CN107674129B

CN107674129B - 裂褶多糖磷酸化衍生物及其制备方法、应用

Info

Publication number: CN107674129B
Application number: CN201710786034.1A
Authority: CN
Inventors: 方兆华; 刘建欣; 冯小玲; 孙永; 周立武; 王德友
Original assignee: Zhuhai Easycare Technology Co ltd
Current assignee: Zhuhai Easycare Technology Co ltd
Priority date: 2017-09-04
Filing date: 2017-09-04
Publication date: 2020-12-15
Anticipated expiration: 2037-09-04
Also published as: CN107674129A

Abstract

本发明公开了一种裂褶多糖磷酸化衍生物，其由以下按质量百分比计的原料制备得到：裂褶多糖1～10％，磷酸化试剂1.5～20％，余量为溶剂；本发明还公开了裂褶多糖磷酸化衍生物的制备方法：(1)将裂褶多糖与磷酸化试剂加入到溶剂中，混合搅拌反应；(2)将经过步骤(1)反应的反应液进行分离提纯后，获得裂褶多糖磷酸化衍生物；本发明所述的裂褶多糖磷酸化衍生物作为抗氧化活性成分、保湿剂和抗老化活性成分用于制备皮肤外用剂，具有即时效果好，而且效果持久的优点。

Description

裂褶多糖磷酸化衍生物及其制备方法、应用

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种裂褶多糖磷酸化衍生物及其制备方法、应用。

背景技术

随着生活水平的提高，人们对皮肤护理(尤其是面部皮肤的护理)越来越关注。皮肤护理首先是进行皮肤水分的补充，由于皮肤缺水不仅会降低皮肤细胞的新陈代谢和细胞活力，导致皮肤出现细纹、皱纹、暗沉、色斑等问题，而且会让皮肤一直处于亚健康状态，导致皮肤耐受性变差，容易受外界刺激，引起过敏、红血丝等问题；皮肤缺水还容易造成皮肤水油失衡，形成外油内干的肤质，容易产生痘痘，给人们的生活带来很大的困扰。现有的补水保湿的护肤品种类繁多，但所用的保湿剂很多并非天然来源，而且保湿效果持续时间短，功效单一等。

裂褶多糖是一种产自裂褶菌的天然来源的β-D-葡聚糖，由(1-3)-连接的β-D-吡喃型葡萄糖残基主链和(1-6)-连接的吡喃型葡萄糖残基的侧链组成，具有抗氧化、抗辐射、保湿等多种护肤功效和生理活性。由于裂褶多糖的分子量通常在百万以上，在水中很难完全溶解，极大地限制其在化妆品中的应用。有文献报道采用超声降解、羧甲基化、硫酸化等方法对裂褶多糖进行物理、化学改性，但存在衍生化试剂价格昂贵，收率偏低，产生降解等副反应，亟需开发一种简单廉价的裂褶多糖的衍生化方法，制备水溶性好、具有抗氧化、保湿等多重功效的裂褶多糖衍生物，作为抗氧化活性成分、保湿剂和抗老化活性成分用于皮肤外用剂。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种简单廉价的裂褶多糖的衍生化方法，用于制备水溶性好、具有抗氧化、保湿等多重功效的裂褶多糖衍生物，作为抗氧化活性成分、保湿剂和抗老化活性成分用于皮肤外用剂。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种裂褶多糖磷酸化衍生物，由以下按质量百分比计的原料制备得到：

裂褶多糖1～10％，

磷酸化试剂1.5～20％，

余量为溶剂。

优选地，所述裂褶多糖选自未经过化学处理的裂褶多糖、羧甲基裂褶多糖、氨基化裂褶多糖、裂褶多糖硫酸酯和经过超声降解的裂褶多糖中的至少一种。

优选地，所述磷酸化试剂是磷酸、三聚磷酸钠、三偏磷酸钠、三氯氧磷和五氧化二磷中的一种或一种以上的混合物。

优选地，所述溶剂选自水、二甲亚砜、异丙醇、丙酮、二甲基甲酰胺和吡啶中的一种或一种以上的混合物。

进一步优选地，所述溶剂为水。

上述裂褶多糖磷酸化衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将裂褶多糖与磷酸化试剂加入到溶剂中，进行混合搅拌反应；

(2)将经过步骤(1)反应的反应液进行分离提纯后，获得裂褶多糖磷酸化衍生物。

优选地，步骤(1)的反应温度0～100℃，搅拌速度100-300rpm，反应时间0.5～12小时。

一种皮肤外用剂，包括上述裂褶多糖磷酸化衍生物。

优选地，所述裂褶多糖磷酸化衍生物的质量百分含量为0.001％～15％。

进一步优选地，所述裂褶多糖磷酸化衍生物的质量百分含量为0.2％～2％。

所述皮肤外用剂的制备方法，将裂褶多糖磷酸化衍生物缓慢加入热水中溶解均匀，再加入药学上或化妆品上可接受的辅料混合均匀即可。

所述皮肤外用剂的应用，其用作具备疾病治疗用途的药物，或者不具备疾病治疗用途的化妆品。其中，所述裂褶多糖磷酸化衍生物在制备皮肤外用制剂时作为抗氧化活性成分、保湿剂和抗老化活性成分。

本发明的有益效果：

本发明的裂褶多糖的衍生化方法简单廉价，获得的裂褶多糖衍生物水溶性好、具有抗氧化、保湿等多重功效。本发明的裂褶多糖衍生物用于制备抗氧化、保湿和抗老化妆品，具有即时效果好，效果持久的优点。

附图说明

图1裂褶多糖和裂褶多糖磷酸酯对皮肤含水量变化率的影响；

图2裂褶多糖及裂褶多糖磷酸酯对经皮水分流失变化率的影响。

具体实施方式

以下通过具体实施例来对本发明作进一步的说明，但这些实施例只是为了说明，并不是对本发明的限制。

实施例1裂褶多糖磷酸酯A的制备

将1g的裂褶多糖溶解在20mL的二甲亚砜中，以搅拌速度100rpm，缓慢加入2.5g的五氧化二磷后，在100℃的温度条件下，保温搅拌反应1h，冷却至室温，将反应液倒入冰水中，用氢氧化钠溶液调节至中性，加入3倍量的乙醇沉淀，离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析1天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯A。

实施例2裂褶多糖磷酸酯B的制备

将1g的裂褶多糖溶解在100mL的去离子水中，以搅拌速度300rpm，缓慢加入1g的三聚磷酸钠和1g的三偏磷酸钠，在60℃的温度条件下，保温搅拌反应5h，冷却至室温，向反应液加入3倍量的乙醇沉淀，离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析2天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯B。

实施例3裂褶多糖磷酸酯C的制备

将1g的裂褶多糖溶解在100mL的去离子水中，以搅拌速度150rpm，缓慢加入1.5g三聚磷酸钠，在60℃的温度条件下，保温搅拌反应5h，冷却至室温，向反应液加入3倍量的乙醇沉淀，离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析1天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯B。

实施例4裂褶多糖磷酸酯D的制备

将1g的裂褶多糖溶解在40mL的二甲基甲酰胺中，以搅拌速度200rpm，缓慢加入2.5g磷酸，在100℃的温度条件下，保温搅拌反应5h，冷却至室温，反应液用水稀释后，离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析2天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯A。

实施例5裂褶多糖磷酸酯E的制备

将1g的羧甲基裂褶多糖溶解在20mL的异丙醇中，以搅拌速度100rpm，缓慢加入2.5g三氯氧磷，在0℃的冰水浴中搅拌反应0.5h，冷却至室温，反应液用水稀释后，加入3倍量的乙醇沉淀，离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析1天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯A。

实施例6裂褶多糖磷酸酯F的制备

将1g的裂褶多糖溶解在100mL的异丙醇：水＝1:1(重量比)的混合溶液中，以搅拌速度200rpm，缓慢加入2.5g的三聚磷酸钠，在50℃的温度条件下，保温搅拌反应12h，冷却至室温，反应液用水稀释后，加入3倍量的乙醇沉淀离心，过滤后，沉淀复溶于热水中，透析1天，浓缩后冷冻干燥即得裂褶多糖磷酸酯A。

实施例7溶解性测试

参考2015版中国药典方法，将未改性的裂褶多糖和实施例1～实施例6的裂褶多糖磷酸酯分别制备1mg的多糖样品，置于(25±1)℃的装有10mL水溶液的具塞试管中，每隔5min强力振摇30s，30min内观察样品溶解情况。溶解性实验结果显示，未改性的裂褶多糖难溶于水，而实施例1～实施例6的磷酸化后的裂褶多糖均可溶于水，溶液澄清透明。

实施例8抗氧化能力测试(DPPH法)

抗氧化能力测试方法参照文献(郭雪峰，岳永德，汤锋，等.用清除有机自由基DPPH法评价竹叶提取物抗氧化能力[J]，光谱学与光谱分析，2008,28(7):1578-1582)，具体步骤为：无水乙醇溶解DPPH配制成0.2mmol/L DPPH溶液，用去离子水溶解羧甲基裂褶多糖配制成一系列浓度多糖溶液1、2、4、8、16、20mg/mL。取2mL DPPH溶液置于试管中，加入2mL多糖溶液，振荡混匀，室温避光放置30min后，在517nm处测吸光值A；以2mL无水乙醇加入2mL去离子水为空白；测得2mL多糖溶液和2mL无水乙醇混合后的溶液的吸光值B，2mL DPPH溶液加上2mL去离子水混合后溶液的吸光值C。多糖溶液对DPPH自由基清除能力(SC)按照以下公式计算：

磷酸化反应前后的裂褶多糖的DPPH自由基清除结果如表1所示，裂褶多糖经过磷酸化自由基清除能力略有提高，DPPH自由基清除EC50值从0.78mg/ml降低到0.35mg/ml。

表1裂褶多糖和裂褶多糖磷酸酯的DPPH自由基清除EC50值

实施例9裂褶多糖护肤霜的制备

表2给出了含有本发明的裂褶多糖磷酸酯的护肤霜配方，各物质的用量用质量百分数表示：

表2护肤霜配方

制备方法：A相80℃溶解混合均匀，B相80℃溶解混合均匀，乳化时A相加入B相并均质5分钟，降温至45℃时加入C相和D相并搅拌5分钟，陈化24h后包装，即可。

实施例10裂褶多糖护肤乳液的制备

表3给出含有本发明的裂褶多糖磷酸酯的护肤乳液配方，各物质的用量用质量百分数表示：

表3护肤乳液配方

实施例9样品保湿性测试

按照实施例2制备的磷酸化前后的裂褶多糖，配制成1％水溶液，在手臂内侧标记试验区域，分别按照2.0mg±0.1mg样品/cm²的用量涂抹样品，在涂抹前和涂抹后1h，2h,3h和4h，采用芬兰Delfin公司的紧凑型MoistureMeter SC测量受试区域角质层中皮肤含水量，采用芬兰Delfin公司的VapoMeter水分蒸发测试仪测试受试区域的经皮水分流失量。

皮肤含水量变化率＝(使用后含水量-初始含水量)/初始含水量×100％

皮肤失水变化率＝(使用后失水量-初始失水量)/初始失水量×100％

磷酸化前后裂褶多糖保湿性结果如图1和图2所示。图1为皮肤角质层含水量变化率结果，涂抹1％裂褶多糖磷酸酯后，皮肤含水量上升明显，使用1h后皮肤含水量变化率为28.1％，高于未改性裂褶多糖的14.9％，随后涂抹区域皮肤含水量逐渐降低，使用4h后皮肤含水量变化率分别为13.8％，高于未改性裂褶多糖的6.2％和空白对照组的3.7％。图2为经皮水分流失变化率结果，涂抹1％裂褶多糖磷酸酯后，皮肤经皮水分流失变化率显著降低，使用1h后，经皮水分流失变化率下降了-35.4％，低于未改性裂褶多糖的-18.9％，使用4h后经皮水分流失变化率下降了-17.5％，低于未改性裂褶多糖的-9.3％和空白对照组的-4.2％。结果表明，在磷酸根基团的引入后，裂褶多糖的保湿性能有了极大的提高。

综上结果来看，裂褶多糖磷酸酯的保湿性能明显优于未改性的裂褶多糖，能够提高皮肤的保湿能力，减少皮肤水分流失，进而增加皮肤弹性，是一种潜在的优良化妆品抗氧化剂、保湿剂和抗老化成分。本发明的裂褶多糖衍生物用于制备化妆品，具有即时效果好，而且效果持久的优点。

Claims

1.一种裂褶多糖磷酸化衍生物，其特征在于，由以下按质量百分比计的原料制备得到：

裂褶多糖1～10％，

磷酸化试剂1.5～20％，

余量为溶剂；

所述裂褶多糖选自未经过化学处理的裂褶多糖、羧甲基裂褶多糖、氨基化裂褶多糖、裂褶多糖硫酸酯和经过超声降解的裂褶多糖中的至少一种；

所述磷酸化试剂是磷酸、三聚磷酸钠、三偏磷酸钠、三氯氧磷和五氧化二磷中的一种或一种以上的混合物。

2.根据权利要求1所述的裂褶多糖磷酸化衍生物，其特征在于，所述溶剂选自水、二甲亚砜、异丙醇、丙酮、二甲基甲酰胺和吡啶中的一种或一种以上的混合物。

3.根据权利要求1或2所述的裂褶多糖磷酸化衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的裂褶多糖磷酸化衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(1)的反应温度0～100℃，搅拌速度100～300rpm，反应时间0.5～12小时。

5.一种皮肤外用剂，其特征在于，包括权利要求1-3中任一项所述的裂褶多糖磷酸化衍生物。

6.根据权利要求5所述的皮肤外用剂，其特征在于，所述裂褶多糖磷酸化衍生物的质量百分含量为0.001％～15％。

7.根据根据权利要求5或6所述的皮肤外用剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，将裂褶多糖磷酸化衍生物缓慢加入热水中溶解均匀，再加入药学上或化妆品上可接受的辅料混合均匀即可。

8.根据权利要求5或6所述的皮肤外用剂的应用，其特征在于，所述所述皮肤外用剂用作不具备疾病治疗用途的化妆品。