CN107847440A

CN107847440A - 改善水不溶性或微水溶性药物的水溶性的方法

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Publication number: CN107847440A
Application number: CN201680039722.5A
Authority: CN
Inventors: A·格拉索尔; E·普里斯赫-格拉索尔; A·博登泰希; M·莫罗库蒂-库尔兹; S·纳克维斯希; C·坎茨
Original assignee: Mary Norm De Biotech Stock Co
Current assignee: Mary Norm De Biotech Stock Co; Marinomed Biotech AG
Priority date: 2015-07-16
Filing date: 2016-07-15
Publication date: 2018-03-27
Anticipated expiration: 2036-07-15
Also published as: ZA201708594B; JP2019501861A; EP3324933B1; HUE053116T2; CA2992376C; KR20180054569A; CO2018001460A2; EA201890194A1; PH12018500042A1; CN107847440B; IL256882A; LT3324933T; IL256882B; JP6836825B2; CL2018000032A1; MA42472B1; EA036233B1; RS61561B1; AU2016293125B2; PT3324933T

Abstract

增加水不溶性或微水溶性疏水有机化合物在水性溶剂中的溶解度的方法，包括：将选自七叶皂苷、甘草甜素和皂树提取物的皂苷组分以足以引发胶束形成的量加入到水性溶剂中，其中在第一步骤中将疏水有机化合物预先溶解在有机溶剂中，于是在第二步骤中将包含预先溶解的化合物的有机溶剂混入水性溶剂中；于是至少一部分不溶性或微溶性疏水有机化合物得到增溶并溶解在水性溶剂中，产生其中所溶解的所述有机化合物的浓度增加的水性组合物。本发明还涉及药物或化妆品组合物，其包含以大幅增加的浓度溶解在水性溶剂中的水不溶性或微水溶性有机化合物。

Description

改善水不溶性或微水溶性药物的水溶性的方法

技术领域

本申请主要在有机化学领域中，并且涉及显著增加水不溶性或微水溶性有机化合物，特别是治疗或美容上有用的药物或试剂在水性溶剂中的溶解度的方法。本申请还涉及包含增加浓度的溶解的水不溶性或微溶性有治疗或美容价值的有机化合物的水性药物或化妆品组合物。

背景技术

在活性药剂或药物需要具有全身生物利用度的大多数情况下，它应该易于溶于哺乳动物体液中。由于这些液体是以水为基础的，生理活性有机化合物的水溶性差一直是并且仍然是药物研发者的挑战性问题。

类固醇构成一类突出且重要的生理活性和治疗重要化合物，其水溶性是如此的差以至于将它们分类在脂质中。通常将类固醇重新配制成新药制剂，其主要用于治疗可导致或多或少严重的病理性呼吸、皮肤病或眼科症状的激素失衡或炎性病症。因此，药物研发者已经寻求合适的方法来改善低溶解性类固醇向皮肤、粘膜组织或体循环的递送。作为其结果，已经提出并实施了几种实际的解决方案。

丙二醇已被用作各种医学感兴趣的类固醇、特别是用于抗炎类固醇的增溶剂。加拿大专利1,119,957公开了氢化可的松在微酸性pH下的丙二醇水溶液中的溶液，其中丙二醇以组合物的15重量％-50重量％的浓度提供，类固醇以组合物的0.025重量％-0.4重量％的浓度提供。

聚乙二醇(PEG)也已与丙二醇一起使用以产生用于类固醇的溶剂。欧洲专利EP246652教导了氟尼缩松(flunisolide)和倍氯米松(beclomethasone)在鼻喷雾制剂中的浓度为每体积组合物的0.05重量％。美国专利4,868,170公开了在含有62-70重量％的PEG(分子量350-500道尔顿)加10-20重量％的丙二醇和15-25重量％的水的载体体系中含有浓度至多0.15重量％的替泼尼旦(tipredane)(水溶解度小于0.2mg/l的类固醇)的洗液。国际专利申请WO 2006/029013要求保护丙二醇(通常2.5-15重量％)和碳酸亚丙酯(通常2.5-7.5重量％)的组合以增加以至多0.1重量％的浓度存在的雄甾烷、特别是丙酸氟替卡松的局部制剂中的类固醇浓度。

已经发现异山梨醇二甲醚当加入到包含丙二醇、聚乙二醇和水的溶剂体系中时增强泼尼松、地塞米松和泼尼松龙的溶解度，每种药物的最大溶解度在或接近1：2的异山梨醇二甲醚/水或异山梨醇二甲醚/丙二醇浓度比，意味着需要高浓度的异山梨醇二甲醚。

大多数用于包括上面提到的那些的类固醇的溶剂体系可能适用于外皮的皮肤病学应用，但不足以满足口服或粘膜递送类固醇在各种治疗应用、特别是在治疗呼吸道或眼睛的炎症中的要求。原因在于类固醇的有效水性浓度对于预期目的而言远非最佳，和/或溶液的粘度太高而不能方便地施用，例如将非常小的液滴喷入鼻中。而且，高度粘稠的组合物可能在人的鼻中产生粘性感，这通常被认为是不舒服的。更糟的是，高度粘稠的眼药水可能会影响视力。另外，在粘性溶剂或载体体系中产生精细分散的混悬液或乳液所需的剧烈机械搅拌所产生的剪切应力可能对同时存在于溶剂或载体体系中的高分子量化合物有害，所述高分子量化合物作为佐剂或添加剂，例如卡拉胶。最后，这些制剂中的许多通常会遇到稳定性问题，因为类固醇在长期储存后倾向于沉淀。

一般而言，粘膜组织是非常敏感的，并且即使使用耐受性良好的化合物也容易发生不期望的副作用。例如，即使将纯净水施用于鼻中也会引起打喷嚏和感冒症状。因此，开发适用于粘膜施用的水不溶性化合物的水性制剂的选择是有限的。

各种抗疟药物的水溶性极其有限。例如青蒿素及其化学衍生物只是微溶于水。通常与蒿甲醚组合使用的苯芴醇实际上不溶于水(溶解度为0.002％)。另一种潜在的抗疟药物姜黄素在水溶性、溶液稳定性和口服生物利用度方面也存在主要弱点。

许多药物制剂中水溶性是限制因素的另一类化合物包括具有免疫抑制和抗炎活性的环状化合物，例如大环类肽的环孢菌素A；大环内酯的他克莫司(也被命名为FK-506)；和另一种大环内酯的西罗莫司(又称雷帕霉素)。这些化合物的分子量甚至超过了许多类固醇的分子量，并且在结构上明显不同于类固醇和普通抗疟药。现有技术中已经描述了很多水性制剂的溶液，它们与前面提到的那些非常相似。然而，在所有这些情况下，这些制剂或者制造复杂，缺乏适当的储存稳定性和/或不是至少准均匀的溶液。

因此可以从上述推断，仍然需要增加水不溶性或微水溶性治疗或美容用化合物的水溶性，以便能够获得更好的局部或全身生物利用度以及改善物理和化学储存稳定性。

发明内容

本发明人已经出乎意料地发现能够通过在很低的浓度下将皂苷组分加入到所述水性介质(通常为药学上或化妆品上可接受的水性溶剂或溶剂体系)中，并将预溶解于常规非水性有机溶剂中的一部分期望的水不溶性或微水溶性疏水有机化合物混入水性溶剂或溶剂体系，从而成功地克服许多有机化合物在水性介质中的溶解度差，并且这种化合物的溶解度惊人地提高了几倍，并且在许多情况下达到几个数量级。

本发明人进行的实验已经证明，适用于实施本文中所述的实施方案的皂苷的增溶作用不限于与具有相近化学、生理或结构相似性的特定类别的水不溶性或微溶性化合物的相互作用而是似乎广泛地适用于各种各样的疏水有机化合物，包括本文中提及的治疗上有用的化合物。

此外，本发明人已经发现，加入右泛醇能够支持并且在一些情况下甚至改善皂苷的增溶作用。也许更重要的是，已经认识到右泛醇还能够在环境温度下延长的储存过程中稳定含有皂苷的溶液。

包含本文中所述的溶剂体系的药物或化妆品组合物，无论是否加入右泛醇作为增溶剂和/或稳定剂，通常都与粘膜表面相容。当含有右泛醇时，它们在室温下稳定至少一个月，其中许多甚至稳定至少3个月，即它们不崩解成多相体系例如液-液(脂肪/水溶液)或液体-固体(颗粒/水溶液)相和/或在这样的储存期间不丧失超过5％的药物或生理活性。通常情况下，它们是澄清透明的溶液，能够使用常规方法无菌过滤，但是也可以配制成非透明制剂，例如用于特定应用的水胶体、乳剂、混悬剂、乳膏剂、凝胶剂或软膏剂。

附图说明

图1表示糖皮质激素布地奈德(budesonide)在没有加入皂苷组分且不含右泛醇的情况下在含有0％、5％、10％和15％(重量/体积)丙二醇的0.25×Mcllvaine缓冲液(调节至pH6.0)中的溶解度。

图2a和2b是指在含有5％(图2a)和10％(图2b)丙二醇的0.25×Mcllvaine缓冲液中在环境温度(T约20-25℃)下储存一个月后仍然溶解的布地奈德的浓度(最大浓度550μg/ml布地奈德)。

图3a和3b基于与图2a/2b相同但在环境温度(T约20-25℃)下储存3个月后的数据集合。

图4表示0.03％w/v七叶皂苷和5％v/v右泛醇在不存在丙二醇的情况下独立地增加布地奈德在Mcllvaine缓冲液中的溶解度。

图5表示甘草甜素和来自皂树(Quillaja saponaria)提取物的皂苷在没有右泛醇的情况下对类固醇溶解度没有显著影响。

图6表示糖皮质激素丙酸氟替卡松在含有丙二醇(0％、5％和10％)、七叶皂苷(0％、0.03％、0.1％)和右泛醇(0％、2％、5％)的组合的0.25×Mcllvaine缓冲液(调节至pH6)中的溶解度数据。

图7表示右泛醇和皂苷浓度对丙酸氟替卡松在含有5％丙二醇(达到的最大浓度＝5μg/ml)的0.25×Mcllvaine缓冲液中的溶解的影响。A...0％右泛醇；B...5％右泛醇；x-轴...％甘草甜素

图8a表示在环境温度(T约20-25℃)下贮存3个月后，在含有5％丙二醇和1.2g/L的ι-卡拉胶的Mcllvaine缓冲液中溶解的布地奈德(y-轴)与不同的右泛醇和七叶皂苷浓度之间的关系：在0％(系列A)、2％(系列B)或5％v/v(系列C)的右泛醇浓度；x-轴＝七叶皂苷浓度。

图8b表示除了实验溶液进一步含有0.4g/L的κ-卡拉胶这一事实之外，从如图8a中的相同实验设置获得的类似数据。

图9a表示在环境温度下储存一个月后，在含有10％丙二醇、1.2g/L的ι-卡拉胶的Mcllvaine缓冲液中溶解的布地奈德的浓度(y-轴)和一方面任选的右泛醇与另一方面的皂苷浓度之间的关系；x-轴＝七叶皂苷浓度。

图9b表示除了实验溶液还含有0.4g/L的κ-卡拉胶这一事实之外，从如图9a中的相同实验设置获得的类似数据。

图10表示在环境温度下储存一个月后，相对于变化的七叶皂苷浓度(x-轴)，在含有5％丙二醇、7.5g/l透明质酸和任选的右泛醇的Mcllvaine缓冲液中溶解的丙酸氟替卡松的浓度(y-轴)；A...0％右泛醇；B...2％右泛醇；C...5％右泛醇；x-轴...w/v％七叶皂苷；y-轴...μg/ml丙酸氟替卡松。

图11a和11b表示通过使用荧光染料(Hoechst 33342)水溶液作为合适的指示剂室温下测定的七叶皂苷(图11a)或甘草甜素(图11b)的浓度与形成胶束的关系；x-轴＝％七叶皂苷或％甘草甜素；y-轴＝相对荧光单位(RFU)。

图12表示对溶解的FK-506的稳定性研究；300μg/ml FK-506溶解于含有七叶皂苷和不含右泛醇(A)或60mg/ml右泛醇(B)的制剂中，并在4℃下储存3个月。

图13表示以两种不同浓度即100μg/ml(A、C)和300μg/ml(B、D)溶解的FK-506的冻干实验结果。左边黑色柱表示冻干前溶解的FK-506的浓度；右边的柱表示在补充有50mg/ml右泛醇和30mg/ml(A、B)或50mg/ml(C、D)丙二醇的水中重构24小时后的FK-506浓度；y-轴显示μg/ml溶解的FK-506。

图14表示丙酸氟替卡松离体对猪鼻粘膜的透过动力学；A(上线)5μg/ml根据本发明制备的丙酸氟替卡松；B(下线)5μg/ml的制备为不含皂苷的比较混悬液；x-轴＝以分钟为单位的孵育时间；y-轴＝ng丙酸氟替卡松/g组织。

图15表示在LPS-诱导的急性肺部炎症模型中施用布地奈德时未处理对照(100％)中TNF-α水平的百分数；A＝1.28mg/ml的比较布地奈德混悬液；B＝0.3mg/ml的比较布地奈德混悬液；C＝0.3mg/ml的布地奈德实验溶液。

具体实施方式

定义

本文使用的术语“类固醇”应当是指基于四个碳环的固醇核心结构的任何和所有化合物，如下面式A所示。

式A

发挥激素作用的类固醇分为两大类：控制碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢并且经常具有抗炎作用的糖皮质激素和控制电解质和水的水平的盐皮质激素。本文所指的类固醇通常是皮质类固醇，可以选自糖皮质激素和盐皮质激素。合适的例子包括布地奈德、氟替卡松、丙酸氟替卡松和糠酸莫米松(mometasone furoate)中的任一种。

本文使用的术语“抗疟药”或“抗疟药物”应当是指目前已知的或将来已知的终止、减少或预防疟原虫属(plasmodium)的蚊传细胞内寄生虫感染并且不溶或仅微溶于水的任何和所有化合物。该类化合物的典型代表是青蒿素和苯芴醇。

本文使用的术语“免疫抑制剂”或“大环免疫抑制剂”应当是指目前已知的或将来已知的减少或抑制哺乳动物中的免疫反应(优选那些结合免疫亲和蛋白)并且不溶或仅微溶于水的任何和全部大环分子。这种大环分子的代表性实例包括环孢菌素、他克莫司和西罗莫司(雷帕霉素)及其化学修饰，以及诸如百利莫司(biolimus)A9、佐他莫司(zotarolimus)、依维莫司(everolimus)、myolimus、novolimus、吡美莫司(pimecrolimus)、ridaforolimus和替西罗莫司(temsirolimus)的化合物。

本文使用的术语“皂苷”应当是指包含三萜或类固醇糖苷配基核心结构(皂苷配基)以及一个或多个附着于皂苷配基的单糖或寡糖残基或链的糖苷。本文特别优选的皂苷是七叶皂苷、甘草甜素和皂树提取物。

本文使用的术语“七叶皂苷”应分别涵盖文献中分别以术语α-和β-七叶皂苷(escin)或α-和β-七叶素(aescin)提及的任何和所有皂苷；其混合物；它们的包含一价、二价或三价阳离子的盐；和与有机酸和/或醇，特别是与低分子量有机酸和/或醇，主要是一价酸和/或醇形成的酯。

本文使用的术语“甘草甜素”应理解为等同于术语其18-α和18-β形式中的甘草酸。

本文使用的术语皂树提取物应指市售产品Quillaja Saponaria(SoapbarkExtract)，其被美国FDA以标题21CFR 172-510、FEMA编号2973批准作为用于食品和饮料(GRAS)的成分。它也被批准作为欧盟类似用途的成分，代码E 999，现行CAS编号：068990-67-0或EPA列表4A CAS编号：1393-03-9(Quillaja Saponin)。

本文使用的术语“炎性病症”应包括所有急性或慢性病症，其中哺乳动物的身体组织受到至少一种选自水肿、肿胀、局部升高的温度、压痛和疼痛的症状，和/或例如C反应蛋白或促炎细胞因子的炎症标志物升高的水平，或者此类症状和炎症标志物的升高的水平的任何组合的影响。

术语“抗炎类固醇”应涵盖能够减少哺乳动物体内任何上述炎症症状的所有类固醇。该组最重要的成员是糖皮质激素。

详述

本发明人已经认识到，即使少量的皂苷当被添加到水性溶剂中时也能够显著增加疏水有机化合物(包括许多治疗相关化合物)的水溶性。根据本发明可获得的有效溶解的疏水有机化合物材料在水性溶剂中的浓度比常规不含皂苷的水性例如水/丙二醇溶剂体系中相同化合物的浓度高至少几倍至至多几个数量级。

到目前为止产生的实验数据表明，改善溶解所需浓度的皂苷组分与疏水有机化合物形成特定的胶束或胶束状结构，并且这样做减少了这些化合物的疏水部分与水性环境的接触面积，因此降低了疏水性并增加了水溶性。

除了皂苷作用以外，加入到按照本发明制备的组合物中的右泛醇的浓度通常高于皂苷的浓度，并且在一些实施方案中浓度在1-5％v/v的范围内，可以防止溶解的疏水有机化合物、特别是类固醇在储存过程中的沉淀。它可以进一步防止这种组合物的成分的混合物在室温下长期储存过程中分解成多相体系。此外，本发明允许调节皂苷和右泛醇的浓度，以完全满足应用于鼻、口、眼睛、呼吸道、肠道、生殖器和肛门直肠区域以及哺乳动物身体的其他部位的敏感粘膜表面的要求。

因此，在实施方案中，本发明涉及改善增溶的水不溶性或仅微水溶性的疏水有机化合物的水溶液的储存稳定性的方法，其中除了皂苷成分之外还加入右泛醇作为增溶剂和/或作为稳定剂。

应当指出的是，在这种情况下，本发明的原理也可以通过向这种水不溶性或微溶性化合物的现有含水溶液、混悬液、乳液或水胶体中加入皂苷组分和右泛醇组分中的一种或两种而应用于这样的溶液、混悬液、乳液或水胶体，特别是治疗或美容应用的化合物。结果是有效溶解的疏水性化合物材料的浓度显著增加，即先前未溶解的疏水性化合物材料转化为溶解状态。

这将有效地增强这些化合物的生物利用度，从而改善受体体内疏水性化合物的药代动力学和反应动力学，并且在药物活性化合物的情况下还将引发所需药理作用的较早开始。

此外，应该强调的是，根据本发明的方法制备的无颗粒且通常澄清和透明的溶液易于直接进行无菌过滤。这与获得无菌过滤的两相制剂即混悬液、乳液或水胶体的现有技术方法相反，所述方法通常包括无菌过滤包含所需疏水性化合物的纯有机溶液，并且独立地无菌过滤水性缓冲液，并将水性缓冲液与有机溶液混合。然而，这种方法使得溶解在有机相中的大部分疏水性化合物分子在与水性缓冲液接触时沉淀，因此产生只含有非常少量的有效增溶化合物的混悬液、乳液或水胶体，一起产生所述化合物的更大量的未溶解的、任选微粒的物质。

生产无菌制剂的此类方法也可以用于本发明的实施方案中，然而不同之处在于水性缓冲液组分进一步包含皂苷和任选的右泛醇，得到类似于本领域已知的制剂，然而，其中溶解的疏水化合物的浓度相对于本领域已知的没有皂苷和任选的右泛醇组分的相应制剂而言显著增加。

因此，本文的实施方案涉及两相水性制剂，即选自混悬液、乳液和水胶体的制剂，其包含皂苷和任选地还有右泛醇组分，其中有效溶解的疏水有机化合物的浓度显著增加超过在没有皂苷和任选的右泛醇组分的相应常规制剂中实现的浓度。

鉴于包含疏水性化合物的许多现有技术制剂基于包含一种或多种有机溶剂以及适量的水的溶剂体系，本文的另一个目的是提供一种用于减少非水性有机溶剂或溶剂混合物在含有微溶于水或不溶于水的疏水有机化合物的组合物中的份额，并同时增加该组合物中纯水性溶剂或缓冲体系的份额的方法。这将克服如上更详细讨论的现有技术制剂的各种缺点，并将大大扩大这种疏水有机化合物或药物的治疗或美容应用、特别是关于预防性或治疗性口服以及肠胃外(例如透皮和透粘膜)的应用的范围。

因此，本文的另一个实施方案涉及用于不溶性或微水溶性化合物的水基溶剂体系，除了本领域中用于溶解这种化合物的常规有机溶剂或增溶剂以外，其包含水溶液和一种或多种皂苷，和任选地右泛醇。

本文使用的术语“改善疏水性化合物的溶解度”应理解为使疏水性化合物更好地溶于水，而无需化学修饰化合物。更具体地，这包括相对于化合物在不应用本发明原理的情况下可能实现的溶解状态下的浓度而言，在水性溶剂中溶解的非微粒状态的不溶性或微水溶性化合物的浓度显著增加。

如本文所示的疏水性化合物的水溶液的术语“改善稳定性”应理解为相对于不添加右泛醇可能达到的储存稳定性显著增加疏水性化合物水溶液的储存稳定性。更具体地，“储存稳定性”应理解为药物或化妆品组合物在预定的时间段内保持基本不变的能力，即没有任何关注的溶解的化合物沉淀的迹象、没有任何组合物分解成两相或多相例如液-液相(乳液)或液-固相(混悬液)的迹象的发生，并且优选没有组合物的生理活性的显著损失。

本文提到的化学多样性和生理学上明显不同的药物活性剂的各种类别或种类具有共同性，它们本质上是高度疏水的，因此只有轻微(如果有的话)水溶性。因此，虽然本文明确提到的疏水性化合物是根据本发明使用的合适的实例，但是对于本领域普通技术人员来说显而易见的是，本发明可以应用于任何这样的类别或种类的疏水性和水难溶性化合物，无论是否具有生理活性或化妆品用途。因此，本文中明确提到的在水溶性方面有改进的余地的水不溶性或微溶性疏水有机化合物的实例，并不是穷尽性的，并且因此不应被解释为限制权利要求书中规定的本发明的范围。

本文最有用的皂苷组分的一个代表是七叶皂苷。七叶皂苷是一种众所周知的三萜皂苷产品，可以通过用醇和其他有机溶剂提取而得自七叶树的坚果(horse chestnut)(欧洲七叶树(Aesculus hippocastanum)的果实)。它是密切相关的高度羟基化三萜衍生物的混合物，其中惕各酸或乙酸以酯的形式结合，而两个葡萄糖醛酸分子通过糖苷键附接。构成七叶皂苷的混合物中的组分在它们的糖残基方面以及在糖苷配基的乙酰基取代基方面不同。七叶皂苷中的主要糖苷具有以下化学结构(式B)：

式B

几十年来，基于七叶皂苷的制剂已经用于治疗静脉功能不全和微血管渗透性过高的各种病症。通常含有丙二醇、异丙醇和卡波姆的含有七叶皂苷的局部凝胶可商购获得，用于治疗静脉曲张或痔疮的局部水肿。口服七叶皂苷制剂也可获得。

欧洲专利EP 1 090 629教导了七叶皂苷和硫酸葡聚糖的组合以预防或治疗个体眼睛周围的刺激。

甘草甜素是来自光果甘草(Glycyrrhiza glabra)的皂苷，由三萜甘草次酸糖苷配基和葡萄糖醛酸组成。这是甘草的甜味成分，在食品和化妆品行业有很多用途。据报道，甘草甜素具有抗炎、抗糖尿病、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗病毒和保肝的特性。其结构如下(式C)：

式C

国际专利申请WO2002/074238公开了使用甘草甜素制备各种含有至少一个氮原子的难溶性化合物的高水溶性复合物。该复合物优选为离子型且甘草甜素与活性剂的摩尔比优选为1：1至1：3。

相反，本发明的实施方案不需要待增溶的化合物中的氮原子，不需要存在离子状态，并且仅需要少量的皂苷，即远低于WO2002/074238中教导的甘草甜素的量，其通常仅在待增溶的化合物的量的一部分范围内。尽管如此，根据本发明，甘草甜素也可以按照本文所述的操作方案以游离碱或其盐形式，特别是其钾盐或铵盐，并任选地与另一种皂苷组合施用。出乎意料的是，它的糖苷配基，即甘草次酸(glycyrrhetinic acid)或enoxolone，可能无法用作本发明的增溶剂。

本文使用的皂苷组分通常以含有所需水不溶性或微溶性有机化合物的最终化妆品或药物制剂的0.01％至10％重量/体积(w/v)的浓度范围提供。在各种实施方案中，皂苷组分的浓度将分别在最终水溶液或制剂的体积的0.02％至0.1％或0.5至5％(w/v)的范围内，取决于给定的用于具体目的的实施方案中使用的皂苷的种类。

右泛醇是泛醇的D-对映体(或立体化学，R-型)，是泛解酸和β-丙氨酸的酰胺。因为它是合成辅酶A所需的必需营养素，所以也被称为维生素B5。其结构如下(式D)：

式D

右泛醇被广泛用作化妆品和局部个人护理产品中的润肤剂和保湿剂，并且其还具有医疗用途。更具体地，它可以支持小型皮肤擦伤、局部一度烧伤和皮肤病的愈合。

已经发现，右泛醇可以用作根据本领域已知的方法或根据本申请制备的不溶性或微水溶性化合物的溶液的稳定剂。

本文使用的右泛醇组分通常以最终制剂例如含有所需的水不溶性或微溶性有机化合物的化妆品或药物组合物的0.5％至10％体积/体积(v/v)的浓度提供。在各种实施方案中，右泛醇组分的浓度将在最终溶液或组合物的1％至5％体积/体积的范围内。

包含作为生理活性成分的水难溶性有机化合物的各种药物组合物目前用于治疗炎症病症、治疗疾病例如疟疾以及治疗自身免疫性疾病和与移植手术有关的手术后免疫抑制过程。例如，目前正在使用结合亲环蛋白的免疫抑制药物来治疗引起诸如特应性皮炎、牛皮癣、白癜风、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮和自身免疫性葡萄膜炎的病症的自身免疫疾病。也可以施用来自该组的特定免疫抑制剂，以防止不希望的免疫反应，例如排斥同种异体器官移植物，包括来自骨髓移植物的移植物抗宿主病。根据本文所述的本发明的实施方式，所有这些组合物可以得到实质性改善。

根据本发明制备的水溶液通常包含一种或多种药学上或化妆品上可接受的非水性溶剂、载体和/或赋形剂，并且任选地还包含防腐剂和/或其它添加剂。溶剂、载体和/或赋形剂可以选自聚乙二醇例如PEG-400；脂肪酸醇例如硬脂醇、鲸蜡醇或油醇，单硬脂酸三乙酰甘油酯，二硬脂酸乙二醇酯，单硬脂酸甘油酯，单硬脂酸丙二醇酯和聚乙烯醇；卡波姆例如羧基聚亚甲基(carboxy polymethylene)；DMSO；通过使氢化蓖麻油与环氧乙烷反应获得的非离子聚乙氧基化去污剂，例如以商品名已知的那些；和化学改性的纤维素衍生物例如羧甲基纤维素和羟丙基纤维素。

其他添加剂可以包括任选地选自脱水山梨糖醇脂肪酸酯例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇及其单月桂酸酯和单油酸酯(例如吐温20、吐温60或吐温80)，脱水山梨糖醇棕榈酸酯、油酸酯和硬脂酸酯(例如，Span40、Span60、Span65或Span80)；聚氧乙烯酯；聚乙二醇脂肪酸酯例如Cremophor^TM；二甘醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、月桂酸乙酯，月桂基硫酸钠、Pluronic F68、泊洛沙姆188的去污剂、乳化剂和/或表面活性剂；并且防腐剂可以选自包含十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基吡啶鎓氯化物、苯扎氯铵和/或前述化合物的混合物。

本文描述的实施方案的药物组合物可以针对各种施用模式进行调整。例如，可以使用口服、肠胃外或经粘膜途径之一调整它们的全身吸收；或者可以调整它们在皮肤或粘膜组织上的局部使用。

肠胃外使用的组合物可以特别适用于血管内输注或推注。

用于吞咽的口服药物组合物可以配制成甜糖浆，但也可以配制成软胶囊或硬胶囊或其他合适的盖仑制剂形式。

通常将粘膜和经粘膜施用的组合物配制成凝胶剂、乳膏剂、软膏剂、喷雾剂、漱口剂、漱口液、吸入溶液剂或栓剂(视情况而定)。

本文所述的组合物还可以包含卡拉胶。最经常使用的卡拉胶是ι-卡拉胶、κ-卡拉胶和λ-卡拉胶，其中ι-卡拉胶和κ-卡拉胶具有特定的抗病毒和抗过敏活性。

以下实施例是为了说明的目的，并且将有助于理解本发明，而不将本发明限于下文中明确公开的实施例。

实施例1：含有布地奈德(5％丙二醇终浓度)的鼻喷雾剂

制备溶液

A.布地奈德预制溶液

在玻璃烧瓶中称取1g布地奈德，在缓慢搅拌下溶解并在丙二醇中加热，并用丙二醇填充至100ml。通过HPLC测得的实际溶解的布地奈德的浓度为10mg/ml。

B.Mcllvaine缓冲液

称量以下物质并溶于蒸馏水中以产生1×Mcllvaine缓冲液pH 6：22.52g Na₂HPO₄×2H₂O，7.73g柠檬酸一水合物，4.0g EDTA钠。加入蒸馏水以得到1000ml pH6的溶液，将其无菌过滤并在室温下保存。

C.含有七叶皂苷的Mcllvaine缓冲液

称取0.5g七叶皂苷并溶解于1×Mcllvaine缓冲液中，填充至250ml并无菌过滤(以下称为Mcllvaine 0.05％，因为该溶液用于制备含有终浓度为0.05％的七叶皂苷的样品)。Mcllvaine缓冲液中的其它七叶皂苷浓度通过如表1中中所述混合不同份的Mcllvaine缓冲液和Mcllvaine 0.05％来制备。

表1；制备具有不同七叶皂苷浓度的缓冲液

缓冲液名称	Mcllvaine 0.05％[ml]	Mcllvaine缓冲液[ml]
			Mcllvaine 0.03％	30	20
Mcllvaine 0.02％	20	30
			Mcllvaine 0.01％	10	40

D.卡拉胶储液

a)称取2.4g的ι-卡拉胶并在缓慢加热和搅拌下溶于蒸馏水中，用蒸馏水填充至1000ml。

b)称取2.4g的ι-卡拉胶和0.8mg/ml的κ-卡拉胶并在轻轻加热和搅拌下溶于蒸馏水中，用蒸馏水填充至1000ml。

溶液在80℃放置1小时，然后热无菌过滤。

市场上可买到的卡拉胶产品通常是ι-卡拉胶、κ-卡拉胶和/或λ-卡拉胶的混合物。对于本文提及的大多数实施方案，用于制备各种制剂的卡拉胶组分应理解为相对于本文使用的卡拉胶产品中存在的所有卡拉胶的总量包含至少50重量％、通常至少80重量％、典型地至少90重量％的ι-卡拉胶、或者ι-和κ-卡拉胶的组合。

E.制备实验组合物

系列A的样品(0％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与5ml卡拉胶储液和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

系列B的样品(2％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.2ml右泛醇、5ml卡拉胶储液和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

系列C的样品(5％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.5ml右泛醇、5ml卡拉胶储液和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

将所得制剂在80℃下放置1小时，然后热无菌过滤。将样品装入玻璃小瓶中并在室温下储存3个月。

实验组成分析

在室温下储存3个月后，取样并以15700rcf离心分离11分钟。将澄清的上清液装入玻璃小瓶中，并通过HPLC一式两份测量溶解的布地奈德(最大500μg/ml)的浓度。

HPLC方法：

使用Agilent Zorbax SB C18 3.5μm 4.6×150mm色谱柱(带有4×4mmRP8预装柱)，使用55％乙腈0.01％TFA/45％水0.01％TFA以1ml/分钟等度洗脱7分钟，通过RP-HPLC(在244nm下的UV吸光度检测)分析布地奈德。注射40μl的含布地奈德的样品并分析。

用在乙腈/水2：8中的20至640ng/μl布地奈德范围内的十个稀释度校准系统。一式三份各自注射25μl的校准样品，每次分析跨越0.5至16μg布地奈德的范围。

从溶解度增强实验获得的结果描述在下面并描绘在图8a和8b中。实施例1中公开的实验溶液能够调整为局部使用的药物组合物，特别是用于经皮或经粘膜施用。在实施方案中，溶液适合作为鼻喷雾剂。

本文优选鼻喷雾剂含有不超过0.05％w/v的七叶皂苷，以避免在敏感的鼻粘膜中产生不希望的副作用。为了优化皂苷组分的溶解度增强活性，甘草甜素和/或皂树提取物可以以下文所述的可接受的浓度补充到七叶皂苷中。

任选地与抗炎类固醇一起存在于组合物中的卡拉胶可以作为抗过敏和/或抗病毒活性佐剂来提高组合物的总体治疗功效。

实施例2：含有布地奈德(10％丙二醇终浓度)的鼻喷雾剂

制备溶液

如实施例1段落A-D所述制备溶液

制备实验组合物

系列A的样品(0％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与5ml卡拉胶储液、0.5ml丙二醇和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

系列B的样品(2％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.2ml右泛醇、5ml卡拉胶储液、0.5ml丙二醇和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

系列C的样品(5％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.5ml右泛醇、5ml卡拉胶储液、0.5ml丙二醇和0.5ml布地奈德预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

将所得制剂加热至80℃并保持1小时，然后热无菌过滤。将样品装入玻璃小瓶中并在室温下储存1个月。

实验组成分析

在室温下储存1个月后，取样并以15770rcf离心分离11分钟。将澄清的上清液装入HPLC分析玻璃小瓶中，并通过HPLC一式两份测量溶解的布地奈德的浓度(最大500μg/ml)。HPLC方法如实施例1中所述

从溶解度增强实验获得的结果描述在下面并描绘在图9a和9b中。实施例2中公开的实验溶液能够调整为局部使用的药物组合物，特别是用于经皮或经粘膜施用。在实施方案中，溶液能够适合作为鼻喷雾剂。

实施例3：含有丙酸氟替卡松的滴眼剂

制备溶液

A.丙酸氟替卡松预制溶液

在玻璃烧瓶中称取1mg丙酸氟替卡松并溶解于丙二醇中并用丙二醇填充至10ml。通过HPLC测定的丙酸氟替卡松的浓度为100μg/ml。

B.Mcllvaine缓冲液

如实施例1中所述

C.含有七叶皂苷的Mcllvaine缓冲液

如实施例1中所述

D.透明质酸储液

称取2.5g透明质酸并在缓慢加热下溶解于蒸馏水中，用蒸馏水填充至120ml，在80℃下保持1小时，然后热无菌过滤。

制备实验组合物

系列A的样品(0％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与3.6ml透明质酸储液和0.5ml丙酸氟替卡松预制溶液混合，并用蒸馏水填充至10ml。

系列B的样品(2％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.2ml右泛醇、3.6ml透明质酸储液和0.5ml丙酸氟替卡松预制溶液混合，用蒸馏水填充至10ml。

系列C的样品(5％右泛醇)：将2.5ml的含有各个七叶皂苷浓度的溶液(Mcllvaine0.01％、0.02％、0.03％或Mcllvaine缓冲液)与0.5ml右泛醇、3.6ml透明质酸储液和0.5ml丙酸氟替卡松预制溶液混合，用AD填充至10ml。

将所得制剂在80℃下放置1小时，然后热无菌过滤。将样品装入玻璃小瓶中并在室温下储存1个月。

实验组成分析

在室温下储存1个月后，取样并以15700rcf离心分离11分钟。将澄清的上清液装入玻璃小瓶中，并通过HPLC一式两份测量溶解FP的浓度(最大5μg/ml)。

HPLC方法：

在含有0.01％TFA水中使用5％乙腈至90％乙腈的梯度(参见下面的详细梯度描述)，通过RP-HPLC(在235nm处的UV吸光度检测)在透明质酸存在下分析丙酸氟替卡松。

溶剂A：水HPLC梯度级0.01％三氟乙酸。溶剂B：乙腈HPLC梯度级0.01％三氟乙酸，流速1ml/min。在HPLC柱Thermo Aquastar 4.6×150mm，S/N 0202797K(带有4×4RP-8Merck预装柱)上在25℃下运行5-90％溶剂B10分钟、90％溶剂B 2分钟、90-5％溶剂B 2分钟和5％溶剂B 1分钟的梯度。各自注射40μl的含有丙酸氟替卡松的样品并分析。丙酸氟替卡松在约9.95分钟洗脱为对称峰。

用乙腈/水4:6中的0.1至80ng/μl丙酸氟替卡松范围内的七个稀释度校准系统，每次分析含有0.5至2000ng的范围。

从溶解度增强实验获得的结果描述在下面并描绘在图10中。实施例3中公开的实验溶液能够调整为局部使用的药物组合物，特别是用于经皮或经粘膜施用。在实施方案中，溶液适合作为滴眼剂。

实施例4：不同药物的溶解度增强

含有七叶皂苷作为皂苷组分的Mcllvaine缓冲液：

称取1g七叶皂苷并溶解于少量Mcllvaine缓冲液(缓冲液组成：22.52g Na₂HPO₄×2H₂O、7.73g柠檬酸一水合物和4.0g EDTA溶于1L蒸馏水中；pH6.0)中，用Mcllvaine缓冲液填充至250ml，并无菌过滤以制备含有0.4％(w/v)七叶皂苷的储液。使用该七叶皂苷储液制备含有终浓度为0.1％七叶皂苷的样品，在下文中称为“Mcllvaine 0.1％”。

样品化合物溶液

为了制备实验化合物在含有10％丙二醇、0.1％七叶皂苷和5％右泛醇的缓冲溶剂中的1ml溶液，在小容器中提供下列化合物：

将250μl“Mcllvaine 0.1％”与50μl右泛醇储液混合，用蒸馏水调至900μl，合并并与100μl预先溶解、尤其是预先混悬在丙二醇中的实验化合物剧烈混合。制备了在DMSO中的化合物预稀释物/预混悬液的备选溶液。将样品在15800rcf下离心分离10分钟。将等分试样的澄清上清液转移到自动取样器玻璃小瓶中，并在Agilent Zorbax Eclipse Plus C18柱(3.5μm，4.6×150mm)上用70％或80％乙腈0.01％TFA/10％或30％水0.01％TFA以1ml/分钟和50℃等度洗脱10分钟，通过HPLC并在适合于各个实验化合物的波长下进行UV吸光度检测来分析溶解的实验化合物的含量。

表2：不同缓冲液中储液的饱和浓度

*0.03％七叶皂苷；**2％甘草甜素替代七叶皂苷；***1％甘草甜素替代七叶皂苷

实施例5(比较例)：在不存在皂苷组分的情况下布地奈德在水溶液中的溶解度

图1表示没有加入皂苷组分并且在不存在右泛醇的情况下布地奈德糖皮质激素在含有0％、5％、10％和15％(重量/体积)丙二醇的0.25×Mcllvaine缓冲液(调节至pH6.0)中的溶解度。

A...缓冲液

B...5％丙二醇

C...10％丙二醇

D...15％丙二醇

y-轴...溶解的布地奈德的浓度

即使丙二醇浓度为15重量％，除了局部应用于皮肤外，对于大多数应用在药理上不可接受，溶解的布地奈德浓度低至175μg/ml。

实施例6：在皂苷组分存在下布地奈德在水溶液中的溶解度

图2a和2b是指在含有5％(图2a)和10％(图2b)丙二醇的0.25×Mcllvaine缓冲液中在环境温度(T约20-25℃)下储存一个月后仍然溶解的布地奈德的浓度(最大浓度550μg/ml布地奈德)。结果表明，仅加入0.01-0.02％w/v的七叶皂苷显著增加了类固醇的溶解度。七叶皂苷浓度的进一步增加基本上没有额外的益处。添加右泛醇作为附加组分不会干扰类固醇的溶解度。

图2a：5％丙二醇；图2b：10％丙二醇

A...0％右泛醇

B...1％右泛醇

C...2％右泛醇

D...5％右泛醇

y-轴...μg/ml溶解的布地奈德

x-轴...w/v％七叶皂苷

实施例7：右泛醇对储存稳定性的影响

图3a：5％丙二醇；图3b：10％丙二醇

A...0％右泛醇

B...1％右泛醇

C...2％右泛醇

D...5％右泛醇

y-轴...μg/ml溶解的布地奈德

x-轴...w/v％七叶皂苷

右泛醇的加入似乎改善了实验溶液的稳定性，特别是在较低的丙二醇浓度(图3a)和非常低的七叶皂苷浓度下。另外，在实验溶液中10％丙二醇中加入2-5％(v/v)右泛醇似乎增加了在七叶皂苷不存在下的类固醇溶解度(图3b)。在这种情况下可以提及的是，本实施例中提及的实验组合物可以有利地配制成滴眼剂。

实施例8：右泛醇对布地奈德溶解度的影响

图4表示在不存在丙二醇的情况下0.03％w/v七叶皂苷和5％v/v右泛醇独立地增加布地奈德在Mcllvaine缓冲液中的溶解度。在0.03％七叶皂苷和5％右泛醇(见图4，D柱)中似乎发生协同作用，即类固醇溶解度似乎增加超过单纯的相加作用。然而，布地奈德在该缓冲体系中即不存在丙二醇时的溶解度保持在或低于单独存在丙二醇即没有七叶皂苷和右泛醇的情况下达到的相应值(参见图2a、b和3a、b)。唯一的例外是D柱的值适度地超过丙二醇单独达到的溶解度值。

A...0％七叶皂苷/0％右泛醇

B...0％七叶皂苷/5％右泛醇

C...0.03％七叶皂苷/0％右泛醇

D...0.03％七叶皂苷/5％右泛醇

y-轴...溶解的布地奈德的浓度[μg/ml]

实施例9：甘草甜素和皂树提取物对类固醇溶解度的影响

图5表示在不存在右泛醇的情况下甘草甜素和来自皂树提取物的皂苷对类固醇溶解度没有显著影响。然而，在右泛醇的存在下，当在实验溶液中分别以0.03％或0.05％的浓度提供时，这些皂苷能够改善布地奈德的溶解度，达到与用七叶皂苷在不存在或存在5％右泛醇时以相同浓度实现的溶解度相当的程度。对于皂树皂苷而不是甘草甜素，这在皂苷浓度0.1％下也适用。七叶皂苷在所有皂苷和右泛醇浓度下表现出最一致的性能，使布地奈德溶解度增加至多十倍。

A...七叶皂苷

B...甘草甜素

C...皂树提取物

*...w/v％皂苷组分(七叶皂苷、甘草甜素或皂树提取物)

#...v/v％右泛醇

y-轴...溶解的布地奈德的浓度

实施例10：丙酸氟替卡松在各种设置中的溶解度

A...0％丙二醇

B...5％丙二醇

C...10％丙二醇

*...w/v％七叶皂苷

#...v/v％右泛醇

y-轴...溶解的丙酸氟替卡松的浓度

看起来，在存在至少0.03％的皂苷组分的情况下，以最高的丙二醇和右泛醇浓度实现实验化合物的最佳溶解。由数据进一步能够推导出，丙酸氟替卡松的溶解度随着PG浓度的增加以及随着右泛醇浓度的增加而独立地增加，甚至不存在任何皂苷组分的情况下。然而，在没有皂苷的情况下达到的最好浓度只有在存在至少0.03％皂苷(即本实施中为七叶皂苷)的情况下获得的最大浓度的约50％。

实施例11：右泛醇和甘草甜素浓度对丙酸氟替卡松溶解度的影响

图7表示右泛醇和皂苷浓度对丙酸氟替卡松在含有5％丙二醇的0.25×Mcllvaine缓冲液中的溶解的影响(达到的最大浓度＝5μg/ml)。结果表明，另外含有0.5-1％甘草甜素作为皂苷组分使溶解度增加至多九倍。5％右泛醇的存在似乎提供促进溶解度的作用。

A...0％右泛醇

B...5％右泛醇

y-轴...溶解的丙酸氟替卡松的浓度

x-轴...％甘草甜素

实施例12：在卡拉胶组分存在下布地奈德的溶解度

图8a表示在环境温度(T≈20-25℃)下贮存3个月后含有5％丙二醇和1.2g/L的ι-卡拉胶的Mcllvaine缓冲液中溶解的布地奈德(y-轴)与不同的右泛醇和七叶皂苷浓度之间的关系：在0％(系列A)、2％(系列B)或5％v/v(系列C)的右泛醇浓度；x-轴＝七叶皂苷浓度。

图8b表示除了实验溶液进一步含有0.4g/L的κ-卡拉胶这一事实之外从如图8a中的相同实验设置获得的类似数据。

A...0％右泛醇

B...2％右泛醇

C...5％右泛醇

x-轴...w/v％七叶皂苷

y-轴...μg/ml布地奈德

看起来，在储存3个月后观察到的最高药物浓度来自包含至少0.03％七叶皂苷的制剂以及包含至少0.02％七叶皂苷以及最高测试的右泛醇浓度即5％右泛醇的制剂。本实施例和下文实施例13中使用的实验组合物可有利地适合用作鼻喷雾剂。

实施例13：在卡拉胶存在下的布地奈德溶解度和储存稳定性

图9a表示在环境温度下储存一个月后一方面含有10％丙二醇、1.2g/L的ι-卡拉胶和任选地右泛醇的Mcllvaine缓冲液中溶解的布地奈德的浓度(y-轴)与另一方面的皂苷浓度之间的关系；x-轴＝七叶皂苷浓度。

图9b表示除了实验溶液进一步含有0.4g/L的κ-卡拉胶这一事实之外从如图9a中的相同实验设置获得的类似数据。

A...0％右泛醇

B...2％右泛醇

C...5％右泛醇

x-轴...w/v％七叶皂苷

y-轴...μg/ml布地奈德

从图8和9中描绘的结果可以推断，实验溶液中卡拉胶的存在基本上不影响实验类固醇化合物的溶解度。在较低的丙二醇浓度(例如5％)下，将皂苷组分从0.01％略微增加到0.02％或0.03％可能是有用的。

实施例14：在透明质酸存在下改变的七叶皂苷和右泛醇浓度对氟替卡松溶解度的影响

图10表示在环境温度下储存一个月后相对于改变的七叶皂苷浓度(x-轴)在含有5％丙二醇、7.5g/l透明质酸和任选的右泛醇的Mcllvaine缓冲液中溶解的丙酸氟替卡松的浓度(y-轴)。

A...0％右泛醇

B...2％右泛醇

C...5％右泛醇

x-轴...w/v％七叶皂苷

y-轴...μg/ml丙酸氟替卡松

在给定的情况下，即在存在透明质酸的情况下，右泛醇似乎协同地增强七叶皂苷对丙酸氟替卡松的增溶活性。缺少皂苷组分时，在测试浓度下加入右泛醇不会对氟替卡松溶解度产生任何显著影响。

实施例15：增溶与胶束的存在相关

在含有低于临界胶束浓度的去污剂的水性缓冲液和水中，Hoechst 33342染料的荧光几乎检测不到。当去污剂浓度增加直到达到临界胶束浓度时，胶束开始形成并且染料开始掺入胶束中，于是能够检测到荧光信号的增加。对于本实施例的实验，将染料以7μM的终浓度与包含不同浓度的皂苷的水性缓冲液在黑色、平坦且透明底部的96-孔板中混合，并使用酶标仪(使用的滤镜：ex＝355nm和em＝460nm)测量发射光谱。最后，将数据进行背景校正。

如图11a和11b中所示，Hoechst 33342染料的荧光随着皂苷浓度的增加而增加。对于七叶皂苷，0.02％的浓度足以引发胶束的形成。为了达到与甘草甜素相同的荧光水平(RFU＝相对荧光单位)，需要0.5％的最小浓度(即增加25倍)。到目前为止进行的实验提供了清楚的证据，即在大量摄取各种疏水性化合物进入溶液所需的皂苷浓度下形成胶束。胶束形成很可能是改善这种微溶性化合物的增溶的关键。

另外，将疏水有机化合物整合到胶束结构中也将有助于保护这些化合物免受不希望的水解，并且在药物的情况下将帮助维持生理活性。

因此，优选根据本发明进行增溶的方法以导致最终制剂中形成胶束结构的方式进行。当使用甘草甜素作为皂苷组分时，也考虑胶束形成，而不是一些现有技术文献教导形成特殊的甘草甜素-药物复合物。因此，在第一步中将不溶或微溶的疏水有机化合物在合适的药学或化妆品上可接受的有机溶剂中以高浓度溶解并将该溶液在第二步骤中通常在20-80℃、特别是30-40℃的温度下在pH4-8下缓慢搅拌下加入到同样可接受的水性溶剂体系中，所述水性溶剂体系包含皂苷组分和任选的右泛醇。将有机溶液和水溶液混合步骤交换以将水相加入有机相中的步骤将实质上阻碍胶束结构的形成，从而实质上减少本发明的有利效果，因此不是优选的。

温度高于50摄氏度倾向于破坏胶束结构，在80摄氏度或更高的温度下不会形成胶束，尽管至少在实验化合物不是热敏感的情况下，暂时过热可能并不总是对最终产品有害。实验已经表明，随后将短时过热的制剂冷却至低于50℃的温度将在大多数情况下至少恢复胶束结构。

在将药物组合物施用于例如鼻、眼睛、呼吸道、肺或生殖器和肛门直肠区域的粘膜表面时，施加超出pH 4-8的优选范围的pH值会产生不希望的副作用例如瘙痒、疼痛和其他副作用。另外，当pH值低于4时，七叶皂苷倾向于分解，而甘草甜素倾向于固化。此外，对于旨在用于各种预期种类的注射的制剂，包括例如皮下、皮内(intracutaneous)、皮内(intradermal)、静脉内、肌内、关节内、鞘内、脊柱内、心内、腹膜内或肺内注射，高于8的pH值是不可接受的。

本文还设想，荧光染料可以用作确认疏水有机化合物在胶束形成溶剂体系中溶解的分析工具。它可应用于测定水不溶性或微溶性疏水有机化合物以快速和简单的方法来提高其在水性溶剂体系中的溶解度的合格性，即其中可检测的荧光至少定性地或定量地指示胶束形成的开始，因此相应化合物的增溶。因此可以通过根据本发明的方法对符合改进增溶作用的化合物的功能性而非结构性定义来提供确定本发明的界限和范围的指导。

实施例16：冻干能够使干燥的制剂能够重构而没有显著的损失

用含有乙醇作为溶剂并用海藻糖作为冻干促进剂的溶解的FK-506进行冻干实验。更具体地，将溶于100％乙醇中的FK-506以1:20稀释到包含5％乙醇、柠檬酸盐缓冲液pH6.0、1％(10mg/ml)甘草甜素、0.03％(0.3mg/ml)七叶皂苷和150mM海藻糖的最终溶液。将液体制剂在液氮中深度冷冻，然后在Alpha 1-4LSCplus冻干系统中冻干。冻干后，制剂在含有50mg/ml右泛醇和30mg/ml或50mg/ml丙二醇的水中重构。通过HPLC测定冻干前和重构后24小时的溶解的FK-506的浓度。

在图13中，大写字母指的是：

A...FK-506(100μg/ml)；以300mg/ml(3％)丙二醇重构

B...FK-506(300μg/ml)；以300mg/ml(3％)丙二醇重构

C...FK-506(100μg/ml)；以50mg/ml(5％)丙二醇重构

D...FK-506(300μg/ml)；以50mg/ml(5％)丙二醇重构

1...冻干前的FK-506；2...冻干和重构后的FK-506；y-轴显示μg/ml溶解的FK-506。

从图13可以得出，本发明的原理也能够应用于在第一步中生产根据本发明溶解的感兴趣的化合物的液体组合物，并且在第二步中冻干所述组合物。于是在第三步中，将冻干材料重构成化妆品上或药学上可接受的水性组合物可以在相应化合物没有显著损失的情况下进行。这意味着感兴趣的化合物不一定需要以其最终的液体、乳膏、凝胶或软膏等形式储存，而是可以以冻干物的形式储存，并且可以使用任选地补充有右泛醇，如果需要还加入其他添加剂的合适的水性缓冲体系重构成最终形式。这可能对于短期的、易于分解的或以其它方式快速恶化的活性物质(其中有许多有用的疏水性药物)的长期储存尤其有益。

实施例17：粘膜施用-生物利用度试验

为了测试根据本发明制备的组合物的生物利用度，离体进行实验，其中将包含丙酸氟替卡松作为感兴趣的化合物的实验组合物与包含相同浓度的相同化合物但不含作为增溶剂的皂苷的组合物进行比较。

图14表示在不同时间点离体透过猪鼻粘膜的丙酸氟替卡松的浓度。实验组合物包含溶于含0.03％七叶皂苷、3％丙二醇和5％右泛醇的水性缓冲液中的5μg/ml丙酸氟替卡松。比较样本是包含相同水性缓冲液且不含皂苷或右泛醇的混悬液。将两种制剂离体加入到手术提取的猪鼻粘膜中。孵育15、30、45和60分钟后，洗涤粘膜，并通过HPLC-MS/MS测定透过的丙酸氟替卡松的量。

A-实验组合物；

B-丙酸氟替卡松的比较混悬液；

x-轴＝以分钟为单位的孵育时间；

y-轴＝ng丙酸氟替卡松/g组织。

结果非常好地表明，当使用根据本发明制备的实验组合物时，与非实验药物混悬液相比，成功透过进入粘膜组织中的活性药物的浓度是约五倍。

实施例18：布地奈德体内生理活性的比较

实验在小鼠模型中进行，以比较通过两种不同浓度的现有技术混悬液(相对于含有0.03％七叶皂苷、5％右泛醇和5％丙二醇在水性缓冲液中的实验组合物)施用的布地奈德的生物利用度和生理学活性。

在LPS诱导的急性肺部炎症模型中，在用安慰剂或者用包含300μg/ml布地奈德溶解的实验溶液或者以分别配制成300μg/ml和1.28mg/ml分散体的布地奈德的比较组合物在LPS攻击前3小时鼻内处理麻醉的小鼠。LPS诱导的TNF-α释放进入支气管肺泡灌洗(BAD在攻击后2小时评价为用市售ELISA试剂盒进行检测的炎症的替代参数。结果描绘在图15中。

图15表示释放到BAL中的各个TNF-α浓度，以安慰剂对照(＝100％)的百分比表示。

A-布地奈德混悬剂(1.28mg/ml)，

B-布地奈德混悬液(300μg/ml)；

C-溶于实验溶剂的布地奈德(300μg/ml)；

x-轴＝测试的样品；

y-轴＝以安慰剂对照(100％)的％释放到BAL中的TNF-α。

从图15可以得出，在体内小鼠模型中，与根据本发明提供的实验布地奈德制剂相比，比较布地奈德制剂在LPS刺激下甚至在最高测试浓度下抑制TNFα水平的效果要低得多。

从上述实施例1-18中公开并且在相应的图中表示的实验获得的数据可以推断出，加入皂苷组分例如七叶皂苷和任选的右泛醇能够增加和任选地稳定在水溶剂体系中溶解的不溶或微溶的疏水有机化合物至多一个或多个数量级。然而，应该强调的是，在这种情况下，为了提供适合于粘膜或经粘膜应用的组合物，最终即用型组合物中七叶皂苷的最大浓度应该优选不超过0.5％w/v，甘草甜素的最大浓度应该优选不超过5％w/v，右泛醇的最大浓度应优选不超过5％，并且丙二醇的最大浓度应优选不超过10％w/v。

此外，本文公开的实验结果提供了明确的证据，即七叶皂苷作为最合适的皂苷组分不仅显著提高了几类疏水有机化合物的溶解度，而且还得出结论，对于选自这些类之一的给定化合物能够特别调节七叶皂苷和右泛醇的浓度以实现溶解度的最佳改善以及所得溶液长期储存的最佳稳定性。而且，从数据中可以得出，如本文所述的成功结果不依赖于待增溶的有机化合物中任何特定化学结构的存在，只要其在本质上是疏水性的并且是不溶于水的或只是微溶的。

本领域的普通技术人员将从本公开包括本文提到的附图中理解，本发明的原理能够用于改善任何疏水有机化合物的溶解性，所述疏水有机化合物不溶于或仅微溶于水或水性溶剂，不管它是药物活性药物、期望的化妆品成分还是其他化学物质。

与本发明有关的特别感兴趣的化合物包括其最佳用途由于溶解度限制而经常受到阻碍的各种药物。本发明不仅可以在大量提高的水平上将其中的许多提供给溶液，而且还可以根据情况甚至将它们的效用扩展到医学治疗或化妆品适用性的新领域。

上述尚未提到的其中使用本发明能够改善较差的水溶性的所关注的化合物的实例特别包括：

a.镇痛药和抗风湿药

例如吗啡，可待因，哌腈米特，芬太尼，左美沙酮，曲马多，双氯芬酸，布洛芬，吲哚美辛，萘普生，吡罗昔康；

b.抗过敏药

例如苯非他明，二甲基茚，特非那定，阿司咪唑，洛拉替丁，多西拉敏和美洛西林；

c.抗生素和化学治疗剂

例如利福平，乙胺丁醇，氨硫脲(thiacetazone)；

d.抗癫痫药

例如卡马西平，氯硝西泮，甲琥胺(mesuximide)，苯妥英，丙戊酸；

e.抗真菌剂

例如纳他霉素，两性霉素B，咪康唑，克霉唑，益康唑，芬替康唑，联苯苄唑，酮康唑，托萘酯；

f.抗疟药

例如氯喹，甲氟喹，青蒿素，伯氨喹，苯芴醇，卤泛群(halofantrine)；

g.肾上腺皮质激素

例如醛固酮，布地奈德，氟氢可的松，倍他米松，地塞米松，去炎松(tramcinolone)，氟可龙(fluocortolone)，丙酸氟替卡松(flucticasone propionate)，氢化可的松(hydroxycortisone)，泼尼松龙，泼尼立定，氯泼尼醇，甲基泼尼松龙

h.皮肤药(Dermatics)

例如来自四环素，红霉素，弗拉霉素(framycetin)，短杆菌素(tyrothricin)，夫西地酸(fusidic acid)的抗生素；病毒抑制剂例如阿糖腺苷(vidarabine)；来自安西奈德(amcinonide)，氟泼尼定，阿氯米松(alclometasone)，氯倍他索(clobetasol)，二氟拉松(diflorasone)，哈西奈德(halcinonide)，氟轻松(fluocinolone)，氯可托龙(clocortolone)，氟米松(flumethasone)，二氟可龙(diflucortolone)，氟氢缩松(fludroxycortide)，卤米松(halomethasone)，去羟米松(desoximetasone)，fluocinolide，氟考丁酯(fluocortin butyl)，氟泼尼定(fluprednidene)，泼尼卡酯(prednicarbate)，地奈德(desonide)的肾上腺皮质激素；

i.安眠药和镇静药

例如环巴比妥，戊巴比妥，安眠酮，来自氟西泮，咪达唑仑，硝西泮，洛美西泮，氟硝西泮，三唑仑，溴替唑仑，替马西泮，氯普唑仑的苯二氮卓类；

j.免疫治疗剂和细胞因子

例如硫唑嘌呤，环孢菌素，匹美莫司，西罗莫司，他克莫司，雷帕霉素；

k.局麻药

例如布坦卡因，甲哌卡因，布比卡因，依替卡因，利多卡因，阿替卡因，奥布卡因，丁卡因，苯佐卡因；

l.抗偏头痛药

例如麦角乙脲，美西麦角，双氢麦角胺，麦角胺；

m.麻醉药

例如美索比妥，丙泊酚，依托咪酯，氯胺酮，硫喷妥钠，氟哌利多，芬太尼；

n.甲状旁腺激素，钙代谢调节剂

例如双氢速甾醇

o.眼药

例如cyclodrin，环戊通，后马托品，托品酰胺，福来君，依度尿苷(edoxudine)，阿昔洛韦，乙酰唑胺，双氯非那胺(diclofenamide)，卡替洛尔，噻吗洛尔，美替洛尔，倍他洛尔，吲哚洛尔，布波洛尔，左旋布诺诺，卡巴可；

p.精神药物

例如苯二氮杂卓类，包括劳拉西泮和地西泮，氯美噻唑；

q.性激素及其抑制剂

例如合成代谢类，雄激素类，抗雄激素类，孕激素类，雌激素类，抗雌激素类；

r.细胞抑制剂和转移抑制剂

例如来自美法仑，卡莫司汀，洛莫司汀，环磷酰胺，异环磷酰胺，曲洛磷胺(trofosfamide)，苯丁酸氮芥，白消安，泼尼氮芥，噻替哌的烷基化剂；来自氟尿嘧啶，甲氨蝶呤，巯嘌呤，硫鸟嘌呤的抗代谢物；来自长春花碱，长春花新碱，长春地辛的生物碱；抗生素例如更生霉素；紫杉醇及相关或类似化合物；达卡巴嗪，雌氮芥(oestramustine)，依托泊苷。

虽然本文公开的实验主要是使用七叶皂苷作为皂苷组分进行的，但应该重申的是，甘草甜素和皂树提取物也已被发现具有增溶活性，特别是如上文所述在右泛醇存在的情况下。

Claims

1.增加水不溶性或微水溶性疏水有机化合物在药学上或化妆品上可接受的水性溶剂中的溶解度的方法，该方法包括将选自七叶皂苷、甘草甜素和皂树提取物中的皂苷组分以足以引发胶束形成的量加入到水性溶剂中，

-其中在加入皂苷组分之前疏水有机化合物已经存在于水性溶剂中；或者

-其中在第一步骤中将疏水有机化合物预先溶解在药学上或化妆品上可接受的有机溶剂中，于是在第二步骤中将包含预先溶解的疏水有机化合物的有机溶剂混入水性溶剂中；

于是至少一部分不溶性或微溶性疏水有机化合物通过与皂苷组分相互作用以形成常见的胶束结构而得到增溶并溶解在水性溶剂中，其中所述化合物附接于或包埋在形成的胶束内，产生其中所溶解的所述有机化合物的浓度增加的水性组合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述水性溶剂包含调节至处于4至8范围内的pH的缓冲体系。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述皂苷组分的加入在20至80℃、35至50℃、或在30至40℃范围内的温度下进行。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中七叶皂苷作为一种或唯一的皂苷组分以0.02至0.5％w/v的浓度加入到所述水性溶剂中。

5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中甘草甜素作为一种或唯一的皂苷组分以0.1至5％w/v的浓度加入到所述水性溶剂中。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，还包括将右泛醇以0.5％至5％v/v的浓度加入到所述水性溶剂中。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述水性溶剂包含浓度为1至15％v/v的丙二醇。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述有机溶剂选自DMSO、丙二醇、聚乙二醇、碳酸亚丙酯、异山梨醇二甲醚、脂肪酸醇、单硬脂酸三乙酰甘油酯、二硬脂酸乙二醇酯、单硬脂酸甘油酯、单硬脂酸丙二醇酯、聚乙烯醇、卡波姆、由氢化蓖麻油衍生的非离子聚乙氧基化去污剂、以及化学改性纤维素衍生物。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中将至少一种选自丙二醇、卡拉胶、纤维素衍生物和透明质酸中的其他成分加入到所述水性溶剂中。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述水不溶性或微溶性疏水有机化合物为选自镇痛药、抗风湿药、抗过敏药、抗生素、化学治疗剂、抗癫痫药、抗真菌剂、抗疟药、肾上腺皮质激素、皮肤药(dermatics)、安眠药(hynotics)、镇静药、免疫治疗剂、免疫抑制剂、细胞因子、麻醉剂、抗偏头痛药物、甲状旁腺激素、钙代谢调节剂、眼药、精神药物、性激素、性激素抑制剂、细胞抑制药和转移抑制剂中的药学活性药物。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，用于制造化妆品制剂或药物。

12.药物或化妆品组合物，其包含在水性溶剂体系中的水不溶性或微水溶性疏水有机化合物，其特征在于，其以临界胶束浓度或高于临界胶束浓度包含选自七叶皂苷、甘草甜素和皂树提取物中的皂苷组分，其中至少一部分水不溶性或微溶性有机化合物通过与存在于溶剂中的胶束附接以增溶从而溶解。

13.根据权利要求12所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，其还包含右泛醇和/或丙二醇。

14.根据权利要求12或13所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，其包含浓度为0.01至0.5％w/v的七叶皂苷和/或浓度为0.5-5％w/v的甘草甜素，和任选的浓度为1至15％v/v的丙二醇。

15.根据权利要求12至14中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，所述水性溶剂包含调节至处于4至8范围内的pH的缓冲体系。

16.根据权利要求12至15中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，所述溶解的疏水有机化合物的浓度比没有皂苷组分的相同组合物中的浓度高至少几倍且至多几个数量级。

17.根据权利要求12至16中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，所述水性溶剂体系包含选自DMSO、丙二醇、聚乙二醇、碳酸亚丙酯、异山梨醇二甲醚、脂肪酸醇、单硬脂酸三乙酰甘油酯、二硬脂酸乙二醇酯、单硬脂酸甘油酯、单硬脂酸丙二醇酯、聚乙烯醇、卡波姆、由氢化蓖麻油衍生的非离子聚乙氧基化去污剂以及化学改性纤维素衍生物中的一部分有机溶剂。

18.根据权利要求12至17中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，其包含至少一种选自ι-卡拉胶、κ-卡拉胶和透明质酸中的其他成分。

19.根据权利要求12至18中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，所述水不溶性或微水溶性疏水有机化合物为选自镇痛药、抗风湿药、抗过敏药、抗生素、化学治疗剂、抗癫痫药、抗真菌剂、抗疟药、皮质激素、皮肤药、安眠药、镇静药、免疫治疗剂、免疫抑制剂、细胞因子、麻醉剂、抗偏头痛药物、甲状旁腺激素、钙代谢调节剂、眼药、精神药物、性激素、性激素抑制剂、细胞抑制药和转移抑制剂中的药学活性药物。

20.根据权利要求12至19中任一项所述的药物或化妆品组合物，其特征在于，其适于施用于粘膜表面，特别是鼻、口、眼睛、呼吸道、肺、生殖器区域和肛肠区域的粘膜表面。