CN108125021A - 一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂及其的制备方法,属于饲料添加剂领域。所述发酵饲料添加剂的原料包括:白术、茯苓、山药、党参和枯草芽孢杆菌M20‑TL,白术、茯苓、山药、党参和粉末状的枯草芽孢杆菌M20‑TL的重量份分别为:20~30份、30~40份、5~15份、25~35份和0.2~3份,枯草芽孢杆菌M20‑TL在2017年6月28日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2017388。该发酵饲料添加剂的制备方法包括:将原料混合后进行发酵,发酵的时间为24h~36h,发酵时原料的温度为32℃~34℃;烘干发酵后的发酵饲料添加剂并进行粉碎。该发酵饲料添加剂能够替代抗生素预防动物腹泻并促进动物生长。同时,该方法制备出的发酵饲料添加剂具有良好的预防动物腹泻并促进动物生长的效果。
Description
技术领域
本发明涉及饲料添加剂领域,特别涉及一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
养殖业生产中广泛使用抗生素,抗生素作为动物饲料添加剂,用于预防动物腹泻并促进动物生长,长期使用可以达到预防动物疾病,促进动物生长的作用。
然而,随着抗生素的广泛使用,抗生素残留、耐药菌株增强和动物食品安全等一系列问题越来越受到人们的重视,无抗生素养殖越来越受关注。欧盟自2006年起已经全面禁止了抗生素在动物饲料中的添加使用。因此,亟待研究出可以完全替代抗生素的安全饲料添加剂。现有一种菌株与中药一同发酵后得到抗生素的替代物。
在实现本发明的过程中,发明人发现现有技术至少存在以下问题:
现有的菌株在替代抗生素时,动物的日采食量少,且腹泻率较高,腹泻率可达到1.05%以上,高腹泻率和低食量不利于动物的生长。
发明内容
为了解决现有技术中抗生素的替代物效果不佳的问题,本发明实施例提供了一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂及其制备方法。所述技术方案如下:
一方面,本发明实施例提供了一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂,所述发酵饲料添加剂的原料包括:白术、茯苓、山药、党参和枯草芽孢杆菌M20-TL,白术、茯苓、山药、党参和粉末状的枯草芽孢杆菌M20-TL的重量份分别为: 20~30份、30~40份、5~15份、25~35份和0.2~3份,所述枯草芽孢杆菌M20-TL 在2017年6月28日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国、武汉、武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2017388。
具体地,白术、茯苓、山药、党参和粉末状的所述枯草芽孢杆菌M20-TL 的重量份分别为:25份、35份、10份、30份和1.5份。
另一方面,本发明实施例提供了一种制备控制腹泻率的发酵饲料添加剂的方法,所述方法包括:
将所述发酵饲料添加剂的原料混合后进行原料发酵,所述原料发酵的时间为24h~36h,所述原料发酵的温度为32℃~34℃;烘干并进行粉碎,得到所述发酵饲料添加剂。
具体地,所述方法还包括:将所述枯草芽孢杆菌M20-TL的原始菌株活化后,进行发酵培养,得到发酵液,提纯所述发酵液,得到所述枯草芽孢杆菌 M20-TL。
具体地,提纯所述发酵液包括:将所述发酵液进行离心,所述离心的转速为6000~7000r/min(例如6700r/min),所述离心时的压力为0.04±0.005MPa(例如0.04MPa),得到滤液,将所述滤液进行喷雾干燥。
具体地,在第一发酵罐中发酵活化后的所述枯草芽孢杆菌M20-TL的原始菌株,且发酵时所述第一发酵罐内的压力为0.05±0.005MPa(例如0.05MPa)。
具体地,所述发酵的培养基包括:大米粉、豆粕、面粉、酵母粉、MgSO4、 KCl、NaCl、CaCO3和消泡剂,所述大米粉、所述豆粕、所述面粉、所述酵母粉、所述MgSO4、所述KCl、所述NaCl、所述CaCO3和所述消泡剂的重量份分别 1.0~1.5份、1.0~2.0份、2~4份、0.6~09份、0.15~0.45份、0.1~0.2份、0.15~0.35 份、0.25~0.45份和0.010~0.020份(例如重量份分别1.3份、1.5份、3份、0.8 份、0.35份、0.1份、0.25份、0.35份和0.015份)。
具体地,所述发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%。
具体地,将所述白术、所述茯苓、所述山药和所述党参加入盛有水的第二发酵罐内浸泡,向所述第二发酵罐内通入蒸汽蒸煮30~40min(例如30min)并冷却后,向所述第二发酵罐内加入含有所述枯草芽孢杆菌M20-TL用50倍的水溶液进行原料发酵。
具体地,采用蒸汽进行烘干,且烘干温度为70℃~80℃。
本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是:该控制腹泻率的发酵饲料添加剂包括白术、茯苓、山药、党参和保藏编号为CCTCC NO:M 2017388的枯草芽孢杆菌M20-TL,该发酵饲料添加剂能够降低饲喂动物的腹泻率,同时能够保证饲喂本发明实施例提供的饲喂发酵饲料添加剂的动物的体重相比于饲喂基础日粮的动物体重明显增加,并与饲喂抗生素的动物的增加体重相当,可见,本发明实施例提供的发酵饲料添加剂能够替代抗生素预防动物腹泻并促进动物生长。同时,该方法制备出的发酵饲料添加剂具有良好的预防动物腹泻并促进动物生长的效果。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施方式作进一步地详细描述。
本发明实施例提供的枯草芽孢杆菌M20-TL(Bacillus subtilis M20-TL)在 2017年6月28日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国、武汉、武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2017388。
白术、茯苓、山药和党参均购买于滁州市南谯区洛稷中药材种植专业合作社。
实施例一
本发明实施例提供了一种发酵饲料添加剂,该发酵饲料添加剂包括:枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参,其中,粉末状的枯草芽孢杆菌 M20-TL、白术、茯苓、山药和党参的重量份分别为:1.5份、25份、35份、10 份和30份。
1、粉末状的枯草芽孢杆菌M20-TL的制备方法包括:
配置斜面培养基:该斜面培养基包括:5g蛋白胨、5g牛肉膏、30g琼脂粉和1000ml水,且配置时所用的水为当地自来水煮沸15min,配置好的斜面培养基分装于容量为50ml的茄子瓶中。放置过夜备用,培养基用琼脂条,需用水洗干净。
培养基灭菌:将装有斜面培养基的茄瓶置于121℃~122℃的高压蒸汽灭菌锅中,灭菌30min后,待其温度降至70℃~80℃,将茄瓶中的斜面培养基摆放成斜面。
菌种制备:在无菌条件下,用无菌刮铲将少许沙土管中的枯草芽孢杆菌M20-TL的孢子(原始菌株)均匀涂布在第一斜面培养基上进行活化,尽量涂布均匀,倒出茄子瓶内的冷凝水,并于34℃培养3天~4天待第一斜面培养基上长出丰富的白色孢子后,用刮铲挑取一铲孢子,均匀涂布在待接的第二斜面培养基上,于34℃培养3天~4天,待长出丰富的白色孢子后,将第二斜面培养基上长出的白色孢子制备成孢子悬液并通过火焰接种到第一发酵罐中。
准备原料:向第一发酵罐内加入发酵培养基,补足水量,添加各种微量元素,调pH值为7.2~7.5。
发酵罐灭菌:保持在122℃~124℃灭菌30min。降低第一发酵罐的压力,当第一发酵罐的压力降至0.05MPa,向第一发酵罐内通入空气,使第一发酵罐的压力维持在0.05MPa。待第一发酵罐的温度降至40℃左右开始接种。
液体发酵:将准备好的孢子悬液,通过火焰接种到第一发酵罐内。发酵培养的培养基包括:大米粉、豆粕、面粉、酵母粉、MgSO4、KCl、NaCl、CaCO3和消泡剂,大米粉、豆粕、面粉、酵母粉、MgSO4、KCl、NaCl、CaCO3和消泡剂的重量份分别1.3份、1.5份、3份、0.8份、0.35份、0.1份、0.25份、0.35 份和0.015份,加水后补足至100重量份。向第一发酵罐内通入空气,使第一发酵罐的压力为0.05MPa。同时搅拌第一发酵罐内的孢子进行发酵,发酵时间为 16h,得到发酵液。
离心:将发酵液进行离心,离心机转数6700r/min。离心后可进一步通过振动筛除渣,得到滤液。
喷雾干燥:把喷雾塔压力调到-150pa左右,对滤液开始喷雾。喷雾时进风温度230℃左右,出风温度80℃左右,得到粉末状的枯草芽孢杆菌M20-TL。喷雾完成后,用自来水冲洗打料管道10min以上。
发酵完毕后,用大量自来水清洗第一发酵罐,然后用浓度为3%的氢氧化钠清洗1次,再用3倍量的自来水清洗,直至末端水pH值为7.0,最后用0.1MPa 灭菌30min。发酵完毕后,用大量自来水清洗,然后用3%的氢氧化钠清洗1次,再用3倍量的自来水清洗,直至末端水pH值为7.0,最后再烘干。从而防止设备交叉污染。
2、将白术、茯苓、山药和党参加入第二发酵罐内,向第二发酵罐内加入冷水浸泡药材,搅拌均匀后静置60min,通蒸汽蒸煮30min后冷却备用。
将重量份为1.5份的粉末状的枯草芽孢杆菌M20-TL喷雾粉用50倍的水溶解得到水溶液后,将水溶液按照1:10的体积比加入第二发酵罐中与药材混合均匀并进行原料发酵,原料发酵的时间为24h~36h,原料发酵的环境温度可以控制在25℃~29℃之间,使发酵时原料的温度维持在32℃~34℃之间,在发酵过程中,不断翻动原料,避免其中的枯草芽孢杆菌M20-TL长出菌丝。在本实施例中,第一发酵罐和第二发酵罐可以为同一发酵罐,在其它实施例中,第一发酵罐和第二发酵罐也可以为不同的发酵罐。
3、采用流化床利用蒸汽烘干发酵饲料添加剂,烘干温度为70℃,烘干时间 6h~9h,使得烘干后的发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%之间。
将烘干后的发酵饲料添加剂投至粉碎机中进行粉碎至80目,得到该发酵饲料添加剂。
实施例二
本发明实施例提供了一种发酵饲料添加剂,该发酵饲料添加剂包括:枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参,其中,枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参的重量份分别为:1份、30份、30份、7份和33份。
将白术、茯苓、山药和党参分别加入第二发酵罐内,向第二发酵罐内加入冷水浸泡药材,搅拌均匀后静置60min,通蒸汽进行蒸煮,30min后冷却备用。
将重量份为3份的枯草芽孢杆菌M20-TL(枯草芽孢杆菌M20-TL采用实施例一中提供的方法制备得到的)用50倍的水溶解得到水溶液后,将水溶液按照 1:10的体积比加入第二发酵罐中与药材混合均匀并进行原料发酵,原料发酵的时间为24h~36h,原料发酵的环境温度可以控制在25℃~29℃之间,使发酵时原料的温度维持在32℃~34℃之间,在发酵过程中,不断翻动原料,避免其中的枯草芽孢杆菌M20-TL长出菌丝。
采用流化床利用蒸汽烘干发酵饲料添加剂,烘干温度为80℃,烘干时间 6h~9h,使得烘干后的发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%之间。
将烘干后的发酵饲料添加剂投至粉碎机中进行粉碎至80目,得到该发酵饲料添加剂。
实施例三
本发明实施例提供了一种发酵饲料添加剂,该发酵饲料添加剂包括:枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参,其中,枯草芽孢杆菌M20-TL(喷雾粉的重量)、白术、茯苓、山药和党参的重量份分别为:1份、20份、37份、 15份和28份。
将白术、茯苓、山药和党参分别加入第二发酵罐内,向第二发酵罐内加入冷水浸泡药材,搅拌均匀后静置60min,通蒸汽进行蒸煮,30min后冷却备用。
将重量份为1份的枯草芽孢杆菌M20-TL(枯草芽孢杆菌M20-TL采用实施例一中提供的方法制备得到的)用50倍的水溶解得到水溶液后,将水溶液按照 1:10的比例加入第二发酵罐中与药材混合均匀并进行原料发酵,原料发酵的时间为24h~36h,原料发酵的环境温度可以控制在25℃~29℃之间,使发酵时原料的温度维持在32℃~34℃之间,在发酵过程中,不断翻动原料,避免其中的枯草芽孢杆菌M20-TL长出菌丝。
采用流化床利用蒸汽烘干发酵饲料添加剂,烘干温度为80℃,烘干时间 6h~9h,烘干后的发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%之间。
将烘干后的发酵饲料添加剂投至粉碎机中进行粉碎至80目,得到该发酵饲料添加剂。
实施例四
本发明实施例提供了一种发酵饲料添加剂,该发酵饲料添加剂包括:枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参,其中,枯草芽孢杆菌M20-TL(枯草芽孢杆菌M20-TL采用实施例一中提供的方法制备得到的)、白术、茯苓、山药和党参的重量份分别为:1.5份、25份、30份、5份和35份。
将白术、茯苓、山药和党参分别加入第二发酵罐内,向第二发酵罐内加入冷水浸泡药材,搅拌均匀后静置60min,通蒸汽进行蒸煮,30min后冷却备用。
将重量份为0.2份的枯草芽孢杆菌M20-TL的喷雾粉用50倍的水溶解得到水溶液后,将水溶液按照1:10的体积比加入第二发酵罐中与药材混合均匀并进行原料发酵,原料发酵的时间为24h~36h,原料发酵的环境温度可以控制在25℃~29℃之间,使发酵时原料的温度维持在32℃~34℃之间,在发酵过程中,不断翻动原料,避免其中的枯草芽孢杆菌M20-TL长出菌丝。
采用流化床利用蒸汽烘干发酵饲料添加剂,烘干温度为80℃,烘干时间 6h~9h,使得烘干后的发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%之间。
将烘干后的发酵饲料添加剂投至粉碎机中进行粉碎至80目,得到该发酵饲料添加剂。
实施例五
本发明实施例提供了一种发酵饲料添加剂,该发酵饲料添加剂包括:枯草芽孢杆菌M20-TL、白术、茯苓、山药和党参,其中,枯草芽孢杆菌M20-TL(喷雾粉的重量)、白术、茯苓、山药和党参的重量份分别为:2份、10份、40份、 15份和35份。
将白术、茯苓、山药和党参分别加入第二发酵罐内,向第二发酵罐内加入冷水浸泡药材,搅拌均匀后静置60min,通蒸汽进行蒸煮,30min后冷却备用。
将重量份为2份的枯草芽孢杆菌M20-TL的喷雾粉用50倍的水溶解得到水溶液后,将水溶液按照1:10的比例加入第二发酵罐中与药材混合均匀并进行原料发酵,发酵的时间为24h~36h,原料发酵的环境温度可以控制在25℃~29℃之间,使发酵时原料的温度维持在32℃~34℃之间,在发酵过程中,不断翻动原料,避免其中的枯草芽孢杆菌M20-TL长出菌丝。
采用流化床利用蒸汽烘干发酵饲料添加剂,烘干温度为80℃,烘干时间 6h~9h,使得烘干后的发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%之间。
将烘干后的发酵饲料添加剂投至粉碎机中进行粉碎至80目,得到该发酵饲料添加剂。
将实施例一至五得到的发酵饲料添加剂,各称取22.5g加入90ml灭菌水,摇匀,并静置1小时,取上清液于8000r/min离心5分钟,将滤液通过0.45μm 滤膜过滤,得到样品。
2.5抑菌试验
取100μl指示菌菌悬液,指示菌菌悬液可以为大肠杆菌O157、O139、K88 和K99分别滴于LB(Luria-Bertani)平板培养基(配合玻璃平皿盖使用)上,并用涂布棒涂布均匀,直至无可见水滴,再用无菌镊子取灭菌牛津杯,轻轻放于LB固体培养基表面,每个培养基上均匀放置5只牛津杯。用微量移液器分别吸取上述样品各265μl,并注入到放置平稳的5只牛津杯内,小心加入,切勿滴洒牛津杯之外的培养基上。再用灭菌陶瓷盖换掉原来的玻璃平皿盖(以吸取培养基在后面实验过程中所蒸腾出的水分)。
2.6培养
将上述LB平板培养基放置于4℃冰箱8h,然后再将扩散处理完全后的LB 平板培养基放入37℃的恒温培养箱内,培养16h~24h后,观察结果。
表1为抑菌实验结果
抑菌圈(mm) | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 |
大肠杆菌O157 | 17 | 18 | 20 | 16 | 15 |
大肠杆菌O139 | 18 | 16 | 15 | 13 | 13 |
大肠杆菌K88 | 17 | 14 | 13 | 19 | 21 |
大肠杆菌K99 | 23 | 20 | 14 | 21 | 16 |
根据抑菌实验结果,选取实施例一进行动物实验。
将实施例一所得的发酵饲料添加剂分别进行仔猪预防腹泻及生长发育试验。
试验动物及地点
选取23日龄体重在8±0.5kg、生长健康、胎次相近、无遗传疾病的杜长大三元杂交断奶仔猪240头进行试验,其中一半公猪,一半母猪,240头试验仔猪均由湖北枝江市宜合众畜牧有限公司提供。
试验共分4组,包括对照组、抗生素组和发酵饲料添加剂组,每组30头(每组做两个重复试验,实验结果取平均值),每组一半公猪一半母猪,试验期为30 天,饲喂时间从仔猪23日龄开始至53日龄结束。试验结束每组随机选取6头仔猪进行采血进行血液指标测定。
表2为饲喂试验分组及处理
表3为血液指标测定结果
在表3中,同行肩标小写字母相同或无字母表示差异不显著(P>0.05),小写字母不同表示差异显著(P<0.05),大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)。
由表3可知,发酵饲料添加剂组相比于其它组能够明显增加仔猪的体重量,发酵饲料添加剂组增加仔猪的体重量与抗生素组相当,由此可知,该发酵饲料添加剂能够促进仔猪的生长。
同时,对上述仔猪进行腹泻率检测,具体如下:
表4为腹泻率统计
由表4可见,本发明实施例提供的发酵饲料添加剂组相比于对照组和抗生素组能够明显降低仔猪腹泻率,从而保证仔猪的生长。
同时,针对十二指肠、空肠和回肠分别进行检测,
表5为十二指肠、空肠和回肠的检测
表5中,VH表示绒毛高度,CD表示隐窝深度,VH/CD表示绒毛高度/隐窝深度。
结合表4和表5可知,发酵饲料添加剂组能够提高绒毛高度、降低隐窝深度、提高绒毛高度与隐窝深度比值,保护肠道正常结构和促进肠道形态的发育。这表明发酵饲料添加剂组在降低腹泻促进肠道发育、保护肠道正常结构和功能方面均显著优于对照组和抗生素组。
本发明实施例提供的控制腹泻率的发酵饲料添加剂包括白术、茯苓、山药、党参和保藏编号为CCTCC NO:M 2017388的枯草芽孢杆菌M20-TL经过发酵后,使得党参中的多糖、酚、皂甙和多种氨基酸含量成倍释放增加,有利于肠道有益菌群生长;白术中的挥发油、苍术酮和苍术醇经发酵后,具有镇静、保肝利胆、利尿、强壮、提高免疫、抗菌、抗氧化能力得到提高;茯苓中的多糖,能够促进原料发酵,其中的茯苓酸、卵磷脂和茯苓聚糖及多种微量和宏量元素,经过发酵后可增加机体的免疫、抗菌、保肝、镇静的作用,同时本发明实施例提供的枯草芽孢杆菌M20-TL,结合中药可替代抗生素,并能够预防动物腹泻并促进动物生长;芍药发酵后,所含芍药甙和挥发油的含量大幅提高,能够更好地发挥镇痛、解痉、抗应激、抗氧化及广谱抗菌作用,这使得中药与枯草芽孢杆菌M20-TL可相互促进,使得该发酵饲料添加剂在降低饲喂动物的腹泻率上作用明显。同时,断奶仔猪腹泄、少食,多以脾虚、寒泻为主,脾虚则水各不分,与湿邪并趋,则泄利无度。仔猪断奶可导致仔猪惊恐且烦躁不食,采用该发酵饲料添加剂能够补气健脾燥湿,并可安神宁志。同时该发酵饲料添加剂还能够保证饲喂动物的体重相比于饲喂基础日粮的动物体重明显增加,并与饲喂抗生素的动物的增加体重相当,可见,本发明实施例提供的发酵饲料添加剂能够替代抗生素预防动物腹泻并促进动物生长。同时,该发酵饲料添加剂能够杀灭或抑制肠道致病菌,促进肠道菌群快速生长定植,提高枯草芽孢杆菌M20-TL 的定植力,发挥生物拮抗作用。该发酵饲料添加剂中药味变淡,同时具有醇香味和微酸味,使得该发酵饲料添加剂具有良好的适口性。本发明实施例提供的方法制备出的发酵饲料添加剂具有良好的预防动物腹泻并促进动物生长的效果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种控制腹泻率的发酵饲料添加剂,其特征在于,所述发酵饲料添加剂的原料包括:白术、茯苓、山药、党参和枯草芽孢杆菌M20-TL,白术、茯苓、山药、党参和粉末状的枯草芽孢杆菌M20-TL的重量份分别为:20~30份、30~40份、5~15份、25~35份和0.2~3份,所述枯草芽孢杆菌M20-TL在2017年6月28日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国、武汉、武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2017388。
2.根据权利要求1所述的发酵饲料添加剂,其特征在于,白术、茯苓、山药、党参和粉末状的所述枯草芽孢杆菌M20-TL的重量份分别为:25份、35份、10份、30份和1.5份。
3.一种制备权利要求1或2所述的发酵饲料添加剂的方法,其特征在于,所述方法包括:
将所述发酵饲料添加剂的原料混合后进行原料发酵,所述原料发酵的时间为24h~36h,所述原料发酵的温度为32℃~34℃;
烘干并进行粉碎,得到所述发酵饲料添加剂。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:
将所述枯草芽孢杆菌M20-TL的原始菌株活化后,进行发酵培养,得到发酵液,提纯所述发酵液,得到所述枯草芽孢杆菌M20-TL。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,提纯所述发酵液包括:将所述发酵液进行离心,所述离心的转速为6000~7000r/min,所述离心时的压力为0.04±0.005MPa,得到滤液,将所述滤液进行喷雾干燥。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在第一发酵罐中发酵活化后的所述枯草芽孢杆菌M20-TL的原始菌株,且发酵时所述第一发酵罐内的压力为0.05±0.005MPa。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述发酵培养的培养基包括:大米粉、豆粕、面粉、酵母粉、MgSO4、KCl、NaCl、CaCO3和消泡剂,所述大米粉、所述豆粕、所述面粉、所述酵母粉、所述MgSO4、所述KCl、所述NaCl、所述CaCO3和所述消泡剂的重量份分别1.0~1.5份、1.0~2.0份、2~4份、0.6~09份、0.15~0.45份、0.1~0.2份、0.15~0.35份、0.25~0.45份和0.010~0.020份。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述发酵饲料添加剂中水分的质量分数为5%~7%。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,将所述白术、所述茯苓、所述山药和所述党参加入盛有水的第二发酵罐内浸泡,向所述第二发酵罐内通入蒸汽蒸煮30~40min并冷却后,向所述第二发酵罐内加入含有所述枯草芽孢杆菌M20-TL的水溶液进行原料发酵。
10.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,采用蒸汽进行烘干,且烘干温度为70℃~80℃。
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