CN107820496A - 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的新的四环4‑氧代‑吡啶‑3‑甲酸衍生物 - Google Patents

用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的新的四环4‑氧代‑吡啶‑3‑甲酸衍生物 Download PDF

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Abstract

本发明涉及具有所示通式的化合物、包含该化合物的组合物和使用该化合物的方法，其中R1至R6、V、W、X和Y如文中所述。

Description

用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的新的四环4-氧代-吡啶- 3-甲酸衍生物
本发明涉及可用于哺乳动物的治疗和/或预防的有机化合物，并且特别涉及可用于治疗HBV感染的HBsAg(HBV表面抗原)抑制剂和HBV DNA生成的抑制剂。
发明领域
本发明涉及具有药物活性的新的四环4-氧代-吡啶-3-甲酸衍生物、它们的制造、包含它们的药物组合物以及它们作为药物的潜在用途。
本发明涉及式I的化合物或其可药用盐或对映体或非对映体，
其中R1至R6、V、W、X和Y如下所述。
乙型肝炎病毒(HBV)是有包膜的、部分双链DNA病毒。紧凑3.2kb HBV基因组由四个重叠的开放读框(ORF)组成，其编码核、聚合酶(Pol)、包膜和X-蛋白。Pol ORF是最长的并且包膜ORF位于其内，而X和核ORF与Pol ORF重叠。HBV的生命周期具有两个主要事件：1)闭合环状DNA(cccDNA)由松环(RC DNA)的生成，和2)前基因组RNA(pgRNA)逆转录以生成RC DNA。在宿主细胞感染之前，HBV基因组作为RC DNA存在于病毒子内。已经确定HBV病毒子能够通过非特异性结合至存在于人肝细胞表面的带负电荷的蛋白聚糖(Schulze,A.,P.Gripon&S.Urban.Hepatology,46,(2007),1759-68)和经由HBV表面抗原(HBsAg)特异性结合至肝细胞牛磺胆酸钠共转运多肽(NTCP)受体(Yan,H.等人,J Virol,87,(2013),7977-91)而进入到宿主细胞中。一旦病毒子进入细胞，病毒核和包被的RC DNA通过宿主因子经由核定位信号，通过Impβ/Impα核转运受体转运到细胞核中。在细胞核内部，宿主DNA修复酶将RC DNA转化为cccDNA。cccDNA充当所有病毒mRNA的模板并由此负责在感染个体中的HBV持久性。由cccDNA生成的转录物被分成两类：前基因组RNA(pgRNA)和次基因组RNA。次基因组转录物编码三种包膜(L、M和S)和X蛋白，并且pgRNA编码前核、核和Pol蛋白(Quasdorff,M.&U.Protzer.J Viral Hepat,17,(2010),527-36)。HBV基因表达或HBV RNA合成的抑制导致HBV病毒复制和抗原生成的抑制(Mao,R.等人,PLoS Pathog,9,(2013),e1003494；Mao,R.等人,J Virol,85,(2011),1048-57)。例如，IFN-α显示通过减少从HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)微型染色体的pgRNA和次基因组RNA的转录而抑制HBV复制和病毒HBsAg生成。(Belloni,L.等人,J Clin Invest,122,(2012),529-37；Mao,R.等人,J Virol,85,(2011),1048-57)。所有HBV病毒mRNA被帽化并且多腺苷酸化，然后输出至细胞质用于翻译。在细胞质中，新病毒子的组装被引发并且初生的pgRNA被病毒Pol包裹，以使能够出现pgRNA经由单链DNA中间体逆转录为RC DNA。含有RC DNA的成熟核壳体被细胞质粒以及病毒L、M和S蛋白包封，然后感染性HBV颗粒接着通过在细胞内膜处芽殖而释放(Locarnini,S.Semin LiverDis,(2005),25Suppl 1,9-19)。令人感兴趣的是，也生成非感染性颗粒，其在数量上极大地多于感染性病毒子。这些空的、包封的颗粒(L、M和S)被称为亚病毒颗粒。重要地，由于亚病毒颗粒与感染性颗粒具有相同的包膜蛋白，已经推测它们充当宿主免疫系统的诱饵并且已被用于HBV疫苗。S、M和L包膜蛋白由含有3个不同起始密码子的单个ORF表达。所有三种蛋白在它们的C-末端共享226aa序列、S-结构域。M和L分别具有另外的pre-S结构域，Pre-S2以及Pre-S2和Pre-S1。然而，正是S-结构域具有HBsAg表位(Lambert,C.&R.Prange.Virol J,(2007),4,45)。
病毒感染的控制需要宿主先天免疫系统的密切监视，其可以在感染后数分钟至数小时内产生响应以影响病毒的初始生长，并且限制慢性和持久感染的发展。尽管目前有基于IFN和核苷(核苷酸)类似物的治疗，但是乙型肝炎病毒(HBV)感染仍然是世界范围内的主要健康问题，其涉及估计约3亿5千万慢性携带者，他们具有更高的肝硬化和肝细胞癌的风险。
肝细胞和/或肝内免疫细胞响应于HBV感染而分泌抗病毒细胞因子在被感染肝的病毒清除中起关键作用。然而，由于病毒采用了多种逃避策略来对抗宿主细胞识别系统和随后的抗病毒响应，慢性感染的患者仅显示出弱的免疫响应。
许多观察结果显示若干HBV病毒蛋白可以通过干扰病毒识别信号转导系统并随后干扰干扰素(IFN)抗病毒活性而对抗最初的宿主细胞响应。其中，HBV空亚病毒颗粒(SVP，HBsAg)的过度分泌可以参与在慢性感染患者(CHB)中观察到的免疫耐受状态的维持。持续暴露于HBsAg和其他病毒抗原可以导致HBV-特异性T细胞缺失或导致进行性的功能受损(Kondo等人,Journal of Immunology(1993),150,4659-4671；Kondo等人,Journal of Me二Cal Virology(2004),74,425-433；Fisicaro等人,Gastroenterology,(2010),138,682-93)。此外，HBsAg已被报道通过直接相互作用而抑制免疫细胞如单核细胞、树突细胞(DC)和自然杀伤(NK)细胞的功能(Op den Brouw等人,Immunology,(2009b),126,280-9；Woltman等人,PLoS One,(2011),6,e15324；Shi等人,J Viral Hepat.(2012),19,e26-33；Kondo等人,ISRN Gasteroenterology,(2013),文章编号935295)。
HBsAg定量是用于慢性乙型肝炎中的预后和治疗响应的显著生物标志物。然而，在慢性感染患者中很少观察到HBsAg消失和血清转化，其仍然是治疗的终极目标。当前疗法如核苷(核苷酸)类似物是抑制HBV DNA合成但不降低HBsAg水平的分子。即使采用延长的治疗，核苷(核苷酸)类似物所显示的HBsAg清除率也与自然观察到的那些相当(在-1％-2％之间)(Janssen等人,Lancet,(2005),365,123-9；Marcellin等人,N.Engl.J.Med.,(2004),351,1206-17；Buster等人,Hepatology,(2007),46,388-94)。因此，同时靶向慢性乙型肝炎患者的HBsAg和乙型肝炎病毒DNA水平可以显著改善乙型肝炎患者的免疫激活和缓解(Wieland,S.F.&F.V.Chisari.J Virol,(2005),79,9369-80；Kumar等人,J Virol,(2011),85,987-95；Woltman等人,PLoS One,(2011),6,e15324；Op den Brouw等人,Immunology,(2009b),126,280-9)。
发明概述
本发明涉及式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、卤素、氰基、氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR7；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
R7是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含氮单环杂环烷基；V、W、X和Y之一选自CR8R9、O、S、SO2和NR10，V、W、X和Y中其余的独立地选自键和CR8R9，其中
R8是氢或C1-6烷基；
R9是氢或C1-6烷基；
R10是苯基C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷基羰基、苯基C1-6烷基磺酰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基或C1-6烷基磺酰基。
发明详述
定义
本文所用的单独的或在组合中的术语“C1-6烷基”表示包含1-6个、特别是1-4个碳原子的饱和直链或支链烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、1-丁基、2-丁基、叔丁基等。具体的“C1-6烷基”是甲基、乙基、异丙基和叔丁基。
单独的或在组合中的术语“C3-7环烷基”是指包含3-7个碳原子、特别是3-6个碳原子的饱和碳环，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。具体的“C3-7环烷基”基团是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
单独的或在组合中的术语“C1-6烷氧基”表示基团C1-6烷基-O-，其中“C1-6烷基”如以上所定义；C1-6烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、2-丁氧基、叔丁氧基等。具体的“C1-6烷氧基”基团是甲氧基和乙氧基，特别是甲氧基。
术语“卤素”表示氟、氯、溴或碘。
术语“卤代C1-6烷基”是指C1-6烷基基团，其中C1-6烷基基团的至少一个氢原子被相同或不同的卤原子、特别是氟原子替代。“卤代C1-6烷基”的实例包括一氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、3,3-二氟丙基、2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。具体的“卤代C1-6烷基”基团是二氟甲基或三氟甲基。
术语“单环杂环烷基”是4-7个环原子的一价饱和或部分不饱和单环环系，其包含1、2或3个选自N、O和S的环杂原子，其余环原子为碳。单环杂环烷基的实例是氮杂环丙基、氧杂环丙基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢-噻吩基、吡唑烷基、咪唑烷基、唑烷基、异唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢硫代吡喃基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、高哌嗪基或氧氮杂环庚烷基。具体的“单环杂环烷基”基团是哌啶基、吗啉基、2-氧代-吡咯烷基和吡咯烷基。
术语“含氮单环杂环烷基”是指其中至少一个杂原子是氮的如上所定义的“单环杂环烷基”。“含氮单环杂环烷基”的例子是氮杂环丙基、氮杂环丁基、吡咯烷基、2-氧代-吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、唑烷基、异唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉-4-基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、高哌嗪基或氧氮杂环庚烷基。具体的“含氮单环杂环烷基”基团是哌啶基、吗啉基、2-氧代-吡咯烷基和吡咯烷基。
术语“氨基”是指式-NR’R”的基团，其中R’和R”独立地是氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、杂C3-7环烷基、芳基或杂芳基。或者，R’和R”与它们所连接的氮一起可以形成杂C3-7环烷基。
单独的或在组合中的术语“羰基”是指基团-C(O)-。
单独的或在组合中的术语“氰基”是指基团-CN。
术语“C1-6烷硫基”是指基团-S-R’，其中R’是如上所定义的C1-6烷基基团。
术语“C1-6烷基磺酰基”是指基团-SO2-R’，其中R’是如上所定义的C1-6烷基基团。C1-6烷基磺酰基的例子包括甲基磺酰基和乙基磺酰基。
术语“对映体”表示彼此为不能重叠的镜像的化合物的两种立体异构体。
术语“非对映异构体”表示具有两个或多个手性中心且其分子彼此不为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱特性和反应性。
本发明的化合物可以以其可药用盐的形式存在。术语“可药用盐”是指保留了式I化合物的生物学效力和特性并且由适宜的无毒有机或无机酸或有机或无机碱形成的常规的酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐包括来自无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的那些，以及来自有机酸例如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等的那些。碱加成盐包括来自铵、钾、钠和季铵氢氧化物，例如，四甲基氢氧化铵的那些。将药物化合物化学修饰成盐是制药化学家所熟知的一种用来提高化合物的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性的技术。其记载于例如Bastin R.J.等人，Organic Process Research&Development 2000,4,427-435或Ansel,H.等人。特别是式I化合物的钠盐。
包含一个或多个手性中心的通式I的化合物可以以外消旋体、非对映异构体混合物或光学活性的单一异构体的形式存在。可以根据已知方法将外消旋体分离成对映体。具体地讲，通过与光学活性的酸例如D-或L-酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或樟脑磺酸反应从外消旋混合物形成可以通过结晶分离的非对映异构体盐。
HBsAg的抑制剂
本发明提供了(i)具有通式I的新化合物或其可药用盐、对映体或非对映体:
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、卤素、氰基、氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR7；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
R7是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含氮单环杂环烷基；V、W、X和Y之一选自CR8R9、O、S、SO2和NR10，V、W、X和Y中其余的独立地选自键和CR8R9，其中
R8是氢或C1-6烷基；
R9是氢或C1-6烷基；
R10是苯基C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷基羰基、苯基C1-6烷基磺酰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基或C1-6烷基磺酰基。
本发明的另一个实施方案是(ii)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中
R7是氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、吡咯烷基C1-6烷基或(2-氧代-吡咯烷基)C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X选自键、CH2、O、S、SO2和苯基C1-6烷氧基羰基氨基；或者，
当W是CH2时，X是CH2。
本发明的另一个实施方案是(iii)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是氯或甲氧基；
R3选自甲基、乙基、丙基、吡咯烷基、羟基、甲氧基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、环丙基甲氧基、苄氧基、氰基丙氧基、羟基丙氧基、羟基己氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基乙氧基、甲氧基丙氧基、羧基丙氧基、乙氧基羰基丙氧基、甲硫基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、氨基己氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基、叔丁氧基羰基氨基己氧基、吗啉基丙氧基、吡咯烷基丙氧基和(2-氧代-吡咯烷基)丙氧基；
R4是氢；
R5是氢或甲基；
R6是氢或甲基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X选自键、CH2、O、S、SO2和苯基甲氧基羰基氨基；或者当W是CH2时，X是CH2。
本发明的另一个实施方案是(iv)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中R7是氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、吡咯烷基C1-6烷基或(2-氧代-吡咯烷基)C1-6烷基；
R4是氢；
R5是C1-6烷基；
R6是C1-6烷基；
V和Y是CH2；
W是键；
X是键。
本发明的另一个实施方案是(v)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R2是甲氧基，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(vi)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3是OR7，其中R7是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基或吗啉基C1-6烷基；并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(vii)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3选自甲氧基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、环丙基甲氧基、羟基丙氧基、羟基己氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基乙氧基、甲氧基丙氧基、甲硫基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、氨基己氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基、叔丁氧基羰基氨基己氧基或吗啉基丙氧基，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(viii)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R5是甲基；R6是甲基，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(ix)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3是OR7；其中R7是苯基C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢；
R6是氢；
V和Y是CH2；
当W是键时X选自CH2、O、S、SO2和苯基C1-6烷氧基羰基氨基；或者当W是CH2时X是CH2。
本发明的另一个实施方案是(x)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R2是氯或甲氧基，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(xi)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3是苄氧基或甲氧基丙氧基，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(xii)如上所定义的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中当W是键时X是CH2或S，或当W是CH2时X是CH2，并且所有其余的取代基具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(xiii)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中R7是卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基或吗啉基C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
V和Y是CH2；
当W是键时X是键或S，或者
当W是CH2时X是CH2。
本发明的另一个实施方案是(xiv)式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是氯或甲氧基；
R3选自乙基、吡咯烷基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基和吗啉基丙氧基；
R4是氢；
R5是氢或甲基；
R6是氢或甲基；
V和Y是CH2；
当W是键时X是键或S，或者当W是CH2时X是CH2。
本发明的另一个实施方案是(xv)式I的顺式异构体或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R1至R6、V、W、X和Y具有以上给出的含义。
本发明的另一个实施方案是(xvi)式I的反式异构体或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R1至R6、V、W、X和Y具有以上给出的含义。
本发明的具体式I化合物是如下化合物:
反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
(3aS,12bR)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
(3aR,12bS)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10,11-二甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(2-甲氧基乙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(4-乙氧基-4-氧代丁氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲硫基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-羟基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
反式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
反式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸；
顺式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸；
反式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸；
顺式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸2,2-二氧化物；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-丙基-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
或其可药用盐、对映体或非对映体。
更具体地，本发明涉及如下式I化合物:
反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
或其可药用盐或对映体。
合成
本发明的化合物可以通过任何常规手段制备。用于合成这些化合物的合适方法以及它们的起始原料在以下流程和实施例中提供。除非另有指明，所有取代基，特别是R1至R6、V、W、X和Y如上所定义。此外，除非另有明确说明，所有反应、反应条件、缩写和符号具有有机化学领域的普通技术人员熟知的含义。
用于中间体的通用合成路线(流程1)
流程1
方法1)
方法2)
中间体可以按照流程1制备，其中Q是Br或I；V、W、X和Y均不是S。
根据方法1)，卤化物II与酮III的偶联反应生成化合物IV。该反应可以在Pd催化剂例如Pd2(dba)3、Pd(PPh3)4或PdCl2(PPh3)2，配体例如Xantphos和适宜的碱例如t-BuONa、Na2CO3或Cs2CO3的存在下，在适宜的溶剂例如THF、甲苯或1,4-二氧六环中，在室温至130℃的温度下进行。化合物IV的还原胺化生成胺V。该反应可以用NH4OAc和NaBH3CN在适宜的溶剂例如甲醇中进行。
根据方法2)，将化合物IV-1用三氟甲磺酸甲酯季铵化，然后与NaHS、Na2S和水一起加热生成化合物IV-2。季铵化反应可以在适宜的溶剂例如异丁基甲基酮中、在0℃至室温下进行。将化合物IV-2用NH4OAc和NaBH3CN还原胺化生成化合物V-1。
用于化合物I、Ia、Ib、Iaa、Iab、Iba和Ibb的通用合成路线(流程2)流程2
式I、Ia、Ib、Iaa、Iab、Iba和Ibb的化合物可以按照流程2制备，其中L是C1-6烷基。将化合物V与甲酸乙酯或甲酸一起在溶剂例如乙醇或二氧六环中加热得到化合物XI。将化合物XI用POCl3在适宜的溶剂例如乙腈或DCM中、在室温至100℃的温度下处理得到化合物XII。将化合物XII与2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸C1-6烷基酯在溶剂例如乙醇中反应得到化合物XIII。将XIII用对四氯苯醌脱氢后，得到化合物XIV。将XIV用氢氧化锂或氢氧化钠在适宜的溶剂例如THF/H2O、EtOH/H2O或MeOH/H2O中水解生成化合物I。化合物I可以通过结晶、柱色谱或制备型HPLC分离得到Ia和Ib，可将其进一步通过手性HPLC分离分别得到化合物Iaa、Iab和Iba、Ibb。
用于化合物I-1的通用合成路线(流程3)
流程3
式I-1的化合物可以按照流程3制备，其中Q1是卤素、-O-S(O)2CH3或-O-S(O)2-(4-CH3-Ph)；L是C1-6烷基。将化合物XIV-1在Pd/C的存在下、在溶剂例如乙醇、THF、甲醇中进行氢化脱苄基化得到XIV-2。然后将XIV-2与卤化物、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯在碱例如K2CO3的存在下、在溶剂例如丙酮或DMF中反应得到化合物XIV-3。将XIV-3用氢氧化锂或氢氧化钠在适宜的溶剂例如THF/H2O、EtOH/H2O或MeOH/H2O中水解生成I-1。
本发明还涉及制备式I化合物的方法，包括
(a)将式(A)的化合物用碱水解，
或者
(b)将式(B)的化合物用碱水解，
其中R1至R7、V、W、X和Y如上所定义，除非另有说明，L是C1-6烷基。
在步骤(a)和(b)中，碱是例如氢氧化锂或氢氧化钠。
按照上述方法制备的式I的化合物也是本发明的目的之一。
药物组合物和给药
本发明还涉及用作治疗活性物质的式I的化合物。
另一个实施方案提供含有本发明的化合物和治疗上惰性的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物来制备这些组合物和药物的方法。在一个实施例中，式I的化合物可以通过在环境温度下、在适当pH下并以所需的纯度与生理学可接受的载体(即，在所采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的载体)混合而配制成盖仑制剂给药形式。制剂的pH主要取决于化合物的具体用途和浓度，但通常优选约3至约8的范围。在一个实施例中，式I的化合物在pH 5的乙酸盐缓冲液中配制。在另一个实施方案中，式I的化合物是无菌的。化合物可以例如作为固体或无定形组合物、作为冻干制剂或作为水溶液储存。
组合物以符合良好医学实践的方式进行配制、定剂量和给药。在此上下文中考虑的因素包括被治疗的具体病症、被治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床病症、病症的病因、药剂的递送部位、给药方法、给药时间安排和执业医师已知的其他因素。要给药的化合物的“有效量”将受这些考虑控制，并且是抑制HBsAg所需的最低量。例如，这样的量可以低于对正常细胞或作为整体的哺乳动物而言是有毒的量。
在一个实施例中，每个剂量胃肠外给药的本发明化合物的药物有效量将在约0.01至100mg/kg，或者约0.01至100mg/kg患者体重/天的范围内，其中所使用的化合物的典型初始范围为0.3至15mg/kg/天。在另一个实施方案中，口服单位剂型如片剂和胶囊优选含有约0.1至约1000mg的本发明化合物。
本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括经口、局部(包括含服和舌下)、直肠、阴道、透皮、胃肠外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外及鼻内给药，以及在期望用于局部治疗时，病变内给药。胃肠外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。
本发明的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如片剂、散剂、胶囊、溶液、分散液、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶、乳液、贴剂等。这些组合物可以含有药物制剂中常见的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、填充剂和其他活性物质。
典型制剂通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂进行制备。合适的载体和赋形剂对于本领域技术人员是熟知的并且详细记载于例如Ansel,Howard C.等人,Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.等人,Remington: The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；以及Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005。制剂还可以包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、湿润剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂、稀释剂和其它公知的添加剂，以便使药物(即本发明的化合物或其药物组合物)具有优美的外观或有助于药物产品(即药物)的生产。
适合的口服剂型的实例是包含约0.1至1000mg的本发明的化合物、约0至2000mg无水乳糖、约0至2000mg交联羧甲基纤维素钠、约0至2000mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约0至2000mg硬脂酸镁的片剂。首先将粉状成分混合在一起，然后与PVP的溶液混合。可以将所得组合物干燥、制粒、与硬脂酸镁混合并使用常规设备压制成片剂。气雾剂制剂的一个实例可以通过将例如0.1至1000mg的本发明化合物溶解在合适的缓冲溶液例如磷酸盐缓冲液中，在需要时添加张力剂例如盐如氯化钠而制备。所述溶液可以过滤，例如使用0.2微米滤器过滤，以除去杂质和污染物。
因此，一个实施方案包括药物组合物，其包含式I的化合物或其立体异构体或可药用盐。在另一个实施方案中，包括药物组合物，其包含式I的化合物或其立体异构体或可药用盐以及可药用载体或赋形剂。
以下实施例A和B示例本发明的典型组合物，但是其仅仅是作为本发明的代表。
实施例A
式I的化合物可以以本身已知的方式作为活性成分用于生产具有以下组成的片剂：
实施例B
式I的化合物可以以本身已知的方式作为活性成分用于生产具有以下组成的胶囊：
适应症和治疗方法
本发明的化合物可以抑制HBsAg生成或分泌并且抑制HBV基因表达。因此，本发明的化合物可用于治疗或预防HBV感染。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBsAg生成或分泌的用途。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBV DNA生成的用途。
本发明涉及式I的化合物用于抑制HBV基因表达的用途。
本发明涉及式I的化合物用于治疗或预防HBV感染的用途。
式I化合物用于制备可用于治疗或预防与HBV感染相关的疾病的药物的用途是本发明的一个目的。
本发明特别涉及式I化合物用于制备用于治疗或预防HBV感染的药物的用途。
另一个实施方案包括一种用于治疗或预防HBV感染的方法，所述方法包括施用有效量的式I的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药、缀合物或可药用盐。
附图简述
图1.实施例4的X-射线结构
实施例
通过参照以下实施例可以更完整地理解本发明。然而，不应将它们视为限定本发明的范围。
本文中使用的缩写如下：
μL： 微升
μm： 微米
μM： 微摩尔/升
CDCl3: 氘代氯仿
DME: 1,2-二甲氧基乙烷
DMSO-d6: 氘代二甲基亚砜
g: 克
h: 小时
hrs: 小时
IC50: 半数最大抑制浓度
HPLC: 高效液相色谱
LC/MS: 液相色谱/质谱
LiOH·H2O: 氢氧化锂一水合物
M: 摩尔浓度
mg: 毫克
MHz: 兆赫兹
min: 分钟
mM: 毫摩尔/升
mm: 毫米
mmol: 毫摩尔
MS(ESI): 质谱(电子喷雾电离)
NaOH: 氢氧化钠
Na2SO4: 硫酸钠
NaBH3CN: 氰基硼氢化钠
NaHCO3: 碳酸氢钠
nM: 纳摩尔/升
nm: 纳米
NMR: 核磁共振
obsd. 实测值
rt: 室温
Pd/C: 钯/活性碳
Pd(PPh3)4: 四(三苯基膦)钯(0)
Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2: [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二
氯甲烷的复合物
prep-HPLC: 制备型高效液相色谱
POCl3: 三氯氧磷
TFA: 三氟乙酸
δ: 化学位移
通用实验条件
中间体和最终化合物通过快速色谱使用以下仪器之一进行纯化：i)Biotage SP1系统和Quad 12/25 Cartridge组件；ii)ISCO组合快速色谱仪。硅胶品牌和孔径：i)KP-SIL粒度：40-60μm；ii)CAS注册号：硅胶：63231-67-4，粒度：47-60微米硅胶；iii)来自青岛海洋化工股份有限公司(Qingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd)的ZCX，孔：200-300或300-400。
中间体和最终化合物通过使用X BridgeTM Perp C18(5μm,OBDTM30×100mm)柱或SunFireTM Perp C18(5μm,OBDTM 30×100mm)柱的反相柱制备型HPLC纯化。
手性分离在制备型SFC 80Q上用AD-H,250×20mmI.D.柱进行。条件:A:CO2；B:0.5％二乙胺的MeOH溶液；梯度:B 40％。
LC/MS光谱使用Acquity Ultra Performance LC-3100质量检测器或AcquityUltra Performance LC-SQ检测器获得。标准LC/MS条件如下(运行时间3分钟)：
酸性条件：A：0.1％甲酸的H2O溶液；B：0.1％甲酸的乙腈溶液；
碱性条件：A：0.05％NH3·H2O的H2O溶液；B：乙腈；
中性条件：A：H2O；B：乙腈。
质谱(MS)：通常仅报告指示母核质量的离子，并且除非另有说明，引述的质量离子是正质量离子(M+H)+。
微波辅助反应在Biotage Initiator Sixty或CEM Discover中进行。
NMR谱图使用Bruker Avance 400MHz获得。
将单晶安装在晶体环上并在氮气流中冷却至160K。采用Cu-K-α-辐射在Gemini R超衍射仪(Oxford Diffraction,UK)上收集数据并用Crysalis包处理数据。用ShelXTL软件(Bruker AXS,Karlsruhe)进行结构解析和细化。
所有涉及空气敏感试剂的反应均在氩气氛下进行。除非另有说明，试剂在从商业供应商处获得后不经进一步纯化直接使用。
制备实施例
实施例1和2:反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸和顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
实施例1
实施例2
步骤1:5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊酮的制备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(2.74g,10mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(92mg,0.1mmol)、2-二环己基膦基-2'-甲基联苯(73mg,0.2mmol)和t-BuONa(1.92g,20mmol)在THF(20mL)中的混合物中加入2,2-二甲基环戊酮(2.24g,20mmol)。将形成的混合物在微波照射和氩气氛下于50℃加热1小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤饼在水和乙酸乙酯之间进行分配。将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊酮粗品(2.23g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊胺的制备
向5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊酮粗品(2.51g,7.3mmol)和乙酸铵(8.43g,109.5mmol)在乙醇(30mL)中的混合物中加入NaBH3CN(920mg,14.6mmol)。将形成的混合物在氩气氛下于100℃加热搅拌30小时。将反应混合物用水稀释，然后用1M NaOH水溶液碱化至pH＝10-12。将形成的混合物室温搅拌30分钟，然后用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊胺粗品(2.17g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺的制备
将5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊胺粗品(2.17g,7.1mmol)和甲酸(0.3mL)在甲酸乙酯(30mL)中的溶液于90℃加热6小时。将混合物减压浓缩得到黄色油状N-[5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺粗品(2.47g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:7-甲氧基-8-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉的制备
向N-[5-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺粗品(2.47g,7.1mmol)的CH3CN(20mL)溶液中加入POCl3(1.09g,7.1mmol)。将反应混合物室温搅拌14小时然后减压浓缩。将残余物溶于CH3CN，然后在0℃下用氢氧化铵碱化至pH＝10。将混合物升温至室温并在室温下搅拌1小时。将形成的混合物用CH2Cl2萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状7-甲氧基-8-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉粗品(1.98g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
将7-甲氧基-8-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉粗品(1.98g,6.25mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(3.49g,18.75mmol)在乙醇(20mL)中的混合物于100℃加热搅拌16小时。将混合物减压浓缩得到棕色油状10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(5.16g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯和顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
反式构型
顺式构型
将10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(5.16g,6.25mmol)和对四氯苯醌(1.54g,6.25mmol)在DME(20mL)中的混合物在氩气氛下于70℃加热3小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤饼干燥得到黄色固体状反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(930mg)。将滤液浓缩得到棕色油状顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(6.13g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸和顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
实施例1
实施例2
向反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(930mg,2mmol)在甲醇(8mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(672mg,16mmol)。将形成的混合物室温搅拌3小时然后用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用乙醚处理得到黄色固体状反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(290mg,
实施例1)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 8.59(s,1H),7.50(s,2H),6.85(s,1H),4.13(m,2H),3.90-3.82(m,4H),3.50-3.44(m,3H),3.26(s,3H),2.32-2.19(m,1H),1.99(quin,2H),1.94-1.77(m,3H),1.47(s,3H),1.24(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:428。
向顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(6.13g,2mmol)在甲醇(16mL)和H2O(4mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(2.02g,48mmol)。将形成的混合物室温搅拌5小时然后用1M盐酸酸化至pH＝2-3，然后用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物用乙醚处理得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(309mg,实施例2)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.52(s,1H),7.01(s,1H),4.63(d,1H),4.20-4.06(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),3.48(t,2H),3.26(s,3H),2.33-2.19(m,2H),1.98(quin,2H),1.63-1.53(m,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:428。
实施例3:顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯的制备
向5-溴-2-甲氧基-苯酚(40.6g,200mmol)、K2CO3(55.2g,400mmol)在CH3CN(300mL)和DMF(100mL)中的混合物中加入苄基溴(35.9g,210mmol)。将混合物室温搅拌过夜然后然后在CH2Cl2和水之间进行分配。将分离的水层用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色固体状2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯粗品(62.6g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊酮的制备
向2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯(53.5g,183mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(3.4g,3.7mmol)、2-二环己基膦基-2'-甲基联苯(2.7g,7.4mmol)和t-BuONa(22.8g,238mmol)在THF(600mL)中的混合物中加入2,2-二甲基环戊酮(24.6g,220mmol)。将形成的混合物在氩气氛下于60℃加热3.5小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤液用水稀释并用2M盐酸酸化。将形成的混合物用乙醚萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊酮粗品(58.5g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊胺的制备
向5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊酮粗品(58.5g,181mmol)和乙酸铵(209g,2720mmol)在乙醇(500mL)中的混合物中加入NaBH3CN(22.8g,362mmol)。将形成的混合物在氩气氛下于90℃加热16小时，然后向反应混合物中依次加入另外的乙酸铵(69g,896mmol)和NaBH3CN(5.7g,90mmol)。将形成的混合物于100℃下继续加热40小时。冷却至室温后，将混合物用水稀释，然后用2M NaOH水溶液碱化至pH＝10-12并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用水、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊胺粗品(60.0g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:N-[5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺的制备
将5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊胺粗品(60.0g,181mmol)和甲酸(3mL)的甲酸乙酯(300mL)溶液于90℃加热16小时。将混合物减压浓缩得到黄色油状N-[5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺粗品(61.9g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:8-苄氧基-7-甲氧基-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉的制备
向N-[5-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)-2,2-二甲基-环戊基]甲酰胺粗品(61.9g,175mmol)的CH3CN(400mL)溶液中加入POCl3(26.8g,175mmol)。将反应混合物在氩气氛下室温搅拌20小时然后减压浓缩。将残余物溶于CH3CN，然后在0℃下用氢氧化铵碱化至pH＝10。将形成的混合物升温至室温并在室温下搅拌1小时，然后用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状8-苄氧基-7-甲氧基-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉粗品(42.5g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
将8-苄氧基-7-甲氧基-3,3-二甲基-1,2,3a,9b-四氢环戊二烯并[c]异喹啉粗品(42.5g,127mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(70.9g,381mmol)在乙醇(400mL)中的混合物在氩气氛下于100℃加热48小时。将混合物减压浓缩得到红色油状11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(126.8g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
将11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,8,8a,12b-八氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(126.8g,127mmol)和对四氯苯醌(31.2g,127mmol)在DME(200mL)中的混合物于70℃加热4小时。将形成的混合物减压浓缩并将残余物溶于DME(100mL)。将形成的溶液室温搅拌1小时然后过滤。将滤液减压浓缩并将残余物溶于2-甲基四氢呋喃(300mL)。向上述溶液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)。将形成的混合物搅拌30分钟。将分离的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)洗涤两次并用4M盐酸(75mL)洗涤三次。将合并的酸性水层在0℃下用4M NaOH水溶液碱化至pH＝9，然后用二氯甲烷(200mL)萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色固体状顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(9.87g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤8:顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
向顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(2.17g,4.6mmol)在甲醇(16mL)和H2O(4mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(773mg,18.4mmol)。将形成的混合物室温搅拌3小时，然后用水稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物室温搅拌30分钟然后过滤。将滤饼用水洗涤，干燥并通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(420mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 8.54(s,1H),7.60(s,1H),7.54(s,1H),7.50-7.45(m,2H),7.42(t,2H),7.38-7.33(m,1H),7.12(s,1H),5.30-5.16(m,2H),4.63(d,1H),3.90(s,3H),3.75(t,1H),2.24(t,2H),1.56(ddd,1H),1.30(td,1H),1.16(s,3H),0.38(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:446。
实施例4和5:(3aS,12bR)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸和(3aR,12bS)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
通过手性HPLC从顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸分离两种对映体得到(3aS,12bR)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸和(3aR,12bS)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸。
实施例4:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.59(s,1H),7.54(s,1H),7.50-7.45(m,2H),7.42(t,2H),7.38-7.33(m,1H),7.12(s,1H),5.31-5.15(m,2H),4.62(d,1H),3.89(s,3H),3.75(br.s.,1H),2.23(m,2H),1.63-1.50(m,1H),1.36-1.24(m,1H),1.15(s,3H),0.37(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:446。通过X射线衍射研究确定绝对立体化学(图1)。
实施例5:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.61-7.33(m,7H),7.11(s,1H),5.32-5.14(m,2H),4.62(m,1H),3.89(s,3H),3.75(br.s.,1H),2.24(m,2H),1.60-1.48(m,1H),1.35-1.23(m,1H),1.15(s,3H),0.37(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:446。
实施例6:顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
将顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(7.7g,16.3mmol)和10wt.％钯碳(770mg)在乙醇(300mL)中的混合物在用氢气囊产生的氢气氛下室温搅拌64小时。将反应混合物过滤然后将滤液减压浓缩得到深棕色油状顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(6.3g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(76mg,0.2mmol)在甲醇(3mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(34mg,0.8mmol)。将混合物室温搅拌过夜，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(9mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm8.51(s,1H),7.53(s,1H),7.51(s,1H),6.85(s,1H),4.59(d,1H),3.89(s,3H),3.75-3.65(m,1H),2.28-2.08(m,2H),1.63-1.52(m,1H),1.42-1.30(m,1H),1.15(s,3H),0.39(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:356。
实施例7:顺式-10,11-二甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入碘甲烷(207mg,1.8mmol)。将混合物室温搅拌过夜。向上述混合物中加入LiOH水溶液(0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌2小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状顺式-10,11-二甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(22mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm8.54(s,1H),7.59(s,1H),7.52(s,1H),7.01(s,1H),4.64(d,1H),3.90-3.88(m,3H),3.88-3.86(m,3H),3.81-3.74(m,1H),2.37-2.21(m,2H),1.59(ddd,1H),1.37(td,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:370。
实施例8:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入1,1,1-三氟-2-碘-乙烷(315mg,1.5mmol)。将形成的混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将反应混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(13mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.56(s,1H),7.65(s,1H),7.60(s,1H),7.17(s,1H),5.00-4.79(m,2H),4.65(d,1H),3.93(s,3H),3.76(t,1H),2.41-2.30(m,1H),2.28-2.17(m,1H),1.59(ddd,1H),1.36(td,1H),1.17(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:438。
实施例9:顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入1-碘-2-甲基-丙烷(166mg,0.9mmol)。将形成的混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(21mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.58(s,1H),7.52(s,1H),6.99(s,1H),4.63(d,1H),3.89(s,3H),3.88-3.80(m,2H),3.76(t,1H),2.37-2.20(m,2H),2.13-1.99(m,1H),1.58(ddd,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),1.01(d,3H),0.99(d,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:412。
实施例10:顺式-11-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入溴甲基环丙烷(122mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(27mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),6.96(s,1H),4.62(d,1H),3.96-3.91(m,2H),3.90(s,3H),3.78-3.71(m,1H),2.34-2.17(m,2H),1.57(ddd,1H),1.35(td,1H),1.29-1.20(m,1H),1.16(s,3H),0.60(dd,2H),0.40(s,3H),0.35(q,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:410。
实施例11:顺式-10-甲氧基-11-(2-甲氧基乙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入1-溴-2-甲氧基-乙烷(292mg,2.1mmol)。将混合物室温搅拌40小时。向上述混合物中加入LiOH·H2O(50mg,1.2mmol)和H2O(1mL)。将形成的混合物室温搅拌2小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到白色固体状顺式-10-甲氧基-11-(2-甲氧基乙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(26mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.59(s,1H),7.52(s,1H),7.03(s,1H),4.63(d,1H),4.29-4.15(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),3.69(t,2H),3.32(s,3H),2.37-2.18(m,2H),1.58(ddd,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:414。
实施例12:顺式-11-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-溴丁腈(133mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(24mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.60(s,1H),7.54(s,1H),7.05(s,1H),4.64(d,1H),4.24-4.09(m,2H),3.90(s,3H),3.81-3.73(m,1H),2.66(t,2H),2.37-2.19(m,2H),2.07(quin,2H),1.58(ddd,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:423。
实施例13:顺式-11-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入3-溴丙-1-醇(167mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(13mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.01(s,1H),4.63(m,2H),4.23-4.09(m,2H),3.89(s,3H),3.81-3.72(m,1H),3.57(t,2H),2.35-2.18(m,2H),1.89(quin,2H),1.63-1.52(m,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:414。
实施例14:顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入3-溴-2,2-二甲基-丙-1-醇(150mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用2M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(8mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.58(s,1H),7.52(s,1H),7.00(s,1H),4.63(m,2H),3.90(s,3H),3.87-3.81(m,1H),3.80-3.74(m,2H),3.30(s,2H),2.35-2.19(m,2H),1.64-1.52(m,1H),1.36(td,1H),1.16(s,3H),0.95(s,6H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:442。
实施例15:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-(3-氯丙基)吗啉(145mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(23mg)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.42(s,1H),7.20(s,1H),7.17(s,1H),6.85(s,1H),4.22-4.13(m,3H),3.94(s,3H),3.84-3.75(m,5H),2.68-2.55(m,6H),2.38-2.26(m,2H),2.19-2.08(m,2H),1.75-1.64(m,1H),1.56-1.47(m,1H),1.28(s,3H),0.54(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:483。
实施例16:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(124mg,0.9mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入1-(3-氯丙基)吡咯烷盐酸盐(166mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(10mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.01(s,1H),4.63(d,1H),4.18-4.09(m,2H),3.89(s,3H),3.80-3.72(m,1H),2.56-2.50(m,2H),2.48-2.40(m,4H),2.31-2.23(m,2H),1.95-1.87(m,2H),1.70-1.65(m,4H),1.62-1.54(m,1H),1.41-1.34(m,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:467。
实施例17:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-甲基苯磺酸3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙酯(178mg,0.6mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(20mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.59(s,1H),7.52(s,1H),6.98(s,1H),4.63(d,J＝8.5Hz,1H),4.17-4.01(m,2H),3.90(s,3H),3.80-3.72(m,1H),3.40-3.35(m,2H),2.34-2.16(m,4H),1.99-1.88(m,4H),1.64-1.53(m,1H),1.36(td,J＝7.8,12.8Hz,1H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:481。
实施例18:顺式-11-(4-乙氧基-4-氧代丁氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-溴丁酸乙酯(176mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-(4-乙氧基-4-氧代丁氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(15mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.59(s,1H),7.52(s,1H),7.01(s,1H),4.63(d,1H),4.17-4.02(m,4H),3.89(s,3H),3.82-3.72(m,1H),2.49-2.44(m,2H),2.35-2.18(m,2H),2.00(quin,2H),1.63-1.53(m,1H),1.35(td,1H),1.22-1.14(m,6H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:470。
实施例19:顺式-11-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-溴丁酸乙酯(176mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状所需的顺式-11-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(25mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.02(s,1H),4.62(d,1H),4.18-4.02(m,2H),3.89(s,3H),3.82-3.72(m,1H),2.40(t,2H),2.35-2.20(m,2H),1.96(quin,2H),1.58(ddd,1H),1.35(td,1H),1.16(s,3H),0.39(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:442。
实施例20:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲硫基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-甲基苯磺酸3-甲硫基丙酯(156mg,0.6mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状所需的顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲硫基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(14mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.02(s,1H),4.62(d,1H),4.24-4.08(m,2H),3.89(s,3H),3.81-3.71(m,1H),2.62(m,2H),2.32-2.22(m,2H),2.07(s,3H),2.01(quin,2H),1.64-1.53(m,1H),1.35(td,1H),1.16(s,3H),0.39(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:444。
实施例21:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-甲基苯磺酸3-甲基磺酰基丙酯(175mg,0.6mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(13mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.59(s,1H),7.53(s,1H),7.02(s,1H),4.63(d,1H),4.30-4.14(m,2H),3.90(s,3H),3.81-3.73(m,1H),3.31-3.25(m,2H),3.04(s,3H),2.35-2.12(m,4H),1.64-1.53(m,1H),1.35(td,1H),1.16(s,3H),0.39(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:476。
实施例22:顺式-11-((6-羟基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(115mg,0.3mmol)和K2CO3(83mg,0.6mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入4-甲基苯磺酸3-甲基磺酰基丙酯(163mg,0.9mmol)。将混合物于120℃加热搅拌4小时然后冷却至室温。向上述混合物中加入LiOH水溶液(2.4M,0.5mL,1.2mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用乙酸酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-((6-羟基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(21mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.00(s,1H),4.63(d,1H),4.37(br.s.,1H),4.15-3.99(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),3.40(br.s.,2H),2.36-2.18(m,2H),1.74(quin,2H),1.58(ddd,1H),1.50-1.30(m,7H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:456。
实施例23:顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:4-甲基苯磺酸6-(叔丁氧基羰基氨基)己酯的制备
将N-(6-羟基己基)氨基甲酸叔丁酯(5.38g,24.8mmol)、三乙胺(5.01g,49.6mmol)和4-二甲基氨基吡啶(151mg,1.24mmol)在CH2Cl2(60mL)中的混合物于0℃搅拌30分钟，然后在0℃下分批加入对甲苯磺酰氯(4.71g,24.8mmol)。将形成的混合物升温至室温并在室温下搅拌过夜。将混合物用水稀释并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用1M盐酸洗涤三次，然后用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状4-甲基苯磺酸6-(叔丁氧基羰基氨基)己酯(8.30g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(460mg,1.2mmol)和K2CO3(331mg,2.4mmol)在DMF(8mL)中的混合物中加入4-甲基苯磺酸6-(叔丁氧基羰基氨基)己酯(1.33g,3.6mmol)。将混合物于120℃加热搅拌3小时。冷却至室温后，将混合物在CH2Cl2和水之间进行分配。将分离的水层用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到棕色油状顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(1.48g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
向顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(370mg,0.3mmol)在甲醇(3mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(50mg,1.2mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(28mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm8.53(s,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),6.99(s,1H),6.79(m,1H),4.63(d,1H),4.16-4.00(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),2.96-2.85(m,2H),2.35-2.18(m,2H),1.79-1.65(m,2H),1.64-1.51(m,1H),1.45-1.22(m,17H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:555。
实施例24:顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
向顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(1.11g,0.9mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中加入三氟乙酸(2mL)。将形成的混合物在室温下搅拌过夜然后减压浓缩得到棕色油状顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(2.10g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
向顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯粗品(700mg,0.3mmol)在甲醇(3mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(252mg,6mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到无色油状顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(6mg)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:455。
实施例25:顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯盐酸盐的制备
将顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(510mg,0.6mmol)和1M HCl的EtOAc溶液(15mL)的混合物室温搅拌过夜。将形成的混合物减压浓缩得到棕色油状顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯盐酸盐粗品(454mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
向顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯盐酸盐(227mg,0.3mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(194mg,1.5mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入乙酰氯(70mg,0.9mmol)。将形成的混合物室温搅拌1小时然后减压浓缩。将残余物溶于甲醇(3mL)和H2O(1mL)，然后向溶液中加入LiOH·H2O(101mg,2.4mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(27mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.54(s,1H),7.80(t,1H),7.58(s,1H),7.51(s,1H),7.00(s,1H),4.63(d,1H),4.15-4.00(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),3.02(q,2H),2.35-2.19(m,2H),1.78(s,3H),1.77-1.69(m,2H),1.58(ddd,1H),1.47-1.28(m,7H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:497。
实施例26:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯盐酸盐(227mg,0.3mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(194mg,1.5mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入甲磺酸酐(263mg,1.5mmol)。将混合物室温搅拌1小时然后减压浓缩。将残余物溶于甲醇(3mL)和H2O(1mL)，然后向溶液中加入LiOH·H2O(101mg,2.4mmol)。将形成的混合物室温搅拌16小时，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(15mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm8.53(s,1H),7.57(s,1H),7.51(s,1H),7.00(s,1H),6.95(t,1H),4.63(d,1H),4.15-4.01(m,2H),3.89(s,3H),3.76(t,1H),2.93(q,2H),2.88(s,3H),2.37-2.19(m,2H),1.75(quin,2H),1.58(ddd,1H),1.52-1.33(m,7H),1.16(s,3H),0.40(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:533。
实施例27和28:反式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸和顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸
实施例27
实施例28
步骤1:2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚酮的制备
向4-溴-1-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(834mg,3mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(28mg,0.03mmol)、2-二环己基膦基-2'-甲基联苯(22mg,0.06mmol)和t-BuONa(576mg,6mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入环庚酮(672mg,6mmol)。将混合物在微波照射和氩气氛下于60℃加热30分钟。然后将混合物在1M盐酸和EtOAc之间进行分配。将水层用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚酮粗品(1.23g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚胺的制备
向2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚酮粗品(1.23g,3mmol)和乙酸铵(6.93g,90mmol)在甲醇(10mL)中的混合物中加入NaBH3CN(756mg,12mmol)。将混合物室温搅拌过夜，然后用水稀释并用2M NaOH水溶液碱化至pH＝10-12。将形成的混合物室温搅拌30分钟，然后用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚胺粗品(810mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚基]甲酰胺的制备
将2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚胺粗品(810mg,2.6mmol)和甲酸(0.15mL)的甲酸乙酯(15mL)溶液于90℃加热2小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到黄色油状N-[2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚基]甲酰胺粗品(790mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:3-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)-7,8,9,10,11,11a-六氢-6aH-环庚三烯并[c]异喹啉的制备
向N-[2-[4-氯-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]环庚基]甲酰胺粗品(790mg,2.3mmol)的CH3CN(10mL)溶液中加入POCl3(352mg,2.3mmol)。将混合物于80℃加热搅拌3小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物溶于CH2Cl2。将形成的溶液于0℃下用氨水碱化至pH＝10，然后升温至室温并在室温下搅拌1小时。然后将分离的水层用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状3-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)-7,8,9,10,11,11a-六氢-6aH-环庚三烯并[c]异喹啉粗品(720mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,2,5a,6,7,8,9,10,10a,14b-十氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯的制备
将3-氯-2-(3-甲氧基丙氧基)-7,8,9,10,11,11a-六氢-6aH-环庚三烯并[c]异喹啉粗品(720mg,2.24mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(1.25g,6.72mmol)在乙醇(10mL)中的混合物于100℃下加热搅拌过夜。将混合物减压浓缩得到棕色油状13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,2,5a,6,7,8,9,10,10a,14b-十氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯粗品(2.04g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯的制备
将13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-1,2,5a,6,7,8,9,10,10a,14b-十氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯粗品(2.04g,2.24mmol)和对四氯苯醌(551mg,2.24mmol)在DME(10mL)中的混合物于70℃下加热搅拌3小时。冷却至室温后，将混合物过滤。将滤饼减压干燥得到13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯粗品(275mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:反式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸和顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸的制备
实施例27
实施例28
向13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸乙酯粗品(275mg,0.6mmol)在甲醇(4mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(202mg,4.8mmol)。将混合物室温搅拌64小时，然后用水稀释并用1M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化并从乙醚/甲醇中沉淀得到黄色固体状反式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸(50mg)和黄色固体状顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸(15mg)。
实施例27:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.85(s,1H),8.22(s,1H),7.37(s,1H),7.14(s,1H),4.89-4.78(m,1H),4.31-4.17(m,2H),3.65(m,1H),3.52(t,2H),3.27(s,3H),2.34-2.21(m,1H),2.14-1.96(m,4H),1.76-1.50(m,7H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例28:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.62(s,1H),8.18(s,1H),7.34(s,1H),7.19(s,1H),4.27(m,2H),4.00-3.90(m,1H),3.52(t,2H),3.27(s,3H),3.04(m,1H),2.46-2.30(m,3H),2.08-1.97(m,2H),1.94-1.50(m,7H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例29和30:反式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸和顺式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸
实施例29
实施例30
步骤1:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸苄酯的制备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(1.10g,4mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(37mg,0.04mmol)、2-二环己基膦基-2'-甲基联苯(25mg,0.08mmol)和t-BuONa(768mg,8mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入4-氧代哌啶-1-甲酸苄酯(1.86g,8mmol)。将混合物在微波照射下于60℃加热15分钟。冷却至室温后，将混合物在水和乙酸乙酯之间进行分配，然后将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸苄酯粗品(2.72g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:4-氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸苄酯粗品(2.72g,4mmol)和乙酸铵(4.62g,60mmol)在甲醇(30mL)中的混合物中加入NaBH3CN(504mg,8mmol)。将混合物室温搅拌过夜，然后用水稀释并用2M NaOH水溶液碱化至pH＝10-12。将形成的混合物室温搅拌30分钟并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄色油状4-氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯粗品(1.95g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:4-甲酰氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯的制备
将4-氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯粗品(1.92g,4mmol)和甲酸(0.02mL)在甲酸乙酯(20mL)中的溶液于90℃下加热搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到黄色油状4-甲酰氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯粗品(1.97g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-苯并[c][1,6]二氮杂萘-2-甲酸苄酯的制备
向4-甲酰氨基-3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-1-甲酸苄酯粗品(1.97g,4mmol)的CH3CN(15mL)溶液中加入POCl3(612mg,4mmol)。将混合物于70℃下加热搅拌2小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物溶于CH3CN。将形成的溶液在0℃下用氨水碱化至pH＝10，然后升温至室温并在室温下搅拌1小时。将混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到橙色油状8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-苯并[c][1,6]二氮杂萘-2-甲酸苄酯粗品(1.69g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,9,9a,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯的制备
将8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-苯并[c][1,6]二氮杂萘-2-甲酸苄酯粗品(1.69g,4mmol)和2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(2.23g,12mmol)在乙醇(20mL)中的混合物于100℃下加热搅拌过夜。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到棕色油状11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,9,9a,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯粗品(3.70g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,13b-四氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯的制备
将11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,9,9a,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯粗品(3.70g,4mmol)和对四氯苯醌(984mg,4mmol)在DME(20mL)中的混合物在氩气氛下于70℃加热搅拌3小时。将混合物减压浓缩得到深棕色固体状11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,13b-四氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯粗品(4.91g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:反式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸和顺式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸的制备
实施例29
实施例30
向11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-4,4a,8,13b-四氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-2,7(3H)-二甲酸2-苄酯7-乙酯粗品(4.91g,4mmol)在甲醇(20mL)和H2O(4mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(1.34g,32mmol)。将混合物室温搅拌过夜，然后用1M盐酸酸化至pH＝2-3并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱和制备型HPLC纯化得到米白色固体状反式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸(5mg)和白色固体状顺式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸(23mg)。
实施例29:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.53(s,1H),7.57(s,1H),7.47(s,1H),7.44-7.30(m,5H),6.93(s,1H),5.16(s,2H),4.91(d,1H),4.36(d,1H),4.18(t,2H),4.08-3.98(m,1H),3.91(s,3H),3.48(t,2H),3.26(s,3H),3.02(br.s.,3H),2.66(d,1H),1.99(quin,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:549。
实施例30:MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:549。
实施例31和32:反式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸和顺式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸
实施例31
实施例32
步骤1:2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己酮的制备
向2-苄氧基-4-溴-1-甲氧基-苯(5.0g,17.1mmol)的无水二氧六环(80mL)溶液中加入环己酮(2.0g,20.5mmol)、乙酸钯(38.2mg,0.17mmol)、三叔丁基四氟硼酸盐(59.2mg,0.20mmol)和二(三甲基硅烷基)氨基锂(1.3mol/L,26.3mL,34.2mmol)。将反应混合物在氩气氛下于60℃加热搅拌3小时，然后冷却至室温并减压浓缩。将残余物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己酮(300mg)。
步骤2:2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己胺的制备
向2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己酮(250mg,0.81mmol)的MeOH(30mL)溶液中在室温下加入乙酸铵(624.5mg,8.1mmol)和氰基硼氢化钠(152.6mg,2.43mmol)。将反应混合物室温搅拌20小时，然后用氢氧化钠水溶液(4mol/L)终止反应。将形成的混合物室温搅拌4小时，然后在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己胺(230mg)粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己基]甲酰胺的制备
向2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己胺(230mg,0.74mmol)的二氧六环(10mL)溶液中加入甲酸(83.7μL,2.22mmol)。将反应混合物于80℃下加热搅拌16小时，然后冷却至室温并减压浓缩得到N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己基]甲酰胺粗品(240mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:9-苄氧基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢菲啶的制备
向N-[2-(3-苄氧基-4-甲氧基-苯基)环己基]甲酰胺(240mg,0.71mmol)的MeCN(10mL)溶液中加入三氯氧磷(0.1mL,1.1mmol)。将形成的混合物于50℃下加热搅拌2小时然后减压浓缩。将残余物在饱和NaHCO3水溶液和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到9-苄氧基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢菲啶(200mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,9,9a,13b-八氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯的制备
向9-苄氧基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢菲啶(200mg,0.62mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(463.6mL,2.49mmol)。将反应混合物于100℃下加热搅拌16小时，然后减压浓缩得到12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,9,9a,13b-八氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯的制备
向12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,9,9a,13b-八氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)的DME(10mL)溶液中加入对四氯苯醌(106.7mg,0.43mmol)。将形成的混合物于70℃下加热搅拌2小时，然后冷却至室温并减压浓缩得到12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:反式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸和顺式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸的制备
实施例31
实施例32
向12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)在甲醇(9mL)和水(3mL)混合溶剂中的溶液中加入LiOH.H2O(78.1mg,1.86mmol)。将反应混合物室温搅拌2小时然后用6M盐酸酸化。将形成的混合物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到反式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸(41mg)和顺式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸(5mg)。
实施例31:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 8.62(s,1H),7.55(s,1H),7.52-7.32(m,6H),7.11(s,1H),5.24(s,2H),3.91(s,3H),3.80-3.71(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.69-2.57(m,2H),2.08-2.00(m,1H),1.90-1.72(m,2H),1.50-1.20(m,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例32:1H NMR(400MHz,丙酮-d6):δppm 8.63(s,1H),7.61(s,1H),7.58-7.52(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.37-7.34(m,1H),7.22(s,1H),7.18(s,1H),5.33(s,2H),4.74-4.62(m,1H),4.02(s,3H),3.69-3.59(m,1H),2.68-2.63(m,2H),1.95-1.83(m,2H),1.61-1.46(m,3H),1.34-1.20(m,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例33和34:反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸
实施例33
实施例34
步骤1:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-酮的制备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(5.0g,18.2mmol)的无水甲苯(80mL)溶液中加入四氢吡喃-4-酮(7.3g,72.8mmol)、乙酸钯(40.9mg,0.18mmol)、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基呫吨(210.6mg,0.36mmol)和碳酸铯(11.9g,36.4mmol)。将反应混合物在氩气氛下于100℃加热搅拌24小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-酮(200mg)。
步骤2:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-胺的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-酮(200mg,0.68mmol)的MeOH(30mL)溶液中在室温下加入乙酸铵(524.3mg,6.8mmol)和氰基硼氢化钠(128.1mg,2.04mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后用氢氧化钠水溶液终止反应。将形成的混合物室温搅拌4小时，然后在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-胺(200mg)粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-基]甲酰胺的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-胺(200mg,0.68mmol)的二氧六环(10mL)溶液中加入甲酸(76.9μL,2.04mmol)。将反应混合物于100℃下加热搅拌18小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-基]甲酰胺粗品(210mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤4:8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-吡喃并[4,3-c]异喹啉的制备
向N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-基]甲酰胺(210mg,0.65mmol)的MeCN(10mL)溶液中加入三氯氧磷(0.12mL,1.3mmol)。将反应混合物于50℃下加热搅拌3小时然后减压浓缩。将残余物在饱和NaHCO3水溶液和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-吡喃并[4,3-c]异喹啉(198mg)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤5:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯的制备
向8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-吡喃并[4,3-c]异喹啉(198mg,0.65mmol)的EtOH(10mL)溶液中加入2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(363.1mg,1.95mmol)。将反应混合物于110℃下加热搅拌20小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯的制备
向11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)的DME(10mL)溶液中加入对四氯苯醌(113.1mg,0.46mmol)。将反应混合物于70℃下加热搅拌3小时，然后减压浓缩得到11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤7:反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸的制备
实施例33
实施例34
向11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)在甲醇(9mL)和水(3mL)混合溶剂中的溶液中加入LiOH.H2O(81.9mg,1.95mmol)。将反应混合物室温搅拌2小时然后用6M盐酸酸化。将形成的混合物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸(15mg)和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸(3mg)。
实施例33:1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.69(s,1H),7.25(s,1H),7.12(s,1H),6.68(s,1H),4.80-4.69(m,1H),4.44-4.34(m,1H),4.25-4.15(m,2H),3.96(s,3H),3.93-3.84(m,1H),3.64-3.55(m,4H),3.39(s,3H),3.13-2.98(m,1H),2.64-2.54(m,1H),2.20-2.13(m,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:416。
实施例34:1H NMR(400MHz,CD3CN)δppm 8.61(s,1H),7.41(s,1H),7.22(s,1H),7.13(s,1H),4.78-4.69(m,2H),4.22-4.11(m,2H),3.93(s,3H),3.89-3.83(m,1H),3.79-3.73(m,1H),3.58-3.52(m,3H),3.43-3.37(m,1H),3.33(s,3H),2.06-2.01(m,2H),1.83-1.73(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:416。
实施例35和36:反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸
实施例35
实施例36
步骤1:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备
向4-溴-1-甲氧基-2-(3-甲氧基丙氧基)苯(10.0g,36.4mmol)的无水THF(150mL)溶液中加入4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.71g,43.7mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(329.7mg,0.36mmol)、2-(二环己基膦基)-2'-甲基联苯(266.1mg,0.73mmol)和叔丁醇钠(5.25g,54.6mmol)。将反应混合物在氩气氛下于60℃加热6小时。冷却至室温后，将混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.0g)。
步骤2:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-4-酮的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.0g)的MeCN(50mL)溶液中加入6M盐酸(10mL)。将混合物室温搅拌30分钟然后用NaHCO3水溶液碱化并用乙酸乙酯萃取。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-4-酮(2.5g)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤3:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-甲基-哌啶-4-酮的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]哌啶-4-酮(2.5g,12.9mmol)的MeCN(40mL)溶液中加入K2CO3(3.56g,25.8mmol)和碘甲烷(1.2mL,19.4mmol)。将反应液室温搅拌16小时然后过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-甲基-哌啶-4-酮(2.0g)。
步骤4:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-酮的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]-1-甲基-哌啶-4-酮(2.0g,6.5mmol)的异丁基甲基酮(20mL)溶液中于℃下缓慢加入三氟甲磺酸甲酯(0.69mL,6.5mmol)。将混合物升温至室温并在室温下搅拌30分钟。向上述混合物中加入硫氢化钠(1.82g,32.5mmol)和九水硫化钠(1.56g,6.5mmol)的水(10mL)溶液。将形成的混合物于100℃下加热搅拌4小时。冷却至室温后，将混合物在盐水和乙酸乙酯之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-酮(600mg)。
步骤5:3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-胺的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-酮(0.6g,1.93mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入乙酸铵(2.2g,28.95mmol)和氰基硼氢化钠(0.36g,5.79mmol)。将反应混合物室温搅拌24小时，然后用4M氢氧化钠水溶液终止反应。将形成的混合物室温搅拌4小时，然后在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-胺，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤6:N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-基]甲酰胺的制备
向3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢吡喃-4-胺粗品(上一步骤的全部粗产物)的二氧六环(10mL)溶液中加入甲酸(0.22mL,5.79mmol)。将反应混合物于100℃下加热搅拌14小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-基]甲酰胺(0.52g)。
步骤7:8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉的制备
向N-[3-[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]四氢硫代吡喃-4-基]甲酰胺(0.52g,1.53mmol)的MeCN(10mL)溶液中加入三氯氧磷(0.21mL,2.3mmol)。将反应混合物于50℃加热3小时然后减压浓缩。将残余物在饱和NaHCO3水溶液和DCM之间进行分配。将有机层分离，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤8:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯的制备
向8-甲氧基-9-(3-甲氧基丙氧基)-3,4,4a,10b-四氢-1H-硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉粗品(上一步骤的全部粗产物)的EtOH(10mL)溶液中加入2-(乙氧基亚甲基)-3-氧代-丁酸乙酯(0.85g,4.59mmol)。将反应混合物于100℃加热18小时。冷却至室温后，将混合物减压浓缩得到11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤9:11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯的制备
向11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,9,9a,13b-八氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)的DME(10mL)溶液中加入对四氯苯醌(0.26g,1.07mmol)。将反应混合物于70℃加热3小时然后减压浓缩得到11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤10:反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸的制备
实施例35
实施例36
向11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸乙酯粗品(上一步骤的全部粗产物)在甲醇(9mL)和水(3mL)混合溶剂中的溶液中加入LiOH.H2O(0.19g,4.59mmol)。将混合物室温搅拌2小时然后用6M盐酸酸化。将混合物在盐水和DCM之间进行分配。将有机层分离并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸(26mg)和顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸(4mg)。
实施例35:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.60(s,1H),7.54(s,1H),7.43(s,1H),7.11(s,1H),4.19-4.12(m,2H),3.96-3.85(m,4H),3.78-3.65(m,1H),3.50-3.43(m,2H),3.26(s,3H),3.14-3.05(m,1H),3.07-2.92(m,2H),2.82-2.72(m,2H),2.18-2.06(m,1H),2.03-1.96(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例36:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.80(s,1H),7.54(s,1H),7.46(s,1H),7.09(s,1H),4.77-4.68(m,1H),4.20-4.07(m,2H),3.90(s,3H),3.80-3.75(m,1H),3.65-3.57(m,1H),3.51-3.46(m,2H),3.26(s,3H),3.17-3.09(m,1H),2.85-2.76(m,1H),2.04-1.90(m,4H),1.65-1.52(m,1H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:432。
实施例37:反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸2,2-二氧化物
向反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸(20mg,0.05mmol)的DCM(3mL)的溶液中加入3-氯过氧苯甲酸(24.0g,0.1mmol)。将反应混合物室温搅拌30小时然后减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸2,2-二氧化物(4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.69-8.59(s,1H),7.57-7.51(s,1H),7.46-7.40(s,1H),7.10-7.04(s,1H),4.39-4.31(m,1H),4.20-4.08(m,3H),3.91(s,3H),3.72-3.61(m,1H),3.54-3.43(m,3H),3.26(s,3H),3.19-3.16(m,4H),2.05-1.92(m,2H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:464。
实施例38:顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
步骤1:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯的制备
向顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(1.53g,4mmol)和三乙胺(1.21g,12mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中在0℃下滴加N-苯基-二(三氟甲磺酰亚胺)(2.14g,6mmol)。将混合物于0℃至室温下搅拌过夜，然后用CH2Cl2稀释。将形成的混合物用1M盐酸和盐水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(1.21g)。
步骤2:顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸的制备
将顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(103mg,0.2mmol)、甲基硼酸(24mg,0.4mmol)、K2CO3(83mg,0.6mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(15mg,0.02mmol)在THF(2.4mL)和水(0.6mL)中的混合物在氩气氛下于60℃加热搅拌过夜。冷却至室温后，向混合物中加入4M氢氧化钠溶液(0.5mL,2mmol)。将形成的混合物室温搅拌1小时，然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(17mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.47(s,1H),7.39(s,1H),7.19(s,1H),7.17(s,1H),4.18(d,1H),3.93(s,3H),3.84-3.76(m,1H),2.37-2.26(m,2H),2.31(s,3H),1.68(ddd,1H),1.50(td,1H),1.28(s,3H),0.53(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:354。
实施例39:顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
将顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(155mg,0.3mmol)、乙基硼酸(89mg,1.2mmol)、K2CO3(249mg,1.8mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(44mg,0.06mmol)在THF(3.6mL)和水(0.9mL)中的混合物在氩气氛下于65℃加入搅拌过夜。冷却至室温后，向混合物中加入4M氢氧化钠溶液(1.5mL,6mmol)。将形成的混合物室温搅拌1小时然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(9mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.47(s,1H),7.42(s,1H),7.19(s,1H),7.18(s,1H),4.18(d,1H),3.93(s,3H),3.85-3.78(m,1H),2.81-2.63(m,2H),2.39-2.26(m,2H),1.68(ddd,1H),1.50(td,J＝8.4,12.9Hz,1H),1.28(s,3H),1.24(t,3H),0.53(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:368。
实施例40:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-丙基-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
将顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(155mg,0.3mmol)、丙基硼酸(105mg,1.2mmol)、K2CO3(249mg,1.8mmol)和Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(44mg,0.06mmol)在THF(3.6mL)和水(0.9mL)中的混合物在氩气氛下于65℃加热搅拌过夜。冷却至室温后，向混合物中加入4M氢氧化钠溶液(1.5mL,6mmol)。将混合物室温搅拌1小时然后用水稀释并用2M盐酸酸化至pH＝2-3。将形成的混合物用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到黄色固体状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-丙基-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(12mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.46(s,1H),7.37(s,1H),7.18(s,1H),7.17(s,1H),4.17(d,1H),3.92(s,3H),3.85-3.77(m,1H),2.74-2.59(m,2H),2.38-2.28(m,2H),1.65(m,2H),1.54-1.44(m,1H),1.28(s,3H),1.25(s,1H),0.98(t,3H),0.53(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:382。
实施例41:顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸
向顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸乙酯(155mg,0.3mmol)的NMP(2mL)溶液中加入吡咯烷(107mg,1.5mmol)。将反应瓶密封并在微波照射下于150℃加热3小时。冷却至室温后，向形成的混合物中加入4M氢氧化钠水溶液(1.5mL,6mmol)。将形成的混合物室温搅拌1小时，然后通过制备型HPLC纯化得到黄色粉末状顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸(18mg)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm8.37(s,1H),7.08(s,1H),7.07(s,1H),6.46(s,1H),4.10(d,1H),3.87(s,3H),3.78-3.70(m,1H),3.63-3.49(m,4H),2.34-2.25(m,2H),2.02-1.94(m,4H),1.69-1.49(m,2H),1.26(s,3H),0.56(s,3H)。MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:409。
生物学实施例
实施例42材料和方法
HBV细胞系
将组成性表达HBV的细胞系HepG2.2.15细胞(Acs等人.Proc NatlAcad Sci USA,84,(1987),4641-4)在保持在5％CO2、37℃的DMEM+Glutamax-I培养基(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA)中培养，所述培养基补充有10％胎牛血清(Invitrogen)和最终浓度为200mg/L的G418(Invitrogen)。
HBsAg试验
将HepG2.2.15细胞一式两份地以1.5x104个细胞/孔接种到白色96孔板中。将细胞用化合物在DMSO中的三倍系列稀释液处理。在所有孔中的最终DMSO浓度为1％，并将DMSO用作无药物对照。
使用HBsAg化学发光免疫测定(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.，中国郑州，目录号：CL0310-2)来半定量地测量分泌的HBV抗原的水平。对于该检测，使用50μL/孔培养上清液并用HBsAg化学发光免疫测定(CLIA)试剂盒(Autobio Diagnostics Co.，中国郑州，目录号：CL0310-2)对HBsAg进行定量，将50μL的上清液转移至CLIA测定板并将50μL的酶结合试剂添加到每个孔中。将板密封并在室温下温和搅拌1小时。弃去上清液-酶-混合物并将孔用300μL的PBS洗涤6次。通过将CLIA板正面向下放置在吸水纸巾上将残余液体除去。向每个孔中添加25μL的底物A和B。在温育10分钟后使用照度计(Mithras LB940MultimodeMicroplate Reader)测量发光度。生成剂量-响应曲线并使用E-WorkBook Suite(IDBusiness Solutions Ltd.,Guildford,UK)外推IC50值。IC50定义为相比于无药物对照，HBsAg分泌减少50％时的化合物浓度(或经调节的培养基对数稀释)。
按照文中的描述测试式I化合物抑制HBsAg的能力。在以上试验中测试实施例化合物并发现其具有低于25.0μM的IC50。发现式I的特定化合物具有低于0.100μM的IC50。发现式I的更为特定的化合物具有低于0.010μM的IC50。HBsAg试验的结果在表1中给出。
表1:在HBsAg试验中的活性数据
HBV DNA试验
该试验采用实时qPCR(TaqMan)直接测量细胞外HBV DNA拷贝数。将HepG2.2.15细胞接种于96孔微量滴定板中。只使用靠内的孔以减少细胞培养过程中观察到的“边缘效应”，靠外的孔中充满完全培养液以使样品的蒸发减至最小。第二天，洗涤HepG2.2.15细胞并将培养基用含不同浓度测试化合物的完全培养基替代，一式三份。3TC作为阳性对照，在细胞中单独加入培养基作为阴性对照(病毒对照，VC)。三天后，将培养基替换为含有适当稀释的药物的新鲜培养基。在首次加入试验化合物6天后，收集细胞培养上清液，用链霉蛋白酶处理，然后用实时qPCR/TaqMan试验检测HBV DNA拷贝数。从HBV DNA水平的降低计算抗病毒活性(IC50)。
按照本文的描述测试本发明化合物抗HBV DNA生成的活性。在以上试验中测试实施例化合物并发现其具有低于25.0μM的IC50。发现式I的特定化合物具有低于0.10μM的IC50。HBV DNA试验的结果在表2中给出。
表2:在HepG2.2.15细胞中抗HBV DNA生成的活性
实施例号 IC50(μM)
3 0.04
28 <0.032

Claims (26)

1.式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，
其中
R1、R2、R3和R4独立地选自氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、卤素、氰基、氨基、C1-6烷基氨基、二C1-6烷基氨基、吡咯烷基和OR7；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
R7是氢；C1-6烷基；卤代C1-6烷基；C3-7环烷基C1-6烷基；苯基C1-6烷基；氰基C1-6烷基；羟基C1-6烷基；C1-6烷氧基C1-6烷基；羧基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基C1-6烷基；C1-6烷硫基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基C1-6烷基；氨基C1-6烷基；C1-6烷基氨基C1-6烷基；二C1-6烷基氨基C1-6烷基；C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基；C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基；C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基；或杂环烷基C1-6烷基，其中的杂环烷基是含氮单环杂环烷基；
V、W、X和Y之一选自CR8R9、O、S、SO2和NR10，V、W、X和Y中其余的独立地选自键和CR8R9，其中
R8是氢或C1-6烷基；
R9是氢或C1-6烷基；
R10是苯基C1-6烷氧基羰基、苯基C1-6烷基羰基、苯基C1-6烷基磺酰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基或C1-6烷基磺酰基。
2.根据权利要求1的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中
R7是氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、吡咯烷基C1-6烷基或(2-氧代-吡咯烷基)C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X选自键、CH2、O、S、SO2和苯基C1-6烷氧基羰基氨基；或者，
当W是CH2时，X是CH2。
3.根据权利要求1或2的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是氯或甲氧基；
R3选自甲基、乙基、丙基、吡咯烷基、羟基、甲氧基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、环丙基甲氧基、苄氧基、氰基丙氧基、羟基丙氧基、羟基己氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基乙氧基、甲氧基丙氧基、羧基丙氧基、乙氧基羰基丙氧基、甲硫基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、氨基己氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基、叔丁氧基羰基氨基己氧基、吗啉基丙氧基、吡咯烷基丙氧基和(2-氧代-吡咯烷基)丙氧基；
R4是氢；
R5是氢或甲基；
R6是氢或甲基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X选自键、CH2、O、S、SO2和苯基甲氧基羰基氨基；或者
当W是CH2时，X是CH2。
4.根据权利要求1至3任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中R7是氢、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基、吗啉基C1-6烷基、吡咯烷基C1-6烷基或(2-氧代-吡咯烷基)C1-6烷基；
R4是氢；
R5是C1-6烷基；
R6是C1-6烷基；
V和Y是CH2；
W是键；
X是键。
5.根据权利要求1至4任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R2是甲氧基。
6.根据权利要求1至5任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3是OR7，其中R7是C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷硫基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基氨基C1-6烷基或吗啉基C1-6烷基。
7.根据权利要求1至6任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3选自甲氧基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、环丙基甲氧基、羟基丙氧基、羟基己氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基乙氧基、甲氧基丙氧基、甲硫基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、氨基己氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基、叔丁氧基羰基氨基己氧基或吗啉基丙氧基。
8.根据权利要求1至7任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R5是甲基；R6是甲基。
9.根据权利要求1至3任意一项的式I的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3是OR7；其中R7是苯基C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢；
R6是氢；
V和Y是CH2；
当W是键时，X选自CH2、O、S、SO2和苯基C1-6烷氧基羰基氨基；或者
当W是CH2时，X是CH2。
10.根据权利要求1至3和9任意一项的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R2是氯或甲氧基。
11.根据权利要求1至3、9和10任意一项的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中R3是苄氧基或甲氧基丙氧基。
12.根据权利要求1至3和9至11任意一项的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中，当W是键时，X是CH2或S，或者当W是CH2时，X是CH2。
13.根据权利要求1或2的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是卤素或C1-6烷氧基；
R3选自C1-6烷基、吡咯烷基或OR7，其中R7是卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基C1-6烷基、C1-6烷基磺酰基氨基C1-6烷基或吗啉基C1-6烷基；
R4是氢；
R5是氢或C1-6烷基；
R6是氢或C1-6烷基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X是键或S，或者
当W是CH2时，X是CH2。
14.根据权利要求1、2或13的化合物或其可药用盐、对映体或非对映体，其中
R1是氢；
R2是氯或甲氧基；
R3选自乙基、吡咯烷基、二氟乙氧基、三氟乙氧基、羟基二甲基丙氧基、甲氧基丙氧基、甲基磺酰基丙氧基、甲基羰基氨基己氧基、甲基磺酰基氨基己氧基和吗啉基丙氧基；
R4是氢；
R5是氢或甲基；
R6是氢或甲基；
V和Y是CH2；
当W是键时，X是键或S，或者
当W是CH2时，X是CH2。
15.根据权利要求1的化合物，选自
反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
(3aS,12bR)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
(3aR,12bS)-11-(苄氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-羟基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10,11-二甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(环丙基甲氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(2-甲氧基乙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-氰基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(4-乙氧基-4-氧代丁氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羧基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲硫基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-羟基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-((叔丁氧基羰基)氨基)己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
反式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
反式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸；
顺式-2-((苄氧基)羰基)-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-2,3,4,4a,8,13b-六氢-1H-苯并[c]吡啶并[1,2-a][1,6]二氮杂萘-7-甲酸；
反式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸；
顺式-12-苄氧基-11-甲氧基-8-氧代-1,2,3,4,4a,13b-六氢吡啶并[1,2-f]菲啶-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡喃并[4,3-c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
反式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸2,2-二氧化物；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-丙基-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
或其可药用盐、对映体或非对映体。
16.根据权利要求1的化合物，选自
反式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-11-(3-甲氧基丙氧基)-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(2,2,2-三氟乙氧基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-异丁氧基-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-(3-羟基-2,2-二甲基丙氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-吗啉代丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-(3-(甲基磺酰基)丙氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-11-((6-乙酰氨基己基)氧基)-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-11-((6-(甲基磺酰氨基)己基)氧基)-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-13-氯-12-(3-甲氧基丙氧基)-2-氧代-2,5a,6,7,8,9,10,10a-八氢环庚三烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-3-甲酸；
顺式-11-甲氧基-12-(3-甲氧基丙氧基)-8-氧代-1,3,4,4a,8,13b-六氢吡啶并[2,1-a]硫代吡喃并[[4,3-c]异喹啉-7-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3,11-三甲基-7-氧代-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
顺式-10-甲氧基-3,3-二甲基-7-氧代-11-(吡咯烷-1-基)-1,2,3,3a,7,12b-六氢环戊二烯并[c]吡啶并[2,1-a]异喹啉-6-甲酸；
或其可药用盐、对映体或非对映体。
17.制备根据权利要求1至16任意一项的化合物的方法，包括
(a)将式(A)的化合物水解
或者
(b)将式(B)的化合物水解
其中R1至R7、V、W、X和Y如权利要求1至16任意一项所定义，L是C1-6烷基。
18.用作治疗活性物质的根据权利要求1至16任意一项的化合物。
19.包含根据权利要求1至16任意一项的化合物和治疗惰性载体的药物组合物。
20.根据权利要求1至16任意一项的化合物用于治疗或预防乙型肝炎病毒感染的用途。
21.根据权利要求1至16任意一项的化合物在制备用于治疗或预防乙型肝炎病毒感染的药物中的用途。
22.根据权利要求1至16任意一项的化合物用于抑制HBsAg生成或分泌或用于抑制HBsAg生成或分泌的用途。
23.用于治疗或预防乙型肝炎病毒感染的根据权利要求1至16任意一项的化合物。
24.按照权利要求17的方法制备的根据权利要求1至16任意一项的化合物。
25.治疗或预防乙型肝炎病毒感染的方法，该方法包括施用有效量的权利要求1至16任意一项所定义的化合物。
26.如上所述的本发明。
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