CN107912419A - 一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 - Google Patents
一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107912419A CN107912419A CN201710940304.XA CN201710940304A CN107912419A CN 107912419 A CN107912419 A CN 107912419A CN 201710940304 A CN201710940304 A CN 201710940304A CN 107912419 A CN107912419 A CN 107912419A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peripheral blood
- cell
- stock solution
- human peripheral
- single nucleus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
- A01N1/02—Preservation of living parts
- A01N1/0205—Chemical aspects
- A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
- A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physiology (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明公开了一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜8‑15％、聚乙二醇6‑10％、人血白蛋白5‑10％，余量为勃脉力A，还包括海藻糖15‑30mg/ml、羟乙基淀粉15‑20mg/ml、β‑葡聚糖10‑20mg/ml、葡萄糖50‑100mg/ml和维生素C 1‑5mg/ml。冻存方法包括：配制冻存液，提取人外周血单个核细胞，然后重悬细胞，再加入冻存液置于‑80℃冻存12‑14h，然后再转入液氮中保存。采用该冻存液保存人外周血单个核细胞时，其细胞存活率高，细胞活性较强，复苏后细胞扩增周期短。
Description
技术领域
本发明属于细胞冻存液技术领域，具体涉及一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法。
背景技术
人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)，指外周血中具有单个核的细胞，包含淋巴细胞，单核细胞(monocyte)、树突状细胞和造血干细胞等。PBMC是制备细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)的种子细胞，也是诱导生成特定淋巴细胞的种子细胞。在实际临床使用中，通常会在患者健康时提取人外周血单个核细胞进行冻存，在需要时再对其进行诱导扩增，因此冻存前后人外周血单个核细胞的质量和数量直接关系到诱导CIK细胞的周期和细胞质量，这就要求在人外周血单个核细胞冻存的过程中，将细胞的损伤降到最低，使细胞在复苏后有较高的活率，复苏后细胞形态规则，扩增周期短。
但现有的人外周血单个核细胞的冻存液效果不佳，采用该冻存液保存人外周血单个核细胞时，其细胞存活率低，细胞活性较弱，复苏后细胞扩增周期长。
发明内容
针对现有技术中的上述不足，本发明提供了一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法，可有效解决采用现有的冻存液保存人外周血单个核细胞时，其存在细胞存活率低，细胞活性较弱，复苏后细胞扩增周期长的问题。
为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜8-15％、聚乙二醇6-10％、人血白蛋白5-10％，余量为勃脉力A，还包括海藻糖15-30mg/ml、羟乙基淀粉15-20mg/ml、β-葡聚糖10-20mg/ml、葡萄糖50-100mg/ml和维生素C 1-5mg/ml。
进一步地，一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜12％、聚乙二醇8％、人血白蛋白7％，余量为勃脉力A，还包括海藻糖25mg/ml、羟乙基淀粉18mg/ml、β-葡聚糖15mg/ml、葡萄糖50mg/ml和维生素C 3mg/ml。
一种人外周血单个核细胞的保存方法，包括以下步骤：
(1)按上述配方配制人外周血单个核细胞的冻存液；
(2)采集新鲜的抗凝人外周血进行离心，提取外周血单个核细胞，然后采用磷酸盐清洗；
(3)用勃脉力A重悬清洗后的外周血单个核细胞，得细胞悬液，然后向细胞悬液中加入1-1.2倍体积的冻存液，分装于细胞冻存管中；
(4)将冻存管置于-80℃冻存12-14h，然后再转入液氮中保存。
进一步地，步骤(3)中冻存液的配制过程为：将二甲基亚砜、聚乙二醇、人血白蛋白和勃脉力A混匀，然后再加入其余物质，使其达到各自终浓度；其中勃脉力A为中国药监局批准的用于临床的复方电解质注射液，其组分为：每1L包含氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g和氯化镁0.30g。
进一步地，步骤(3)中用勃脉力A重悬细胞以使得人外周血单个核细胞的浓度为最终冻存液中外周血单个核细胞浓度的两倍为准。
进一步地，步骤(3)中冻存管中，外周血单个核细胞的密度为0.5-1.2×107个/ml。
本发明提供的一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法，具有以下有益效果：
(1)二甲基亚砜易穿透细胞，在冷冻保存过程中可使冰点下降，减少细胞内形成冰晶的机会，从而减少冰晶对细胞的损伤；聚乙二醇水溶性好，熔点低，可有效脱除细胞内及细胞间隙中的流动水分，其低熔点也保证了细胞外溶液在降温过程中不形成冰晶，从而降低了对细胞的损伤；海藻糖富含羟基，是良好的玻璃化试剂，可以与细胞膜形成玻璃态基质，减少冰晶形成几率，从而有效避免冰晶产生的伤害；羟乙基淀粉可以促进细胞内及细胞间隙中的流动水分的排出，减少细胞内冰晶的含量。
二甲基亚砜、聚乙二醇、海藻糖和羟乙基淀粉在减少冰晶产生方面具有促进和稳定作用。
(2)在低温冷冻过程中，蛋白质会因氧化作用而导致结构被破坏，而维生素C具有抗氧化作用，可以防止蛋白质发生变化，有效保护了人血白蛋白的功效。
(3)勃脉力A为用于临床的复方电解质注射液，其可以维持细胞电解液平衡，与二甲基亚砜、聚乙二醇、海藻糖和羟乙基淀粉协同减少细胞内冰晶含量。
(4)冻存液中还含有葡萄糖，可为细胞提供一定的营养成分。
(5)本发明提供的冻存液中不含动物血清、人血清、细胞培养基等，可有效避免传播潜在病原体的风险，提高了细胞冻存的安全性，又确保了人外周血单个核细胞的冻存效果；同时，采用本发明提供的冻存液冻存的人外周血单个核细胞复苏后，安全无毒，并且具有较高的存活率和较强的细胞活性，CIK细胞诱导扩增的周期也较短，还可以直接回输人体，且并未引起不适症状。
具体实施方式
实施例1
一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜8％、聚乙二醇6％、人血白蛋白5％、勃脉力A 81％，还包括海藻糖15mg/ml、羟乙基淀粉15mg/ml、β-葡聚糖10mg/ml、葡萄糖50mg/ml和维生素C 1mg/ml。
一种人外周血单个核细胞的保存方法，包括以下步骤：
(1)按上述配方配制人外周血单个核细胞的冻存液：
将二甲基亚砜、聚乙二醇、人血白蛋白和勃脉力A混匀，然后再加入海藻糖、羟乙基淀粉、β-葡聚糖、葡萄糖和维生素C，使其各成分终浓度为15mg/ml、15mg/ml、10mg/ml、50mg/ml和1mg/ml；
(2)采集新鲜的抗凝人外周血进行离心，提取外周血单个核细胞，然后采用磷酸盐清洗；
(3)用勃脉力A重悬清洗后的外周血单个核细胞以使得人外周血单个核细胞的浓度为最终冻存液中外周血单个核细胞浓度的两倍为准，得到细胞悬液，然后向细胞悬液中加入等体积的冻存液，分装于细胞冻存管中，该冻存管中外周血单个核细胞的密度为0.5×107个/ml；
(4)将冻存管置于-80℃冻存12h，然后再转入液氮中保存。
实施例2
一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜15％、聚乙二醇10％、人血白蛋白10％、勃脉力A 65％，还包括海藻糖30mg/ml、羟乙基淀粉20mg/ml、β-葡聚糖20mg/ml、葡萄糖100mg/ml和维生素C 5mg/ml。
一种人外周血单个核细胞的保存方法，包括以下步骤：
(1)按上述配方配制人外周血单个核细胞的冻存液：
将二甲基亚砜、聚乙二醇、人血白蛋白和勃脉力A混匀，然后再加入海藻糖、羟乙基淀粉、β-葡聚糖、葡萄糖和维生素C，使其各成分终浓度为30mg/ml、20mg/ml、20mg/ml、100mg/ml和5mg/ml；
(2)采集新鲜的抗凝人外周血进行离心，提取外周血单个核细胞，然后采用磷酸盐清洗；
(3)用勃脉力A重悬清洗后的外周血单个核细胞以使得人外周血单个核细胞的浓度为最终冻存液中外周血单个核细胞浓度的两倍为准，得到细胞悬液，然后向细胞悬液中加入等体积的冻存液，分装于细胞冻存管中，该冻存管中外周血单个核细胞的密度为0.5×107个/ml；
(4)将冻存管置于-80℃冻存12h，然后再转入液氮中保存。
实施例3
一种人外周血单个核细胞的冻存液，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜12％、聚乙二醇8％、人血白蛋白7％、勃脉力A 73％，还包括海藻糖25mg/ml、羟乙基淀粉18mg/ml、β-葡聚糖15mg/ml、葡萄糖50mg/ml和维生素C 3mg/ml。
一种人外周血单个核细胞的保存方法，包括以下步骤：
(1)按上述配方配制人外周血单个核细胞的冻存液：
将二甲基亚砜、聚乙二醇、人血白蛋白和勃脉力A混匀，然后再加入海藻糖、羟乙基淀粉、β-葡聚糖、葡萄糖和维生素C，使其各成分终浓度为25mg/ml、18mg/ml、15mg/ml、50mg/ml和3mg/ml；
(2)采集新鲜的抗凝人外周血进行离心，提取外周血单个核细胞，然后采用磷酸盐清洗；
(3)用勃脉力A重悬清洗后的外周血单个核细胞以使得人外周血单个核细胞的浓度为最终冻存液中外周血单个核细胞浓度的两倍为准，得到细胞悬液，然后向细胞悬液中加入等体积的冻存液，分装于细胞冻存管中，该冻存管中外周血单个核细胞的密度为0.5×107个/ml；
(4)将冻存管置于-80℃冻存12h，然后再转入液氮中保存。
对比例1
对比例1与实施例3不同之处为：配方中的聚乙二醇用生理盐酸代替，勃脉力A用提取外周血单个核细胞时人外周血中的血浆代替，其余与对比例3相同；保存方法也与实施例3相同。
对比例2
对比例2与实施例3不同之处为：配方中没有海藻糖、羟乙基淀粉、β-葡聚糖、葡萄糖和维生素C，其余与实施例3相同；保存方法也与实施例3相同。
实验例
1、检测细胞复苏率和细胞活率
将实施例1-3和对比例1-2提供的冻存液在对应的冻存条件下冻存一个月，将冻存的细胞在37℃水温下复苏，待完全熔化后，取适量悬液使用台盼蓝染色计数法计算复苏率和细胞活率，结果见表1。
表1细胞复苏率和细胞活率结果
由表1可知，本发明提供的冻存液配方结合相应的冻存程序，可有效提高细胞复苏率和细胞活率，而对比例1和2的细胞复苏率和细胞活率明显低于实施例1-3，尤其是实施例3效果最佳。
2、细胞诱导培养CIK细胞的生长情况
将实施例1-3和对比例1-2中剩余的细胞悬液加入磷酸盐缓冲液离心，清洗，弃其上层清夜，加入细胞因子诱导培养CIK细胞，每天取少量细胞悬液观察细胞形态，并测定其细胞数量，结果见表2。
表2细胞诱导培养CIK细胞的生长情况
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | |
| 1天 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 5天 | 3.30±0.21 | 3.36±0.29 | 3.48±0.32 | 2.27±0.34 | 2.21±0.41 |
| 10天 | 35.39±3.98 | 37.91±4.75 | 43.56±4.61 | 25.83±4.77 | 24.88±4.69 |
| 15天 | 76.21±7.86 | 80.12±8.15 | 88.75±8.48 | 43.12±8.76 | 40.23±9.32 |
表2为诱导培养CIK细胞1天、5天、10天和15天时记录的细胞数量(×107个/ml)，由表2可知，实施例1-3的冻存液及结合相应的冻存方法冻存后的细胞进行诱导培养CIK细胞过程中，在相同的培养时间，实施例1-3培养的细胞数量明显高于对比例1和22，说明采用本发明提供的冻存液及相应的冻存方法来冻存细胞，然后对其诱导培养CIK细胞的周期明显缩短。
3、诱导得到的CIK细胞的检测
用流式细胞仪检测实施例1-3和对比例1-2收获的成熟CIK细胞中CD3+和CD56+T细胞的百分比，所得比值分别为25.36％、26.12％、26.89、17.12％和16.78％。
4、CIK细胞回输结果观测
选取100名受试者回输实施例1-3所得的成熟CIK细胞，回输后观察24h，未出现不良反应。
Claims (6)
1.一种人外周血单个核细胞的冻存液，其特征在于，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜8-15％、聚乙二醇6-10％、人血白蛋白5-10％，余量为勃脉力A，还包括海藻糖15-30mg/ml、羟乙基淀粉15-20mg/ml、β-葡聚糖10-20mg/ml、葡萄糖50-100mg/ml和维生素C 1-5mg/ml。
2.根据权利要求1所述的人外周血单个核细胞的冻存液，其特征在于，按体积分数计，包括以下组分：二甲基亚砜12％、聚乙二醇8％、人血白蛋白7％，余量为勃脉力A，还包括海藻糖25mg/ml、羟乙基淀粉18mg/ml、β-葡聚糖15mg/ml、葡萄糖50mg/ml和维生素C 3mg/ml。
3.一种人外周血单个核细胞的保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)按权利要求1或2所述配方配制人外周血单个核细胞的冻存液；
(2)采集新鲜的抗凝人外周血进行离心，提取外周血单个核细胞，然后采用磷酸盐清洗；
(3)用勃脉力A重悬清洗后的外周血单个核细胞，得细胞悬液，然后向细胞悬液中加入1-1.2倍体积的冻存液，分装于细胞冻存管中；
(4)将冻存管置于-80℃冻存12-14h，然后再转入液氮中保存。
4.根据权利要求3所述的人外周血单个核细胞的保存方法，其特征在于，步骤(3)中冻存液的配制过程为：将二甲基亚砜、聚乙二醇、人血白蛋白和勃脉力A混匀，然后再加入其余物质，使其达到各自终浓度。
5.根据权利要求3所述的人外周血单个核细胞的保存方法，其特征在于，步骤(3)中用勃脉力A重悬细胞以使得人外周血单个核细胞的浓度为最终冻存液中外周血单个核细胞浓度的两倍为准。
6.根据权利要求3所述的人外周血单个核细胞的保存方法，其特征在于，步骤(3)冻存管中，外周血单个核细胞的密度为0.5-1.2×107个/ml。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710940304.XA CN107912419A (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710940304.XA CN107912419A (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107912419A true CN107912419A (zh) | 2018-04-17 |
Family
ID=61895713
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710940304.XA Pending CN107912419A (zh) | 2017-10-11 | 2017-10-11 | 一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107912419A (zh) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108617640A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-10-09 | 吉林省太阳鸟再生医学工程有限责任公司 | 一种脐血单个核细胞冻存液及其应用 |
| CN109619088A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-04-16 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种脂肪间充质干细胞的保存液 |
| CN110140716A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-08-20 | 方艳秋 | 一种外周血单个核细胞改良冻存液 |
| CN110301432A (zh) * | 2019-07-25 | 2019-10-08 | 上海轩锋生物科技有限公司 | 一种新的细胞冻存方法 |
| CN110959606A (zh) * | 2018-09-28 | 2020-04-07 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种免疫效应细胞冻存液及其用途 |
| EP3685665A1 (en) | 2019-01-23 | 2020-07-29 | Carnamedica sp. z o.o. | Preservation of stem cells |
| CN111869659A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-11-03 | 上海雅酶生物医药科技有限公司 | 一种无血清细胞冻存液、制备方法及其使用方法 |
| CN112167245A (zh) * | 2020-10-27 | 2021-01-05 | 深圳华大基因细胞科技有限责任公司 | 用于细胞保存的保护剂 |
| CN112841173A (zh) * | 2021-01-25 | 2021-05-28 | 赵丽歌 | 一种造血干细胞冻存液及冻存方法 |
| CN113475500A (zh) * | 2021-08-09 | 2021-10-08 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种全药级原料肿瘤组织冻存液及其应用 |
| CN114762496A (zh) * | 2021-01-11 | 2022-07-19 | 南京艾尔普再生医学科技有限公司 | 心肌细胞冻存液及其制备方法 |
| CN115088708A (zh) * | 2022-07-22 | 2022-09-23 | 厦门锐杰天川生物科技有限公司 | 外周血单个核细胞长期保存方法 |
| CN115226706A (zh) * | 2022-07-01 | 2022-10-25 | 深圳科诺医学检验实验室 | 一种细胞冻存液和细胞冻存和/或回输的方法 |
| CN115251045A (zh) * | 2022-08-04 | 2022-11-01 | 珠海暨创硒源纳米科技有限公司 | 一种细胞冻存液及其制备方法 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1305705A (zh) * | 2001-01-08 | 2001-08-01 | 卢杲 | 一种长期保存地球所有物种基因和生物样品的方法 |
| EP1901605A2 (de) * | 2005-07-01 | 2008-03-26 | Cytonet GmbH & Co. KG | Lagermedium für zellen |
| CN102669087A (zh) * | 2012-05-15 | 2012-09-19 | 深圳市博泰生物医疗机构管理有限公司 | 一种外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 |
| CN104082277A (zh) * | 2014-07-25 | 2014-10-08 | 成都清科生物科技有限公司 | 一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂及保存方法 |
| CN104623665A (zh) * | 2009-12-08 | 2015-05-20 | 范德比尔特大学 | 用于静脉采集和自体移植的改进的方法和组合物 |
| CN104705291A (zh) * | 2015-04-03 | 2015-06-17 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种脐血单个核细胞冻存液、应用、制备方法 |
| CN104719282A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-24 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种外周血单个核细胞无血清冻存液及冻存方法 |
| CN107094753A (zh) * | 2017-05-31 | 2017-08-29 | 东莞市保莱生物科技有限公司 | 一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法 |
| CN107156108A (zh) * | 2017-05-27 | 2017-09-15 | 魏方萌 | 一种外周血干细胞保存液及制备方法 |
-
2017
- 2017-10-11 CN CN201710940304.XA patent/CN107912419A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1305705A (zh) * | 2001-01-08 | 2001-08-01 | 卢杲 | 一种长期保存地球所有物种基因和生物样品的方法 |
| EP1901605A2 (de) * | 2005-07-01 | 2008-03-26 | Cytonet GmbH & Co. KG | Lagermedium für zellen |
| CN104623665A (zh) * | 2009-12-08 | 2015-05-20 | 范德比尔特大学 | 用于静脉采集和自体移植的改进的方法和组合物 |
| CN102669087A (zh) * | 2012-05-15 | 2012-09-19 | 深圳市博泰生物医疗机构管理有限公司 | 一种外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 |
| CN104082277A (zh) * | 2014-07-25 | 2014-10-08 | 成都清科生物科技有限公司 | 一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂及保存方法 |
| CN104719282A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-24 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种外周血单个核细胞无血清冻存液及冻存方法 |
| CN104705291A (zh) * | 2015-04-03 | 2015-06-17 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种脐血单个核细胞冻存液、应用、制备方法 |
| CN107156108A (zh) * | 2017-05-27 | 2017-09-15 | 魏方萌 | 一种外周血干细胞保存液及制备方法 |
| CN107094753A (zh) * | 2017-05-31 | 2017-08-29 | 东莞市保莱生物科技有限公司 | 一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张丽娟等: "直接用于输注的临床级细胞冻存保护剂的动物体内外安全性评价", 《昆明医科大学学报》 * |
| 张苗等: "一种简便的外周血干细胞冷冻保存法", 《中国实验血液学杂志》 * |
Cited By (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108617640A (zh) * | 2018-06-26 | 2018-10-09 | 吉林省太阳鸟再生医学工程有限责任公司 | 一种脐血单个核细胞冻存液及其应用 |
| CN110959606B (zh) * | 2018-09-28 | 2022-07-01 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种免疫效应细胞冻存液及其用途 |
| CN110959606A (zh) * | 2018-09-28 | 2020-04-07 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种免疫效应细胞冻存液及其用途 |
| CN109619088A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-04-16 | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 | 一种脂肪间充质干细胞的保存液 |
| EP3685665A1 (en) | 2019-01-23 | 2020-07-29 | Carnamedica sp. z o.o. | Preservation of stem cells |
| WO2020152297A1 (en) | 2019-01-23 | 2020-07-30 | Carnamedica Sp. Z O.O. | Preservation of stem cells |
| CN110140716A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-08-20 | 方艳秋 | 一种外周血单个核细胞改良冻存液 |
| CN110301432A (zh) * | 2019-07-25 | 2019-10-08 | 上海轩锋生物科技有限公司 | 一种新的细胞冻存方法 |
| CN111869659A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-11-03 | 上海雅酶生物医药科技有限公司 | 一种无血清细胞冻存液、制备方法及其使用方法 |
| CN112167245A (zh) * | 2020-10-27 | 2021-01-05 | 深圳华大基因细胞科技有限责任公司 | 用于细胞保存的保护剂 |
| CN114762496A (zh) * | 2021-01-11 | 2022-07-19 | 南京艾尔普再生医学科技有限公司 | 心肌细胞冻存液及其制备方法 |
| CN114762496B (zh) * | 2021-01-11 | 2023-11-07 | 南京艾尔普再生医学科技有限公司 | 心肌细胞冻存液及其制备方法 |
| CN112841173A (zh) * | 2021-01-25 | 2021-05-28 | 赵丽歌 | 一种造血干细胞冻存液及冻存方法 |
| CN113475500A (zh) * | 2021-08-09 | 2021-10-08 | 上海细胞治疗集团有限公司 | 一种全药级原料肿瘤组织冻存液及其应用 |
| CN115226706A (zh) * | 2022-07-01 | 2022-10-25 | 深圳科诺医学检验实验室 | 一种细胞冻存液和细胞冻存和/或回输的方法 |
| CN115088708A (zh) * | 2022-07-22 | 2022-09-23 | 厦门锐杰天川生物科技有限公司 | 外周血单个核细胞长期保存方法 |
| CN115251045A (zh) * | 2022-08-04 | 2022-11-01 | 珠海暨创硒源纳米科技有限公司 | 一种细胞冻存液及其制备方法 |
| CN115251045B (zh) * | 2022-08-04 | 2023-10-27 | 珠海暨创硒源纳米科技有限公司 | 一种细胞冻存液及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107912419A (zh) | 一种人外周血单个核细胞的冻存液及冻存方法 | |
| US8642255B2 (en) | Materials and methods for hypothermic collection of whole blood | |
| CN105248413B (zh) | 一种cik细胞冻存液 | |
| CN104082277A (zh) | 一种人外周血单个核细胞的冻存保护剂及保存方法 | |
| CN107156108A (zh) | 一种外周血干细胞保存液及制备方法 | |
| CN107183008A (zh) | 一种胎盘间充质干细胞冻存液及其冻存方法 | |
| Silva et al. | Recovery and cryopreservation of epididymal sperm from agouti (Dasiprocta aguti) using powdered coconut water (ACP-109c) and Tris extenders | |
| CN106665559B (zh) | 一种免疫细胞冻存液及其应用 | |
| Amini et al. | Effects of supplementation of Tris-egg yolk extender with royal jelly on chilled and frozen-thawed ram semen characteristics | |
| EP2950643B1 (en) | Composition and method for preserving, transporting and storing living biological materials | |
| CN103141471B (zh) | 一种昆明狼犬精液冷冻液配方及配制方法 | |
| CN101990888A (zh) | 干细胞冻存液及干细胞的冻存方法 | |
| CN110140716A (zh) | 一种外周血单个核细胞改良冻存液 | |
| CN105211052B (zh) | 一种培养后的nkt细胞的冻存液及其制备方法 | |
| CN111602648B (zh) | 一种免疫细胞无血清冻存液及冻存方法 | |
| KR101457526B1 (ko) | 돼지 정액의 보존성 개선을 위한 희석액 조성물 | |
| Ramukhithi et al. | Cryopreservation of South African indigenous goat semen | |
| CN104322483A (zh) | 一种猪抗病毒长效精液稀释液配方及制备方法 | |
| CN109511650B (zh) | 一种可以扩大供肝来源的常温机械灌注液 | |
| CN101622986B (zh) | 一种含谷胱甘肽的猪精液冷冻保存液及其冷冻保存方法 | |
| Pan et al. | Cryopreservation of black seabream (Acanthopagrus schlegelii) sperm | |
| BRPI1002346A2 (pt) | processo de obtenção de água de coco desidratada e produto resultante | |
| Khalifa et al. | Effect of soybean lecithin-based semen extender on freezability and fertility of Rahmani ram spermatozoa | |
| Javed et al. | Addition of pomegranate juice (Punica granatum) in tris‐based extender improves post‐thaw quality, motion dynamics and in vivo fertility of Nili Ravi buffalo (Bubalus bubalis) bull spermatozoa | |
| CN112752505A (zh) | 用于细胞和/或组织的运输和/或冷冻保存的组合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20180417 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |