CN106236795A - 一种具有抑菌作用的中药制剂及生产方法 - Google Patents

一种具有抑菌作用的中药制剂及生产方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于中药领域，涉及一种具有抑菌作用的中药制剂，特别是一种以锡叶藤(五桠果科锡叶藤Tetracera asiatica(Lour.)Hoogland的根)的提取物制成的中药制剂；研究结果表明，该中药制剂能对贺氏痢疾杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和伤寒杆菌具有抑菌活性作用，显示出良好的抑菌消炎作用。

Description

一种具有抑菌作用的中药制剂及生产方法
技术领域
本发明属于中药领域，涉及以锡叶藤(五桠果科锡叶藤Tetracera asiatica(Lour.)Hoogland的根)为原料制备中药制剂的方法，以及该中药制剂的抑菌和消炎药效学试验结果。
背景技术
细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者，但是细菌大部分是有害的，所以它也是导致人类死亡的重要原因，细菌感染是危害人类健康的大敌。目前，治疗细菌感染的药物主要依赖于抗生素，然而，由于人类对抗菌药物的滥用，使得许多细菌在抗菌药物的强大压力下逐渐进化，产生对抗菌药物极强的抗药性，致使抗菌药物对耐药菌株的疗效不断减弱甚至无效，同时细菌的耐药机制多种多样，现在几乎每种有效的抗生素都发现了其相应的耐药菌。这种情况下，在中药领域中寻找新的抗菌药物，已成为解决细菌耐药性的一种重要途径。
锡叶藤为五桠果科锡叶藤Tetracera asiatica(Lour.)Hoogland的根。其性凉，味苦，具有收敛止泻，消肿止痛之功。常用于治疗腹泻、痢疾、脱肛等症。其药材中富含鞣质、黄酮、萜类类物质等多种生物活性成分，具有明显的抑菌、抗炎、抗肿瘤等活性[国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草[M].第3卷.上海：上海科学技术出版社，1999：510-511.]。锡叶藤药材资源丰富，我国南部与西南各省均产，为民间常用的的中草药之一。
利用锡叶藤的这些药理作用，研究人员将锡叶藤作为药品原料进行了研究，但现有研究文献报道的不多。主要有：治疗子宫脱垂[秦芳，申请号 201510092468.2]、治疗小儿腹泻[万家林，申请号CN201410580600.X]和治疗宫颈癌[李荣勤，CN201510495244.6]等。
至2016年9月8日，已公开的、与锡叶藤有关的专利文献共计27条，其中发明专利27条，全部是复方中药制剂。以锡叶藤为单方开发的中药制剂，尚未见有专利文献报道。
综上所述，本发明具有充分的新颖性、创造性和实用性。
发明内容
发明人从锡叶藤中制备一种具有抑菌作用的乙醇提取部位，并将这一有效部位制备成中药制剂，这在国内尚未见有文献报道过。
本发明的技术方案述及了从锡叶藤中提取具有抑菌作用的有效部位的方法、将这一有效部位制备成中药制剂的方法、以及对这一中药制剂进行抑菌试验的方法和结果。
锡叶藤抑菌作用有效部位的提取方法，尚未见有文献报道。发明人通过科学研究发现，锡叶藤抑菌作用的有效成分溶解于50％-70％的乙醇中，因此，发明中采用乙醇水溶液回流提取，乙酸乙酯萃取。为得到较为纯净的具有抑菌作用的黄酮类，本发明采用聚酰胺树脂洗脱，提取得到的有效部位，可制备成供口服的中药制剂，如片剂、口服液、颗粒剂等，其制法与文献记载的相应剂型的制法是通用的。有效部位与药用辅料的重量比例范围如下：制剂中含锡叶藤提取物0.5％～99.5％，余量为药剂成型辅料。
与现有技术相比，本发明突出的实质性特点和显著的进步是：首次公开了从锡叶藤中提取抑菌作用有效部位的方法、将该有效部位制备成片剂、口服液、颗粒剂的方法、以及对该中药制剂进行保肝降酶动物试验的方法和结果。
具体实施方式
下列实施例子用于举例说明本发明，并不是对本发明保护范围的任何限制。
一、下面是提取抑菌有效部位的实施例子：
提取实施例一：锡叶藤根茎，晒干，打成最粗粉(过一号筛)，用8倍量50％乙醇水溶液回流提取3次，每次45min；合并醇提液，浓缩，乙酸乙酯萃取；滤液通过聚酰胺树脂柱(树脂用量为药材重量的5倍)，收集流出液，减压浓缩至稀膏。
提取实施例二：锡叶藤根茎，晒干，打成最粗粉(过一号筛)，用10倍量60％乙醇水溶液回流提取3次，每次45min；合并醇提液，浓缩，乙酸乙酯萃取；滤液通过聚酰胺树脂柱(树脂用量为药材重量的5倍)，收集流出液，减压浓缩至稠膏，稠膏烘干，打成细粉(过五号筛)。
提取实施例三：锡叶藤根茎，晒干，打成最粗粉(过一号筛)，用12倍量70％乙醇水溶液回流提取3次，每次45min；合并醇提液，浓缩，乙酸乙酯萃取；滤液通过聚酰胺树脂柱(树脂用量为药材重量的5倍)，收集流出液，减压浓缩至稠膏，稠膏烘干，打成细粉(过五号筛)。
二、下面是将有效部位制备成药物的实施例子：
药物制剂实施例一：按有效部位的得率计算，取相当于1000g锡叶藤生药的有效部位干膏细粉，约重17g，加淀粉至总量100g，制粒，压成片剂，素片重0.2g，每片含锡叶藤生药2g。
药物制剂实施例二：按有效部位的得率计算，取相当于1000g锡叶藤生药的有效部位稀膏，体积约500ml，加白砂糖1200g，加热溶解，最后加水到2000ml，过滤，得口服液，分装，每支10ml，每支含锡叶藤生药5g。
药物制剂实施例三：按有效部位的得率计算，取相当于1000g锡叶藤生药的有效部位干膏细粉，约重23g，加糖粉至总量500g，制粒，得颗粒剂，分装， 每小包5g，每小包含锡叶藤生药10g。
三、下面是药理作用试验方法及结果：
供试菌株的制备：将相应供试菌种移接到相对应的斜面培养基上，每种菌种接多支重复，置于37℃生化培养箱培养24h，每种菌种取3支供试验用，其余冷藏备用。
菌悬液的制备：挑取各种细菌菌落接种于平面培养基上，于37℃生化培养箱培养24h，用无菌生理盐水洗脱，振荡15s后用血细胞计数板调整其浓度，分别制成含菌约105cfu·mL-1的菌悬液。具体制备方法：分别挑取少量细菌至无菌生理盐水中洗出-玻璃珠打散-制成菌悬液-调菌悬液浓度为105cfu·mL-1，备用。
药理实验一
通过体外抑菌试验比较锡叶藤冷浸、回流、超声提取三种提取方法的抑菌活性：
取锡叶藤样品粉末各3份，每份约2g，精密称定，分别置于锥形瓶中，加入10倍量50％乙醇，分别进行超声提取45min、冷浸24h、水浴回流45min，提取3次，分别合并各次提取液，过滤，浓缩至每1ml提取液中含有1g锡叶藤。阴性对照就是空白对照，阳性对照为青霉素溶液。
试验结果表明本发明回流提取可获得更好的体外抑菌效果，见表1：
表1 锡叶藤提取方法抑菌效果
(++表示有抑菌较强，+表示有抑菌圈，-表示没有抑菌圈)
药理实验二
通过体外抑菌试验比较锡叶藤石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物的抑菌活性：
取粉碎后的锡叶藤根药粉，加10倍量的50％乙醇溶剂，进行减压热回流提取3次，每次45min，过滤后的提取液以3000r/min离心20min，滤液浓缩得锡叶藤乙醇提取物浸膏，取约乙醇浸膏分散于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，减压浓缩后得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三个部分浸膏，用无菌水溶解稀释成含各提物1g·mL-1的药液。
试验结果表明本发明乙酸乙酯萃取物可获得更好的体外抑菌效果，见表2：
表2 锡叶藤萃取物抑菌效果
(++表示有抑菌较强，+表示有抑菌圈，-表示没有抑菌圈)
锡叶藤乙酸乙酯萃取物对贺氏痢疾杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和伤寒杆菌具有抑菌活性作用。可作为天然抗菌剂用于食品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。

Claims (3)

1.一种中药制剂，其特征在于：以重量计，锡叶藤提取物在制剂中所占的比例为0.5％～99.5％，余量为药剂成型辅料。
2.根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于：制备方法如下：①干锡叶藤粗粉，用8-12倍量浓度为50-70％的乙醇水溶液，80℃回流提取45min，过滤，重复提取3次，合并3次滤液；②滤液减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取；③醇提液流过聚酰胺树脂柱，以洗脱出黄酮类成分，收集流出液；④流出液回收溶剂至稀膏；⑤制剂的制备方法有2种：第一种：稀膏中加入白砂糖粉，溶解，混匀，制成口服液；第二种：稀膏进一步制成干膏，干膏打成细粉后与赋形辅料混匀，制成片剂、颗粒剂。
3.根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于：对贺氏痢疾杆菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和伤寒杆菌具有抑菌活性作用。可作为天然抗菌剂用于食品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。
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