CN107847759A - 用于减少脂肪量的β‑羟基‑β‑甲基丁酸(HMB)的组合物和使用方法 - Google Patents

用于减少脂肪量的β‑羟基‑β‑甲基丁酸(HMB)的组合物和使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了包括HMB的组合物。还描述了向动物施用HMB的方法。施用HMB以增强或促进脂解作用、增加脂肪细胞脂肪氧化、诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生、增加能量消耗、降低总体重和增加机体减脂。

Description

用于减少脂肪量的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的组合物和使用 方法
本申请要求于2015年6月1日提交的美国临时专利申请第62/169,334号的优先权，并且通过引用将临时申请并入本文。
发明背景
1.领域
本发明涉及包括β-羟基-β-甲基丁酸(β-hydroxy-β-methylbutyrate(HMB))的组合物和使用HMB来增强脂解作用、增加机体减脂、减少脂肪细胞大小、增加脂肪细胞脂肪酸代谢、降低总体重和降低脂肪细胞炎症的方法。
2.背景
肥胖的高度流行是公共卫生和经济的主要负担，使得产生对肥胖和肥胖相关合并症(comorbidity)进行有效的营养管理的迫切需求。最近，慢性炎症已经被认为是许多代谢疾病的发病机制中的一个促成因素，部分源自脂肪组织。具体而言，脂肪细胞肥大驱动与代谢功能障碍相关的炎症基因谱(profile)。目前，国家优先考虑研发用于管理肥胖和脂肪组织炎症的有效工具，包括用于控制食欲和维持减肥期间最佳身体组成的营养产品。然而，减肥产品背后的科学迄今主要仅基于热量限制，而不是在脂肪组织的减少的同时维持非脂肪组织(lean tissue)。理想的减肥计划将优先推动脂肪组织的减少而不是肌肉组织。脂肪细胞代谢的提高导致脂肪细胞大小、氧化应激和炎症的减少，并促进心血管代谢健康。
肥胖流行的上升是一个非常严重的健康危机，并且预计到2030年，大约50％的成年人会肥胖。肥胖与2型糖尿病(T2D)、心血管疾病(CVD)、高血压和许多癌症有关。除了对生活质量的破坏性影响之外，与正常体重人群相比，肥胖症和相关合并症使得每人平均每年医疗费用增加2,741美元(2005)，包括住院费用增加46％、门诊费用增加27％以及处方药支出增加80％。此外，全职员工生产力损失造成的成本估计为每年428亿美元。
支链氨基酸，尤其是亮氨酸被认为是蛋白质代谢的关键调节因子。若干研究表明，亮氨酸的天然代谢物β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)比亮氨酸更有效地导致肌肉蛋白质分解减少和促进肌肉蛋白质合成，其在年轻人和老年人中在健康和疾病期间转化为增加的非脂肪体重和改善的肌肉功能。
亮氨酸缺乏饮食已经被证明引起腹部脂肪量急剧减少(Cheng et al.,Diabetes,2010Jan,59(1):17-25)，使得本发明的发现令人惊讶和意外。
HMB
α-酮异己酸盐(KIC)是亮氨酸的第一主要和活性代谢物。KIC代谢的次要产物是β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)。已经发现HMB在各种应用的情况下是有用的。具体而言，在美国专利第5,360,613号(Nissen)中，HMB被描述为可用于降低总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的血液水平。在美国专利第5,348,979号(Nissen等人)中，HMB被描述为可用于促进人体氮存留。美国专利第5,028,440号(Nissen)讨论了HMB增加动物的非脂肪组织发育的有用性。而且，在美国专利第4,992,470号(Nissen)中，HMB被描述为有效增强哺乳动物的免疫应答。美国专利第6,031,000号(Nissen等人)描述了HMB和至少一种氨基酸用于治疗疾病相关的消耗的用途。
HMB用于抑制蛋白质水解的用途来源于亮氨酸具有节约蛋白质特征的观察。必需氨基酸亮氨酸既可用于蛋白质合成，也可诱导转氨基为α-酮酸(α-酮异己酸盐，KIC)。在一个途径中，KIC可被氧化成HMB，并且这占亮氨酸氧化的约5％。HMB在提高肌肉量和力量方面优于亮氨酸。当HMB以钙盐形式每天给予3.0g时，或者以0.038g·kg体重/天给予时，HMB可达到最佳效果，而亮氨酸需要每天超过30.0g。
一旦产生或摄入，HMB似乎有两个命运。第一个命运是通过尿液的简单排泄。在摄入HMB后，其在尿液中的浓度增加，导致HMB的尿液损失约20-50％。另一个命运与HMB到HMB-CoA的活化有关。一旦转化为HMB-CoA，可发生进一步的代谢，HMB-CoA脱水至MC-CoA，或直接将HMB-CoA转化为HMG-CoA，HMG-CoA为细胞内胆固醇合成提供底物。一些研究已经表明HMB被并入胆固醇合成途径中，并且可成为用于受损细胞膜再生的新细胞膜的来源。人体研究已经表明，通过在最初的48小时内补充HMB可减轻激烈运动后的肌肉损伤(通过升高的血浆CPK(肌酸磷酸激酶)测量)。持续日常使用，HMB的保护作用持续达三周。许多研究显示HMB的有效剂量为每天3.0g CaHMB(钙HMB)(约38mg/kg体重/天)。这种剂量联合阻力训练增加肌肉量和肌肉力量，同时最小化与剧烈运动相关的肌肉损伤。HMB已经过安全测试，对健康的年轻人或老年人没有副作用。当补充给艾滋病和癌症患者时，HMB与L-精氨酸和L-谷氨酰胺组合也显示是安全的。
最近研发了HMB的新型递送形式HMB游离酸。已经显示这种新的递送形式比CaHMB更快吸收并具有更大的组织清除率。在美国专利公开第20120053240号中描述了新的递送形式，其全部内容通过引用并入本文。
目前的证据表明HMB通过高强度或长时间运动后加速骨骼肌的再生能力起作用。当训练和/或饮食控制时，HMB可以剂量依赖性方式降低骨骼肌损伤指数和蛋白质分解。最近，已研发出游离酸形式的HMB(HMB-FA)，其具有提高的生物利用度。最初的研究表明，与目前可得形式的HMB钙相比，该形式的HMB补充剂在施用后大约四分之一的时间内引起大约两倍的HMB血浆水平。此外，在快速大剂量阻力训练之前30分钟给予HMB-FA能够减弱肌肉损伤的指数，并且改善阻力训练的运动员的感知恢复。此外，快速摄入2.4g HMB-FA分别增加了骨骼肌蛋白质合成+70％，并将蛋白质分解减少了-56％。
HMB对肌肉的作用已有详细记录。已知HMB的补充会导致肌肉量和力量增加，并可导致有氧改善。虽然瘦肌肉量的增加改变了整个身体组成，但是已经假定HMB仅影响肌肉细胞以增加肌肉量，这反过来改变身体组成。在本发明所述的发现之前，尚不知道HMB对脂肪细胞和脂肪组织有任何直接作用。
大多数减肥是由低热量饮食开始的。这种减肥包括脂肪量和非脂肪体重(即骨骼肌)的损失，其比例估计为2:1。运动导致体重减轻，其主要由脂肪量损失引起，肌肉量轻微或显著增加。现在认为运动中发生的显著数目的体重变化是由IL-6的经典(有益)途径介导的。令人惊讶的是，HMB具有与运动类似的效果，但运动不是其中变量；即使在没有运动的情况下也可看到脂肪量损失。
本发明包括HMB组合物和使用HMB增强脂解作用、增加脂肪细胞脂肪氧化、诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生(biogenesis)、增加能量消耗、降低体重和增加机体减脂的方法。因此HMB可用于改善体型，如增加的非脂肪体重与减少的脂肪量一起所定义的。这可导致总体重减轻。这些影响可在有或没有热量限制也不需要运动的情况下看到。
使用HMB来增加脂解作用和/或降低脂肪量也减少了肥胖相关的疾病(例如2型糖尿病、心血管疾病、慢性炎症、癌症和其他相关合并症)。
除了向人施用HMB以导致对脂肪细胞、脂肪组织和减脂的上述作用之外，本发明包括将HMB组合物施用于动物，并对脂肪细胞、脂肪组织和减脂具有相同的作用。伴侣动物肥胖率高；估计美国有54％的猫和狗超重或肥胖。因此，存在对于组合物和这些组合物用于导致动物减脂的方法的需要。
发明概述
本发明的一个目的是提供用于减脂和/或减轻体重的组合物。
本发明的另一个目的是提供用于增加脂肪细胞和/或脂肪组织脂肪氧化的组合物。
本发明的另一个目的是提供诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生的组合物。
本发明的另一个目的是提供增加能量消耗的组合物。
另外，本发明的目的是提供用于增强脂解作用的组合物。
本发明的另一个目的是提供用于减脂的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供增加脂肪细胞和肌肉脂肪氧化的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供用于诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供用于增加能量消耗的组合物的施用方法。
另外，本发明的目的是提供用于减脂的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供用于降低体重的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供用于增强脂解作用的组合物的施用方法。
本发明的另一个目的是提供用于减少肥胖相关疾病(包括2型糖尿病、心血管疾病、慢性炎症、癌症和其他相关合并症)的组合物的施用方法。
参照下面的说明书、附图和权利要求，本发明的这些和其它目的对于本领域技术人员将变得清楚。
本发明旨在克服迄今为止遇到的困难。为此，提供了包括HMB的组合物。将所述组合物施用于对其有需要的对象。所有的方法包括将HMB施用于动物。包括在本发明中的对象包括人类和非人类哺乳动物。
附图简述
图1是显示3T3-F442A脂肪细胞中脂解作用的图。
图2是显示人皮下脂肪细胞中脂解作用的图。
图3显示了基因表达。
图4是显示OP9脂肪细胞中脂解作用的图。
图5是显示基础脂解作用(basal lypolysis)的图。
发明详述
令人惊讶且意外地发现HMB影响脂肪细胞和脂肪组织。本发明包括HMB组合物和HMB用于导致增强的脂解作用、脂肪细胞氧化、诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生、增加的能量消耗、降低的体重和增加的机体减脂的方法。尽管运动可与补充本发明的组合物和方法一起进行，但是可在有或没有热量限制且不需要锻炼的情况下观察到这些效果。
该组合物可用于寻求减脂的所有年龄组。该组合物也可用于人和非人哺乳动物，包括但不限于伴侣动物。
HMB
β-羟基-β-甲基丁酸或β-羟基-异戊酸可以其游离酸形式表示为(CH3)2(OH)CCH2COOH。术语“HMB”是指具有上述化学式的游离酸和盐形式的化合物及其衍生物。尽管可在本发明的上下文中使用任何形式的HMB，但优选HMB选自游离酸、盐、酯和内酯。HMB酯包括甲酯和乙酯。HMB内酯包括异戊酰基内酯。HMB盐包括钠盐、钾盐、铬盐、钙盐、镁盐、碱金属盐和土金属盐。
生产HMB及其衍生物的方法在本领域是公知的。例如，HMB可通过双丙酮醇的氧化来合成。在Coffman等人J.Am.Chem.Soc.80:2882-2887(1958)中描述了一个合适的步骤。如其中所述，HMB通过双丙酮醇的碱性次氯酸钠氧化来合成。产物以游离酸形式回收，其可被转化成盐。例如，HMB可通过类似于Coffman等人(1958)的步骤制备成其钙盐，其中HMB的游离酸用氢氧化钙中和并通过从乙醇水溶液中结晶回收。HMB的钙盐和游离酸形式可从Metabolic Technologies，Ames，Iowa购买获得。
钙β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的补充
二十多年前，HMB的钙盐被研发作为人类的营养补充剂。许多研究表明，CaHMB的补充联合阻力训练可增加肌肉量和肌肉力量，并减弱例如癌症和艾滋病等病症的肌肉量损失。Nissen和Sharp进行了补充剂与阻力训练联合使用的荟萃分析，并发现HMB是临床研究显示通过阻力训练显著增加力量和非脂肪体重的仅有的两种补充剂之一。研究表明，每kg体重每天38mg的CaHMB似乎是一个普通人的有效剂量。
除了力量和肌肉量的增加，CaHMB的补充也降低了肌肉损伤和肌肉蛋白质降解的指标。人体研究表明，剧烈运动后的肌肉损伤(通过升高的血浆CPK(肌酸磷酸激酶)测量)随着补充HMB而降低。已显示持续日常使用，HMB的保护作用持续达至少三周。分离的大鼠肌肉的体外研究表明HMB是肌肉蛋白水解的有效抑制剂，特别是在应激期间。这些发现已经在人类中得到证实；例如，HMB抑制参与阻力训练的对象的肌肉蛋白水解。
已经报道了HMB减少蛋白质分解和增加蛋白质合成的分子机制。Eley等人进行的体外研究显示HMB通过mTOR磷酸化刺激蛋白质合成。其他研究已经表明，当蛋白水解诱导因子(PIF)、脂多糖(LPS)和血管紧张素II刺激肌肉蛋白质分解代谢时，HMB通过减弱泛素-蛋白体蛋白水解途径的诱导来降低蛋白水解。还有其他研究已经证明HMB还减弱了半胱天冬酶-3和半胱天冬酶-8蛋白酶的活化。总的来说，这些研究表明补充HMB会导致瘦体重增加并伴随力量增加，这是通过蛋白水解减少和蛋白质合成增加的组合带来的。
HMB游离酸形式
在大多数情况下，用于临床研究并作为增补剂(ergogenic aid)销售的HMB一直是钙盐形式。最近的进展已经允许HMB以游离酸形式制造以用作营养补充剂。最近，研发了新的游离酸形式的HMB，其显示出比CaHMB更快地吸收，导致更快和更高的血清HMB水平峰值以及对组织改善的血清清除。
因此HMB游离酸可能是比钙盐形式更有效的施用HMB的方法，特别是在剧烈运动之前直接施用时。在快速训练之前30分钟开始加入的HMB游离酸比CaHMB更有效地减轻肌肉损伤和改善炎症反应。然而，本领域的普通技术人员将认识到本发明包括任何形式的HMB。
任何形式的HMB可以以一种方式结合到递送和/或施用形式中，从而导致约0.5gHMB到约30g HMB的典型剂量范围。
当组合物以食用形式口服施用时，组合物优选为膳食补充剂、食品或药物介质的形式，更优选为膳食补充剂或食品的形式。在本发明的上下文中可使用任何合适的包括所述组合物的膳食补充剂或食品。本领域的普通技术人员将理解，无论形式(例如膳食补充剂、食品或药物介质)如何，组合物可包括氨基酸、蛋白质、肽、碳水化合物、脂肪、糖、矿物质和/或微量元素。
为了制备作为膳食补充剂或食品的组合物，组合物通常以使得组合物基本均匀分布在膳食补充剂或食品中的方式组合或混合。或者，可以将组合物溶解在液体如水中。
膳食补充剂的组成可以是粉末、凝胶、液体或者可制成片剂或装入胶囊。
尽管在本发明的上下文中可使用包括所述组合物的任何合适的药物介质，但是优选地，所述组合物与合适的药物载体例如右旋糖或蔗糖组合。
所述组合物可以以片剂、胶囊、软凝胶、丸剂、舌下凝胶或液体形式口服施用。所述组合物可与其他组分如蛋白质、游离形式的氨基酸、碳水化合物、糖、维生素(如维生素D、维生素C、维生素B12、维生素B6、维生素E和/或维生素K)和/或矿物质一起施用。
此外，药物介质的组合物可以以任何合适的方式静脉内施用。为了通过静脉内输注施用，组合物优选为水溶性无毒形式。静脉内施用特别适用于正在经历静脉(IV)治疗的住院患者。例如，组合物可以溶解于施用于患者的IV溶液(例如盐水或葡萄糖溶液)中。而且，组合物可添加到营养IV溶液中，其可包括氨基酸、肽、蛋白质和/或脂质。待静脉内施用的组合物的量可与口服施用的水平相似。静脉内输注可比口服施用更可控和准确。
计算施用组合物的频率的方法是本领域众所周知的，并且在本发明的上下文中可使用任何合适的施用频率(例如每天一次6g剂量或每天两次3g剂量)并且在任何合适的时间段内(例如，可以在五分钟的时间段内或在一小时的时间段内施用单剂量，或者可在延长的时间段内施用多剂量)。HMB可在延长的时间内施用，例如数周、数月或数年。
在本发明的范围内可使用任何合适剂量的HMB。计算适当剂量的方法在本领域中是众所周知的。
通常，HMB的量足以导致脂解作用增加、脂肪细胞脂肪氧化增加、诱导脂肪细胞和肌肉线粒体生物发生、能量消耗增加和减脂增加。这些影响可在有或没有热量限制且不需要锻炼的情况下看到。
实验实施例
以下实施例将更详细地说明本发明。容易理解的是，如本文实施例中一般描述和说明的本发明的组合物可以以各种制剂和剂型合成。因此，本发明的方法、制剂和组合物的目前优选的实施方案的以下更详细的描述并非如权利要求一样旨在限制本发明的范围，而仅仅代表本发明目前优选的实施方案。
在3T3-F442A脂肪细胞中的脂解作用
方法.鼠3T3-F442A前体脂肪细胞生长至汇合。汇合后，使3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞并充满甘油三酯。通过从3T3-F442A脂肪细胞在孔板中的甘油释放评估脂解作用。将脂肪细胞单层用含有Hepes(KRH)、补充有2％无脂肪酸BSA、5mM葡萄糖、ADA和PIA的Krebs-Ringer缓冲液孵育。另外，用0(对照)、0.1、1或6mM浓度的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)处理细胞。细胞在0.1μM异丙基肾上腺素不存在(基础)或存在的情况下孵育1小时。取孵育培养基的等分试样并冷冻直至甘油测定。甘油通过商业酶法测量。数据表示为相对于对照的倍数增加。
结果.图1显示了HMB对分化的3T3-F442A脂肪细胞脂解作用的作用。在基础条件下，0.1和1mM浓度的HMB与对照相比增加脂解作用，但HMB在包含6.0mM水平下降低脂解作用。对异丙基肾上腺素刺激的反应，0.1mM HMB增加脂解作用，但HMB在包括6.0mM水平下降低脂解作用。这些数据表明，HMB可通过在基础条件和刺激时以剂量响应方式增加脂解作用活性来调节脂肪细胞的甘油三酯含量。
人类皮下脂肪细胞中的脂解作用
方法.从供体获得人皮下脂肪细胞并在体外孵育。通过甘油在孔板中的释放评估脂解作用。将脂肪细胞与包含Hepes(KRH)的补充有4％不含脂肪酸的BSA、5mM葡萄糖、ADA和PIA的Krebs-Ringer缓冲液一起孵育。此外，在1.0μM异丙基肾上腺素存在下，用0(对照)、0.1或1mM浓度的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)处理细胞2小时。取孵育培养基的等分试样并冷冻直至甘油测定。甘油通过商业酶法测量。数据表示为相对于对照的倍数增加。
结果.图2显示了HMB对人皮下脂肪细胞中的脂解作用作用。对异丙基肾上腺素刺激的反应，0.1和1mM HMB与对照补充的脂肪细胞相比增加脂解作用。这些数据表明HMB可通过增加脂解作用活性来调节脂肪细胞的甘油三酯含量。这些发现表明，HMB可用于减少人体脂肪含量，并可加速肥胖人群的体重减轻。
HMB对分化的脂肪细胞基因表达的影响
将SGBS人前脂肪细胞分化成脂肪细胞并用1mM HMB处理4天。人类Simpson-Golabi-Behmel综合征(SGBS)前脂肪细胞细胞株细胞起源于GSBS患者的脂肪组织样本。进行微阵列(mRNA)。数据显示经典(经典的)IL6信号传导途径中的显著提高(2.53倍)，其最近显示是抗炎和保护性的。类似地，通过测量mRNA，细胞因子受体相互作用和钙信号传导途径也升高。表1描述了结果。
表1
基因表达
分化的脂肪细胞与1mM HMB一起孵育4天。提取RNA并通过qPCR测定基因表达。分析ATGL、ACOX、PGC1a、ATG7和BNIP3的基因表达。ATGL是脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)，且被发现在催化甘油三酯水解的最初步骤中起主要作用。ATGL在人和小鼠的脂肪组织中高度表达。ACOX1或酰基-CoA氧化酶1是参与过氧化物酶体脂肪酸氧化的第一酶。当脂肪酸链太长而不能被线粒体处理时发生这种情况。产生的高电位电子转移到O2→H2O2(+热)，其在过氧化氢酶的存在下产生→H2O和O2。PGC1α是能量代谢的关键调节因子，且在产生高能量脂肪组织的棕色脂肪组织的发育过程中被发现是非常重要的。自噬相关蛋白7(ATG7)调节脂肪量。敲低ATG7会导致非功能性脂肪组织异常。提高的水平增加组织再循环。BNIP3是与ATG7类似的另一自噬相关蛋白，似乎也具有显著性。基因表达结果如图3所示。
用HMB处理的SGBS脂肪细胞的磷酸激酶蛋白质阵列
该方法用于以无偏见的方式测定已知影响重要信号传导蛋白活性的蛋白质磷酸化的变化。用或不用HMB(1mM)处理分化的人脂肪细胞4天。
只显示与未处理细胞相比，所列出的蛋白质在所示的磷酸化位点的磷酸化显著增加的情况。进行蛋白质阵列，表2显示用HMB孵育分化的脂肪细胞后上调的磷酸化蛋白质，且表3显示下调的蛋白质
表2
表3
一个值得注意的发现是参与IL-6有益途径的Stat3的减少。此外，观察到AKT 1/2/3转录物(一种在丝氨酸473上被磷酸化并且与mTOR途径密切相关的蛋白质)的减少。这与苏氨酸308的AKT1/2/3没有变化形成对比，并且参与胰岛素信号传导途径。SRC激酶、Fyn、yes和lyn参与脂肪酸代谢。
这些研究是在没有电刺激模拟运动的情况下进行的，表明即使在没有运动的情况下，补充HMB对减脂作用也是有效的。
HMB调节分化的脂肪细胞中基础和异丙基肾上腺素刺激的脂解作用。
如上所述，观察到用HMB处理的细胞中ATGL表达的增加，因此直接在培养的脂肪细胞中测定HMB处理对基础和异丙基肾上腺素刺激的脂解作用的作用。使用Viswanadha和Londos的方案来优化测量鼠原代脂肪细胞中脂解作用的条件(J.Lipid Res.2006.47:1859-1864)，其包括用腺苷脱氨酶(ADA)处理以除去内源性腺苷，并且然后加入耐ADA的PIA(苯异丙基腺苷)。
测试了以下处理策略：HMB剂量为0.1、1和6mM；2种浓度的β-肾上腺素激动剂异丙基肾上腺素0.1和1μM，以及短期(紧接在脂解作用测定之前)与长期(48h)HMB处理(每个处理n＝4)。Op9脂肪细胞用作SGBS细胞，因为SGBS细胞需要很长时间(几周)分化使得它们不方便使用。
将细胞用不同浓度的HMB在OP9生长培养基中预处理48小时。预处理后，洗涤细胞并与异丙基肾上腺素(0.1或1.0μM)一起在脂肪分解缓冲液(含有4％BSA的Krebs ringer碳酸氢盐(KRB))中孵育。培养基还在37℃下含有腺苷脱氨酶(ADA)和苯基-异丙基腺苷(PIA)中孵育2小时。加入ADA以除去内源性腺苷，并且加入抗ADA的PIA用于低标准化的基础脂解作用。处理后，测定培养基的甘油含量，细胞用RIPA缓冲液溶解以测定蛋白质浓度，*p<0.05，**p<0.01。N＝4。
结果如图4和5所示：
a)在分化的OP9脂肪细胞中用HMB预处理48小时显著(2-4倍)增强异丙基肾上腺素 刺激的脂解作用(图4)
b)在0.1mM HMB时，对0.1uM异丙基肾上腺素反应脂解作用增强了2倍(图4和5)。
c)在1mM HMB时，在0.1uM异丙基肾上腺素下观察到比没有HMB时增加4倍(图4和5)。
d)在6mM时，对0.1μM异丙基肾上腺素的反应增强3倍，因此1mM HMB的剂量显示最 佳(图4)。
e)较高浓度的异丙基肾上腺素可降低最大脂解作用，如肾上腺素受体脱敏所预测的(图5)。
f)在用于脂解作用测定的上述条件下，即添加ADA，然后添加PIA以钳制基础脂解作用在低水平，HMB预处理也增加基础脂解作用约2倍(图4)。
这些实验实施例证明，HMB对脂肪细胞和脂肪组织有直接的作用，并且表明补充HMB可用于减脂作用。
前面的描述和附图包括本发明的说明性实施例。本文所述的前述实施例和方法可基于本领域技术人员的能力、经验和偏好而变化。仅仅以某种顺序列出该方法的步骤并不构成对该方法的步骤顺序的任何限制。前面的描述和附图仅解释和说明本发明，而本发明不限于此，除非权利要求是如此限定的。具有公开内容的本领域技术人员在不脱离本发明的范围的情况下将能够进行修改和变化。

Claims (18)

1.一种组合物，其包含约0.5g至约30g的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)，其中将所述组合物施用于对其有需要的动物产生至少一种选自包含以下的作用：增强的脂解作用、增加的脂肪细胞脂肪氧化、诱导的脂肪细胞生物发生、增加的能量消耗、脂肪量减少、总体重降低和增加的减脂。
2.权利要求1的组合物，其中所述HMB选自由以下组成的组：其游离酸形式、其盐、其酯、及其内酯。
3.权利要求2的组合物，其中所述盐选自由以下组成的组：钠盐、钾盐、镁盐、铬盐和钙盐。
4.用于减少动物体内脂肪量的组合物，所述组合物包含约0.5g至约30g促进所述动物体内脂解作用的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)。
5.权利要求4的组合物，其中施用HMB增加所述动物体内的肌肉量。
6.一种增加对其有需要的动物的脂肪组织中的脂解作用的方法，包括向所述动物施用约0.5g至约30g的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的组合物，从而增加动物的脂解作用。
7.权利要求6的方法，其中所述HMB选自由以下组成的组：其游离酸形式、其盐、其酯、及其内酯。
8.权利要求7的方法，其中所述盐选自由以下组成的组：钠盐、钾盐、镁盐、铬盐和钙盐。
9.权利要求6的方法，其中所述动物不参与运动项目。
10.一种在对其有需要的动物中诱导减脂的方法，包括向动物施用有效量的包含β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的组合物。
11.权利要求10的方法，其中所述HMB选自由以下组成的组：其游离酸形式、其盐、其酯、及其内酯。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述盐选自由以下组成的组：钠盐、钾盐、镁盐、铬盐和钙盐。
13.权利要求10的方法，其中HMB组合物的施用增加肌肉量。
14.一种促进对其有需要的动物从脂肪细胞中输出甘油的方法，包括向所述动物施用有效量的包含β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的组合物。
15.权利要求14的方法，其中所述HMB选自由以下组成的组：其游离酸形式、其盐、其酯、及其内酯。
16.权利要求15的方法，其中所述盐选自由以下组成的组：钠盐、钾盐、镁盐、铬盐和钙盐。
17.一种治疗或预防对其有需要的动物中与肥胖相关的至少一种合并症的方法，其包括向所述动物施用约0.5g至约30g的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)的组合物。
18.权利要求17的方法，其中所述合并症选自由以下组成的组：2型糖尿病、心血管疾病、慢性炎症和癌症。
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