CN105754809A - 一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法及所得产物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种工业化生产有机富硒藏虫夏草原浆酒方法，包括步骤：1)藏虫夏草斜面菌种培养和种子液培养，2)先水培养基深层发酵扩大培养然后按比例向其加入酒继续发酵，3)藏虫夏草活性菌丝体细胞破壁或用酒将其浸泡密封陈化产香，4)制备中药提取物，5)藏虫夏草发酵液菌丝体破壁并按比例加入高纯度中药提取物和发酵用酒勾兑成产品。本发明用藏虫夏草菌丝体深层液体发酵，当获得足够菌丝体时分别加白酒、甜酒、黄酒、葡萄酒继续发酵，待活性成分足够时，菌丝体破壁并与麦冬、玉竹、山萸肉、肉苁蓉、淫羊藿、富硒甘味绞股蓝、黄芪、西洋参提取物及发酵用酒勾兑，形成富硒并具提高免疫力、抗肾腺、胸腺萎缩、延年嫩肤益寿的藏虫夏草原浆酒。

Description

一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法及所得产物

技术领域

本发明属于禽类饲养领域，具体涉及一种使用发酵床养殖禽类的方法。

背景技术

冬虫夏草是一种传统的名贵滋补中药材，具有“保肺益肝、补精填髓、止血化痰”的功效，“可治百虚百损”，现代医学证明其有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。由于其用途越来越广和用量越来越大，而野生量越来越少，人工种植技术从根本上还没有攻克。人们用其菌开展菌丝发酵生产替代野生冬虫夏草。

冬虫夏草核苷类成分冬虫夏草核苷类成分主要有尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、脱氧腺苷等6种，因产地不同，腺苷含量不同，无性型冬虫夏草比有性型冬虫夏草腺苷含量高。2010版药典对冬虫夏草有效成分的含量要求为：本品含腺苷(C₁₀H₁₃N₅O₄)不得少于0.010％。全国13个产地冬虫夏草的腺苷含量为0.11425～0.13966mg/g，其中藏草腺苷含量(13966mg/g)高于川草；在川草中，炉草腺苷含量(0.12466mg/g)高于滇草(0.11425mg/g)。其含超氧化物歧化酶(SOD)、17种氨基酸(总氨基酸含量＞20％，以酪氨酸，赖氨酸，组氨酸，精氨酸含量为主)、多糖(主要由D-甘露糖和D-半乳糖摩尔比为3∶5组成，多糖含量为31.5％，提取后粗多糖含量为42.0％)、脂肪酸成分(其中4个主要成分为软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和一个微量的十七烷酸。)、37种无机元素(其中磷、镁含量最高。有报道称冬虫夏草的抗癌作用与含磷、钴、铁、铜等有关)、抗维生素C、B1、B2、B12、烟酸和烟酰胺等营养物质。冬虫虫夏草腺苷和虫草素作为发酵虫草菌丝体的一个质量指标,其含量高低是衡量虫草菌丝体优劣的标准之一。研究证明，海拔4000米-5000米生长的藏虫草是虫草中的极品，用其发酵生产保健酒和医药饮食品工业原料，其保健作用更好。

经常食用冬虫夏草能够提高人体免疫功能，并能止咳化痰，治疗肺结核，年老体衰，贫血虚弱，神经性胃病，腰膝酸痛，阳痿遗精，病后久虚不复等症。近代医学家发现，还有抗癌、抗疲劳、抗病毒、降血压、改善心脑供血等功能，对肝硬化及鼻咽癌细胞生长有显著的抑制作用。

目前，冬虫夏草开发的产品有药品、化妆品、酒、饲料、保健食品、酒。CN102746974提供一种冬虫夏草保健酒及其制备方法，就是一种原浆冬虫夏草酒生产技术。其菌种发酵液采用有技术含量设备和技术脱水，因其水分含量过高，勾兑用酒度数必须高，无法提高酒中的虫草有效成分含量。

发明内容

针对本领域存在的不足，本发明的目的是提出一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法。

本发明的另一目的是提出所述工业化生产方法制得的原浆酒。

实现本发明目的的技术方案为：

一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法，包括步骤：

1)藏虫夏草斜面菌种的培养

取海拔4000-5000米生长的天然藏虫夏草虫体和子座进行A20140822菌种分离筛选，在PDA斜面培养基上控温15-25℃下培养7天-15天进行复壮培养，制得斜面菌种；

斜面菌种接种到摇瓶种子液培养基中，控制温度15-25℃摇床培养36-108小时，制得摇瓶种子液；

2)深层发酵扩大培养，加酒再连续发酵

在无菌条件下，按发酵罐液体培养基体积的8-15％加入藏虫草A20140822斜面摇瓶种子液进行发酵罐发酵，控温15-23℃，通风比1:0.6-0.8以及发酵罐内压为0-0.05MPa的条件下，连续发酵33h～40h，得到活体菌液后，再加质量为活体菌液1.0-1.5倍的纯粮酿制原基白酒、甜酒、黄酒、葡糖酒中的一种，在控温15-23℃，通风比1:0.6-0.8以及发酵罐内压为0-0.05MPa的条件下，二次连续发酵6h-24h，用胶体磨和高压纳米均质机将两次连续发酵的菌丝体细胞破壁，形成混悬胶液，得到藏虫夏草菌丝体发酵原浆。

3)制备中草药提取物

称取如下重量份的中药原料：麦冬38-42份，玉竹35-40份，山萸肉38-42份，肉苁蓉30-38份，淫羊藿15-22份，富硒甘味绞股蓝1-2份，西洋参0.1-0.5份、黄芪0.5-1份，用低温膨化机膨化后，加入8-16倍重量水浸润后用超声波提取机提取，将其提取液体用固液分离机除杂，将离心清液用超滤膜、纳滤膜、反渗透膜串联形成的分子膜分离机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白、大部分水，得纯度70％-98％中草药有效成分，再用冷冻干燥机干燥中草药浸膏成含水6％-8％的粉末或用常温真空离心干燥机浓缩到含水30％-60％浸膏。

4)用两次连续发酵的藏虫草菌丝体破壁形成的原浆，添加提取纯化的中草药有效成分及酒：将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原浆、纯化的中草药有效成分和酒发酵用白酒、米酒、甜酒、黄酒、葡萄酒中的一种，按照质量比为1-3：0.05-0.15：1.8-2.4勾兑产品；或将含水30％-70％浸膏或含水6-8％干粉加入发酵原浆酒，再用酒发酵用白酒、米酒、甜酒、黄酒、葡萄酒中的一种，按照质量比为1-3：0.05-0.15：1.8-2.4勾兑产品均质灌装。

A20140822菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCCM2015707,鉴定为拟青霉菌(Paecilomyces.Sp)，保藏日期2015年11月26日。保藏中心地址：:武汉市武昌珞珈山邮编:430072，电话：02768754052(辛晓红主任)；02768752319。

本发明采用冬虫夏草菌丝体发酵原液、中草药提取分离纯化液或浓缩液或冷冻干燥物与70-96度纯粮酿制原基白酒、葡萄酒、甜酒、黄酒勾兑成品，其中冬虫夏草菌丝体发酵原液是采用无菌体过滤的深层液体发酵技术，得到发酵菌体液，再进行细胞破碎，不浓缩液或浓缩液按配方用量配中药提取分离纯化物进行调制，其过程中保留了破壁菌丝体聚合物而形成的纳米均质成品，保持了天然冬虫夏草有效成份，形成了综合性能独特的藏虫草原浆酒产品。

本发明天然有机富硒延年养颜藏虫夏草原浆酒中，(1)天然富硒甘味绞股蓝:味甘、苦,性微寒。归经:归肺经、脾经、肾经。功能:益气安神,提高免疫力、护肝、抗过敏，抗癌，抗溃疡、抗肾腺萎缩、抗性腺萎缩、抗衰嫩肤美容、降三高、延年、防治老年痴呆病、清热解毒,祛瘀化痰。

(2)西洋参性凉,味甘、微苦，归心、肺、肾经，补气养血、滋阴补肾、健脾养胃、延缓衰老及养颜等功效现代医学研究证明，西洋参具有抗疲劳、抗衰老、抗休克、提高思维、改善记忆及调节内分泌、增强人体免疫力及改善心血管功能等作用。

(3)黄芪味甘性微温。归肺、脾、肝、肾经。补齐固表，托疮生肌。主治体虚自汗，久泻，脱肛，子宫脱垂，慢性肾炎，体虚浮肿，慢性溃疡，疮口久不愈合。生用黄芪，有益气固表、利水消肿、脱毒、生肌的功效。

(4)麦冬养阴生津，润肺清心，主治肺燥干咳、虚痨咳嗽、津伤口渴、心烦失眠、内热消渴、肠燥便秘以及咽白喉。

(5)玉竹润肺滋阴，养胃生津，主治燥热咳嗽，虚劳久嗽；热病伤阴口渴，内热消渴；阴虚外感，寒热鼻塞；头目昏眩，筋脉挛痛；

(6)山萸肉补益肝肾、收敛固涩、固精缩尿、止带止崩、止汗、生津止渴，主治腰膝酸痛、头晕耳鸣、健忘、遗精滑精、遗尿尿频、崩漏带下月经不调、大汗虚脱和内热消渴。

(7)肉苁蓉味甘咸、性温、归肾、大肠经、质润多液、补肾阳，益精血，润肠通便，防治阳痿，不孕，腰膝酸软，筋骨无力，肠燥便秘。补肾阳，强筋骨，祛风湿等症，为阴阳两补之品。

(8)淫羊藿治疗阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛和更年期高血压，淫羊藿具有补肾助阳，强筋健骨，祛风除湿，洗疮杀虫，消瘰化痈之功效。淫羊藿苷是淫羊藿主要有效成分之一，现代药理作用发现淫羊藿苷的主要生理活性在于改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力及调节内分泌，同时还具有抗肿瘤、抗肝毒、抗缺氧、健骨等作用。

其中，所述步骤1)中，摇瓶种子液培养基的配制比例为：土豆2200克，葡萄糖180克，蛋白胨20克，酵母膏15克，硫酸镁6克，磷酸二氢钾5克(自然pH值)，用水定容到10L；摇床培养时摇床转速150-200转/min。

其中，所述步骤2)中，发酵罐液体培养基的配制比例为：小米200000-250000g，葡萄糖10000-15000g，白糖2000-5000g，硫酸二氢钾500-1800g，硫酸镁100-2500g，蛋白胨5000-8000g，酵母浸膏1000-2000g，氨基酸100-200g，维生素VB110g，用水定容到2500L-5000L。

控温15-23℃，通风比1:0.6-0.8以及发酵罐内压为0-0.05MPa的条件下，连续发酵33h～40h，(pH值为3.8-4.5，菌丝体自然沉降100％结束发酵)，得到活体菌液。

本发明的一个具体实施方式为：首先用接种环将一环A20140822菌种的试管种接种到100ml液体培养基/500ml三角瓶中进行摇瓶培养，培养好的摇瓶种子液按5％-10％的量接种到发酵罐中的液体培养基中发酵生产A20140822菌丝，发酵结束后，用固液离心机分离出菌丝按鲜菌丝按1kg浸入10kg—100kg的50度—60度白酒中密封陈化0.5年—10年后形成独有的十分宜人的虫草酒香气后，按比例配方加入中药提取物。

其中，所述步骤3)中，再用高压流体纳米机在500-30000psi均质机破碎细胞壁，形成混悬胶液，在25-40℃下保温放置1-1.5小时，使细胞内物质充分渗出，到藏虫夏草菌丝体发酵原浆。

优选地，经胶体磨和高压均质机处理发酵液固液分离，取清液。

其中，所述步骤4)中，用低温膨化机膨化后，加入8-16倍量离子水浸润1-3h后用超声波提取剂提取，提取液用超滤膜、纳滤膜、反渗透膜逐级链接的膜分离机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白，得纯化的中草药提取液备用；或再用常温减压离心浓缩机脱水浓缩含干物质20％-70％，或再将其用冷冻干燥机干燥成含水7％的粉末。

其中，所述步骤5)中，所述白酒为粮食酒，可选自茅台、郎酒、泸州老窖、五粮液、剑南春、汾酒、西凤酒、郎酒、洋河大曲、贵州董酒、二锅头酒、牛栏山白酒、市售合格白酒任何一种。所述粮食酒为28度、38度、42度、45度、50度、52度、60度白酒中的一种。

其中，步骤2)用固液离心机分离出鲜菌丝后，按鲜菌丝按1kg浸入10kg—100kg的50度—60度白酒中密封陈化0.5年—10年后，加入中药提取物

优选地，鲜菌丝、含水20％-80％浸膏或含水6-8％干粉、酒的质量比为0.016-0.1：0.05-0.08：1.6-1.8；

作为本发明的另一优选技术方案，所述步骤5)中，发酵原液菌丝干粉、含水20％-80％浸膏或含水6-8％干粉、酒的质量比为0.002-0.004：0.05-0.08：1.6-1.8合并后均质罐装获得产品，不加任何商品色素和防腐剂；

本发明生产的有机富硒藏虫草原浆酒，它是由添加的天然绞股蓝硒总人参皂苷和硒多糖形成,总有机硒0.01mg/kg—0.05mg/kg。

本发明所述的方法制备得到的原浆酒。

本发明制得的透明体琥珀色藏虫草酒成品，不加任何商品色素和防腐剂。

其中，所述步骤3)中，再用高压流体纳米机在500-30000psi均质机破碎细胞壁，形成混悬胶液，在25-40℃下保温放置1-1.5小时，使细胞内物质充分渗出，得到藏虫夏草菌丝体发酵原浆。

其中，所述步骤4)中，用低温膨化机膨化后，加入8-16倍量离子水浸润1-3h后用超声波提取剂提取，提取液用分子膜机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白备用，或再用常温减压离心浓缩机脱水浓缩含干物质20％-70％，或再将其用冷冻干燥机干燥成含水7％的粉末备用。

进一步地，所述步骤5)中，所述白酒为粮食酒，选自茅台、郎酒、泸州老窖、五粮液、剑南春、汾酒、西凤酒、市售或自酿二锅头酒中的一种。

作为本发明的另一优选技术方案，所述步骤5)中，发酵原浆与中草药浸膏、酒的质量比为0.008-0.01：0.05-0.08：1.6-1.8合并后均质罐装获得混悬体成品；

或，发酵原浆中与中草药干粉、酒的质量比为0.002-0.004：0.05-0.08：1.6-1.8合并后均质罐装获得产品。

本发明所述的方法制备得到的原浆酒。

本发明的有益效果在于：

1、本发明的天然有机富硒延年养颜藏虫夏草原浆酒使用的菌种是从西藏海拔4000-5000的藏虫草分离筛选并经中国科学院微生物研究所鉴定的虫草菌种A20140822，其发酵液有效成分均高于CN102746974B发酵液，用其菌种生产藏虫草酒并申报发明专利具有使用菌种性创新。

2、本发明的天然有机富硒延年养颜藏虫夏草原浆酒设计为需要延年养颜和日常补充天然雄性激素及显著提高免疫力需求的男女消费者设计的功能保健商品，其配方为藏虫夏草中分离编号A20140822藏虫草菌丝体深层液体发酵原浆天与中药麦冬、玉竹、山萸肉、肉苁蓉和淫羊藿、天然富硒甘味绞股蓝总皂苷、天然富硒甘味绞股蓝总多糖、天然富硒甘味绞股蓝甜味素、黄芪、西洋参提取液和纯粮酿制原基白酒、甜酒、黄酒、葡糖酒勾兑而成，酒度5度-60度，其中药提取成分是根据中医中药理论科学选用具有药效协同作用的中药配伍。

3、本发明创造性的将冬虫夏草菌丝体发酵酒技术从一次发酵发展为二次发酵冬虫夏草原浆酒生产技术，生产的冬虫夏草酒产品活性物质高于一次发酵酒1—30倍以上。

4、本发明根据微生物发酵代数增加发酵液有效成分含量变少，无效成分增多和微生物发酵进入对数期后无效成分增多特性，创造性的将一、二、三、四次发酵液勾兑的原浆酒划分为特等藏虫草原浆酒、一级藏虫草原浆酒、二级藏虫草原浆酒、三级藏虫草原浆酒。

5、藏虫草原浆酒加入的中草药提取有效成分分离纯化过程中，中草药原料在常温膨化机膨化后加水浸润后用超声波提取机提取，用分子膜机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白，再脱水浓缩。克服了现有技术使用粉碎机粉碎原料再用沸水煮提取所造成的提取不完全缺陷、有效防止了原料提取过程中有效成分降解、生理活性降低等问题。

6、藏虫草发酵液活性菌体细胞破壁过程中，将活体菌丝液使用卫生级胶体磨适度研磨，再用高压流体纳米均质机破碎，形成纳米细度混悬胶液，使细胞内物质充分渗出，避免了藏虫草发酵菌丝体细胞破壁形成原浆过程中重金属超标问题，使产品质量更好。结合巴氏灭菌技术，即实现灭菌又不降解本产品有效成分，充分保证了产品保健功效。

7、藏虫草菌丝体发酵液用常温减压离心浓缩机快速浓缩脱水并结合用冷冻干燥机脱水处理工艺，实现了浓缩提取物在不降解产品有效成分和不降低有效成分活性前提下实现脱水。

8、本发明选用富集有机硒的甘味绞股蓝在种植过程中使用生产达到有机认证的富硒菌剂肥、生物有机富硒肥，生产出达到有机认证的富含硒多糖、硒总皂苷的甜味绞股蓝原料，用从富硒甘味绞股蓝中提取得到的硒多糖、硒总皂苷作为有机硒原料生产天然有机富硒延年养颜藏虫夏草原浆酒，即可补足人和动物需要的硒，又提高了甘味绞股蓝多糖、总皂苷的医疗保健功效。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例中，如无特别说明，所使用的技术手段为本领域常规的技术手段。

实施例1：

藏虫夏草酱香型保健酒的制备步骤方法如下：

(1)藏虫草斜面菌种的培养

取生长西藏海拔4000-5000米出的鲜藏虫草，进行藏虫夏草菌的分离筛选(保藏号CCTCCM2015707)，获得的A20140822菌种单菌落置斜面培养基上进行培养，制得斜面菌种；斜面培养所采用的培养基为PDA培养基，在15～25℃下培养10天。

(2)液体药瓶菌种的制备

取上述培养的斜面固体菌种在无菌条件下接种液体液体培养基里培养，制得液体菌种；其中液体培养基的成分和重量如下土豆2200克，葡萄糖180克，蛋白胨20克，酵母膏15克，硫酸镁6克，磷酸二氢钾5克，自然pH值，用水定容到10L；用接种环将一环A20140822菌种的试管种接种到装有100ml液体培养基的500ml三角瓶中进行摇瓶培养，摇床培养时摇床转速150-200转/min，培养温度20℃，最大菌丝生物量达5.5g/L结束。

(3)连续二次深层发酵扩大培养

发酵罐内培养基成分和重量为：小米200000g，葡萄糖15000g，白糖5000g，硫酸二氢钾500g，硫酸镁250g，蛋白胨7000g，酵母浸膏1500g，氨基酸150g，维生素VB110g，加水至5000L。

其过程如下：摇瓶种子液接种量按发酵罐液体培养基体积总量10％接入摇瓶种子液，在23℃，通风比1:0.6以及培养内压为0.05MPa的条件下，连续发酵72h，此时pH为4.0，菌丝体自然沉降100％。

然后，在无菌条件下按发酵液1份，53度酱香白酒1.13份将酒加入发酵液中，在23℃，通风比1:0.6，培养内压为0.05MPa的条件下，继续连续发酵6h-24h，ph为4.0菌丝体自然沉降100％结束发酵。

(4)活性菌体细胞破壁

将二次发酵菌液使用卫生级胶体磨适度研磨，再用高压流体纳米均质机在10000psi破碎细胞壁，形成纳米细度混悬胶液，在30℃下保温放置1.5小时，使细胞内物质充分渗出，得到藏虫草菌丝体发酵原浆。

(5)中药原料配伍和用量及前处理：将麦冬42kg，玉竹40kg，山萸肉42kg，肉苁蓉38kg，淫羊藿22kg，甘味绞股蓝2kg，西洋参0.5kg、黄芪1kg混合后用低温膨化机膨化后，加出16倍量除离子水浸润2h后用超声波提取机提取，提取液用超滤膜、纳滤膜、反渗透膜逐级链接的分子膜分离机(美国GE，管式膜)除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白和大部分水，然后冷冻干燥得纯度70％-98％的上述中药原料干粉末状有效成分。

(6)勾兑28度藏虫夏草酱香型保健原浆酒

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原浆、中草药提取液、酒按照质量比为1：0.08：1.6合并后均质罐装获得混悬体成品，灌装。

实施例2、60度白酒藏虫草原浆酒的生产

步骤(1)至(4)的方法同实施例1。

(5)中药原料配伍和用量及前处理：将配伍麦冬38kg，玉竹35kg，山萸肉38kg，肉苁蓉38kg，淫羊藿22kg，甘味绞股蓝1kg，西洋参0.1-kg、黄芪0.5kg混合后用低温膨化机膨化后，加10倍量去离子水浸润2h后用超声波提取机提取，提取液用美国GE分子管式膜、超滤膜、纳滤膜、反渗透膜联接的分子膜机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白和大部分水，再用常温减压离心浓缩机脱水浓缩至含干物质40％，得浸膏备用。

(6)勾兑60度白酒：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药浸膏和99度纯粮酿制原基白酒(汾酒)按照质量比为0.8：0.07：1.8合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例3、12度藏虫夏草原浆米酒的生产

步骤(1)至(3)的方法同实施例1。

步骤(4)发酵结束后，用固液离心机分离出鲜菌丝2kg破壁浸入10L39度五粮液白酒中密封陈化0.5年后产生独有的十分宜人的虫草酒香气后，按比例配方加入中药提取物制得39度藏虫夏草原浆酒。

(5)中药原料配伍和用量及前处理：将配伍麦冬40kg，玉竹38kg，山萸肉40kg，肉苁蓉36kg，淫羊藿20kg，甘味绞股蓝1.5kg，西洋参0.3kg、黄芪0.8kg混合后用低温膨化机膨化后，加10倍量去离子水浸润2h后用超声波提取机提取，提取液用美国GE分子管式膜、超滤膜、纳滤膜、反渗透膜联接的分子膜机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白，再用常温减压离心浓缩机脱水浓缩至含干物质50％，再用冷冻干燥机干燥成粉末备用。

(6)勾兑12度藏虫草原浆米酒：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药浸膏、35度五粮液和6度米酒按照质量比为0.8：0.06：1.7合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例4、10度藏虫夏草原浆黄酒生产技术

步骤(1)至(5)的方法同实施例3。

(6)勾兑10度黄酒：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药提取液和10度黄酒按照质量比为0.7：0.07：1.6过滤得透明藏虫夏草原浆黄酒或不过滤合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例5、18度藏虫草原浆黄酒生产技术

步骤(1)至(5)的方法同实施例1。

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药提取液和18度黄酒按照质量比为2：0.06：1.6或合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例6、30度藏虫草原浆黄酒生产技术

步骤(1)至(5)的方法同实施例2。

(6)勾兑30度黄酒获取成品：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药浸膏和30度黄酒按照质量比0.008：0.06：1.6合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例7、10度藏虫草原浆干红葡萄酒生产技术

步骤(1)至(5)的方法同实施例1。

(6)勾兑葡糖酒后获取成品：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药提取液和10度干白葡萄酒酒按照质量比为2：0.06：1.7或合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例8、15度藏虫草原浆半甜葡萄酒生产技术

步骤(1)至(5)的方法同实施例1。

(6)勾兑葡糖酒后获取成品：

将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原液、中草药提取液和15度半甜葡萄酒酒按照质量比为3：0.06：1.7或合并后均质罐装获得混悬体成品。

实施例1-8所得原浆酒进行理化测试，结果见下表1和表2。

表1：成分检测结果

表2成分检测结果

各实施例制备的藏虫夏草原浆酒中，水解氨基酸总量>0.156g/kg、游离氨基酸总量>0.035g/kg，汞<0.03mg/kg、砷<0.05mg/kg、镉<0.01mg/kg、锗<0.01mg/kg、铜<0.26mg/kg、铅<0.05mg/kg、锑<0.05mg/kg、镍<0.05mg/kg,无农残成分、无有害合成物。

以上的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。

Claims (10)

1.一种工业化生产有机富硒藏虫草原浆酒的方法，其特征在于，包括步骤：

1)藏虫夏草斜面菌种的培养

取海拔4000-5000米生长的天然藏虫夏草虫体和子座进行A20140822菌种分离筛选，在PDA斜面培养基上控温15-25℃下培养7天-15天进行复壮培养，制得斜面菌种；

斜面菌种接种到摇瓶种子液培养基中，控制温度15-25℃摇床培养36-108小时，制得摇瓶种子液；

2)深层发酵扩大培养，加酒再连续发酵

在无菌条件下，按发酵罐液体培养基体积的8-15％加入藏虫草A20140822斜面摇瓶种子液进行发酵罐发酵，控温15-23℃，通风比1:0.6-0.8以及发酵罐内压为0-0.05MPa的条件下，连续发酵33h～40h，得到活体菌液后，再加质量为活体菌液1.0-1.5倍的纯粮酿制原基白酒、甜酒、黄酒、葡糖酒中的一种，在控温15-23℃，通风比1:0.6-0.8以及发酵罐内压为0-0.05MPa的条件下，二次连续发酵6h-24h，用胶体磨和高压纳米均质机将两次连续发酵的菌丝体细胞破壁，形成混悬胶液，得到藏虫夏草菌丝体发酵原浆；

3)制备中草药提取物

称取如下重量份的中药原料：麦冬38-42份，玉竹35-40份，山萸肉38-42份，肉苁蓉30-38份，淫羊藿15-22份，富硒甘味绞股蓝1-2份，西洋参0.1-0.5份、黄芪0.5-1份，用低温膨化机膨化后，加入8-16倍重量水浸润后用超声波提取机提取，将其提取液体用固液分离机除杂，将离心清液用膜分离得纯度70％-98％中草药有效成分；

4)用两次连续发酵的藏虫草菌丝体破壁形成的原浆，添加提取纯化的中草药有效成分及酒：将上述制得的藏虫草菌丝体发酵原浆、纯化的中草药有效成分和酒发酵用白酒、米酒、甜酒、黄酒、葡萄酒中的一种，按照质量比为1-3：0.05-0.15：1.8-2.4勾兑产品；或将含水30％-70％浸膏或含水6-8％干粉加入发酵原浆酒，再用酒发酵用白酒、米酒、甜酒、黄酒、葡萄酒中的一种，按照质量比为1-3：0.05-0.15：1.8-2.4勾兑产品均质灌装。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，摇瓶种子液培养基的配制比例为：土豆1800-2200克，葡萄糖180-220克，蛋白胨20-40克，酵母膏5-15克，硫酸镁4-6克，磷酸二氢钾5-15克，用水定容到10L—20L；摇床培养时摇床转速150-200转/min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，发酵罐液体培养基的配制比例为：小米200000-500000g，葡萄糖10000-15000g，白糖2000-5000g，硫酸二氢钾500-1800g，硫酸镁100-2500g，蛋白胨5000-8000g，酵母浸膏1000-2000g，氨基酸100-200g，维生素VB110g，用水定容到2500L-5000L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，用高压流体纳米机在500-30000psi均质机破碎细胞壁，形成混悬胶液，在25-40℃下保温放置1-1.5小时，使细胞内物质充分渗出，得到藏虫夏草菌丝体发酵原浆。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)中，用低温膨化机膨化后，加入8-16倍量离子水浸润1-3h后用超声波提取剂提取，提取液用超滤膜、纳滤膜、反渗透膜逐级链接的膜分离机除去鞣制、叶绿素、粘液质、水不溶性蛋白，得纯化的中草药提取液备用；或再用常温减压离心浓缩机脱水浓缩含干物质20％-70％，或再将其用冷冻干燥机干燥成含水7％的粉末。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)中，所述白酒为粮食酒，所述粮食酒为28度、38度、42度、45度、50度、52度、60度白酒中的一种。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)用固液离心机分离出鲜菌丝后，按鲜菌丝1kg浸入10kg—100kg的50度—70度白酒，密封陈化0.5年—10年后，加入中药提取物，鲜菌丝、含水20％-80％浸膏或含水6-8％干粉、酒质量比为0.016-0.1：0.05-0.08：1.6-1.8；。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，藏虫草菌丝体发酵原浆、酒的质量比为0.016-0.1：0.05-0.08：1.6-1.8。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5)中，发酵原液菌丝干粉、含水20％-80％浸膏或含水6-8％干粉、酒的质量比为0.002-0.004：0.05-0.08：1.6-1.8。

10.权利要求1～9任一所述的方法制备得到的原浆酒。