CN108143765A - 一种含有红景天的保健品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种含有红景天的保健品及其制备方法。该保健品由红景天、葛根等主要成分组成，通过合理的配伍和科学的制备，经动物功能试验证明本品对提高缺氧耐受力有很好的作用。

Description

一种含有红景天的保健品及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有提高缺氧耐受力功能的保健品及其制备方法，具体来说是涉及一种含有红景天的，具有提高缺氧耐受力功能的保健品组方及其制备方法。

背景技术

氧是人体进行新陈代谢的关键物质，是人体生命活动的第一需要。由肺吸入的氧转化为人体内可利用的血氧，血液携带血氧向全身输入生物氧化所需的能源，因此氧是生命活动中不可缺少的重要物质。一旦体内由于呼吸、血氧含量及血液运行障碍等而使体内器官缺少血氧，就会像不能正常呼吸一样感到憋气、窒息，从而引发心缺氧反应（心悸、胸闷、气促等）、脑缺氧反应(头晕目眩、记忆障碍、神志不清等)及躯体缺氧反应（机体反应迟钝、酸痛乏力、手脚发麻等），最终导致机体的心、脑等主要器官等因供氧不足而死亡。

缺氧有以下几种类型：①病理性缺氧。患呼吸系统疾病、心脑血管疾病的病人，由于从外界摄取氧和通过血液输送氧的能力下降，造成机体缺氧；②生理性缺氧。人到中年，随着年龄的增长，各器官生理性老化，直接造成人体摄入氧量降低，利用氧的效率降低，身体处于程度不同的慢性缺氧状态。人到老年，与年轻人相比血管腔狭窄，血管弹性降低，血流量减少，肺活量下降。老年人摄入氧量减少，运送氧的能力降低，利用氧的效率下降，整个身体组织处于不同程度的缺氧状态，缺氧正是老年人容易发生脑、心、肝、肾功能降低的病理基础。③运动性缺氧。紧张的体力和脑力活动会造成机体耗氧量增加，由于体内耗氧量急剧增加，单纯地通过肺呼吸，不足以弥补体内的氧耗量，使细胞处于缺氧环境中，同时伴随大量乳酸产生。④环境性缺氧。正常情况下，大气中的氧含量是20.9%。如果处在一个氧含量低于18%的环境中，就会表现出相应的缺氧症状。一般说来，凡是氧含量低于20.9%的环境，都是缺氧环境。即便是轻度缺氧的环境，长期在其中生活、工作，也会对身体健康带来不同程度的损伤。另外还有一类缺氧环境是由于高原、高空的空气稀薄造成。如航空航天、高原勘探、高空作业、井下作业、高原旅游等人员，常常存在低压、缺氧等应激因素的影响，短期、轻度的缺氧可很快恢复，不致于产生不良后果；而长期、累积性缺氧可能渐进性损害身心功能，加重疲劳，降低工作效率，甚至诱发安全事故。因此，开发具有提高缺氧耐受力的保健食品具有重要的现实需求和重大的社会、经济效益。

随着人们对缺氧危害的认识，不少消费者希望通过食用保健食品来改善身体的缺氧状况。

现在市场上有许多提高缺氧耐受力的产品，如纯中药类（红景天制剂、银杏制剂、枸杞子制剂、葛根制剂等）、纯营养素类（鲨鱼油、角鲨烯、1,6-二磷酸果糖、牛初乳等）、中药与营养素复方类等几大类，其中纯中药类保健食品数量占到同类产品数量50%以上。

发明内容

本品以红景天、葛根作为原料，利用现代生产工艺制备而成，剂型广为大众接受，提高缺氧耐受力，一旦上市，具有巨大市场需求量。

低氧或缺氧是心、肺、脑血管病等常见病患者的基本病理过程，一般短暂或轻度缺氧可引起心跳加快、嘴唇发紫、头晕、头痛，甚至可能出现呕吐、昏迷等症状。长时间或急度缺氧，可引起严重的功能性障碍或病理学改变，甚至可能导致死亡，缺氧的机制错综复杂，涉及领域广泛。自适应是机体在内外环境的变化中，通过改变自身的机能、形态和结构以适应其变化，从而更好的生存下去。自适应是生物体作为复杂系统在长期进化过程中适应环境赖以生存延续的基本能力。当外界刺激超过机体的适应能力时，即可导致疾病的发生。机体适应缺氧能力的强弱决定着缺氧耐受性高低。低氧或缺氧时，机体可产生一系列的变化，从而更好的适应缺氧，其中包括肺通气量的增加，血红蛋白含量及其与氧的亲和力的增加以及组织利用氧的增加等方面，但大多数人自身对缺氧环境下的生理性调节能力远不能满足人体活动的需要，甚至导致缺氧缺血性心脑疾病的发生。因此，提高机体缺氧自适应调节能力成为人体提高缺氧耐受力的关键环节。

本品依据传统中医理论组方，选用具有益气、活血、通络等功能的中药，且被列入卫生部批准的可用于保健食品的物品（或既是食品又是药品的物品）作为原料，组成初选配方，再通过成型试验，确定配比量，最后制成本品。

配方中红景天，味甘、苦，性平，归肺、心经，益气活血，通脉平喘。明代李时珍《本草纲目》记载：“红景天，本经上品，祛邪恶气，补诸不足”称之为“已知补益药中所罕见”。《四部医典》也有关于红景天的记载，言其“性平、味涩、善润肺、能补肾、理气养血。”《晶珠本草》言：“红景天活血清肺、止咳退烧、止痛，用于治疗肺炎、气管炎、身体虚弱、全身乏力、胸闷、难于透气、嘴唇和手心发紫”。红景天益气活血，气旺则血行，血脉通利，气虚得补，瘀血得通。

葛根，味甘、辛，性凉，归脾、胃、肺经，解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。《神农本草经》载：“主消渴，身太热，呕吐，诸痹，起阴气，解诸毒。”《名医别录》言：“疗伤寒中风头痛，解肌，发表，出汗，开腠理。”“生根汁，疗消渴，伤寒壮热。”《本草纲目》载：“葛根，性凉、气平、味甘，具清热、降火、排毒”。《本草正义》谓：“气味俱薄，能升发脾胃清阳之气”，葛根其气清浮，最能升发脾胃清阳之气，鼓舞脾胃津气上行，与红景天同用，益气升阳，养阴生津，使祛瘀通络之效更著。

以红景天益气活血，配以葛根生津止渴，升发阳气组成以岭牌红景天胶囊，气虚得补，气旺血行，且使缺氧不适诸症得消。

本配方中各原料均为亦食亦药的天然植物，按照药理作用及中医理论配伍，各原料的实际使用量均在各原料安全剂量范围之内，从配方上完全能够保证对人体的安全性。

本发明所述的，含有红景天的提高缺氧耐受力的保健品，其特征在于所述保健品各主料的重量份如下：红景天150-450、葛根650-950。

所述保健品各主料的重量份还可优选为：红景天150、葛根950。

本发明保健品各主料的重量份也可优选为：红景天、450、葛根650。

本发明所述保健品各主料的重量份更优选为：红景天330 、葛根825。

本发明保健品还包含辅料，辅料为玉米淀粉或红薯淀粉。辅料的重量份为100-200。优选的，辅料的重量份为130。

本发明保健品的制剂剂型可以为胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂或膏剂。其中所述胶囊剂的制备方法包括以下步骤：

a、按配方量称取红景天、葛根，加乙醇回流提取3次，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为稠膏；真空干燥，得到干膏，粉碎后得干膏粉备用；

b、辅料玉米淀粉与步骤a所得的干膏粉混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。

所述胶囊剂的制备方法包括以下步骤：

a、按配方量称取红景天、葛根，加60%乙醇回流提取3次，第一次加10倍量的60%乙醇回流提取2小时；第二次、第三次加8倍量60%乙醇回流提取1.5小时，收集提取液，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为60℃热测，相对密度为1.2-1.3的稠膏；真空带式干燥，干燥温度为110℃-120℃，得到干膏，干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉备用；

b、辅料红薯淀粉与步骤a所得的干膏粉，混合机混合15分钟混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，整粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。

为证实本发明保健品的产品安全性和有效性，特采用实施例1制得的样品，送福建省疾病预防控制中心进行检测，报告如下：

样品名称: 本发明保健品

检验项目:急性经口毒性试验、Ames试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验

检验依据：《保健食品检验与评价技术规范)) (卫生部2003 )

检验结果及判定意见:

l 、急性毒性试验:该样品急性毒性试验结果为MTD＞20g/kg BW (相当于成人日推荐量的310倍) ，根据急性毒性分级属于无毒级。

2 、Ames试验: 该样品Ames试验结果为阴性。

3 、骨髓细胞微核试验: 该样品小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。

4 、小鼠精子畸形试验: 该样品小鼠精子畸形试验结果为阴性。

本发明保健品检验项目: 急性毒性试验

一、材料:

1 、样品: 本发明保健品内容物，成人日推荐量为3.87g，相当于0.0645g/kg BW (成人体重以60kg计) 。

2 、动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。

3、饲料: 上海普路腾生物科技有限公司，饲料生产许可证号:沪饲证(2014)04001。

4 、饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF 级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008。

5、检测仪器: 电子天平。

二、实验方法:

选取18-22g健康ICR小鼠20只，雌雄各半，试验前小鼠隔夜禁食16小时，不禁水，称取样品10g加蒸馏水至30mL (达最大可灌胃浓度) ，搅拌均匀，以经口灌胃方式间隔4h给予3次，灌胃容量为0.02mL/g BW，试验剂量为20g/kgBW，灌胃后，连续观察14天，观察并记录动物中毒的表现和死亡情况。

三、结果:

试验期间动物未见异常；观察期结束后存活动物进行大体解剖，动物未见异常，结果见表1。

四、结论

该样品急性毒性试验结果为MTD> 20g/kg BW ，相当于成人目推荐量的310倍，根据急性毒性分级属无毒级。

样品名称: 本发明保健品检验项目: Ames试验

材料:

l 、样品:本发明保健品内容物.

2 、阳性物: 2，4，7-TNFone 、NaN3、MMC 、2-AF 、1，8-二羟基蒽醌。

3 、溶剂:蒸馏水， 0.103MPa20min灭菌。

4 、检测仪器: BSC-1360 II A2 生物安全柜、SHP-250生化培养箱、DK-S28 电热恒温水温箱、电子天平、SS-325型自动高压灭菌器、自动菌落计数仪。

二、实验方法:

采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100和TA102 四株菌株进行试验，采用多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆作为体外代谢活化系统.称取样品5.0g加溶剂至100mL做为高剂量受试物，量取高剂量20mL加溶剂至100mL搅拌均匀做为次高剂量受试物，以下三个剂量如此类推配制，由高到低配成5000、1000、200、40、8μg/皿5个浓度，经0.055MPa20min灭菌，同时设自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组，每个剂量设3个平皿，在顶层琼脂中加入0.1mL测试菌株增菌液、0.1 mL受试物溶液和0.5 mLS-9混合液(当需要代谢活化时) ，混匀后倒入底层培养基平板上，在37℃培养48小时，计数每皿回变菌落数，试验重复一次。如果样品的回变菌落数是溶剂对照组回变菌落数2倍以上，并具有剂量反应关系则定为试验结果阳性。

二、结果:

由表2 、3可见，该样品各剂量组的回变菌落数均未超过溶剂对照组回变菌落数的2倍。

四、结论:

该样品的Ames 试验结果为阴性。

样品名称: 本发明保健品检验项目: 骨髓细胞微核试验

一、材料:

l 、样品: 本发明保健品内容物，成人日推荐量为3.87g，相当于0.0645 g/kg BW (成人体重以60 kg计) 。

2 、动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。

3 、饲料:上海普路腾生物科技有限公司，饲料生产许可证号号:沪饲证(2014)04001 。

4 、饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF级动物实验室，许可证号: SYXK (闽)2012-0008。

5 、阳性对照物:环磷耽胶(40 mg/kg BW )。

6 、溶剂对照物:蒸馏水。

7 、检测仪器: Olympus CH 显微镜、电子天平。

二、实验方法:

采用问隔24小时两次经口灌胃进行试验，选取体重25-30g健康小鼠50只，雌雄各半，各性别小鼠按体重随机分成5组，每组5只，试验设3个剂量组为1.67、 3.33、6.67g/kg BW，相当于人推荐量的25、51、103倍，另设溶剂对照组及阳性对照组，分别称取样品2.5、5.0、10.0g各加蒸馏水至30mL配成3个浓度，各组动物分别按0.02mL/g BW 间隔24h灌胃给予不同浓度的受试物及对照物2次，末次灌冒6小时后脱颈椎处死动物，取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片，经甲醇固定，Giemsa染色。在光学显微镜下观察，每只动物计数1000个嗜多染红细胞，微核发生率以含微核PCE千分率计，按x²检验进行统计分析，同时计数200个PCE ，求出PCE/NCE值。

三、结果:

由表4可见，该样品各剂量组PCE/NCE未少于溶剂对照组的20% ，提示骨髓红细胞系统的增殖并无明显抑制，对嗜多染红细胞微核的观察无明显影响。阳性对照组微核发生率明显高于溶剂对照组，差异有统计学意义(P<0.01) ，而样品各剂量组与溶剂对照组比较差异无统计学意义( p > 0.05 ) ，说明该样品未表现出使小鼠骨髓PCE微核率上升的致突变效应。

四、结论: 该样品小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性。

样品:本发明保健品 检验项目：小鼠精子畸形试验

一、材料:

l 、样品:本发明保健品内容物，成人日推荐量为3.87g，相当于0.0645 g/kg BW (成人体重以60 kg计算)。

2 、动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级健康ICR小鼠，许可证号: SCXK (沪) 2012-002。

选用体重25-30g性成熟雄性小鼠25只，按体重随机分成5组，每组5只，试验设3 个剂量组为1.67、3.33、6.67g/kg BW ，相当于人推荐量的25、51、103倍，另设溶剂对照组及阳性对照组，分别称取样品2.5、5.0、1 0.0g各加蒸馏水至30mL配成3个浓度，各组动物分别按0.02 mL/g BW灌胃给予不同浓度的受试物及对照物，连续5天。于首次灌胃后35天，处死动物，取双侧附睾尾按标准程序制片、染色，显微镜下每只动物观察1000个完整精子，记录各类畸形精子数，计算精子畸变发生率，按x ²检验进行统计分析。

三、结果:

由表5 可见，该样品各剂量组与溶剂对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05) ，阳性对照组与溶剂对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01 )，样品对小鼠精子畸形发生率未产生明显改变，提示该样品对小鼠精子不产生畸变作用。

四、结论：

该样品小鼠精子畸形试验结果为阴性。

检验项目：30天喂养试验

检验依据：《保健食品检验与评价技术规范)) (卫生部2003 )

检验结果及判定意见:

本发明保健品各剂量组给予大鼠喂养30天，试验期间，各组动物生长活动正常，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及试验结束时各剂量组大鼠体重、体重增重、总进食量、总食物利用率、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义(P> 0.05) . 雄性中剂量组谷草转氨酶;雌性高剂量组嗜碱性粒细胞、总胆固醇与对照组相比，差异有统计学意义(P<0 .05) ，但在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义。其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、血糖、总胆固醇、甘油三酯、总蛋白、白蛋白测定值、血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组相比差异均无统计学意义(P> 0.05) . 对受检脏器作组织病理学检查，未见特异性病变。

样品名称: 本发明保健品

l 材料及方法

1.1 样品:本发明保健品内容物，成人日推荐量为3.87g ，相当于0.0645 g/kg BW (成人体重以60kg计)。每次称取样品96.75g加蒸馏水至150mL搅拌均匀，配成高剂量组受试物；高剂量组受试物依次1/2倍比递减稀释作为中、低剂量组受试物。

检验项目: 30天喂养试验

1.2 实验动物:选用上海斯莱克实验动物有限责任公司提供的清洁级SD大鼠80只，雌雄各半，体重66-79g. 许可证号: SCXK (沪) 2012-0002。

1.3饲养环境:福建省疾病预防控制中心SPF 级动物实验室，许可证号: SYXK(闽) 2012-0008。

1.4饲料:购于上海普路腾生物科技有限公司，生产许可证号号:沪饲证(2014)04001。

1.5 仪器:日立7060C全自动生化仪、雅培CELL- DVN3700全自动五分类血液分析仪、S HANDON EXCELSIOR全自动密封脱水机、LEICA EG 门50病理组织包埋机、SHANDONFINESSE325石蜡切片机、C S-IV摊片烤片机、电热鼓风干燥箱、OLYMPUS BX51T-32E 显微镜、LEI CA ST5020全自动染色机、电子天平。

1.6 试验方法:各性别动物按体重随机分成4组，每组各10只。试验按样品人日推荐量的25、50和100倍，设3个剂量组为1.612、3.225、6.450 g/kg BW (以成品计)，另设蒸馏水为溶剂对照组。因样品味苦，各组以经口灌胃方式给予各剂量受试物及对照物，灌冒体积为10 mL/kg BW。试验期间动物单笼喂养，自由进食饮水，每天观察动物形态，记录饲料洒漏量，每周记录一次体重和2次食物摄入量。喂养30天禁食过夜后动物称重，采血作血常规及生化指标测定，取出肝、肾、脾、睾丸称重，并对肝、肾、脾、胃肠、睾丸、卵巢作病理学检查。

1. 7 观察指标:

1.7 .1 动物的一般表现、体重、进食量、食物利用率。

1.7.2 血常规及生化指标:红细胞计数、白细胞计数、白细胞分类、血红蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、总胆固醇、甘油三醋、血糖、总蛋白、白蛋白。

1.7.3 病理解剖:脏体比、大体观察及病理组织学检查(肝、脾、肾、胃肠、睾丸和卵巢)。

1.8 实验数据统计方法:实验数据以SPSS软件进行单因素方差分析.经方差齐性检验，方差齐的实验数据采用LSD法进行统计分析，方差不齐的实验数据采用Tambane法进行统计分析。

2 结果

2.1 一般形态观察:

该样品3个剂量组的大鼠毛质白、有光泽，外观形态与对照组比较无区别，也无死亡现象。

2.2 动物体重增长与食物利用率:

由表6、7、8可见，试验期间，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及实验结束时体重、体重增重、总进食量、总食物利用率与对照组比较，差异均无统计学意义( p > 0.05)。

2.3血常规检查结果

由表9可见，雌性高剂量组嗜碱性粒细胞与对照组相比，差异有统计学意义(p < 0.05)，但在本实验室历史对照正常值范围内，本实验室认为无生物学意义.其余各剂量组的血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组比较，差异均无统计学意义(p>0.05 )。

2 .4血清生化检验结果

由表10可见，雄性中剂量组谷草转氨酶；雌性高剂量组总胆固醇与对照组比较，差异有统计学意义(p< O.05 )，但在本实验室历史对照正常值范围内，本实验室认为无生物学意义，其他各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、血糖、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯与对照组比较，差异均无统计学意义( p> 0.05 )。

2.5对大鼠脏体比的影响:

由表11可见，各剂量组大鼠禁食后体重、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义(p>0.05 )。

2.6病理组织学检查:

2.6.1 各剂量组动物大体检查未发现明显病变，且生化指标未见异常，因此仅选对照组及高剂量组作组织病理学检查.

2.6.2 结果描述:

肝:正常肝小叶结构存在，肝细胞无明显肿胀及颗粒变性，少数肝细胞胞浆内出现少许细小的脂肪空泡，呈轻度脂肪变，这种脂变肝细胞呈散在小灶分布，范围小.肝细胞无坏死改变.少数肝小叶、肝汇管区见淋巴细胞等炎细胞浸润，无纤维组织增生，胆管未见异常冒和十二指肠:粘膜完整，无明显出血、坏死、糜烂、溃疡及炎细胞浸润，无明显腺体增生萎缩改变.肾:肾皮髓质结构清楚，肾小管上皮无明显肿胀及空泡变性，个别肾间质中有灶性炎细胞浸润，个别肾小管内可见管型。脾:脾白髓、红髓结构清楚，白髓、红髓无明显扩张或萎缩现象。睾丸:曲细精管正常，可见各级生精细胞及成熟精子。卵巢:发育正常，可见各级卵泡和成熟黄体。总之，以上病理学改变仅在个别动物中发生，各组标本病理变化无明显差异，因此认为被检脏器未见与受试物有关的病理学改变(各组标本病理变化详见表12)

表12-1 大鼠肝脏病理检测结果

表12-2 大鼠胃病理检测的结果

表12-3 大鼠肠病理检测的结果

表12-4 大鼠肾脏病理检测的结果

表12-5 大鼠脾脏病理检测的结果

表12-6 大鼠宰丸病理检测的结果

表12-7 大鼠卵巢病理检测的结果

3、小结：

本发明保健品各剂量组给予大鼠喂养30天，试验期间，各组动物生长活动正常，各剂量组大鼠各周体重、进食量、食物利用率及试验结束时各剂量组大鼠体重、体重增重、总进食量、总食物利用率、脏体比与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05).雄性中剂量组谷草转氨酶;雌性高剂量组嗜碱性粒细胞、总胆固醇与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05 )，但在本实验室正常值范围内，本实验室认为无生物学意义.其余各剂量组大鼠的血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐、血糖、总胆固醇、甘油三酯、总蛋白、白蛋白测定值、血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类与对照组相比差异均无统计学意义( P>0.05 )。对受检脏器作组织病理学检查，未见特异性病变。

检验项目：提高缺氧耐受力功能试验

检验依据：《保健食品检验与评价技术规范)) (卫生部2003 )

检验结果及判定意见:

经口灌胃给予小鼠不同剂量的本发明保健品30天后，结果能延长注射亚硝酸钠后小鼠的存活时间；延长急性脑缺血性缺氧条件下小鼠的喘气时间，且对小鼠体重增长无影响。提示该样品具有提高缺氧耐受力功能作用。

样品名称: 本发明保健品检验项目: 提高缺氧耐受力功能试验

l 、材料与方法:

1.1 样品:本发明保健品内容物，每次称取7.74g 样品，加蒸馏水至80 mL 搅拌均匀，配成高剂量组受试物；量取20 mL 高剂量组受试物加蒸馏水至60 mL搅拌均匀，配成中剂量组受试物；量取20 mL中剂量组受试物加蒸馏水至40mL 搅拌均匀，配成低剂量组受试物。

1.2 实验动物及饲料:均购于上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号:SCXK (沪) 2012-0002，所购动物为清洁级ICR 健康雄性小鼠120只，许可证号: SCXK(沪)2012-0002，体重18 - 22g，本实验将动物分为3 组( 1 组进行常压耐缺氧实验、2 组进行亚硝酸钠中毒存活实验、3 组进行急性脑缺血性缺氧实验) ，每个实验组将40 只小鼠按体重随机分成4个小组，每组1 0只动物。1.3饲养环境：福建省疾控中心SPF 级动物实验室，许可证号: SYXK (闽) 2012-0008。

1.4剂量选择:该样品成人目推荐量为3.87 g，即相当于0.0645 g/kg BW (成人体重以60 kg 计)，按推荐用量的5倍、10倍、30倍设3个剂量组: 0.322 g/kg B W、0.645 g/kgBW和1. 935 g/kg BW，另设蒸馏水为溶剂对照组。

1. 5 给药途径:各组动物每日称重，并按2.0 m L/100g 体重经口灌胃给予不同浓度的受试物及蒸馏水，连续30天。

1.6 仪器与试剂:秒表、250mL 磨口瓶，一次性针筒、纱布、氢氧化纳、碳酸钙、凡士林、亚硝酸纳。

1.7 实验数据统计方法:实验数据以SPSS 软件进行单因素方差分析。经方差齐性检验，方差齐的实验数据采用LSD 法进行统计分析，对方差不齐或非正态的实验数据先进行变量转换再进行统计。

1.8 实验方法:

1.8.1 常压耐缺氧试验:各剂量组小鼠连续30 天给予不同浓度受试物，对照纽给予同等容量溶剂，于末次灌胃后l 小时，将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250mL 磨口瓶内，每瓶l 只，用凡士林封口，盖严使之不漏气，立即记时，并观察存活情况，以呼吸停止为指标，记录小鼠因缺氧致死的时间。

1.8.2 亚硝酸钠中毒存活试验：各剂量组小鼠连续30天给予不同浓度受试物，对照组给予同等容量溶剂，于末次灌胃后l小时，各组小鼠按0.lm L/ 10g BW 腹腔注射220mg/kg BW 的亚硝酸纳，注射后立即记时，记录小鼠存活时间。

1.8.3 急性脑缺血性缺氧试验:各剂量组小鼠连续30天给予不同浓度受试物，对照组给予同等容量溶剂，于末次灌胃后l 小时，各组小鼠自颈部逐只断头，立即按秒表记录每只小鼠断头后至张口喘气停止时间。

2. 结果:

2.1 常压缺氧条件下的小鼠存活时间:

由表l3可见，该样品各剂量组小鼠在常压缺氧条件下的存活时间，与对照组比较差异均无统计学意义( p >0.05 )。

2. 2 注射亚硝酸纳后的小鼠存活时间:

由表14可见，该样品可延长中、高剂量组小鼠注射亚硝酸纳后的存活时间，与对照组比较差异均有统计学意义( p < 0.05 ).

2.3急性脑缺血性缺氧的小鼠断头喘气时间:

由表15可见，该样品可延长中、高剂量组小鼠在急性脑缺血性缺氧条件下的喘气时间，与对照组比较差异有统计学意义( p < 0.05 )。

2.4该样品对小鼠体重的影响:

该样品各组小鼠的初始体重经方差分析差异均无统计学意义(p> 0.05)，即小鼠的初始体重在各组问较为均衡；实验结束时，各组小鼠的末重经统计，差异均无统计学意义(p>0.05 ) ，即该样品对小鼠的体重增长无影响。

3. 结论:

经口灌胃给予小鼠不同剂量的本发明保健品30天后，结果能延长注射亚硝酸钠后小鼠的存活时间；延长急性脑缺血性缺氧条件下小鼠的喘气时间，且对小鼠体重增长无影响。提示该样品是有提高缺氧耐受力功能作用。

本品以现代生产工艺进行加工，符合市场的需要，能更好的服务于广大消费者。同时，本品的开发可为企业和国家带来较好经济效益，解决劳动就业问题，上市后，本品可通过不断创新的营销手段，不断地挖掘和细分市场，从而带来较好的经济效益和社会效益。

本发明保健品所采用的工艺研究如下：

一、工艺路线设计

按药物的特性，将工艺路线定为：提取→浓缩→干燥→粉碎→混合→制粒→整粒→总混，有较强的可操作性。

二、工艺参数的优选

1红景天提取溶剂优选

试验设计：

采用单因素试验法，以红景天苷含量为考察指标，对水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇5种溶剂进行考察。

试验方法：

取红景天饮片，称取30g，分别加入8倍量不同溶剂，回流提取两次，每次1.5小时，提取液合并，滤过，放冷至室温，用相应溶剂定容至500mL量瓶中，摇匀，备用。

红景天苷含量测定（方法来源：参考《中华人民共和国药典》2010年版一部红景天项下红景天苷的测定）

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇—水（15：85）为流动相，流速1.0mL/min；检测波长为275nm。

对照品溶液的制备：取红景天苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL约含0.9mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取提取液10mL，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法：分别精密吸取供试品溶液5μL和对照品溶液2μL,注入HPLC色谱仪，测定，即得。

试验结果：见表16。

结果表明，红景天苷在乙醇中含量明显高于水，以60%乙醇提取的含量最高。

2、乙醇提取工艺优选

为了将饮片提取充分，同时省工节能，降低生产成本，采用正交试验法对乙醇提取工艺参数进行优选。

（1）正交试验设计：

选取提取次数(A)、提取时间(B)、加溶剂量(C)为考察因素，(D)设为空白，以红景天苷、总黄酮含量和出膏率为指标，按L9(34)正交设计表进行试验。因素水平见表17：

试验方法：

称取红景天20g、葛根50g，按照L9(34)正交试验设计表，加60％乙醇回流提取，滤过，提取液合并，适当浓缩，转移至1000mL量瓶中，放冷至室温，加60％乙醇稀释至刻度，摇匀，备用。

红景天苷含量测定（方法来源：参考《中华人民共和国药典》2010年版一部红景天项下红景天苷的测定）

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以水为流动相B，按表18中的规定进行梯度洗脱；流速1.0mL/min；检测波长275nm。

对照品溶液制备：取红景天苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL约含0.2mg的溶液，即得。

供试品溶液制备：精密量取提取液20mL，置蒸发皿中蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。

测定法：精密吸取供试品溶液和对照品溶液各5μL，注入HPLC色谱仪，测定，即得。

总黄酮含量测定（方法来源：参考《保健食品检验与评价技术规范》2003年版保健食品中总黄酮的测定）

芦丁标准溶液的制备：取芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL约含50μg的溶液，即得。

芦丁标准曲线的制备：吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，于波长360nm测定吸收值，求回归方程。

供试品溶液的制备：精密吸取提取液1mL，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉（100~200目）吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转入层析柱，先用20mL甲苯洗，甲苯液弃去，然后用25mL甲醇洗脱黄酮，定容至25mL。

测定法：照《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）保健食品中总黄酮的测定方法，于波长360nm测定吸收值，代入回归方程，计算试样中总黄酮含量。

出膏率测定

精密吸取提取液各100mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥5小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算，即得。试验结果：见表19。

结果分析：

直观分析表明，各因素对红景天苷含量的影响大小依次为：提取次数>提取时间>加溶剂量，最佳工艺为A₃B₃C₃；对总黄酮含量的影响大小依次为：提取次数>提取时间>加溶剂量，最佳工艺为A₃B₃C₃；对出膏率的影响大小依次为：提取次数>提取时间>加溶剂量。

方差分析（结果见表20、表21、表22）表明，提取次数的差异对三个指标均具有统计学意义，其中红景天苷（P<0.05）、总黄酮（P<0.05）、出膏率（P<0.05），其他因素的差异均无统计学意义。

从提取次数分析，由于A因素提取次数对所考查的指标均有统计学意义，因此提取次数选择三次。从提取时间分析，B因素提取时间对所考查的指标均无统计学意义，因此提取时间第一次选择2小时，第二次、第三次选择1.5小时。从加溶剂量分析，C因素加溶剂量对所考查的指标均无统计学意义，考虑到乙醇成本较高，确定加溶剂量为第一次10倍量，第二次、第三次8倍量。故经优选后的工艺定为A₃B_(3,2,2)C_(3,2,2)，即加60%乙醇回流提取三次，第一次2小时，加10倍量，第二次、第三次1.5小时，加8倍量。由于在A因素中，以红景天苷、总黄酮、出膏率为考察指标时，Ⅲ水平含量比Ⅱ水平含量增幅大于10%以上，因此拟在优选工艺提取完成后，再提取第4次，加8倍量60%乙醇，提取1.5小时，单独收集，考察红景天苷、总黄酮和出膏率含量变化。

（2）乙醇提取工艺的验证实验：

称取红景天20g、葛根50g，分别按最佳工艺A3B3C3的组合条件和选定工艺的A₃B_(3,2，2)C_(3,2，2)组合条件进行重复验证对比实验；优选工艺提取后的药渣再加8倍量60%乙醇，提取1.5小时，单独收集，适当浓缩后定容至500mL，分别测定红景天苷、总黄酮和出膏率含量。测定结果见表23：

以上结果显示，第四次提取液中红景天苷含量仅占4次总提取量的1.2%，总黄酮含量仅占4次总提取量的2.2%，增幅均较小，而第四次提取液出膏率占4次总出膏率的4.0%，增幅稍大，可能杂质较多。由于指标成分增幅较小，为减少服用量、节省时间、节约能源，因此选择提取三次。经对优选工艺与最佳工艺进行重复对比试验，优选工艺指标成分与最佳工艺相差较小，并且优选工艺省工节能，因此确定提取工艺为优选工艺A3B_(3,2,2)C_(3,2,2)，即加60%乙醇回流提取三次，第一次2小时，加10倍量，第二次、第三次1.5小时，加8倍量。

3、成型工艺研究

（1）干燥方式的选择

常用的中药浸膏干燥方式主要有真空烘箱干燥、喷雾干燥和真空带式干燥。但对于大部分具有热敏性和易结团、高粘度的中药浸膏，真空烘箱干燥和喷雾干燥仍然存在一定的缺陷和局限性。真空烘箱干燥时间长、能耗高、间歇操作容易染菌和吸潮，达不到GMP质量标准。喷雾干燥用于中药浸膏干燥的最大难题是出现粘壁和干燥产品易吸潮现象，难以处理高浓度、高黏性的中药浸膏，而且粘壁造成物料流失严重。喷雾干燥的另一缺陷是热敏性物料在喷雾干燥时存在氧化问题。真空带式干燥在真空条件下，液态物料较薄地涂布在传送带上，由于加热器的加热，使物料内水分蒸发而得到多孔的高品质干燥制品。真空带式干燥的优点是：料层薄、干燥快、物料受热时间短；物料松脆，容易粉碎；隔离操作，避免污染；动态操作，不易结垢；流水作业，自动控制，整个干燥过程完全封闭，不与外界环境接触，符合GMP的要求。真空带式干燥技术特别适用于热敏性和粘性浸膏，它的连续化和自动化代替手工操作，更符合提高产品的质量要求，因此本产品采用真空带式干燥技术。

（2）真空带式干燥温度的确定

按处方配比称取药材，按选定工艺提取、浓缩，浓缩液分为三等份，分别考察110℃、115℃、120℃真空带式干燥温度对总黄酮和红景天苷含量的影响，结果见表24。

以上结果表明，温度对总黄酮和红景天苷含量影响不大，但考虑到生产上实际真空带式干燥设备温度受蒸汽大小及浸膏相对密度影响较大，故将干燥温度选定为110℃-120℃。

（3）真空带式干燥时浸膏相对密度的确定

真空带式干燥是在真空条件下，液态物料经软管流向喷嘴，将物料较薄地涂布在传送带上，由于加热器的加热，使物料内水分蒸发而得到多孔的高品质干燥制品。由真空带式干燥的原理可以看出，药液相对密度太小，容易从传送带上流出，药液相对密度太大，容易造成输液管道堵塞，因此实际生产上一般真空带式干燥时要求药液的相对密度在1.20-1.30（60℃）之间，根据考察真空带式干燥温度时的情况，本产品浓缩时相对密度可以达到1.20-1.30（60℃），因此暂定本品真空带式干燥时相对密度为1.20-1.30（60℃）。后经中试生产验证，相对密度范围可行。

（4）制粒方式的选择

常用的制粒方式有湿法制粒和干法制粒，湿法制粒工序复杂，物料加入黏合剂制粒后需要再次烘干，生产周期长。干法制粒是采用螺杆进料机将干粉状物料经压轮挤压成薄片，然后再粉碎成适当大小的干颗粒的制粒方法，与传统制粒工艺相比，干法制粒过程中不需加黏合剂，省略了混合制软材、干燥等过程，缩短了工艺路线和生产周期，节约了成本，符合国家极力倡导的节能环保产业政策。

因此本产品采用干法制粒技术。

（5）干法制粒工艺参数的确定

将真空带式干燥所得干膏粉碎（过80目筛网），加入适量淀粉，混合均匀，考察干法制粒压轮间距工艺参数，结果见下表25。

上表试验结果表明，压轮间距控制在0.0-0.1mm时制粒效果好。

（6）颗粒的流动性测定

用固定漏斗法测定整粒（过1.5mm的锥形筛网）后颗粒的休止角为36^○，具有较好的流动性。

4、根据实验室研究的生产工艺进行中试放大，对拟定的生产工艺进行工艺验证和偏差纠正。

对确定的配方、工艺进行了三批中试生产，中试数据见下表26：

注：*从第一批颗粒中取出6.9kg做动物实验用，其余充填胶囊。

中试数据结果显示，各环节的参数及成品得率稳定，质量合格，表明确定的工艺可用于生产。三批样品自检报告附后。

随着经济的发展，国民收入的增加，生活水平的提高，人们的消费观念、健康观念发生了较大变化，人们对氧的重要性和缺氧的认识进一步增强，为提高缺氧耐受力保健食品提供了广阔的发展空间。

社会上需要提高缺氧耐受力的人群较多，如患呼吸系统疾病、心脑血管疾病的病理性缺氧人员，中老年的生理性缺氧人员，处于紧张的体力和脑力活动的运动性缺氧人员，航空航天、高原勘探、高空作业、井下作业、高原旅游等处于环境性缺氧的人员等。社会需求者多，需求量大，则产品投放市场后的发展前景良好。

中国作为一个拥有13亿人口的大国，随着社会工业程度的发展，生活节奏的加快，都使得我国在人口与健康领域面临着巨大的挑战，许多人员处于不同程度的缺氧状态，要提高全民的健康程度并实现可持续发展任重而道远。

本品以现代生产工艺进行加工，符合市场的需要，能更好的服务于广大消费者。同时，本品的开发可为企业和国家带来较好经济效益，解决劳动就业问题，上市后，本品可通过不断创新的营销手段，不断地挖掘和细分市场，从而带来较好的经济效益和社会效益。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详细描述，以助于理解本发明的内容。

实施例1

原辅料配比为：

红景天330g 、葛根825g

制备方法：

a、按配方量称取红景天、葛根，加60%乙醇回流提取3次，第一次加10倍量的60%乙醇回流提取2小时；第二次、第三次加8倍量60%乙醇回流提取1.5小时，收集提取液，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为60℃热测，相对密度为1.2的稠膏；真空带式干燥，干燥温度为110℃，得到干膏，干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉备用；

b、辅料玉米淀粉与步骤a所得的干膏粉，混合机混合15分钟混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，整粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。

实施例2

原辅料配比为：红景天150g 、葛根950g

制备方法：

a、按配方量称取红景天、葛根，加60%乙醇回流提取3次，第一次加10倍量的60%乙醇回流提取2小时；第二次、第三次加8倍量60%乙醇回流提取1.5小时，收集提取液，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为60℃热测，相对密度为1.3的稠膏；真空带式干燥，干燥温度为120℃，得到干膏，干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉备用；

b、辅料红薯淀粉与步骤a所得的干膏粉，混合机混合15分钟混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，整粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒压片、包装、检验即得。

实施例3

原辅料配比为：红景天450g 、葛根650g

制备方法：

a、按配方量称取红景天、葛根，加60%乙醇回流提取3次，第一次加10倍量的60%乙醇回流提取2小时；第二次、第三次加8倍量60%乙醇回流提取1.5小时，收集提取液，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为60℃热测，相对密度为1.2的稠膏；真空带式干燥，干燥温度为120℃，得到干膏，干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉备用；

b、辅料玉米淀粉与步骤a所得的干膏粉，混合机混合15分钟混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，整粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒包装、检验即得。

实施例4

原辅料配比为：红景天200g 、葛根700g

按常规方法制成丸剂即可。

实施例5

原辅料配比为：红景天300g 、葛根800g

按常规方法制成膏剂即可。

Claims (10)

1.一种含有红景天的提高缺氧耐受力的保健品，其特征在于所述保健品各主料的重量份如下：红景天150-450、 葛根650-950。

2.根据权利要求1所述的保健品，其特征在于所述保健品各主料的重量份如下：红景天150、 葛根950。

3.根据权利要求1所述的保健品，其特征在于所述保健品各主料的重量份如下：红景天、450、 葛根650。

4.根据权利要求1所述的保健品，其特征在于所述保健品各主料的重量份如下：红景天330 、葛根825。

5.根据权利要求1-4任一所述的保健品，其特征在于该保健品还包含辅料，辅料为玉米淀粉或红薯淀粉。

6.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于辅料的重量份为100-200。

7.根据权利要求6所述的保健品，其特征在于辅料的重量份为130。

8.如权利要求5所述的保健品，其特征在于所述保健品的制剂剂型为胶囊剂、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂或膏剂。

9.根据权利要求8所述的保健品，其特征在于所述胶囊剂的制备方法包括以下步骤：

a、按配方量称取红景天、葛根，加乙醇回流提取3次，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为稠膏；真空干燥，得到干膏，粉碎后得干膏粉备用；

b、辅料玉米淀粉与步骤a所得的干膏粉混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。

10.根据权利要求9所述的保健品，其特征在于所述胶囊剂的制备方法包括以下步骤：

a、按配方量称取红景天、葛根，加60%乙醇回流提取3次，第一次加10倍量的60%乙醇回流提取2小时；第二次、第三次加8倍量60%乙醇回流提取1.5小时，收集提取液，过滤，醇提液回收乙醇后，减压浓缩为60℃热测，相对密度为1.2-1.3的稠膏；真空带式干燥，干燥温度为110℃-120℃，得到干膏，干膏粉碎，过80目筛，得干膏粉备用；

b、辅料红薯淀粉与步骤a所得的干膏粉，混合机混合15分钟混合均匀，混合粉备用；

c、将步骤b所得的混合粉干法制粒，整粒，得颗粒备用；

d、将步骤c所得的颗粒充填胶囊、包装、检验即得。