CN108029918A - 一种富含黄酮类化合物固体饮料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种富含黄酮类化合物固体饮料及其制备方法。本发明的固体饮料主要由以下原料组成：松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮。分别将上述原料按一定比例混合，接入适量的植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌发酵菌种，在优化的发酵条件下培养24～48小时，往发酵产物中添加辅料海藻糖、脱脂奶粉和低聚果糖，经冷冻干燥后试制成品。本发明的固体饮料具有营养丰富、安全有效、功能明确、吸收率高等特点，具备辅助降血脂和血糖的作用。

Description

一种富含黄酮类化合物固体饮料及其制备方法
技术领域
本发明涉及固体饮料领域，具体涉及一种以松花粉黄酮为主要原料的富含黄酮类化合物固体饮料及其制备方法。
背景技术
松花粉又名松花、松黄，是中国医学宝库中的传统药材和食品。有润心肺、益气、祛风止血、壮颜益智、强身健体的功能。松花粉具有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素、微量元素、不饱和脂肪酸、黄酮类化合物、多糖等多种成分，其中黄酮类成分是松花粉中发挥药理活性的主要有效成分，其含量丰富，具有明显的抗氧化、抗衰老、抗疲劳、降低血脂、调节血糖的作用。同样，竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷、山楂黄酮在辅助降血脂和血糖等方面具有独特的功效作用。
益生菌因能改善肠道菌群结构、提高免疫力、降低胆固醇和血压、抑菌抗炎、抗癌等方面发挥作用，在饮料和食品中已得到广泛的应用。它能通过影响代谢、转化和吸收等作用增加有效成分的功效、产生新的活性成分、提高有效成分的生物利用度。益生菌和黄酮化合物的结合，将增强黄酮化合物的作用功效，提高黄酮化合物的吸收。同时，松花粉中的营养成分促进了益生菌的增殖，充分发挥“1+1>2”的强大效应。
目前松花粉产业存在产品销售单一、开发能力弱、精深加工滞后、质量标准及品牌建设滞后等众多问题，制约了产业的转型升级。而市场上松花粉产品主要以破壁松花鲜粉或复配营养成分的破壁松花粉为主，精深加工产品、细分产品非常缺少，尚未有针对松花粉黄酮开发的相关产品。因此，开发具有营养丰富、功能明确、安全有效、生物利用度高等优点的深加工产品，对松花粉产品多元化，加工产业拓展，提高企业自主创新能力和增加农民收入等方面具有一定的经济和社会价值。
发明内容
本发明的目的是为了能够解决松花粉产品部分问题，提供了一种具有辅助降血脂和血糖作用的松花粉固体饮料。同时提供了淡竹叶、橘皮、桑叶和山楂资源再利用新方法。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种富含黄酮类化合物松花粉固体饮料及其制备方法，包括以下步骤：
按以下重量份数称取原料：松花粉黄酮50～70份、竹叶黄酮10～15份、桑叶黄酮10～15份、橘皮苷5～10份和山楂黄酮5～10份；
将原料按比例混合，接入益生菌菌种，进行发酵培养；
发酵完成后，向培养体系中添加冻干保护剂和益生元，经冷冻干燥后试制成品。
其中，作为优选的，松花粉黄酮为松花粉超临界CO2萃取的产物，包括以下步骤制备而成：马尾松松花粉经除杂、干燥、筛选和破壁处理后，用乙醇浸润10～12小时，放入超临界装置中，在压力为30～40MPa、温度为31～42℃、固液比为1:1～1.5、CO2流量为35～45L/h条件下萃取2～4小时分离得到的产物。
优选的，所用的乙醇为70％乙醇，用于提取松花粉黄酮，目前未有采用超临界CO2萃取松花粉中的黄酮类化合物，以70％乙醇作为夹带剂。
优选的，竹叶黄酮为淡竹叶超临界CO2萃取的产物，包括以下步骤制备而成：淡竹叶采后经洗净、干燥、粉碎和过筛处理后，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为30～40MPa、温度为36～50℃、夹带剂用量为1～4.5ml/g条件下萃取2～4小时分离得到的产物。
优选的，桑叶黄酮为桑叶超临界CO2萃取的产物，包括以下步骤制备而成：桑叶采后经洗净、干燥、粉碎和过筛处理后，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为26～36MPa、温度为40～51℃、夹带剂用量为2.5～4.0ml/g条件下萃取3～4小时分离得到的产物。
优选的，橘皮苷为橘皮超临界CO2萃取的产物，包括以下步骤制备而成：橘皮经洗净、切分、干燥、粉碎和过筛处理后，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为30～40MPa、温度为50～62℃、夹带剂用量为1.5～3.0ml/g条件下萃取2～3小时分离得到的产物。
优选的，山楂黄酮为山楂乙醇回流提取的产物，包括以下步骤制备而成：山楂经清洗、去核、干燥、粉碎处理后，放入提取罐中，以70％乙醇为提取溶剂，在提取温度40～50℃、料液比1∶10～20的条件下提取3～5h得到的产物。
优选的，益生菌菌种为植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌，采用发酵方式为混合发酵，两者的接种比例为2:1，接种量分别为2.0～3.0*107cfu/ml和1.0～1.5*107cfu/ml。
优选的，将原料松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮混合物制成4～8％的悬液，按比例接入植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌，混匀，于38～42℃温度下静止培养24～48小时。
优选的，海藻糖和脱脂奶粉为冷冻干燥保护剂，两者的比例为1:1。
低聚果糖作为益生元。
其中海藻糖的添加量为培养体系总重量的2～5％、脱脂奶粉的添加量为培养体系总重量的2～5％；益生元为低聚果糖的添加量为培养体系总重量的3～5％。
优选的，冷冻干燥为超低温真空冷冻干燥。
本发明还提供一种富含黄酮类化合物固体饮料，所述固体饮料采用上述的的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法得到。
进一步，固体饮料中植物乳杆菌活菌数大于2*109cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数大于1*109cfu/g。
进一步，固体饮料中总黄酮含量大于25.0mg/g。
本发明与现有产品和技术相比，本发明具有以下优点：
第一、首次将松花粉黄酮类化合物试制成品，这将丰富松花粉产品种类，增加松花粉的经济附加值，也为松花粉细分产品生产提供新方法。
第二、首次利用超临界CO2萃取技术分离松花粉中黄酮类化合物，夹带剂为70％乙醇。超临界CO2萃取技术具有无溶剂残留、无污染、安全性高、无化学反应、省时简便等优点，可以完整保留提取物中的生物活性成分，对环境友好，可实现生产过程绿色化，被称为“绿色分离技术”，在食品工业分离技术中具有一定的优势。
第三、超临界CO2萃取的松花粉黄酮含量大于32.8mg/g，产品中总黄酮含量大于25.0mg/g，黄酮含量非常丰富。通过添加竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮等富含黄酮类化合物的提取物，将增强黄酮类化合物辅助降血脂和血糖的作用。同时对竹叶、桑叶、橘皮废弃资源的再利用，增加它们的经济附加值。
第三、首次将松花粉黄酮和益生菌的完美结合，不仅提高了松花粉黄酮在人体肠道中的吸收，增强其作用功效。同时也彰显了益生菌降低胆固醇的作用。
第四、采用植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌为发酵菌种，两者比例为2:1混合发酵方式进行益生菌发酵。通过两者的结合，协调了速效和长效调节作用，能够有效改善肠道菌群结构，显著提高黄酮类化合物的生物利用度。同时，提高了产品的品质、口感、风味和色泽。
第五、通过对复合保护剂的筛选，确定了以海藻糖和脱脂奶粉为理想的冻干保护剂。经过多次试验，该保护剂配方具有存活率高、成本低、安全稳定、操作简便等特点，适合大规模的工业化生产使用。
第六、通过添加益生元低聚果糖，为益生菌提供必要的能量，有助于益生菌的增殖，改善肠道菌群结构，与益生菌协同促进黄酮类化合物的吸收。而且，低聚果糖是一种优良的水溶性膳食纤维，能有效降低血清中胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸的含量。
第八、采用超低温真空冷冻干燥发酵产物，在冻干保护剂作用下，产品中植物乳杆菌活菌数大于2*109cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数大于1*109cfu/g，确保了益生菌的高存活率。
具体实施方式
本发明提供了一种富含黄酮类化合物松花粉固体饮料及其制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：
(1)采用不同的提取条件获得松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮原料。
(2)包括以下重量份的原料组成：松花粉黄酮50～70份、竹叶黄酮10～15份、桑叶黄酮10～15份、橘皮苷5～10份和山楂黄酮5～10份。
(3)将步骤(2)中原料按比例混合，接入适量的发酵菌种，在优化的发酵条件下培养24～48小时。
(4)往培养体系中添加辅料海藻糖、脱脂奶粉和低聚果糖，经冷冻干燥后试制成品。
其中，本发明中松花粉黄酮是松花粉经超临界CO2萃取后富含黄酮类化合物的产物。处理后的松花粉经低温气流式超微粉碎破壁技术破坏细胞壁后，其内含物得到充分的释放，以70％乙醇作为夹带剂，在优化的萃取条件下，松花粉黄酮得到有效富集。黄酮类化合物提取方法有很多，超临界CO2萃取方法因其安全可靠、对环境友好、提取效率高等特点，而作为提取松花粉黄酮的优选方案。
具体的，采集后的松花粉经过除质后，倒入沸腾干燥流化床中，控制进风温度80～100℃，出风温度35～45℃干燥1～2小时。将干燥好的松花粉加入到在安装有180目震荡筛筛网的螺旋上料机的料斗内进行筛选和分级，控制螺旋上料机频率30～50Hz，分级轮频率45～50Hz，进风阀门的开启度为70％～90％。将分级合格的干燥松花粉加入到气流粉碎机料斗中，控制压缩空气进气压力0.75～0.95MPa，分级轮转速80～110Hz，进行破壁。破壁好的松花粉用70％乙醇浸润10～12小时，放入超临界装置中，在压力为30～40MPa、温度为31～42℃、固液比为1:1～1.5、CO2流量为35～45L/h条件下萃取2～4小时，分离产物。将萃取液加入配料罐中，在温度为50～55℃，在-0.08～-0.10MPa压力下抽真空6～8小时，回收乙醇。
本发明中添加松花粉黄酮的量为50～70份，优选为55～65重量份，更优选为58～63重量份。在本发明具体实施例中，优选使用经喷雾干燥的粉末，其松花粉黄酮的含量大于32.8mg/g。黄酮类化合物因其辅助降血脂和血糖、抗氧化、抗菌、保肝护肝等功能，受到广泛的关注。松花粉黄酮的动物实验研究表明其在辅助降血脂和血糖、抗氧化、缓解疲劳等方面展示出良好的效果。
具体的，松花粉黄酮经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺，控制主要参数：进风温度为170～190℃，出风温度80～90℃，雾化器频率为40～50Hz，打料频率为13～18Hz。使其产品的粒度在60～80目之间，水分≤5％，堆密度为0.3～0.4kg/m3，色泽为黄色或淡黄色。经喷雾干燥的粉末，松花粉黄酮的含量大于32.8mg/g。
本发明中竹叶黄酮为淡竹叶经提取后黄酮类产物，作为优选的提取方法为超临界CO2萃取分离技术。竹叶黄酮有效成分主要是黄酮糖苷和香豆素类内酯，有明显的降低动物血清中甘油三酯和总胆固醇含量、升高高密度脂蛋白(HDL)和降低低密度脂蛋白(LDL)含量的作用，能清除人体内活性氧自由基，防止生物膜脂质被超氧自由基和羟基自由基氧化等作用。从分子水平上，竹叶黄酮能够调节脂肪酸合成酶(FAS)、激素敏感脂肪酶(HSL)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)等基因的表达水平，从而减少脂肪合成，增加脂肪降解，促进脂质的转运和清除，使脂类代谢处于良性的循环，发挥调节血脂的作用。本发明产品中添加10～15份的竹叶黄酮可与松花粉黄酮产生协同作用。
具体的，采后的竹叶用清水洗净、晾干，将叶片置于60～70℃大型烘箱中，烘8～10小时。烘干的竹叶经粉碎机粉碎后，过50～60目的筛网，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为30～40MPa、温度为36～50℃、夹带剂用量为1～4.5ml/g条件下萃取2～4小时。将萃取液加入到配料罐中，在温度为50～56℃，在-0.09～-0.11MPa压力下抽真空5～7小时，回收乙醇。竹叶萃取物经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺。
本发明中桑叶黄酮为桑叶经提取后富含黄酮类化合物的产物，作为优选的提取方法为超临界CO2萃取分离技术。现代药理研究表明，桑叶具有抗氧化、抗衰老、降血糖和降血脂等多种活性。黄酮类化合物是桑叶的重要活性成分之一。桑叶黄酮具有提高抗氧化能力，促进胰岛素分泌，同时具有提高己糖激酶活力等作用，表现出良好的降血糖作用。同时桑叶黄酮可显著的降低血清总胆固醇、甘油三酯、游离脂肪酸、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇、血浆过氧化物及尿过氧化物的浓度，对高血糖病人具有明显的降血脂效应。本发明产品中添加10～15份的桑叶黄酮可提高松花粉黄酮辅助降血脂和血糖的作用。
具体的，桑叶采后经洗净、干燥、粉碎和过筛处理后，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为26～36MPa、温度为40～51℃、夹带剂用量为2.5～4.0ml/g条件下萃取3～4小时。将萃取液加入到配料罐中，在温度为50～56℃，在-0.08～-0.10MPa压力下抽真空7～9小时，回收乙醇。桑叶萃取物经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺。
本发明中橘皮苷为橘皮经提取后的黄酮类产物，作为优选的提取方法为超临界CO2萃取分离技术。橙皮苷在柑橘果肉和果皮中的含量较高，橙皮苷具有维持血管正常渗透性，降低毛细管脆性及通透性的作用，抗脂质过氧化和清除羟自由基作用，能抑制与胆固醇合成有关酶的活性，从而起预防心血管疾病、抗氧化、降血脂等作用。有资料显示给血液中胆固醇偏高的人每日喝3杯橙汁，4周后发现，他们血液中HDL增加21％，LDL/HDL比值降低16％，甘油三酯的水平也明显降低，具有明显降血脂作用。本发明产品中添加10～15份的橘皮苷有助于增强松花粉黄酮的作用功效。
具体的，橘皮经洗净、切分、干燥、粉碎和过筛处理后，放入超临界装置中，以无水乙醇为夹带剂，在压力为30～40MPa、温度为50～62℃、夹带剂用量为1.5～3.0ml/g条件下萃取2～3小时。将萃取液加入到配料罐中，在温度为50～56℃，在-0.09～-0.11MPa压力下抽真空6～8小时，回收乙醇。橘皮黄酮经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺。
本发明中山楂黄酮是山楂经提取后含有大量黄酮类化合物的产物，作为优选的提取方法为乙醇回流提取技术。现代药理学研究证明，山楂黄酮具有降血脂作用，能明显降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平，升高高密度脂蛋白水平，同时提高抗氧化能力抑制脂质过氧化物预防脂质代谢紊乱，可以用来预防和治疗高血脂，且没有毒副作用。大量的动物实验表明山楂黄酮具有显著的抗氧化和降血脂作用。本发明产品中添加5～10份的山楂黄酮可以加强松花粉黄酮降血脂的作用。
具体的，山楂经清洗、去核、干燥、粉碎处理后，放入提取罐中，以70％乙醇为提取溶剂，在提取温度40～50℃、料液比1∶10～20的条件下提取3～5h。将萃取液加入到配料罐中，在温度为55～65℃，在-0.08～-0.10MPa压力下抽真空6～8小时，回收乙醇。山楂黄酮经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺。
本发明选择功能明确的松花粉黄酮为主要原料，同时添加其它功能明确的黄酮类化合物协同发挥降血脂和血糖作用。这些原料都是国家卫计委批准的既是食品又是药品的物品，其安全性和疗效都有一定的科学依据。而且，这些原料无任何配伍禁忌，相辅相成，协同促进，共同发挥作用。本发明采用本领域技术人员所熟知的原料，可以增加一种或几种富含黄酮类化合物的原料，也可以减少一种或几种富含黄酮类化合物的原料，均视为本发明内容的保护范围之内。
本发明还包括上述富含黄酮类化合物松花粉固体饮料的制备方法，将所述松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮按比例混合，接入适量的植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌发酵菌种，在优化的发酵条件下培养24～48小时，添加辅料海藻糖、脱脂奶粉和低聚果糖，经冷冻干燥后试制成品。
本发明采用的益生菌为植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌，两者接种的比例为2:1。研究认为，肥胖是产生高血脂、高血糖的主要原因之一，而肥胖发生可能与抗菌素引起的肠道益生菌数量与种类减少相关。益生菌不仅能改善肠道菌群结构，降低血清中胆固醇的水平，而且能显著提高黄酮类化合物的吸收率。通过对益生菌发酵菌种、发酵方式、接种量、发酵条件等研究发现，以植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌接种量分别为2.0～3.0*107cfu/ml和1.0～1.5*107cfu/ml，在优化条件下进行混合发酵，对益生菌的繁殖和黄酮化合物的提高具有良好的效果。当然，可用于食品的益生菌种类很多，采用本领域技术人员所熟知的益生菌种类、数量均视为本发明内容的保护范围之内。而且本发明的益生菌来源广泛，市场销售的普通菌种即可满足本发明的要求。
具体的，松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮按比例混合，制成4～8％的悬液，按上述接种量接入植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌，搅拌混匀，于38～42℃温度下静止培养24～48小时。
本发明采用的冷冻干燥为低温真空冷冻干燥技术。常规干燥所得的产品，一般是体积缩小、质地变硬，有些物质发生了氧化，一些易挥发的成分大部分会损失掉，有些热敏性的物质，如蛋白质、维生素会发生变性。同时益生菌会失去生物活力，干燥后的物质不易在水中溶解等。采用低温真空冷冻干燥技术，能保证益生菌最大的活菌数，而且干燥后的产品疏松多孔，呈海绵状，能迅速而完全溶解于水中。
本发明采用的冻干保护剂为脱脂奶粉和海藻糖。从安全和经济等角度综合考虑，通过对复合保护剂的筛选，确定了以海藻糖和脱脂奶粉为较为理想的冻干保护剂。经过多次试验，以海藻糖的质量比为2～5％和脱脂奶粉的质量比为2～5％配方比例下，益生菌的存活率达90％。该配方相对于其它配方中添加山梨醇、精氨酸、抗坏血酸等冻干保护剂，具有存活率高、成本低、安全稳定、操作简便等特点，适合大规模的工业化生产。在该配方和冻干工艺下，最终产品中植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌活菌数不低于2*109cfu/g和1×109cfu/g。
本发明产品中添加3～5％的益生元低聚果糖。低聚果糖具有双向的调节肠道功能，可作为能量极大促进益生菌的繁殖，同时抑制有害菌的生长。而且能有效降低血清中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平，提高高密度脂蛋白/低密度脂蛋白(HDL/LDL)比率，改善血脂状况。通过添加益生元低聚果糖将有效增加产品的作用功能。
具体的，发酵完成后，往培养体系中投入2～5％的海藻糖、2～5％的脱脂奶粉和3～5％的低聚果糖，搅拌混匀，放入冻干设备中，预冻至-40～-50℃，然后在温度为-65～-70℃，冻干厚度为1.3～1.6cm的条件下真空冻干48～72小时。冻干后产品进行制粒。
本发明是以松花粉黄酮为主，同时复配其它富含黄酮类化合物的提取产物，并经益生菌发酵技术对混合物进行发酵，而试制成具有辅助降血脂和血糖作用效果的产品。服用本发明产品2～4g/天，30天后具有明显效果。
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例对本发明进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
本发明制备的一种富含黄酮类化合物松花粉固体饮料，其组分的质量百分比为：松花粉黄酮50份、竹叶黄酮15份、桑叶黄酮15份、橘皮苷10份和山楂黄酮10份。
采集后的松花粉经过除质后，倒入沸腾干燥流化床中，控制进风温度93℃，出风温度40℃干燥2小时。将干燥好的松花粉加入到在安装有180目震荡筛筛网的螺旋上料机的料斗内进行筛选和分级，控制螺旋上料机频率46Hz，分级轮频率48Hz，进风阀门的开启度为82％。将分级合格的干燥松花粉加入到气流粉碎机料斗中，控制压缩空气进气压力0.86MPa，分级轮转速90Hz，进行破壁。破壁好的松花粉用70％乙醇浸润10小时，放入超临界装置中，在压力为38MPa、温度为40℃、固液比为1:1.5、CO2流量为38L/h条件下萃取3.5小时，分离产物。将萃取液加入配料罐中，在温度为53℃，在-0.09MPa压力下抽真空8小时，回收乙醇。
松花粉黄酮经过滤、浓缩后，进行喷雾干燥工艺，控制主要参数：进风温度为180℃，出风温度87℃，雾化器频率为46Hz，打料频率为16Hz。产品的粒度为60目，水分3.86％，堆密度为0.39kg/m3，色泽为黄色或淡黄色。
将松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮按重量比例投入到发酵罐中，配制成7％的悬液，接入植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌的量分别为3.0*107cfu/ml和1.5*107cfu/ml，开搅拌混匀，混匀后40℃温度下静止培养42小时。往培养好的产物中添加3.2％的脱脂奶粉、3.1％的海藻糖和5％低聚果糖，搅拌混匀，进行冷冻干燥48～72小时后制粒。
经喷雾干燥的松花粉黄酮和产品中的总黄酮采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH方法测定，其试验结果如下：
首先，绘制出芦丁的标准曲线，而后，采用70％浸提法提取松花粉黄酮和产品中的总黄酮。按NaNO2-Al(NO3)3-NaOH方法测出各自的吸光值，并算出黄酮的含量，其中松花粉黄酮含量为32.8mg/g，产品中总黄酮含量为25.0mg/g(表1)。
表1.松花粉黄酮和产品总黄酮含量
实施例2
本发明制备的一种富含黄酮类化合物松花粉固体饮料，其组分的质量百分比为：松花粉黄酮60份、竹叶黄酮10份、桑叶黄酮10份、橘皮苷10份、山楂黄酮5份和葛根黄酮5份。
松花粉采集后，经除杂、干燥、过筛和分级后，采用超临界CO2萃取所得到的产物，进行过滤和浓缩。将松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷、山楂黄酮和葛根黄酮按上述重量比例投入发酵罐中，接入3.0*107cfu/ml和1.5*107cfu/ml量的植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌。混匀后，38℃温度下静止培养40小时。往培养好的产物中添加3.2％的脱脂奶粉、3.1％的海藻糖和5％低聚果糖，混匀，进行冷冻干燥48～72小时后制粒。产品中的黄酮总含量为26.3mg/g。
实施例3
本发明制备的一种富含黄酮类化合物松花粉固体饮料，其组分的质量百分比为：松花粉黄酮70份、竹叶黄酮10份、桑叶黄酮10份、橘皮苷5份和山楂黄酮5份。
松花粉采集后，经除杂、干燥、过筛和分级后，采用超临界CO2萃取所得到的产物，进行过滤和浓缩。将松花粉黄酮、竹叶黄酮、桑叶黄酮、橘皮苷和山楂黄酮按上述重量比例投入发酵罐中，接入一定量的植物乳杆菌和罗伊氏乳杆菌。混匀后，37℃温度下静止培养36小时。往培养好的产物中添加3.2％的脱脂奶粉、3.1％的海藻糖和5％低聚果糖，混匀，进行冷冻干燥48～72小时后制粒。产品中的黄酮总含量为28.6mg/g。
实施例4
本发明制备的松花粉固体饮料，在高脂大鼠的试验结果如下：
在高脂大鼠的试验中，具有良好的辅助降血脂的效果。以上述产品设三个剂量组对高脂大鼠喂养30天后，血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平都得到显著的下降，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显的上升。血脂状况明显得到改善。
表2.试验大鼠血脂的各项指标(n＝10，单位:mmol·L-1)
注：与模型对照相比，*P≤0.05，**P≤0.01。
实施例5
本发明制备的松花粉固体饮料，在糖尿病大鼠的试验结果如下：
在糖尿病大鼠的试验，展示良好的辅助降血糖作用效果。以上述产品设三个剂量组对糖尿病大鼠喂养30天后，大鼠的血糖明显得到下降，血糖状况得到显著改善。而糖耐量的试验结果说明松花粉固体饮料有助于糖尿病大鼠提高对葡萄糖的耐受能力。两者都存在一定的剂量-效应关系。
表3.试验大鼠血糖指标(n＝10，单位:mmol·L-1)
注：与模型对照相比，*P≤0.05，**P≤0.01。
表4.试验大鼠糖耐量的影响(n＝10，单位:mmol·L-1)
注：与模型对照相比，*P≤0.05，**P≤0.01。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明核心技术的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：
按以下重量份数称取原料：松花粉黄酮50～70份、竹叶黄酮10～15份、桑叶黄酮10～15份、橘皮苷5～10份和山楂黄酮5～10份；
将原料按比例混合，接入益生菌菌种，进行发酵培养；
发酵完成后，向培养体系中添加冻干保护剂和益生元，经冷冻干燥后试制成品。
2.根据权利要求1所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，所述发益生菌菌种为植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌。
3.根据权利要求2所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌接种比例为2:1。
4.根据权利要求2所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，冻干保护剂为海藻糖和脱脂奶粉，其中海藻糖的添加量为培养体系总重量的2～5％、脱脂奶粉的添加量为培养体系总重量的2～5％；益生元为低聚果糖的添加量为培养体系总重量的3～5％。
5.根据权利要求1所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，松花粉黄酮为松花粉超临界CO2萃取的产物，由以下方法制备而成：松花粉经除杂、干燥、筛选和破壁处理后，用乙醇浸润10～12小时，放入超临界装置中，在压力为30～40MPa、温度为31～42℃、固液比为1:1～1.5、CO2流量为35～45L/h条件下萃取2～4小时分离得到的产物。
6.根据权利要求5所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，所述乙醇为70％乙醇。
7.根据权利要求2所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法，其特征在于，将原料按比例混合，制成4～8％的悬液，接入植物乳杆菌和凝结芽孢杆菌，混匀，于38～42℃温度下静止培养24～48小时。
8.富含黄酮类化合物固体饮料，其特征在于，所述固体饮料采用权利要求1-7任意一项所述的富含黄酮类化合物固体饮料的制备方法得到。
9.根据权利要求8所述的富含黄酮类化合物固体饮料，其特征在于，固体饮料中植物乳杆菌活菌数大于2*109cfu/g，凝结芽孢杆菌的活菌数大于1*109cfu/g。
10.根据权利要求8所述的富含黄酮类化合物固体饮料，其特征在于，固体饮料中总黄酮含量大于25.0mg/g。
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