CN107954956B - 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用 - Google Patents

一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107954956B
CN107954956B CN201711248715.9A CN201711248715A CN107954956B CN 107954956 B CN107954956 B CN 107954956B CN 201711248715 A CN201711248715 A CN 201711248715A CN 107954956 B CN107954956 B CN 107954956B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fenugreek
lactone
eluent
temperature
solvent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201711248715.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107954956A (zh
Inventor
刘鸿
李小兰
黄世杰
黄善松
董振山
张峻松
周芸
潘玉灵
兰柳妮
周奕
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Tobacco Guangxi Industrial Co Ltd
Original Assignee
China Tobacco Guangxi Industrial Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Tobacco Guangxi Industrial Co Ltd filed Critical China Tobacco Guangxi Industrial Co Ltd
Priority to CN201711248715.9A priority Critical patent/CN107954956B/zh
Publication of CN107954956A publication Critical patent/CN107954956A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107954956B publication Critical patent/CN107954956B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/40—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C07D307/46—Doubly bound oxygen atoms, or two oxygen atoms singly bound to the same carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/28—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances
    • A24B15/30—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances
    • A24B15/36—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring
    • A24B15/40—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms
    • A24B15/403—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms having only oxygen as hetero atoms
    • A24B15/406—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms having only oxygen as hetero atoms in a five-membered ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

本发明提供了一种葫芦巴内酯分离制备方法及在卷烟中应用，以葫芦巴籽为原料，葫芦巴籽经烘焙、萃取、浓缩得到葫芦巴酊剂或浸膏，以有机溶剂为洗脱剂体系，利用硅胶柱层析分离得到葫芦巴内酯。经GC‑MS检测葫芦巴内酯GC纯度>99％。本发明所述的方法操作简单，设备要求低，耗时较少。

Description

一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中 应用
技术领域
本专利涉及一种从天然香料中分离制备单体香料的方法，具体涉及种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用。
背景技术
葫芦巴内酯又名糖内酯、3-羟基-4,5-二甲基-2(5H)呋喃酮，天然主要存在于葫芦巴浸膏中，是葫芦巴浸膏的关键香气组分，也是甘蔗制糖残余物中重要的香气组分，具有非常强烈持久的甘蔗糖蜜样的香气，略带焦香果味，可用作肉制品、汤料、调味品等，是一种良好的食品增香剂，也可用作卷烟香精香料。在卷烟香精中使用，可增加烟草的焦甜香味、增添烟香、掩盖杂气、降低卷烟刺激性、改善抽吸口感。
从葫芦巴浸膏中分离葫芦巴内酯国内外未见报道，国内仅有关于葫芦巴内酯合成的相关文章。例如陈永宽(2002)以丙二酸二乙酯为原料建立了一种葫芦巴内酯的简便合成方法，但是该方法操作繁琐。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种从葫芦巴中分离葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用，此种方法可以快速得到纯度较高的葫芦巴内酯。
本发明的技术方案，以葫芦巴为原料，以硅胶为吸附剂，以有机溶剂为洗脱剂体系，工艺步骤如下。
(1)样品前处理，称取葫芦巴，经有机溶剂萃取、浓缩得到葫芦巴酊剂或浸膏，然后加入去离子水，然后加入萃取剂涡旋振荡萃取，离心，溶液分层，对去离子水溶解的葫芦巴浸膏萃取三次，合并三次萃取剂。
进一步的所述步骤包括：
(1)葫芦巴浸膏与加入去离子水称样质量与体积按照g/mL的料液比值为1:10，加入去离子水与加入萃取剂体积比为1:1。
进一步的所述步骤(1)涡旋振荡萃取的时间为5.00min。
(2)装柱，常规湿法装柱将吸附剂装入分离柱。
进一步的所述步骤(2)硅胶的优选粒度为200—300目。
(3)上样，将处理后的样品用乙酸乙酯溶解加入分离柱。
(4)洗脱，用自动馏分收集器控制洗脱液流速控制流速为3mL/min，分管收集洗脱液。
进一步的所述步骤(4)洗脱体系中石油醚与乙酸乙酯优选体积配比为1:0、8:1、6:1、1:1四个梯度。
(5)定性检测，对每管收集的洗脱液用GC—MS定性检测。
(6)葫芦巴内酯的获取，合并相同组分的洗脱液，用旋转蒸发器减压浓缩除去溶剂，即得到葫芦巴内酯。
进一步的所述步骤(6)旋转蒸发器加热温度为35℃将溶剂蒸干，然后温度升到50℃，保持15min，以保证溶剂完全除去。
一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用，所采用的仪器条件如下：
气相色谱条件：采用HP-5MS型60m*0.25mm*0.25μm的石英熔融毛细管柱；进样量1μL；载气：He；流速：1mL/min；进样口温度280℃；程序升温条件：50℃，保持2min，10℃/min升到280℃，保持10min，300℃后运行5min。
质谱条件：电子轰击离子源(EI)，电子电流为70ev；离子源温度230℃，四级杆温度150℃，传输线温度280℃；溶剂延迟：7min。
本发明所述的方法操作简单，设备要求低，耗时较少。
本发明所述方法确定的石油醚—乙酸乙酯洗脱剂体系具有理想的分离葫芦巴浸膏中葫芦巴内酯。
本发明所述方法采用硅胶为吸附剂，并对硅胶的粒度进行了优选，在常压下即可从葫芦巴浸膏中分离出纯度较高的葫芦巴内酯。
本发明所述方法可以使葫芦巴浸膏中的葫芦巴内酯得到有效分离，葫芦巴内酯的GC纯度达到>99％。图1为所分离葫芦巴内酯总离子流图。
附图说明
图1为所分离葫芦巴内酯总离子流图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述本发明。以下实施例仅用于对本发明的进一步具体描述。
分离制备实施例1
本实施例中以葫芦巴浸膏为原料，萃取后样品葫芦巴内酯GC纯度为30.51％，以200—300目粒度硅胶为吸附剂，以石油醚：乙酸乙酯＝1:0、10:1、6:1、1:1(体积比)的石油醚—乙酸乙酯溶液为洗脱剂体系。
(1)样品前处理，称取葫芦巴浸膏13.41g于500.00mL三角瓶中，加入去离子水130.00mL，然后加入二氯甲烷130.00mL做萃取剂，摇匀，取适量于离心管中涡旋振荡，离心后，溶液分层，取下层二氯甲烷相于茄形瓶中，为保证萃取完全对去离子水溶解的样品萃取三次。合并下层二氯甲烷相，用旋转蒸发仪将溶剂除去。
(2)装柱，常规湿法装柱将吸附剂装入分离柱，分离柱为Φ0.26x70.00cm玻璃柱。
(3)上样，用2.00mL乙酸乙酯将处理后的样品溶解，加入分离柱。
(4)洗脱，用自动馏分收集器控制洗脱液流速控制流速为3.00mL/min，分管收集洗脱液。
(5)定性检测，用GC—MS对每管收集的洗脱液进行定性检测。
(6)葫芦巴内酯的获取，合并相同的成分洗脱液，用旋转蒸发器将溶剂除去，加热温度为35.00℃，然后温度升到50.00℃，保持15.00min。然后将所得葫芦巴内酯单体用乙醇溶解，取适量于色谱瓶经GC—MS检测，葫芦巴内酯GC纯度为97.11％。
分离制备实施例2
本实施例中得到葫芦巴浸膏或酊剂为样品葫芦巴内酯GC纯度为5.96％，以200—300目粒度硅胶为吸附剂，以石油醚：乙酸乙酯＝1:0、10:1、6:1、1:1(体积比)的石油醚—乙酸乙酯溶液为洗脱剂体系。
(1)样品前处理，称取葫芦巴浸膏14.23g于500.00mL三角瓶中，加入去离子水142.00mL，然后加入石油醚142.00mL做萃取剂，摇匀，取适量于离心管中涡旋振荡，离心后，溶液分层，取上层石油醚相于茄形瓶中，为保证萃取完全对去离子水溶解的样品萃取三次。合并上层石油醚相，用旋转蒸发仪将溶剂除去。
(2)装柱，常规湿法装柱将吸附剂装入分离柱，分离柱为Φ0.26x70.00cm玻璃柱。
(3)上样，用2.00mL乙酸乙酯将处理后的样品溶解，加入分离柱。
(4)洗脱，用自动馏分收集器控制洗脱液流速控制流速为3mL/min，分管收集洗脱液。
(5)定性检测，用GC—MS对每管收集的洗脱液进行定性检测。
(6)葫芦巴内酯的获取，合并相同的成分洗脱液，用旋转蒸发器将溶剂除去，加热温度为35.00℃，然后温度升到50.00℃，保持15.00min。然后将所得葫芦巴内酯单体用乙醇溶解，取适量于色谱瓶经GC—MS检测，葫芦巴内酯GC纯度为99.65％。
本实施例中以葫芦巴浸膏为原料，处理后样品葫芦巴内酯GC纯度为12.61％，以200—300目粒度硅胶为吸附剂，以石油醚：乙酸乙酯＝1:0、10:1、6:1、1:1(体积比)的石油醚—乙酸乙酯溶液为洗脱剂体系。
(1)样品前处理，称取葫芦巴浸膏13.71g于500.00mL三角瓶中，加入去离子水137.00mL，然后加入石油醚137.00mL做萃取剂，涡旋振荡，离心后，溶液分层，取上层石油醚相于茄形瓶中，为保证萃取完全对去离子水溶解的样品萃取三次。合并上层石油醚相，用旋转蒸发仪将溶剂除去。
(2)装柱，常规湿法装柱将吸附剂装入分离柱，分离柱为Φ0.26x70.00cm玻璃柱。
(3)上样，用2.00mL乙酸乙酯将处理后的样品溶解，加入分离柱。
(4)洗脱，用自动馏分收集器控制洗脱液流速控制流速为3mL/min，分管收集洗脱液。
(5)定性检测，用GC—MS对每管收集的洗脱液进行定性检测。
(6)葫芦巴内酯的获取，合并相同的成分洗脱液，用旋转蒸发器将溶剂除去，加热温度为35.00℃，然后温度升到50.00℃，保持15.00min。然后将所得葫芦巴内酯单体用乙醇溶解，取适量于色谱瓶经GC—MS检测，葫芦巴内酯GC纯度为99.01％。
应用实施例
将分离的葫芦巴浸膏用乙醇稀释，用香精注射剂注射到空白卷烟中，并按照《GB5606.4-2005烟草及烟草制品感官评价方法》进行感官评吸。评吸结果取平均值，其结果详情见表1。所述注射量为占烟丝的重量百分比。
表1：感官评吸结果。
Figure BDA0001491237210000031
从表1中评析结果可以看出，葫芦巴内酯在空白卷烟中最适添加量为十万分之1，在卷烟中添加量大于十万分之1，能够增加香气量，增添烟香，添加量大于十万分之1时，烟气的协调性变差，当添加量在十万分之0.5到十万分之1之间能够降低刺激性。

Claims (1)

1.一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法，其特征在于：
以葫芦巴籽为原料，以硅胶为吸附剂，以有机溶剂为洗脱剂体系，经有机溶剂提取、利用硅胶柱层析分离得到葫芦巴内酯；所述方法包括如下步骤：
(1)样品前处理：称取葫芦巴，经有机溶剂萃取、浓缩得到葫芦巴酊剂或浸膏；然后加入去离子水，然后加入萃取剂涡旋振荡萃取，离心，溶液分层，对去离子水溶解的葫芦巴浸膏萃取三次，合并三次萃取剂；
(2)装柱：常规湿法装柱将吸附剂装入分离柱；
(3)上样：将处理后的样品用乙酸乙酯溶解加入分离柱；
(4)洗脱：用自动馏分收集器控制洗脱液流速控制流速，分管收集洗脱液；
(5)定性检测：对每管收集的洗脱液用GC—MS定性检测；
(6)葫芦巴内酯的获取：合并相同组分的洗脱液，用旋转蒸发器减压浓缩除去溶剂，即得到葫芦巴内酯；
所述步骤(1)中葫芦巴浸膏与加入的去离子水按g/mL计的料液比值为1:10，加入去离子水与加入萃取剂体积比为1:1；所用萃取溶剂为选自二氯甲烷、石油醚、乙醚或乙酸乙酯的有机溶剂；
所述步骤(1)中涡旋振荡萃取的时间为5min；
所述步骤(2)中硅胶的粒度为100—500目；
所述步骤(4)中洗脱时，洗脱液流速控制为3mL/min，以石油醚：乙酸乙酯体积比为1:0、10:1、6:1、1:1的石油醚—乙酸乙酯溶液为洗脱剂体系；
所述步骤(6)中旋转蒸发器加热温度为35℃，将溶剂蒸干，然后温度升到50℃，保持15min，以保证溶剂完全除去；
所采用的仪器条件如下：
气相色谱条件：采用HP-5MS型60m*0.25mm*0.25μm的石英熔融毛细管柱；进样量1μL；载气：He；流速：1mL/min；进样口温度280℃；程序升温条件：50℃，保持2min，10℃/min升到280℃，保持10min，300℃后运行5min；
质谱条件：电子轰击离子源，电子电流为70ev；离子源温度230℃，四级杆温度150℃，传输线温度280℃；溶剂延迟：7min。
CN201711248715.9A 2017-12-01 2017-12-01 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用 Active CN107954956B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711248715.9A CN107954956B (zh) 2017-12-01 2017-12-01 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711248715.9A CN107954956B (zh) 2017-12-01 2017-12-01 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107954956A CN107954956A (zh) 2018-04-24
CN107954956B true CN107954956B (zh) 2021-09-07

Family

ID=61963161

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711248715.9A Active CN107954956B (zh) 2017-12-01 2017-12-01 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107954956B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108982743B (zh) * 2018-08-17 2021-04-20 福建中烟工业有限责任公司 检测烟草制品和/或烟用香精香料中葫芦巴内酯的方法
CN109007959B (zh) * 2018-09-20 2021-02-26 云南中烟工业有限责任公司 一种葫芦巴净油的高效制备方法及用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105062678A (zh) * 2015-07-31 2015-11-18 湖北中烟工业有限责任公司 一种烟用葫芦巴浸膏的制备方法
CN105669612A (zh) * 2016-03-07 2016-06-15 郑州轻工业学院 一种3-羟基-4-甲基-2（5氢）-呋喃酮的简便制备方法
CN106036992A (zh) * 2016-05-31 2016-10-26 湖北中烟工业有限责任公司 用超临界萃取法从葫芦巴中提取烟用添加剂的方法
CN106957322A (zh) * 2017-04-01 2017-07-18 云南中烟工业有限责任公司 一种能改善卷烟抽吸喉部舒适性的异苯并呋喃类化合物及其制备方法与应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1195099B1 (en) * 2000-08-11 2017-03-15 Takasago International Corporation Deodorant composition and its application

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105062678A (zh) * 2015-07-31 2015-11-18 湖北中烟工业有限责任公司 一种烟用葫芦巴浸膏的制备方法
CN105669612A (zh) * 2016-03-07 2016-06-15 郑州轻工业学院 一种3-羟基-4-甲基-2（5氢）-呋喃酮的简便制备方法
CN106036992A (zh) * 2016-05-31 2016-10-26 湖北中烟工业有限责任公司 用超临界萃取法从葫芦巴中提取烟用添加剂的方法
CN106957322A (zh) * 2017-04-01 2017-07-18 云南中烟工业有限责任公司 一种能改善卷烟抽吸喉部舒适性的异苯并呋喃类化合物及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Thermal generation of 3-amino-4,5-dimethylfuran-2(5H)-one, the postulated precursor of sotolone, from amino acid model systems containing glyoxylic and pyruvic acids;Paula Vanessa Guerra等;《J. Agric. Food Chem.》;20110319;第59卷;第4699-4704页 *
胡芦巴籽中特征性香味成分分析;任晓锋等;《天然产物研究与开发》;20101231;第22卷;第1065页左栏第1行-第1068页右栏第1行 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107954956A (zh) 2018-04-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107149161B (zh) 一种低烟碱烟草提取物及其制备方法
CN107954956B (zh) 一种基于柱层析技术分离制备葫芦巴内酯的方法及在卷烟中应用
CN108760924B (zh) 一种滤棒香线和爆珠特征成分的提取检测方法
CN104849393A (zh) 一种烟草中糖苷键合态香味成分的测定方法
CN106136302B (zh) 一种烟用丁香油的微胶囊双水相纯化方法及其应用
CN110041303B (zh) 从废烟叶中提取新植二烯、类胡萝卜素和烟碱的工艺方法
CN102965199B (zh) 一种茶叶香气的提取方法和应用
CN107011308A (zh) 从瓯柑果实中分离纯化多甲氧基黄酮类化合物的方法
CN112321450B (zh) 一种羟基-α-山椒素单体的制备方法
CN106093252A (zh) 一种卷烟主流烟气中性香气成分的分离方法
CN105259266B (zh) 检测啤酒和麦汁中的四种麦香类风味物质的方法
US4970085A (en) Process for making improved citrus aqueous essence and product produced therefrom
CN104957761B (zh) 水果中游离态和键合态香气物质在卷烟中的应用
CN111035051B (zh) 利用废弃烟蒂制备具有致香特性的焦油提取物的方法及其在卷烟中的应用
CN111004679B (zh) 细梗香草提取物及香精
CN109705983B (zh) 一种同时萃取植物精油及纯露的超临界co2萃取装置及方法
CN108017515B (zh) 一种分离纯化烟草中赖百当二萜类成分的方法
CN110823649A (zh) 一种卷烟主流烟气中有机酸的收集方法和检测方法
CN114176246B (zh) 白酒香型加热不燃烧发烟颗粒及其制备方法与应用
CN108384276B (zh) 一种紫甘薯色素及其生产方法
CN111000284B (zh) 一种提取云烟浸膏中的致香物质的方法、香料以及烟支
CN109007957B (zh) 一种烟草提取物、其制备方法及烟草制品
CN107033017A (zh) 一种快速制备高纯度羟基‑γ‑山椒素的方法
CN108445093B (zh) 一种秘鲁浸膏特征组分分离、制备的方法
CN113881501B (zh) 一种降低云烟浸膏精制物中烟碱含量的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant