CN108094043A - 一种富硒香菇栽培种的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：获得香菇孢子；将香菇孢子接种于菌丝培养基中培养，获得菌丝；配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中培养，获得母种；配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内培养，获得原种；配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内培养至菌丝占满料袋，然后升温，继续培养，获得富硒栽培种。本发明培育出的富硒香菇栽培种含硒量高、生长状态好、质量稳定，有利于促进富硒香菇行业的快速发展，具有重要的市场价值和社会价值。
Description
技术领域
本发明涉及香菇培育技术领域，具体是一种富硒香菇栽培种的培育方法。
背景技术
硒是一种人和动物所必需的微量元素，具有清除自由基抗氧化、延缓衰老、抗癌、增强免疫力、拮抗重金属等生物学特性。硒总体分为无机硒和有机硒两大类：前者包括硒酸盐、亚硒酸盐等，无机硒对于人和动物来说吸收效果差，毒性风险大，使用不当极易造成硒中毒；后者主要是指与生物有机分子结合形态的硒，对人和动物来说有机硒吸收率高，毒性风险小，更适合补硒的要求。植物是人类和动物获取硒的主要来源。在硒化合物的营养作用中，有机硒大于无机硒，植物硒大于动物硒。国内目前尚不能人工合成植物有机硒，获取植物有机硒的途径大多是依靠植物转化技术来实现的，利用作物的生物转化提高有机硒的含量而进入食物链供人和动物食用是一项主要的富硒技术。
中国已知的食用菌有350多种，其中多属担子菌亚门，常见的有香菇、草菇、银耳、蘑菇、松茸等。香菇中含有蛋白质、糖、多种维生素和矿物质，其中最主要的有30多种酶及7中人体必需的氨基酸，据实验表明有增强细胞免疫和体液免疫，提高机体的抗癌能力的作用。由于香菇的上述功能作用，若能够以香菇为载体，将无机硒转化为有机硒制成富硒香菇将大大提高香菇的保健功效。香菇菌种分为母种、原种和栽培种，而实际上直接用于种植香菇的菌种为栽培种，因此如何培育富硒香菇栽培种成为香菇种植领域研究的热点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种富硒香菇栽培种的培育方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡1-2min，取出后，采用无菌水冲洗3-5次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过12-20h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在22-25℃下培养10-15天，获得菌丝；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在24-26℃、无光条件下培养13-15天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在24-26℃、无光条件下培养25-30天，获得原种；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在15-18℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至24-26℃，继续培养至达到25-30天，获得富硒栽培种。
作为本发明进一步的方案：步骤2）中，所述菌丝培养基的制备方法如下：取15-18g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持15-20min，然后加入琼脂12-15g、葡萄糖8-10g、蛋白胨3-6g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基。
作为本发明再进一步的方案：步骤3）中，所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂16-18g、葡萄糖24-25g、磷酸二氢钾2g、维生素B1 15mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管。
作为本发明再进一步的方案：步骤3）中，所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可。
作为本发明再进一步的方案：步骤4）中，所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸35-40份、木屑50-55份、玉米面5-8份、石膏2-3份、蔗糖3-5份、磷酸二氢钾0.5-0.8份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1。
作为本发明再进一步的方案：步骤4）中，所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
作为本发明再进一步的方案：步骤5）中，所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳25-30份、木屑60-70份、玉米面6-8份、石膏2-3份、蔗糖2-5份、磷酸二氢钾1.0-1.4份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2。
作为本发明再进一步的方案：步骤5）中，所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明培育出的富硒香菇栽培种含硒量高、生长状态好、质量稳定，有利于促进富硒香菇行业的快速发展，具有重要的市场价值和社会价值。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡1min，取出后，采用无菌水冲洗3次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过12h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在22℃下培养10天，获得菌丝，所述菌丝培养基的制备方法如下：取15g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持15min，然后加入琼脂12g、葡萄糖8g、蛋白胨3g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在24℃、无光条件下培养13天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂16g、葡萄糖24g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管；所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在24℃、无光条件下培养25天，获得原种；所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸35份、木屑50份、玉米面5份、石膏2份、蔗糖3份、磷酸二氢钾0.5份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1；所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在15℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至24℃，继续培养至达到25天，获得富硒栽培种；所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳25份、木屑60份、玉米面6份、石膏2份、蔗糖2份、磷酸二氢钾1.0份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2；所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
实施例2
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡1min，取出后，采用无菌水冲洗4次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过14h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在22℃下培养11天，获得菌丝，所述菌丝培养基的制备方法如下：取16g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持16min，然后加入琼脂12g、葡萄糖8g、蛋白胨4g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在24℃、无光条件下培养13天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂16g、葡萄糖24g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管；所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在24℃、无光条件下培养26天，获得原种；所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸38份、木屑51份、玉米面5份、石膏2份、蔗糖4份、磷酸二氢钾0.6份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1；所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在15℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至24℃，继续培养至达到26天，获得富硒栽培种；所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳26份、木屑63份、玉米面6份、石膏3份、蔗糖2份、磷酸二氢钾1.1份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2；所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
实施例3
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡2min，取出后，采用无菌水冲洗4次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过16h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在23℃下培养13天，获得菌丝，所述菌丝培养基的制备方法如下：取17g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持18min，然后加入琼脂13g、葡萄糖9g、蛋白胨4g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在25℃、无光条件下培养14天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂17g、葡萄糖24g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管；所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在25℃、无光条件下培养28天，获得原种；所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸37份、木屑52份、玉米面6份、石膏3份、蔗糖4份、磷酸二氢钾0.6份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1；所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在16℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至25℃，继续培养至达到28天，获得富硒栽培种；所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳28份、木屑65份、玉米面7份、石膏2份、蔗糖4份、磷酸二氢钾1.3份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2；所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
实施例4
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡1min，取出后，采用无菌水冲洗5次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过19h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在24℃下培养13天，获得菌丝，所述菌丝培养基的制备方法如下：取18g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持18min，然后加入琼脂15g、葡萄糖9g、蛋白胨5g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在26℃、无光条件下培养15天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂18g、葡萄糖25g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管；所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在26℃、无光条件下培养28天，获得原种；所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸40份、木屑53份、玉米面7份、石膏3份、蔗糖3份、磷酸二氢钾0.7份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1；所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在17℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至25℃，继续培养至达到30天，获得富硒栽培种；所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳29份、木屑68份、玉米面8份、石膏3份、蔗糖4份、磷酸二氢钾1.3份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2；所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
实施例5
一种富硒香菇栽培种的培育方法，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡2min，取出后，采用无菌水冲洗5次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过20h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在25℃下培养15天，获得菌丝，所述菌丝培养基的制备方法如下：取18g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持20min，然后加入琼脂15g、葡萄糖10g、蛋白胨6g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在26℃、无光条件下培养15天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂18g、葡萄糖25g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管；所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在26℃、无光条件下培养30天，获得原种；所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸40份、木屑55份、玉米面8份、石膏3份、蔗糖5份、磷酸二氢钾0.8份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1；所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在18℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至26℃，继续培养至达到30天，获得富硒栽培种；所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳30份、木屑70份、玉米面8份、石膏3份、蔗糖5份、磷酸二氢钾1.4份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2；所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1/10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
本发明培育出的富硒香菇栽培种含硒量高、生长状态好、质量稳定，有利于促进富硒香菇行业的快速发展，具有重要的市场价值和社会价值。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (8)
1.一种富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）将种菇放入0.1%升汞溶液中浸泡1-2min，取出后，采用无菌水冲洗3-5次，采用滤纸吸干表面水分，然后将种菇的菌褶朝下，用铁丝支撑置于培养皿上，把灭菌过的滤纸置于培养皿内，经过12-20h，培养皿内的滤纸上散落一层白色的孢子印，即获得香菇孢子；
2）将香菇孢子接种于菌丝培养基中，在22-25℃下培养10-15天，获得菌丝；
3）配置母种培养料，装入试管内，并进行灭菌处理，灭菌处理后，将试管进行斜面摆放，将菌丝接种至斜面试管中，在24-26℃、无光条件下培养13-15天，使菌丝长满试管斜面，获得母种；
4）配置原种培养料，放入菌种瓶，并进行灭菌处理，获得原种培养瓶，将母种接种至原种培养瓶内，在24-26℃、无光条件下培养25-30天，获得原种；
5）配置栽培种培养料，放入料袋中，并进行灭菌处理，获得栽培料袋，将原种接种至栽培料袋内，在15-18℃下培养至菌丝占满料袋，然后升温至24-26℃，继续培养至达到25-30天，获得富硒栽培种。
2.根据权利要求1所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤2）中，所述菌丝培养基的制备方法如下：取15-18g麦芽浸膏，加入800mL水，煮沸后保持15-20min，然后加入琼脂12-15g、葡萄糖8-10g、蛋白胨3-6g和亚硒酸钠0.2mg，搅拌混合均匀后，补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热装入培养皿中，即可获得菌丝培养基。
3.根据权利要求2所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤3）中，所述母种培养料的制备方法如下：取优质马铃薯，去皮并挖去发芽眼，切成薄片，称取200克，置于钢精锅，加水1000mL，煮沸后保持40 min，趁热用10层纱布过滤，将获得的滤液放入烧杯中，补水至1000mL，再倒回钢精锅，加入琼脂16-18g、葡萄糖24-25g、磷酸二氢钾2g、维生素B115mg和亚硒酸钠0.4mg，再补水至1000mL，继续搅拌混合均匀后，趁热分装试管。
4.根据权利要求1-3任一所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤3）中，所述灭菌处理为：将装有母种培养料的试管放入灭菌锅内，在试管上端开口处塞入棉塞并包扎聚丙烯塑料薄膜，以防棉塞受潮，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，在121℃、100千帕的条件下灭菌30min后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1／10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出试管，即可。
5.根据权利要求4所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤4）中，所述原种培养料包含以下按照重量份的原料：麦麸35-40份、木屑50-55份、玉米面5-8份、石膏2-3份、蔗糖3-5份、磷酸二氢钾0.5-0.8份、硫酸镁0.1份、亚硒酸钠0.005份，且料水比1:1.1。
6.根据权利要求5所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤4）中，所述灭菌处理为：将装有原种培养料的菌种瓶放入灭菌锅内，在菌种瓶开口处塞入棉塞，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌2h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1／10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
7.根据权利要求6所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤5）中，所述栽培种培养料包含以下按照重量份的原料：棉籽壳25-30份、木屑60-70份、玉米面6-8份、石膏2-3份、蔗糖2-5份、磷酸二氢钾1.0-1.4份、硫酸镁0.2份、亚硒酸钠0.008份，且料水比1:1.2。
8.根据权利要求7所述的富硒香菇栽培种的培育方法，其特征在于，步骤5）中，所述灭菌处理为：将装有栽培种培养料的料袋放入灭菌锅内，通入蒸汽并打开排气阀，排尽灭菌锅内的冷气，然后关闭排气阀，待压力升至50千帕时，开阀放气，待指针回到0位时，保持5分钟，再关上排气阀，等压力升到200千帕时，灭菌3h，然后停止加热，待指针回到零点，先打开锅盖的1／10开度，等到无直冲蒸气时，再打开全部锅盖，取出灭菌锅，即可。
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