CN107750948A - 提高桃杂交成苗率的方法 - Google Patents

提高桃杂交成苗率的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107750948A
CN107750948A CN201711017042.6A CN201711017042A CN107750948A CN 107750948 A CN107750948 A CN 107750948A CN 201711017042 A CN201711017042 A CN 201711017042A CN 107750948 A CN107750948 A CN 107750948A
Authority
CN
China
Prior art keywords
peach
culture
benevolence
fruit
precocious
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201711017042.6A
Other languages
English (en)
Inventor
许建兰
马瑞娟
俞明亮
丁辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Jiangsu Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Academy of Agricultural Sciences filed Critical Jiangsu Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN201711017042.6A priority Critical patent/CN107750948A/zh
Publication of CN107750948A publication Critical patent/CN107750948A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)

Abstract

本发明公开了一种提高桃杂交成苗率的方法,包括以下步骤：A、在早熟桃果实七成熟时采收，中晚熟桃成熟后采收；B、早熟桃整果消毒，中晚熟桃先取种后消毒；C、培养：中晚熟桃种仁置于培养皿培养，早熟桃种仁进行试管培养，采用改良WPM培养基；D、待培养皿中的种子胚根长到3cm以上播种；胚根萌动后培养，胚培苗5片叶片后移栽。本发明早熟桃在果实七成熟时采收，可提高果实在低温的贮藏时间；整果消毒技术大大提高杂交果实的成苗率，污染率可控制在0～5％之间。且本发明对WPM培养基做了较大调整，可促进冷藏后的种仁在子叶边重新长出新芽，这样可以确保植株正常生长，进而提高成苗率。

Description

提高桃杂交成苗率的方法
技术领域
本发明涉及到一种提高桃杂交成苗率的方法，属于植物育种技术领域。
背景技术
在桃育种过程中，受各种因素的影响，桃杂交授粉成功率及早熟桃胚培养成功率达不到100％，所以种子处理成苗率在后期显得尤为重要。桃的常规育种方法为：采收成熟果实后，先削去外面的果肉，露出种核，再在相对干净的地方，用铁锤敲破种核，取出种仁，期间用力不当会将种仁敲碎，后放到烧杯中于超净工作台上进行消毒处理，先75％酒精消毒5秒，且要求不停晃动，然后消毒好的无菌水冲洗6次，再放到0.1％升汞中进行消毒5分钟，期间不停晃动，后无菌水冲洗6次，然后接种到培养基或培养皿中。此方法的缺点是消毒前果实去果肉浪费很多的人力，75％酒精消毒时间以秒为单位较难掌握，0.1％升汞消毒，升汞属于剧毒药品，前后共需要无菌水冲洗12次，给消毒工作带来一定的麻烦。且早熟桃胚培养处理过程复杂，有时大量果实成熟时在较短时间内较难完成接种工作，需将果实放置冷库，但成熟度较高果实贮藏时容易烂果，由于交叉污染，影响优质果率，进而影响胚培养成功率。且由于早熟桃胚培苗在培养室培养时，长出的叶片或茎段由于靠近管壁生长或一些特殊情况，导致生长叶片或茎段枯萎，植株不能正常生长，进而影响成苗率。
另外传统中晚熟桃处理采用培养皿处理技术是在培养皿底部平铺一层棉花以达到保湿的效果，在种子发芽后，根系会钻到棉絮下面，不易观察根系生长的长短，不能很好的掌握播种时间。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提高桃杂交成苗率的方法。
本发明提供如下技术方案：一种提高桃杂交成苗率的方法,包括以下步骤：
A、桃果实的采收：早熟桃在果实七成熟时采收，中晚熟桃在果实成熟时采收；
B、早熟桃消毒：整果放置到75％酒精中进行第一次消毒处理，时间5～10分钟，然后直接从酒精中捞出，放置到20％的次氯酸钠溶液中进行第二次消毒处理，时间15～30分钟，最后从次氯酸钠溶液中取出，在超净工作台通过剪刀将果实剪开，取出种仁直接接种到培养基中；
中晚熟桃消毒：剪开桃核，取种仁，种仁置于75％酒精消毒2分钟，然后无菌水冲洗6次，放置到培养皿中；
C、培养：将早熟桃种仁放置于试管培养，试管培养为在试管中加入灭菌处理的改良WPM培养基，投入种仁后封口膜封口，后置于3±2℃环境低温处理3个月；
其中每一升改良WPM培养基中包括如下:
1650mg硝酸铵、1900mg硝酸钾、440mg二水氯化钙、370mg七水硫酸镁和170mg磷酸二氢钾，提供大量元素；
6.2mg硼酸、22.3mg四水硫酸锰、8.6mg七水硫酸锌、0.25mg二水钼酸钠和0.25mg五水硫酸铜，提供微量元素；
37.2mg乙二胺四乙酸二钠和27.4mg硫酸亚铁，提供铁盐；
1.0mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、0.5mg烟酸、2mg甘氨酸和l00mg肌醇，提供有机物；
琼脂粉和蔗糖；
将中晚熟桃种仁放置于培养皿培养，培养皿培养为在培养皿中放置4层滤纸，加入无菌水，将种仁平放在滤纸上，盖上培养皿盖，保鲜膜封口以保湿；
D、中晚熟桃种子播种：待培养皿中的种子胚根长到3cm以上播种，播种前将塑料钵中的营养土浇透水，在塑料钵营养土中间戳小洞，将种子胚根放入其中，子叶留在洞口外，最后在上面覆盖一层干土，保湿；
早熟桃苗移栽：待培养基中种胚胚根萌动，放置于组培室进行培养5周后移栽，移栽前穴盘营养土浇透水，去子叶，将植株根系植入土中，并压实、保湿。
优选的，步骤C中试管中倒入培养基，高度在5cm以上；直径6cm的培养皿加水量为5毫升，直径12cm的培养皿加水量为8毫升。
优选的，步骤D中种胚胚根萌动至长度为0.5～1cm时移入组培室，叶片5片以上时移栽。
本发明早熟桃果实七成熟时采收，而非传统的果实成熟时采收，可提高果实采收后在低温的贮藏时间，进而保证完整果率。且七成熟的果实果肉较脆，在取种时，只要剪刀对准位置，可以轻松将果核打开，取出种仁。
本发明采用整果消毒技术，不仅省工省力，而且时间掌握比较容易，在很长时间范围内都不会对种子产生影响，剪刀取种只要剪开种核就行，种子不需再消毒就可接种到培养基中。整果消毒法大大提高杂交果实的成苗率，污染率可控制在0～5％之间。
本发明对WPM培养基做了较大调整，可促进冷藏后的种仁在子叶边重新长出新芽，这样可以确保植株正常生长，进而提高成苗率。
本发明采用培养皿滤纸培养，桃种子在低温冷藏阶段只需加水一次，即可保持到发芽，且根系裸露在外面，很容易掌握根系的生长情况，进而决定播种时间。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
本提高桃杂交成苗率的方法,包括以下步骤：
A、桃果实的采收：早熟桃在果实七成熟时采收，中晚熟桃在果实成熟时采收；
B、早熟桃消毒：整果放置到75％酒精中进行第一次消毒处理，时间5～10分钟，然后直接从酒精中捞出，放置到20％的次氯酸钠溶液中进行第二次消毒处理，时间15～30分钟，最后从次氯酸钠溶液中取出，在超净工作台通过剪刀将果实剪开，取出种仁直接接种到培养基中；
中晚熟桃消毒：用剪刀剪开桃核，取种，在75％酒精消毒2分钟，然后无菌水冲洗6次。
C、培养：将早熟桃种仁放置于试管培养，试管培养为在试管中加入灭菌处理的改良WPM培养基，倒入后的高度在5cm以上，投入种仁后封口膜封口，后置于3±2℃环境低温处理3个月；
其中每一升改良WPM培养基中包括如下:
1650mg硝酸铵、1900mg硝酸钾、440mg二水氯化钙、370mg七水硫酸镁和170mg磷酸二氢钾，提供大量元素；
6.2mg硼酸、22.3mg四水硫酸锰、8.6mg七水硫酸锌、0.25mg二水钼酸钠和0.25mg五水硫酸铜，提供微量元素；
37.2mg乙二胺四乙酸二钠和27.4mg硫酸亚铁，提供铁盐；
1.0mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、0.5mg烟酸、2mg甘氨酸和l00mg肌醇，提供有机物；
琼脂粉和蔗糖；
将中晚熟桃种仁放置于培养皿培养，培养皿培养为在培养皿中放置4层滤纸，加入无菌水，直径6cm的培养皿加水量为5毫升，直径12cm的培养皿加水量为8毫升，将种仁平放在滤纸上，盖上培养皿盖，保鲜膜封口以保湿；
D、中晚熟桃种子播种：待培养基中的种子胚根长到3cm以上播种，播种前将塑料钵中的营养土浇透水，在塑料钵营养土中间戳小洞，将种子根系放入其中，子叶留在洞口外，最后在上面覆盖一层干土，保湿；
早熟桃苗移栽：待培养基中种胚胚根萌动，长度为0.5～1cm时，放置于组培室进行培养5周，叶片5片以上时移栽，移栽前穴盘营养土浇透水，去子叶，将植株根系植入土中，并压实、保湿。
统计早熟桃果实贮藏一个月后烂果率和试管胚培污染率，结果见表1。
对比例：分别在早熟桃果实八成熟、九成熟和完全成熟时采收，在与实施例1相同条件下贮藏一个月，统计贮藏一个月后烂果率和试管胚培污染率，结果见表1。
表1不同成熟度早熟桃果实贮藏后烂果及胚培污染情况
果实采收成熟度 贮藏一个月后烂果率(％) 试管胚培污染率(％)
7成熟 4 4
8成熟 26 34
9成熟 92 100
完全成熟 100 100

Claims (4)

1.一种提高桃杂交成苗率的方法,包括以下步骤：
A、桃果实的采收：早熟桃在果实七成熟时采收，中晚熟桃在果实成熟时采收；
B、早熟桃消毒：整果放置到75％酒精中进行第一次消毒处理，时间5～10分钟，然后直接从酒精中捞出，放置到20％的次氯酸钠溶液中进行第二次消毒处理，时间15～30分钟，最后从次氯酸钠溶液中取出，在超净工作台通过剪刀将果实剪开，取出种仁直接接种到培养基中；
中晚熟桃消毒：剪开桃核，取种仁，种仁置于75％酒精消毒2分钟，然后无菌水冲洗6次，放置到培养皿中；
C、培养：将早熟桃种仁放置于试管培养，试管培养为在试管中加入灭菌处理的改良WPM培养基，投入种仁后封口膜封口，后置于3±2℃环境低温处理3个月；
其中每一升改良WPM培养基中包括如下:
1650mg硝酸铵、1900mg硝酸钾、440mg二水氯化钙、370mg七水硫酸镁和170mg磷酸二氢钾，提供大量元素；
6.2mg硼酸、22.3mg四水硫酸锰、8.6mg七水硫酸锌、0.25mg二水钼酸钠和0.25mg五水硫酸铜，提供微量元素；
37.2mg乙二胺四乙酸二钠和27.4mg硫酸亚铁，提供铁盐；
1.0mg盐酸硫胺素、0.5mg盐酸毗哆醇、0.5mg烟酸、2mg甘氨酸和l00mg肌醇，提供有机物；
琼脂粉和蔗糖；
将中晚熟桃种仁放置于培养皿培养，培养皿培养为在培养皿中放置4层滤纸，加入无菌水，将种仁平放在滤纸上，盖上培养皿盖，保鲜膜封口以保湿；
D、中晚熟桃种子播种：待培养皿中的种子胚根长到3cm以上播种，播种前将塑料钵中的营养土浇透水，在塑料钵营养土中间戳小洞，将种子胚根放入其中，子叶留在洞口外，最后在上面覆盖一层干土，保湿；
早熟桃苗移栽：待培养基中种胚胚根萌动，放置于组培室进行培养5周后移栽，移栽前穴盘营养土浇透水，去子叶，将植株根系植入土中，并压实、保湿。
2.根据权利要求1所述的提高桃杂交成苗率的方法,其特征在于：步骤C中试管中倒入培养基，高度在5cm以上。
3.根据权利要求1或2所述的提高桃杂交成苗率的方法,其特征在于：步骤C中直径6cm的培养皿加水量为5毫升，直径12cm的培养皿加水量为8毫升。
4.根据权利要求1或2所述的提高桃杂交成苗率的方法,其特征在于：步骤D中种胚胚根萌动至长度为0.5～1cm时移入组培室，叶片5片以上时移栽。
CN201711017042.6A 2017-10-26 2017-10-26 提高桃杂交成苗率的方法 Pending CN107750948A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711017042.6A CN107750948A (zh) 2017-10-26 2017-10-26 提高桃杂交成苗率的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201711017042.6A CN107750948A (zh) 2017-10-26 2017-10-26 提高桃杂交成苗率的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107750948A true CN107750948A (zh) 2018-03-06

Family

ID=61271341

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201711017042.6A Pending CN107750948A (zh) 2017-10-26 2017-10-26 提高桃杂交成苗率的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107750948A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109392583A (zh) * 2018-12-10 2019-03-01 江苏省农业科学院 一种促进桃胚培莲座状苗成苗的方法
CN116034876A (zh) * 2023-01-10 2023-05-02 重庆市铜梁区果之王园艺研究院 一种gf677桃砧木培养基及其培育方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150096069A1 (en) * 2012-04-20 2015-04-02 Monsanto Technology Llc Transgenic Plants With Enhanced Traits
CN105104195A (zh) * 2015-08-22 2015-12-02 中国农业科学院郑州果树研究所 一种规模化获取桃胚培养无菌苗的技术

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150096069A1 (en) * 2012-04-20 2015-04-02 Monsanto Technology Llc Transgenic Plants With Enhanced Traits
CN105104195A (zh) * 2015-08-22 2015-12-02 中国农业科学院郑州果树研究所 一种规模化获取桃胚培养无菌苗的技术

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
许建兰等: "早熟桃的胚培养技术", 《江苏农业学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109392583A (zh) * 2018-12-10 2019-03-01 江苏省农业科学院 一种促进桃胚培莲座状苗成苗的方法
CN116034876A (zh) * 2023-01-10 2023-05-02 重庆市铜梁区果之王园艺研究院 一种gf677桃砧木培养基及其培育方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107455262A (zh) 一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法
JP2013150559A (ja) 果樹の栽培方法
CN104067821A (zh) 一种甘薯脱毒苗的制备方法
CN105875399B (zh) 基于一次成苗的桃树杂种胚试管培育方法及培育基体
CN107980635A (zh) 一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法
CN103125386B (zh) 工厂化山葵种植方法
CN104255491B (zh) 一种金叶龟甲冬青组培繁殖方法
CN106258956B (zh) 一种铁皮石斛纯种繁育和野外移植方法
CN105993865A (zh) 一种栓皮栎无菌苗的培育方法
CN105557518A (zh) 一种白及种子开放式组培繁殖方法
CN108419675B (zh) 一种紫果西番莲顶梢的组培育苗方法
CN104255245A (zh) 生姜茎蔸过冬育种苗繁殖方法
CN103444522A (zh) 一种丰水梨试管苗生根的制备方法
CN111642340A (zh) 一种藜麦培育种植方法
CN103858771A (zh) 一种玉米转基因组培苗的移栽方法
CN101695280B (zh) 红树莓的组织培养与快速繁殖方法
CN110301337A (zh) 一种橡胶树扦插育苗方法
CN108370808B (zh) 一种马尾松菌根化幼苗育苗方法
CN107750948A (zh) 提高桃杂交成苗率的方法
CN111034617B (zh) 一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法
CN112042477A (zh) 一种巨菌草幼苗培育方法
CN104429486A (zh) 加工番茄未成熟种子培养成苗的方法
CN107278893A (zh) 一种苹果砧木sh40快速繁殖的方法
CN103704140A (zh) 一种以幼花为外植体组培繁殖多倍体毛泡桐的方法
CN107873518A (zh) 一种粉防己种苗的组培方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination