CN107660149B - 一种神经生长因子组合物及注射粉剂 - Google Patents

一种神经生长因子组合物及注射粉剂 Download PDF

Info

Publication number
CN107660149B
CN107660149B CN201680023115.XA CN201680023115A CN107660149B CN 107660149 B CN107660149 B CN 107660149B CN 201680023115 A CN201680023115 A CN 201680023115A CN 107660149 B CN107660149 B CN 107660149B
Authority
CN
China
Prior art keywords
growth factor
nerve growth
composition
injection
factor composition
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201680023115.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN107660149A (zh
Inventor
谭剑平
王炳璋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Staidson New Pharmaceuticals Co ltd
Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Beijing Staidson New Pharmaceuticals Co ltd
Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=57144485&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN107660149(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Beijing Staidson New Pharmaceuticals Co ltd, Staidson Beijing Biopharmaceutical Co Ltd filed Critical Beijing Staidson New Pharmaceuticals Co ltd
Publication of CN107660149A publication Critical patent/CN107660149A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107660149B publication Critical patent/CN107660149B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/185—Nerve growth factor [NGF]; Brain derived neurotrophic factor [BDNF]; Ciliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins, e.g. NT-3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明公开了一种神经生长因子组合物及注射粉剂。该神经生长因子组合物包括以下组分：10μg/mL～100μg/mL的神经生长因子；10mg/mL～80mg/mL的二糖类稳定剂；0mg/mL～30mg/mL的氨基酸类稳定剂；0.01mg/mL～1mg/mL的表面活性剂；10mg/mL～50mg/mL的支持剂；维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.0～7.4的pH缓冲剂；溶剂为水。本发明神经生长因子组合物及注射粉剂，通过使用二糖类或二糖类与氨基酸组合代替白蛋白作为稳定剂，能够避免因白蛋白中携带病毒或其他未知成分带来的潜在风险；不仅对mNGF具有保护作用，同时能够保证hNGF以及rhNGF在制备、运输及储存过程中保持良好的稳定性、更好的临床用药安全性及质量可控性；成分明确，易于定性及定量，所用稳定剂纯度高，来源广，容易进行长期大量生产，便于控制成本及提高产品质量。

Description

一种神经生长因子组合物及注射粉剂
技术领域
本发明涉及一种神经生长因子组合物及注射粉剂，属于医药生物领域。
背景技术
神经生长因子(NGF)是一种具有神经元营养和促进突起生长双重生物学功能的一种神经细胞生长调节因子，它对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用。NGF包含α、β、γ三个亚单位，β亚单位是活性区，由两个118个氨基酸组成的单链通过非共价键结合而成。1953年，意大利科学家Levi-Montalcini发现了NGF并获得了诺贝尔奖。目前，国内外已有多个NGF产品上市，临床上主要用于治疗神经系统发育不良，包括弱视、神经瘤、各种神经损伤及神经系统病变等疾病。
NGF与其他蛋白质药物相似，由于蛋白质半衰期较短，当暴露于极端温度、湿度条件下，或受物理、化学因素的影响，蛋白质的空间构象容易发生改变而引起变性，变性的蛋白质丧失了原有的生物活性；此外，因蛋白质常易粘附于固体表面，在灌装过程中，部分蛋白质会粘附于容器内壁上而造成活性成分的损失。为保证其生物活性，需加入稳定剂以防止其生物活性丧失。
通常，白蛋白作为一种优良的稳定剂以及块状(cake)成型剂被广泛应用于各种生物制品中。然而，由于白蛋白主要来源于人血、胎盘血，NGF组合物作为一种非经过灭菌的无菌制剂，血液中携带着一些不易检测的未知成分容易给制剂带来污染；同时，白蛋白的长期、大量应用也容易受到血源供应的限制以及生产成本的影响；再次，在中间体及制剂成品含量测定时，白蛋白可能会对相对少量的NGF产生干扰从而影响产品的品质管理。因此，为避免上述问题，需寻求一种稳定的去白蛋白NGF组合物。
发明内容
本发明的目的是提供一种神经生长因子组合物及注射粉剂，不仅对鼠源性神经生长因子(mNGF)具有保护作用，同时还能够保证人源性神经生长因子(hNGF)以及重组人神经生长因子(rhNGF)在制备、运输及储存过程中保持良好的稳定性、具有更好的临床用药安全性及质量可控性。
本发明提供的一种神经生长因子组合物，其包括以下组分：
质量体积浓度为10μg/mL～100μg/mL的神经生长因子；
质量体积浓度为10mg/mL～80mg/mL的二糖类稳定剂；
质量体积浓度为0mg/mL～30mg/mL的氨基酸类稳定剂；
质量体积浓度为0.01mg/mL～1mg/mL的表面活性剂；
质量体积浓度为10mg/mL～50mg/mL的支持剂；
维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.0～7.4的pH缓冲剂；
溶剂为水。
上述神经生长因子组合物中，稳定剂的添加可避免或降低由制备或储存过程中引起的蛋白质聚集和解聚，术语“稳定剂”是指一种能防止活性成分在水溶液中聚集或解聚的物质，除了稳定作用之外，稳定剂通常也可作为支持剂以改善产品的成型性，且不排除还有其它作用；
上述神经生长因子组合物中，优选地，所述二糖类稳定剂的质量体积浓度为30mg/mL～70mg/mL，更优选地，所述二糖类稳定剂的质量体积浓度为30mg/mL；
上述神经生长因子组合物中，所述二糖类稳定剂可为麦芽糖、海藻糖、蔗糖和乳糖中的至少一种；
上述神经生长因子组合物中，优选地，所述氨基酸类稳定剂的质量体积浓度为2mg/mL～10mg/mL，更优选地，所述氨基酸类稳定剂的质量体积浓度为3mg/mL～10mg/mL，再优选地，所述氨基酸类稳定剂的质量体积浓度为3mg/mL、10mg/mL。
上述神经生长因子组合物中，所述氨基酸类稳定剂可为丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、组氨酸和异亮氨酸中的至少一种。
上述神经生长因子组合物中，所述二糖类稳定剂和所述氨基酸类稳定剂具体可为下述1)-8)中任一种：
1)蔗糖和组氨酸、2)蔗糖和甘氨酸、3)蔗糖、甘氨酸和组氨酸、4)乳糖和甘氨酸、5)乳糖、蔗糖和异亮氨酸、6)海藻糖、精氨酸和组氨酸、7)麦芽糖、甘氨酸和组氨酸、8)麦芽糖、丙氨酸、精氨酸和谷氨酸。
上述神经生长因子组合物中，由于蛋白质具有较高的与表面相互作用的倾向，这使它们在气-液、瓶-液界面容易经受吸附和/或变性，这种相互作用与蛋白浓度成反比，并导致形成可溶性的和不可溶的蛋白质聚集体、或者溶液中的蛋白质通过吸附到界面而损失，表面活性剂的加入可防止溶液表面相互作用引发的吸附和/或变性，使得由表面引发的吸附和/或变性被减至最低；这是因为表面活性剂为两性分子，对于界面位置能竞争过蛋白质，表面活性剂分子中的疏水部分占据界面位置(如气-液)，而分子中的亲水部分保持指向溶剂主体，在足够的浓度下(通常在表面活性剂的临界胶束浓度左右)，表面活性剂分子的表面层起到防止蛋白质分子在界面吸附的作用；
上述神经生长因子组合物中，优选地，所述表面活性剂的质量体积浓度为0.1mg/mL～0.5mg/mL，更优选地，所述表面活性剂的质量体积浓度为0.2mg/mL～0.5mg/mL，再优选地，所述表面活性剂的质量体积浓度为0.2mg/mL、0.5mg/mL；
上述神经生长因子组合物中，所述表面活性剂可为非离子表面活性剂，优选地，所述非离子表面活性剂可为泊洛沙姆、聚山梨酯和15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯(简称HS 15，下同)中的至少一种，具体可为泊洛沙姆、聚山梨酯和HS 15中的任一种。
上述神经生长因子组合物中，所述支持剂的加入可改善成品的外观，保证本品冻干后具有较好的成型性；
上述神经生长因子组合物中，优选地，所述支持剂的质量体积浓度为20～50mg/mL，更优选地，所述支持剂的质量体积浓度为20mg/mL、50mg/mL；
上述神经生长因子组合物中，所述支持剂可为甘露醇、糊精和右旋糖酐中的任一种。
上述神经生长因子组合物中，为保证组合物具有最大的生物活性，通常需要控制一个最适的pH范围，这种稳定性的最适pH范围需要在处方筛选时确定，通常采用影响因素试验(光照、高温、高湿)、加速及长期稳定性试验等方法进行确定，确定处方后，组合物在生产及贮存过程中必须保持在其最适pH范围，由于pH缓冲剂具有良好的缓冲能力，在一定范围内能保持产品pH的相对稳定，因此，处方中经常添加缓冲剂用于控制pH值；
上述神经生长因子组合物中，所述pH缓冲剂的摩尔浓度为10mM～50mM，优选地，所述pH缓冲剂的摩尔浓度为20mM～25mM，更优选地，所述pH缓冲剂的摩尔浓度为20mM、25mM；
上述神经生长因子组合物中，优选地，维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.80～7.00，更优选地，维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.86～6.91，再优选地，维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.86，具体可为6.80、6.82、6.83、6.85、6.86、6.87、6.91、6.92或7.00；
上述神经生长因子组合物中，所述pH缓冲剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐中的至少一种，具体可为1)磷酸盐、2)柠檬酸盐、3)醋酸盐、4)组氨酸盐酸盐、或5)组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐，5)中组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐的摩尔比可为12：13。
上述神经生长因子组合物中，所述水为注射用水。
上述神经生长因子组合物中，所述神经生长因子是一种具有神经元营养和促进突起生长双重生物学功能的一种神经细胞生长调节因子，它对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用；
上述神经生长因子组合物中，优选地，所述神经生长因子的质量体积浓度为40μg/mL～60μg/mL，更优选地，所述神经生长因子的质量体积浓度为50μg/mL；
上述神经生长因子组合物中，所述神经生长因子为鼠源性神经生长因子、人源性神经生长因子或重组人神经生长因子。
上述神经生长因子组合物中，各组分的浓度具体可为下述1)-17)中的任一种：
1)神经生长因子：40μg/mL～80μg/mL、二糖类稳定剂：10mg/mL～40mg/mL、氨基酸类稳定剂：0mg/mL～6mg/mL、表面活性剂：0.01mg/mL～0.2mg/mL、支持剂：10mg/mL～30mg/mL、pH缓冲剂：10mM～25mM；
2)神经生长因子：60μg/mL～100μg/mL、二糖类稳定剂：40mg/mL～80mg/mL、氨基酸类稳定剂：6mg/mL～30mg/mL、表面活性剂：0.2mg/mL～1mg/mL、支持剂：30mg/mL～50mg/mL、pH缓冲剂：25mM～50mM；
3)神经生长因子：10μg/mL～50μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL～50mg/mL、氨基酸类稳定剂：2mg/mL～10mg/mL、表面活性剂：0.05mg/mL～0.4mg/mL、支持剂：20mg/mL～40mg/mL、pH缓冲剂：20mM～30mM；
4)神经生长因子：10μg/mL～50μg/mL、二糖类稳定剂：35mg/mL～70mg/mL、氨基酸类稳定剂：3mg/mL～13mg/mL、表面活性剂：0.1mg/mL～0.5mg/mL、支持剂：20mg/mL～40mg/mL、pH缓冲剂：20mM～30mM；
5)神经生长因子：10μg/mL～50μg/mL、二糖类稳定剂：35mg/mL～70mg/mL、氨基酸类稳定剂：4mg/mL～14mg/mL、表面活性剂：0.1mg/mL～0.5mg/mL、支持剂：20mg/mL～40mg/mL、pH缓冲剂：20mM～30mM；
6)神经生长因子：40μg/mL～60μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL～70mg/mL、氨基酸类稳定剂：0mg/mL～10mg/mL、表面活性剂：0.2mg/mL～0.5mg/mL、支持剂：20mg/mL～50mg/mL、pH缓冲剂：20mM～25mM；
7)神经生长因子：40μg/mL～60μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL～70mg/mL、氨基酸类稳定剂：3mg/mL～10mg/mL、表面活性剂：0.2mg/mL～0.5mg/mL、支持剂：20mg/mL～50mg/mL、pH缓冲剂：20mM～25mM；
8)神经生长因子：10μg/mL、二糖类稳定剂：10mg/mL、氨基酸类稳定剂：0mg/mL、表面活性剂：0.01mg/mL、支持剂：10mg/mL、pH缓冲剂：10mM；
9)神经生长因子：40μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL、氨基酸类稳定剂：2mg/mL、表面活性剂：0.05mg/mL、支持剂：20mg/mL、pH缓冲剂：20mM；
10)神经生长因子：50μg/mL、二糖类稳定剂：35mg/mL、氨基酸类稳定剂：3mg/mL、表面活性剂：0.1mg/mL、支持剂：30mg/mL、pH缓冲剂：25mM；
11)神经生长因子：60μg/mL、二糖类稳定剂：40mg/mL、氨基酸类稳定剂：4mg/mL、表面活性剂：0.2mg/mL、支持剂：40mg/mL、pH缓冲剂：30mM；
12)神经生长因子：80μg/mL、二糖类稳定剂：50mg/mL、氨基酸类稳定剂：6mg/mL、表面活性剂：0.4mg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：50mM；
13)神经生长因子：100μg/mL、二糖类稳定剂：70mg/mL、氨基酸类稳定剂：10mg/mL、表面活性剂：0.5mg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：50mM；
14)神经生长因子：100μg/mL、二糖类稳定剂：80mg/mL、氨基酸类稳定剂：13mg/mL、表面活性剂：1mg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：50mM；
15)神经生长因子：100μg/mL、二糖类稳定剂：80mg/mL、氨基酸类稳定剂：14mg/mL、表面活性剂：1μg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：50mM；
16)神经生长因子：100μg/mL、二糖类稳定剂：80mg/mL、氨基酸类稳定剂：30mg/mL、表面活性剂：1mg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：50mM；
17)神经生长因子：50μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL、氨基酸类稳定剂：3mg/mL、表面活性剂：0.2mg/mL、支持剂：50mg/mL、pH缓冲剂：25mM；
18)神经生长因子：50μg/mL、二糖类稳定剂：30mg/mL、氨基酸类稳定剂：10mg/mL、表面活性剂：0.5mg/mL、支持剂：20mg/mL、pH缓冲剂：20mM。
本发明进一步提供了一种上述神经生长因子组合物注射粉剂的制备方法，将上述的神经生长因子组合物冷冻干燥即可得到所述神经生长因子组合物注射粉剂。
本发明的另一个目的是提供一种上述制备方法制备得到的神经生长因子组合物注射粉剂，为注射给药。
上述神经生长因子组合物注射粉剂中，所述注射粉剂的含水率可为1.2％～3.0％，具体可为1.3％、1.7％、1.9％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.7或2.8％；pH值可为6.80～7.20，具体可为6.80、6.82、6.83、6.85、6.92、6.93、6.95、7.05、7.10或7.20。
上述神经生长因子组合物在治疗神经损伤或制备治疗神经损伤的药物中的应用，也在本发明的保护范围内。所述神经生长因子组合物具体可为神经生长因子组合物注射粉剂。所述神经损伤可以是视神经损伤，其致伤原因具体可为拳脚伤、车祸、物体崩伤或眼部爆炸伤。
本发明进一步提供了一种治疗神经损伤的方法，它包括如下步骤：给神经损伤患者施用有效剂量的神经生长因子组合物。所述神经生长因子组合物具体可为神经生长因子组合物注射粉剂。所述施用具体可为肌肉注射。所述神经损伤可以是视神经损伤，其致伤原因具体可为拳脚伤、车祸、物体崩伤或眼部爆炸伤。
本发明制备得到的神经生长因子组合物注射粉剂，在制备、运输及储存过程中均保持良好的稳定性：(1)在制备过程中：本发明制备得到的神经生长因子组合物注射粉剂在室温条件下放置24小时后，其中NGF的含量和活性均无明显变化；(2)与参比制剂相比，在常规(6±2℃)的运输及储存过程中，本发明NGF组合物注射粉剂在12月后，其有效含量仅降低2.0％～6.3％，优选降低2.0～3.0％，其活性仅降低3.4％～10.9％，具有优异的稳定性。
本发明制备得到的神经生长因子组合物注射粉剂，在临床试验中，能够明显降低不良反应发生率，临床治疗效果好，与现有的参比制剂相比，具有更好的临床用药安全性及质量可控性。
本发明具有如下有益效果：
(1)本发明神经生长因子组合物及注射粉剂，通过使用二糖类或二糖类与氨基酸组合代替白蛋白作为稳定剂，能够避免因白蛋白中携带病毒或其他未知成分带来的潜在风险。
(2)本发明神经生长因子组合物注射粉剂，不仅对鼠源性神经生长因子(mNGF)具有保护作用，同时能够保证人源性神经生长因子(hNGF)以及重组人神经生长因子(rhNGF)在制备、运输及储存过程中保持良好的稳定性、更好的临床用药安全性及质量可控性。
(3)本发明神经生长因子组合物及注射粉剂中，成分明确，易于定性及定量，所用稳定剂纯度高，来源广，容易进行长期大量生产，便于控制成本及提高产品质量。
附图说明
图1为在加速条件下(25℃，RH 60±10％)，实施例中制备得到的NGF组合物注射粉剂及参比制剂中NGF的平均含量随时间的变化曲线。
图2为在加速条件下(25℃，RH 60±10％)，实施例中制备得到的NGF组合物注射粉剂及参比制剂的平均活性随时间的变化曲线。
图3为在长期稳定性条件下(6±2℃)，实施例中制备得到的NGF组合物注射粉剂及参比制剂中NGF的平均含量随时间的变化曲线。
图4为在长期稳定性条件下(6±2℃)，实施例中制备得到的NGF组合物注射粉剂及参比制剂的平均活性随时间的变化曲线。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
为使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面，结合实施例及试验例对本发明的具体实施方式做进一步阐述，但是这些实施例不能被解释为限制本发明。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中所使用的mNGF及hNGF原液由舒泰神(北京)生物制药股份有限公司提供，rhNGF原液由北京义翘神州生物技术有限公司提供，其余辅料除非特别说明，均为注射级别。
下述实施例中表面活性剂的浓度的单位均采用％表示，如0.1％表示1mg/mL。
为了寻找替代白蛋白的物质作为NGF的稳定剂，本发明进行了大量探索性实验，作为本品的稳定剂使用的麦芽糖、海藻糖、蔗糖、乳糖、丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸以及作为表面活性剂使用的聚山梨酯-20(简称TW-20，下同)、聚山梨酯-80(简称TW-80，下同)、泊洛沙姆188(简称F68，下同)、HS 15制备了各种NGF组合物及注射粉剂，并测定了成品的水分、pH、渗透压、含量及活性。
实施例1、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1中处方组成称取处方量柠檬酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的海藻糖、甘露醇及F68搅拌至完全溶解，加入hNGF原液，用NaOH或柠檬酸调pH至表1中所示pH 6.85，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为80μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥(制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例2、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量磷酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的蔗糖、甘氨酸、组氨酸和右旋糖酐搅拌至完全溶解，由于处方中TW-20在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-20溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入rhNGF原液，用NaOH或磷酸调pH至表1中所示pH 7.00，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为50μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得rhNGF注射用无菌粉末即rhNGF注射粉剂。
实施例3、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量醋酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的麦芽糖、丙氨酸、精氨酸、谷氨酸和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中HS 15在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将HS 15溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入hNGF原液，用NaOH或醋酸调pH至表1中所示pH 6.92，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为40μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例4、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量组氨酸盐酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的蔗糖、组氨酸和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中TW-20在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-20溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入hNGF原液，用HCl或L-组氨酸调pH至表1中所示pH 6.87，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为60μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例5、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量柠檬酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的海藻糖、蔗糖甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中TW-80在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-80溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入mNGF原液，用NaOH或柠檬酸调pH至表1中所示pH 6.82，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为60μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得mNGF注射用无菌粉末即mNGF注射粉剂。
实施例6、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量磷酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的蔗糖、甘氨酸和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中TW-80在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-80溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入hNGF原液，用NaOH或磷酸调pH至表1中所示pH 6.91，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为50μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例7、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量组氨酸盐酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的麦芽糖、甘氨酸、组氨酸和糊精搅拌至完全溶解，由于处方中TW-80在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-80溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入rhNGF原液，用HCl或L-组氨酸调pH至表1中所示pH 6.80，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为100μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得rhNGF注射用无菌粉末即rhNGF注射粉剂。
实施例8、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量柠檬酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的海藻糖和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中HS 15在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将HS 15溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入hNGF原液，用NaOH或柠檬酸调pH至表1中所示pH 6.86，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为40μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例9、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量磷酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的乳糖、甘氨酸和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中TW-20在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-20溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入hNGF原液，用NaOH或磷酸调pH至表1中所示pH 6.86，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为50μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得hNGF注射用无菌粉末即hNGF注射粉剂。
实施例10、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1处方组成称取处方量组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的海藻糖、精氨酸、组氨酸和甘露醇搅拌至完全溶解，由于处方中TW-20在注射用水中呈球形聚集状态，不易混合均匀，本发明先将TW-20溶解于热的注射用水(40～80℃)中配制成1％水溶液，待冷却至室温后按处方量经折算后加入上述溶液中混合均匀，最后加入rhNGF原液，用HCl或L-组氨酸或L-精氨酸调pH至表1中所示pH6.83，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为60μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得rhNGF注射用无菌粉末即rhNGF注射粉剂。
实施例11、NGF组合物及注射粉剂的制备
按下述步骤制备NGF组合物及注射粉剂：
按照表1中处方组成称取处方量磷酸盐，加入适量注射用水并搅拌至完全溶解，再加入处方量的乳糖、蔗糖、异亮氨酸、甘露醇及F68搅拌至完全溶解，加入mNGF原液，用NaOH或磷酸调pH至表1中所示pH 6.85，并加注射用水定容至刻度，混合均匀后，经0.22μm微孔滤膜过滤至无菌容器中，制备成NGF浓度约为10μg/mL的组合物。
将上述组合物，按0.63±0.03mL/瓶分装至硼硅玻璃注射瓶中，冷冻干燥制得mNGF注射用无菌粉末即mNGF注射粉剂。
表1、实施例1-11中各组分的用量
Figure BDA0001440011510000111
实施例12、实施例1-11中制备得到的NGF组合物注射粉剂性能测试
(1)外观、水分、渗透压、pH、含量及活性测试
分别观察实施例1-11中制备得到的NGF组合物注射粉剂及参比制剂(注射用鼠神经生长因子，商品名：苏肽生，由舒泰神(北京)生物制药股份有限公司提供)的外观，测定其水分、渗透压、pH、含量及活性。其中，NGF含量的测定方法为按照专利号200510130348.3，专利名称为“测定神经生长因子含量的方法”中实施例1所述方法进行操作。活性测试方法采用细胞法进行测定，详细操作方法按照专利公开号为CN103376248A，专利名称为“神经生长因子活性定量测定方法”中实施例1中的方法进行操作。实验结果如表2所示。
表2各实施例检查项目检测结果
Figure BDA0001440011510000121
由上述表2可知，本发明制备得到的NGF组合物注射粉剂各项指标均符合质量标准要求。
(2)稳定pH范围筛选
根据实施例2中处方组成配制3份NGF组合物，保持磷酸盐总量不变，调节NaH2PO4·H2O与Na2HPO4用量，使NGF组合物pH值分别为6.0、6.8及7.4，分别灌装于西林瓶中，冷冻干燥制成注射用无菌粉末。取样，加入适量灭菌注射用水配制成溶液，置于室温条件下，分别于第0、4、8、12、24h观察外观、测定pH、含量及活性变化情况，测定结果如下表所示。
表3NGF组合物稳定pH范围筛选结果
Figure BDA0001440011510000122
Figure BDA0001440011510000131
由上表数据可知，三种不同pH的NGF组合物在室温下放置24h后，各项指标较0h无明显变化，均符合质量标准要求，说明室温条件下样品溶液pH在6.0～7.4范围内24h内能保持稳定，优选pH为6.8。
(3)稳定性测试
A、加速稳定性试验
根据《生物制品稳定性研究技术指导原则》要求，将参比制剂(苏肽生)与实施例制备得到的分装的NGF组合物注射粉剂样品置于25℃，RH 60±10％条件下进行0～6月加速稳定性考察，观察样品外观，进行水分、渗透压、pH、含量及活性的测试，结果见表4及图1(平均含量随时间的变化曲线)、图2(平均活性随时间的变化曲线)。
表4NGF组合物注射粉剂及参比制剂加速稳定性试验结果
Figure BDA0001440011510000132
Figure BDA0001440011510000141
Figure BDA0001440011510000151
由图1可以看出，在加速条件下(25℃，RH 60±10％)下放置，随着时间的变化，参比制剂、实施例制备得到的NGF组合物注射粉剂中NGF的平均含量呈下降趋势，其中，参比制剂中NGF的平均含量的下降速度明显大于本发明实施例。由表4结果可知，在加速条件(25℃，RH 60±10％)下放置6个月，各样品外观、水分、pH及渗透压无明显变化，而参比制剂含量降低约10.5％，实施例1～11的NGF组合物注射粉剂含量降低率分别为7.8％、6.1％、8.0％、3.2％、5.5％、3.6％、7.9％、3.0％、2.4％、5.2％及8.1％。说明加速条件下本发明实施例的稳定性由于参比制剂。其中，实施例4、6、8、9含量降低率分别为3.2％、3.6％、3.0％、2.4％，远低于参比制剂，说明加速条件下实施例4、6、8、9稳定性明显优于参比制剂。
由图2可以看出，在加速条件下(25℃，RH 60±10％)下放置，随着时间的变化，参比制剂、实施例制备得到的分装的NGF组合物注射粉剂中NGF的平均活性整体呈下降趋势，其中，参比制剂的活性在加速两个月后迅速下降。由表4结果可知，在加速条件(25℃，RH 60±10％)下放置6个月，各样品外观、水分、pH及渗透压无明显变化，参比制剂的活性下降17.7％，实施例1～11的NGF组合物注射粉剂活性分别下降14.5％、12.5％、15.3％、8.9％、10.6％、9.2％、12.9％、6.3％、5.9％、11.1％及13.8％，说明加速条件下本发明实施例的稳定性由于参比制剂。其中，加速条件下，实施例4、实施例6、实施例8和实施例9活性降低率分别为8.9％、9.2％、6.3％、5.9％，远低于参比制剂，说明加速条件下实施例4、实施例6、实施例8和实施例9稳定性明显优于参比制剂。
B、长期稳定性试验
根据《生物制品稳定性研究技术指导原则》要求，将参比制剂(苏肽生)与实施例4、实施例6、实施例8、实施例9制备得到的分装的NGF注射粉剂样品置于6±2℃条件下进行0～12月长期稳定性考察，观察样品外观，测定水分、渗透压、pH、含量及活性，结果见表5及图3(平均含量随时间变化曲线)、图4(平均活性随时间变化曲线)。
表5NGF组合物注射粉剂及参比制剂长期稳定性试验结果
Figure BDA0001440011510000161
Figure BDA0001440011510000171
Figure BDA0001440011510000181
由图3可以看出，在长期稳定性条件下(6±2℃)下放置，随着时间的变化，参比制剂、实施例制备得到的分装的NGF组合物注射粉剂中NGF的平均含量均呈下降趋势，其中，参比制剂中NGF的平均含量的下降速度明显大于本发明实施例。由表5结果可知，在长期条件下放置12个月，各样品外观、水分、pH及渗透压无明显变化，而参比制剂含量降低约6.7％，实施例1～11的NGF组合物注射粉剂含量降低率分别为6.3％、5.1％、6.2％、2.8％、5.1％、3.0％、6.1％、2.6％、2.0％、4.5％及6.0％。说明在长期稳定性条件下(6±2℃)下本发明实施例的稳定性优于参比制剂。其中，实施例4、实施例6、实施例8、实施例9含量降低率分别为2.8％、3.0％、2.6％、2.0％，远低于参比制剂，说明长期条件下，实施例4、实施例6、实施例8、实施例9稳定性明显优于参比制剂。
由图4可以看出，在长期稳定性条件下(6±2℃)下放置，随着时间的变化，参比制剂、实施例中制备得到的分装的NGF组合物注射粉剂中NGF的平均活性整体均呈下降趋势，其中，参比制剂的活性的下降速度大于本发明实施例。由表4结果可知，在长期条件下放置12个月，各样品外观、水分、pH及渗透压无明显变化，参比制剂的活性下降12.8％，实施例1～11的NGF组合物注射粉剂的活性分别下降10.9％、9.6％、10.3％、4.8％、8.7％、5.4％、9.2％、3.8％、3.4％、8.1％及10.2％，说明说明在长期稳定性条件下(6±2℃)下本发明实施例的稳定性优于参比制剂。其中，实施例4、实施例6、实施例8、实施例9的活性分别下降4.8％、5.4％、3.8％、3.4％，远低于参比制剂，说明长期条件下，实施例4、实施例6、实施例8、实施例9稳定性明显优于参比制剂。
(4)临床评价
采用多中心非随机对照研究设计，271名视神经损伤患者进行为期12周的临床试验，受试者年龄为14周岁以上，所有受试者均能够与研究者进行良好沟通，理解并服从本临床试验要求，能够理解本临床试验并签署知情同意书。
受试者条件：14周岁以上。
性别：男性或女性。
受试者来源：在以各大眼科研究单位纳入各种原因所致的视神经损伤患者409例。
致伤原因：拳脚伤136例(136眼)，车祸152例(152眼)，物体崩伤73例(73眼)，眼部爆炸伤49例(49眼)。所有病例均不伴眼球破裂伤及眶壁骨折压迫视神经所致损伤。
治疗方法：治疗组分别采用采用参比制剂及本发明NGF组合物注射粉剂进行肌肉注射(注射用水)，每日1次，每次30μg，所有病例连续给药12周。安慰剂组采用阴性对照(不含活性成分，其余辅料同NGF组合物)。
治疗组271例(271眼)，年龄18～63岁，平均34.2岁；男189例(189眼)，女82例(82眼)；右眼147眼，左眼124眼。安慰剂组138例(138眼)，年龄13～55岁，平均33.9岁，男96例(96眼)，女42例(42眼)；右眼45眼，左眼93眼。
分组设计，按下表所示进行分组：
表6临床试验分组及受试者数量
Figure BDA0001440011510000191
注：采用实施例9制得的神经生长因子组合物，下同。
临床常见不良反应评价：按安慰剂组、参比制剂组及NGF组合物组分别给药，观察各组不良反应症状及发生率，结果如下表所示。
表7NGF临床常见不良反应
Figure BDA0001440011510000192
注：*为与安慰剂组相比，有显著差异(P<0.05)；#为与参比制剂组相比，有显著差异(P<0.05)。
由上表结果可知，与安慰剂组相比，本发明制备的NGF组合物主要的不良反应为局部疼痛、荨麻疹和头晕；与参比制剂相比，本发明制备的NGF组合物能显著减轻局部疼痛、荨麻疹、头晕等不良反应。
临床疗效：按安慰剂组、参比制剂组及NGF组合物组分别给药，观察各组的临床疗效，结果如下表所示。
表8NGF临床疗效对比
Figure BDA0001440011510000201
上述表格中的临床疗效采用如下临床疗效评价标准进行评价：
①痊愈：视力恢复到1.0以上，视野中心暗点消失；
②显效：视力提高4行上，视野中心暗点缩小或绝对暗点变为相对暗点；
③好转：视力提高2行以上，视野无变化；
④无效：视力和视野与治疗前相同或有退步。
由上表的结果可知，与安慰剂组相比，本发明的NGF组合物及其注射粉剂能够有效治疗各种原因所致的视神经损伤，对视神经损伤治疗的综合有效率优于参比制剂参比制剂组，能够明显降低不良反应发生率，临床治疗效果好。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方案及实施例对本发明做了详尽的描述，但在本发明的基础上，所属技术领域的技术人员可以在不偏离本发明主旨的范围内对之进行修改和改进，这些修改或改进均属于本发明要求保护的范围。

Claims (20)

1.一种神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子组合物为以下组分：
质量体积浓度为50μg/mL~60μg/mL的神经生长因子；
质量体积浓度为30mg/mL~40mg/mL的二糖类稳定剂；
质量体积浓度为3mg/mL的氨基酸类稳定剂；
质量体积浓度为0.1mg/mL~0.5mg/mL的表面活性剂；
质量体积浓度为20mg/mL~50mg/mL的支持剂；
维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.8~7.2的pH缓冲剂；
溶剂为水；
所述二糖类稳定剂为海藻糖或乳糖；
所述支持剂为甘露醇、糊精和右旋糖酐中的任一种。
2.根据权利要求1所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述氨基酸类稳定剂为丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、组氨酸和异亮氨酸中的至少一种。
3.根据权利要求1或2所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述二糖类稳定剂和氨基酸类稳定剂为下述1）-2）中任一种：
1）乳糖和甘氨酸、2）海藻糖、精氨酸和组氨酸。
4.根据权利要求1或2所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述表面活性剂为非离子表面活性剂。
5.根据权利要求4所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述非离子表面活性剂为泊洛沙姆、聚山梨酯和15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯中的至少一种。
6.根据权利要求3所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述表面活性剂为非离子表面活性剂。
7.根据权利要求6所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述非离子表面活性剂为泊洛沙姆、聚山梨酯和15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯中的至少一种。
8.根据权利要求1、2、5、6和7任一项所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述pH缓冲剂的摩尔浓度为10mM~50mM的；所述pH缓冲剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐中的至少一种；
所述水为注射用水。
9.根据权利要求8所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述pH缓冲剂的摩尔浓度为20mM~25mM。
10.根据权利要求3所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述pH缓冲剂的摩尔浓度为10mM~50mM的；所述pH缓冲剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐中的至少一种；
所述水为注射用水。
11.根据权利要求4所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述pH缓冲剂的摩尔浓度为10mM~50mM的；所述pH缓冲剂为磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、组氨酸盐酸盐和精氨酸盐酸盐中的至少一种；
所述水为注射用水。
12.根据权利要求1、2、5-7和9-11中任一项所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子为鼠源性神经生长因子、人源性神经生长因子或重组人神经生长因子。
13.根据权利要求3所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子为鼠源性神经生长因子、人源性神经生长因子或重组人神经生长因子。
14.根据权利要求4所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子为鼠源性神经生长因子、人源性神经生长因子或重组人神经生长因子。
15.根据权利要求8所述的神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子为鼠源性神经生长因子、人源性神经生长因子或重组人神经生长因子。
16.一种神经生长因子组合物，其特征在于：所述神经生长因子组合物为如下任一种：
（1）质量体积浓度为50μg/mL的神经生长因子；
质量体积浓度为30mg/mL的乳糖；
质量体积浓度为10mg/mL的甘氨酸；
质量体积浓度为0.5mg/mL的表面活性剂；
质量体积浓度为20mg/mL的甘露醇；
维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.86的pH缓冲剂；
溶剂为水；
（2）质量体积浓度为60μg/mL的神经生长因子；
质量体积浓度为40mg/mL的海藻糖；
质量体积浓度为3mg/mL的精氨酸；
质量体积浓度为3mg/mL的组氨酸；
质量体积浓度为0.1mg/mL的表面活性剂；
质量体积浓度为30mg/mL的甘露醇；
维持所述神经生长因子组合物的pH值为6.83的pH缓冲剂；
溶剂为水。
17.一种神经生长因子组合物注射粉剂的制备方法，其特征在于：将权利要求1-16中任一项所述的神经生长因子组合物冷冻干燥即可得到所述神经生长因子组合物注射粉剂。
18.权利要求17所述的制备方法制备得到的神经生长因子组合物注射粉剂。
19.权利要求1-16中任一项所述的神经生长因子组合物在制备治疗神经损伤的药物中的应用。
20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于：所述神经损伤是视神经损伤。
CN201680023115.XA 2015-04-21 2016-04-18 一种神经生长因子组合物及注射粉剂 Active CN107660149B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510189156 2015-04-21
CN2015101891563 2015-04-21
PCT/CN2016/079571 WO2016169454A1 (zh) 2015-04-21 2016-04-18 一种神经生长因子组合物及注射粉剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107660149A CN107660149A (zh) 2018-02-02
CN107660149B true CN107660149B (zh) 2021-04-27

Family

ID=57144485

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201680023115.XA Active CN107660149B (zh) 2015-04-21 2016-04-18 一种神经生长因子组合物及注射粉剂

Country Status (6)

Country Link
US (1) US11077193B2 (zh)
EP (1) EP3287140B1 (zh)
CN (1) CN107660149B (zh)
DK (1) DK3287140T3 (zh)
ES (1) ES2882106T3 (zh)
WO (1) WO2016169454A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114642729B (zh) * 2020-12-21 2023-12-15 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 一种凝血因子x激活剂组合物
CN114177273B (zh) * 2021-11-29 2024-05-28 苏州人本药业有限公司 一种含有神经毒素的液体制剂及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1133012A (zh) * 1993-08-20 1996-10-09 辛泰克斯（美国）公司 神经生长因子的药物制剂
CN1552440A (zh) * 2003-06-06 2004-12-08 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 去白蛋白神经生长因子制剂
CN1824297A (zh) * 2005-12-30 2006-08-30 安徽金大陆生物制药有限公司 神经生长因子制品在制备治疗视神经病变药物中的应用
CN101972470A (zh) * 2010-09-13 2011-02-16 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 一种眼用原位凝胶

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1151842C (zh) 1995-07-27 2004-06-02 基因技术股份有限公司 稳定等渗的冻干蛋白制剂
US6090781A (en) 1996-11-06 2000-07-18 Genentech, Inc. Stabilizing formulation for NGF
EP0852951A1 (de) 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
US6663899B2 (en) * 1997-06-13 2003-12-16 Genentech, Inc. Controlled release microencapsulated NGF formulation
JP5149470B2 (ja) 1999-02-22 2013-02-20 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド 新規のアルブミンを含有していない第ｖｉｉｉ因子処方物
JP4317010B2 (ja) 2001-07-25 2009-08-19 ピーディーエル バイオファーマ，インコーポレイティド ＩｇＧ抗体の安定な凍結乾燥医薬製剤
WO2003092731A1 (en) 2002-05-03 2003-11-13 Novo Nordisk A/S Stabilised solid compositions of modified factor vii
US7456254B2 (en) * 2004-04-15 2008-11-25 Alkermes, Inc. Polymer-based sustained release device
WO2006014965A2 (en) 2004-07-27 2006-02-09 Human Genome Sciences, Inc. Pharmaceutical formulation and process
KR20110022096A (ko) 2005-12-20 2011-03-04 주식회사 삼양사 고분자 마이크로스피어의 제조 방법 및 제조 장치
CN1843503A (zh) 2006-01-25 2006-10-11 安徽金大陆生物制药有限公司 一种滴眼剂
CN1857718A (zh) 2006-03-22 2006-11-08 安徽金大陆生物制药有限公司 一种神经生长因子注射剂
JP5631591B2 (ja) 2006-10-06 2014-11-26 アムジエン・インコーポレーテツド 安定な抗体製剤
WO2008143867A1 (en) 2007-05-15 2008-11-27 Stryker Corporation Concentrated protein preparations of bone morphogenetic proteins and methods of use thereof
CN101461786A (zh) 2009-01-08 2009-06-24 上海交通大学 用水包油－油包固体制备的pla/plga壳－核微球及其制备方法
CN101972224B (zh) 2010-09-13 2012-01-04 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 一种眼用原位凝胶
JOP20200043A1 (ar) * 2011-05-10 2017-06-16 Amgen Inc طرق معالجة أو منع الاضطرابات المختصة بالكوليسترول
FR3011836B1 (fr) * 2013-10-10 2015-10-23 Saint Gobain Vitrage de controle thermique

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1133012A (zh) * 1993-08-20 1996-10-09 辛泰克斯（美国）公司 神经生长因子的药物制剂
CN1552440A (zh) * 2003-06-06 2004-12-08 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 去白蛋白神经生长因子制剂
CN1824297A (zh) * 2005-12-30 2006-08-30 安徽金大陆生物制药有限公司 神经生长因子制品在制备治疗视神经病变药物中的应用
CN101972470A (zh) * 2010-09-13 2011-02-16 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 一种眼用原位凝胶

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Neuroactive Conducting Scaffolds: Nerve Growth Factor Conjugation on Active Ester-Functionalized Polypyrrole;Jae Young Lee等;《J R Soc Interface.》;20081209;第38卷(第6期);第801-810页 *

Also Published As

Publication number Publication date
US11077193B2 (en) 2021-08-03
EP3287140A1 (en) 2018-02-28
US20180161436A1 (en) 2018-06-14
CN107660149A (zh) 2018-02-02
ES2882106T3 (es) 2021-12-01
EP3287140A4 (en) 2018-12-26
EP3287140B1 (en) 2021-06-02
WO2016169454A1 (zh) 2016-10-27
DK3287140T3 (da) 2021-07-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPH10508289A (ja) オキサリプラティヌムの医薬的に安定な製剤
TW201605489A (zh) 賴谷胰島素（ｉｎｓｕｌｉｎ ｇｌｕｌｉｓｉｎｅ）的穩定調配物
TWI755377B (zh) 穩定的液態促性腺激素調配物
CN104136015A (zh) 视网膜疾病的预防、改善或治疗剂
CN107660149B (zh) 一种神经生长因子组合物及注射粉剂
JP2002502358A (ja) Ｎｇｆの安定化処方
US20220313790A1 (en) Human albumin-containing medical product and preparation method thereof
AU2017225236B2 (en) A lyophilised pharmaceutical formulation and its use
CN107708723B (zh) 神经生长因子组合物和注射粉剂
CN108348579B (zh) 神经生长因子组合物及注射粉剂
MXPA05000662A (es) Composicion farmaceutica estable que comprende eritropoyetina.
SI21257A (sl) Stabilni farmacevtski pripravek, ki vsebuje eritropoietin
US20220411482A1 (en) Stable formulations of silk-derived protein

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant