた、５００ｐｐｍ以下のトコフェロール類を含んでなる本発明の酸化防止剤組合せ物のヘキサナール値に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＷＷ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＷＷ」中に組み込むことにより調製した。食餌の総てに１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１．５：１）を封入した。

比較食ｎ°１６は、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）だけを含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１３は、５ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１４は、１００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１５は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１６は、３００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１７は、４００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１８は、５００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１７は、６００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および８０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）を含む「ＷＷ」であった。

図２に示すように、５００ｐｐｍ未満のトコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との使用は、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類だけを使用した場合よりも、５０℃で１４週間後に得られた総ヘキサナール値は低くなる（または同等である）。５００ｐｐｍを超えると、ヘキサナール値は、トコフェロール類を使用しなかった場合よりも高くなる（比較食ｎ°１６、ｎ°１７および実験食ｎ°１８を参照）。これは、５００ｐｐｍを超える量でトコフェロール類を使用しないという条件で、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類がトコフェロール類の抗酸化作用を増強するのに有用であることを示している。

２．６．実施例６−熱的および／または物理的処理下でのトコフェロール類の損失に対する本発明の組合せ物の影響。
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＷＷ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＷＷ」中に組み込むことにより調製した。

比較食ｎ°１８は、２００ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°１９は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および２００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°１９は、２００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸および２５０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：５）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°２０は、３００ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°２０は、３００ｐｐｍのトコフェロール類、９０ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および３０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比３：１）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°２１は、３００ｐｐｍのトコフェロール類、１２０ｐｐｍのカルノシン酸および３０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比４：１）を含む「ＷＷ」であった。

比較食ｎ°２２は、３２４ｐｐｍのトコフェロール類を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°２１は、３２４ｐｐｍのトコフェロール類、６５ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および１３０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＧＡ）（ＣＡ：ＧＡ比１：２）を含む「ＷＷ」であった。

実験食ｎ°２２は、３２４ｐｐｍのトコフェロール類、６５ｐｐｍのカルノシン酸（ＣＡ）および１３０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＴＡ、タンニン酸）（ＣＡ：ＴＡ比１：２）を含む「ＷＷ」であった。

下記表６および７に示すように、トコフェロール類と３：１または１：４の比のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物を用いた後に得られるトコフェロール類の損失は、トコフェロール類単独を使用した場合に得られたトコフェロール類の損失と比較して少なくとも同等であった。しかしながら、トコフェロール類と本発明による比の範囲外の比のカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類とを組み合わせた場合、トコフェロール類の損失は、トコフェロール類単独を使用した場合より著しく高かった。これらの結果は、本発明の比の範囲外のカルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類比を使用しないという条件で、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物が、物理的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させることによりトコフェロール類の抗酸化作用を増強することができることを明らかに示している。

表８に示すように、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類としての没食子酸（実験食ｎ°２１）またはタンニン酸（実験食ｎ°２２）のいずれかとを組み合せた、トコフェロール類の使用は、トコフェロール類単独の使用（比較食ｎ°２２）と比較して、物理的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させる。これらの結果は、加水分解型ガロタンニン類の種類（タンニン酸または没食子酸）に関わらず、トコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との組合せ物が、トコフェロール類の抗酸化作用を増強することができることを明らかに示している。

２．７．実施例７−脂肪中に組み込まれた本発明の酸化防止剤組合せ物の保護の時間に対する影響
酸化防止剤を含んでなる脂肪を、実施例１．２．１．に従って、酸化防止剤をサーモン油中に組み込むことにより調製した。

異なる脂肪で測定した保護の時間を図３および４に示している。

図３では、４００ｐｐｍのカルノシン酸および２００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比２：１）を、図３に示した量のトコフェロール類と組み合わせてまたは組み合わさずに、サーモン油中に添加した。

図４において、１００ｐｐｍのカルノシン酸および４００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を、図４に示した量のトコフェロール類と組み合わせてまたは組み合わさずに、サーモン油中に添加した。

図３および４に示すように、５００ｐｐｍ未満のトコフェロール類とカルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類との使用は、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類だけの使用と比較して、サーモン油の保護の時間を著しく向上させる。５００ｐｐｍを超えると、保護の時間はもはや延長されない。従って、５００ｐｐｍより多いトコフェロール類を添加することは、有利ではない。これは、５００ｐｐｍを超える量でトコフェロール類を使用しないという条件で、本発明の組合せ物は、サーモン油などの脂肪の保護の時間を向上させるのに有用であることを示している。

２．８．実施例８−脂肪中に組み込まれた、ケルセチンを含んでなる本発明の組合せ物の保護の時間に対する影響
酸化防止剤を含んでなる脂肪を、実施例１．２．１．に従って、酸化防止剤を家禽脂中に組み込むことにより調製した。

異なる脂肪で測定した保護の時間を図５〜８に示している。

図５では、４００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：２）を、図５に示した量のケルセチンと組み合わせてまたは組み合わさずに、家禽脂中に添加した。

図６では、４００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および４００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を、図６に示した量のケルセチンと組み合わせてまたは組み合わさずに、家禽脂中に添加した。

図７では、２００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：１）を、図７に示した量のケルセチンと組み合わせてまたは組み合わさずに、家禽脂中に添加した。

図８では、１００ｐｐｍのトコフェロール類、６０ｐｐｍのカルノシン酸および２０ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比３：１）を、図８に示した量のケルセチンと組み合わせてまたは組み合わさずに、家禽脂中に添加した。

図５〜８に示すように、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の比（１：２、１：４、１：１または３：１）に関わらず、また、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の量に関わらず、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物の保護の時間は、ケルセチンを添加した場合に、著しく向上する。ケルセチンの添加は、１５０ｐｐｍのケルセチンを超えない場合に特に有利である。実際には、１５０ｐｐｍまでのケルセチンの添加により、保護の時間は指数関数的に向上するが、１５０ｐｐｍを超える添加により、保護の期間の減少が生じる。

２．９．実施例９−脂肪中に組み込まれた、ヒドロキシチロソールを含んでなる本発明の組合せ物の保護の時間に対する影響
酸化防止剤を含んでなる脂肪を、実施例１．２．１．に従って、酸化防止剤をサーモン油中に組み込むことにより調製した。

異なる脂肪で測定した保護の時間を図９および１０に示している。

図９では、５００ｐｐｍのトコフェロール類、５０ｐｐｍのカルノシン酸および２００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：４）を、図９に示した量のヒドロキシチロソールと組み合わせてまたは組み合わさずに、サーモン油中に添加した。

図１０では、３００ｐｐｍのトコフェロール類、１００ｐｐｍのカルノシン酸および１００ｐｐｍの加水分解型ガロタンニン類（ＣＡ：ＧＡ比１：１）を、図１０に示した量のヒドロキシチロソールと組み合わせてまたは組み合わさずに、サーモン油中に添加した。

図９および１０に示すように、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の比（１：４、１：１）に関わらず、また、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の量に関わらず、トコフェロール類、カルノシン酸および加水分解型ガロタンニン類の組合せ物の保護の時間は、ヒドロキシチロソールを添加した場合に、著しく向上する。ヒドロキシチロソールの添加は、５０ｐｐｍを超えるヒドロキシチロソールを添加した場合に特に有利であり、保護の時間を指数関数的に向上させる。

２．１０．実施例１０−本発明の組合せ物のイヌの嗜好性に対する影響
Ａ．加水分解型ガロタンニン類(hydrolysable gallotanins)として没食子酸を含んでなる酸化防止剤組合せ物
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＸＸ」と呼称する）を、実施例１．２．２に従って、酸化防止剤と、２％の家禽肝臓消化物とを含んでなる家禽脂（６％）を乾燥キブル「ＸＸ」上にコーティングすることにより調製した。

下記の表９は、家禽脂に使用した酸化防止剤の種類および量を示す。

対比試験を行って、本発明の範囲外のＣＡ：ＧＡ比を有する比較食２３／２４／２５と、本発明によるＧＡ：ＣＡ比を有する実験食２３／２４とのイヌの嗜好性を比較した。結果を表１０に示す。

表１０に示すように、イヌの食物消費量は、トコフェロール類単独を含有する食餌と比較して、食餌が本発明による組合せ物を含んだ場合に有意に高かった。しかしながら、食餌が本発明の範囲外のＣＡ：ＧＡ比を有する組合せ物を含んだ場合、トコフェロール類単独を含有する食餌と比較して、イヌの食物消費量に有意差はなかった。

Ｂ．加水分解型ガロタンニン類(hydrolysable gallotanins)としてタンニン酸を含んでなる酸化防止剤組合せ物
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＺＺ」と呼称する）を、実施例１．２．３に従って、封入により酸化防止剤を乾燥キブル「ＺＺ」中に組み込むことにより調製した。

対比試験を行って、トコフェロール類単独（２１０ｐｐｍ）を含んでなる比較食２６と、１０５ｐｐｍのトコフェロール類、２０ｐｐｍのカルノシン酸、７５ｐｐｍのタンニン酸（ＧＡ：ＣＡ比１：３．７５）を含んでなる実験食２５とのイヌの嗜好性を比較した。結果を表１１に示す。

表１１に示すように、イヌの食物消費量は、トコフェロール類単独を含有する食餌と比較して、食餌が本発明による組合せ物を含んだ場合に有意に高かった。

２．１１．実施例１１−本発明の組合せ物のネコの嗜好性に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＹＹ」と呼称する）を、実施例１．２．２に従って、酸化防止剤、ならびに３％の豚肝臓消化物を含んでなる家禽脂（６％）を乾燥キブル「ＹＹ」上にコーティングすることにより調製した。

下記の表１２は、家禽脂に使用した酸化防止剤の種類および量を示す。

対比試験を行って、本発明の範囲外のＣＡ：ＧＡ比を有する比較食２７／２８と、本発明によるＧＡ：ＣＡ比を有する実験食２６／２７とのネコの嗜好性を比較した。結果を表１３に示す。

表１３に示すように、食餌が本発明によるＣＡ：ＧＡ比を有する組合せ物を含んだ場合、トコフェロール類単独を含有する食餌と比較して、ネコの食物消費量に有意差はなかった。しかしながら、食餌が本発明の範囲外のＣＡ：ＧＡ比を有する組合せ物を含んだ場合、トコフェロール類単独を含有する食餌と比較して、ネコの食物消費量は有意に劣っていた。

２．１２．実施例１２−合成酸化防止剤と比較した、本発明の組合せ物のイヌの嗜好性に対する影響
栄養的にバランスの取れた乾燥キブル（本明細書において「ＸＸ」と呼称する）を、実施例１．２．２に従って、酸化防止剤、ならびに２％の家禽肝臓消化物とを含んでなる家禽脂（６％）を乾燥キブル「ＸＸ」上にコーティングすることにより調製した。

対比試験を行って、実験食ｎ°２４と、合成酸化防止剤ミックス（ＢＨＡ、クエン酸および没食子酸プロピル）を含んでなる家禽脂でコーティングされた比較食２９とのイヌの嗜好性を比較した。

また、比較食２９と、２００ｐｐｍのトコフェロール類、６６ｐｐｍのカルノシン酸、１３４ｐｐｍの没食子酸、１００ｐｐｍのヒドロキシチロソールおよび１００ｐｐｍケルセチンを含んでなる家禽脂でコーティングされた実験食ｎ°２８とのイヌの嗜好性を比較するために、対比試験を行った。
結果を表１４に示す。

表１４に示すように、食餌が本発明による（天然）組成物を含んだ場合、合成酸化防止剤と比較して、イヌの食物消費量に有意差はなかった。

参照文献

Claims (21)

1. 少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物であって、
   トコフェロール類の量が５００ｐｐｍ未満であり、かつ
   カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比が１：４〜３：１の範囲である、
   酸化防止剤組合せ物。
2. 前記トコフェロール類が天然混合トコフェロール類である、請求項１に記載の酸化防止剤組合せ物。
3. 前記カルノシン酸がローズマリー由来である、請求項１または２に記載の酸化防止剤組合せ物。
4. 前記加水分解型ガロタンニン類が没食子酸である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物。
5. 前記酸化防止剤組合せ物が、ヒドロキシチロソールおよびケルセチンから選択される少なくとも１種の酸化防止剤をさらに含んでなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物。
6. 前記酸化防止剤組合せ物が、約５０ｐｐｍを上回る、好ましくは、５０ｐｐｍを上回る量でヒドロキシチロソールをさらに含んでなる、請求項１〜５のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物。
7. 前記ヒドロキシチロソールがオリーブ抽出物由来である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物。
8. 前記酸化防止剤組合せ物が、約１５０ｐｐｍを下回る、好ましくは、１５０ｐｐｍを下回る量でケルセチンをさらに含んでなる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物。
9. 少なくともトコフェロール類と、カルノシン酸と、加水分解型ガロタンニン類との酸化防止剤組合せ物を含んでなる抗酸化脂肪含有組成物であって、
   前記組合せ物において、
   トコフェロール類の量が約５００ｐｐｍ未満、好ましくは、５００ｐｐｍ未満であり、かつ
   カルノシン酸：加水分解型ガロタンニン類の比が約１：４〜約３：１、好ましくは、１：４〜３：１の範囲である、
   抗酸化脂肪含有組成物。
10. 前記抗酸化脂肪含有組成物が、抗酸化食物組成物、好ましくは、抗酸化ペットフード組成物である、請求項９に記載の抗酸化脂肪含有組成物。
11. 前記抗酸化脂肪含有組成物が、好ましくは、抗酸化脂肪、脂肪を含んでなる抗酸化嗜好性向上組成物、または脂肪を含んでなる抗酸化食から選択される抗酸化脂肪含有食物成分である、請求項９に記載の抗酸化脂肪含有組成物。
12. 抗酸化脂肪含有組成物を調製するための方法であって、
    ａ）脂肪含有組成物を準備する工程、
    ｂ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の組合せ物を前記脂肪含有組成物中に組み込み、それによって、脂肪の酸化防止が増強された抗酸化脂肪含有組成物を得る工程
    を含んでなる、方法。
13. 工程ａ）の前記脂肪含有組成物が食物組成物であり、それによって、工程ｂ）において抗酸化食物組成物を得る、請求項１２に記載の方法。
14. 前記工程ｂ）が封入によって行われる、請求項１３に記載の方法。
15. 工程ｂ）の前記抗酸化脂肪含有組成物を、食物組成物、好ましくは、請求項１３または１４から得られる抗酸化食物組成物に封入し、それによって、抗酸化食物組成物を得る工程ｃ１）をさらに含んでなる、請求項１２に記載の方法。
16. 前記抗酸化食物組成物を押出成形し、それによって、押出成形された抗酸化食物組成物を得る工程ｃ２）をさらに含んでなる、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 工程ｂ）の前記抗酸化脂肪含有組成物で、押出成形された食物組成物、好ましくは、請求項１６から得られる押出成形された抗酸化食物組成物をコーティングし、それによって、コーティングされた押出成形抗酸化食物組成物を得る工程ｃ３）をさらに含んでなる、請求項１２に記載の方法。
18. 脂肪含有組成物中での経時的な脂肪酸化を遅延させかつ／または脂肪含有組成物の物理的および／または熱的処理下でのトコフェロール類の損失を減少させるための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物の使用。
19. 単一パッケージ内の１つ以上の容器中に
    １種以上の脂肪含有組成物；および
    請求項１〜８のいずれか一項に記載の酸化防止剤組合せ物
    を含んでなるキット。
20. 前記脂肪含有組成物がペットフード組成物である、請求項１３に記載の方法、請求項１８に記載の使用、請求項１９に記載のキット。
21. 前記脂肪含有組成物が、好ましくは、脂肪、脂肪を含んでなる嗜好性向上組成物または脂肪を含んでなる食事から選択される脂肪含有食物成分である、請求項１２に記載の方法、請求項１８に記載の使用、請求項１９に記載のキット。