CN107980635A

CN107980635A - 一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法

Info

Publication number: CN107980635A
Application number: CN201711372246.1A
Authority: CN
Inventors: 赵玲玲; 宋来庆; 姜中武; 张硕; 张学勇; 刘美英; 唐岩; 孙燕霞
Original assignee: Shandong Yantai Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Shandong Yantai Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2017-12-19
Filing date: 2017-12-19
Publication date: 2018-05-04
Anticipated expiration: 2037-12-19
Also published as: CN107980635B

Abstract

本发明属于苹果脱毒种苗工厂化繁育技术领域，特别涉及一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法；特征在于，包括以下步骤：（1）生根培养；（2）室内炼苗；（3）水草移栽；（4）带水草基质移栽；（5）大田移栽。本发明的有益效果：使用本发明的技术方法，操作技术简单，成本低；炼苗时间短，仅仅需要4天，缩短炼苗时间10‑13天；第一次移栽后，组培苗自养根系生长快，第15天90%以上组培苗自养根系可达1.5cm以上，而且水草保湿性好，拱棚内温、湿度易控制；移栽成活率高，苹果组培苗移栽成活率可达到95.6%以上；两次移栽不伤根系，田间移栽不需要缓苗，苗木生长健壮，可实现当年嫁接；本发明技术方法应用范围广，适用于绝大多数苹果品种。

Description

一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法

技术领域

本发明属于苹果脱毒种苗工厂化繁育技术领域，特别涉及一种苹果组培苗两步移栽提高成活率的方法。

背景技术

苹果作为我国农业部规划的11大优势农产品之一，目前我国栽培总面积3150万亩、总产量2050万吨，总面积以及总产量分别占世界39.8%、34.7%，栽培面积和产量高居世界第一，是世界上最大的苹果生产国。苹果生产在促进我国农业增效、农民增收和农业经济发展中具有举足轻重的地位。

组织培养技术是园艺作物快速繁殖的主要技术，具有无性繁殖，能保持品种的优良性状、繁殖速度快、育苗周期短、环境条件不受季节限制、生产的种苗整齐度高等优点。目前我国已将组织培养技术广泛应用于果树育苗生产中。尽管国内在果树脱毒苗木组培快繁方面做了较多的研究工作，但只有少部分进入到工厂化生产阶段。其中苹果试管苗生根和移栽较难是实现其规模化生产存在的一个制约因素。国内外许多学者正致力于探讨组培苗移栽难成活因子及提高栽后成活率的有效措施。

生根苗移栽是脱毒种苗工厂化育苗最为关键的步骤。关于生根苗移栽难以成活的原因国内外学者进行了研究，现在一般认为栽后试管小植株体内水分失调，造成水分亏缺，从而引起植株萎蔫死亡；而另一种观点认为试管小植株是在人为提供的营养-培养基中异养生长，一旦栽入土壤中不能马上适应自养生活状态，因而造成营养匮缺饥饿死亡。还有一些研究认为是各种因素综合作用的结果。苹果组培苗生根试管苗移栽技术一般包括炼苗和移栽两步。炼苗一般在温室内或者室内强光下进行，先是进行7天闭瓶炼苗，然后开瓶炼苗一般在5~7天左右。田河等（2013）研究结果表明，组培室培养7天，温室炼苗17天为最佳组合。炼苗完毕后，在营养钵中定植于育苗基质中。育苗基质要具备透气、保湿、容易灭菌处理、不利于杂菌滋生的特点（郑亚明，2010），一般常用育苗基质包括锯末、蛭石、珍珠岩、细沙、草炭土等。不同品种的苹果组培苗移栽基质不同。M9和M26 最优驯化基质为珍珠岩：花生壳：草炭=1：1：1，成活率可达到85%。苹果矮化砧木SH28和SH29最优移栽基质为草炭土与蛭石1：2或1：1，组培苗移栽成活率分别达90.77%和88.24%（田河等，2013）。最新的研究结果表明，在育苗基质中加 0.5mg/L FeSO₄溶液可使生根苗移栽成活率提高到78 %以上（赵亮明等，2011）。移栽后注意移栽后棚内的空气湿度和光照强度。郭韩玲等（2005）研究了空气湿度和光照对苹果组培苗移栽成活率的影响，发现空气相对湿度90%~100%、光照强度20000lx~25000lx、以蛭石和调配的营养土为基质的条件下，富士和嘎啦组培苗移栽成活率85%~93%。

虽然以上对苹果组培苗移栽技术进行了一定的研究，但是在实践中我们发现利用以上技术移栽苹果组培苗炼苗时间长，炼苗过程湿度不易控制，组培苗失水严重；而且不同品种需要不同的移栽基质配方，移栽基质需要提前灭菌，移栽后湿度控制比较严格，移栽成活后缓苗时间长，苗木的立枯病发生严重，成活率相对降低，大大增加了生产成本。

发明内容

为了解决以上现有技术中苹果组培苗移栽前炼苗时间长，移栽基质要求严格，成活率低的问题，本发明提供了一种技术简单、成本低、成活率高，植株生长健壮，适合绝大多数苹果品种的苹果组培苗移栽方法。

本发明提供的技术方案如下：

一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特殊之处在于：包括以下步骤：

（1）、生根培养：选取健壮的、株高2.5cm以上的苹果脱毒苗离体植株，接种在生根培养基上，培养至根系长度达到1.0~2.0cm，根系条数在3条以上时，进行炼苗处理。

（2）、室内炼苗：将步骤（1）中经过生根培养的组培苗自然光下放置2天，然后逐步去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次。4天后将苗小心取出洗净。

（3）、第一次移栽：将经过炼苗处理的组培苗用杀菌溶液浸泡后，用湿润的水草将组培苗根部包住，放入72孔育苗穴盘后置于小拱棚内，进行第一次移栽；第一次移栽后的组培苗要注意控制温度和湿度；待发现每盘中60%组培苗根系从穴盘底部长出时，去除小拱棚。

（4）、第二次移栽：将步骤（3）中的第一次移栽成活的组培苗带水草移入装满育苗基质的50孔加深育苗穴盘中，浇透水，在温室中继续生长至长出2~3片真叶。

（5）、大田移栽：将步骤（4）中第二次移栽的成活苗定植于大田中。

更具体的，上述苹果组培苗两步移栽方法，包括以下步骤：

（1）生根培养：从继代培养30天的苹果脱毒苗离体植株中选取健壮、株高2.5cm以上的再生芽单芽，转入生根培养基上培育20～25d，至根系长度达到1.0~2.0cm，根系条数在3条以上时，进行炼苗。

所述生根培养基的配方为：1/2MS（1/5大量元素）+0.7mg/L IBA +琼脂5.1～5.3g/L +蔗糖30 g/L，pH5.8。

人工气候室中的培养环境为：温度25±2℃，光照3000lx，光照16h。

（2）室内炼苗：将步骤（1）中经过生根培养的组培苗转入自然光下放置2天，然后第3天将组培瓶盖拧松，第4天完全去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次。第5天，将苗用镊子小心取出，放入水中洗净根部残留培养基。注意尽量在房间背阴处炼苗，避免阳光照射和房间通风。

（3）第一次移栽（水草移栽）：将步骤（2）中经过炼苗处理的组培苗用杀菌溶液浸泡，30s后立即倒掉杀菌溶液，用湿润的水草包裹组培苗根部1cm，放入72孔育苗穴盘中；待整张穴盘栽植完毕后，放入温室内的小拱棚内，拱棚上部注意覆盖塑料薄膜并加盖遮阳网，注意保持拱棚内湿度和温度。2周后，去除塑料薄膜和遮阳网，适应3天后，准备第二次移栽。

所述杀菌溶液是浓度为70%甲基托布津可湿性粉剂800倍液，浸泡时间为30s；水草湿度为60%；拱棚内环境为，温度30±4℃，湿度为65%~70%。

（4）第二次移栽（带水草基质移栽)：将步骤（3）中的第一次移栽成活的组培苗用尖头镊子带水草取出，放入50孔加深育苗穴盘中，然后上部填满育苗基质，浇透水，放置在温室中生长4周。注意移栽前穴盘中应提前加入2/3深度的育苗基质。

所述育苗基质为进口草炭土和蛭石，其二者的混合体积比例为进口草炭土：蛭石=3：1。

（5）大田移栽：将步骤（4）中第二次移栽4周后的成活苗定植于大田中。首先打畦，畦宽0.4-0.6m，浇底水，待水渗下后，开沟，深度8~12cm，每畦栽植2行，株距保持在5~10cm。定植后要注意保湿，正常田间管理。

本发明的有益效果：使用本发明的技术方法，技术简单，成本低；缓苗时间短，移栽成活率高，苹果组培苗移栽成活率可达到95.6%以上，苗木生长健壮，可实现当年嫁接。

本发明的生根培养基特点是配方大大降低了培养基中大量元素（NH₄NO₃、KNO₃、CaCl₂、MgSO₄、KH₂PO₄）的含量，比常规1/2MS培养基配方中的大量元素降低1.5倍；在此培养基上，苹果组培苗根系生长快，20~25天时，85%以上的植株根系长度可达1.0~2.0cm，根系条数在3条以上；而且由于本培养基配方减少了大量元素用量，组培苗生长势减弱，苗木粗壮，易于后期炼苗，提高炼苗成活率。本发明改常规的一次性移栽为二次移栽，相比现有的苹果组培苗移栽技术具有以下4个优点：第一，第一次移栽（水草移栽）后，组培苗在水草中自养根系生长快，第15天90%以上组培苗自养根系可达1.5cm以上，而且水草保湿性好，拱棚内温、湿度易控制；第二，移栽成活率高，苹果组培苗移栽成活率可达到95.6%以上；第三，两次移栽均不伤及根系，因此田间移栽不需要缓苗，苗木生长健壮，可实现当年嫁接；第四，本发明技术方法应用范围广，适用于绝大多数苹果品种在第一次移栽时均能很快生出自养根系，有效解决了苹果组培苗移栽成活率的问题。

附图说明

图1为本发明的方法流程图；

图2为第一次移栽后2周组培苗发育情况图；

图3为第二次移栽后4周组培苗发育情况图。

具体实施方式

为了更好的理解本发明，下面结合附图以及具体实施例来进一步说明。实验品种脱毒富士2001、嘎啦、八棱海棠实生优系2、M26。

实施例1：

本发明提供的高效进行苹果组培苗移栽方法，包括以下4个步骤：

步骤1、生根培养：在无菌条件下，将继代培养30天的离体植株选取健壮、株高2.5cm以上的再生芽单芽，转入生根培养基上培育。本发明采用的生根培养基配方为1/2MS（1/5大量元素）+0.7mg/L IBA +琼脂5.1～5.3 g/L +蔗糖30 g/L，pH5.8，待培养20～25d后，至根系长度达到1.0~2.0cm，根系条数在3条以上时，用于炼苗处理。

步骤2、炼苗：将经过生根培养的组培苗转入室内自然光下放置2天，于第3天将组培瓶盖拧松，第4天完全去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次。第6天，将苗用镊子小心取出，放入水中洗净根部残留培养基。注意尽量在房间背阴处炼苗，避免阳光照射和房间通风。

步骤3、第一次移栽：将经过炼苗处理的洗净后的组培苗用70%甲基托布津800倍溶液浸泡，30s后立即倒掉甲托溶液，用湿度60%的水草包裹组培苗根部，放入72孔育苗穴盘中；待整张穴盘栽植完毕后，放入温室内的小拱棚内，拱棚上部覆盖塑料薄膜并加盖遮阳网，保持拱棚内湿度65%~70%和温度30±4℃。2周后，去除塑料薄膜和遮阳网，适应3天后，准备第二次移栽。

步骤4、第二次移栽：将第一次移栽成活的组培苗用尖头镊子带水草取出，放入50孔加深育苗穴盘中，然后上部填满育苗基质，浇透水，放置在温室中。育苗基质配方为：进口草炭土、蛭石混合比例为3：1。4周后，将成活苗定植于大田中，正常田间管理。

以下选用2组不同处理方式的对照组与经过实施例1处理后获得的移栽成活率结果进行对比，对本实施例的处理效果进行说明。

对照组1：

与实施例1相比，除步骤3、4中将经过炼苗后的洗净后的组培苗用70%甲托800倍溶液浸泡30s后倒掉甲托溶液，直接移栽入育苗基质（草炭土、蛭石混合比例为3：1），2周后，去除塑料薄膜和遮阳网，4周后大田移栽。其余步骤1、2、5与实施例1相同。

对照组2：

与实施例1相比，除步骤2中将经过生根培养的组培苗转入室内自然光下放置3天，于第4天将组培瓶盖拧松，第5天瓶盖揭开一半，第6天完全去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次。至第10天，将苗用镊子小心取出，放入水中洗净根部残留培养基，后准备移栽。其余步骤1、3、4、5与实施例1相同。

基础试验效果

以脱毒富士、嘎啦、八棱海棠实生优系2、M26为试材，研究不同移栽方法对4个不同品种苹果组培苗移栽成活率的影响。

试验处理：试验设3个处理组，每个处理组移栽4个品种组培苗90株，重复3次。

T1处理组使用实施例1移栽方法；

T2处理组使用对照组1移栽方法；

T3处理组使用对照组2移栽方法；

与其它处理相比较，两步移栽法（T1）的4个品种的移栽成活率均较高，其中富士组培苗的移栽成活率达到95.6%，八棱海棠实生优系的组培苗移栽成活率达到97.78%，均显著高于一步移栽处理（直接移栽在育苗基质中，即T2处理）和延长炼苗处理（T3）。

移栽45天后，研究了不同处理对不同品种组培苗植株生长的影响。结果表明，不同移栽处理对4个品种移栽后的生长具有较大影响，两步移栽处理（T1）的植株生根快，植株生长旺盛，4个品种的植株高度最大，其中砧木八棱海棠优系2的植株高度比直接移栽在育苗基质（T3）高10.78%；其次为延长炼苗处理（T3），以直接移栽在育苗基质中的植株高度和叶片数量最小。

移栽45天后，调查了不同处理对不同品种组培苗叶片数量的影响。结果表明，不同移栽处理对4个品种移栽后的叶片数量存在较大影响，以两步移栽处理（T1）的植株叶片数量最多，其次为延长炼苗处理（T3），以直接移栽在育苗基质中的植株叶片数量最小。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims

1.一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

包括以下步骤：

（1）、生根培养：选取健壮的、株高2.5cm以上的苹果脱毒苗离体植株，接种在生根培养基上，培养至根系长度达到1.0~2.0cm，根系条数在3条以上时，进行炼苗处理；

（2）、室内炼苗：将步骤（1）中经过生根培养的组培苗自然光下放置2天，然后逐步去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次；4天后将苗小心取出洗净；

（3）、第一次移栽：将经过炼苗处理的组培苗用杀菌溶液浸泡后，用湿润的水草将组培苗根部包住，放入72孔育苗穴盘后置于小拱棚内，进行第一次移栽；第一次移栽后的组培苗要注意控制温度和湿度；待发现每盘中60%组培苗根系从穴盘底部长出时，去除小拱棚；

（4）、第二次移栽：将步骤（3）中的第一次移栽成活的组培苗带水草移入装满育苗基质的50孔加深育苗穴盘中，浇透水，在温室中继续生长至长出2~3片真叶；

2.如权利要求1所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

更加具体的步骤如下：

（1）生根培养：将继代培养30天的苹果脱毒苗离体植株选取健壮、株高2.5cm以上的再生芽单芽，转入生根培养基上，暗培养7天后，转入光下培育14～23d，至根系长度达到1.0~2.0cm，根系条数在3条以上时，进行炼苗；

（2）室内炼苗：将步骤（1）中经过生根培养的组培苗转入自然光下放置2天，然后第3天将组培瓶盖拧松，第4天完全去除瓶盖，并于早、中、晚各喷水1次；第5天，将苗用镊子小心取出，放入水中洗净；

（3）第一次移栽：将步骤（2）中经过炼苗处理的组培苗用杀菌溶液浸泡，30s后立即倒掉杀菌溶液，用湿润的水草包裹组培苗根部1cm，放入72孔育苗穴盘中；待穴盘栽植完毕后，放入温室内的小拱棚内，喷雾，拱棚上部注意覆盖塑料薄膜并加盖遮阳网，注意保持拱棚内湿度和温度；2周后，去除塑料薄膜和遮阳网，适应3天后，准备第二次移栽；

（4）第二次移栽：将步骤（3）中的第一次移栽成活的组培苗用尖头镊子带水草取出，放入50孔加深育苗穴盘中，然后上部填满育苗基质，浇透水，放置在温室中；注意穴盘中应提前加入2/3深度的育苗基质；

（5）大田移栽：将步骤（4）中第二次移栽4周后的成活苗定植于大田中。

3.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（1）中所述生根培养基的配方为：1/2MS（1/5大量元素）+0.7mg/L IBA +琼脂5.1～5.3 g/L +蔗糖30 g/L，pH5.8。

4.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（1）中的培养环境为：温度25±2℃，光照3000lx，光照16h。

5.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（3）中所述杀菌溶液是浓度为70%甲基托布津可湿性粉剂800倍液，浸泡时间为30s；水草湿度为60%，拱棚内环境为：温度30±4℃，湿度为65%~70%。

6.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（3）中第一次移栽基质为水草。

7.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（4）中第二次移栽的育苗基质进口草炭土和蛭石，其二者的混合体积比例为进口草炭土：蛭石=3：1。

8.如权利要求2所述的一种高成活率的苹果组培苗两步移栽法，其特征在于：

步骤（5）大田移栽中，首先打畦，畦宽0.4-0.6m，浇底水，待水渗下后，开沟，深度8~12cm，每畦栽植2行，株距保持在10~15cm；定植后要注意保湿，正常田间管理。