CN103040882A - 紫果西番莲茎及叶提取物及其药物组合物与抗抑郁作用 - Google Patents

Abstract

提供紫果西番莲茎及叶提取物，其进一步的活性化合物，其药物组合物，它们的制备方法，以及它们在制备抗抑郁药品保健品中的应用。紫果西番莲茎及叶提取物以环阿尔廷烷型三萜和黄酮及其苷为指标成分，应用于镇静抗抑郁相关产品。紫果西番莲植物为果品种植业及庭园绿化植物，种植容易，原料易得；提取富集三萜及黄酮类提取物工艺简单，适合工业化生产；具有一定的镇静抗抑郁活性，应用于镇静抗抑郁相关产品开发。

Description

紫果西番莲茎及叶提取物及其药物组合物与抗抑郁作用

技术领域：

本发明属于药品技术领域，具体的说，涉及由紫果西番莲茎叶提取物，其进一步的活性化合物，其药物组合物，它们的制备方法，以及它们在制备抗抑郁药物中的应用。

背景技术：

西番莲属(Passiflora)为西番莲科 (Passifloraceae)最大的属，全属植物约有400余种，该属植物均为多年生草本或木质藤本，其中可以食用的约有60余种，大都原产于热带美洲地区，其余种类多数产于亚洲热带地区，《中国植物志》记载有20种2变种。我国于1913年从菲律宾将该属植物引入台湾种植，目前在台湾、福建、广东、广西和云南等省(区)都有栽培，引种栽培的主要有紫果西番莲(Passiflora edulis)和黄果西番莲(Passiflora edulis f. flovicarpa)以及它们的杂交种，其果实人称鸡蛋果、百香果，营养丰富，是一种滋补健身的水果，果汁加工业也在我国多地开展。西番莲属植物全草药用价值广泛，1569年，西班牙研究人员Monardus在秘鲁发现该属植物并作为药用植物进行开发。

焦虑和抑郁是目前发病率越来越高的疾病之一，容易导致患者精神恍惚，工作效率低下，严重的有自杀的倾向。目前还缺乏非常有效的药物治疗，心理治疗与自我调节为主要方式。迄今，现有技术中未有紫果西番莲提取物及其活性化合物作为治疗焦虑和抑郁的药物活性的报道。

发明内容：

本发明目的在于提供一种由紫果西番莲茎叶提取物，其进一步的活性化合物，其药物组合物，它们的制备方法，以及它们在制备抗抑郁药物中的应用。

下面的技术方案是用以实现本发明的上述目的的：

一种紫果西番莲茎及叶提取物，用下述方法提取获得：紫果西番莲茎叶采收后晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出乙醇后回收乙醇，得到提取物浸膏水混悬液，石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂；剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮类化合物的活性提取部位。

如上所述的紫果西番莲茎及叶提取物，是以下述结构式所示的化合物环阿尔廷烷型三萜和黄酮及其苷类化合物为主要成分，

其中，R₁~R₄为氢原子、羟基、各种糖等形成的苷元及其苷类物质。

如上所述的紫果西番莲茎及叶提取物，是以下述的化合物1、2、3单个成分或者三个成分的总含量为质量指标：化合物1和2相加的含量不低于0.5%，或者化合物3的含量不低于0.2%，或者化合物1和2和3相加的总含量不低于1.5%，上述含量以质量百分数为单位，

制备上述紫果西番莲茎及叶提取物的方法，取紫果西番莲茎叶，晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出提取液后回收乙醇，得到提取物水混悬液，用石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂，剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮的活性提取部位。

一种抗抑郁中药组合物，含有治疗有效量的上述的紫果西番莲茎及叶提取物及可药用载体。

上述的紫果西番莲茎及叶提取物在制备抗抑郁药物中的应用。

一种抗抑郁中药组合物，含有治疗有效量的以上述的紫果西番莲茎及叶提取物进一步纯化获得的下述化合物1或2或3及可药用载体，

制备上述中药组合物的方法，取紫果西番莲茎叶，晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出乙醇后回收乙醇，得到提取物浸膏；将浸膏分散在水中，石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂；剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮的活性提取部位；经200-300目，氯仿-甲醇，10:1-1:1反复硅胶柱层析、甲醇凝胶柱层析、Rp-18，Rp-8gel，甲醇：水=8:2~5:5反相柱层析得到化合物1、2、3，最后加入药物常规辅剂得中药组合物。

上述的中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用。

上述的中药组合物中活性化合物1或2或3在制备抗抑郁药物中的应用。

本发明由紫果西番莲茎或叶制备具有镇静抗抑郁作用的相关药品保健品或食品补充品。紫果西番莲茎叶为果品工业的副产物，原料易得，主要化学成分为环阿尔廷烷型三萜(Cyclopassiflosides)与黄酮(chrysin)及其苷类物质，其总提物具有镇静抗抑郁活性；其中三个量大主要化学成分化合物1、2、3也显示抗抑郁活性，可以用开发产品作质量指标。

本发明将紫果西番莲茎叶提取物开展抗抑郁活性筛选，发现该植物茎叶具有一定的镇静抗抑郁活性。进一步的化学研究表明该植物主要含有环阿尔廷烷型三萜和黄酮及其苷类化合物，分离鉴定了这类化合物31个，其中2个量大的环阿尔廷烷型三萜皂苷(CyclopassiflosidesIX and XI)和1个黄酮苷(chrysin-7-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-α-L-rhamnopyranoside) (图示 2)，这三个主要化学成分也具有抗抑郁活性，可以选择用于相关产品的质量指标。西番莲茎叶用作相关产品开发，可以增加果品工业的附加值。

本发明的有效提取物紫果西番莲茎或叶提物，以及活性化合物1、2、3可直接作为药物使用，其余辅料为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的药用载体或赋形剂。

所述的药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、超填料以及药物制品辅剂。将所述的有效提取物或有效部位以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经口服和口腔喷雾两种形式给药。

口服可用其固体或液体制剂，如粉剂、片剂、糖衣片剂、胶囊、酊剂、糖浆、滴丸剂等。

口腔喷雾可用其固体或液体制剂。

本发明药物可用于治疗抑郁、焦虑疾病。与现有市售药物相比，本发明药物具有疗效非常显著，起效快，服药量低，方便患者等优点。

具体实施方式：

下面的实施举例可以使本专业人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：

紫果西番莲环阿尔廷烷型三萜与黄酮及其苷的分离富集：

采收紫果西番莲茎叶晾干，称重得3.6公斤，打成粗粉，用90 %乙醇回流提取，滤出乙醇后回收乙醇，得到提取物浸膏；将浸膏分散在水中，石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂；剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以80 %乙醇洗脱，得到总提物即为富含三萜及黄酮的活性提取部位78克，总得率约为2.17%。

上述提取物以下述的化合物环阿尔廷烷型三萜和黄酮及其苷类化合物为主要成分。

其中，R1~R4为氢原子、羟基、各种糖等形成的苷元及其苷类物质。

实施例2：

紫果西番莲茎叶提取物抗抑郁活性筛选：

将西番莲茎与西番莲叶分别晾干，打成粗粉，各称取20.0克样品，用70%丙酮水回流3小时提取。过滤提取液，回收丙酮水溶剂，得到提取物浸膏西番莲茎提取物（XFLJ，5.6克，提取率28.0%）、西番莲叶提取物（XFLY，7.3克，提取率36.5%）。结果表明XFLY高剂量组（生药剂量10g/kg）抗抑郁活性较差，可能与其镇静作用有关(表1及表2)。

与空白相比：*P<0.05

由表1可见，阳性对照氯米帕明及XFLY低剂量组（生药剂量2g/kg）连续灌胃给药7天，能明显缩短强迫游泳小鼠的不动时间。

与空白组相比：*，**P<0.05，<0.01

由表2可见，阳性对照氯米帕明、XFLJ和XFLY连续灌胃给药8天，均能明显地缩短悬尾小鼠的不动时间。

实施例3：

紫果西番莲三个主成分抗抑郁活性：

紫果西番莲茎叶采收后晾干，打成粗粉，称重得3.6公斤，用90%乙醇10升回流提取两次，每次3小时，合并过滤得到的乙醇提取液，减压浓缩蒸去乙醇液，加适量水到总体积约2.5升的水混悬液。再以乙酸乙酯萃取3次，每次1.5升，萃取后的水液上D101大孔树脂；先以水冲树脂柱至无色，再以80%乙醇洗脱大孔树脂柱，收集乙醇洗脱部位，浓缩至干燥膏状物，称重得78克，即为富含三萜及黄酮的总提取物。

该总提物经反复硅胶柱层析（200-300目，氯仿-甲醇，10:1-1:1）、凝胶柱层析（甲醇）、反相柱层析（Rp-18，Rp-8gel，甲醇：水=8:2~5:5）得到化合物1 (534mg，总得率约0.015%，约占总提物浸膏78克的0.68%)、化合物2 (420mg，总得率约0.012 %，约占总提物浸膏78克的0.54 %)、化合物3 (310 mg，总得率约0.0086 %，约占总提物浸膏78克的0.40%)，最后加入药物常规辅剂得中药组合物。

将分离鉴定的三个主成分(两个三萜皂苷Cyclopassiflosides IX(化合物1)和XI(化合物2)，一个黄酮苷chrysin-7-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-α-L- rhamnopyranoside(化合物3))(下述结构图)开展抗抑郁小鼠模型筛选，结果表明均具有活性(表3及表4)。分离鉴定的三个化合物结构如下：

与纯水相比，*^/**P<0.05/0.01；与TW-80相比，^△P<0.05

由表3可见，阳性对照氯米帕明及化合物1、2、3样品单次灌胃给药，均能明显缩短强迫游泳小鼠的不动时间，与相应溶媒对照组相比差异具有统计学意义，其作用顺序为：阳性＞3#＞1#＞2#。

与纯水相比，*^/**P<0.05/0.01；与TW-80相比，^△P<0.05

由表4可见，阳性对照氯米帕明及1、2、3#（即上述结构式中的化合物1、2、3）样品单次灌胃给药，均能明显缩短悬尾小鼠的不动时间，与相应溶媒对照组相比差异具有统计学意义，其作用顺序为：阳性＞2#＞1#＞3#。

实施例4：

按实施例1或2或3制得紫果西番莲活性提取物，以及活性化合物1、2、3，按活性提取物或活性化合物与赋形剂重量比1:1的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例5：

按实施例1或2或3制得紫果西番莲活性提取物，以及活性化合物1、2、3，按活性提取物或活性化合物与赋形剂重量比1:2的比例加入赋形剂，制粒压片。

实施例6：

按实施例1或2或3制得紫果西番莲活性提取物，以及活性化合物1、2、3，按常规胶囊制剂方法制成颗粒剂或装胶囊。

实施例7：

按实施例1或2或3制得紫果西番莲活性提取物，以及活性化合物1、2、3，再按下述方法制成片剂

片剂：紫果西番莲活性提取物或活性化合物1或2或3100mg

淀粉适量

玉米浆适量

硬脂酸镁适量

实施例8：

胶囊剂：紫果西番莲活性提取物或活性化合物1或2或3     100mg

淀粉适量

硬脂酸镁适量

制备方法：将活性提取物或活性化合物1或2或3混合，过筛，在合适的容器中均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊。

实施例9：

鼻喷雾剂：紫果西番莲活性提取物或活性化合物1或2或3     80 mg

制备方法：搅拌下于适当体积的重蒸馏水中每次加入一种成分，直至完全深解，然后再加入另一种成分。加水至2ml后，将该溶液在无菌过滤器上过滤，装入瓶中并按照适当的剂量分隔。

实施例10：

滴丸：紫果西番莲活性提取物或活性化合物1或2或31g

聚乙二醇9g

制法：活性提取物或活性化合物1或2或3与聚乙二醇6000熔融液的制备：按上述处方量称取糖胶树加入适量无水乙醇，微热溶解后，加入处方量的聚乙二醇熔融液中（60℃水浴保温），搅拌混合均匀，直至乙醇挥尽为止，静置于60℃水浴中保温30分钟，待气泡除尽，然后将除尽气泡的上述混匀熔融液转入贮液筒内，在保温80-85℃的条件下，控制滴速，一滴滴地滴入冷凝液中，等冷凝完全，倾去冷凝液，收集滴丸，沥净和用滤纸除去丸上的冷凝液，放置硅胶干燥器中或自然干燥即可。

Claims (10)

1.一种紫果西番莲茎及叶提取物，其特征在于该提取物用下述方法提取获得：紫果西番莲茎叶采收后晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出乙醇后回收乙醇，得到提取物浸膏水混悬液，石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂；剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮类化合物的活性提取部位。

2.如权利要求1所述的紫果西番莲茎及叶提取物，其特征在于紫果西番莲茎及叶提取物是以下述结构式所示的化合物环阿尔廷烷型三萜和黄酮及其苷类化合物为主要成分，

其中，R₁~R₄为氢原子、羟基、各种糖等形成的苷元及其苷类物质。

3.如权利要求1所述的紫果西番莲茎及叶提取物，其特征在于该提取物以下述的化合物1、2、3单个成分或者三个成分的总含量为质量指标：化合物1和2相加的含量不低于0.5%，或者化合物3的含量不低于0.2%，或者化合物1和2和3相加的总含量不低于1.5%，上述含量以质量百分数为单位，

4.制备权利要求1所述的紫果西番莲茎及叶提取物的方法，取紫果西番莲茎叶，晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出提取液后回收乙醇，得到提取物水混悬液，用石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂，剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮的活性提取部位。

5.一种抗抑郁中药组合物，含有治疗有效量的权利要求1或2或3所述的紫果西番莲茎及叶提取物及可药用载体。

6.权利要求1或2或3所述的紫果西番莲茎及叶提取物在制备抗抑郁药物中的应用。

7.一种抗抑郁中药组合物，含有治疗有效量的以权利要求1所述的紫果西番莲茎及叶提取物进一步纯化获得的下述化合物1或2或3及可药用载体，

8.制备权利要求7所述的中药组合物的方法，取紫果西番莲茎叶，晾干，打成粗粉，用60%~85%乙醇回流提取，滤出乙醇后回收乙醇，得到提取物浸膏；将浸膏分散在水中，石油醚或乙酸乙酯萃取脱脂；剩余水相用大孔树脂负载，水冲至无色，再以50%~95%乙醇洗脱，得到总提取物富含三萜及黄酮的活性提取部位；经200-300目，氯仿-甲醇，10:1-1:1反复硅胶柱层析、甲醇凝胶柱层析、Rp-18，Rp-8gel，甲醇：水=8:2~5:5反相柱层析得到化合物1、2、3，最后加入药物常规辅剂得中药组合物。

9.权利要求7所述的中药组合物在制备抗抑郁药物中的应用。

10.权利要求7所述的中药组合物中活性化合物1或2或3在制备抗抑郁药物中的应用。