CN108186474A - 桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、制备方法及应用 - Google Patents

桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮含量为65%‑80%；其中所含黄酮成分包括:鼠李素‑3‑O‑鼠李糖苷70%‑80%、槲皮素‑3‑O‑鼠李糖苷5%‑10%、鼠李柠檬素‑3‑O‑鼠李糖苷5%‑10%、山奈酚‑3‑O‑鼠李糖苷2%‑5%，其他黄酮类成分为余量。所述提取物用于护肤品，与鼠李素合用利用总黄酮物质抗氧化作用及鼠李素抗炎作用相结合，可以有效提高护肤品祛痘和抗衰老抗氧化的作用。其提取方法是北桑寄生茎枝粉碎，用乙醇水溶液提取得到提取液；将提取液减压浓缩至浸膏，加水分次溶解，静置并过滤；将滤液通过大孔吸附树脂柱，先用水冲洗，再用醇水溶液洗脱、收集、浓缩，真空干燥得到所述的北桑寄生总黄酮提取物。北桑寄生的功效成分总黄酮纯度达到90%。

Description

桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、制备方法及应用
技术领域
本发明涉及桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、该提取物的制备方法，及其在化妆品领域中的应用。
背景技术
北桑寄生(Loranthus tanakae Franch.et Sav.)系桑寄生科桑寄生属植物北桑寄生的带叶茎枝。产于四川、甘肃、陕西、山西、内蒙古、河北、山东，海拔950-2000米山地阔叶林中，寄生于栎属、榆属、李属、桦属等植物上。北桑寄生是一种用于风湿痹痛、腰膝酸软、筋骨无力、胎动不安、早期流产、高血压症的中药材。
据文献报道，北桑寄生主要含有糖类、鞣质及酚性物质、黄酮类、挥发油和甾体皂苷类成分，现代药理研究发现其粗提物对体外肿瘤细胞具有细胞毒活性和血管抑制活性，但对该植物的化学成分研究仅分出4个黄酮类化合物，并且提取分离的步骤复杂，分离率低，而对于总黄酮的提取工艺研究尚未见报道。
发明内容
本发明提供一种桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物、制备方法及其应用，以达到提高总黄酮收率和总黄酮类纯度，以及提高北桑寄生利用效率的目的。
为解决以上技术问题，根据本发明的一个方面，提供一种桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物，所述提取物总黄酮含量为65 %-90 %；其总黄酮所含成分包括: 鼠李素-3-O-鼠李糖苷70 % - 80 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷5 % - 10 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷5% -10 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2 % - 5 %，其他黄酮类成分为余量。
根据本发明的另一方面，提供一种制备以上所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物的方法，包括步骤：
（1）将干燥的北桑寄生茎枝粉碎，用5-30倍量的乙醇水溶液提取0.5-2小时，提取2-3次，得到提取液；
（2）将提取液减压浓缩至浸膏，加入原生药量3-5倍量水中，分次溶解，静置并过滤。
（3）将步骤（2）滤液通过大孔吸附树脂柱，首先用水冲洗3-8个柱体积，再用醇水溶液洗脱、收集、浓缩，真空干燥得到所述的北桑寄生总黄酮提取物。
进一步地，步骤（1）中，所述提取方法是超声提取或回流提取。
进一步地，步骤（2）中，使用活性炭对溶解的浸膏进行过滤。
进一步地，步骤（3）中，所述洗脱、收集、浓缩的操作过程为：直接用30%-75%醇水溶液洗脱；或用5-30%的醇水溶液洗脱1-3个柱体积、去除洗脱液，用40-75%醇水溶液洗脱；收集洗脱液，减压浓缩。
进一步地，步骤（3）中，采用HPD-100或AB-8或D101大孔吸附树脂。
根据本发明的另一方面，提供以上所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在制备护肤品中的应用，桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在护肤品中的含量为1%-10%（质量分数）。
进一步地，所述护肤品为膏霜或乳液。
此外，本发明还提供一种抗皱抗衰老护肤品，包括以下重量份数的原料：保湿剂25-35份，防腐剂0.2-1份，乳化剂5-15份，透明质酸钠1-5份，桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物1-10份，鼠李素 0-5份，水30-90份。本发明所采用的提取方法，其工艺步骤简单，总黄酮收率高，北桑寄生的功效成分总黄酮纯度达到90%。本发明所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物用于护肤品，有提高护肤品祛痘和抗衰老抗氧化的作用，从而使皮肤更加紧致并富有弹性。
附图说明
图1为北桑寄生总黄酮提取物HPLC图谱。该图谱能对北桑寄生总黄酮提取物组成成分：鼠李素-3-O-鼠李糖苷（成分1）、槲皮素-3-O-鼠李糖苷（成分2）、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷（成分3）、山奈酚-3-O-鼠李糖苷（成分4），进行明确定性和定量。
具体实施方式
桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物
本发明一种典型的实施方式提供一种桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物，所述提取物总黄酮含量为65%-90%；其中所含黄酮成分包括: 鼠李素-3-O-鼠李糖苷70 % - 80 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷5 % - 10 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷5 % -10 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2 % - 5 %，其他黄酮类成分为余量。
本发明北桑寄生提取物以总黄酮含量、鼠李素-3-O-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷、山奈酚-3-O-鼠李糖苷的含量对其进行确切的表征。目前，以上述表征方式进行表征的黄酮类物质以及北桑寄生总黄酮提取物用于护肤品内，均未见相关文献的报道。
桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物的方法
本发明另一种典型的实施方式提供了制备上述桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物的方法，包括步骤：
（1）将干燥的北桑寄生茎枝粉碎，用5-30倍量的乙醇水溶液提取0.5-2小时，提取2-3次，得到提取液；
（2）将提取液减压浓缩至浸膏，加入原生药量3-5倍量水中，分次溶解，静置并过滤；
（3）将步骤（2）滤液通过大孔吸附树脂柱，首先用水冲洗3-8个柱体积，再用醇水溶液洗脱、收集、浓缩，真空干燥得到所述的北桑寄生总黄酮提取物。
作为优选的实施方式，步骤（1）中，所述提取方法是超声提取或回流提取。
作为优选的实施方式，步骤（2）中，使用活性炭对溶解的浸膏进行过滤。
作为相对具体的实施方式，步骤（3）中，所述洗脱、收集、浓缩的操作过程为：直接用30%-75%醇水溶液洗脱；或用5-30%的醇水溶液洗脱1-3个柱体积、去除洗脱液，用40-75%醇水溶液洗脱；收集洗脱液，减压浓缩。以上所述醇水溶液是乙醇水溶液或甲醇水溶液。
作为优选的实施方式，步骤（3）中，采用HPD-100或AB-8或D101大孔吸附树脂。
本发明的提取方法，可以使北桑寄生的功效成分总黄酮纯度达到90%。采用高效液相色谱法，可以对本发明提取物中的黄酮类成分进行明确定性和定量。利用上述工艺得到的北桑寄生总黄酮提取物中总黄酮含量及各组分成分含量测定方法为：北桑寄生总黄酮提取物干燥后，总黄酮含量的测定采用AlCl3显色法进行测定。
在护肤品中的应用
在另一种优选的实施方式中，提供了一种桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在制备护肤品中的应用， 桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在护肤品中的含量为1%-10%（质量分数）。
可将北桑寄生总黄酮与鼠李素合用，利用总黄酮物质抗氧化作用及鼠李素抗炎作用相结合，可以有效提高护肤品祛痘和抗衰老抗氧化的作用,从而使皮肤更加紧致并富有弹性。所述护肤品优选为膏霜或乳液。
下面以抗氧化实验结果阐明其作用。
北桑寄生中的黄酮类物质清除DPPH自由基的清除能力见表1。
注：表中M1: 北桑寄生富集总黄酮提取物; M2: 鼠李素; M3：M1与M2混合物；M4：槲皮素。
结论：在相同浓度下，北桑寄生总黄酮提取物对于DPPH自由基清除能力略低于槲皮素，鼠李素对DPPH自由基清除能力略高于槲皮素。将北桑寄生总黄酮提取物和鼠李素混合后，在相同浓度下，混合物的自由基清除能力高于单一物质及槲皮素。结果表明，北桑寄生总黄酮提取物、鼠李素、槲皮素的自身抗氧化结果均良好，且前两者具有一定的抗氧化协同作用。
因此本专利将总黄酮类物质及鼠李素联合使用于保湿霜中，可起到更好的抗衰老效果。同时，鼠李素具有抗炎作用，本发明中加入鼠李素具有辅助抗痘的作用。
在另一种优选的实施方式中，提供一种抗皱抗衰老护肤品，包括以下重量份数的原料：保湿剂25-35份，防腐剂0.2-1份，乳化剂5-15份，透明质酸钠1-5份，桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物1-10份，鼠李素 0-5份，水30-90份。
优选地，抗皱抗衰老护肤品，包括以下重量份数的原料：保湿剂25-35份，防腐剂0.2-1份，乳化剂5-15份，透明质酸钠1-5份，桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物1-10份，鼠李素 1-5份，水30-90份。
下面提供一些实施例对本发明技术方案和效果作进一步说明。
实施例1：
取粉碎的北桑寄生茎枝10g，用24倍量的75%乙醇水溶液回流提取1.5小时，共提取3次，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量5倍量水中，分次溶解，静置并过滤；滤液加于按常规方法处理好的D101大孔吸附树脂柱上，首先用水冲洗5个柱体积后，再用30%乙醇水溶液洗脱3个柱体积，60%乙醇水溶液洗脱3个柱体积，95%乙醇水溶液洗脱3个柱体积，收集60%乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
60%乙醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为83.2%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷78.51 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷6.06 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷9.55 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2.40 %，以及其他黄酮类成分（见图1）。
实施例2：
取北桑寄生茎枝粗粉200g，用21倍量的65%乙醇水溶液超声提取1.5小时，共提取3次，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量3倍量水中，分次溶解，静置并过滤；滤液加于按常规方法处理好的HPD-100大孔吸附树脂柱上，首先用水冲洗8个柱体积后，再用5%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，60%乙醇水溶液洗脱5个柱体积，95%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，收集60%乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
60 %乙醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为90%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷79.65%、槲皮素-3-O-鼠李糖苷5.01 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷8.07 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2.12 %，以及其他黄酮类成分。
实施例3：
取北桑寄生茎枝粗粉1kg，用5倍量的85%甲醇水溶液回流提取1.5小时，共提取3次，合并提取液，减压回收甲醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量4倍量水中，分次溶解，静置,利用活性炭过滤；滤液加于按常规方法处理好的AB-8大孔吸附树脂上，首先用水冲洗4个柱体积后，再用30%甲醇水溶液洗脱2个柱体积，40%甲醇水溶液洗脱3个柱体积，95%甲醇水溶液洗脱2个柱体积，收集40%甲醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
40%甲醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为70%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷72.78 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷7.87 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷9.98 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷3.16 %，以及其他黄酮类成分。
实施例4
取北桑寄生茎枝粗粉500g，用30倍量的80%乙醇水溶液超声提取2小时，共提取2次，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量4倍量水中，分次溶解，静置并过滤；滤液加于按常规方法处理好的HPD-100大孔吸附树脂柱上，首先用水冲洗3个柱体积后，再用30%甲醇水溶液洗脱2个柱体积，75%甲醇水溶液洗脱5个柱体积，95%甲醇水溶液洗脱2个柱体积，收集75%甲醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
75 %甲醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为75.8%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷71.69 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷7.90 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷9.35 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷3.72 %，以及其他黄酮。
实施例5
取北桑寄生茎枝粗粉500g，用30倍量的80%乙醇水溶液超声提取2小时，共提取2次，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量4倍量水中，分次溶解，静置并过滤；滤液加于按常规方法处理好的HPD-100大孔吸附树脂柱上，首先用水冲洗3个柱体积后，然后用30%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，95%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，收集30%乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
30 %乙醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为70.8%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷70.05 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷6.56 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷8.37 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2.42 %，以及其他黄酮。
实施例6
取北桑寄生茎枝粗粉200g，用21倍量的65%乙醇水溶液超声提取0.5小时，共提取3次，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味时，继续浓缩至浸膏；加入原生药量3倍量水中，分次溶解，静置并过滤；滤液加于按常规方法处理好的HPD-100大孔吸附树脂柱上，首先用水冲洗8个柱体积后，然后用75%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，95%乙醇水溶液洗脱2个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩，真空干燥得北桑寄生总黄酮提取物。
75%乙醇水溶液得北桑寄生总黄酮提取物，其总黄酮（以芦丁计）含量为76%，其中鼠李素-3-O-鼠李糖苷74.68 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷5.76 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷7.48%、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2.02 %，以及其他黄酮类成分。
实施例7 北桑寄生总黄酮提取物保湿霜
保湿剂 35 g
防腐剂 0.5 g
乳化剂 10 g
透明质酸钠 2 g
北桑寄生总黄酮提取物 5 g
鼠李素 1g
以及水 45 g
所述保湿剂为丁二醇，所述防腐剂为苯氧乙醇，所述乳化剂为PEG-60 氢化蓖麻油。
制备过程：取北桑寄生总黄酮提取物和鼠李素于乳钵中，加丁二醇研磨成细腻糊状，另将苯氧乙醇、PEG-60 氢化蓖麻油在搅拌下缓缓加入乳钵中研匀，移入量器中，加蒸馏水至全量，搅匀，即得。
实施例8 北桑寄生总黄酮提取物保湿乳液
保湿剂 30 g
防腐剂 0.2 g
乳化剂 15 g
透明质酸钠 4 g
北桑寄生总黄酮提取物 3 g
以及水 80 g
所述所述保湿剂为1，2-戊二醇，所述防腐剂为苯氧乙醇，所述乳化剂为黄原胶。
制备过程：将北桑寄生总黄酮提取物溶于水中，加入1，2-戊二醇、苯氧乙醇、黄原胶混匀，制成10ml，封装，即得。
实施例9 北桑寄生总黄酮提取物保湿霜
保湿剂 25 g
防腐剂 1 g
乳化剂 5 g
透明质酸钠 1 g
北桑寄生总黄酮提取物 1 g
鼠李素 2g
以及水 30 g
所述保湿剂为丁二醇，所述防腐剂为苯氧乙醇，所述乳化剂为PEG-60 氢化蓖麻油。
制备过程：取北桑寄生总黄酮提取物和鼠李素于乳钵中，加丁二醇研磨成细腻糊状，另将苯氧乙醇、PEG-60 氢化蓖麻油在搅拌下缓缓加入乳钵中研匀，移入量器中，加蒸馏水至全量，搅匀，即得。
实施例10 北桑寄生总黄酮提取物保湿乳液
保湿剂 30g
防腐剂 0.8g
乳化剂 10g
透明质酸钠 5g
北桑寄生总黄酮提取物 10g
鼠李素 5g
以及水 90g
所述所述保湿剂为1，2-戊二醇，所述防腐剂为苯氧乙醇，所述乳化剂为黄原胶。
制备过程：将北桑寄生总黄酮提取物和鼠李素溶于水中，加入1，2-戊二醇、苯氧乙醇、黄原胶混匀，制成10ml，封装，即得。

Claims (9)

1.一种桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物，其特征在于：所述提取物总黄酮含量为65 %-90 %；其总黄酮所含成分包括: 鼠李素-3-O-鼠李糖苷70 % - 80 %、槲皮素-3-O-鼠李糖苷5 % - 10 %、鼠李柠檬素-3-O-鼠李糖苷5 % -10 %、山奈酚-3-O-鼠李糖苷2 % - 5%，其他黄酮类成分为余量。
2.制备如权利要求1所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物的方法，其特征在于，包括步骤：
（1）将干燥的北桑寄生茎枝粉碎，用5-30倍量的乙醇水溶液提取0.5-2小时，提取2-3次，得到提取液；
（2）将提取液减压浓缩至浸膏，加入原生药量3-5倍量水中，分次溶解，静置并过滤；
（3）将步骤（2）滤液通过大孔吸附树脂柱，首先用水冲洗3-8个柱体积，再用醇水溶液洗脱、收集、浓缩，真空干燥得到所述的北桑寄生总黄酮提取物。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述提取方法是超声提取或回流提取。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤（2）中，使用活性炭对溶解的浸膏进行过滤。
5.根据权利要求2或3或4所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述洗脱、收集、浓缩的操作过程为：直接用30%-75%醇水溶液洗脱；或用5-30%的醇水溶液洗脱1-3个柱体积、去除洗脱液，用40-75%醇水溶液洗脱；收集洗脱液，减压浓缩。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（3）中，采用HPD-100或AB-8或D101大孔吸附树脂。
7.权利要求1所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在制备护肤品中的应用，桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物在护肤品中的含量为1%-10%（质量分数）。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述护肤品为膏霜或乳液。
9.一种抗皱抗衰护肤品，其特征在于，包括以下重量份数的原料：保湿剂25-35份，防腐剂0.2-1份，乳化剂5-15份，透明质酸钠1-5份，权利要求1所述的桑寄生属植物北桑寄生总黄酮提取物1-10份，鼠李素 0-5份，水30-90份。
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